效应面法优化蒙花苷水解工艺及其水解物的醛糖还原酶抑制活性研究
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响应面法优化多穗石柯总黄酮提取工艺及抗氧化活性研究多穗石柯(Sophora flavescens Ait.)是一种重要的中草药材,具有广泛的药用价值。
其中所含有的总黄酮类化合物具有抗氧化、抗癌、抗炎等多种生物活性,因此备受关注。
为了提高多穗石柯总黄酮的提取效率和抗氧化活性,研究人员利用响应面法对其提取工艺进行了优化,并对提取物的抗氧化活性进行了研究。
以下是对该研究的详细报道。
研究目的:本研究旨在利用响应面法优化多穗石柯总黄酮的提取工艺,并评估其抗氧化活性,为多穗石柯的深加工和应用提供科学依据。
材料与方法:1. 实验材料:采集新鲜多穗石柯作为实验材料,经过分选、晒干后研磨成粉末。
2. 提取工艺优化:采用单因素实验确定了提取温度、提取时间和料液比对多穗石柯总黄酮提取率的影响,然后利用Box-Behnken响应面设计进行优化。
3. 抗氧化活性评价:采用DPPH自由基清除实验和铁还原能力实验评估提取物的抗氧化活性。
结果与讨论:1. 响应面法优化多穗石柯总黄酮的提取工艺,得到了最佳工艺条件为:提取温度70℃,提取时间3 h,料液比1:30。
在此条件下,多穗石柯总黄酮的提取率达到了2.35%。
2. 利用DPPH自由基清除实验和铁还原能力实验评估提取物的抗氧化活性,结果表明多穗石柯总黄酮具有较强的抗氧化活性,其清除DPPH自由基的IC50为53.47 μg/mL,铁还原能力达到0.82。
本研究为多穗石柯总黄酮的提取工艺优化和抗氧化活性研究提供了重要参考,为多穗石柯的深加工和应用提供了科学依据,具有一定的理论和实际意义。
未来可以进一步研究多穗石柯总黄酮的生物活性及其在药物和保健品中的应用。
响应面法优化酶解红松松仁粕制备抗氧化肽包怡红;王銮;李倩;蒋士龙【摘要】以工业生产东北红松松仁油副产物松仁粕为原料,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法对松松仁粕抗氧化肽酶解工艺进行了优化研究.结果表明,碱性蛋白酶是制备松仁粕抗氧化肽的最佳蛋白酶,其最佳酶解工艺条件为底物质量分数15%,酶添加量为10 000 U/g,酶解pH值9.0,酶解温度63℃,酶解时间为80 min.在此优化条件下,总还原力为0.69,水解度(DH)为36.23%.该条件下制备的松仁粕抗氧化肽有较强的还原力,当抗氧化肽的质量浓度为14 mg/mL时,总还原力达到同等浓度维生素(VC)的71.16%,对羟基自由基、ABTS自由基、DPPH自由基的清除能力均效果显著.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2018(037)007【总页数】6页(P150-155)【关键词】红松;松仁粕;酶解;响应面;抗氧化肽【作者】包怡红;王銮;李倩;蒋士龙【作者单位】东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江飞鹤乳业有限公司,北京100015【正文语种】中文【中图分类】TS255.1有报道证实,抗氧化肽具有抗衰老、抗诱导及抑制肿瘤生长等生物活性[1-2]。
而天然抗氧化肽比合成的食品抗氧化剂更加安全可靠,将天然抗氧化肽作为合成抗氧化剂的替代品已越来越引起人们的兴趣。
因此,抗氧化肽已不仅在食品工业,而且在医药、化妆品等领域中都广泛受到关注[3]。
东北红松松仁粕是松仁经过提油后的副产物,其中蛋白质含量较高,氨基酸组成齐全,是一种优良的抗氧化肽源[4]。
选择适当的蛋白酶将其蛋白质进行酶解,可以得到大量的具有各种生理功能的肽类[5],其不仅具有广泛的活性和多样性,而且能提供人体生长发育所需的营养物质,安全性好、容易吸收[6]。
綦蕾等[7]利用Alcalase 2.4 L碱性蛋白酶酶解红松松仁制备抗氧化活性肽,其最佳酶解条件中底物质量分数为0.6%。
正交设计法优化野菊花中蒙花苷的提取工艺张明,程文明*,李俊,陆维丽,张云静,张群林【摘要】目的为野菊花中要紧黄酮成份蒙花苷提取工艺的确信提供实验依据。
方式采纳正交设计的方式优化提取方案,RP-HPLC法测定蒙花苷的质量分数。
结果最终确信优化提取方案为80%乙醇,按8倍药材质量的溶剂量,提取3次,每次2 h。
结论提取溶剂量和提取时刻对提取效率具有显著阻碍,应加以操纵。
优化方案提取效率明显高于正交设计中所有9个实验的提取效率。
【关键词】正交设计; 野菊花; 蒙花苷; RP-HPLC; 提取工艺Abstract:ObjectiveTo provide a basis for the optimum extraction technology of Linarin from Chrysanthemum indicum L..MethodsThe orthogonal design and RP-HPLC method were used.ResultsThe optimum extraction condition was selected as eight times amount of 80% alcohol and refluxing 2 h repeatedly for 3 times.ConclusionThe volume of solvent and extracting time had obvious effect on the extracting efficiency of the three flavonoids in Chrysanthemum indicum L. The optimal method is superior to the nine experiments in orthogonal design.Key words: Orthogonal design; Chrysanthemum indicum; Linarin; RP-HPLC; Extraction technology野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的头状花序,别名为野黄菊花、苦薏、山菊花、甘菊花,作为经常使用药材收录于2005版《中国药典》(Ⅰ部)中。
效应面法与酶法联用提取天麻素和天麻多糖的优化工艺研究叶文斌
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2015(000)012
【摘要】通过效应面法与酶法联用工艺提取天麻中的活性物质。
以天麻素和天麻
多糖含量为评价指标,用单因素方差分析法研究酶解温度、酶解浓度和pH对提取天麻素和天麻多糖含量的影响;采用效应面法和对酶法联用提取工艺条件进行优化。
结果显示,最佳优化工艺为:酶解温度为54.36℃,酶解浓度为0.09 g和pH为4.73,该工艺条件易于控制、工艺简单,成本低,在此条件下,天麻酶解后天麻素的最高含量为7.2816 mg/g,天麻多糖的最高含量为38.3361%。
【总页数】6页(P25-30)
【作者】叶文斌
【作者单位】陇南师范高等专科学校生化系,甘肃成县742500
【正文语种】中文
【相关文献】
1.效应面法与酶法联用提取黄果槲寄生果实多糖的优化工艺研究 [J], 叶文斌;樊亮;王昱;黄兆辉;杨小录;王让军
2.效应面法与酶法联用提取纹党多糖的优化工艺研究 [J], 叶文斌
3.正交试验联用星点设计-效应面法优化西瓜皮总黄酮提取工艺研究 [J], 王章姐;张梦茹
4.星点设计-效应面法优化纤维素酶法辅助提取鬼针草叶中总黄酮研究 [J], 张玲;和
焕香;刘武;夏真真;周洪雷
5.星点设计-效应面法优化武当山白芍中芍药苷的提取工艺研究 [J], 张钰彬;蒙静雯;赵永恒;戈振凯
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星点设计-效应面法优化蒿甲醚自微乳释药系统田霞;范云周;孙媛;王宁;全东琴【期刊名称】《国际药学研究杂志》【年(卷),期】2016(43)5【摘要】Objective To optimize and assess the formulation of self-microemulsifying drug delivery systems(SMEDDS)for artemether(ARM). Methods The optimized formulation of ARM-SMEDDS was screened by solubility,ternary phase diagram and cen⁃tral composite design-response surface methodology,with the particle size,Zeta potential and solubility as parameters. The physico-chemical property and dissolution characters of ARM-SMEDDS were also determined. Results The optimized SMEDDS was composed of Cremophor RH40(39.29%),Transcutol HP(35.71%)andMCT(25%). The average particle size after the emulsification was 24.52 nm,the Zeta potential was-10.10 mV,and the drug loading of self-microemulsifying exceeded 88 mg/g. Conclusion The opti⁃mized formulation of ARM-SMEDDS using the star point design-response surface methodology has significantly enhanced the solubility and in vitro dissolution of ARM.%目的:研究蒿甲醚自微乳释药系统(SMEDDS)的制备优化及体外评价。
专利名称:一种酶法水解蒙花苷制备金合欢素的方法专利类型:发明专利
发明人:杨凌,王平,葛广波,窦同意,崔攀
申请号:CN201510451784.4
申请日:20150728
公开号:CN106701856A
公开日:
20170524
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了一种酶促水解蒙花苷制备相应的苷元金合欢素的方法,属于生物工程领域。
该方法包括制备粗酶液、酶解和纯化步骤,具体为:(1)粗酶液的制备:将纤维化纤维细菌接种于液体培养基中,30℃培养40h,9000g离心10min后取上清,进行硫酸铵沉淀,收集20%-40%的组分,用缓冲液重新溶解即得;(2)酶解:以蒙花苷为原料,利用溶解后的粗酶液对其转化,使7位的β-D-葡萄糖苷键被水解得到金合欢素;(3)金合欢素的制备:待反应结束后,将上述转化液与2倍体积的甲醇混合,加热至60度重复提取3-5次,收集提取液冷却结晶即得到金合欢素。
本方法具有反应条件温和、专一性强、高效低成本等优点,所得的金合欢素纯度在98%以上。
申请人:中国科学院大连化学物理研究所
地址:116023 辽宁省大连市中山路457号
国籍:CN
代理机构:沈阳晨创科技专利代理有限责任公司
代理人:张晨
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响应面法优化灵芝黄酮酶辅助提取工艺及抗氧化活性研究伍鸿强;王娟娟;庄玮婧;郑亚凤;张怡【摘要】Enzyme addition in the hot water extraction of flavonoids from Ganoderma lucidum was investigated for improvements on the extraction efficiency and/or enhancement on the antioxidant activity of the extract.The single factor test and the response surface methodology were used to optimize the processing conditions.It was found that a maximized yield of flavonoids of 0.75 mg/g could be obtained with the use of a combination of cellulase,pectinas eand neutral proteinase in the ratio of 2.07:0.86:2.11 for the extraction at pH 5.0 and 50℃C for 80 min.The resulting extract exhibited a high reducing power as well as free radical scavenging activities on DPPH and hydroxyl free radicals.%利用响应面法优化酶辅助提取灵芝黄酮工艺.在酶解温度、酶解时间和酶用量3个单因素的基础上,利用Box-Benhnken实验设计原理对复合酶的最佳配比进行优化.同时对灵芝提取液的抗氧化活性进行研究.结果表明:在80 min、50℃、pH值为5.0的酶解条件下,最佳酶比例为纤维素酶∶果胶酶∶中性蛋白酶=2.07∶0.86∶2.11.在该条件下,灵芝黄酮实际提取率可达0.75 mg· g-1;并且灵芝提取液对DPPH自由基和羟自由基有一定的清除能力,同时具有较强的还原力.【期刊名称】《福建农业学报》【年(卷),期】2017(032)001【总页数】6页(P87-92)【关键词】灵芝;复合酶比例;响应面;黄酮【作者】伍鸿强;王娟娟;庄玮婧;郑亚凤;张怡【作者单位】福建农林大学食品科学学院,福建福州 350002;福建农林大学食品科学学院,福建福州 350002;福建农林大学食品科学学院,福建福州 350002;福建农林大学食品科学学院,福建福州 350002;福建农林大学食品科学学院,福建福州350002【正文语种】中文【中图分类】R284.2随着生物酶制业的发展,酶法辅助提取已成为食用菌的提取的辅助技术,其操作条件温和、环境无污染、能耗小。
响应面法优化紫甘薯花色苷水解条件代凤;毛建霏【摘要】使用响应面法优化了紫甘薯花色苷的水解条件.使用高效液相色谱-多波长检测器测定花青素含量.采用3因素3水平Box-Behnken中心组合设计,优化了水解时间、盐酸浓度和水解温度对矢车菊素和芍药素峰面积之和的综合影响.结果显示,紫甘薯花色苷的最佳水浴水解条件为:盐酸浓度4.54 mol/L,水浴温度100℃,水解时间45.8 min.在最优条件下进行验证试验,响应值为理论值的96.5%,说明该响应面法优化方法可行.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2013(025)009【总页数】5页(P1245-1248,1228)【关键词】响应面法;高效液相色谱;紫甘薯;花青素;水解【作者】代凤;毛建霏【作者单位】中国石油化工股份有限公司贵州石油分公司,贵阳550002;四川省农业科学院分析测试中心农业部食品质量监督检验测试中心,成都610066【正文语种】中文【中图分类】O652.1近年来的研究表明,除作为天然色素外,花青素具有多种对人体有益的生理功能,引起人们广泛的关注。
花青素在自然界以糖苷化的花色苷形式广泛存在,已鉴定出上千余种。
花青素苷元已发现二十余种,常见的仅有六种。
紫甘薯富含花青素类色素,主要为酰基化的矢车菊和芍药素糖苷,已鉴定出二十余种花色苷,具有优异的稳定性和有益的生理功能[1]。
使用紫外分光光度法可方便地对总花青素含量进行测定,但影响因素较多[2]。
采用高效液相色谱法大多是定性分析,直接定量测定需要液质联用等复杂仪器和多种标准品,难以应用于实际检测工作[3]。
通过水解多种花色苷为少数花青素苷元,可方便地使用高效液相色谱法对花青素进行准确定性和定量分析[1]。
目前仅有通过一次改变一个变量(one variable at a time,OVAT)的方法优化紫甘薯花色苷水解条件的报道,主要影响因素为温度、盐酸浓度和水解时间[1,4]。
响应面法优化丹参叶总酚酸的提取工艺及其对酪氨酸酶的抑制活性公衍玲;邱治淇;刘菲;闫广福【期刊名称】《青岛科技大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2016(037)001【摘要】采用热水浸提法提取丹参叶中总酚酸,优化提取工艺并检测提取物对酪氨酸酶的抑制作用.以总酚酸得率为指标,采用星点设计-响应面法考察液料比、提取温度和提取时间对提取工艺的影响,采用多元线性回归和二项式方程拟合,确定最佳提取工艺.以左旋多吧为底物,观察丹参叶总酚酸提取物对酪氨酸酶的抑制作用.实验结果表明:丹参叶总酚酸的最佳工艺条件为液料比23∶1,提取时间109 min,提取温度76℃.该条件下总酚酸得率预测值为3.211%,实测平均值为3.285%.丹参叶总酚酸提取物可抑制酪氨酸酶的活性,并具有一定的剂量依赖关系.星点设计-响应面法可用于丹参叶总酚酸的提取工艺优化,预测性良好;获得的提取物具有一定的美白效果.【总页数】5页(P13-17)【作者】公衍玲;邱治淇;刘菲;闫广福【作者单位】青岛科技大学化工学院,山东青岛266042;青岛科技大学化工学院,山东青岛266042;青岛科技大学化工学院,山东青岛266042;瑞康中药饮片有限公司,山东平邑273300【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.响应面法优化丹参叶总酚酸超声波辅助提取工艺 [J], 薛治浦;李欣;朱文学2.响应面法优化银杏叶多酚提取工艺及对脲酶抑制活性的研究 [J], 王桃云;邱业先;汪金莲;杨磊;薛凯;王罗玲3.无患子总皂苷提取工艺优化及其对酪氨酸酶的抑制活性 [J], 刘俊宏; 邱智东4.木瓜皮多酚和黄酮提取工艺优化及酪氨酸酶与胰脂肪酶抑制活性研究 [J], 裴文清;吕泸楠;王靖宇;浦思琦;雷霜;王春丽5.二苯乙烯化合物的提取工艺优化及其酪氨酸酶抑制活性 [J], 李紫微;梁钰;陈晓曼;吴安萍;吴晓翔;阿卜杜拉·玉苏普;刘果;程金生;蒋文明;曹庸;苗建银因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
正交试验优化神香草中的迷迭香酸和蒙花苷提取工艺
韩雪;李莉;刘佳倪;刁娟娟
【期刊名称】《安徽医药》
【年(卷),期】2023(27)2
【摘要】目的优化神香草中的迷迭香酸和蒙花苷提取条件,确定最佳的提取工艺。
方法在单因素试验的基础上,采用超声法提取神香草中的迷迭香酸和蒙花苷,选取提取溶剂、料液比、提取时间、提取次数为主要考察因素,采用L_(9)(3^(4))正交试验对迷迭香酸和蒙花苷提取工艺进行优化。
结果确定最佳提取条件,平行操作3次,神香草中迷迭香酸和蒙花苷的最佳提取工艺为提取溶剂为60%甲醇、料液比为
1∶20、提取时间为20 min、提取次数为1次。
结论该方法操作便捷、快速,适用于神香草中的迷迭香酸和蒙花苷的提取。
【总页数】4页(P251-254)
【作者】韩雪;李莉;刘佳倪;刁娟娟
【作者单位】新疆医科大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.RP-HPLC法同时测定夏桑菊颗粒中绿原酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和蒙花苷
2.正交试验法优化康定鼠尾草中迷迭香酸提取工艺
3.响应面法优化野菊花蒙花苷的提取工艺及大悟县不同区域野菊花中蒙花苷含量的测定
4.响应面法优化野菊花蒙
花苷的提取工艺及大悟县不同区域野菊花中蒙花苷含量的测定5.HPLC法同时测定喉痛灵颗粒中绿原酸、木犀草苷、迷迭香酸、蒙花苷含量
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响应面法优化多穗石柯总黄酮提取工艺及抗氧化活性研究【摘要】本研究旨在通过响应面法优化多苞石柯总黄酮的提取工艺,并研究其抗氧化活性。
优化后的提取工艺对多苞石柯总黄酮的提取率和抗氧化活性具有重要影响。
研究结果表明,响应面法在优化提取工艺中具有较好的应用效果,能够显著提高多苞石柯总黄酮的提取效率和抗氧化活性。
本文总结了其他相关研究成果,展望未来研究方向。
研究表明,多苞石柯总黄酮具有较高的抗氧化活性,优化提取工艺对其抗氧化活性具有重要意义。
本文的研究对于开发多苞石柯总黄酮的抗氧化功能食品具有一定的指导意义。
【关键词】关键词:响应面法、多苞石柯、总黄酮、提取工艺、抗氧化活性、优化、研究。
1. 引言1.1 研究背景多苞石柯(Sophora flavescens Aiton)是一种常见的中药材,含有丰富的黄酮类化合物,其中多苞石柯总黄酮具有抗氧化、抗炎、抗菌等生物活性,对人体健康具有重要作用。
多苞石柯总黄酮的提取工艺存在着诸多不足,如提取效率低、工艺复杂等问题,限制了其在药物开发和应用中的进一步利用。
通过优化多苞石柯总黄酮的提取工艺,提高提取效率并保留活性成分,对扩大其应用范围和提高其经济价值具有重要意义。
响应面法是一种统计学方法,已广泛应用于优化植物提取工艺,通过设计实验矩阵和回归分析,可以有效确定影响提取工艺的关键因素,优化工艺参数,提高提取效率。
本研究旨在通过响应面法优化多苞石柯总黄酮的提取工艺,并探究其抗氧化活性,为多苞石柯药用价值的挖掘和开发提供理论依据和实验支持。
通过开展这一研究,有望为多苞石柯总黄酮的高效提取及其抗氧化活性的研究提供新思路和方法。
1.2 研究目的本研究旨在利用响应面法优化多穗石柯总黄酮的提取工艺,并探究其抗氧化活性,为开发多穗石柯总黄酮在食品、医药和化妆品等领域的应用提供科学依据。
具体目的包括:1. 确定最佳的多穗石柯总黄酮提取工艺参数,提高提取率和提取效果;2. 探讨响应面法在多穗石柯总黄酮提取工艺中的应用优势和有效性;3. 研究多穗石柯总黄酮的抗氧化活性,评估其在抗氧化方面的潜在应用价值;4. 分析不同提取工艺对多穗石柯总黄酮抗氧化活性的影响,为进一步优化工艺提供依据;5. 综合评价多穗石柯总黄酮提取工艺的优化对抗氧化活性的重要性,为后续研究和应用提供指导。
效应面法优化蒙花苷水解工艺及其水解物的醛糖还原酶抑制活性研究目的:用效应面法对蒙花苷的水解工艺进行优化,通过醛糖还原酶模型研究其水解物金合欢素醛糖还原酶的抑制活性。
方法:建立水解物金合欢素体外生物酶模型,通过测定NADPH的荧光吸收,计算水解物金合欢素对醛糖还原酶的抑制率,从而得到水解物的醛糖还原酶抑制活性的IC50的平均值。
在蒙花苷水解工艺中采用效应面法优化水解工艺,并对结果进行预测分析。
结果:水解物金合欢素醛糖还原酶抑制活性,其IC50的平均值为2.74 mg·L-1。
优选的水解工艺为水解时间7.4 h,硫酸甲醇0.54 mol·L-1,固液比3∶1。
结论:水解物金合欢素具有比蒙花苷较好的醛糖还原酶抑制活性。
优选的蒙花苷水解工艺简便,预测性良好。
标签:蒙花苷;效应面分析法;金合欢素;醛糖还原酶抑制剂蒙花苷为菊科植物野菊花Chrysanthemum indicum L.的主要天然黄酮类成分[3]。
近年来国内外研究表明,蒙花苷对大鼠晶状体的醛糖还原酶(AR)有抑制活性[4]。
本实验室前期研究表明,蒙花苷属于低溶解度,透过性较差的药物[5]。
药物比表面积和脂溶性对药物体内吸收有重要的促进作用,因此通过去糖基化增加蒙花苷的比表面积和脂溶性,对蒙花苷进行结构修饰。
效应面法具有试验次数少,精确度高,应用方便的特点,该设计方法可以很好地应用于药学领域[6]。
本研究以蒙花苷水解率为指标,运用效应面法进行蒙花苷水解工艺优化。
选用经典的非细胞模型[7-9],评价醛糖还原酶在水解物金合欢素干预下的变化。
1 材料Lab Alliance高效液相色谱仪(SeriesⅡ一元泵系统,Lab Alliance色谱工作站);AB204-N电子天平(瑞士METTLER TOLEDO公司);HS-3120超声波清洗器(奥特赛恩斯机器有限公司);DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器(巩义市英峪高科仪器厂)。
蒙花苷对照品(实验室自制,经HPLC归一法检测纯度>97%),金合欢素(中国食品药品检定研究院);甲醇(色谱醇,天津市康科德科技有限公司);冰醋酸(色谱醇,天津市康科德科技有限公司);其他试剂均为分析醇。
响应面法优化灵芝红茶的制作工艺刘良琴;龚小见;周欣;赵超;陈华国【摘要】To systematically optimize the manufacture of Ganoderma lucidum black tea, Ganoderma lucidum and top black tea of Zunyi was used as the raw material. By setting sensory evaluation as the criteria, the formula was preliminarily determined by using the single factor test and then was further optimized by Box-Behnken de-sign and response surface methodology, and determinated the content of the main active ingredient in Ganoder-ma lucidum black tea products. The optimized conditions as follow: The content of Ganoderma lucidum extract was 0.93 g, baking temperature 79 ℃, bake for 61 min. The sensory score of Ganoderma lucidum black tea made by using this optimal formula was 86.1, approximating to the predicted value of 87.2. Content of tea polyphenol and polysaccharide in Ganoderma lucidum black tea was 136.0 mg/g, 36.39 mg/g respectively, moisture content of 5.38 %. This product showed appearance exquisite, colour lustre, taste mellow, sweetness with Ganoderma lucidum mixed with black tea aroma.%为系统地探究灵芝红茶的制作工艺,采用灵芝提取物和遵义顶级红茶为主要原料,以感官评价为主要评价指标,以单因素试验研究灵芝提取物用量、烘烤温度、烘烤时间对灵芝红茶得分的影响,采用响应面分析法和Box-Behnken试验优化灵芝红茶的最佳工艺参数,同时对灵芝红茶中主要活性成分茶多酚和多糖的含量进行测定.结果显示:灵芝提取物用量为0.93 g,烘烤温度为79℃,烘烤时间为61 min,以此工艺制备的灵芝红茶在响应面法中感官评价得分预测最大值为87.2,实测值为86.1.灵芝红茶产品中茶多酚含量为136.0 mg/g,多糖含量为36.39 mg/g,水分含量为5.38%.灵芝红茶产品外形优美,色泽乌润均匀,口感醇厚,具有灵芝甜香与红茶的混合香味.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)005【总页数】6页(P100-105)【关键词】灵芝红茶;工艺;Box-Behnken响应面优化;茶多酚;多糖【作者】刘良琴;龚小见;周欣;赵超;陈华国【作者单位】贵州师范大学贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学贵州省药物质量控制及评价技术工程实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学天然药物质量控制研究中心,贵州贵阳 550001;贵州师范大学贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学贵州省药物质量控制及评价技术工程实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学天然药物质量控制研究中心,贵州贵阳 550001;贵州师范大学贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学贵州省药物质量控制及评价技术工程实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学天然药物质量控制研究中心,贵州贵阳 550001;贵州师范大学贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学贵州省药物质量控制及评价技术工程实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学天然药物质量控制研究中心,贵州贵阳 550001;贵州师范大学贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学贵州省药物质量控制及评价技术工程实验室,贵州贵阳 550001;贵州师范大学天然药物质量控制研究中心,贵州贵阳 550001【正文语种】中文灵芝[Ganoderma lucidum(Fr.)Karst]为担子菌门(Basidiomycota)担子菌纲(Basidiomyce-tes)多孔菌科(Polyporaceae)灵芝属(Ganoderma)的一种药用真菌[1],又称“灵芝草”、“仙草”、“瑞草”,也叫长生草、灵草、还魂草,在我国有悠久的药用历史。
星点设计—效应面法优化山茱萸总环烯醚萜苷脂质体的制备工艺目的:优化山茱萸总环烯醚萜苷脂质体的制备工艺,并对其进行表征。
方法:采用逆相蒸发法制备山茱萸总环烯醚萜苷脂质体。
采用高效液相色谱法测定山茱萸总环烯醚萜苷脂质体中马钱苷和莫诺苷含量。
以总皂苷(以马钱苷和莫诺苷总和计)包封率为指标,通过单因素试验筛选制备山茱萸总环烯醚萜苷脂质体的主要工艺因素后,采用星点设计-效应面法优化药物与磷脂的质量比(药脂比)、胆固醇与磷脂的质量比(胆脂比)和水合介质pH值。
利用达尔文激光粒径测定仪测定最优处方下所制脂质体的Zeta电位和粒径,并在透射电镜下观察其形态。
结果:确定最优处方的药脂比为0.026、胆脂比为0.107、水合介质pH为5.78。
所制3批脂质体的平均包封率为11.63%(n=3),与预测值11.48%的相对误差为1.29%;平均粒径为(80.87±0.27)nm,Zeta电位为(-13.60±5.32)mV,脂质体外观呈球形或类球形。
结论:优化后山茱萸总环烯醚萜苷脂质体制备工艺简单,所制脂质体粒径较小。
ABSTRACT OBJECTIVE:To optimize the preparation technology of Total iridoid glycosides liposome of Cornus officinalis,and to characterize it. METHODS:Total iridoid glycosides liposome of C. officinalis was prepared by reverse phase evaporation method. The contents of loganin and morroniside in Total iridoid glycosides liposome of C. officinalis were determined by HPLC. Using encapsulation rate of total saponins (total contents of loganin and morroniside)as index,main technology factors for the preparation of Total glycosides liposome of C. officinalis were screened by single factor test;the ratio of drug to phospholipid (drug-lipid ratio),ratio of choline to phospholipid (choline-lipid ratio),pH of hydration medium were optimized by central composite design-response surface methodology. The Zeta potential and particle size of liposome prepared by optimal prescription were determined by using Darwin laser particle size analyzer. The morphology of liposome was observed by TEM. RESULTS:The optimal prescription included that drug-lipid ratio was 0.026;cholesterol-lipid ratio was 0.107;pH of hydration medium was 5.78. The average encapsulation efficiency of liposome was 11.63% (n=3),the relative error of prediction value 11.48% is 1.29%,the average particle size was (80.87±0.27)nm,and Zeta potential was (-13.60±5.32)mV. It was spherical or spherical-like. CONCLUSIONS:The optimized technology of Total iridoid glycosides liposome of C. officinalis is simple,and prepared liposome has small particle size.KEYWORDS Central composite design-response surface methodology;Total iridoid glycosides of Cornus officinalis;Liposome;Reverse phase evaporation method;Preparation technology山茱萸具有補益肝肾、收敛固涩的功效[1],是常用的补肝肾中药。
酶促水解结合响应面法优化复合花茶饮料工艺本研究采用酶促水解技术结合响应面法对复合花茶饮料进行工
艺优化。
首先,选取绿茶、红茶、菊花、桂花和玫瑰花为原料,采用酶促水解提取技术,通过单因素实验确定最佳水解条件:酶浓度0.2%、温度60℃、水解时间4 h、pH值6.0。
然后,采用响应面法对复合花茶饮料的工艺进行优化,考察不同水解条件对花茶饮料的感官评价和氧化物含量的影响。
结果表明,最佳的复合花茶饮料工艺为:绿茶、红茶、菊花、桂花和玫瑰花的质量比为1:1:1:1:1,酶浓度0.2%、温度60℃、水解时间4 h、pH值6.0。
在该条件下,复合花茶饮料的感官评分最高,氧化物含量最低。
本研究为复合花茶饮料的生产提供了一种优化工艺方案。
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效应面法优化蒙花苷水解工艺及其水解物的醛糖还原酶抑制活性研究作者:王娇许浚张铁军来源:《中国中药杂志》2014年第11期[摘要] 目的:用效应面法对蒙花苷的水解工艺进行优化,通过醛糖还原酶模型研究其水解物金合欢素醛糖还原酶的抑制活性。
方法:建立水解物金合欢素体外生物酶模型,通过测定NADPH的荧光吸收,计算水解物金合欢素对醛糖还原酶的抑制率,从而得到水解物的醛糖还原酶抑制活性的IC50的平均值。
在蒙花苷水解工艺中采用效应面法优化水解工艺,并对结果进行预测分析。
结果:水解物金合欢素醛糖还原酶抑制活性,其IC50的平均值为2.74 mg·L-1。
优选的水解工艺为水解时间7.4 h,硫酸甲醇0.54 mol·L-1,固液比3∶1。
结论:水解物金合欢素具有比蒙花苷较好的醛糖还原酶抑制活性。
优选的蒙花苷水解工艺简便,预测性良好。
[关键词] 蒙花苷;效应面分析法;金合欢素;醛糖还原酶抑制剂[收稿日期] 2013-12-09[通信作者] 张铁军,Tel:(022)23006848,E-mail:tiezhang4@[作者简介] 王娇,硕士研究生,Tel:(022)23006843,E-mail:taoqibaojiaojiao369@糖尿病慢性并发症是严重影响患者生命质量的全身性病变,糖尿病视网膜病变是发病率较高的一种糖尿病慢性并发症。
醛糖还原酶抑制剂是通过抑制醛糖还原酶的活性,间接抑制多元醇通路的一类延缓和阻断糖尿病并发症的药物[1-2]。
近年来从植物提取出的具有抑制醛糖还原酶活性的化合物主要有黄酮类化合物。
蒙花苷为菊科植物野菊花Chrysanthemum indicum L.的主要天然黄酮类成分[3]。
近年来国内外研究表明,蒙花苷对大鼠晶状体的醛糖还原酶(AR)有抑制活性[4]。
本实验室前期研究表明,蒙花苷属于低溶解度,透过性较差的药物[5]。
药物比表面积和脂溶性对药物体内吸收有重要的促进作用,因此通过去糖基化增加蒙花苷的比表面积和脂溶性,对蒙花苷进行结构修饰。
效应面法具有试验次数少,精确度高,应用方便的特点,该设计方法可以很好地应用于药学领域[6]。
本研究以蒙花苷水解率为指标,运用效应面法进行蒙花苷水解工艺优化。
选用经典的非细胞模型[7-9],评价醛糖还原酶在水解物金合欢素干预下的变化。
1 材料Lab Alliance高效液相色谱仪(SeriesⅡ一元泵系统,Lab Alliance色谱工作站);AB204-N电子天平(瑞士METTLER TOLEDO公司);HS-3120超声波清洗器(奥特赛恩斯机器有限公司);DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器(巩义市英峪高科仪器厂)。
蒙花苷对照品(实验室自制,经HPLC归一法检测纯度>97%),金合欢素(中国食品药品检定研究院);甲醇(色谱醇,天津市康科德科技有限公司);冰醋酸(色谱醇,天津市康科德科技有限公司);其他试剂均为分析醇。
Wister大鼠,雄性,天津市山川红实验动物技术有限公司,动物合格证号SCXK(津)2009-0001。
2 方法与结果2.1 含量测定2.1.1 色谱条件流动相乙腈-水-冰醋酸(40∶59∶1);体积流量1 mL·min-1;检测波长326 nm;进样量10 μL;柱温30 ℃。
2.1.2 标准曲线的绘制分别精密称取蒙花苷和金合欢素对照品5.35,11.00 mg,置于100 mL量瓶中,加甲醇溶解至刻度,作为蒙花苷对照品储备液和金合欢素对照品储备液。
采用逐级稀释法用甲醇配置成不同浓度的蒙花苷对照品溶液和金合欢素对照品溶液,摇匀,按照2.1.1项下色谱条件进行测定,记录蒙花苷色谱峰面积及金合欢素色谱峰面积。
以蒙花苷对照品溶液质量浓度为横坐标(X L),峰面积积分值为纵坐标(Y L)进行线性回归,得回归方程为Y L=7X L-373.742,R2=0.999 2,线性范围0.1~52.9 mg·L-1;以金合欢素对照品溶液质量浓度为横坐标(X A),峰面积积分值为纵坐标(Y A)进行线性回归,得回归方程为Y A=7X A-4 828.128,R2=0.999 0,线性范围2.2~110.0 mg·L-1。
2.1.3 水解率的计算蒙花苷水解率=金合欢素峰面积/(金合欢素峰面积+蒙花苷峰面积)×100%。
2.2 单因素试验设计2.2.1 水解时间称取6份蒙花苷,按固液比1∶1,加入相应0.45 mol·L-1硫酸甲醇,搅拌加热,水解温度95 ℃,水解时间分别设为4,5,6,7,8,9 h,放冷,取上清液测定蒙花苷水解率,结果见图1,可知最适水解时间为7 h。
2.2.2 酸浓度称取6份蒙花苷,按固液比1∶1,分别加入0.15,0.3,0.45,0.6,0.75 mol·L-1硫酸甲醇,搅拌加热,水解温度95 ℃,水解时间7 h,放冷,取上清液测蒙花苷水解率,结果见图2,可知最适酸浓度0.45 mol·L-1。
2.2.3 固液比称取6份蒙花苷,分别按固液比1∶1,2∶1,3∶1,4∶1,5∶1,加入相应0.45 mol·L-1硫酸甲醇,搅拌加热,水解温度95 ℃,水解时间7 h,放冷,取上清液测蒙花苷水解率,结果见图3,可知最适物料比3∶1。
2.3 效应面试验设计2.3.1 试验设计根据Box-Benhnken中心组合实验设计原理[8],结合单因素实验结果,选择对蒙花苷水解反应影响较大的酸浓度(X1)、固液比(X2)、水解时间(X3)3个因素作为考察因素,以水解率为响应值,采用3因素3水平的响应面实验设计,见表1。
2.3.2 效应面试验结果及数据分析多元二次模型方程的建立与检验:各试验点根据设计进行15次试验,以水解率Y为响应值,试验点设计及试验结果见表2。
采用Design-Expert 7.1.6软件对表2中实验数据进行多元回归拟合,得到蒙花苷水解的回归方程:Y=0.91+0.15X1+0.013X2+0.23X3-0.037X1X2-0.16X1X3+0.027X2X3-0.098X12-0.056X22-0.16X32。
对该模型进行方差分析,结果见表3。
结果显示所选用的二次回归模型具有高度的显著性(P效应面分析及优化:利用Design-Expert7.1.6软件对回归分析结果作相应的曲面图,见图4。
根据Box-Behnken实验所得结果及二次多项回归方程,利用Design Expert软件中的数据优化(numerical optimization)程序求得各因素最佳范围分别为水解时间6.8~7.6 h,硫酸甲醇0.48~0.56 mol·L-1,固液比2.8∶1~3.1∶1。
2.4 验证性试验依据二次多项回归方程,选取的最佳水解条件为水解时间7.4 h、硫酸甲醇0.54 mol·L-1、固液比3∶1,预测最优水解率79.64%。
为了验证优化结果的可靠性,在最佳水解条件下进行了3组试验,测得蒙花苷平均水解率为78.97%,RSD 0.90%,与预测值(79.64%)的偏差为0.8%,说明本实验建立的数学模型工艺稳定,重复性好,可见该模型能较好地预测实际水解情况。
2.5 水解物金合欢素对醛糖还原酶抑制活性研究2.5.1 醛糖还原酶的提取 Wistar大鼠颈椎脱臼处死,立即摘除眼球,分离晶状体(冰上进行)放入20 mL 10 mmol·L-1β-巯基乙醇[含有135 mmmol·L-1磷酸缓冲液(pH 7.0)]中,匀浆,4 ℃离心30 min,取上清液,-20 ℃保存。
2.5.2 反应体系的建立设立阳性对照组和阴性对照组,每组4个复孔。
反应体系中加入180 mmmol·L-1磷酸缓冲液(pH 7.0)225 μL,1.0 mmol·L-1硫酸锂溶液50 μL,10 mmmol·L-1DL-甘油醛溶液50 μL,阳性对照溶液(提取的酶溶液100 μL),阴性对照组加去离子水100 μL混合,30 ℃预热3 min,加入0.3 mmol·L-1 NADPH溶液50 μL,30 ℃反应30 min,加入0.5 mmol·L-1盐酸150 μL终止反应,各测试管分别加入10 mmmol·L-1咪唑(含6 mmol·L-1氢氧化钠溶液)10 μL,60 ℃反应20 min,室温放冷后于激发波长360 nm ,吸收波长460 nm检测荧光吸收度,见图5,阴性对照为NADPH在此反应体系中自身氧化变化趋势,阳性对照组中NADPH的荧光强度显著降低,说明AR的活性较强。
2.5.3 标准曲线的绘制 180 mmmol·L-1磷酸缓冲液(pH 7.0)2 450 μL,1.0 mmol·L-1硫酸锂溶液700 μL,10 mmmol·L-1 DL-甘油醛溶液700 μL,二甲基亚砜(DMSO)350 μL,提取的酶溶液1 400 μL和0.5 mmol·L-1的盐酸2 100 μL混合后取出600 μL,分别加入NADP溶液0,1,2,4,8,16 μmmol·L-1,各测试管分别加入10 mmmol·L-1咪唑(含6 mmol·L-1氢氧化钠溶液),60 ℃反应20 min,室温放冷后于激发波长360 nm,吸收波长460 nm检测荧光吸收度。
以NADP溶液浓度为横坐标,荧光强度为纵坐标,绘制标准曲线,计算得回归方程A=13.195C+57.062(r=0.998 9),线性范围为0~18 μmmol·L-1。
2.5.4 样品溶液的配置 180 mmmol·L-1磷酸缓冲液(pH 7.0)采用倍比稀释法分别将蒙花苷和金合欢素的DMSO溶液稀释成一定浓度,溶液在终浓度时所含DMSO体积相等且小于2.5%。
2.5.5 筛选方法按表5设置反应组,每个反应组中均加入提取的酶溶液50 μL,1.0 mmol·L-1硫酸锂溶液100 μL,180 mmol·L-1磷酸缓冲液(pH 7.0)225 μL。
2.5.6 实验结果按照下式计算有效组分各浓度的抑制率。
据各浓度的抑制率应用Origin Pro4.0软件计算出IC50。
抑制率=(A-B)/(A-C)×100%,式中,A为阴性对照组吸收度,B 为样品组吸收度,C为空白组吸收度。
由此计算的蒙花苷醛糖还原酶抑制活性的IC50的平均值为3.53 mg·L-1,金合欢素醛糖还原酶抑制活性的IC50的平均值为2.74 mg·L-1。