消化道平滑肌的生理特性和药物的影响实验报告
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消化道平滑肌生理特性及药物对平滑肌运动的影响Physiological Characteristics of Gut Smooth Muscle and Effectsof Drugs on the Movement of Smooth Muscle【目的和原理】 观察家兔离体胃肠平滑肌的电生理特性和一般特性;熟悉哺乳动物离体器官灌流的一种方法;观察不同浓度乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)对家兔离体肠平滑肌的作用及阿托品(atropine)对ACh的拮抗作用;熟悉研究药物量效关系的实验方法。
消化道平滑肌具有自动节律性,较大的伸展性,对化学物质、温度改变及牵张刺激较为敏感等一般生理特性。
电位变化方面,消化道平滑肌除了具有一般可兴奋组织的静息电位(RP)和动作电位(AP),还有其特有的慢波电位。
ACh通过激动肠管平滑肌上的M型胆碱受体可引起肠管平滑肌收缩,在一定剂量范围内,其收缩强度呈剂量依赖性。
Atropine作为M型胆碱受体阻断剂,可竞争性地拮抗ACh对M受体的激动作用。
【实验动物】 家兔,体重2.5~3.0Kg。
【实验器材和药品】 超级恒温器、恒温浴管、BL-410生物机能实验系统、木槌、万能支架台、双凹夹2个、温度计、烧杯、石蜡作底面的表面皿、玻璃微电极、Ag-AgCl电极丝、张力换能器、注射器(1.0ml)7支、注射针头、手术器械、蛙心夹、弹簧夹、兔手术台。
台氏液、1:10,000肾上腺素(adrenaline,adr)、1N NaOH、1N HCl、不同浓度(3X10-1、3X10-3、3X10-5、3X10-7、3X10-9、3X10-11)mol/L氯化ACh。
【实验步骤和观察项目】1.标本制作用木槌猛击家兔头枕部致昏,迅速剖开腹腔,找出胃与十二指肠交界处,用线结扎,将与十二指肠相连的肠系膜沿肠缘剪开,在结扎线近胃侧剪断小肠,立即取出长约20~30cm 的肠管。
把离体肠管置于4o C的台氏液中轻轻漂洗将肠内容物冲洗干净,并将肠管剪成2~3cm数段,再换台氏液备用。
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------消化管平滑肌的生理特性消化管平滑肌的生理特性【实验目的】 1. 学习哺乳动物离体器官实验的一般方法; 2. 记录离体小肠在模拟体内环境中的活动; 3. 研究不同药物对消化道平滑肌收缩的影响,了解平滑肌的生理特性。
【实验原理】哺乳动物消化管平滑肌具有肌组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。
但是消化道平滑肌有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。
将离体组织器官至于模拟体内环境的溶液中,可以在一定时间内保持其功能。
本实验以台氏液作灌流液,在体外观察及记录家兔离体肠段的一般生理特性。
【实验动物与器材】实验动物:家兔实验器材:恒温平滑肌浴管、生理信号采集处理系统、肌张力传感器、万能支架、大铁夹、螺旋夹、双凹夹 2 个、温度计、烧杯、台氏液、无钙台氏液、 1:50000 肾上腺素、 1:1000000乙酰胆碱、1:50000 阿托品【实验方法与步骤】一、实验准备 (一) 启动平滑肌浴管恒温系统恒温平滑肌浴管是自供液式,中心管为平1 / 4滑肌浴管。
外部容器为恒温浴锅,加蒸馏水或自来水。
使用前将浴管刷洗干净,加入台氏液至浴管高度的 2/3 处,约50ml。
开启电源加热,恒温工作点定在38℃,浴管温度将自动稳定在38℃左右。
(二) 标本制备用槌猛击兔的头枕部使其昏迷,剖开腹部,找出胃与十二指肠交界处,用线结扎,在结扎线近胃侧剪断小肠,将肠管的肠系膜沿肠缘剪开,分离出长约 20~30cm 的肠管。
把离体的肠管置于4℃左右的台氏液中,剪成数段,每段长2~3cm,然后用注射器向肠腔内注入台氏液,冲洗肠腔,待肠腔内容物基本洗净后,放入4℃台氏液中备用。
消化道平滑肌生理特性及药物影响一、实验目的:1、学习哺乳动物离体器官的灌流实验法。
2、观察消化道平滑肌自律性运动及药物温度的影响。
二、实验对象:三、实验方法:1、实验装置的准备:(1)麦氏浴槽灌流:该浴槽坐浴于盛水的烧杯中,酒精灯加热,温度计测量,控温于37度左右(因水浴升降温速度较慢),故可用此法来维持温度。
(2) 恒温浴槽的换液方法:其排水管道上夹有弹簧夹,打开用50毫升注射器抽取,可使灌浴槽中的液体流出,主管则可加入新鲜台氏液(3)描记装置:通过张力换能器将信号输入实验系统的通道4,打开计算机,D95主界面生理消化道平滑肌生理特性。
2、制备离体小肠标本:用铁棒猛击兔头枕部,使其昏迷,立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,由此取20~30cm长的肠管。
先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去,再将拟取肠管两端分别用线结扎,于结扎两端内侧剪断,取出肠段,置于台氏液中轻轻漂洗,当肠内容物基本洗净之后,将肠管分成6段,每段长2~3cm,两端各系一条线,保存于室温台氏液中。
3标本安装:当实验装置准备完毕,将肠段一端牢固地系在通气管钩上,放入准备好的麦氏浴槽中(室温台氏液),另一端系在张力换能器的悬梁臂上,调节氧气袋出气管上的滚轴,控制通气量(使空气气泡从通气管前端呈单个而不是成串逸出,以免振动悬线影响记录),酒精灯开始加热台氏液到37度,实验开始3、观察项目观察离体小肠平滑肌收缩的节律、波形和幅度。
(注意:收缩曲线的基线代表小肠平滑肌的紧张性,因此实验过程中不要随意移动该基线。
)四、实验结果:实验项目收缩幅度收缩节律室温台氏液→37度1/10万Ach2滴↑↓1/万 Adr2滴↑↓1/万 Atr2滴↑↓2min后加Ach2滴↑↓换25度台氏液继之→42度42度→五、实验讨论:1、正常曲线:幅度高低取决于钙离子内流量,取决于动作电位,钙离子内流可加强平滑肌收缩,因此,动作电位频率越高,平滑肌收缩强度越大,频率即收缩节律,最终受基本电节律控制。
平滑肌实验报告平滑肌实验报告引言:平滑肌是人体内一种重要的肌肉组织,存在于消化道、呼吸道、血管等器官中。
它的收缩和松弛对于维持正常生理功能至关重要。
为了深入了解平滑肌的特性和功能,我们进行了一系列实验。
本报告将详细介绍实验的目的、方法、结果和讨论,以及对未来研究的展望。
实验目的:1. 了解平滑肌的基本结构和功能。
2. 探究平滑肌收缩和松弛的调控机制。
3. 分析平滑肌对不同刺激的响应。
实验方法:1. 采集平滑肌标本:从实验动物中取出消化道、呼吸道或血管等平滑肌组织标本。
2. 制备平滑肌切片:将标本固定、切片,以便观察细胞结构。
3. 观察平滑肌细胞结构:使用显微镜观察切片,记录细胞形态和排列方式。
4. 测量平滑肌收缩力:将平滑肌标本放置于生理盐水中,通过施加不同的刺激(如药物、电刺激等)来观察平滑肌的收缩力。
5. 分析平滑肌对不同刺激的响应:记录不同刺激下平滑肌的收缩力变化,并进行统计学分析。
实验结果:1. 平滑肌细胞结构观察:平滑肌细胞呈长条状,排列紧密,无横纹。
细胞内含有较少的肌纤维。
2. 平滑肌收缩力测量:不同刺激条件下,平滑肌表现出不同的收缩力。
例如,乙酰胆碱刺激可以引起平滑肌收缩,而硝酸甘油刺激则会使平滑肌松弛。
3. 平滑肌对不同刺激的响应:不同刺激对平滑肌的作用机制不同。
乙酰胆碱通过与胆碱受体结合,激活细胞内的二磷酸腺苷酸环化酶,导致平滑肌收缩。
硝酸甘油则通过释放一氧化氮,促使环磷酸鸟苷的产生,从而引起平滑肌松弛。
讨论:本实验结果表明平滑肌具有很强的调节能力,可以通过不同的刺激实现收缩和松弛。
这种调节能力对于人体内多个器官的正常功能至关重要。
例如,胃肠道平滑肌的收缩和松弛可以调节食物的运输和消化吸收过程。
血管平滑肌的收缩和松弛则可以调节血液的流动和血压的维持。
然而,本实验还存在一些局限性。
首先,我们只使用了动物标本进行实验,结果可能与人类平滑肌存在差异。
其次,我们只研究了一些常见的刺激物质,还有待进一步探索其他刺激对平滑肌的作用机制。
消化道平滑肌的一般生理特性
消化道平滑肌的一般生理特性:
1. 平滑肌具有成熟和少数持续的功能变化的能力,可以把营养物转化成代谢物并传导给身体。
2. 平滑肌中DNAs相对稳定,不会变性,它们可以保持消化道的功能稳定性。
3. 平滑肌的活力很强,可以利用ATP能量水平调节消化道的能量,以保障功能的正常运行。
4. 平滑肌可以发挥控制消化道壁的大小和形状,从而调节前行过程需要的时间及对营养物的吸收能力。
5. 平滑肌拥有很强的血流能力,可以使消化道结构得以充分供血。
6. 有的平滑肌能实现食物的门户流动,能够在消化道壁上形成一个队列,以可控制食物的速度及营养物的吸收率。
7. 消化道平滑肌含有蛋白质、肝素和脂肪,能够实现免疫、消化和吸收功能,以及维护消化道结构完整及免受外来损害。
8. 消化道平滑肌也可以实现感应功能,能够检测消化道内外的变化,从而调整其活性。
9. 消化道平滑肌还可以制造粘液和血浆素等物质,有助于食物的消化流动。
10. 平滑肌的活动受到神经系统以及多种激素的调控,是消化道日常运作的基础。
实验名称:消化道平滑肌生理特性及药物影响一、实验目的:1、学习消化道平滑肌的--般生理特性。
2、观察药物和化学因素对消化道平滑肌运动的影响。
3、了解家兔离体肠管的实验方法。
二、实验原理①消化道平滑肌具有自动节律性,伸展性,且对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏感。
离体肠平滑肌置于适宜的液体中,仍能进行节律性活动,并对温度、pH环境变化做出反应。
②当交感神经兴奋时,其末梢释放的递质去甲肾上腺素或体液中的肾上腺素,作用于消化道平滑肌细胞上的a、β受体,可使消化道平滑肌运动减慢减弱;当迷走神经兴奋时,末梢释放递质乙酰胆碱,作用于平滑肌细胞膜上的M受体,可使平滑肌运动加快、加强。
因此,当给予相应药物(如受体激动剂或受体阻断剂)于灌流液中时,平滑肌舒缩活动也发生相应变化。
③平滑肌细胞外液Ca2+浓度升高时,Ca2+内流增加,使得细胞内液中Ca2+浓度升高,Ca2+更易与钙调蛋白结合,促进了横桥的激活。
可使收缩力增加。
三、实验对象及材料:家兔、麦氏浴槽,张力换能器,BL-420F生物信息采集系统,L形通气管,铁支架,三角铁架,试管夹,滴管,烧杯,供气球,温度计,酒精灯,台氏液,1:10000肾上腺素溶液,1:100000乙酰胆碱溶液,1N NaOH溶液,1N HCI溶液,1:100BaCl,溶液。
四、实验步骤:①用木槌猛击兔头枕部,使其昏迷。
②剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,依次向下端取出长四厘米的小肠段。
离体肠段保存于供氧的台氏液中。
③恒温水浴锅控制加热,恒温工作点定在36.8℃。
将充满氧气的供气球与通气管相连。
将离体肠段的一端与浴槽内的标本挂钩相连,另一端连接于张力换能器,调节换能器张力,预置1~2g的张力信号。
④电脑选择“实验项目”--“消化实验”--“消化道平滑肌生理特性”。
记录一段正常的小肠收缩曲线。
五、观察项目:1.记录肠管在室温台氏液中的活动情况。
2.将浴槽放入盛水的烧杯中,其下用酒精灯加热,使台氏液温度逐渐增至38~40°C,记录肠管运动的变化。
台州学院医学院实验报告班级:学号:姓名:实验课程:机能学实验实验项目:消化道平滑肌的生理特性和药物的影响实验分室:实验日期 2015年 6 月 3 日一、实验目的1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。
2、了解肠段平滑肌的生理特性.3、观察某些药物对离体平滑肌的作用二、实验原理哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等.但消化管平滑肌又有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。
这些特性可维持消化管内一定压力,保持胃肠等一定的形态和位置,适合于消化管内容物的理化变化,在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。
将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶液中,可在一定时间内保持其功能。
本实验以台式液作灌流液,在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性.三、实验仪器与材料兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、20ml注射器、张力传感器、生物机能实验系统、温度计、台式液、肾上腺素(1:10000)、乙酰胆碱(1:10000)、阿托品针剂(1支)。
四、实验内容、方法与步骤1、安装麦氏浴槽恒温平滑肌浴槽可用来记录消化道平滑肌的收缩活动,分为外槽和内槽,内槽用来浸浴实验标本,外槽内有恒温自来水流动以加热内槽中的台氏液,使其温度保持在37℃左右.小肠标本一端固定在内槽底部的铁钩上,另一端连至肌肉张力换能器的悬臂上。
换能器与生物信号采集处理系统通道相连并输入计算机.内槽中的台氏液以刚能淹没肠管为宜。
内槽底部还有通空气和排液的共同开口,通过此开口可排液和供给标本所需氧气.2、制备离体兔肠段取禁食24h的健康家兔,一手提后肢使头部自然下垂,另一手用木槌猛击兔后头延髓部,致其昏迷后立即剖开腹腔,找到胃幽门与十二指肠交界处。
在十二指肠起始端扎一线,取出十二指肠、空肠、放入冷台式液内。
先用20ml注射器冲洗内容物,冲洗干净后剪成若干约1.5cm长的小肠段(每一实验小组一段)在其两端结扎,一端做一短线环固定在通气的浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连,此线不宜过长且必须竖直。
一、实验目的1. 了解消化道平滑肌的基本生理特性。
2. 掌握观察消化道平滑肌运动的方法。
3. 研究药物对消化道平滑肌运动的影响。
二、实验原理消化道平滑肌是人体消化系统中重要的组成部分,其主要功能是推动食物在消化道内的运动。
消化道平滑肌具有以下生理特性:1. 自主性:消化道平滑肌在没有神经和体液调节的情况下,也能进行节律性的收缩和舒张运动。
2. 感受性:消化道平滑肌对各种化学、物理和神经刺激具有敏感性。
3. 稳定性:消化道平滑肌的收缩和舒张运动具有一定的稳定性,但受神经和体液调节的影响较大。
本实验通过观察消化道平滑肌的运动,研究药物对消化道平滑肌运动的影响,从而加深对消化道平滑肌生理特性的理解。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:猪小肠、生理盐水、氯化钾溶液、阿托品溶液、肾上腺素溶液、氯化钡溶液等。
2. 实验仪器:显微镜、放大镜、离心机、恒温水浴锅、秒表、滴定管等。
四、实验方法与步骤1. 准备实验材料:将猪小肠剪成适当长度,用生理盐水冲洗干净,置于生理盐水中备用。
2. 观察消化道平滑肌运动:将小肠标本置于显微镜下,观察其自然运动情况,记录运动频率、幅度和节律性。
3. 药物对消化道平滑肌运动的影响:分别向小肠标本中加入氯化钾溶液、阿托品溶液、肾上腺素溶液和氯化钡溶液,观察并记录药物对消化道平滑肌运动的影响,包括运动频率、幅度和节律性等。
4. 数据处理与分析:将实验数据整理成表格,进行统计学分析。
五、实验结果1. 自然状态下,消化道平滑肌呈现节律性的收缩和舒张运动,运动频率约为每分钟3-5次,幅度约为1-2mm。
2. 加入氯化钾溶液后,消化道平滑肌运动频率明显加快,幅度增大,节律性减弱。
3. 加入阿托品溶液后,消化道平滑肌运动频率和幅度无明显变化,但节律性略有减弱。
4. 加入肾上腺素溶液后,消化道平滑肌运动频率明显减慢,幅度减小,节律性增强。
5. 加入氯化钡溶液后,消化道平滑肌运动频率和幅度无明显变化,但节律性略有增强。
平滑肌实验报告引言:平滑肌是人体内一种重要的肌肉类型,广泛分布于血管、消化道、呼吸道等器官中。
它具有不同于骨骼肌的特点,能够自发性地收缩和松弛,并参与各种生理过程。
了解平滑肌的结构和功能,对于研究人体生理学、病理学以及药物的作用机制等方面有着重要的意义。
在本次实验中,我们将通过对平滑肌的观察和测量,深入了解其特点和响应机制。
实验一:平滑肌的构造观察首先,我们通过显微镜观察了平滑肌的基本结构。
将取自小鼠食道的组织标本置于载玻片上,加入显微镜溶解液进行处理并覆盖载玻片。
在显微镜下,我们可以清晰地看到平滑肌组织中的细胞形态和纤维排列。
与骨骼肌相比,平滑肌的细胞形状更加细长,并且没有明显的横纹。
接着,我们观察了平滑肌的收缩特点。
将取自小鼠的平滑肌组织分割成较小的片段,并放置在培养皿中,加入生理盐水和适量的钙离子。
随着钙离子的加入,平滑肌组织逐渐收缩,并呈现出波浪状的动态变化。
通过记录收缩的持续时间和幅度,我们可以量化地评估平滑肌的收缩能力。
实验二:通过药物研究平滑肌的响应机制为了进一步研究平滑肌的响应机制,我们选择了常见的药物去甲肾上腺素(noradrenaline)和乙酰胆碱(acetylcholine),它们分别代表交感神经系统和副交感神经系统的作用。
我们首先将分割好的平滑肌组织片段分别置入含有去甲肾上腺素或乙酰胆碱的培养液中,观察其收缩状况。
结果显示,去甲肾上腺素的加入使平滑肌组织呈现出较为强烈的收缩状态,而乙酰胆碱的作用则使其放松松弛。
进一步地,我们测量了平滑肌组织在不同浓度药物下的收缩反应。
通过逐渐增加药物浓度,我们发现平滑肌组织的收缩强度和持续时间均呈现出剂量依赖性的变化。
这表明平滑肌对于不同药物的反应存在一定的敏感性,并且其机制可能与特定的受体和信号传导途径有关。
结论:通过本次实验,我们得出了以下结论:1. 平滑肌具有不同于骨骼肌的结构特点,细胞形状细长且无明显的横纹。
2. 平滑肌能够自发性地收缩和松弛,表现出波浪状的动态变化。
此报告纯属个人娱乐行为,读者请勿留言一、实验目的——1.学习哺乳动物离体肠标本制备及灌流方法。
2.观察消化道平滑肌;L的一般生理特性及某些因素对舒缩活动的影响。
二、实验原理消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样,也具有兴奋性、传导性和收缩性,有些也具有自律性。
相比之下消化道平滑肌的兴奋性低,收缩慢,伸展性大,具有紧张性收缩,对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏感等特性。
小肠离体后,置于适宜的溶液中,观察其收缩活动及环境变化的影响,观察分析上述生理特性。
三、实验材料——1、实验动物:家兔2、器械、药品:电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器(量程为25g以下)、BL-410生物记录系统、L型通气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺丝夹、三维调节器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液。
四、实验方法和步骤1、标本制备流程:①击昏家兔:用木槌猛击兔头枕部,使其昏迷。
②剖开腹腔快速取出肠管:立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,快速取长20~30cm的肠管,先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去,置于供氧台氏液中轻轻漂洗,把肠内容物基本洗净。
③制作离体肠标本:将肠管分成数段,每段长2-3cm,两端各系一条线,保存于供氧的38℃左右的台氏液中2、仪器安装与调试实验安装(如图):恒温水浴锅控制加热,恒温工作点定在38℃。
将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接,将肠段一端系在通气管钩上,另一端与张力换能器相连。
控制通气量,使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。
仪器调试:BL-410系统的使用,选择“实验项目”中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。
相关参数设置的参考值:时间常数t→DC,高频滤波F→30Hz,显速→4.00s/div,增益→100g。
用鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮,调节参数至波形幅度、密度适当,待收缩曲线稳定后,单击记录按钮。
此报告纯属个人娱乐行为,读者请勿留言一、实验目的——1. 学习哺乳动物离体肠标本制备及灌流方法。
2. 观察消化道平滑肌 ;L的一般生理特性及某些因素对舒缩活动的影响。
二、实验原理消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样,也具有兴奋性、传导性和收缩性,有些也具有自律性。
相比之下消化道平滑肌的兴奋性低,收缩慢,伸展性大,具有紧张性收缩,对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏感等特性。
小肠离体后,置于适宜的溶液中,观察其收缩活动及环境变化的影响,观察分析上述生理特性。
三、实验材料——1、实验动物:家兔2、器械、药品:电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器(量程为25g以下)、BL-410生物记录系统、L型通气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺丝夹、三维调节器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液。
四、实验方法和步骤1、标本制备流程:①击昏家兔:用木槌猛击兔头枕部,使其昏迷。
②剖开腹腔快速取出肠管:立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,快速取长20~30cm的肠管,先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去,置于供氧台氏液中轻轻漂洗,把肠内容物基本洗净。
③制作离体肠标本:将肠管分成数段,每段长2-3cm,两端各系一条线,保存于供氧的38℃左右的台氏液中2、仪器安装与调试实验安装(如图):恒温水浴锅控制加热,恒温工作点定在38℃。
将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接,将肠段一端系在通气管钩上,另一端与张力换能器相连。
控制通气量,使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。
仪器调试:BL-410系统的使用,选择“实验项目”中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。
相关参数设置的参考值:时间常数t→DC,高频滤波F→30Hz,显速→4.00s/div,增益→100g。
用鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮,调节参数至波形幅度、密度适当,待收缩曲线稳定后,单击记录按钮。
台州学院
医学院实验报告
班级:学号:姓名:
实验课程:机能学实验
实验项目:消化道平滑肌的生理特性和药物的影响实验分室:
实验日期 2015年 6 月 3 日
一、实验目的
1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。
2、了解肠段平滑肌的生理特性。
3、观察某些药物对离体平滑肌的作用
二、实验原理
哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。
但消化管平滑肌又有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。
这些特性可维持消化管内一定压力,保持胃肠等一定的形态和位置,适合于消化管内容物的理化变化,在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。
将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶液中,可在一定时间内保持其功能。
本实验以台式液作灌流液,在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。
三、实验仪器与材料
兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、20ml注射器、张力传感器、生物机能实验系统、温度计、台式液、肾上腺素(1:10000)、乙酰胆碱(1:10000)、阿托品针剂(1支)。
四、实验内容、方法与步骤
1、安装麦氏浴槽恒温平滑肌浴槽可用来记录消化道平滑肌的收缩活动,分为外槽和内槽,内槽用来浸浴实验标本,外槽内有恒温自来水流动以加热内槽中的台氏液,使其温度保持在37℃左右。
小肠标本一端固定在内槽底部的铁钩上,另一端连至肌肉张力换能器的悬臂上。
换能器与生物信号采集处理系统通道相连并输入计算机。
内槽中的台氏液以刚能淹没肠管为宜。
内槽底部还有通空气和排液的共同开口,通过此开口可排液和供给标本所需氧气。
2、制备离体兔肠段
取禁食24h的健康家兔,一手提后肢使头部自然下垂,另一手用木槌猛击兔后头延髓部,致其昏迷后立即剖开腹腔,找到胃幽门与十二指肠交界处。
在十二指肠起始端扎一线,取出十二指肠、空肠、放入冷台式液内。
先用20ml注射器冲洗内容物,冲洗干净后剪成若干约1.5cm长的小肠段(每一实验小组一段)在其两端结扎,一端做一短线环固定在通气的浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连,此线不宜过长且必须竖直。
将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中。
3、开启生物机能实验系统,接通与张力传感器相连的通道。
固定管并调节扎线与张力传感器,使肠段运动自如又能牵动传感器(注意:扎线不可贴壁或过紧过松)。
调节增益与扫描速度,使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。
4、实验观察
(1)记录肠段正常运动曲线,观察基线水平、收缩幅度、节律及波形特点。
用新鲜37℃台式液冲洗,待恢复正常(注意作好标记,下同)。
(2)加肾上腺素在内槽台氏液中加入1~2滴肾上腺素(1:10000),观察并记录曲线变化。
曲线变化后立即更换新的38℃的台氏液。
(3)加乙酰胆碱在内槽台氏液中加入1~2滴乙酰胆碱(1:10000),观察并记录曲线变化。
依上法冲洗。
(4)在内槽台氏液中加入2~4滴阿托品(1:10000),2min后再加1~2滴乙酰胆碱(1:10000),记录并观察曲线变化,与项目(3)进行比较。
依上法冲洗。
(5)环境pH的影响加入HCL3~4滴,观察平滑肌收缩活动的改变。
在其基础上再滴3~4滴NaOH观察肠平滑肌的反应。
标记,冲洗。
(6)温度的影响将内槽换成25℃台式液,同时关闭恒温加热装置,使内槽台氏液温度逐渐降至25℃,并记录曲线变化,同时观察肠段紧张度变化。
五、实验数据处理
六、实验结果与分析
正常小肠:正常情况下,离体小肠平滑肌在台氏液中可以自由缓慢收缩,但其节律性不规则。
α,β受体激动药,加肾上腺素:在浴槽中加入肾上腺素后,可见离体肠管活动减弱,描计曲线出现收缩频率变慢,幅度减小以及基线下移。
因为肠肌细胞膜上存在α于β受体, 前者又分为抑制性受体和兴奋性受体,肾上腺素作用于抑制性受体,引起肠肌膜上一种特异性受体活化,使钾离子外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,肌张力下降,同时肾上腺素还作用于β受体,它的激活引起肠肌细胞膜上的cAMP合成增多,激活了肠肌膜及肌浆网上钙离子泵活动,使肌浆中钙离子浓度降低使肌张力下降。
Β受体激活后促使钾离子及钙离子外流增加,加速膜的超极化,促进了肌张力的减低。
拟胆碱药的影响:在浴槽中加入乙酰胆碱后可见离体肠管活动增强,描计曲线出现收缩频率变快,幅度增加。
出现上述现象是因为消化道平滑肌产生动作电位的离子基础与钙离子的内流有关,乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合,使得两类通道开放:一类为电位敏感性钙离子专用通道,另一类为特异性受体活化钙离子专用通道。
前一类对Ach敏感,小剂量Ach即引起开放;后一类对Ach相对不敏感,只有大剂量才会引起开放。
这两类通道开放都使得肌浆中钙离子增高,进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。
抗胆碱药的影响:当加入抗胆碱药阿托品后,现象消失。
因为阿托品为M受体阻断药,作用机制为拟胆碱药的拮抗效应。
pH的影响:在浴槽中加入盐酸溶液后,离体肠管活动减弱,描计曲线出现收缩幅度降低,频率变慢。
这是由于细胞外氢离子升高,钙离子通道的活性受到抑制,使得钙离子内流减少。
氢离子升高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程,氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低,使肌原纤维对钙离子的敏感性和钙离子从肌质网的释放量减少。
再加入NaOH后肠管活动出现相反的情况,及肠管活动增强,这是因为NaOH可以中和氢离子,改变细胞外液的PH值,PH过高过低,收缩幅度及张力都会降低,最适PH时收缩效果最好。
温度的影响:将平滑肌置于25℃台氏液可以看出小肠收缩明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
消化道平滑肌的一般生理特性:
1、消化道平滑肌的电兴奋性较骨骼肌为低。
平滑肌收缩的潜伏期,收缩期和舒张期所占的时间也比骨骼肌的长得多,而且变异很大。
2、消化道平滑肌在离体后,臵入适宜的环境内,仍能进行良好的节律性运动,但其收缩很缓慢,节律性远不如心肌那样规则。
3、消化道平滑肌常保持在一种微弱的持续收缩状态,即具有一定的紧张性。
4、消化道平滑肌能适应实际的需要而作很大的伸展。
5、消化道平滑肌对电刺激较不敏感,但对于牵张、温度和化学刺激则特别敏感,轻微的刺激常可引起强烈地收缩。
注意事项:
1、恒温仪中需加满水,然后打开电源,禁止无水加热,水银温度计应避免与硬物碰撞。
2、实验过程中,必须保持标本的供氧,供氧速度已出现一个个小气泡为宜,充气过猛会导致标本较大幅度的摆动。
3、每次加要钱,必须先准备好更换用的37~38℃台氏液。
4、效应一旦出现,立即换液,换液应沿内壁流入,避免对肠段的直接冲击,干扰记录曲线。
5、待肠段恢复正常活动后再进行下一项操作。
七、实验结论
1.消化道平滑肌具有自律性,但其收缩缓慢,节律性不规则。
2.消化道平滑肌具有一定的紧张性。
3.消化道平滑肌的活动易受温度,PH值及其他化学因素,药物因素的影响。
指导老师签字:
年月日。