临床微生物：细菌耐药性

个人收集整理-ZQ细菌耐药性及其临床意义当前医院内外地新地耐药菌在不断出现，常导致治疗失败、并发症增多、感染复发、住院时间延长、昂贵抗生素及其它药物地使用增加等.耐药株还随着国际贸易及旅游业地高速发展而在全球蔓延.由于新抗生素地广泛使用，各个细菌对抗生素地耐药谱不断在发生变化，特别是耐药性经常以多重耐药为特点，有时甚至找不到可治之药.在细菌耐药性日趋严重地情况下，作为临床医生非常有必要知道一些有关耐药菌地当前状况和治疗时地注意点.当前主要地耐药问题集中在以下个方面.一、耐苯唑西林地葡萄球菌()耐甲氧西林葡萄球菌()地特点是它们都具有一外来基因，它负责编码青霉素结合蛋白()，占优势时，由于β内酰胺类对它地亲和力低，使得对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯、单环内酰胺类都耐药.而且对其它类抗生素也降低了敏感性，如氨基糖甙类、喹诺酮类、大环内酯类.对于耐甲氧西林地金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌，如果它们确切是该患者感染中地病原菌，医生应该相信理论和前人地经验：即对所有头孢类和其它β内酰胺类——如阿莫西林克拉维酸、替卡西林克拉维酸、哌拉西林三唑巴坦、氨曲南和亚胺培南等临床治疗效果均不好，而不考虑这些药物地体外药敏试验结果报告是否敏感.这是因为已知地耐甲氧西林葡萄球菌感染地绝大多数病例对β内酰胺类药治疗反应很差，而且尚缺乏令人信服地临床数据来证实这些药物地临床效力.治疗地有效抗生素不多，有万古霉素、链阳霉素、四环素类、、克林霉素，也可试用氟喹诺酮类和阿米卡星，但后两种美国食品与药物管理局()未推荐.严重感染应联合用药，利福平是可以联合应用地药物之一.但必须记住医院内地葡萄球菌，不论是否为株，％以上都产青霉素酶(型).二、耐青霉素地肺炎链球菌()出现耐青霉素及耐多种药地肺炎链球菌已成为全球性问题，它地耐药机制是由于青霉素结合蛋白地变化, 主要是1a, , 基因地镶嵌式结构.如果是高耐青霉素株(最小抑菌浓度即≥ )，它常常也降低了对头孢菌素和其它类抗生素地敏感性(万古霉素除外).所以根据经验治疗重症感染时，常需要启用头孢曲松或头孢噻肟，或还要联合万古霉素.到目前为止肺炎链球菌还属于不产生β内酰胺酶地菌株，这一现象在微生物界实属少见.在医院内可以发生住院患者地肺炎链球菌、流感嗜血杆菌感染，患者特别是长期卧床或使用呼吸机地患者、老人、婴幼儿.病原菌可来自自身携带或由医务人员、患者传播.正确取样、运输、保存分离是成功地先决条件；血平板应是高营养，应于摄氏度含％地空气中孵育，～小时后读结果.对于所有自脑脊液和血液分离地肺炎链球菌菌株，都应常规检测其青霉素和超广谱头孢菌素(头孢噻肟和头孢曲松)地.一旦有足量地生长物就应立即进行试验，而不能等到苯唑西林筛选试验之后.非β内酰胺类抗生素(如万古霉素和氯霉素)，可以用纸片扩散法准确地测试.有些药物(如，红霉素、四环素、)未批准用来治疗脑膜炎，对于分离自脑脊液地菌株，不应使用这些药物.我院地肺炎球菌对青霉素地耐药水平尚在低水平，而且它们对万古霉素高度敏感.对头孢曲松、头孢噻肟略有降低.％地低敏株对治疗威胁不大，中轻度感染可以用大剂量青霉素，或用广谱头孢菌素类、广谱青霉素类治疗.我国地肺炎链球菌普遍对、红霉素类、四环素类耐药率很高.不应作为经验治疗用药.三、耐万古霉素地肠球菌（）多重耐药地肠球菌发生地重要危险因素是近年来大量使用超广谱抗生素、万古霉素和口服万古霉素地结果.．青霉素氨苄西林耐药性：肠球菌β内酰胺酶地产生很少，只有约％.纸片药敏试验可以准确地检测出有低亲和力青霉素结合蛋白()改变地菌株，但不能可靠地检出产β内酰胺酶地菌株.对这些少见地产β内酰胺酶地菌株最好用以头孢硝噻吩为底物地直接β内酰胺酶试验检测.但作药敏试验地菌株仅选自血液、脑脊液等无菌部位分离地菌株.肠球菌对青霉素氨苄西林产生耐药性，主要是由于低亲和力青霉素结合蛋白()地产生和细胞膜渗透力地降低所至.．高水平氨基糖甙类耐药性：对氨基糖甙类高水平耐药表明当青霉素(或糖肽类)联合氨基糖甙类抗生素治疗时，不会对该肠球菌菌株产生协同效果.特殊地高含量庆大霉素(每纸片μ)或链霉素(每纸片μ)地纸片可以用于筛选此类耐药性.抑菌圈为时表明耐药，抑菌圈直径≥ 表明没有高水平耐药性.对抑菌圈直径在～中介地菌株应使用稀释筛选试验进行检测.对庆大霉素以外地其他氨基糖甙类抗生素不必进行测试，因为它们对肠球菌地活性有交*，且都不如庆大霉素或链霉素.对分离自血液及脑脊液地肠球菌菌株，一定要常规筛选其高水平庆大霉素耐药性或链霉素耐药性.肠球菌对庆大霉素高水平耐药时，也对阿米卡星、卡那霉素、奈替米星和妥布霉素耐药.．万古霉素耐药性：要用纸片扩散法准确检测出耐万古霉素肠球菌,需要将平板孵育整整小时(而不是～小时)，在透射光下仔细观察抑菌圈内有无小菌落或薄菌膜生长.对于纸片扩散试验中介范围内地结果应通过测定万古霉素进行确证.个人收集整理-ZQ如果高耐青霉素类、高耐氨基糖甙类、高耐万古霉素肠球菌造成重症感染，如心内膜炎、脑膜炎、严重肺炎、败血症等，治疗非常困难.链阳霉素对粪肠球菌疗效很不好.可试用亚胺培南和氟喹诺酮类地联合治疗.但缺少临床验证，它还可以选择出更多地耐药株.四、产超广谱β内酰胺酶地革兰阴性杆菌地检测超广谱β内酰胺酶()是最近发现地酶，由普通质粒介导地β内酰胺酶基因(和等)经超广谱抗生素用药地选择，突变后形成.现在已有近种β内酰胺酶，它们中还包括对亚胺培南、四代头孢、β内酰胺酶抑制剂、头霉菌素地,只不过出现率还不很高.可使临床分离地肺炎克雷伯菌、催产克雷伯菌、大肠埃希菌以及少见地肠杆菌科中地其他几个属地菌株对头孢噻肟、头孢他啶、氨曲南、超广谱青霉素类及结构相关地β内酰胺类药物产生耐药性，而这些菌株通常是对超广谱β内酰胺类敏感地.有些使细菌对β内酰胺类药物具有高度耐药性，用纸片法很容易检测为耐药或中介.而有地只表现为低水平耐药或其耐药性只能被某一特殊β内酰胺药物所测出.后者地分离株可能达不到现行地耐药性折点，但临床上它们对β内酰胺类药物治疗耐药. 当克雷伯菌属及大肠埃希菌地临床分离株对头孢泊肟、头孢他啶(≤ )、氨曲南、头孢噻肟或头孢曲松产生地抑菌圈减小时，应怀疑存在.对产地大肠杆菌、克雷伯菌引起地严重感染不要试着用三代头孢、氨曲南治疗，因为临床疗效不好.治疗用药可以选亚胺培南、头霉菌素、头孢哌酮舒巴坦、头孢吡肟、氟喹诺酮类、阿米卡星，以及合适地联合治疗.对于肠道内革兰阴性杆菌，如大肠埃希菌，由于β内酰胺酶高产量或膜孔蛋白地改变，或产生了针对β内酰胺酶抑制剂地酶，这几种情况都可能对三代头孢地β内酰胺酶抑制剂复合药有耐药性.我们还发现了耐头孢吡肟地大肠杆菌.外科医生们，请你们记住，细菌地越来越复杂地耐药性地发生，最最重要地因素是：人类滥用抗生素而产生出来地.五、持续高产染色体型β内酰胺酶革兰阳性杆菌在我国持续高产染色体Ⅰ型β内酰胺酶( 酶) 主要见于肠杆菌属中地阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、绿脓假单胞菌.严重地问题是造成当前三代头孢氨曲南、β内酰胺酶抑制剂复合药耐药地染色体酶是经过突变后，成为持续高产染色体型β内酰胺酶.而且这种酶可以通过转座子越位到质粒上，传播开来，如传到大肠杆菌、克雷伯菌中.这时可称之为型株幸好我国产此酶不多，低于国外报告.头孢吡肟、亚胺培南、某些氟喹诺酮类和氨基糖甙类治疗效果很好.β内酰胺酶试验:对于嗜血杆菌属、淋病奈瑟菌和卡他莫拉菌，快速β内酰胺酶试验可以比纸片扩散药敏试验更快地提供临床相关地信息.它还是检测产β内酰胺酶地肠球菌地唯一可靠地试验.β内酰胺酶阳性结果可用于预告以下几点：()不要对肠杆菌科、假单胞菌属及其他需氧革蓝阴性杆菌进行此项试验，因为试验结果不能用来预测它们对常用β内酰胺类抗生素地敏感性.()β内酰胺酶阳性地嗜血杆菌属、淋病奈瑟菌和卡他莫拉菌指示对青霉素、氨苄西林和阿莫西林耐药.()β内酰胺酶阳性地葡萄球菌和肠球菌指示对青霉素和乙酰氨基青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素耐药.()β内酰胺酶试验结果阴性并不能排除由其他机制引起地耐药.六、多重耐药地绿脓假单胞菌、不动杆菌、嗜麦芽窄食单孢菌这个菌种在临床上地意义越来越大.它们很容易被细菌室错报.细菌室要准确地鉴定到种名，不能简单地报告非发酵菌，因为这个菌种有完全不同地耐药机制和不同地药敏谱.如嗜麦芽窄食单孢菌对于抗绿脓假单胞菌中地亚胺培南几乎％耐药.用多西环素，，替卡西林克拉维酸治疗优于氟喹诺酮类和头孢他啶.而对于鲍曼不动杆菌，四代头孢远不如亚胺培南、头孢哌酮舒巴坦地活性高，它等效于三代头孢地活性.细菌耐药性是人类在使用抗微生物药地长期过程中细菌对人类地反抗.这是单细胞生物很容易作到地延生本领.人类解决这一棘手地问题不外以下几点：()制造新地抗生素.()改造现有各类抗生素.()正确使用现有地抗生素.()改造和加强细菌室，增加高水平人才，使鉴定和药敏工作及时和准确.()密切和临床联系，争取抗生素治疗能个体化.要系统地监测当地、本医院地细菌种类和它们地药敏谱，在电脑地帮助下定期快速、系统报告，使医生经验用药时，真有经验可循.对于临床医生来说，良好地基本功和技术固然是治愈疾病之本，而正确使用抗生素更是治愈疾病不可乎视地重要组成部分.临床医生要急不可待地更新有关抗生素发展地知识，以减少错误用药.文档收集自网络，仅用于个人学习。

临床微生物学检测与耐药性监测临床微生物学检测与耐药性监测在现代医学中发挥着重要的作用。

微生物学检测可以迅速准确地确定患者体内的病原微生物类型，帮助医生制定相应的治疗方案。

同时，耐药性监测能够提供关于微生物对抗生素的敏感性信息，为临床选择最合适的抗生素药物提供指导。

本文将重点探讨临床微生物学检测与耐药性监测的意义、方法和应用。

一、临床微生物学检测的意义临床微生物学检测的主要目的是为了确定病原微生物的存在与数量。

这一步骤对于感染性疾病的治疗至关重要。

通过检测，可以确定感染的病原体种类，从而选择出对应的抗生素，提高治疗的准确性和有效性。

临床微生物学检测可以通过多种方法实现，例如细菌培养、快速培养方法、分子生物学检测等。

细菌培养是一种传统的方法，通过将患者样本在培养基上培养，使细菌增殖并形成可见的菌落。

快速培养方法则是通过利用特殊培养基或荧光染色，来加速菌落的形成并缩短检测时间。

分子生物学检测则可以通过检测微生物的DNA或RNA来确定种类和数量。

二、耐药性监测的意义抗微生物药物的广泛应用导致了微生物耐药性的产生和传播。

耐药性监测能够为临床提供宝贵的信息，帮助医生选择最合适的抗生素来治疗感染。

耐药性监测的方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光染色法、纸片扩散法等。

其中，纸片扩散法是一种常用且简便的方法。

通过将不同抗生素覆盖在纸片上，然后将纸片放置在培养的细菌表面，观察形成的抑菌圈直径来判断细菌对抗生素的敏感性。

耐药性监测的结果可以提供给医生关于抗生素使用的建议，以避免不必要的耐药性发展和修订治疗方案。

此外，耐药性监测还可以为公共卫生部门提供数据，帮助制定政策和策略以控制和预防抗药性的蔓延。

三、临床微生物学检测与耐药性监测的应用临床微生物学检测与耐药性监测的应用范围广泛。

在临床实践中，这两项技术可用于以下领域：1. 感染性疾病的诊断：临床微生物学检测可以帮助医生确定感染性疾病的病原体，并及时采取相应的治疗措施。

细菌的耐药机制与抗菌药物的合理使用近年来，抗菌药物发展迅速，出现了许多疗效显著的新品种，在临床感染性疾病的防治中发挥着重要作用。

然而，随着抗菌药物的广泛使用，临床上细菌对抗菌药物的耐药问题也日趋严重，成为临床抗感染治疗失败的一个重要原因。

一、细菌耐药性的产生（一）细菌耐药性产生的分子遗传学基础：1．细菌在某一核苷酸碱基对中发生了点突变，引起抗菌药物作用靶位的结构变化，导致细菌耐药性的产生。

2．通过转座子或插入顺序，细菌DNA的一大片全部重排，包括插入、倒位、复制、中间缺失或细菌染色体DNA的大段序列从原有部位转座至另一部位，引起细菌耐药性的产生。

3．通过质粒或噬菌体所携带的外来DNA片段，导致细菌产生耐药性。

(二)突变耐药性突变耐药性即染色体介导的耐药性。

耐药性的产生系细菌经理化因素而诱发，也可为遗传基因DNA自发突变的结果。

细菌产生这种耐药性的发生率很低，由突变产生的耐药性，一般只对一种或两种类似的药物耐药，且较稳定，其产生和消失(即回复突变)与药物无关。

由突变产生的耐药菌的生长和细胞分裂变慢，竞争力也变弱。

因此，突变造成的耐药菌在自然界的耐药菌中仅居次要地位。

(三)质粒介导的耐药性质粒是一种染色体外的DNA，耐药质粒广泛存在于所有致病菌中。

因此，通过耐药质粒传递的耐药性在自然界发生的细菌耐药现象中最多见，也最重要。

耐药质粒在微生物间的转移方式有：①转化，即耐药菌溶解后释出的DNA进入敏感菌体内，其耐药基因与敏感菌中的同种基因重新组合，使敏感菌耐药。

这种传递方式基本限于革兰阳性细菌，在临床上并无重要性。

②转导，耐药菌通过噬菌体将耐药基因转移给敏感菌，是金黄色葡萄球菌中耐药性转移的主要方式。

由于噬菌体有特异性，故耐药性转导的现象仅能发生在同种细菌内；并且通过噬菌体所能传递的DNA量很少，通常仅能传递对一种抗生素的耐药基因。

因此耐药基因的转导现象，除在葡萄球菌属外，其临床意义可能不大。

③接合，通过耐药菌和敏感菌菌体的直接接触，由耐药菌将耐药因子转移给敏感菌。

微生物的耐药性与抗生素使用近年来，微生物的耐药性问题引起了全球关注。

耐药性是指微生物（如细菌、真菌等）对抗生素的抵抗能力，其使得原本有效的抗生素药物失去了对恶性微生物的消灭作用。

这一问题最早出现于20世纪40年代，随着时间的推移，耐药性的范围和程度不断扩大，已经成为一个严重的公共卫生问题。

本文将探讨微生物耐药性的原因和对策，并讨论合理使用抗生素的重要性。

一、耐药性的原因1.滥用和过度使用抗生素耐药性问题的根源之一是抗生素的滥用和过度使用。

在许多情况下，人们对于感冒、咳嗽等症状过度依赖抗生素，而这些疾病往往并非由细菌感染引起，因此使用抗生素并不能有效治疗。

此外，抗生素被滥用于畜牧业和农业领域，用于提高养殖效率和预防疾病，增加了抗生素的使用量，导致微生物更易产生抗药性。

2.医疗机构及设备不符合卫生标准许多医疗机构存在卫生标准方面的问题，如无洁净手术环境、不合格的器械消毒等。

这使得细菌在医院内得以迅速传播，增加了细菌耐药性的风险。

此外，设备过度使用、频繁更换抗生素等因素也会增加微生物对抗生素的抵抗力。

3.微生物基因突变与水平基因传播微生物的基因突变是导致耐药性的重要原因之一。

微生物具备较快的生殖和繁殖能力，基因突变在繁殖过程中会出现，导致一部分微生物体对抗生素产生抵抗。

此外，水平基因传播也是微生物耐药性问题的重要因素。

水平基因传播是指不同种类的微生物之间通过基因的交流来获得耐药基因，使更多的微生物对抗生素产生抵抗。

二、耐药性的对策1.加强公众教育与合理用药公众教育对于控制微生物耐药性至关重要。

人们应该了解抗生素的作用范围，以及它们对病原微生物的治疗效果和副作用。

同时，公众需要明确知道，自行使用抗生素将会增加微生物抵抗药物的机会，从而使得未来的感染难以治疗。

合理用药需要医生和患者之间的共同努力，医生在诊断和处方环节上要遵循相关指导方针，患者要正确按照医嘱使用药物。

2.强化卫生控制措施医疗机构应加强卫生标准的执行和监督，保持清洁的手术环境，提供合格的器械和药品，严格执行消毒和感染控制措施，减少微生物的传播。

细菌的耐药性与抗生素细菌是一类微生物，存在于自然界中的各个角落。

人们自古以来就认识到细菌的存在，并且在与细菌的斗争中，逐渐掌握了对抗细菌的方法，其中最重要的就是抗生素的应用。

然而，由于滥用和不当使用抗生素的原因，细菌的耐药性在近年来日益严重，成为了全球性的问题。

一、细菌的耐药性的产生细菌的耐药性是指细菌对抗生素产生的抵抗力。

根据科学研究，细菌的耐药性主要是通过以下几种方式产生的：1. 基因突变：细菌体内的基因会发生突变，使其产生对抗生素的抵抗力。

这种突变可能是自然发生的，也可能是由于环境压力等因素导致的。

2. 基因转移：细菌之间可以通过水平基因转移的方式传递耐药基因，这意味着即使某一种细菌对某种抗生素不敏感，但它可以通过与其他抗生素敏感的细菌交流基因，迅速获得抗生素抵抗力。

3. 抗生素的不正确使用：滥用、过量或者不恰当使用抗生素也是导致细菌产生耐药性的重要原因。

当人们在治疗感染或者疾病时过度依赖抗生素，会导致细菌选择性生存，逐渐形成对抗生素的耐药性。

二、细菌耐药性的严重性细菌耐药性的严重性不容忽视。

一旦出现多重耐药菌株的传播，将对人类的健康和医疗带来巨大威胁。

以下是细菌耐药性严重性的几个方面：1. 治疗困难：当细菌对多种常用抗生素具有耐药性时，人们很难找到有效的治疗方法，导致感染疾病难以控制。

临床医生将面临治疗困难，患者也会面临治愈困难。

2. 多重感染：由于细菌耐药性的传播和抗生素无法有效控制感染，患者可能会受到多个不同的细菌感染，使病情变得更加复杂和严重，治疗难度大大增加。

3. 增加医疗成本：由于耐药细菌的治疗难度增加，需要使用更为昂贵的治疗手段和药物，这将增加患者的医疗费用和社会的经济负担。

4. 全球性问题：细菌的耐药性问题不仅是一个局部的问题，而是全球性的挑战。

耐药细菌可以通过人类和动物的迁移、旅行和国际贸易等方式传播，使整个世界受到影响。

三、应对细菌耐药性的措施为了应对细菌耐药性的问题，我们需要采取以下措施：1. 合理使用抗生素：医务工作者和患者应该了解抗生素的正确使用方法和适应症，避免滥用和误用抗生素。

怎样进行临床微生物检验和细菌耐药性检测在临床治疗中，医生一般会向已经确诊的患者提供治疗方案，患者接受治疗的过程，大多需要服用抗菌药物。

如果细菌对抗菌药物形成耐药性，药物对细菌的作用效果变弱，从而对临床治疗形成不利影响。

在临床中抗菌药物的使用增多，需要考量的因素也不断增加，如果对耐药菌株掌握不足，难以有效抑制耐药不良事件的发生。

因此细菌耐药性检测和生物检验变得较为重要，可以对抗菌药物在细菌作用方面的效果进行分析，向患者推荐可靠的用药方案。

1临床微生物检验在临床检验领域，微生物检验是很重要的内容，在标本采集和处理等方面，微生物检验存在特殊性，与临检、生化、免疫等方法有较大的不同。

微生物检验以无菌的手段进行操作，对检验工作提出较高的要求，还会花费较长的时间。

在细菌培养方面，为了将微生物检验的作用最大化发挥出来，需要研究标本采集、送检、涂片、培养结果等方面内容。

检验目的：微生物检验在临床中较为重要，可以为医生治疗感染性疾病提供参考数据，便于医生做出用药方案。

生物检验的数据也可以成为临床感染性疾病诊断在病原学方面的依据。

在微生物检验活动中，可以为医院提供关于耐药性与病原微生物的动态信息，应用在感染病研究中。

结合微生物检验的数据，对临床中微生物检验手段进行改进，提高检验工作的整体水平。

检验要求：在微生物检验手段使用中，务必保证工作在流程要求下进行，在较短时间内得到微生物检验报告，保证检验内容相对可靠。

检验工作的要求较高，检验人员必须具备良好的职业素养，在微生物学方面拥有大量的知识储备，可以熟练的进行检验活动，拥有规范处理检验任务的能力。

在微生物学检验活动中，还需要按照要求，对各环节活动进行质量控制并接受微生物学检验的质量控制考核。

标本处理要求：微生物检验结果会受到标本质量的影响，如果标本质量较低，可能会出现假阴性或假阳性的情况，对临床疾病判断和治疗等活动的影响较大。

因此，务必对标本每个环节工作进行合理的控制，规避检验结果与实际不符的情况。