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实验方案-HPLC测定植物样品中的儿茶素

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HPLC测定植物样品中的儿茶素
一、仪器与试剂
LC-6A 高效液相色谱仪, 包括SPD-6A 紫外-可见分光光度检测器, SCL-6A系统控制器, SIL-6A自动进样器, CR-3A 色谱工作站; PE Lambda 35 UV-Vis 紫外可见光分光光度仪; 超声波清洗器。

儿茶素标准溶液: 称取儿茶素标准品10.0 mg, 用乙醇溶解, 并定容于25mL容量瓶中, 质量浓度为400. 0 mg·L-1。

水为重蒸馏水, 无水乙醇为优级纯, 甲醇为色谱纯。

二、仪器的工作条件
Shim-pack CLC-ODS C18色谱柱( 150 mm×6.0mm, 5um) , 流动相为甲醇-水(75+ 25) 混合溶液, 柱温为30℃, 流速为1.0mL·min-1 , 进样量为5.0uL, 检测波长为210nm。

三、标准工作曲线的制定
移取不同体积的儿茶素标准溶液置于2mL容量瓶中, 用乙醇定容, 制成0，20.0，40.0，80.0，200.0，320.0，400.0 mg·L-1系列标准溶液, 按色谱条件进行测定，绘制出标准曲线。

四、试验方法
称取一定量（1g）粉碎后的植物样品, 以每克植物样品加乙醇－水( 20+ 80) 溶液15 mL的比例混合, 70 ℃水浴加热并超声溶解30min, 用0.45um微孔膜过滤。

按仪器工作条件对提取液进样分析。

五、计算
根据标准工作曲线，计算出植物样品中儿茶素的含量（mg·g- 1）。

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表儿茶素的色谱条件

表儿茶素的色谱条件

表儿茶素的色谱条件
儿茶素（catechins）是茶叶中的重要成分，常用的高效液相色谱（HPLC）方法一般用于分析和测定儿茶素的含量。

以下是一种常用的HPLC色谱条件：
1. 色谱柱：常见的色谱柱包括C18柱和C8柱，一般使用5μm或3μm的粒径，柱长一般为150mm。

2. 流动相：常用的流动相是乙腈和水的混合物，可以添加0.1%的磷酸作为缓冲剂。

初始流动相的组成可以设置为85%乙腈和15%水，然后随着时间的推移逐渐增加乙腈的浓度。

3. 流速：常见的流速为1.0 mL/min。

4. 检测波长：儿茶素在紫外区域具有吸收峰，常见的检测波长为280nm。

5. 注射体积：一般情况下，儿茶素的样品注射体积为10μL。

需要注意的是，以上条件仅供参考，具体的色谱条件可能会有一定的差异，取决于仪器设备和具体分析要求。

在实际操作中，可以根据需要进行优化调整。

RP-HPLC法测定猕猴桃根中儿茶素和表儿茶素含量

RP-HPLC法测定猕猴桃根中儿茶素和表儿茶素含量

RP-HPLC法测定猕猴桃根中儿茶素和表儿茶素含量王敏;马玉梅;周晓松【摘要】建立用反相高效液相色谱法(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定猕猴桃根中儿茶素和表儿茶素含量的方法,并分析不同采挖季节猕猴桃根中儿茶素和表儿茶素含量的变化.采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-1％乙酸水溶液为流动相,以1.0mL/min的流速梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量10μL.结果显示,儿茶素和表儿茶素的浓度线性范围分别为1.0μg/mL～198.6μg/mL(r2=0.9999)和1.0μg/mL～201.0μg/mL(r2=0.9999),儿茶素平均加样回收率为99.16％,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.66％(n=9),表儿茶素平均加样回收率为100.99％,RSD为0.74％(n=9).本法适用于猕猴桃根中儿茶素和表儿茶素的精确定量,检测结果表明,初春采收的猕猴桃根中的儿茶素和表儿茶素含量明显高于秋冬.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)018【总页数】5页(P168-172)【关键词】含量;猕猴桃根;儿茶素;表儿茶素;反相高效液相色谱法【作者】王敏;马玉梅;周晓松【作者单位】安顺职业技术学院应用医药系,贵州安顺561100;深圳市泰康制药有限公司,广东深圳518110;安顺职业技术学院应用医药系,贵州安顺561100【正文语种】中文猕猴桃根为猕猴桃科植物中华猕猴桃（Actinidia chinensis Planch）的干燥根[1]，具有很好的保健用途和药用价值。

可以烧水当保健茶喝；是养生膳食原料、保健填充材料、养生药酒原料以及中药制药原料，也经常用于养生花草茶、泡脚泡澡等，还可与其它膳食原料做成健康养生膳食，如猕猴桃粥对胃癌病人有特殊补益作用[2-5]。

HPLC法测定不同产地黑豆皮中表儿茶素的含量

HPLC法测定不同产地黑豆皮中表儿茶素的含量


２ 供试 品溶液 的制备 ． ２
图１ Ｅ Ｃ对照品色谱 图
Ｆｉ ． Ｓｔ ｎｄ ｒ ｏｆＥＣ ｇ１ ａ ａ ｄ
称取不 同产地黑 豆皮样 品各 １ ，用 １ ．ｇ ０ ％盐 酸 甲
０ ５ 微孑 滤膜过滤 ，取续 滤液作为供试 品溶液 ， ． ｍ Ｌ ４ 于
醇 １ 浸提２ ， ０ ｍＬ ４ 过滤 ， ｈ 得滤液 。 精密吸取２ Ｌ ． ｍ 滤液 ， ５
ｍｅｈ ｄ ｉ ｉ ｌ ｎ ｅｉｂ ｅ，ａ ｄ ｃ ｎｂ ｓ ｄｔ ｏ ｔｏ ｈ ｕ ｌｔ ｆ ｌ ｋ ｓ ｙ ｅ ｎ． ｔ ｏ ｓｓｍｐ ｅａ ｄｒ ｌａ ｌ ｎ ａ ｅｕ ｅ ｃ ｎ ｒ ｌ ｅｑ ａｉ ｏ ａ ｏ ｂ ａ ｏ ｔ ｙ ｂｃ
Ｋｅ ｙｗｏｒ ｓ：ＨＰＬ ；ｂａ ｋｓ ｙｂ ａ ｄ Ｃ ｌ ｏ ｅ ｎ；ｅ ｃ ｔｃ ｉ ｃ ｐｉａｅ ｈ ｎ；ｃ ｎ ｅ ｔ ｅ ｅｍ ｉａ ｉｎ ｏ ｔｎ ｔｒ ｎ ｔ ｄ ｏ
１ 仪 器 与 试 剂
表 儿茶素对 照品 ： 自中 国药 品及 生物制 品检定 购
所， 纯度 ≥９ ％， ８ 本文简称Ｅ 甲醇 、 Ｃ； 乙腈 为色谱 纯 ， 水 为去离 子水 ， 其他均为分析纯 。
青扁 、 黄仁 （ 于山东 ）Ｋ ０ ０ 青 圆 、 产 、Ｌ ９ １ 有机黑 豆皮 ： 购
黑豆是 我 国一 种传统种 植 的农 作物 ， 具有悠 久 的
效。 可治疗 阴虚烦热 ， 盗汗 ， 眩晕 ， 痛 ， 痹等症 【 此 头 风 ｌ ＿ 。 外， 黑豆皮提 取物还 具有很 强 的抗 氧化活 性［ 抑 制诱 ２ １ 、 变口 ］ 炎Ｉ 预 防癌症［ －抗 ５ ４ 、 Ｊ 、 ６ １ 等功效 。 以很有 必要 对其成 所 分及 含量进 行深入研究 。 研究 仅报道 黑豆皮 中含有大量 花青 素类成 分 ， 目 前韩 国学者Ｊ ｗ ｎ ｅ从黑豆皮 中分离得到５ ｉＨ ａ ｅ ｎ Ｌ 种花青
高效液相色谱法测定天山花楸中表儿茶素含量

高效液相色谱法测定天山花楸中表儿茶素含量

２ ． ４ 样 品测 定
定所提供 ； 花楸枝叶采 自玛纳斯林场 ， 经药学 院高级 实验师 陈
玉怀鉴定为天 山花楸 ， 采摘 时 间分别 为 ２ ０ １ １ ０ ９ ０ １ ， ２ ０ １ １ ０ ８ １ ５ ， ２ ０ １ ０ ０ ８ ０ ７ ， ２ ０ １ ０ ０ ８ ０ １ ； 实验所 用 甲醇 、 乙腈 为色谱级 ， 其余 均 为
水（ ２ ０ ： ８ ０ ） ， 流速为 ｌ ｍｌ ・ｍｉ ｎ ～ 。结果 ： 测得 天山花楸中表儿茶素 的含量 为 １ ． ９ ６ ％。结论 ： 该方法 准确 ， 重现性好 ， 能为天 山花楸的进
一
步研究提供理论依据 。 关键词 ： 高效液相色谱法 ； 表儿茶素
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ Ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ．１ ０ ０ ４ － ４ ３ ３ ７ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ４ ． ０ ３ ４
分析级 。 １ ． ２ 方 法
取 ４批天 山花楸样 品按 照 ” １ ． ２ ． ２ ” 项 下方 法制备 供试 品 溶液 ， 取供试 品溶液 和对 照品溶 液各 １ ０ ｕ ｌ ， 按“ １ ． １ ． ２ ” 色谱 条
件记录色谱图 。测量 对照 品和供 试 品待测成 分 的峰 面积 ， 按
天 山花楸为蔷薇科 （ Ｒ ｏ ｓ ｅ ｃ ｅ ａ ｅ ） 花楸 属 （ Ｓ ｏ ｒ ｂ ｕ ｓ ） 植物， 主要
产新疆各地 。该属 植物具 有重 要 的药用价 值及 经 济价值 ， 其 中一些植 物 由于 有密集 的花 序也 常作观 赏用 。《 新疆 中草 药
手册 》 记载 ： “ 果实： 味甘 苦 ， 性平， 无 毒 。嫩 枝 和皮 ： 味苦 ， 性 寒， 无毒 。清肺止 咳， 补脾 生津 。治肺 结核 ， 哮 喘咳嗽＿ １ ｊ ， ’ 。课