1．2《基因工程的基本操作程序》（第一课时）
【要达成的目标】
教师个性化教案
学生学习笔记
5．人工合成目的基因有哪几种方法？例：已知大肠杆菌的一条mRNA为ACCGGUAGGGGGGAAACUU则转录成该mRNA的基因的碱基序列是？如果是人的mRNA呢？
例：已知大肠杆菌的某蛋白质氨基酸序列为：甲硫氨酸—亮—苏—精、、、、、则指导该蛋白质合成的基因的碱基序列是？（依据什么原理进行推测）
巩固训练：
1、对基因组文库的描述，不．正确的是（）
A.含有某种生物的全部基因
B.基因中含有启动子和内含子
C.文库的基因是通过受体菌承载的
D.文库中的全部基因可以在物种间交流
【课后反思】
（教师写成败得失和改进措施，学生写学习体会和存在的问题）教师个性化教案学生学习笔记。
基因工程的基本操作程序【教学目标】1.简述基因工程原理及基本操作程序。
2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。
3.培养学生探索科学的严谨态度【教学重点】基因工程基本操作程序的四个步骤。
【教学难点】（1）从基因文库中获取目的基因。
（2）利用PCR技术扩增目的基因。
【教学过程】高考资源网复习：转基因抗虫棉培育的大致过程？引入：基因工程的基本操作程序：(一)、目的基因的获取目的基因：主要是指编码蛋白质的结构基因获取目的基因的方法：①从基因文库中获取（基因组文库，部分基因文库）②利用PCR技术扩增目的基因（变性，复性，延伸）原理：（DNA的复制）条件：（已知基因的核苷酸序列，四种脱氧核苷酸，一对引物，DNA聚合酶）方式：以（指数）方式扩增，即（n为扩增循环的次数）结果：（使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增）过程：a、DNA变性（90℃-96℃）：目的基因DNA受热变性，（氢键断裂），形成（DNA单链）。
b、退火（复性25℃-65℃）：系统温度降低，（引物）与（DNA模板）结合，形成局部双链。
c、延伸（70℃-75℃）：合成链在（DNA聚合酶）作用下进行延伸，合成与模板互补的DNA。
③通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成(二)、基因表达载体的构建基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
目的：使目的基因在受体细胞内稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。
基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点基因表达载体的构建过程：1.用一定的_______（限制酶）切割质粒，使其出现一个切口，露出____（黏性末端）。
2.用__________（同一种限制酶）切断目的基因，使其产生__________（相同的黏性末端）。
3.将切下的目的基因片段插入质粒的_____（切口）处，再加入适量_______ （DNA连接酶），形成了一个重组DNA分子（重组质粒）(三)、将目的基因导入受体细胞转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
1.2 基因工程的基本操作程序【导学目标】1.简述基因工程原理及基本操作程序。
2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。
【自主学习】基因工程的基本操作程序1. 的获取。
2．的构建。
3．将目的基因导入。
4．目的基因的与鉴定。
一、目的基因的获取1.目的基因：主要是指编码蛋白质的，也可以是一些具有。
2．基因文库(1)基因文库的含义：将含有某种生物不同基因的许多，导入的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。
(2)基因文库的种类①基因组文库：含有一种生物的基因。
②部分基因文库：含有一种生物的基因。
3．获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因(2)利用PCR技术扩增目的基因①PCR的含义：是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。
②过程：目的基因受热形成，与引物结合，在的作用下延伸形成DNA。
③方式：指数扩增＝2n(n为扩增循环的次数)。
(3)人工合成法：若较小，序列已知，可以人工合成。
二、基因表达载体的构建1.基因表达载体的组成2．基因表达载体的功能(1)使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以给下一代。
(2)使目的基因和发挥作用。
三、将目的基因导入受体细胞1.转化：进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2．导入植物细胞(1)方法：、基因枪法、花粉管通道法等。
(2)农杆菌的特点①易感染和裸子植物。
②Ti质粒上的可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞上。
3．导入动物细胞(1)常用方法：技术。
(2)常用受体细胞：。
4．导入微生物细胞(1)原核生物特点：繁殖快、多为、遗传物质相对等。
(2)对受体细胞的常用处理方法：用处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为 )。
四、目的基因的检测与鉴定1.检测方法(1) 技术：①检测转基因生物的上的目的基因；②检测目的基因是否转录出。
(2)抗原—抗体杂交技术：用于检测目的基因是否翻译成。
2．鉴定：鉴定、抗性鉴定等。
1、2 基因工程的基本操作程序课标要求简述基因工程的原理和技术能力要求（1）通过对书中插图、照片等的观察，学会科学的观察方法，培养观察能力。
（2）通过对基因工程的基本操作程序的学习，使学生在理解步骤的同时，举一反三，对于其他基因工程操作实例做到能理解、能介绍，从而培养学生对相关知识的理解能力及良好的语言表达能力。
（3）通过引导学生在网上的探究活动，引导学生主动参与，乐于探究，培养学生收集和处理科学信息的能力、获取新知识的能力、分析和解决问题的能力及交流与合作的能力。
知识网络体系目的基因：指编码蛋白质结构基因基因文库从基因文库中获取基因组文库目的基因的获取方法部分基因文库人工合成PCR：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。
利用PCR技术扩增目的基因目的：获取大量的目的基因原理：DNA复制过程目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，基因表达载体的构建并使目的基因能够表达和发挥作用。
（基因工程的核心）目的基因：基因表达载体的组成：启动子：终止子：标记基因：转化：目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳定和表达的过程农杆菌转化法导入植物细胞的方法：基因枪法将目的基因导入受体细胞方法：花粉通道法导入动物细胞的方法：显微注射技术导入微生物的方法：检测转基因生物的染色体上是否插入了目的基因检测：方法：分子杂交技术（DNA探针+转基因生物DNA）目的基因的检测和鉴定检测目的基因是否转录方法：分子杂交技术（DNA探针+转基因生物mRNA）检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原—抗体杂交鉴定：对生物进行个体水平的鉴定重难热点归纳提取目的基因的方法目的基因导入受体细胞的途径。
知识拓展1．外显子与内含子一般来说，结构基因都是由外显子和内含子组成，但是，外显子和内含子的关系不是完全固定不变的。
有时同一条DNA链上的某一段DNA序列，当它作为编码某多肽链的基因时是外显子，而作为编码另一多肽链的基因时，则是内含子，结果是同一基因可以同时转录为两种或两种以上的mRNA。
基因工程的基本操作程序学习目标1、简述基因工程原理及基本操作程序。
2、尝试设计某一转基因生物的研制过程。
重点和难点1、重点：基因工程基本操作程序的四个步骤。
2、难点：（1）从基因文库中获取目的基因。
（2）利用PCR技术扩增目的基因。
学习过程基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：、、、。
其中基因工程的核心是。
一、目的基因的获取：1．目的基因：主要是指编码蛋白质的，也可以是一些具有调控作用的因子。
2．获取目的基因的方法：(1)从基因文库中获取目的基因①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多，导入受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。
思考：cDNA文库和基因组文库有什么区别呢？③目的基因的获取根据基因的有关信息：基因的序列、基因的功能、基因在上的位置、基因的转录产物、基因的表达产物等特性获取目的基因。
(2)利用技术扩增目的基因。
①PCR：是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。
②原理：。
③前提：已知目的基因的序列。
④过程：目的基因DNA受热形成，与结合，然后在______的作用下进行延伸形成DNA。
⑤条件：DNA模板(上有目的基因)、引物、能量、___________________和4种脱氧核苷酸。
⑥方式：指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)⑦PCR技术与DNA复制的异同点(3)人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。
①反转录法：以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。
②根据已知的氨基酸序列合成DNA法：根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。
例1 、下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( )①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A．①②③④B．①②③C．②③④D．②③二、基因表达载体的构建（核心）1．表达载体的组成：目的基因+++标记基因等。
