生物技术大实验考试复习题
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生物实验复习题集及答案实验一:细胞的构造与功能题目1:细胞器的结构和功能答案:细胞器是细胞内的各种结构和器官,它们具有不同的形态和功能。
以下是一些常见细胞器的结构和功能:1. 线粒体:呼吸作用的场所,提供细胞所需的能量。
2. 内质网:合成、包装和运输细胞内物质的重要通道。
3. 高尔基体:负责合成和包装细胞分泌物或膜蛋白。
4. 核糖体:参与蛋白质的合成。
5. 溶酶体:消化和分解细胞内外的废物。
6. 核膜:包裹和保护细胞核。
题目2:光合作用与呼吸作用的比较答案:光合作用和呼吸作用是细胞内重要的代谢过程,二者有以下区别:1. 光合作用利用光能将二氧化碳和水合成有机物质,产生氧气。
呼吸作用利用有机物质分解产生能量,产生二氧化碳和水。
2. 光合作用发生在叶绿体中,呼吸作用发生在线粒体中。
3. 光合作用是一种兴奋性过程,需要光能参与。
呼吸作用属于一种有氧过程,需要氧气参与。
实验二:遗传与变异题目1:DNA复制的过程答案:DNA复制是细胞分裂过程中的重要步骤,具体包括以下几个步骤:1. 脱氧核苷酸的解旋:DNA双链解旋成两条单链。
2. 模板链的合成:DNA聚合酶从3'端向5'端在模板链上合成新的DNA链。
3. 拉链酶的作用:拉链酶通过连接互补的碱基对,将新合成的DNA链与模板链连接起来。
4. 终止:新合成的DNA链与模板链下游的DNA分子连接完成。
题目2:染色体变异的种类和影响答案:染色体变异是指染色体结构和数量发生异常的现象,种类较多,主要包括以下几种:1. 缺失:染色体上的一部分基因或染色体段缺失。
2. 倍数变化:染色体的数量出现变化,如三体、四体等。
3. 倒位:染色体上两个不同区域的片段发生交换。
4. 转座:染色体上的某个基因或片段移动到其他染色体上。
这些染色体变异会影响个体的遗传信息,导致遗传病的发生或个体特征的改变。
实验三:生态系统与环境保护题目1:生态系统的组成与功能答案:生态系统是由生物和环境组成的生态系统,它包括以下几个方面的组成与功能:1. 生物群落:由相互作用的不同物种组成的群体。
生物实验考试试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 下列哪项不是细胞的基本结构?A. 细胞膜B. 细胞壁C. 细胞质D. 细胞核答案:B2. 细胞分裂过程中,染色体的数目在哪个阶段加倍?A. 间期B. 有丝分裂前期C. 有丝分裂后期D. 减数分裂答案:C3. 光合作用中,光能被转化为化学能的阶段是?A. 光依赖反应B. 光合磷酸化C. 暗反应D. 呼吸作用答案:A4. 以下哪个不是线粒体的功能?A. 产生ATPB. 储存遗传物质C. 参与细胞呼吸D. 调节细胞死亡答案:B5. 以下哪个选项是真核细胞特有的结构?A. 核糖体B. 内质网C. 细胞膜D. 核糖体和内质网答案:D6. 基因突变是指什么?A. 基因序列的改变B. 染色体结构的改变C. 基因表达的改变D. 基因数量的改变答案:A7. 以下哪个不是细胞周期的阶段?A. G1期B. S期C. G2期D. M期答案:D8. 以下哪个是细胞凋亡的特征?A. 细胞体积增大B. 细胞膜破裂C. 细胞核浓缩D. 细胞质凝聚答案:C9. 以下哪个是细胞信号传导的第二信使?A. ATPB. cAMPC. 钙离子D. 所有选项都是答案:D10. 以下哪个是细胞骨架的组成部分?A. 微管B. 微丝C. 中间丝D. 所有选项都是答案:D二、填空题(每空2分,共20分)1. 细胞膜的主要功能是_________和_________。
答案:保护细胞内部结构;控制物质进出2. 细胞分裂的两种类型是_________和_________。
答案:有丝分裂;减数分裂3. 细胞周期包括_________、S期、G2期和M期。
答案:G1期4. 细胞凋亡是一种_________的细胞死亡方式。
答案:受控5. 细胞信号传导的第一步是_________。
答案:受体与配体结合三、简答题(每题15分,共30分)1. 描述细胞呼吸的过程,并简述其在细胞能量代谢中的作用。
答案:细胞呼吸是细胞将有机物质(如葡萄糖)氧化分解,释放能量的过程。
今年生物实验考试题及答案一、选择题(每题2分,共10分)1. 细胞膜的主要功能是什么?A. 储存遗传信息B. 保护细胞内部结构C. 传递神经冲动D. 合成蛋白质答案:B2. 下列哪项不是线粒体的功能?A. 能量转换B. 细胞呼吸C. DNA复制D. 蛋白质合成答案:D3. 植物细胞特有的结构是:A. 叶绿体B. 线粒体C. 核糖体D. 高尔基体答案:A4. 以下哪种物质不是细胞壁的主要成分?A. 纤维素B. 木质素C. 蛋白质D. 胆固醇答案:D5. 细胞周期中,DNA复制发生在哪个阶段?A. G1期B. S期C. G2期D. M期答案:B二、填空题(每空1分,共10分)1. 真核细胞的细胞核中包含有_______,是遗传信息的主要储存场所。
答案:DNA2. 细胞膜的流动性是由于其组成成分中的_______和_______具有流动性。
答案:磷脂、蛋白质3. 光合作用中,光能被_______捕获,转化为_______能。
答案:叶绿素、化学4. 细胞分裂过程中,染色体数量加倍发生在_______期。
答案:有丝分裂5. 细胞凋亡是一种_______的细胞死亡过程。
答案:程序化三、简答题(每题10分,共20分)1. 描述一下细胞呼吸的过程,并说明其在细胞中的作用。
答案:细胞呼吸是细胞将有机物质氧化分解,释放能量的过程。
主要分为三个阶段:糖酵解、柠檬酸循环和电子传递链。
细胞呼吸的作用是为细胞提供能量,以维持细胞的各种生命活动。
2. 解释一下什么是基因表达,以及基因表达调控的基本机制。
答案:基因表达是指基因信息被转录成mRNA,然后翻译成蛋白质的过程。
基因表达调控的基本机制包括转录调控、mRNA的加工和降解、翻译调控等。
这些机制可以控制基因在特定时间和空间的表达,以适应细胞的生理需求。
四、实验题(每题15分,共30分)1. 实验目的:观察植物细胞的质壁分离和复原现象。
实验材料:洋葱鳞片叶表皮、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、0.3M 蔗糖溶液、清水。
生物实验考试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 细胞的基本结构包括:A. 细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核B. 细胞膜、细胞质、线粒体和叶绿体C. 细胞质、细胞核和核糖体D. 细胞膜、细胞质、细胞核和细胞器答案:D2. 以下哪个不是真核细胞的特征?A. 有核膜包围的细胞核B. 细胞质中存在多种细胞器C. 细胞壁由纤维素构成D. DNA与蛋白质形成染色体答案:C3. 光合作用中,光能被转化为:A. 热能B. 动能C. 化学能D. 电能答案:C4. 以下哪个过程不涉及DNA的复制?A. 细胞分裂B. 基因表达C. 细胞分化D. 有丝分裂答案:B5. 以下哪个是细胞呼吸的最终产物?A. 葡萄糖B. 二氧化碳和水C. 氧气D. 氨基酸答案:B6. 酶的催化作用主要依赖于:A. 酶的浓度B. 酶的活性中心C. 酶的温度稳定性D. 酶的分子量答案:B7. 以下哪个不是细胞周期的阶段?A. G1期B. S期C. G2期D. R期答案:D8. 基因突变可能导致:A. 染色体结构变异B. 基因表达的改变C. 细胞周期的改变D. 所有以上选项答案:D9. 以下哪个是孟德尔遗传定律?A. 基因型决定表型B. 显性基因掩盖隐性基因C. 基因独立分离D. 环境影响基因表达答案:C10. 以下哪个是生物进化的证据?A. 化石记录B. 物种的地理分布C. 比较解剖学D. 所有以上选项答案:D二、简答题(每题10分,共30分)1. 描述细胞分裂过程中的有丝分裂过程。
答案:有丝分裂是细胞分裂的一种方式,它包括四个阶段:前期、中期、后期和末期。
在前期,染色体复制形成姐妹染色单体,核膜和核仁消失。
中期时,染色体排列在细胞的中央形成赤道面。
后期,姐妹染色单体分离,向细胞两极移动。
末期,核膜和核仁重新形成,细胞质分裂,形成两个新的细胞。
2. 解释什么是基因重组,并给出一个例子。
答案:基因重组是遗传物质在生物体中重新排列的过程,它可以通过交叉互换或基因工程实现。
生物技术复习题(附参考答案)一、单选题(共40题,每题1分,共40分)1、在DNA生物合成中,具有催化RNA指导的DNA聚合反应、RNA水解反应及DNA指导的DNA聚合反应三种功能的酶是A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、逆转录酶D、DNA水解酶正确答案:C2、有关辅酶的叙述正确的是( )A、为一种高分子化合物B、一种辅酶只能与一种酶蛋白结合C、不参与质子、电子及化学基团转移D、可决定酶的特异性E、与酶蛋白结合比较疏松正确答案:E3、用含Oligo-dT配基的纤维素柱层析提纯真核组织mRNA是非常有效的方法,这是因为mRNA含有A、m7Gppp的结构B、CCA-OH的结构C、poly(A)的结构D、poly(T)结构正确答案:C4、反竞争性抑制作用的描述是A、抑制剂既与酶结合又与酶-底物复合物相结合B、抑制剂使酶促反应的K m值升高,V max降低C、抑制剂使酶促反应的K m值降低,V max增高D、抑制剂只与酶-底物复合物相结合正确答案:D5、细菌芽孢释放的时期()A、延滞期B、稳定期C、衰亡期D、指数期正确答案:C6、位于糖酵解、糖异生、磷酸戊糖途径、糖原合成和糖原分解各条代谢途径交汇点上的化合物是A、1-磷酸葡萄糖B、1,6-二磷酸果糖C、6-磷酸果糖D、6-磷酸葡萄糖正确答案:D7、胞质中的NADH可以进行下列哪项A、直接进入线粒体氧化B、将H交给FAD,生成FADH 2后进入线粒体氧化C、还原磷酸二羟丙酮后所生成的还原产物可进入线粒体D、由肉碱协助进入线粒体进一步氧化正确答案:C8、采用温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌,而对物体本身基本无害的措施叫()A、化疗B、消毒C、防腐D、灭菌正确答案:B9、氯仿在植物DNA提取过程中的作用,表述正确的是( )。
A、氯仿使蛋白质变性B、氯仿降低产生气泡C、氯仿除去多糖D、氯仿提取DNA正确答案:A10、细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌()A、接种针、手、高压锅B、高压锅、手、接种针C、接种针、手、培养基D、培养基、手、接种针正确答案:D11、DNA拓扑异构酶的作用是A、将DNA双螺旋解链B、使DNA解链旋转时不致打结C、稳定解开的双螺旋D、将复制中不连续的两段链连接起来正确答案:B12、配制1000mL的固体培养基需加琼脂为()A、2~7gB、50gC、10gD、15~20g正确答案:D13、仅适用于澄清液体和气体的灭菌方法是()A、化学药品灭菌法B、湿热灭菌法C、干热灭菌法D、过滤除菌法正确答案:D14、尿素的合成过程称为A、嘌呤核苷酸循环B、柠檬酸循环C、鸟氨酸循环D、核蛋白体循环正确答案:C15、干热法常用于()灭菌。
生物技术测试题(附参考答案)一、单选题(共40题,每题1分,共40分)1、不能用干燥方法除去的水分是( )A、结合水分B、非结合水分C、自由水分D、平衡水分正确答案:D2、用牛肉膏作培养基能为微生物提供()A、C 源B、N 源C、生长因素D、A,B,C都提供正确答案:D3、细菌的芽胞是()A、细菌生长发育的一个阶段B、一种运动器官C、一种细菌接合的通道D、一种繁殖方式正确答案:A4、实验室常用的培养放线菌的培养基是()A、麦芽汁培养基B、马铃薯培养基C、牛肉膏蛋白胨培养基D、高氏一号培养基正确答案:D5、血液NPN增高,其中最主要的物质是A、肌酸B、尿酸C、胆红素D、尿素正确答案:D6、5-羟色胺是由哪种氨基酸转变生成A、脯氨酸B、酪氨酸C、组氨酸D、色氨酸正确答案:D7、测定某一蛋白质样品的氮含量为2.0g,该样品中约含蛋白质A、11gB、13gC、14gD、12.5g正确答案:D8、下列哪种胆汁酸是次级胆汁酸A、牛磺胆酸B、鹅脱氧胆酸C、石胆酸D、甘氨胆酸正确答案:C9、细菌的基本形态是()A、杆状B、球状C、螺旋状D、以上都是正确答案:D10、关于酮体的叙述正确的是A、是脂酸在肝中大量分解产生的异常中间产物,可造成酮症酸中毒B、各组织细胞均可利用乙酰CoA合成酮体,但以肝为主C、酮体只能在肝内生成,肝外利用D、酮体氧化的关键酶是乙酰乙酸转硫酶正确答案:C11、细胞质内生成乳酸的代谢途径是A、脂肪酸合成B、脂肪酸β氧化C、糖酵解D、磷酸戊糖途径正确答案:C12、cDNA是指A、在体外经逆转录合成的与RNA互补的DNAB、在体外经逆转录合成的与DNA互补的DNAC、在体外经转录合成的与DNA互补的RNAD、在体内经逆转录合成的与RNA互补的DNA正确答案:A13、实验室中含糖培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是( )A、121℃/50minB、115℃/10minC、140℃/30minD、115℃/30min正确答案:D14、以下哪种方法保藏菌种最好()A、斜面低温保藏B、砂土管保藏法C、冷冻真空干燥法D、石蜡油封法正确答案:C15、革兰氏染色结果中,革兰氏阳性菌应为()A、黄色B、紫色C、无色D、红色正确答案:B16、过滤和培养的耦合是把一定浓度发酵液通过( )进行过滤,使培养液中的培养基成分和溶解的胞外产物随滤液排出,而菌体则循环回反应器继续进行发酵。
生物实验大赛试题及答案一、选择题(每题2分,共10分)1. 细胞分裂过程中,染色体数量加倍的时期是:A. 有丝分裂前期B. 有丝分裂中期C. 有丝分裂后期D. 有丝分裂末期答案:C2. 以下哪种物质不是细胞膜的主要成分?A. 磷脂B. 蛋白质C. 糖类D. 核酸答案:D3. 光合作用中,光能转化为化学能的场所是:A. 叶绿体B. 线粒体C. 细胞核D. 细胞质答案:A4. 以下哪种激素是由胰腺分泌的?A. 胰岛素B. 甲状腺激素C. 肾上腺素D. 性激素答案:A5. 细胞呼吸过程中,释放能量最多的阶段是:A. 糖酵解B. 柠檬酸循环C. 电子传递链D. 无氧酵解答案:C二、填空题(每空1分,共10分)1. 细胞膜的主要功能是________和________。
答案:保护细胞内部结构,控制物质进出2. 植物细胞特有的细胞器是__________。
答案:叶绿体3. DNA复制过程中,需要的酶是__________。
答案:DNA聚合酶4. 人体免疫系统中,负责特异性免疫的是__________细胞。
答案:淋巴5. 植物细胞壁的主要成分是__________。
答案:纤维素三、简答题(每题5分,共20分)1. 描述细胞周期的各个阶段及其特点。
答案:细胞周期包括间期和有丝分裂期。
间期又分为G1期、S期和G2期。
G1期细胞生长,准备DNA复制;S期DNA复制;G2期细胞继续生长,准备有丝分裂。
有丝分裂期包括前期、中期、后期和末期,细胞核和染色体的变化是主要特征。
2. 简述光合作用的过程。
答案:光合作用是植物、藻类和某些细菌利用光能将二氧化碳和水转化为葡萄糖和氧气的过程。
光反应阶段在叶绿体的类囊体膜上进行,光能被叶绿素吸收,产生ATP和NADPH。
暗反应阶段在叶绿体的基质中进行,利用ATP和NADPH将二氧化碳转化为葡萄糖。
3. 描述人体免疫系统的三道防线。
答案:第一道防线是皮肤和粘膜,它们可以阻挡病原体侵入;第二道防线包括体液中的杀菌物质和吞噬细胞,它们可以消灭病原体;第三道防线是特异性免疫,由免疫器官和免疫细胞组成,可以识别并攻击特定的病原体。
生物实验考试题及答案一、选择题(每题2分,共10分)1. 细胞膜的主要功能是什么?A. 储存遗传信息B. 保护细胞内部结构C. 调节细胞内外物质交换D. 进行光合作用答案:C2. 以下哪种物质不是植物细胞壁的主要成分?A. 纤维素B. 木质素C. 蛋白质D. 淀粉答案:D3. 人体中负责运输氧气的蛋白质是?A. 血红蛋白B. 肌红蛋白C. 血清蛋白D. 免疫球蛋白答案:A4. 以下哪个选项不是细胞周期的阶段?A. G1期B. S期C. G2期D. G0期答案:D5. 光合作用中,光能转化为化学能的场所是?A. 线粒体B. 叶绿体C. 内质网D. 高尔基体答案:B二、填空题(每空1分,共10分)1. 细胞核内的遗传物质主要储存在_______中。
答案:染色体2. 植物细胞与动物细胞的主要区别在于植物细胞具有_______。
答案:细胞壁3. 细胞呼吸过程中,葡萄糖被分解成_______和_______。
答案:二氧化碳、水4. 真核细胞与原核细胞的主要区别在于真核细胞具有_______。
答案:细胞核5. DNA复制过程中,新合成的DNA链与模板链之间的关系是_______。
答案:互补三、简答题(每题10分,共20分)1. 描述一下细胞分裂的过程。
答案:细胞分裂包括有丝分裂和无丝分裂两种类型。
有丝分裂是真核细胞的细胞分裂方式,分为前期、中期、后期和末期四个阶段。
在前期,染色体凝聚并排列在细胞赤道面上;中期时,染色体清晰可见,排列整齐;后期时,染色体被拉向两极;末期时,细胞质分裂,形成两个新的细胞。
无丝分裂则是原核细胞的细胞分裂方式,过程较为简单,不涉及染色体的凝聚和排列。
2. 什么是基因突变?基因突变对生物体有何影响?答案:基因突变是指DNA分子中的碱基序列发生改变的现象。
这种改变可能是单个碱基的替换、插入或缺失。
基因突变对生物体的影响取决于突变发生的位置和性质。
如果突变发生在非编码区或编码区的非关键位置,可能对生物体没有明显影响。
生物科学实验试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 细胞的基本结构包括哪些?A. 细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核B. 细胞壁、细胞质、细胞核C. 细胞膜、细胞质、细胞核D. 细胞质、细胞核、线粒体2. 下列哪项不是细胞器?A. 核糖体B. 内质网C. 细胞膜D. 高尔基体3. 光合作用主要发生在植物细胞的哪个部位?A. 细胞质B. 线粒体C. 叶绿体D. 内质网4. 细胞分裂过程中,染色体的数目会如何变化?A. 增加一倍B. 保持不变C. 减少一半D. 先增加一倍,再恢复原状5. 基因是遗传信息的载体,它位于:A. 细胞核B. 细胞质C. 线粒体D. 细胞膜二、填空题(每空2分,共20分)6. 细胞膜的主要功能是________和________。
7. 细胞呼吸过程中,葡萄糖被分解成__________和__________。
8. 真核细胞与原核细胞的主要区别在于真核细胞具有_________。
9. 植物细胞的细胞壁主要由_________组成。
10. 基因突变是指基因序列发生_________,从而导致性状的改变。
三、简答题(每题10分,共30分)11. 请简述细胞周期的四个阶段及其主要特点。
12. 描述一下光合作用的基本过程。
13. 解释什么是克隆技术,并简述其在生物科学中的应用。
四、实验操作题(每题15分,共30分)14. 实验目的:观察植物细胞的有丝分裂。
实验材料:洋葱根尖、显微镜、载玻片、盖玻片等。
实验步骤:a. 取洋葱根尖,放入装有固定液的容器中,固定细胞形态。
b. 将固定好的根尖放入装有解离液的容器中,使细胞分离。
c. 用镊子取出根尖,放在载玻片上,轻轻压平。
d. 用盖玻片覆盖,然后进行显微镜观察。
请根据实验步骤,描述观察到的细胞分裂过程。
15. 实验目的:验证光合作用需要光。
实验材料:水草、水、光、暗箱、氧气检测试剂等。
实验步骤:a. 将水草放入装有水的容器中,一半置于光照下,一半置于暗箱中。
生物实验试题库及答案一、选择题1. 细胞膜的主要功能是什么?A. 储存遗传信息B. 保护细胞内部结构C. 控制物质进出细胞D. 合成蛋白质答案:C2. 以下哪个选项是植物细胞特有的结构?A. 叶绿体B. 线粒体C. 核糖体D. 高尔基体答案:A3. DNA复制过程中,哪个酶负责解开双螺旋结构?A. DNA聚合酶B. 限制性内切酶C. 解旋酶D. RNA聚合酶答案:C二、填空题4. 真核细胞的细胞核外有一层称为_______的结构,它在细胞分裂时会消失。
答案:核膜5. 光合作用中,光能被_______吸收并转化为化学能。
答案:叶绿素6. 在遗传学中,一个基因的等位基因是指在同一基因座位上的_______基因。
答案:不同三、判断题7. 所有生物的遗传物质都是DNA。
答案:错误(部分病毒的遗传物质是RNA)8. 细胞分化是不可逆的过程。
答案:正确9. 人类基因组计划的目标是测定人类基因组的全部DNA序列。
答案:正确四、简答题10. 描述细胞周期中,有丝分裂的各个阶段。
答案:有丝分裂包括前期、中期、后期和末期。
前期,染色体凝聚,核膜和核仁消失;中期,染色体排列在赤道面上;后期,染色体被拉向两极;末期,细胞质分裂,形成两个新的细胞。
11. 解释什么是基因突变,并举例说明。
答案:基因突变是指基因序列发生改变,导致基因编码的蛋白质结构或功能发生变化。
例如,镰状细胞贫血症是由于血红蛋白基因发生突变,导致血红蛋白分子结构异常,红细胞变形为镰刀状。
12. 阐述孟德尔遗传定律中的分离定律。
答案:分离定律指出,在有性生殖过程中,每个个体的每个基因座位上有两个等位基因,其中一个来自父本,另一个来自母本。
在形成配子时,这两个等位基因会分离,每个配子只获得一个等位基因。
这一定律解释了杂合子在自交或与纯合子杂交时,后代会出现不同表型的现象。
生物生物技术复习题集及答案一、选择题(每题4分,共40分)1. 下列不属于转基因技术常见的基因互换变异方式的是:A. 融合基因B. 插入基因C. 删除基因D. 替换基因答案:C2. 下列关于基因工程的说法,错误的是:A. 基因工程是指人为改变生物体的遗传性状。
B. 基因工程的核心技术是DNA重组技术。
C. 基因工程主要应用于生物农业、生物医药和生物能源领域。
D. 基因工程只能用于改变植物的遗传性状,对动物无效。
答案:D3. 下列哪种酶在基因工程中常用于制备DNA片段:A. DNA聚合酶B. 核酸酶D. 限制酶答案:D4. 下列哪种技术不属于PCR实验中的步骤:A. 双链DNA的变性B. 引物的连接C. DNA扩增D. 温度循环答案:B5. 下列哪种技术不属于基因克隆中的步骤:A. DNA片段的提取B. DNA片段的连接C. DNA片段的扩增D. DNA片段的检测答案:C6. 转基因作物具有下列哪种优点:A. 抗病虫害C. 增加产量D. 所有选项都是答案:D7. 下列哪种技术可以用于定量检测基因表达水平:A. 聚合酶链式反应B. 南方杂交C. 北方杂交D. 蛋白质电泳答案:A8. 下列哪种技术被广泛应用于疾病基因诊断:A. 生物传感技术B. 蛋白质组学C. 基因芯片技术D. 基因编辑技术答案:C9. 下列哪种应用属于生物工程中的传统应用:A. 多肽药物的研发B. 基因编辑C. 基因组测序D. 酶工程答案:D10. 下列关于CRISPR-Cas9技术的说法,错误的是:A. CRISPR-Cas9是一种基因编辑技术。
B. CRISPR-Cas9可以用于治疗遗传性疾病。
C. CRISPR-Cas9技术存在一定的误剪切率。
D. CRISPR-Cas9可以直接编辑人类遗传物质。
答案:D二、简答题(共50分)11. 请简要介绍转基因技术的原理和应用。
答案:转基因技术是指通过人为手段将外源基因导入到目标生物体中,并使其表达或产生相应的功能产物。
2023高考生物生物实验技术复习题集附答案一、选择题1. DNA是由以下哪种分子组成的?A. 葡萄糖B. 脂肪酸C. 氨基酸D. 核苷酸答案:D2. 下列哪个实验步骤不属于DNA提取实验中的操作?A. 细胞破碎B. 酶解蛋白质C. 离心沉淀D. 温育孵化答案:D3. 酶是一类具有生物催化作用的蛋白质,其最适作用温度为:A. 0℃B. 25℃C. 37℃D. 100℃答案:C4. 下列哪项操作是进行细菌培养的前提条件?A. 消毒培养皿B. 无菌操作台C. 干燥环境D. 磁力搅拌器答案:B5. 丙酮对蛋白质的沉淀作用基于其溶液的性质,这种性质是:A. 极性B. 酸性C. 疏水性D. 氧化性答案:C二、填空题1. DNA双螺旋结构是由两条互补的链构成,其中腺嘌呤与____________配对。
答案:胸腺嘧啶2. 细胞分裂周期中,DNA的复制过程发生在_________期。
答案:S期3. 酶的催化作用主要通过调节____________的速度来实现。
答案:化学反应4. 在细胞培养的过程中,细胞的快速增殖需要提供合适的_________、温度和气体条件。
答案:营养物质5. 细菌的定植需以固体培养基上形成菌落,这一过程称为____________。
答案:菌落形成三、名词解释1. 物种多样性答案:物种多样性指生物学上指生物系统内物种的多样性的程度,包括物种的丰富度和相对丰富度。
2. 基因突变答案:基因突变是指生物体遗传物质中的基因发生的永久性变化,可通过点突变、插入突变等形式出现。
3. 酶促反应答案:酶促反应是在有酶存在下,底物转化为产物的生化反应。
酶作为催化剂能够降低活化能,加速化学反应的进行。
四、综合题1. 实验室的设施管理是生物实验技术中的重要环节,请你列举3个常见的实验室设施和其使用方法。
答案:a. 离心机:用于离心沉淀、分离液体中的悬浮物质。
使用方法:将待处理的液体样品放入离心管,将离心管放入离心机,设定好速度和时间后开始离心。
生物实验考试试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 细胞分裂过程中,染色质凝缩成染色体发生在哪个阶段?A. 间期B. 前期C. 中期D. 后期答案:B2. 下列哪一项不是细胞膜的主要功能?A. 物质转运B. 细胞间通讯C. 细胞内能量转换D. 细胞形态维持答案:C3. 光合作用中,光能被转化为化学能的场所是:A. 叶绿体B. 线粒体C. 细胞核D. 细胞质答案:A4. 以下哪个选项不是DNA复制的特征?A. 半保留复制B. 需要引物C. 双向复制D. 随机复制答案:D5. 细胞凋亡与细胞坏死的主要区别在于:A. 细胞形态变化B. 是否由基因控制C. 是否有炎症反应D. 细胞内DNA含量答案:B6. 在孟德尔的遗传实验中,决定豌豆花色的基因位于:A. 细胞核B. 线粒体C. 叶绿体D. 核糖体答案:A7. 下列哪一项不是酶的催化特点?A. 高效性B. 专一性C. 需要高温D. 可逆性答案:C8. 以下哪种激素不属于动物激素?A. 胰岛素B. 生长激素C. 甲状腺素D. 赤霉素答案:D9. 以下哪种生物不属于原核生物?A. 细菌B. 蓝藻C. 酵母菌D. 放线菌答案:C10. 植物细胞特有的细胞器是:A. 叶绿体B. 线粒体C. 高尔基体D. 内质网答案:A二、填空题(每空1分,共20分)1. 细胞周期包括____和____两个阶段。
答案:间期;有丝分裂期2. 真核细胞的DNA主要分布在____中。
答案:细胞核3. 光合作用中,光反应和暗反应分别发生在____和____。
答案:类囊体膜;叶绿体基质4. 细胞凋亡是由____控制的程序性细胞死亡过程。
答案:基因5. 孟德尔的遗传定律包括____和____。
答案:分离定律;自由组合定律6. 酶的化学本质主要是____和____。
答案:蛋白质;RNA7. 动物激素和植物激素的主要区别在于动物激素主要是____,而植物激素主要是____。
答案:蛋白质或多肽;小分子有机化合物8. 原核生物和真核生物的主要区别在于原核生物没有____。
生物实验试题会考及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 细胞膜的主要功能是什么?A. 储存遗传物质B. 保护细胞内部结构C. 进行光合作用D. 合成蛋白质答案:B2. 以下哪个选项不是细胞器?A. 线粒体B. 内质网C. 高尔基体D. 细胞壁答案:D3. 植物细胞与动物细胞的主要区别是什么?A. 植物细胞有叶绿体B. 动物细胞有中心体C. 植物细胞有细胞壁D. 动物细胞有液泡答案:C4. DNA复制发生在哪个阶段?A. 有丝分裂前期B. 有丝分裂间期C. 有丝分裂末期D. 减数分裂前期答案:B5. 以下哪种激素不是由内分泌腺分泌的?A. 胰岛素B. 甲状腺素C. 肾上腺素D. 消化酶答案:D6. 光合作用的主要场所是哪里?A. 线粒体B. 叶绿体C. 细胞核D. 高尔基体答案:B7. 以下哪种生物不属于真核生物?A. 酵母菌B. 细菌C. 藻类D. 原生动物答案:B8. 细胞呼吸的主要场所是哪里?A. 细胞质B. 线粒体C. 细胞核D. 内质网答案:B9. 哪种生物过程不涉及DNA复制?A. 有丝分裂B. 减数分裂C. 细胞分化D. 细胞凋亡答案:D10. 以下哪个选项不是细胞周期的阶段?A. G1期B. S期C. G2期D. 减数分裂期答案:D二、填空题(每空1分,共20分)1. 细胞膜的主要成分包括__________和__________。
答案:磷脂、蛋白质2. 细胞核的主要功能是__________和__________。
答案:储存遗传信息、控制细胞代谢3. 植物细胞的细胞壁主要由__________组成。
答案:纤维素4. DNA的双螺旋结构是由__________和__________两条链组成的。
答案:脱氧核糖核苷酸5. 有丝分裂过程中,染色体数量在__________期加倍。
答案:有丝分裂前期6. 光合作用的产物是__________和__________。
答案:葡萄糖、氧气7. 线粒体是细胞的__________,负责细胞的能量供应。
生物技术复习题(含参考答案)一、单选题(共40题,每题1分,共40分)1、原核细胞中特有的 C 源贮藏颗粒是()A、异染粒B、肝糖粒C、淀粉粒D、聚-β-羟基丁酸正确答案:D2、某DNA的T m值较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致A、G+AB、C+GC、A+TD、C+T正确答案:B3、下列关于酶特性的叙述错误的是A、催化效率高B、都有辅因子参与催化反应C、作用条件温和D、专一性强正确答案:B4、将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是()A、没必要放入未接种的培养基B、为了下次接种时再使用C、对比分析培养基是否被杂菌污染D、对比观察培养基有没有被微生物利用正确答案:C5、变性蛋白质的主要特点是( )A、共价键被破坏B、生物学活性丧失C、溶解度增加D、分子量降低E、不易被蛋白酶水解正确答案:B6、细胞色素b、c 1、c均含有的辅基为A、铁卟啉B、血红素C、血红素AD、Fe 3+正确答案:A7、放线菌一般要培养()天A、1B、5~7C、3D、2正确答案:B8、构成丝状真菌营养体的基本单位是()A、菌丝体B、菌丝C、有隔菌丝D、无隔菌丝正确答案:B9、适合所有微生物的特殊特征是()。
A、细胞有明显的核B、只有用显微镜才能观察到C、它们是多细胞的D、可进行光合作用正确答案:B10、关于酶与底物的关系叙述正确的是A、如果酶的浓度不变,则底物浓度改变不影响反应速度B、当底物浓度很高使酶被饱和时,改变酶的浓度将不再改变反应速度C、当底物浓度远高于酶的浓度时,反应速度随酶浓度的增加而增加D、如果底物的浓度不变,则酶浓度改变不影响反应速度正确答案:C11、基因组代表一个细胞或生物体的( )A、部分遗传信息B、可表达基因C、整套遗传信息D、可转录基因正确答案:C12、细菌的繁殖首先开始于 : ( )A、膜的分裂B、壁的分裂C、DNA的复制D、细胞核的复制正确答案:C13、微生物在生命活动过程中需要的主要营养物质是()A、碳源、氮源、生长因子、无机盐和水B、碳源、氮源、生长因子C、碳源、氮源、水D、碳源、氮源、无机盐、能源和水正确答案:A14、过滤除菌法仅适用于()的除菌。
生物实验试题库及答案生物实验是生物学教育的重要组成部分,旨在培养学生的实验技能和科学探究能力。
以下是一套生物实验试题库及答案,供参考使用。
一、选择题1. 下列哪项不是细胞的基本结构?A. 细胞膜B. 细胞质C. 细胞核D. 叶绿体(植物细胞)答案:D(叶绿体是植物细胞特有的结构,不是所有细胞都具有)2. 光合作用主要发生在植物细胞的哪个部位?A. 线粒体B. 细胞核C. 叶绿体D. 细胞壁答案:C(光合作用是在叶绿体中进行的)3. 细胞分裂过程中,染色体的数目变化是:A. 减半B. 不变C. 增加D. 先减半后恢复答案:D(细胞分裂过程中,染色体数目在分裂前期减半,分裂末期恢复)二、填空题1. 细胞膜的主要功能是_________和_________。
答案:控制物质进出;保护细胞内部结构2. 植物细胞与动物细胞相比,特有的结构是_________。
答案:细胞壁、大液泡、叶绿体3. DNA分子的双螺旋结构是由_________和_________共同发现的。
答案:沃森、克里克三、简答题1. 描述细胞呼吸的基本过程。
答案:细胞呼吸是细胞内有机物在氧气存在的条件下,通过一系列酶促反应,最终将有机物分解成二氧化碳和水,并释放能量的过程。
主要包括糖酵解、三羧酸循环和电子传递链三个阶段。
2. 解释什么是基因突变,并举例说明。
答案:基因突变是指DNA分子中的碱基序列发生改变,导致基因结构和功能的变化。
例如,镰状细胞贫血症就是由血红蛋白基因的突变引起的。
四、实验题1. 实验目的:观察和识别植物细胞的基本结构。
实验材料:洋葱鳞片叶、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子等。
实验步骤:a. 取一小块洋葱鳞片叶,用镊子撕下内表皮。
b. 将撕下的内表皮放在载玻片上,用盖玻片覆盖。
c. 用显微镜观察并记录细胞的基本结构。
2. 实验目的:探究不同光照条件下植物光合作用速率的变化。
实验材料:水草、透明容器、光源、计时器等。
实验步骤:a. 将水草放入透明容器中,并加入一定量的水。
生物技术复习题含参考答案一、单选题(共50题,每题1分,共50分)1、组成病毒粒子核心的化学物质是( )A、蛋白质B、糖类C、核酸D、脂肪正确答案:C2、下列属于单细胞原核微生物的是()A、酵母菌B、青霉C、根霉菌D、链霉菌正确答案:D3、CO影响氧化磷酸化的机制为A、加速ATP水解为ADP和PiB、解偶联作用C、使物质氧化所释放的能量大部分以热能形式消耗D、影响电子在细胞色素aa 3与O 2之间传递正确答案:D4、谷氨酸发酵,菌体生长最适温度( )。
A、32~34℃B、34~37℃C、28~30℃D、30~32℃正确答案:D5、占微生物细胞总重量70%-90%以上的细胞组分是()A、氮素物质B、碳素物质C、水D、无机盐正确答案:C6、下列叙述中错误的是A、蛋白质多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序在决定它的二级结构、三级结构乃至四级结构中起重要作用B、主肽链的折叠单位—肽平面之间相关一个Cα碳原子C、蛋白质变性过程中空间结构和一级结构被破坏,因而丧失了原有生物活性D、维持蛋白质三维结构的次级键有氢键、盐键、二硫键、疏水力和范德华力正确答案:C7、真核生物结构基因,能够编码蛋白质的序列是( )A、外显子B、增强子C、终止子D、启动子正确答案:A8、培养细菌的常用温度是()A、20℃B、28-30℃C、35-37℃D、室温正确答案:C9、生产实践中厌氧菌的固态培养法采用()A、发酵罐培养B、浅盘培养C、堆积培养D、曲法培养正确答案:C10、用于除菌的薄膜滤菌器,其滤膜孔径应为()A、0.45μmB、0.72μmC、0.22μmD、0.12μm正确答案:C11、全酶是指A、酶的辅助因子以外的部分B、一种酶-抑制剂复合物C、一种需要辅助因子的酶,具有了酶蛋白、辅助因子各种成分D、酶的无活性前体正确答案:C12、在紫外分光光度法中,OD260/280=2.0代表是( )。
A、纯RNAB、纯DNAC、不纯DNAD、不纯RNA正确答案:A13、下列孢子中属于真菌有性孢子的是()A、子囊孢子B、孢囊孢子C、游动孢子D、分生孢子正确答案:A14、具有足细胞的是()A、曲霉B、酵母C、毛霉D、根霉正确答案:A15、单链DNA:5'-CGGTA-3',能与下列哪一种RNA杂交A、5'-UACCG-3'B、5'-GCCAU-3'C、5'-GCCTA-3'D、5'-AUCCG-3'正确答案:A16、某物质体内不能合成,必须由食物供给,在体内可转变为前列腺素、血栓烷及白三烯等,该物质最有可能是A、维生素AB、亮氨酸C、软脂酸D、亚油酸正确答案:D17、下列微生物中能通过细菌滤器,并营专性寄生的是 ( )。
生物技术大实验一、核酸凝胶电泳的基本原理是什么?(1)核酸分子糖—磷酸骨架中的磷酸集团,呈负离子化状态;核酸分子在一定电场强度的电场中,他们会向正极移动。
(2)电泳中使用无反应活性的稳定支持介质,电泳迁移率与与分子摩擦系数成反比。
物质在电场作用下的迁移速度叫作电泳的速率,它与电场强度成正比,与该分子所携带的净电荷数成正比,而与分子的磨擦系数成反比(分子大小、极性、介质的粘度系数等)。
因此,可在同一凝胶中、一定电场强度下分离出不同分子量大小或相同分子量而构型有差异的核酸分子。
二、CTAB法提取植物总DNA中CTAB的中文名称及其作用原理是什么?CTAB的全称是十六烷基三甲基溴化铵基因组DNA的提取包括组织粉碎,细胞膜破坏,蛋白质去除和DNA的沉淀.一般取植物的幼嫩组织,其DNA含量丰富,组织易于破碎。
组织破碎方法有很多种,可以研磨,捣碎机捣碎,超低温冷冻使组织细胞间结冰,稍加研磨即可以粉碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用。
DNA提取缓冲液主要是由对DNA有稳定作用的盐如Tris,EDTA和破坏细胞的试剂SDS或者CTAB组成。
蛋白质的去除是用苯酚和氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。
上清液中加入异丙醇或无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于TE溶液中,之后用RNase处理去除少量的RNA,即得植物总DNA溶液。
三、SDS-PAGE电泳的基本原理是什么?SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)是蛋白分析中最经常使用的一种方法,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基磺酸钠),它是将蛋白样品同离子型去垢剂十二烷基硫酸钠(SDS)以及巯基乙醇一起加热,SDS能断裂分子内和分子间氢键,使蛋白变性,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物,这种复合物由于结合大量的SDS,使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块,从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异,由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的,因此在进行电泳时,蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。
当分子量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW为分子量,X为迁移率,k、b 均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。
用SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白质的分子量和纯度。
在4%浓缩胶和12%分离胶上,以标准分子量蛋白(Protein Marker,High 29-205 kDa)为对照,电泳分离。
经考马斯亮蓝-R250染色和脱色液脱色后,比较样品与标准分子量蛋白的迁移率,确定蛋白质的分子量及酶制剂纯度。
四、RNA提取过程中的注意事项有哪些?RNA是一类极易降解的分子,要得到完整的RNA,必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。
高浓度强变性剂异硫氰酸胍,可溶解蛋白质,破坏细胞结构,使核蛋白与核酸分离,失活RNA酶,所以RNA从细胞中释放出来时不被降解。
细胞裂解后,除了RNA,还有DNA、蛋白质和细胞碎片,通过酚、氯仿等有机溶剂处理得到纯化、均一的总RNA。
注意事项1. 从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。
例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。
糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml 是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2. 匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。
RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3. 分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
预期产量:1mg组织或1×106细胞提取RNA分别为:肝和脾6-10μg ,肾3-4μg ,骨骼肌和脑组织1-1.5μg ,胎盘1-4μg ,上皮细胞8-15μg ,成纤维细胞5-7μg 。
常见问题分析:得率低:A.样品裂解或匀浆处理不彻底B. RNA沉淀未完全溶解A260/A280<1.65 :A.检测吸光度时,RNA样品没有溶于水,而溶于了TE中。
低离子浓度和低pH值条件下A280值偏高B.样品匀浆时加的试剂量太少C. 匀浆样品时未在室温放置5分钟D. 吸取水相时混入了有机相E .RNA沉淀未完全溶解。
RNA降解:A.组织取出后没有马上处理或冷冻B. 待提取RNA的样品没有保存于-60至-70℃,而保存在了-5至-20℃C. 细胞在用胰酶处理时过度D. 溶液或离心管未经RNase去除处理E. 电泳时使用的甲醛pH值低于了3.5DNA污染: A. 样品匀浆时加的试剂量太少B. 样品中含有有机溶剂(如乙醇,DMSO等),强缓冲液或碱性溶液蛋白聚糖和多糖污染: 沉淀RNA的过程中作以下改进可去除这些污染,步骤7中,每使用1ml TRIzol在水相中加0.25ml异丙醇和0.25ml高盐溶液(0.8M柠檬酸钠和1.2M NaCl)混合离心,按之前操作进行。
这种方法可使蛋白聚糖和多糖留在溶液中,高效沉淀出纯RNA。
从含有大量多糖的植物中提取RNA时应在匀浆后离心,并加上以上操作步骤。
4. 在研磨过程中,利用液氮时刻使组织保持冰冻状态。
5. RNA酶是一类生物活性非常稳定的酶类,除了细胞内源RNA酶外,外界环境中均存在RNA酶,所以操作时应戴手套,并注意时刻换新手套。
五、DEPC的中文名称汲取作用原理焦碳酸二乙酯(DEPC):是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。
它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性。
六、感受态细胞的定义及其制备流程。
经过适当处理后容易接受外来DNA进入的细胞。
如大肠杆菌经CaCl2处理,就成为容易受质粒DNA转化的细胞。
(1)取一支无菌的摇菌试管,在超净工作台中加入2ml LB(不含抗菌素!)培养基。
(2)从超低温冰柜中取出DH5 菌种,放置在冰上。
在超净工作台中用烧红的接种环插入冻结的菌中,然后接入含2ml LB 培养基的试管中,37℃摇床培养过夜。
(3)取0.5ml 上述菌液转接到含有50mL LB 培养基的三角烧瓶中,37℃下250r/min 摇床培养2—3h,测定OD590为0.375(<0.4 0.6,细胞数<108/mL,此为关键参数!)。
以下操作除离心外,都在超净工作台中进行。
(4)将菌液分装到1.5mL 预冷无菌的聚丙烯离心管中,于冰上放置10min,然后于4℃,5000rpm 离心10min。
(5)将离心管倒置以倒尽上清液,加入1ml 冰冷的0.1 mol/L CaCl2 溶液,立即在快速混匀器上混匀,插入冰中放置30min。
(6)4℃,5000rpm 离心10min,弃上清液后,用1mL 冰冷的0.1 mol/L CaCl2溶液重悬,插入冰中放置30min。
(7)4℃,5000rpm 离心10min,弃上清液后,用200¦ L 冰冷的0.1 mol/L CaCl2溶液重,超净工作台中按每管100 L 分装到1.5mL 离心管中。
可以直接用作转化实验,或立即放入-80℃超低温冰柜中保藏(可存放数月)。
七、Taq酶蛋白提取过程中基于哪些原理?在PCR循环的高温条件下仍能保持较高的活性八、PCR技术的原理是什么?有那些作用?PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),是与发生在细胞内的DNA复制过程相似的技术,其结果都是以原来的DNA为模板产生新的互补DNA片段。
PCR是在试管中进行的DNA复制反应,基本原理与细胞内DNA复制相似,但反应体系相对较简单。
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应做准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在Taq酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。
九、PCR反应的组分有哪些?主要起到什么作用?十、碱式裂解法提取质粒DNA的实验流程是什么?溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的组成及作用原理?实验步骤1.氨苄青霉素过滤灭菌:首先灭菌滤头、滤膜、注射器、超纯水、1.5ml EP管;再按比例溶解氨苄青霉素;过滤灭菌。
2.挑选一个单菌落,接种到5 ml离心管含适当抗生素(氨苄青霉素100 mg/L)的3ml LB培养液中,37℃振荡培养12-16小时。
3.取1.2 ml菌液于1.5ml EP管中,12,000rpm离心1分钟,收集菌体,重复一次。
4.加入预冷的溶液I 100μl,涡旋振荡充分悬浮,分散,混匀,冰浴5分钟 (重悬细胞)。
5.加入200μl溶液Ⅱ(现配),快速轻柔颠倒几次,直至溶液澄清,保持冰浴 (碱变性染色体DNA、蛋白质)。
6.在5分钟内,加入溶液III 150μl,轻柔颠倒5-10次,冰浴10分钟(利用pH差异,复性质粒DNA)7.12,000rpm离心10分钟,沉淀染色体DNA,及不溶的变性蛋白,取上清。
8.上清液加入2倍体积无水乙醇,混匀后,室温放置10-15分钟。
9.在12,000rpm离心10分钟得到质粒DNA沉淀。
10.去上清,加入1ml 75%乙醇,洗涤沉淀。
11.12,000rpm 离心10分钟。
12.去上清,吸出痕量剩余乙醇,风干。
13.加入30-50μl ddH2O溶解质粒DNA,-20℃保存。
十一、设计在大肠杆菌中表达Taq聚合酶的实验流程。
实验目的了解通过诱导重组DNA表达目的基因的技术实验原理克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。
这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。
大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点:易于生长和控制;用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵;有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。