sigma标准品

一. 标准品的购买：

1一级标准品可向USP、中国药品生物制品检定所等法定认可机构购买，应附有分析证书或相关证明。接收时应核对批号、有效期、校正因子、数量、说明书等相关信息。并将其记录在标准品接收记录中。此类标准品购进后不需要进行确认。

2活性成分测定用的二级标准品是从已经认可的可靠供户提供的原料中选择，以一级标准品标定后作为工作用标准品，详见第五章。此时，标准品效期为原料药COA证书中标明的效期。

3根据“内标”的定义，它在色谱分析中被用于辅助鉴别和定量待测组分。内标应具有证书或证明其纯度的文件，保证其纯度及可用性。可从中国药品生物检定所购买，或按“第五章1.选取”要求从原料中选择。

4按各标准品标签或说明书规定的有效期使用。若标签或者说明书上没有指明有效期（失效期），未开瓶的标准品，自接收之日起，给定两年的有效期。同时每月到相关网站上查询，如USP，EP标准品目录单等，如果超过未开瓶有效期或网站上已过期，则报废处理；开瓶后仅供一次在同一系列的连续分析中使用，标准品管理员应每月在相关网站上查询一次，并打印查询信息。

相关网站Relevant websites:

USP对照品reference standard：/

中检所对照品NIFDC reference standard：/CL0001/

EDQM对照品reference standard：http://www.edqm.eu/en/ph-eur-reference-standards-627.html

《中国药典》2010第二增补版关于对照品的使用和贮存的规定：国家药品标准物质单元包装一般供一次使用；标准物质溶液应临用前配制。否则，使用者应证明其适用性。

鉴于以上规定：

4.1.1.对于定量用的标准品：本企业内部可以通过做对照品（开瓶后或者对照溶液）贮存期限验证以证明其适用性或者样品集中检验或者对比检验（如使用开瓶后的对照品和新开瓶的对照品对比检测，以证明开瓶后按照原贮存方式贮存的对照品的适用性）。依据验证或对比结论规定各品种的有效期。4.1.2.用于鉴别用的标准品：如红外、紫外可以用未开瓶的和开瓶后的对照品做有效期限验证（开瓶后的不同时间和新开瓶的对照品检测进行图谱比对，如对比紫外最大吸收、吸收波数等，以证明开瓶后对照品的适用性）。 4.1.3.杂质标准品：如有关物质的杂质对照，可以用未开瓶的和开瓶后的对照品做有效期限验证（开瓶后的不同时间和新开瓶的对照品检测进行图谱比对，如对比相对保留时间、分离度、峰谷比等，以证明开瓶后对照品的适用性）。

酶联免疫吸附法和免疫亲和柱-高效液相色谱法在检测饲料中黄曲霉毒素B1含量中的比对研究

作者：***

来源：《中国动物保健》2022年第05期

摘要： 为了探讨酶联免疫吸附法检测饲料中黄曲霉毒素B1含量的可行性，试验采用酶联免疫吸附法（ELISA法）比对免疫亲和柱-高效液相色谱法（IAC-HPLC法），对饲料中黄曲霉毒素B1含量进行了检测，对检测结果的准确度、精密度和样品加标回收率进行了分析。ELISA法线性方程相关系数为0.9952，相对标准偏差（RSD）为1.6%～8.1%，平均加标回收率为105.6%～111.8%。结果表明，ELISA法的准确性、重现性、稳定性好;且ELISA法检测结果与IAC-HPLC法检测结果的相对标准偏差（RSD）为5.4%～19.2%，两种方法的检测结果的偏差可以接受，表明ELISA法能满足检测需求。

关键词：酶联免疫吸附法;免疫亲和柱-高效液相色谱法;饲料;黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素，是黄曲霉菌和寄生曲霉菌分泌的次级代谢产物，主要分为B、G类，其中黄曲霉毒素B1的含量最多，危害性最大，该毒素具有强致癌性、致畸性、致突变性。黄曲霉毒素B1可以侵害畜禽肝脏，导致肝脏变性、坏死等，进而导致畜禽肺脏、肾脏、脾脏、胃、直肠等器官发生病变;导致畜禽的免疫力降低;導致畜禽生长发育迟缓，采食量降低、食物利用率低;母畜不育或产仔少等问题。

黄曲霉毒素B1主要污染粮食作物及其副产品，其中，花生和玉米及其副产品污染最为严重，几乎无法避免，该毒素性质稳定，持续高压灭菌2h仅能降低其25%～33%的毒力，而且只有在282℃的高温下才能被裂解，所以世界各国都严格设定“限量标准”。黄曲霉毒素B1污染饲料主要源于原料污染、储存条件不当饲料霉变污染和加工过程污染。要预防黄曲霉毒素B1毒害畜禽，就要及时准确测定饲料原料及饲料成品中黄曲霉毒素B1含量，因而制定准确实用的检测方案至关重要，进而加强原料的筛选、饲料的品控，更好的保护畜禽健康，发挥畜禽生产性能，将饲料价值充分发挥。

质控品 标准品 校准品

校准品、标准品、质控品三者同为参考物质。参考物质是一种材料或者物质，某一种或多种特性值只够均匀并被良好确定，用于校准测量系统，评价测量程序或为材料赋值。但三者并非用一个概念，他们有各自不同的应用场合。临床上常常有很多错误的应用，例如将不同厂商的校准品应用于检测系统；使用给定值的质控品评价检测系统；使用质控品来校准检测系统等等。本文内容详细介绍了校准品、标准品、质控品的来源及定值方式，得出正确使用三种参考物质的方法。

一、传统的方法的缺点

传统的检验项目，要使得检验结果可靠或者有依据，往往会使用一个已知浓度的标准品随样品一同测定。

例如：血清铜测定

用玻棒混匀，在室温静置10min，3000r/min离心，取上清液2.0ml+缓冲液2.8ml铜试剂0.2ml

室温静置20min后，620nm比色空白调零

计算结果：血清铜= (测定管吸光度 * 标准液铜浓度) /标准管吸光度

传统的标准液用纯水配制，同血清相比，成份非常简单，除了待测物质外只有水了。此时在将样品同标准品相比较时，引入了基质效应。

基质效应：检体中的非测定物质对测定量的影响。

换句通俗的话说也就是，检体中测定物外的其他物质对检测的干扰，使检测结果偏离真值。

此时通过同无基质效应的标准品比较得出的有基质效应的样品检测值，将偏离于真值。

是否能使用标准液取决于检测方法学，干扰极小的决定性方法或者某些已知干扰的参考方法可直接使用标准品。

二、标准品的定值

一般而言，检验工作中使用的标准品属应用标准。将符合质量标准的纯品使用称量法和容量法配制成溶液。用决定性方法反复测定，结果在规定的范围内属合格。测定制的可靠性 空白管(ml) 标准管(ml) 测定管(ml)

血清 — — 1.0

铜标准液 — 1.0 —

去离子水 1.0 — —

2mol/L HCL 0.7 0.7 0.7

标准品的期间核查计划

标准物质的稳定性和准确性在实验室质量控制中起重要作用。

对标准物质的管理工作实施有效的监督管理，是保证监测质量的重要措施。

第一步:建立原始标样的详细列表,包括购买时间,品牌,开瓶日期,浓度,CAS号码,失效日期.

第二步:在有效期内如果标准样品开瓶后每年核查一次,核查方法：新购置的标准物质或新配置的标准工作液与正在使用的比对，用原始标样配制储备液,中间液,走完曲线后,再走旧的标液和新的标液,比较二者之间的差值,偏差不超过5%;如果中间配制过,也需要这样走一次,保证有效期内一年内至少被核查一次.

对于中间液和曲线溶液,已经验证了有效性后,确定储存期,所以这些数据可以作为证据,就不用期间核查了.

期间核查应是有控制计划的质量活动，核查结果应形成书面报告，其结果应经管理评审进行分析评估，提出是否准予继续使用和使用范围的建议，以及管理层审批。标准物质的监督管理