顺铂对小鼠耳蜗Calpain表达的影响及机制

抗癌药顺铂对小鼠的耳、肾和肝毒性及其机制的研究廖英俊;汤浩;金亚平【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2004(20)1【摘要】目的以小鼠为实验对象建立抗癌药顺铂毒性研究的实验动物模型,并探讨其毒性作用产生的可能机制,为进一步对顺铂毒性作用的防治研究提供科学参考资料.方法选择♂昆明种小鼠,经腹腔连续注射顺铂5 d,观察不同剂量顺铂对小鼠的听力、肾脏和肝脏的毒性作用及肝和肾组织抗氧化系统各指标的变化.结果顺铂可引起小鼠体重明显下降、全频率的听力阈值升高,肝和肾的脏器系数、血清尿素氮(BUN)含量和丙氨酸氨基转换酶(ALT)活性等指标的异常,并呈剂量依赖关系.此外,顺铂还可引起肝和肾抗氧化及氧化损伤指标的异常.结论 3.0～4.0 mg*kg-1 b.w 的顺铂可引起小鼠出现明显的听力、肾和肝组织的损伤.氧化损伤是抗癌药顺铂产生其毒性作用的可能机制之一,但对于不同的脏器和在不同的给药时期,其发挥的作用不同.【总页数】4页(P82-85)【作者】廖英俊;汤浩;金亚平【作者单位】中国医科大学基础医学院生理教研室,沈阳,110001;中国医科大学基础医学院生理教研室,沈阳,110001;中国医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室,沈阳,110001【正文语种】中文【中图分类】R-332;R322.47;R322.61;R322.92;R979.19【相关文献】1.抗癌药顺铂耳毒性机制及防治方法的研究进展 [J], 廖英俊;汤浩2.维生素E对顺铂所致的小鼠肾毒性的影响及其机制研究 [J], 张林;刘伏友;彭佑铭;李大伟;曾妮;武蓉;刘沧桑3.富氢盐水拮抗顺铂对小鼠耳毒性的作用研究 [J], 卢燕;林信衡;蔡友铮;徐浩;王宏波;吴小波;林昶;钟秀荣;孙丽清4.熊果酸对顺铂所致小鼠耳毒性的防护作用研究 [J], 孙美玲;沈天骄;邸阳;田原;王爱梅5.艾叶挥发油致小鼠急性肝毒性作用及其机制研究 [J], 刘红杰;李天昊;詹莎;陈亮;陈灵修;唐树杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

第30卷第5期2009年10月西安交通大学学报(医学版)Jour nal of Xi an Jiaotong University (Medical Scie nces )Vol .30No .5Oct .2009顺铂对小鼠耳蜗毒性及caspase -3表达的影响孙伟霞1,王爱梅1,包翠芬2,惠丽杰1,常志杰1(1.辽宁医学院生理学教研室;2.辽宁医学院科学实验中心,辽宁锦州　121001)摘要:目的　建立小鼠顺铂耳毒性模型,研究不同剂量顺铂对小鼠耳蜗毒性及caspa se -3表达的影响。

方法　69只昆明小鼠随机分成对照组、顺铂2.5mg /(kg ·d )组、顺铂3.5mg /(kg ·d )组和顺铂4.5mg /(kg ·d )组,腹腔连续注射5d 。

通过听脑干反应(audito ry brainstem respo nse ,A BR )测试观察用药前后小鼠听力的变化;应用免疫组织化学Envision 法检测半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase -3)在耳蜗中的表达。

结果　不同剂量顺铂组小鼠体重和听力明显下降,与对照组比较均有显著性差异(P <0.05,P <0.01);并且随着顺铂给药剂量的增加,小鼠耳蜗中caspase -3表达亦明显增强。

结论　应用顺铂可建立小鼠耳毒性模型;caspase -3参与了顺铂致小鼠耳蜗细胞损伤的过程,提示内耳细胞凋亡可能是顺铂的耳毒性机制之一。

关键词:顺铂;耳蜗;caspase -3;免疫组织化学中图分类号:R764.43 文献标志码:A 文章编号:1671-8259(2009)05-0616-04Effect of cisplatin on ototoxicity and expression ofcaspase -3in mouse cochleaSUN Wei -xia 1,WANG Ai -mei 1,BAO Cui -fen 2,H UI Li -jie 1,CH ANG Zhi -jie1(1.Department of Physiology ;2.Scientific Labo rato rial Cente r ,Liaoning M edical Co lleg e ,Jinzhou 121001,China )ABSTRAC T :Objective To establi sh a m ice m odel of cispla tin -induce d ototoxicity and to investigate the ef fectof cisplatin on the expression of caspase -3in mouse cochle a .Methods Totally 69Kunm ing mice were r andomly divide d into contr ol gr oup ,cisplatin 2.5mg /(kg ·d )group ,c i splatin 3.5mg /(kg ·d )gr oup and cisplatin 4.5mg /(kg ·d )group .Mice wer e injected intr aper itoneally f or 5days .Auditor y br ainstem r esponse (ABR )was m easure d to obser ve the change of he aring .Envi sion me thod of immunohistochemistr y was applie d to de tect the expr ession of caspase -3in cochle a .Results　The we igh t and hear ing of mice in dif fer ent dose cisplatin groups were decline dsignif icantly as com pa red with those in contr ol gr oup (P <0.05,P <0.01),and the expression of caspase -3was gr eater r emar kably with m or e cisplatin injected .Conclusion A mouse model of cisplatin -induced ototoxicity could be establi shed .C aspase -3is involved in cisplatin -induced cochlear injur y .I t suggests that apoptosis m ay be one of the mechanisms of cispla tin ototoxicity .KEY WORDS :cisplatin ;cochle a ;caspase -3;immunohistochem istr y 收稿日期:2008-11-05 修回日期:2009-01-06通讯作者:王爱梅,教授,硕士研究生导师.E -mail :aim eiw ang @yah oo .com .cn作者简介:孙伟霞(1981-),女(汉族),在读硕士研究生.研究方向:听觉生理与病理.E -m ail :soffeesw x @ 顺铂(cisplatin ,CDDP )作为一种抗癌药,被广泛用于治疗各种恶性肿瘤。

顺铂诱导耳蜗血管纹周细胞凋亡及槲皮素保护作用的机制研究顺铂诱导耳蜗血管纹周细胞凋亡及槲皮素保护作用的机制研究引言：顺铂是一种广泛应用于临床的抗肿瘤药物，其通过与DNA结合，抑制肿瘤细胞的分裂和增殖。

然而，顺铂也对健康细胞产生毒性作用，其中包括耳蜗中的血管纹周细胞。

近年来研究发现，槲皮素作为一种天然的抗氧化剂和抗炎物质，能够对顺铂产生的耳蜗损伤具有保护作用。

本研究旨在探究顺铂诱导耳蜗血管纹周细胞凋亡的机制，并研究槲皮素在保护耳蜗细胞方面的作用机制。

方法：1.细胞培养：使用小鼠耳蜗血管纹周细胞株，采用细胞培养技术进行培养。

2.顺铂处理：将耳蜗血管纹周细胞分为对照组和顺铂处理组，顺铂处理组细胞暴露在一定浓度的顺铂中，对照组细胞不受任何处理。

3.细胞凋亡检测：采用细胞凋亡检测试剂盒，通过流式细胞仪分析细胞的凋亡率。

4.槲皮素处理：将顺铂处理组的细胞分为槲皮素处理组和非处理组，槲皮素处理组的细胞暴露在一定浓度的槲皮素中，非处理组细胞不受任何处理。

5.细胞活性检测：采用MTT法测定细胞的活性。

结果：1.顺铂诱导耳蜗血管纹周细胞凋亡：与对照组相比，顺铂处理组细胞的凋亡率显著升高。

2.槲皮素对顺铂诱导的细胞凋亡具有保护作用：与顺铂处理组相比，槲皮素处理组细胞的凋亡率显著降低。

3.槲皮素能够提高耳蜗血管纹周细胞的活性：与非处理组相比，槲皮素处理组细胞的活性显著增强。

讨论：本研究结果表明，顺铂诱导了耳蜗血管纹周细胞的凋亡，并且槲皮素具有保护细胞免受顺铂损伤的作用。

这可能是由于槲皮素的抗氧化和抗炎性活性，能够减少顺铂产生的氧化应激和炎症反应。

此外，槲皮素还能够提升细胞的活力，对细胞的修复和再生起到积极的促进作用。

因此，槲皮素可能是一种潜在的耳蜗保护剂。

结论：本研究证实了顺铂对耳蜗血管纹周细胞的凋亡作用，并发现槲皮素对顺铂产生的损伤具有保护作用。

这为寻找更多可能的耳蜗保护剂提供了理论依据，并为临床预防顺铂耳毒性提供了借鉴。

顺铂通过Cav1.2诱导耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的研究顺铂通过Cav1.2诱导耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的研究引言：顺铂（Cisplatin）是一种广泛应用于临床癌症治疗的铂类化合物。

尽管其抗肿瘤效果显著，但顺铂同时也对机体产生诸多不良作用，特别是对耳蜗中的螺旋神经节神经元产生损伤。

然而，关于顺铂对螺旋神经节神经元凋亡的机制研究仍然不完善。

本文旨在通过研究顺铂通过Cav1.2促进耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的作用机制，为进一步预防和治疗顺铂耳毒性提供实验依据。

方法：本研究选用体外培养的耳蜗螺旋神经节神经元作为研究对象，通过顺铂处理不同浓度（0.1μM，1μM，10μM）的细胞，合适时间后用Annexin V/PI染色技术，流式细胞术观察细胞凋亡情况。

同时，通过Western blot和免疫荧光染色技术检测细胞凋亡相关蛋白（caspase-3、Bcl-2和Bax）的表达水平。

此外，利用siRNA靶向下调Cav1.2的表达，观察其对顺铂诱导的神经元凋亡的影响。

结果：实验结果显示，与对照组相比，顺铂处理后的细胞明显出现凋亡，表现为Annexin V阳性/PI阳性细胞的显著增加。

此外，顺铂处理后caspase-3的表达水平增加，而Bcl-2/Bax比值减少，表明细胞凋亡通路被激活。

进一步的免疫荧光染色结果也证实了这种观察结果。

值得注意的是，在Cav1.2表达受抑制的耳蜗螺旋神经节神经元中，顺铂诱导的细胞凋亡明显减少，相关凋亡蛋白的表达也有所下降。

讨论：本研究结果表明，顺铂通过Cav1.2通道参与了耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的调控。

Cav1.2通道的激活可能导致钙离子内流增加，从而引起线粒体损伤和细胞凋亡。

我们的研究发现，抑制Cav1.2通道的表达可以减轻顺铂诱导的细胞凋亡，这为未来通过调控Cav1.2通道来减轻顺铂耳毒性提供了新的治疗策略。

结论：顺铂通过Cav1.2通道参与了耳蜗螺旋神经节神经元凋亡的机制。

抑制Cav1.2通道的表达可以减轻顺铂诱导的细胞凋亡。

顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶表达的影响张立伟;刘芳芳;于利;王爱梅【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》【年(卷),期】2016(024)002【摘要】Objective To investigate the effects of cisplatin on the expressionof calpain in mouse cochlear hair cells in vitro ,and to explore the mechanism of cisplatin-induced apoptosis in mouse cochlear haircells .Meth‐ods A total of 600 cochlear basilar membranes isolated from Kunming mice at postnatal day 3 were cultured for 24 hours ,then randomly divided into control group and 3 cisplatin groups (4 μg/ml ,8μg/ml and 16 μg/ml) .Each group contained 150 basilar membranes .Four groups were continually cultured for another 24 hours .Hoechst 33258 staining was used to detect the apoptosis of cochlear haircell .Immunofluorescent staining and Western blot were carried out forde tecting the expressions of calpain 1 (μ-calpain) and calpain 2 (m-calpain) in mouse cochlear hair cells .Results The percent of apoptotic hair cells in the three cisplatin groups (15 .63% ± 0 .20% ,38 .40% ± 2 .64% and 64 .24% ± 0 .05% ,respectively) was g reater than that of in the control group (5 .55% ± 0 .12% ) , showing a clear dose-response relationship(P<0 .01) .Furthermore ,the expressions of μ -calpain and m -cal‐pain in different cisplatin groups were increased ,and m -calpain expression was great remarkably with increased concentration of cisplatin(P<0 .01) .Conclusion Our results suggest that cisplatin can induce the apoptosis in mouse cochlear hair cells by regulating calpain pathway .This may play a role in the cisplatin-induced ototoxicity .%目的：观察顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶（calpain ）表达的影响，探讨顺铂致耳蜗毛细胞凋亡的机制。

红景天苷改善顺铂引起的小鼠耳蜗毛细胞和螺旋神经节神经元损伤的机制李兆龙;徐义策;李泽文;周洁【期刊名称】《听力学及言语疾病杂志》【年(卷),期】2024(32)1【摘要】目的探究红景天苷(SAL)改善顺铂(CIS)引起的耳蜗毛细胞(CHC)和螺旋神经节神经元(SGN)损伤的作用及其与环磷腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP效应元件结合蛋白(CREB)通路的关系。

方法分离新生C57BL/6小鼠的耳蜗基底膜,分为对照组(C组)、CIS组、SAL组、SAL+SQ22536(cAMP抑制剂)组和SAL+H-89(PKA抑制剂)组,每组20条。

C组仅加入无血清BME培养液;CIS组在培养液中加入15μmol/L CIS;SAL组在CIS组基础上加入5μmol/L SAL;SAL+SQ22536组在CIS组基础上加入5μmol/L SAL和5μmol/L SQ22536;SAL+H-89组在CIS组基础上加入5μmol/L SAL和30μmol/L H-89。

各组在培养箱中孵育48 h后,免疫荧光染色观察各组CHC和SGN损伤;试剂盒检测各组耳蜗基底膜中ROS和cAMP含量;Western blot检测各组PKA、p-CREB、CREB、Bcl-2、BDNF、NF-M蛋白水平。

结果CIS组CHC排列混乱、体积肿大,SGN细胞核破碎、神经突缺失,SAL可减轻CHC和SGNs损伤。

与C组相比,CIS组CHC、SGN数量较少(P<0.05),ROS、cAMP含量、PKA、BDNF、NF-M、Bcl-2蛋白及p-CREB/CREB水平较高(P<0.05);与CIS组相比,SAL组CHC、SGN数量较多(P<0.05),ROS含量较低(P<0.05),cAMP含量、PKA、BDNF、NF-M、Bcl-2蛋白及p-CREB/CREB水平较高(P<0.05)。

SQ22536和H-89均可逆转SAL对CHC和SGN的保护作用。

顺铂体内注射对子代豚鼠耳蜗毛细胞的影响
郝帅; 闫艾慧; 姜学钧
【期刊名称】《《大连医科大学学报》》
【年(卷),期】2011(033)005
【摘要】[目的]了解孕晚期顺铂暴露是否会诱导子代豚鼠耳蜗毛细胞损伤。

[方法]将孕晚期豚鼠12只随机分为两组,在孕50 d至56 d,顺铂组经腹膜腔注射顺铂1.5 mg/kg.d,对照组注射生理盐水1.5 mg/kg.d。

出生后14d,应用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)和Caspase-3免疫组化染色检测毛细胞凋亡情况。

[结果]孕晚期顺铂暴露的子代豚鼠耳蜗毛细胞有凋亡发生及Caspase-3蛋白表达。

[结论]孕期顺铂暴露可诱导子代豚鼠耳蜗毛细胞Caspase-3表达及凋亡发生。

【总页数】4页(P434-436,440)
【作者】郝帅; 闫艾慧; 姜学钧
【作者单位】中国医科大学第一临床医院耳鼻咽喉科辽宁沈阳110001
【正文语种】中文
【中图分类】R764.35
【相关文献】
1.川芎嗪通过调控fas/fasL的表达对顺铂诱导豚鼠耳蜗毛细胞的抗凋亡机制研究[J], 冷辉;孙海波;马贤德;刘宏伟;李媛
2.刺五加注射液对谷氨酸所致离体豚鼠耳蜗外毛细胞内钙浓度的影响 [J], 贾琳琳;杨笑天;张涤;张雪岩;张玚
3.顺铂体内注射对子代豚鼠耳蜗毛细胞的影响 [J], 郝帅; 闫艾慧; 姜学钧
4.丹参注射液对豚鼠耳蜗毛细胞的影响 [J], 马天宝;李同德;史永芝;张雪梅;康颂建
5.川芎嗪对顺铂诱导豚鼠耳蜗毛细胞模型中JNK/c-JUN信号转导通路调控及Caspase-3表达影响 [J], 冷辉;孙海波;马贤德;刘宏伟;李媛
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顺铂耳毒性机制及抗氧化药物局部应用的预防作用於得红;汪雪玲;陈聿名;吴皓【摘要】Cisplatin is a widely used and effective drug for the treatment of various solid tumors.Unfortunately, its severe side-effects have also impacted patients,especially its often bilateral,progressive,irreversible and dose-depen-dent ototoxicity.Current evidence indicates that cisplatin triggers the production of reactive oxygen species(ROS)in tar-get tissues in the inner ear.A large number of agents that protect against cisplatin-induced ototoxicity have been success-fully tested in cell culture and animal models.However,many of them interfere with the therapeutic effects of cisplatin, and therefore are not suitable for systemic administration in clinical practice. Until now, none of them has been ap-proved by the FDA.Consequently,local administration strategies,namely intratympanic administration,have been de-veloped to achieve otoprotection,without reducing the antitumoral effects of cisplatin.This review summarizes the clini-cal and experimental studies of ciaplatin ototoxicity,including details of the molecular mechanisms of action,to gain in-sight for future drug development in this field.%顺铂是临床普遍应用的广谱高效抗肿瘤药物,与多种抗肿瘤药有协同效应、无交叉耐药等特点,为当前联合化疗中最常用的药物之一.然而,顺铂的毒副作用严重困扰着癌症患者,其耳毒性尤为突出.顺铂耳毒性多为双侧、进展性、不可逆性、剂量依赖性听力损伤,往往导致成人、尤其是儿童患者出现语言交流障碍.大量研究证实,顺铂通过诱发活性氧(ROS)升高导致听觉毛细胞发生caspase-3激活的细胞凋亡.哺乳动物听觉毛细胞无自发再生能力,一旦损伤即为永久性.因此,顺铂耳毒性预防的药物研发或治疗策略开发至关重要.目前,越来越多的药物被证实在细胞和动物水平上具有顺铂耳毒性保护作用.然而,绝大部分药物经系统性用药后拮抗顺铂抗肿瘤疗效,无法实现临床上的有效应用.至今仍无有效顺铂耳毒性保护药物被批准上市.耳蜗局部鼓室内用药可部分缓解耳毒性保护候选药物对顺铂抗肿瘤疗效的干扰,但因顺铂需周期性用药,多次鼓室内给予耳毒性保护药物易引起局部创伤和感染.本文总结了具有代表性抗氧化药物预防顺铂耳毒性的基础和临床研究进展,为顺铂耳毒性新药研发提供理论依据.【期刊名称】《中华耳科学杂志》【年(卷),期】2018(016)002【总页数】5页(P145-149)【关键词】顺铂;耳毒性;药物;预防【作者】於得红;汪雪玲;陈聿名;吴皓【作者单位】上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉头颈外科,上海交通大学医学院耳科学研究所,上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室;上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉头颈外科,上海交通大学医学院耳科学研究所,上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室;上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉头颈外科,上海交通大学医学院耳科学研究所,上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室;上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉头颈外科,上海交通大学医学院耳科学研究所,上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R764顺铂作为一种广谱抗癌药，对泌尿生殖系统肿瘤、恶性淋巴瘤、头颈部鳞癌、软组织肉瘤等均具有一定的治疗效果。

顺铂作用机制
顺铂（Cisplatin）是一种常用的白金类抗肿瘤药物，其作用机制主要涉及以下几个方面：
DNA交联：顺铂通过与DNA中的两个相邻的鸟嘌呤核苷酸（通常是两个腺嘌呤）形成共价键的方式，引起DNA的交联。

这种交联会阻碍DNA双螺旋的解旋，干扰DNA的正常复制和转录过程。

DNA链损伤：顺铂引起DNA中的跨链接不仅阻碍了DNA的复制，还导致DNA链的结构发生变化，形成断裂。

这样的DNA链断裂会激活DNA修复机制，但有时也可能导致细胞无法有效修复，最终导致细胞死亡。

细胞周期依赖性：顺铂对细胞的毒性在细胞周期的S和G2期表现得更为明显。

这是因为在细胞的这两个阶段，DNA复制和修复活动较为频繁，因此，顺铂对DNA的影响更为显著。

激活细胞凋亡：顺铂的治疗还可通过激活细胞凋亡（程序性细胞死亡）途径诱导肿瘤细胞死亡。

这通常涉及一系列的信号传导途径，包括p53通路等。

总的来说，顺铂通过干扰DNA的结构和功能，导致DNA损伤和交联，进而激活DNA修复和凋亡机制，最终导致癌细胞死亡。

然而，由于顺铂的细胞毒性，其使用也可能伴随一些不良反应，因此在治疗中需要仔细监控患者的状况。

1。

脑神经生长素防护顺铂致耳蜗螺旋神经节损伤的研究徐鸥;杨逸;路虹;薛丽华;郑春芳【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2004(25)6【摘要】目的探讨脑神经生长素(cerebral nerve growth factor,CNG)作为防护药物拮抗顺铂致耳蜗螺旋神经节毒性作用.方法选24只豚鼠,随机分为3组,每组8只.顺铂组连续5 d腹腔注射顺铂2 mg/(kg*d);CNG组在给予顺铂前2 d开始大腿内侧肌肉注射CNG 2 mg/(kg*d);正常对照组连续5 d腹腔注射生理盐水2mg/(kg*d);用药前后测试听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)阈值,处死动物制作耳蜗标本,应用透射电镜观察并用免疫组化法测定诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)的表达.结果顺铂组动物ABR听阈值显著升高,透射电镜下见螺旋神经节细胞的细胞器损伤严重,iNOS阳性染色,呈棕黄色.CNG组动物ABR阈值略有升高,但较顺铂组为低(P< 0.01).螺旋神经节细胞的细胞器损伤较轻,iNOS显色浅,呈浅黄色.结论 CNG可减少耳蜗iNOS表达,保护耳蜗螺旋神经节,从而保护听力.【总页数】3页(P345-347)【作者】徐鸥;杨逸;路虹;薛丽华;郑春芳【作者单位】河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科,河北,石家庄,050000【正文语种】中文【中图分类】R764.35【相关文献】1.耳蜗局部应用NR2B受体阻滞剂对水杨酸钠致豚鼠螺旋神经节细胞损伤的拮抗作用 [J], 刘渊;尹时华;黄训健;周琦;舒竞铖;韦顺莲2.顺铂致豚鼠螺旋神经节细胞凋亡及Caspase-3活化的研究 [J], 张民;刘兆华;姬长友3.15D-PGJ2对小鼠耳蜗基底膜螺旋神经节氧化损伤的防护作用 [J], 罗颜;曹忠胜;朱政文;袁辉4.庆大霉素对小鼠耳蜗螺旋神经节细胞损伤机制初步研究 [J], 顾晰;林昶;张榕5.黄芩苷对庆大霉素致耳蜗螺旋神经节细胞损伤作用的影响 [J], 戴德因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

顺铂耳毒性豚鼠耳蜗Connexin26的表达发表时间：2013-11-11T15:47:31.700Z 来源：《医药前沿》2013年第29期供稿作者：张翠翠[导读] 缝隙连接转移细胞间的信号，调节细胞内外液体、离子的分布，对机体的代谢平衡和生长发育起重要作用。

张翠翠（山东中医药高等专科学校山东烟台 264100）【摘要】目的检测顺铂耳毒性豚鼠耳蜗中Connexin26表达，探讨顺铂耳毒性与Connexin26关系。

方法免疫组化法检测对照组和实验组Connexin26表达。

结果Connexin26阳性率对照组99.25% ,实验组 38.12%。

结论Connexin26表达减少与顺铂耳毒性相关。

【关键词】顺铂耳毒性 Connexin26【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）29-0206-02 顺铂用于肿瘤化疗，主要副作用是耳毒性。

本研究通过免疫组化法检测顺铂耳毒性豚鼠耳蜗Connexin26，探讨顺铂耳毒性与Connexin26关系。

1 实验方法豚鼠30只，随机分成两组，实验组2mg/kg/d顺铂，对照组等量的生理盐水，连续腹腔注射6d。

1.1石蜡切片制备断头后取出耳蜗，刺破圆窗膜，从蜗顶注入40g/L多聚甲醛，PBS中固定2h，40g/LEDTA脱钙14天，梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，沿蜗轴切片。

1.2免疫组化法切片经PBS冲洗，滴加3%H2O2孵育15min。

水洗后滴加5%BSA孵育20min，甩去多余液体，滴加一抗，37℃孵育1 h，PBS冲洗。

加二抗孵育20min后PBS冲洗，DAB显色，复染、脱水、透明、树胶固定。

PBS代替一抗作为阴性对照。

每张切片在高倍镜(×400)下数出视野中细胞数及阳性细胞数，计算阳性细胞的百分率。

1.3统计学处理 SPSS 11.5软件，采用t分析 p<0.05有统计学意义。

2 结果Connexin26阳性染色主要位于细胞质（如图1，2）。

顺铂对耳蜗螺旋神经节细胞毒性作用及机制路虹;杨逸;徐鸥;张迪;韩海霞;于丽萍【期刊名称】《中国耳鼻咽喉头颈外科》【年(卷),期】2004(11)6【摘要】目的通过透射电镜及免疫组化法观察顺铂对耳蜗螺旋神经节细胞的毒性作用。

方法16只豚鼠随机均分为2组。

顺铂组连续5天腹腔注射顺铂2mg/kg/d;对照组连续5天腹腔注射生理盐水2mg/kg/d;用药前后测试听力,处死动物后制作耳蜗标本,透射电镜观察及免疫组化法测定诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)的表达。

结果ABR:顺铂组听力下降明显,阈值显著升高(P<0.01)。

透射电镜观察:顺铂组螺旋神经节细胞的细胞器损伤严重,核变形,线粒体肿胀,大量空泡样变,粗面内质网增多,有髓神经纤维的髓鞘增厚;对照组螺旋神经节细胞核无变形,核仁基本居中,线粒体结构正常。

免疫组织化学显示:顺铂组螺旋神经节有iNOS阳性反应显色,灰度值降低,iNOS活性升高,与对照组比较,有显著性差异(P<0.01)。

结论顺铂可致耳蜗螺旋神经节细胞损伤并呈iNOS阳性表达,导致听力下降。

【总页数】3页(P355-357)【关键词】顺铂;螺旋神经节细胞;耳蜗;对照组;NOS;毒性作用;听力下降;免疫组化法;升高;腹腔注射【作者】路虹;杨逸;徐鸥;张迪;韩海霞;于丽萍【作者单位】河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科【正文语种】中文【中图分类】R764;R734【相关文献】1.顺铂对小鼠耳蜗螺旋神经节细胞凋亡及caspase-3表达的影响 [J], 孙伟霞;王爱梅;包翠芬;惠丽杰;常志杰2.顺铂诱导大鼠体外培养耳蜗螺旋神经节细胞凋亡中BNIP3的核转位表达 [J], 王苹;汤勇;陈霞;杜波3.顺铂作用下沙鼠耳蜗螺旋神经节神经元和Corti器细胞的凋亡 [J], 许辉杰;黄魏宁4.水杨酸钠对顺铂导致的螺旋神经节细胞毒性的保护作用 [J], 董蕾;王士礼;蔡昌枰;李彪;张一帆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

顺铂体内注射对子代豚鼠耳蜗毛细胞的影响郝帅; 闫艾慧; 姜学钧【期刊名称】《《大连医科大学学报》》【年(卷),期】2011(033)005【总页数】4页(P434-436,440)【关键词】毛细胞; 凋亡; 顺铂【作者】郝帅; 闫艾慧; 姜学钧【作者单位】中国医科大学第一临床医院耳鼻咽喉科辽宁沈阳110001【正文语种】中文【中图分类】R764.35顺铂以其广谱高效性在抗肿瘤治疗中被普遍应用，但其肾毒性和耳毒性的副作用使得目前临床应用被严格控制[1]，特别是顺铂可造成听功能永久性损伤[2]。

本研究组前期实验发现孕晚期顺铂暴露致子代豚鼠毛细胞损伤及听力下降，但孕期顺铂暴露致子代出生后毛细胞损伤的研究未见报道。

因此，本实验通过检测顺铂能否诱导毛细胞凋亡，为顺铂耳毒性研究及其防护提供理论依据。

1 材料和方法1.1 主要试剂与仪器顺铂注射剂为齐鲁制药产品，兔抗Caspase-3多克隆抗体为美国Cell Signalling Techenology公司产品，TUNEL试剂盒为美国BD Biosciences公司产品；冰冻切片机位德国SLEE公司产品，光学显微镜为日本Olympus光学工业产品。

1.2 实验动物健康白色红目受孕豚鼠12只(体重600～700 g)，中国医科大学动物部提供。

双侧耳廓反射灵敏，在安静的环境下饲养。

实验动物生产许可证号：SCXK(辽)2003-0009；使用许可证号：SYXK(辽)2003-0013。

1.3 动物分组与处理随机分成两组，每组6只，从孕50 d至56 d连续腹膜内注射：(1)对照组：生理盐水1.5 mg/kg·d；(2)顺铂组：顺铂1.5 mg/kg·d。

子代出生后14 d，分离仔鼠右侧耳蜗，行TUNEL染色和Caspase-3免疫组化染色。

1.4 耳蜗冰冻切片制备快速打开胸腔，左心室穿刺，接灌流液，右心耳剪开。

先以4℃生理盐水经心脏灌流，待右心耳处流出液体为无色时，改以4℃新鲜配置的4%多聚甲醛磷酸缓冲液(0.1 mol/L，pH=7.4)约300 mL灌流固定。

顺铂对耳蜗毒性的实验研究李凤玲;范淑敏;张静【期刊名称】《神经药理学报》【年(卷),期】2002(019)006【摘要】目的:探讨顺铂对耳蜗毒性的影响.方法:将豚鼠12只随机分成顺铂组、对照组,每组6只.顺铂组连续5d腹腔注射顺铂,2ml·kg-1·d-1;对照组连续5d腹腔注射生理盐水,2ml·kg-1·d-1.两组豚鼠均于实验结束后测耳蜗血流、耳蜗电图,断头,取耳蜗,用不同方法染色固定,铺片及电镜观察.结果:顺铂组动物在给药后体重减轻,耳廓反射减退,耳蜗血流下降,阈值提高,毛细胞大片缺失,两组比较,差异有显著性(P ＜0.01).顺铂组血管纹较对照组血管纹明显扩张,红细胞聚集.扫描电镜下观察,顺铂组的绝大部分内、外毛细胞的纤毛散乱,倒伏,甚至缺失;透射电镜下观察,顺铂组血管纹线粒体水肿变性.结论:顺铂对耳蜗有损坏作用.【总页数】4页(P12-15)【作者】李凤玲;范淑敏;张静【作者单位】张家口医学院一附院耳鼻喉科,075000;张家口医学院一附院耳鼻喉科,075000;张家口医学院病理生理教研室,075000【正文语种】中文【中图分类】R979.1;Q95-33【相关文献】1.参芎注射液对顺铂耳蜗毒性防护作用的实验研究 [J], 张博;陈颖;黄喜;程胜男;李海燕;2.灯盏花素拮抗顺铂耳蜗毒性作用的实验研究 [J], 何强;郝芙蓉;任秀敏;张燕3.参芎注射液对顺铂耳蜗毒性防护作用的实验研究 [J], 张博;陈颖;黄喜;程胜男;李海燕4.黄芪对顺铂耳蜗毒性防护作用的实验研究 [J], 沈雄;王挥戈;何婉珑;林丽丽;毛晓梅;林庆海5.川芎嗪对顺铂所致耳蜗毒性保护作用的实验研究 [J], 孔敏;刘儒林因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

顺铂致豚鼠耳毒性作用中细胞凋亡及caspase-3表达的研究张量;孙大宇;杨志航;江敏【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2011(8)4【摘要】Objective: To explore the ototoxicity mechanism of cisplatin by investigating the expression of apoptosis and caspase-3 in ototoxicity induced by cisplatin in guinea pig. Methods: 20 guinea pigs were divided into control group (10 guinea pigs) and experiment group (10 guinea pigs).10 guinea pigs were treated with cisplatin [2.0 mg/(kg·d), ip, all 6 days) in the experiment group, other 10 guinea pigs were replaced with normal saline in the control group. Guinea pigs were treated with ABR testing in hearing changes before and after the treatment; expression of apoptosis were detected by TUNEL assay and immunohistochemistry method was employed to detect the caspase-3 expression in cochlear cells. Results: The apoptosis of cochlea cells increased and the espression of caspase— 3 also enhanced significantly in the experiment group. Conclusion: The signal transducion mechanisms mediated by caspase-3 may be involved in CDDP-induced apoptosis of cochlear cells, leading to the occurrence of ototoxicity.%目的:通过顺铂(CDDP)致豚鼠耳毒性作用中细胞凋亡及caspase-3表达的观察,探讨CDDP致耳毒性的作用机制.方法:实验组和对照组豚鼠各10只,前者以CDDP 2.0 mg/(kg·d)连续腹腔注射6 d,后者以等量生理盐水替代.通过ABR 测试用药前后豚鼠听力的变化,应用TUNEL法检测耳蜗凋亡细胞,免疫组化法检测caspase-3在耳蜗中的表达.结果:实验组耳蜗凋亡细胞明显增多,caspase-3的表达亦明显增强.结论:caspase-3介导的信号传导机制,可能参与了CDDP所致的耳蜗细胞凋亡过程,导致耳毒性的发生.【总页数】3页(P24-26)【作者】张量;孙大宇;杨志航;江敏【作者单位】沈阳医学院基础医学院生理教研室,辽宁沈阳,110034;沈阳医学院基础医学院生理教研室,辽宁沈阳,110034;沈阳医学院基础医学院生理教研室,辽宁沈阳,110034;沈阳医学院基础医学院生理教研室,辽宁沈阳,110034【正文语种】中文【中图分类】R764.43【相关文献】1.参芎注射液对顺铂致小鼠耳毒性及耳蜗Caspase-3表达的影响 [J], 张博;陈颖;黄喜;程胜男;李海燕;王娜2.DPOAE监测一次性大剂量顺铂致豚鼠耳毒性的实验研究 [J], 费文彬;丁海峰;刘维荣;马晶;朱永红;左金山3.顺铂致豚鼠螺旋神经节细胞凋亡及Caspase-3活化的研究 [J], 张民;刘兆华;姬长友4.丹参在防治顺铂耳毒性中对豚鼠耳蜗血管纹的作用 [J], 路虹;李凤玲;徐鸥;杨逸;刘砚星5.连翘酯苷对顺铂致豚鼠耳毒性的影响及其机制探讨 [J], 安宁;侯学东;时胜武因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。