化学发光免疫测定综述

化学发光免疫分析化学发光免疫分析篇一：化学发光免疫分析方法化学发光是在常温下由化学反应产生的光的发射。

其发光机理是：反应体系中的某些物质分子，如反应物、中间体或者荧光物质吸收了反应释放的能量而由基态跃迁到激发态，当中间体由激发态回到基态时会释放等能级的光子，对光子进行测定而实现定量分析。

化学发光免疫分析方法是将化学发光与免疫反应相结合的产物，因化学发光具有荧光的特异性，但与荧光产生需要激发光不同，化学发光由化学反应产生光强度，并不需要激发光，从而避免了荧光分析中激发光杂散光的影响。

化学发光免疫分析包含了免疫化学反应和化学发光反应两个部分。

免疫分析系统是将化学发光物质或酶标记在抗原或抗体上，经过抗原与抗体特异性反应形成抗原－抗体免疫复合物。

化学发光分析系统是在免疫反应结束后，加入氧化剂或酶的发光底物，化学发光物质经氧化剂的氧化后，形成一个处于激发态的中间体，会发射光子释放能量以回到稳定的基态，发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测。

待测物质浓度因为与发光强度成一定的关系而实现检测目的。

一、化学发光免疫分析方法的类别化学发光免疫分析法根据标记物的不同可分为3 大类，即化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析法。

（一）化学发光免疫分析化学发光免疫分析是用化学发光剂直接标记抗体或抗原的一类免疫测定方法。

目前常见的标记物主要为鲁米诺类和吖啶酯类化学发光剂。

1. 鲁米诺类标记的化学发光免疫分析。

鲁米诺类物质的发光为氧化反应发光。

在碱性溶液中，鲁米诺可被许多氧化剂氧化发光，其中H2O2最为常用。

因发光反应速度较慢，需添加某些酶类或无机催化剂。

酶类主要是辣根过氧化物酶（HRP），无机类包括O3、卤素及Fe3+、Cu2+、Co2+和它们的配合物。

鲁米诺在碱性溶液下可在催化剂作用下，被H2O2等氧化剂氧化成3－氨基邻苯二酸的激发态中间体，当其回到基态时发出光子。

鲁米诺的发光光子产率约为0.01，最大发射波长为425 nm。

化学发光免疫检测在生化检验中的应用摘要：化学发光免疫检测是一种快速、敏感、特异性高的生物分析技术。

它是通过将荧光标记的抗体与待检测物结合，在化学反应的作用下发生光化学发光反应，从而实现对待检测物的检测。

化学发光免疫检测在生化检验中应用广泛，可以用于检测血液、尿液、脑脊液、组织和细胞等样本中的各种生化指标和病原微生物。

该技术具有检测速度快、敏感度高、特异性好、自动化程度高等优点，已成为临床诊断、疾病监测和药物研发等领域的重要手段。

本文就化学发光免疫检测在生化检验中的应用进行了综述。

关键词：化学发光免疫检测；生化检验；应用分析引言化学发光免疫检测是一种基于抗原-抗体反应的检测方法，通过利用免疫学原理和化学发光技术，可以高灵敏度、高特异性地检测目标物质。

在生化检验中，化学发光免疫检测广泛应用于血液学、生物化学、免疫学等领域，为疾病的诊断、预防和治疗提供了重要的辅助手段。

化学发光免疫检测的原理和方法，包括抗原-抗体反应、化学发光底物等方面的基本知识。

化学发光免疫检测在不同疾病的诊断中的应用，如肿瘤标志物的检测、感染性疾病的诊断等。

基于此，通过本文的研究，能够了解化学发光免疫检测在生化检验中的应用，从而更好地理解和应用这一技术，为疾病的早期诊断和治疗提供有力支持。

1化学发光免疫检测原理1化学发光免疫检测原理（Chemiluminescent Immunoassay，CLIA）是一种基于免疫学原理的生物分析技术，用于检测体液中的特定分子或抗原。

其原理基于化学发光反应，即利用特定酶标记抗体或抗原与待测分子结合后，通过化学反应使发光底物发生化学发光反应，从而检测出待测分子的含量。

具体实现过程如下：（1）样品处理：将待测样品加入到试剂盒中，经过预处理使其适合于化学发光反应。

（2）抗原-抗体反应：试剂盒中的抗原或抗体与待测样品中的目标分子结合形成复合物。

（3）酶标记：试剂盒中的抗原或抗体被特定酶标记，使其能够参与化学发光反应。

免疫化学发光法免疫化学发光法是一种常用的生物分析技术，广泛应用于生物医学研究、临床诊断和药物开发等领域。

该技术利用免疫学原理，通过特异性抗体与目标分子结合，再利用化学发光反应产生荧光信号，从而实现对目标分子的检测和定量分析。

免疫化学发光法具有高灵敏度、高特异性和宽动态范围的优点，能够检测到非常低浓度的目标分子。

这使得该技术在临床诊断中得到广泛应用，如肿瘤标志物的检测、病毒感染的诊断等。

与传统的酶联免疫吸附法相比，免疫化学发光法无需底物底色反应，避免了背景信号的干扰，提高了检测的准确性和灵敏度。

免疫化学发光法的原理是基于化学发光反应。

该反应是在存在特定底物时，通过催化剂（如酶）的作用，使底物发生氧化或还原反应，并产生激发态物质。

这些激发态物质通过放射性或非放射性跃迁返回基态时，释放出光子，产生荧光信号。

在免疫化学发光法中，底物一般是一种荧光标记的物质，当特异性抗体与目标分子结合后，荧光标记物也会与抗体结合，从而形成抗原-抗体-荧光标记物复合物。

通过光子检测器对荧光信号进行测量，就可以确定目标分子的存在和浓度。

免疫化学发光法的操作步骤相对简单，通常包括样品制备、抗体标记、抗原结合、洗涤等步骤。

首先，需要对样品进行预处理，如血清、尿液等样品需要离心去除悬浮物。

然后，将荧光标记的抗体与样品中的目标分子结合，形成抗原-抗体复合物。

接下来，对复合物进行洗涤，去除非特异性结合物质。

最后，使用荧光检测仪测量样品中的荧光信号强度，根据标准曲线确定目标分子的浓度。

免疫化学发光法在生物医学研究中有着广泛的应用。

例如，在肿瘤标志物的检测中，可以利用免疫化学发光法检测血清中的肿瘤标志物浓度，从而实现早期肿瘤的筛查和诊断。

此外，免疫化学发光法还可以应用于病毒感染的诊断，如乙肝病毒、人免疫缺陷病毒等的检测。

同时，该技术还可以用于药物代谢动力学研究，通过检测药物及其代谢产物在体内的浓度变化，评估药物的代谢过程和药效学特性。

免疫化学发光法是一项重要的生物分析技术，具有高灵敏度、高特异性和宽动态范围的优点。

化学发光分析法综述化学发光分析法是一种基于光的检测技术，其原理是通过化学反应产生光的发射，利用发光强度与待测物质浓度之间的关系进行定量分析。

化学发光分析法在生物医学、环境监测、食品安全等领域有着广泛的应用。

本文将综述化学发光分析法的原理、方法和应用研究进展。

化学发光分析法的原理可以归纳为两类：化学发光增强原理和化学发光自身原理。

前者基于化学反应中发光物质的生成和增强，如钒酸盐-含氮化物体系中产生的荧光；后者则是通过一些物质在化学反应中的产生发光，如氧化还原反应中的增白剂和催化剂的发光作用。

化学发光分析法的方法包括化学发光法、电化学发光法和光生发光法。

其中化学发光法是应用最广泛的一种方法，其步骤通常包括试剂的制备、反应条件的优化、发光体系的选择和测量装置的设计。

电化学发光法则是利用电化学反应中产生的电流转化成光信号进行检测。

光生发光法是利用光照射样品后产生的催化剂发光进行分析。

在应用研究方面，化学发光分析法在生物医学领域有着广泛的应用。

例如，生物芯片技术结合化学发光分析法可以用于检测DNA序列、蛋白质和细胞等。

此外，化学发光分析法还可以用于检测环境中的有毒物质，如重金属离子和有机污染物。

食品安全是一个重要的应用领域，化学发光分析法可以用于检测食品中的农药残留、添加剂和毒素等。

近年来，一些新的发展和研究方向也出现在化学发光分析法中。

例如，利用纳米材料和纳米光子学的原理，可以制备出高灵敏度、特异性的化学发光探针。

此外，不断提高化学发光分析方法的自动化程度，可以实现高通量的分析和测量。

同时，与其他分析技术的结合，如质谱技术和色谱技术，也是当前的研究重点。

综上所述，化学发光分析法是一种重要的分析技术，具有广泛的应用前景。

随着研究的不断深入，化学发光分析法在生物医学、环境监测和食品安全等领域的应用将会得到进一步的扩展。

免疫化学发光检验项目
免疫化学发光（Immunochemiluminescence，ICL）检验是一种常用的免疫测定技术，通过测量化学发光信号的强度来定量测定样品中的生物分子。

免疫化学发光检验项目广泛应用于临床诊断、药物研发和生命科学研究领域。

免疫化学发光检验项目包括但不限于以下几个方面：
1. 抗体测定：通过检测特定抗体的存在或水平来诊断某些疾病。

例如，乳腺癌标志物CA15-3、甲状腺功能相关抗体（TPO-Ab、TG-Ab）、乙肝病毒表面抗原（HBsAg）等。

2. 药物测定：检测药物在体内的浓度，用于药物治疗的监测和调整剂量。

常见的药物测定项目包括抗生素、抗抑郁药物、免疫抑制剂等。

3. 激素测定：检测体内激素水平的变化，用于诊断内分泌疾病。

常见的激素测定项目包括性激素（雌激素、孕激素等）、甲状腺激素（T4、T3、TSH等）、肾上腺皮质激素（皮质醇等）等。

4. 微量元素测定：测定体内微量元素的水平，用于评估人体营养状况和某些疾病的诊断。

常见的微量元素测定项目包括钙、铁、锌、镁、铜等。

5. 肿瘤标志物测定：通过检测肿瘤标志物的水平来筛查、诊断和监测肿瘤的发展。

常见的肿瘤标志物测定项目包括癌胚抗原
（CEA）、前列腺特异性抗原（PSA）、甲胎蛋白（AFP）等。

6. 受体测定：测定体内受体的水平，用于研究受体与相关疾病的关系以及药物研发。

常见的受体测定项目包括雌激素受体（ER）、雄激素受体（AR）等。

总之，免疫化学发光检验项目广泛涉及了多个医学领域，通过对特定生物分子的定量检测，可以为临床诊断、疾病监测和药物治疗提供有力的支持。

第49卷第11期2021年6月广州化工Guangzhou Chemical IndustryVol.49No.11Jun.2021化学发光分析法研究综述李霞1,王仕宝2°(1汉中职业技术学院农林技术与生物工程学院，陕西汉中723000；2汉中职业技术学院秦巴山区药(食)用植物研究所，陕西汉中723000；3汉中职业技术学院药学院，陕西汉中723000)摘要：化学发光分析法是利用被测样品与体系所产生的发光强度，在一定范围内的线性定量关系，对所测样品进行含量测定的一种痕量分析方法。

通过反应物、反应中所加的催化剂、增敏剂和抑制剂等，采用标记方式应用于物质含量测定，从而扩大化学发光分析使用范围。

化学发光分析法已经广泛应用于药物分析、环境监测、临床检验及食品分析等多个领域。

本文对化学发光原理、特点进行了概括，同时结合文献，汇总了多种化学发光体系的应用。

关键词：化学发光；分析法；流动注射；研究；综述中图分类号：A150.2520文献标志码：A文章编号：1001-9677(2021)011-0018-03 Research Review of Chemiluminescence Analysis*U Xia1,WANG Shi-bad1-'3(1School of Agricultural and Forestry Technology and Bioengineering,Hanzhong Vocation and Technology College, Shaanxi Hanzhong723000;2Institute of Pharmaceutical(Edible)Botanty,Qinba Mountains Hanzhong Vocation and Technology College,Shaanxi Hanzhong723000；3School of Pharmacy,Hanzhong Vocation and Technology College,Shaanxi Hanzhong723000,China)Abstract:Chemiluminescence(CL)analysis is a trace analysis method for the determination on the content of the measured sampleby using the linear quantitative relationship within a certain range.Through the reactants,catalysts, sensitizers and inhibitors added in the reaction,the labeling method is applied to the determination of material content,so as to expand the scope of application of chemiluminescence analysis.Chemiluminescence analysis has been widely used in drug analysis,environmental monitoring,clinical testing and food analysis.The principleand characteristics of CL were summarized,and the applications of various chemiluminescence systems were summarized.The principle and characteristics of chemiluminescence were summarized,and Various CL systems were summarizedcombining reference.Key words:chemiluminescence;analysis;flow-injection;research;review化学发光(chemiluminescence,CL)是物质在化学反应过程中产生的一种光辐射现象化学发光分析法是利用不同浓度所测样品与体系所产生的发光强度，在一定范围内呈现线性定量关系，通过对检测该体系中化学反应的发光强度后，确定出所测样品含量的一种痕量分析方法⑵。

化学发光免疫分析技术原理简介20 世纪60 年代即有人利用化学发光法测定水样中细菌含量和菌尿症患者尿液检查.1977 年Halman 等将化学发光系统与抗原抗体反应系统相结合，创建了化学发光免疫分析法，保留了化学发光的高度灵敏性，又克服了它特异性不足的缺陷。

近年来对技术与仪器的不断改进，使此技术已成为一种特异，灵敏，准确的自动化的免疫学检测方法。

1996 年推出的电化学发光免疫技术,在反应原理上又具有一些新的特点。

这两种技术目前已在国内一些大型医院实验室用于常规免疫学检验。

一、化学发光免疫分析法化学发光免疫分析法( chemiluminescence immunoassay , CLlA) 是把免疫反应与发光反应结合起来的一种定量分析技术，既具有发光检测的高度灵敏性，又具有免疫分析法的高度特异性。

在CLIA中，主要有两个部分,即免疫反应系统和化学发光系统。

免疫反应系统与放射免疫测定中的抗原抗体反应系统相同化学发光系统则是利用某些化合物如鲁米诺( luminol) 、异鲁米诺（isolu—minol) 、金刚烷( AMPPD）及吖啶酯（ AE）等经氧化剂氧化或催化剂催化后成为激发态产物，当其回到基态时就会将剩余能量转变为光子，随后利用发光信号测量仪器测量光量子的产额。

将发光物质直接标记于抗原(称为化学发光免疫分析)或抗体上(称为免疫化学发光分析），经氧化剂或催化剂的激发后，即可快速稳定的发光，其产生的光量子的强度与所测抗原的浓度可成比例。

亦可将氧化剂（如碱性磷酸酶等）或催化剂标记于抗原或抗体上，当抗原抗体反应结束后分离多余的标记物，再与发光底物反应,其产生的光量子的强度也与待测抗原的浓度成比例。

发光免疫分析的灵敏度高于包括RIA 在内的传统检测方法，检测范围宽，测试时间短,仅需30 — 60min 即可。

试剂货架寿命长，稳定性好，具有大规模自动化测试的功能。

这项技术发展很快，已有许多厂商生产各具特色的测定仪器与配套试剂。