哮喘患者痰嗜酸性粒细胞凋亡与IL25 及sIL22R 相关性的研究
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哮喘患者痰嗜酸性粒细胞凋亡与IL25及sIL22R相关性的研究
许军阳 江凤霞 邱元吉 (中山大学第五附属医院呼吸内科,珠海519000)
中国图书分类号 R392 文献标识码 A 文章编号 10002484X(2004)0920646202
[摘 要] 目的:探讨哮喘患者痰液嗜酸性粒细胞凋亡(EOS)与IL25和sIL22R的关系。方法:选择哮喘患者(哮喘组)急
性发作期和缓解期30例,20名健康人(正常组)作对照。分别采用ELISA法测定患者痰液白细胞介素5(IL25)和可溶性白介
素2受体(sIL22R),应用流式细胞仪检测痰液EOS凋亡。结果:哮喘患者急性发作期和缓解期痰液中IL25和sIL22R明显升高,
EOS凋亡率增高,而正常组未发现EOS凋亡。急性发作期哮喘患者EOS凋亡率与IL25呈明显的负相关,r为-0178。结论:哮
喘患者气道局部有EOS凋亡现象,并受到IL25相互作用的调节。sIL22R与EOS凋亡率无明显的相关性。
[关键词] 哮喘;细胞因子;嗜酸性粒细胞;凋亡;相关性
AkineticstudyontherelationshipbetweenIL25,sIL22Randeosinophilapoptosisin
asthmaticpatient’sairwayinflammation
XUJun2Yang,JIANGFeng2Xia,QIUYun2Ji.DepartmentofRespirtatoryMedicine,TheFifthHospital,Zhongshan
University,Guangdong,Zhuhai,519000,China
[Abstract] Objective:Toexploretherelationshipbetweeneosinophil(EOS)andIL25,sIL22Rinasthmaticpatientsinsputum.Meth2
ods:Thirtyasthmaticpatients(asthmaticgroup)duringexacerbationandstablestageandtwentyhealthypersonswereselected.IL25andsIL22R
insputumweredeterminedbyELISA,EOSapoptosiswasidentifiedbyflowcytometre.Results:IL25,sIL22RandEOSapoptosispercentagesin
thepatientsduringexacerbationandstablestageinsputumwereincreasedsignificantly,.TherewerenoexpressionofEOSapoptosisinthe
healthypersons.DataanalysesrevealedanegativecorrelationbetweenEOSapoptosisandthelevelsofIL25,andaclosercorrelationbetween
thepercentagesandIL25.Conclusion:EOSunderwentapoptosisinasthmaticairwayandEOSapoptosiswasregulatedbyIL25.Therewereno
correlationbetweenEOSapoptosisandsIL22R.
[Keywords] Asthma;Cytokines;Eosinophil;Apoptopsis;relativity
支气管哮喘是以嗜酸性粒细胞(eosiniphil
EOS)、肥大细胞反应为主的气道变应性炎症(AAI)
和气道高反应性(AHR)为特征的疾病。Simon等认
为EOS凋亡受抑制可能是EOS增多的重要原因,
EOS凋亡有利于哮喘过程中EOS炎症的消退1。我
们对30例哮喘患者痰液白细胞介素5(IL25)、可溶
性白介素2受体(sIL22R)和EOS凋亡进行观察,探
讨其变化规律。
1 材料与方法
111 材料来源 哮喘患者(哮喘组)急性发作期和
缓解期30例,近2个月来未用过皮质激素。男16
例,女14例,年龄13~65岁,平均年龄35±11岁。
疾病诊断标准参照2003年我国制定的支气管哮喘
防治指南2。所有患者排除心、肝、肾疾患、恶性肿
瘤和肺部感染等。另选20名健康人(正常组)作对
作者简介:许军阳(1961年-),男,医学硕士,主任医师,主要从事哮喘免疫方面的研究。照,其中男9名,女11名,年龄15~65岁,平均3913
±1017岁。用3%NaCl雾化吸人,回收痰液于1500
rΠmin离心10分钟,上清液贮于-20℃,在1月内作
细胞因子检测。细胞用1mlHank液重悬,在6小时
内作凋亡检测。IL25、sIL22R测定试剂盒由Medgenix
公司提供。
112 痰液IL25、sIL22R测定 用ELISA方法测定。
113 EOS凋亡
11311 EOS的标记 痰液置10ml离心管中,加等
量生理盐水稀释,离心洗涤(1200rΠmin,5分钟),去
上清;加入3ml生理盐水重新悬浮细胞;取70μm孔
径尼龙筛网过滤,滤过液低速离心(1000rΠmin,3分
钟),去上清;调整细胞浓度为106ml-1,加入CD49d2
FITC和CD152PE各10μl,按操作程序在室温避光孵
育15分钟后,加入5mlPBS缓冲液离心洗涤,去上
清。
11312 流式细胞仪检测凋亡率 根据有关方法并
加以改进3。
114 统计学分析 实验数据均以x±s表示。组・646・中国免疫学杂志2004年第20卷间比较采用两样本均数资料t检验,两变量的相关
程度采用直线相关分析。
2 结果
211 哮喘患者痰液IL25、sIL22R和EOS凋亡率的变
化 哮喘组急性发作期和缓解期患者痰液IL25和
sIL22R的表达较正常组明显增加(P<0105),缓解期
EOS的凋亡率略较急性期升高(见表1)。
212 急性发作期哮喘患者痰液EOS凋亡率与IL25
和sIL22R的相关关系 哮喘组急性发作期患者痰
液EOS凋亡率与IL25呈负相关(见图1),r值分别
为-0178(P<0105),而与sIL22R无明显相关性。
表1 哮喘组和正常组IL25、sIL22R和EOS凋亡率的变化
(x±s)
Tab11 ConcentrationsofIL25,sIL2sRandEOSapoptosisin
percentageinasthmaticandcontrolgroups(x±s)
GroupsnIL25(ngΠL)sIL22R(ngΠL)EOSapoptosispercentage(%)
Controlgroup2010125±7133365132±1321560
Asthmaticgroupexacerbation3049152±171831)747148±1701561)3128±0197
Stablegroup3046132±171631)731112±1771311)3144±1101
Note:1)P<0105comparedwithcontrolgroup.
图1 急性发作期哮喘患者痰液EOS凋亡率与IL25的相关性
Fig.1 CorrelationbetweenIL25andEOSapoptosispercentage
inasthmaticpatientsduringexacerbation3 讨论
哮喘气道局部存在嗜酸性细胞凋亡现象,可能
是炎症消散的重要途径。有证据表明凋亡亦参与炎
症反应的调节,凋亡小体(apoptoticbody),很快被邻
近的薄壁细胞和巨噬细胞吞噬,不触发机体免疫2炎
症反应,因此在炎症消散过程中具有生理性保护意
义4。我们在动态观察中发现,哮喘急性发作期患
者痰液中EOS明显增多,而缓解期逐渐减少,说明
哮喘患者确实存在气道中EOS的浸润。缓解期EOS
的凋亡率较急性期升高,表明EOS凋亡参与和调节
哮喘患者的免疫2炎症反应。
EOS凋亡机制的实验表明,IL23、IL25能明显抑
制EOS的凋亡,而且在一定范围内呈剂量和时间依
赖关系5。本研究证实,急性发作期哮喘患者痰液
EOS凋亡率与IL25呈明显负相关,说明IL25确实对
EOS凋亡有明显的抑制作用。我们还发现哮喘患者
痰液sIL22R与EOS凋亡率无明显的相关性,这可能
与sIL22R是T细胞激活的一个特异性标志和敏感
的定量指标,对细胞的增值和分化起免疫调节作用,
而对EOS的凋亡无明显抑制或促进作用有关。
4 参考文献
1 SimonHU,BlaserK.Inhibitionofprogrammedeosinophildeath,akeypathogeniceventforeosinophilia.Immunol.Today,1995;16:53255.2 中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.支气管哮喘防治指南J.中华结核和呼吸杂志,2003;26(3):1322138.3 彭黎明.6种细胞凋亡检测方法的比较J.中华病理学杂志,1999;19(1):55258.4 KodamaT,MasuyamaT,MiyataSetal.KineticsofapoptosisinthelungofmicewithallergicairwayinflammationJ.ClinExpAllergy,1998;28(11):1432158.5 SternM,MeagherL,SavilJetal.Apoptosisinhumaneosinophils:pro2grammedcelldeathintheeosinophilleadstopphgocytosisbymacrophagesandismodulatedbyIL25J.JImmunol,1992;148:354323549.
[收稿2003207233 修回20042012]
(编辑 徐 杰)・746・许军阳等 哮喘患者痰嗜酸性粒细胞凋亡与IL25及sIL22R相关性的研究 第9期