产麻痹性贝毒塔玛亚历山大藻共培养菌群的物种多样性研究

ｔ ａ ｍ ａ ｒ ｅ ｎ ｓ ｅ ） 是 我 国典 型赤 潮 甲藻 ， 但 对 其 共 培
化 测试 所需 培养 基 ， 参照文献 ［ １ ５ ］ 配制 ； 细 菌 基 因组 Ｄ Ｎ Ａ提 取 、 Ｐ Ｃ Ｒ 扩 增 试 剂 盒 均 购 自荷 兰
养菌群的物种 多样性背景信 息 尚知之甚少 。本
为 海洋 Ｚ ｏ ｂ ｅ ｌ ｌ ２ ２ １ ６培 养 基 Ｈ 。细 菌 鉴 定 生 理 生
的实验证 据支 持
。产毒 赤潮藻与其共生菌
的关 系是揭 示 Ｐ Ｓ Ｐ产 生 机制 的关 键 ， 而其 共 培 养 菌群 的分 离 及 其 多 样 性 分 析 是 开 展 此 研 究 的 必
要 前 提 。产 Ｐ Ｓ Ｐ塔 玛 亚 历 山 大 藻 （ Ａ ｌ ｅ ｘ ａ ｎ ｄ ｒ ｉ ｕ ｍ
２ ０ ０ ０ ９ ０； ２ ．上海海洋大学 ， 上海 ２ ０ １ ３ ０ ６ ；
１ ０ ６ １ ７ ； ４ ． 俄勒冈州立大学微生物学 系 ， 科瓦里斯 ， 俄勒 冈 ９ ７ ３ ３ ３ ）
摘
要 ：产毒赤潮藻与其共 生菌的互 作关 系是 揭示麻痹性贝毒 （ Ｐ Ｓ Ｐ ） 产生机制 的关键 ， 而其 共培养 菌群 的分
离及其多样性解析是开展此研究的必要前提。塔玛亚历 山大藻 （ Ａ ｌ ｅ ｘ ａ ｎ ｄ ｒ ｉ ｕ ｍ ｔ ａ ｍ ａ ｒ ｅ ｎ ｓ ｅ ） 是典 型产 Ｐ Ｓ Ｐ赤潮原 因 甲藻 ， 为揭示其共培养菌群 的物种多样性信息 ， 本文通过免培养海洋微生物高通量测序技术 ， 解析 了东海塔
玛亚历山大藻 （ ａ ｔ ３ ＃ ） 共培养菌群的种类 、 丰度及 多样性信息 。结果表 明 ， 其共培养菌群共有 ８ ７个种 与已有数
产 麻 痹 性 贝 毒塔 玛 亚历 山大 藻 共培 养 茵群 的 物 种 多样 性 研 究
刘 巧红 ，苑丽东 ，田晓清 ，马丽艳 ，周宏农。 ，
樊成奇 ，杨 宪时 ，杨
（ １ ．中Ｎ Ｉ 水产科学研究 院东海水产研究所 ， 上海 ３ ．台湾大学渔业科学研究所 ， 中国台北
桥 ，张晓玲
作者简介 ：刘 巧红（ １ ９ ９ ０一） ， 硕士研究生 ， 研究 方向 ： 海洋微生 物及 海洋毒素。
通 讯 作 者 ：张 晓玲 ， 副 研 究 员 。Ｅ － ｍａ ｉ ｌ ： ｎ ｙ ｙ ｑ ｘ ｌ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｎ ｒ
海
洋
渔
业
２ ０ １ ６正
学 试剂 均 为分析 纯 ， 购 自上海 国药 集 团。实 验 用
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 实验 材料
产 Ｐ Ｓ Ｐ塔 玛 亚 历 山 大 藻 （ Ａ ｌ ｅ ｘ ａ ｎ ｄ ｒ ｉ ｕ ｍ ｔ ａ ｍ ａ ｒ ｅ ｎ ｓ ｅ ， 编号 ａ ｔ ３ ＃ ） ， 由台湾 大 学 渔 业 科 学 研 究 所 周宏 农 教 授 课题 组 提 供 。 分 离 自台湾 屏 东 市 东 港水 产养 殖池 中 ， 保存 于本 研究 室 。 藻培养 基 ： 改 良ｆ ／ ２培 养基 、 细 菌分 离培 养 基
染 日趋 加重 ， 导致 赤潮 频 发 ， 给 我 国 生态 环 境 、 海 产养殖 及渔 业 、 水 产 品质 量 安全 等 多 方 面 带来 巨
的生物学背景信息支持。
大威胁 ， 且不断 引发人体 中毒 乃至死 亡事 件发
生 。而 目前关 于麻 痹性 贝 毒 （ Ｐ Ｓ Ｐ ） 的来 源 问 题 仍悬 而未 决 ， 而 甲藻共 生 菌 产 毒 假 说 认 为 ， 赤 潮 藻 内共 生 菌 才 是 Ｐ Ｓ Ｐ的 主 要 生 产 者 Ｊ 。该 学 说得 到 了 日益增 加 的赤 潮 藻产 毒共 生 菌 数 量
据库 匹 配 ， 此 外 尚有 ５ ％ 的 未 知 种 。其 包 含 ５ ７个 属 ， 其 中 优 势 菌 属 ５个 ， 分别 为 Ｒ ｈ ｏ ｄ ｏ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ａ ｃ ｅ ａ ｅ 、
Ｍａ ｒ ｉ ｎ ｏ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ 、 Ｍｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｏ ｐ ｈ ａ ｇ ａ 、 Ｎ ｉ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｒ ｅ ｄ ｕ ｃ ｔ ｏ ｒ 及Ｐ ｈ ｙ ｃ ｉ ｓ ｐ ｈ ａ ｅ ｒ ａ 。研 究表明东海产 Ｐ Ｓ Ｐ塔玛亚历 山大藻（ ａ ｔ ３ ＃ ） 含有物 种丰富的共培养菌群 ， 且具有发掘海洋特殊生境微生物新种属 的良好潜力 。
关键 词 ：塔玛 亚历 山大藻 ；麻痹性贝毒 ； 共培养菌群 ； 物种多样性
中图分类号 ：Ｑ ９ ４ ９ ． ３ 文献标识码 ：Ａ
有 害赤 潮 是 受 到 全 球关 注 的 重 大环 境 问 题
及 海洋 生态 灾 害 ¨ 。近 年来 ， 我 国海 洋 环 境 污
通 过免 培养 微生 物 高通 量 测 序技 术 ， 首 次解 析 了 其共 培养 菌群 的种类 、 丰度 及 多 样 性 信 息 。此 研 究结 果可 为后 续 开 展 藻 菌 关 系 等 研 究 提 供 必 要
纯水制 自美 国 Ｍｉ ｌ ｌ ｉ ｐ ｏ ｒ ｅ公 司 Ｍｉ ｌ ｌ ｉ － Ｑ纯 水系统 。
１ ． ２ 实验 方法
１ ． ２ ． ４ 数 据分析
第３ ８ 第 ６期
海 洋 渔
Ｍ Ｉ ｉ Ⅱ ｅ
业
Ｖｏ １ ． ３ ８， Ｎｏ ． ６
２ ０ １ ６年 １ １ 月
Ｆ ｉ ｓ ｈ ｅ ｒ ｉ ｅ ｓ
ＮＯ Ｖ ． ， ２０ １ ６
文章编号 ：１ ０ ０ ４— ２ ４ ９ ０ （ ２ ０ １ ６ ） ０ ６— ０ ６ ６ ３— ０ ７
文 以东 海塔 玛亚历 山大 藻 株 （ ａ ｔ ３ ＃ ） 为研 究 材 料 ，
收稿 日期 ：２ ０ １ ６— ０ ２—１ ６
Ｑ Ｉ Ａ Ｇ Ｅ Ｎ公司； Ｐ Ｃ Ｒ引物 由上海生工合成 ； 其它化
基金项 目：国家 自然科学基金 （ ４ １ ２ ０ ６ ０ ９ ３ ） ； 中央公益性科研院所基本科研业 务费专项 （ ２ ０ １ ２ Ｔ ０ ８ ）