病毒培养技术PPT课件

互联网的普及使得病毒的传播速度更快、范围更广，对网络安全和数据安全造成了 更大的威胁。
计算机病毒的特点与危害
计算机病毒具有以下 特点
传染性：病毒可以通 过复制自身和传播其 他文件来感染计算机 系统。
隐蔽性：病毒通常隐 藏在可执行文件或数 据文件中，难以被发 现。
计算机病毒的特点与危害
01
02
03
传播方式
通过加密算法对文件进行加密， 并要求用户支付赎金以解锁文件
。
影响范围
全球范围内，影响多个行业和组 织，如医院、学校、政府机构等
。
防范措施
及时更新系统和软件补丁，关闭 恶意软件传播渠道，备份重要数
据。
Petya勒索软件病毒
传播方式
通过感染Windows操作系统文件，使用加密算法对文件进行加密 ，并要求用户支付赎金以解锁文件。
CodeRed蠕虫病毒
传播方式
通过感染Windows操作系统文件和网络共享文件夹，使用复制 和感染文件的方式进行传播。
影响范围
全球范围内，影响多个行业和组织，如医疗、教育、政府机构等 。
防范措施
限制网络共享文件夹访问权限，及时更新系统和软件补丁，关闭 恶意软件传播渠道。
THANKS。
病毒活动。
清除方法
备份恢复法
备份重要数据，然后恢复到正 常状态。
安全模式法
在安全模式下启动计算机，然 后使用防病毒软件进行全盘扫 描。
程序修复法
使用防病毒软件提供的工具修 复被病毒感染的文件。
手动删除法
手动删除病毒文件和相关配置 文件，恢复系统设置。
05
最新计算机病毒案例分析
WannaCry勒索软件病毒
致程序无法正常运行或数据文件损坏。

器材与试剂的选用原则
03
如无菌操作、适用性、经济性等
02
细菌形态与结构观察
细菌培养及形态特征
01
02
03
细菌培养方法
包括需氧培养、厌氧培养 和兼性厌氧培养等，不同 种类的细菌需要不同的培 养条件。
细菌菌落特征
观察细菌在固体培养基上 形成的菌落，了解其形状、 大小、颜色、透明度等特 征。
细菌细胞形态
05
微生物代谢活性测定
生长曲线测定方法
直接计数法
通过显微镜直接观察并计数微生物数量，适用于较大微生物如细 菌、酵母菌等。
比浊法
利用微生物生长引起培养液浊度变化来测定生长曲线，操作简便 但易受杂质干扰。
平板菌落计数法
将待测样品稀释后涂布于固体培养基表面，培养后计数形成的菌 落数，适用于可形成菌落的微生物。
原理
病毒必须寄生在活细胞内才能增 殖，通过提供适宜的细胞环境， 使病毒在细胞内复制并产生子代
病毒。
病毒检测技术及应用
免疫学方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验 （ELISA）、免疫荧光技术等检测病毒抗原或抗体。
分子生物学方法
基于病毒核酸的特异性，利用PCR、实时荧光定量PCR等技术扩增 并检测病毒核酸。
微生物学实验ppt课件
contents
目录
• 实验基础知识 • 细菌形态与结构观察 • 真菌形态与结构观察 • 病毒培养与检测技术 • 微生物代谢活性测定 • 微生物遗传与变异研究 • 微生物生态学及环境因子影响研究
01
实验基础知识
微生物学概述
类生活中的作用：如 生态平衡、发酵工业 等
生理生化鉴定
利用真菌的生理生化特性，如营养需 求、代谢产物等，进行进一步的分类 鉴定。

7.1 计算机病毒的特点与分类
（1） 引导型病毒的工作机理 引导扇区是硬盘或软盘的第一个扇区，是存放引导指 令的地方，这些引导指令对于操作系统的装载起着十分重 要的作用。一般来说，引导扇区在CPU的运行过程中最先 获得对CPU的控制权，病毒一旦控制了引导扇区，也就意 味着病毒控制了整个计算机系统。
至今短短30年，已经经历了3个阶段。第一个阶段为 DOS、Windows等传统病毒，此时编写病毒完全是基 于对技术的探求，这一阶段的顶峰应该算是CIH病毒； 第二个阶段为基于Internet的网络病毒，例如“红色代 码”、“冲击波”、“震荡波”等病毒皆属于此阶段， 这类病毒往往利用系统漏洞进行世界范围内的大规模 传播；目前计算机病毒已经发展到了第三阶段，我们 所面临的不再是一个简简单单的病毒，而是集病毒、 黑客攻击、木马、间谍软件等多种危害于一身的基于 Internet的网络威胁。
本章将从计算机病毒的概念、发展、危害及其 特点等方面谈起，介绍计算机病毒的分类，并结合 具体的例子介绍恶意代码、计算机病毒尤其是典型 计算机病毒的检测与清除。最后，简单回顾计算机 病毒的现状和发展趋势。
第七章 计算机病毒防治
主要内容
7.1 计算机病毒的特点与分类 7.2 恶意代码 7.3 计算机病毒的检测与清除 7.4 典型计算机病毒的检测与清除 7.5 计算机病毒的现状和发展趋势
计算机病毒赖以生存的基础是现代计算机都具有相同 的工作原理和操作系统的脆弱性，以及网络协议中的安全 漏洞。特别是在个人计算机中，系统的基本控制功能对用 户是公开的，可以通过调用和修改系统的中断，取得对系 统的控制权，从而对系统程序和其他程序进行任意处理。
7.1 计算机病毒的特点与分类
7.1.2 计算机病毒的发展 从1986年出现第一个感染PC机的计算机病毒开始，

红色代码、尼姆达、求职信等蠕虫病毒，感染大量计算机，造
成严重经济损失。
传播途径与防范
03
蠕虫病毒主要通过漏洞传播，及时修补系统漏洞、安装杀毒软
件可有效防范。
木马病毒案例分析
木马病毒定义
隐藏在正常程序中的恶意代码，窃取用户信息、控制系统资源。
典型案例分析
灰鸽子、冰河等木马病毒，窃取用户账号密码、远程控制计算机， 实施网络犯罪。
零日漏洞威胁
利用尚未公开的漏洞进行攻击，杀毒软 件无法及时应对。
攻击手段多样化
病毒攻击手段不断翻新，包括钓鱼攻击、 水坑攻击等，难以防范。
社交工程攻击
通过欺骗用户获取敏感信息，进而实施 病毒攻击。
加强国际合作，共同应对计算机病毒威胁
建立国际反病毒联盟
各国共同组建反病毒联盟，共享病 毒信息和防范技术。
《计算机病毒》PPT课件
目录
• 计算机病毒概述 • 计算机病毒传播途径与方式 • 计算机病毒检测与防范技术 • 典型计算机病毒案例分析
目录
• 计算机病毒法律法规与道德伦理 • 计算机病毒未来趋势及挑战
01
计算机病毒概述
计算机病毒定义与特点
01
02
定义
特点
计算机病毒是一种恶意软件，能够在计算机系统内进行自我复制和传 播，破坏数据、干扰计算机运行，甚至危害网络安全。
计算机病毒分类与危害
分类
根据传播方式可分为文件型病毒、网络型病毒和复合型病毒；根据破坏性可分 为良性病毒和恶性病毒。
危害
计算机病毒可导致数据丢失、系统崩溃、网络拥堵等问题，严重影响计算机的 正常使用和网络的安全稳定。同时，计算机病毒还可能窃取个人隐私信息、造 成经济损失等不良后果。

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学以致用
1. 学习了病毒形态结构、生命活动的 特点，你能不能找出它们的弱点， 从而战胜它们呢？
2. 虽然有很多病毒会让人类或其他生 物得病，但你有没有想出可以让病 毒为人类服务的方法呢？
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病毒的弱点：
1. 结构简单，只有蛋白 质外壳和内部遗传物质。
2. 只能寄生在活细胞。 高温杀死
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5
小资料一
19世纪末，科学家伊万诺夫斯基在研究烟草 花叶病的病因时，推想是由细菌引起的。他将患 花叶病的烟草榨出汁液，用细菌过滤器进行过滤， 将细菌滤出，再用过滤后的汁液去感染正常的烟 叶，结果发现正常的烟叶还能患病。 这表明烟草花叶病是由比细菌还小的生物引 起的，他把这种生物叫做“滤过性病毒”。
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6
小资料一
20世纪三十年代，电子显 微的发明使观察物体的放大倍 数提高到了几十万倍。 科学家首次用电子显微镜 观察到烟草花叶病毒是一种杆 状颗粒。
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7
豌豆萎黄 甲流病毒 狂犬病毒 花叶病毒 病毒
HIV 病毒
大肠杆菌 SARS 昆虫病毒 病毒 病毒
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病毒的形态
球形
杆形
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蝌蚪形
9
小资料二
由于病毒是微生物中最小的生物，而且病毒 用活细胞进行 在一般的微生物培养基上不能繁殖，这就给寻找 病毒培养 培养病毒的技术增加了难度。然而，病毒培养是 病毒研究中最基础、最关键的一步，可以说没有 病毒培养技术的建立，也就没有病毒研究的突破 和发展。
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给害苦了！”说着转身吩咐女儿：“小青，快去把你的被褥和刺绣活计什儿搬到这边屋里来，我去看看那几个落难的娃娃们！”小青答应 一声，去东边的屋子搬东西去了。乔氏陪同耿老爹一起出门来接耿正兄妹三人。父子们进门后，将挑担和行李卷放在院子里，方才放心地 长长出了一口气。小青把自己的被褥搬到母亲屋里之后，又将刺绣活计什儿抱了出来，转头对耿正兄妹三人说：“我搬完了，你们把行李 搬进去吧！”于是，父子四人一起动手，把所有的行李都挪进了东边的屋子里放下来。此时，各人只感觉浑身上下已经没有一点儿力气了， 耿英和耿直更是软软地坐在那张挺宽敞的大床边上，再也不想动弹了。看着耿老爹父子四人疲惫不堪的样子，乔氏说：“还没有吃饭吧？ 我这就给你们做点儿便饭去！”耿老爹忙说：“不劳您费心了，我们带着干粮呢，只要有点儿热水喝也就行了。”乔氏不依，说：“那怎 么行呢？娃娃们已经疲累得这个样子了。”耿老爹说：“那就麻烦您熬点儿粥吧，我挑的这箩筐里还有些米呢！”乔氏摆摆手说：“别， 不用动你们带的那点儿米了。我们家的日子虽然没有多么富裕，但几顿便饭还有得吃。喝点儿粥也好，家里正好有新鲜的百合和莲子，喝 点儿百合莲子粥清心安神呢。我再炒一个油菜蘑菇，你把干粮拿出来，将就着吃了好早点儿歇了。”转头又招呼女儿：“小青，水罐里还 有不少温热的开水呢，你快去给客人每人倒上一碗端过来吧！”见乔氏要去熬粥，耿英站起身来要去帮忙。乔氏说：“丫头啊，快去洗把 脸歇着吧，看你累得够呛。”在如此困境中能遇到这样的好心人着实不容易，耿家父子们连声道谢不迭。而乔氏母女俩并不多说什么，只 管忙活去了。耿老爹刚从挑担中取出脸盆儿，小青和乔氏就各端着两碗热水过来了。耿家父子们赶快接过碗来再次道谢。乔氏说：“不要 说那么多客气话了，你们先喝碗水歇着吧！哦，你们带着脸盆啊？”小青说：“我去给你们打水！”父子们都简单洗把脸，又各自喝了一 碗温热的开水，感觉体力恢复了一些。半个时辰后，乔氏母女终于熬好了一大锅百合莲子粥，炒了一大盘子油菜蘑菇。小青过来对大家说： “我姆妈说，你们这个屋里东西多，乱呢。都到我们那边屋里吃饭吧！”“多谢多谢！”耿老爹说着，端起装有10个大饼的大盘子，带着 耿正兄妹三人，跟随小青来到西边的屋子里。耿英顺便把喝了水的四个碗也端了过来。乔氏接过盘子，说：“就将就点儿吃你们自己带的 干粮吧。”又说：“我们娘儿俩也还没有吃晚饭呢，正好大家一块儿吃。”见耿英把四个碗也端过来了，她轻轻笑笑接过来放在一旁，就 招呼大家围坐在一张不大不小的圆桌边。在桌子的中间，已经放了一大盘子还冒着热气儿的香喷喷的油菜蘑

1.牛肉膏蛋白胨固体培养基配方
物质 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂
重量 5g
10g 5g 20g
水
定溶至 1000mL
2、配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤
计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
3、注意事项:
①倒平板的温度一般在50℃左右适宜 （温度过高会烫手，过低培养基又会凝固） ②平板需倒置 （这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防 止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染）
特殊营养物质：如:生长因子(即细菌 生长必需，而自身不能合成 的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌 呤、嘧啶) pH：细菌pH为6.5–7.5; 放线菌pH
小结
培养基的营养物质及作用
营养物质
作用
举例
碳源
提供碳元素（有机碳源还能提供 无机碳源：CO2、NaHCO3
能量）
有机碳源：糖类、脂肪酸、
花生粉饼、石油
染的方法。 2、消毒：指使用较为温和 的物理或化学方法杀死物体 表面或内部的部分微生物 （不包括芽孢和孢子） 3、灭菌：使用强烈的理化 因素杀死物体内外所有的微 生物，包括芽孢和孢子。 4、归纳实验室常用的消毒
小结消毒
小结灭菌
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物 被其他外来微生物污染外，还有什么目的？
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消 毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
3 .利用酒精消毒时，酒精浓度是不是越高越好？
氮源
提供氮元素，主要用于合成蛋白 分子态氮、氨、铵盐、硝酸 质、核酸以及含氮的代谢产物 盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨

第一节 病毒的传播方式与感染类型
病毒感染类型
隐性感染 显性感染
急性病毒感染(acute viral infection) ：
✓ 病毒侵入机体后，潜伏期短、发病急，病程短 ✓ 恢复后体内不再存在病毒并常获得特异性免疫
持续性病毒感染(persistent viral infection) ：
✓ 病毒侵入机体后持续存在数月、数年甚至几十年 ✓ 可出现症状，也可不出现症状 ✓ 体内长期携带病毒，是重要的传染源
病毒感染对宿主细胞的直接致病作用
细胞凋亡(apoptosis)：
✓ 由基因控制的程序性细胞死亡 ✓ 病毒的感染可导致宿主细胞发生凋亡
基因整合(integration)和细胞转化(cell transformation) ：
✓ 某些DNA病毒和反转录病毒的基因可整合于宿主细胞染色体 基因组中—前病毒体
持续性病毒感染的分类： ✓ 潜伏性感染(latent viral infection)
o 病毒在显性/隐性感染后未完全清除； o 病毒潜伏在某些组织细胞内，不复制； o 一般在潜伏期检测不到子代病毒； o 潜伏可达数十年； o 在一定条件下重新激活； o 单纯疱疹病毒等。
第一节 病毒的传播方式与感染类型
第一节 病毒的传播方式与感染类型
病毒感染
病毒感染的来源 病毒感染途径 病毒感染传播方式 病毒在体内的播散方式
水平传播(horizontal transmission) ：
✓ 在人群中不同个体之间的传播 ✓ 大多数传染病的传播方式属于水平传
播性传播 ✓ 水平传播的病毒感染率高，迅速繁殖
和扩散
垂直传播(vertical transmission) ：
第一节
病毒学诊断

消毒操作
对疑似患者和密切接触者所处环境进 行彻底消毒，包括空气、物品表面、 地面等。
密切接触者追踪管理
追踪调查
对疑似患者的密切接触者进行 追踪调查，了解其行动轨迹、
接触人员等信息。
隔离观察
将密切接触者隔离观察，进行 医学观察和健康状况监测。
采样检测
对密切接触者进行采样检测， 确认是否感染病毒。
心理干预
未来发展趋势预测
全球化趋势下的挑战
随着全球化的加速推进，人员流动和物资流通更加频繁， 传染病的传播速度和范围也将不断扩大，防控难度将越来 越大。
新技术、新方法的应用
未来将有更多的新技术、新方法应用于传染病防控领域， 如基因编辑、人工智能等，这些技术将为传染病防控提供 更加精准、高效的手段。
社会共治模式的探索
常见寄生虫性传染病包括血吸 虫病、疟疾等。
传播途径和易感人群
传染病的传播途径主要有呼吸 道传播、消化道传播、接触传 播、虫媒传播等。
易感人群是指对某种传染病缺 乏免疫力而容易感染该病的人 群，如儿童、老人、孕妇等。
了解传染病的传播途径和易感 人群，有助于采取针对性的防 控措施，保护易感人群免受感 染。
普及传染病防控知识，提 高居民自我防护意识和能 力。
实施消毒措施
对公共场所、交通工具等 进行定期消毒，减少病毒 传播风险。
疫苗接种政策
推广疫苗接种
加强疫苗研发、生产、流通等环 节的监管，确保疫苗质量和安全
。
实施免费接种
将疫苗纳入国家免疫规划，为居民 提供免费接种服务。
建立接种档案
建立个人疫苗接种档案，记录接种 时间、疫苗品种等信息，方便管理 和查询。
开展健康促进活动
组织各类健康促进活动，如健康讲座、义诊等，提高公众健康意 识和自我防护能力。

悬浮培养
通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬浮于培养液内 的培养方法，主要用于一些在振荡或搅拌下能生长繁殖的细 胞，如生产单克隆抗体的杂交瘤细胞。
微载体培养
微载体直径应为60～105nm，无毒性，透明，颗粒密度与培 养液密度相近似，略重于液体，低速搅拌即能悬浮，不吸收 培养液和化学反应，表面光滑、硬度小、有弹性，易于细胞 吸 附 在 表 面 ， 如 DEAE—SephadexA-50 、 Cytodexl 、 Cytodex2、Cytodex3等。
有些病毒不产生CPE。 病毒收获：CPE达80％时收获，反复冻融多次使病毒释放，
然后离心除去细胞碎片，上清病毒液-20℃保存。 病毒毒价：TCID50、中和试验、AGP效价、HA
疫苗制造工艺流程
病毒性细胞疫苗制造工艺流程
病毒性组织疫苗制造工艺流程
细菌疫苗和类毒素制造工艺流程
寄生虫疫苗制备的工艺流程
3. 细胞培养要素
•培养液 •血清 •细胞接种量 •pH •温度 •无菌条件 •培养器皿清洁度
RPMI-1640、199、 DMEM、F12
血清
• 成分：必需氨基酸、促进细胞生长和贴壁的成分。α-珠蛋 白和白蛋白能促进细胞生长；白蛋白具有毒作用；糖蛋白、 a2-球蛋白和β脂蛋白G2能促进细胞贴壁。
（1）原代细胞(primary cell)
指由新鲜组织经剪碎和胰酶消化制备的细胞，如CEF细胞。
（2）细胞株(cell strain) 又称二倍体细胞
指自继代培养的细胞中选育出具有特殊生物学性质和标记的 细胞。这类细胞且能保持原来的二倍染色体数目，能连续传很 多 代 (50 ～ 100 代 ) ， 但 为 有 限 生 命 ； 没 有 肿 瘤 原 。 如 PKl5 、 BHK21和Vero （3）传代细胞（continued cell line）\ 细胞系(cell line)

2．孵化技术 ．
①温度：37～39.5℃。传染性支气管炎病毒37℃ ②湿度：鸡胚53％～57％，水禽胚比鸡胚高5％～10％。 ③通风：氧气，二氧化碳。 ④翻蛋：
3．接种技术 ．
不同病毒的增殖有不同的接种途径， 同一种病毒接种不同日龄禽胚获得的病毒量也不同。 •接种日龄：鸡胚13～14日龄。鸭胚15～16日龄，尿囊液含 量最高，平均约6～8ml，羊水约1～2ml。 •接种部位：不应伤及胚体和血管，以免影响其发育 •严格防止禽胚污染 ①鸡胚接种时严格无菌操作； ②定期清扫消毒孵化室，保持室内空气新鲜； ③种蛋入孵前先用温水清洗，消毒，凉干。
6. 病毒增殖指标与收获
细胞病变(CPE)： ： 细胞病变 ①细胞圆缩，如痘病毒和呼肠孤病毒等； ②细胞聚合，如腺病毒； ③细胞融合形成合胞体，如副粘病毒和疱疹病毒； ④轻微病变，如正粘病毒、冠状病毒等。 包涵体和血凝性： 包涵体和血凝性：也可作为检查病毒增殖的指标。 有些病毒不产生CPE。 病毒收获：CPE达80％时收获，反复冻融多次使病毒释放， 病毒收获 然后离心除去细胞碎片，上清病毒液-20℃保存。 病毒毒价：TCID50、中和试验、AGP效价、HA 病毒毒价
3. 细胞培养要素
•培养液 培养液 •血清 血清 •细胞接种量 •细胞接种量 •pH •温度 温度 •无菌条件 无菌条件 •培养器皿清洁度 培养器皿清洁度
RPMI-1640、199、 DMEM、F12
血清
• 成分：必需氨基酸、促进细胞生长和贴壁的成分。 珠蛋 成分 ： 必需氨基酸 、 促进细胞生长和贴壁的成分。 α-珠蛋 白和白蛋白能促进细胞生长；白蛋白具有毒作用；糖蛋白、 白和白蛋白能促进细胞生长；白蛋白具有毒作用；糖蛋白、 a2-球蛋白和β脂蛋白 能促进细胞贴壁。 球蛋白和β 能促进细胞贴壁。 球蛋白和 脂蛋白G2能促进细胞贴壁 血清选择：同种动物优于异种动物血清； 血清选择 ：同种动物优于异种动物血清；人和牛血清优于 马血清；马血清优于兔血清和鸡血清。 马血清；马血清优于兔血清和鸡血清。 血清使用：目前国内多用犊牛血清，使用前须经56℃灭活 血清使用： 目前国内多用犊牛血清， 使用前须经 ℃ 30min， 并进行细胞毒性试验 。 生长液血清含量一般为 ， 并进行细胞毒性试验。 生长液血清含量一般为5 ％～20％。维持液中血清量为 ～5％。 ％ 维持液中血清量为0%～ ％ 血清替代因子：激素和生长因子（如胰岛素、 血清替代因子：激素和生长因子（如胰岛素、 上皮生长因 结合蛋白（如转铁蛋白） 贴壁因子（如鱼精蛋白、 子）、结合蛋白（ 如转铁蛋白）、贴壁因子（ 如鱼精蛋白、 聚赖氨酸）和微量元素（如硒）四类几十种，多数无血清 聚赖氨酸） 和微量元素（ 如硒） 四类几十种， 培养液须补加3～ 种血清替代因子 种血清替代因子。 培养液须补加 ～8种血清替代因子。