康为世纪 CW2088棉花基因组提取试剂盒

专利名称：适用于PCR的棉花基因组DNA快速、批量制备方法
专利类型：发明专利
发明人：张道远,李小双,李海燕
申请号：CN201210514827.5
申请日：20121205
公开号：CN102925430A
公开日：
20130213
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种适用于PCR的棉花基因组DNA快速、批量制备方法，涉及作物育种领域转基因作物的分子检测。

该方法是由取棉花植株顶部的幼嫩叶片装入离心管中，加入提取液和钢珠，对样品进行破碎处理，然后水浴，加抽提液抽提，用异丙醇沉淀DNA，再用乙醇洗涤，沉淀溶于水即为提取的DNA。

本发明解决了棉花基因组DNA提取步骤复杂、耗时耗力的问题，提供了一种能够快速、批量的提取满足PCR检测需求的DNA的方法，能够应用于转基因棉花育种和安全性申报等环节中的分子生物学检测。

申请人：中国科学院新疆生态与地理研究所
地址：830011 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市北京南路40号附3号
国籍：CN
代理机构：乌鲁木齐中科新兴专利事务所
代理人：张莉
更多信息请下载全文后查看。

基因组DNA 提取试剂盒使用说明书此说明书仅适用于此说明书仅适用于基因组基因组DNA 提取试剂盒提取试剂盒，，使用前请务必仔细阅读说明书有关内容使用前请务必仔细阅读说明书有关内容，，若有任何疑问若有任何疑问，，欢迎致电厦门欢迎致电厦门致致善生物科技有限公司生物科技有限公司（（4006618810*************）进行咨询进行咨询，，您也可以登录我们公司的网站您也可以登录我们公司的网站（（ ）了解相关信息或者通过E-mail ( ****************) 与我们进行沟通与我们进行沟通。

一 产品简介基因组DNA 提取试剂盒采用本公司自行研制的磁珠，用于从抗凝全血、新鲜或冻存组织、培养细胞、石蜡包埋组织、唾液、培养细菌等一系列不同样品中分离、纯化高质量的基因组DNA。

我们根据磁珠的独特分离作用，提供了一个极其简便的操作程序：样品裂解、磁珠吸附、洗涤以及洗脱。

在最适的试剂及操作条件下，可获得高质量DNA。

该方法具有简便、快捷、高效等特点，整个提取过程无须使用苯酚、氯仿等有机溶剂。

品名规格 货号 基因组DNA 提取试剂盒100T 4hk001裂解液DL 120ml ×2 磁粒 40ml 洗涤液 50ml ×5 洗脱液 45ml 缓冲液HTL 20ml ×1 二硫苏糖醇（DTT ） 10管，0.18g/管 说明书 1份储存条件储存条件：：本试剂盒所有试剂（除DTT 外）均可以室温保存,应避免阳光直射。

当室温低于15℃时，裂解液中可能有结晶析出，38℃水浴加热几分钟，恢复澄清后即可使用，提取效率不受影响。

DTT 需要于冰箱4℃保存。

本试剂盒有效期为12个月， 请于有效期内使用。

安全信息：试剂中含刺激性化合物，操作时应小心，避免沾染皮肤，眼睛和衣服，若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。

三 使用者自配试剂DTT 溶液使用浓度为1mol/L 。

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明一、试剂盒组成及存储条件：1.试剂盒包括蛋白酶K、缓冲液、洗涤缓冲液、脱水溶液等。

2.试剂盒应存放在4℃以下避光干燥处，避免冻结。

二、实验前准备：1.准备所需的实验耗材和设备，如离心管、恒温振荡器、离心机等。

2.取出全血样品，可以是新鲜全血或已离心制备的全血细胞。

三、DNA提取步骤：1.取出全血样品，用洗涤液洗涤细胞沉淀并离心收集，去除红细胞。

2.加入蛋白酶K将细胞裂解，释放DNA。

3.加入缓冲液和脱水溶液，沉淀DNA并洗涤。

4.最终稀释DNA并保存在适当的条件下。

四、实验注意事项：1.操作过程中需注意无菌操作，避免污染。

2.加入蛋白酶K的量应准确控制，不要过多或过少。

3.混合溶液时需轻轻摇匀，避免气泡的产生。

4.稀释保存DNA时，需使用无核酸酶的载体溶液，如TE缓冲液。

五、质控及结果分析：1.可以通过琼脂糖凝胶电泳或比色法检测提取的DNA质量。

2.检测DNA浓度和纯度，确保提取的DNA适用于后续实验。

3.可以保存提取好的DNA样品，以备后续实验使用。

六、应用领域：1.该试剂盒适用于从全血样品中提取DNA，可用于基因分析、疾病诊断、遗传研究等领域。

2.可以用于个体基因检测、种群遗传学研究、药物反应性研究等。

总结：全血基因组DNA提取试剂盒是用于从全血样品中提取DNA的重要工具，操作简便、提取效率高。

在实验中需注意操作规范，保证提取的DNA质量和纯度。

该试剂盒广泛应用于科研领域，为基因研究和临床诊断提供了有力支持。

希望上述使用说明能够帮助用户正确、高效地使用全血基因组DNA提取试剂盒。

DNAamp PCR Kit基因组扩增试剂盒Version 09062010‐2.4 I 组分说明Catalog no. Number of preps CW055650CW0556A6CW0556B200Buffer SA 15 ml 1.5 ml 50 ml2×PCR MasterMix Proteinase KProtocol 550 μl550 μl180 μl80 μl12×1 ml2×1 ml1注意：2×PCR Master Mix含有Taq DNA Polymerase, 2x Taq PCR Buffer, 3 mM MgCl2, 和 400 µM dNTP mix.II 保存条件Buffer SA室温（15-25℃）干燥条件下可保存12个月；2×PCR MasterMix建议分装后放置于-20℃，可长期保存。

如需频繁使用，可存放于4℃。

III 产品简介本产品专用于从各种常见的样品中快速提取用于PCR扩增的DNA。

裂解液直接用于PCR，使用非常简便。

应用广泛，尤其适用于高通量育种筛选和临床筛选。

可以快速制备PCR模板。

Ⅳ 注意事项1.样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。

2.Buffer SA应放置于室温保存，如放在低温（-20℃或4℃）保存时有沉淀析出，可在56℃水浴中重新溶解沉淀，并摇匀溶液后使用。

3.本产品提供的2×PCR MasterMix为2×母液，使用时需加入模板和引物，并加入灭菌水补足体积，使其浓度为1×即可进行反应。

V 操作步骤以下所有步骤均可以在室温下操作，除非有特殊说明。

1. 第一次使用本试剂盒时，请仔细查看Buffer SA中是否有结晶析出，如有结晶请将裂解缓冲液于室温充分平衡至结晶完全溶解，或在56℃水浴中重新溶解沉淀后使用。

裂解缓冲液溶解后在室温保存。

DNAFect Transfection ReagentDNA转染试剂Version 10272010‐1.0I 组分说明Catalog no. CW0860CW0860ADNAFect Transfection Reagent 0.5 ml 1 ml1Protocol 1II 保存条件2-8℃保存，可以稳定保存一年。

III 产品简介DNAFect是一种高效的阳离子脂质体转染试剂，适用于多种细胞的DNA转染。

可将DNA转入真核细胞中，对于大多数细胞都可以高效转染，且对细胞毒性较低。

IV 注意事项1. 转染试剂使用前务必先震荡摇匀。

2. 转染效率与细胞密度有很大关系，不同实验间应保持一个基本的传代步骤，且应确保转染时细胞没有长满或处于静止期。

一般贴壁细胞转染的最佳细胞密度是80-90%，悬浮细胞的最佳细胞密度为3-5x105细胞/ml，用于转染的最佳细胞密度根据不同的细胞类型或用途而异。

3. 转染时不要在培养基中加入抗生素，否则会导致细胞死亡。

V 操作步骤所有质粒用量均为标准用量。

以下操作步骤以6孔板为例，其他孔板按照表1中所列用量进行实验。

1.贴壁细胞：在转化前18-24小时，在6孔板的每孔中加入大约2ml正常生长培养基（在需要的情况下加入血清和抗生素），接种1-3 x105细胞。

待细胞生长至80-90%满。

悬浮细胞：在准备转染试剂之前，在0.8ml的无血清，无抗生素的培养基里接种1-3 x105细胞注意：由于转染效率对于培养条件极其敏感，所以应在不同的实验建立一个对应的传代流程。

2.在灭菌的离心管中准备以下试剂：溶液A：使用100 ul不含血清和抗生素的的培养基稀释2 ug DNA。

溶液B：充分混匀DNAfectin，使用100 ul不含血清和抗生素的的培养基稀释10-20 ul DNAFect。

3.将溶液 A 和溶液 B 在室温下孵育5分钟。

4.混合溶液 A 和溶液 B，并轻柔使其充分混匀，在室温条件下孵育20分钟。

PurePlasmid Midi Kit高纯度质粒中提试剂盒Version 04282010‐2.1I 组分说明Catalog no. CW0502CW0502ANumber of preps. 50 6Buffer P1 30 ml 5 mlBuffer P2 30 ml 5 mlBuffer N3 40 ml 5 mlBuffer PB 30 ml 5 mlBuffer PW(concentrate) 15 ml 2 mlBuffer EB 15 ml 1 mlRNase A(10mg/ml ) 600 μl 100μlSpin Column CL 50 6Collection Tube(2ml) 50 6Protocol 1 1II 保存条件该试剂盒室温干燥条件下（15-25℃）可保存一年，更长的保存时间可置于2-8℃。

若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀。

单独包装的RNaseA可室温(15-25℃)保存，更长时间保存置于2-8℃，加入RNaseA后的Buffer P1置于2-8℃保存，可以稳定保存半年。

III 产品简介本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，通过新型离心吸附柱在高盐浓度下高效、专一结合溶液中的DNA，提取率达85%–90%。

本试剂盒提取的质粒纯度高，质量稳定，最大限度的去除杂质蛋白和细菌中其它有机化合物的污染，一次可处理5-15ml菌液。

所得质粒可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。

IV 注意事项1.Buffer P1 在使用前先加入RNase A（将试剂盒中提供的RNase A 全部加入），混匀，置于2–8℃保存。

2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。

3.使用前请先检查Buffer P2 和Buffer N3 是否出现浑浊，如有混浊现象，可在37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。

棉花DNA 提取方法DNA 提取采用CTAB 法(Paterson et al., 1993),并稍加修改， 具体步骤如下：(1)将1g 冻叶(或鲜叶)放入预冷的研钵中，加入液氮研磨。

分2次加入5ml 新鲜配制的提取缓冲液(表3-2)，转入10ml 的离心 管中，涡旋混匀，冰浴保存10min 。

10000rpm 离心20min (4°C),弃于沉淀中加入3ml 65 C 预热的裂解缓冲液(表3-3)，并用 ，涡旋混匀，65C 水浴30min ； 加入3ml 氯仿：异戊醇(24： 1)混合液，翻转50次以上， 10000rpm 离心20min (15C)，将上清转入10 ml 的离心管中，加0.6 体积的预冷的异丙醇，缓慢翻转30次，混匀，静置10min ，10000rpm ， 离心10min (RT )，弃上清，于沉淀中加入2 ml 70%的乙醇洗涤，并 转入5 ml 的离心管中，10000rpm 离心5min 。

倒掉上清液，通风干燥 20min ；(4) 加2 ml TE 缓冲液溶解，65C 培养10〜30min ，加等体积的 氯仿：异戊醇(24 : 1)，缓慢翻转50次，混匀，室温静置5min ， 10000rpm 离心 10min ；(5) 上清液转入5ml 离心管中，加0.1体积的3M 醋酸钠(pH 5.2)， 加等体积的异丙醇后翻转30次，放置30min ， 10000rpm 离心5min 。

弃上清液，加1 ml 70%乙醇洗DNA 小团，转入1.5 ml 的离心管中， 10000rpm 离心5min 。

弃上清液，自然通风干燥DNA 小团；(6) 加 200 l TE 缓冲液(10mM Tris/HCl(PH 8.0)，1mM EDTA(PH 8.0)，PH 8.0)溶解 DNA (4C ，30min 以上)，并保存。

(2)铜丝搅松(3)表3-2 DNA提取缓冲液配制Table 3-2 Extration solutions to extract DNA工作液Working Solution ml ml存储液Stock Solution0.35M Glucose34.68g 6.936g Glucose0.1M Tris.HCl5010.0 1.0M Tris.HCl(pH 8.0)5mM Na.EDTA5 1.00.5M EDTA(pH 8.0) 2% PVP10020.010% PVP 1%(V/V)P-Me5 1.0Liquid dd Water34068.0Total500ml100ml表3-3裂解缓冲液配制Table 3-3 Lysis solutions to extract DNA工作液Working Solution ml Ml存储液Stock Solution1.4M NaCl40.908g8.1816g Salt0.1M Tris.HCl5010 1.0M Tris.HCl(pH 8.0)20mM Na.EDTA2040.5M Na.EDTA(pH 8.0) 2%CTAB1002010% CTAB2% PVP1002010% PVP 1%(V/V)P-Me5 1.0Liquid dd Water22545Total500ml100ml。

Marine Animals DNA Kit海洋动物组织基因组提取试剂盒Version 09152010‐2.2 I 组分说明Catalog no. CW2089 CW2089A CW2089BNumber of preps 50 6 200Buffer OTL 15 ml 3 ml 60 mlBuffer GL 15 ml 3 ml 60 mlBuffer GW1（concentrate） 19 ml 3.8 ml 76 mlBuffer GW2（concentrate） 13 ml 2.6 ml 52 mlBuffer GE 15 ml 2 ml 60 mlProteinase K 1.25 ml 150 μl 1.25×4 mlSpin Column DM Collection Tube (2 ml) 505066200200Protocol 1 1 1II 保存条件自收到之日起，该试剂盒室温干燥条件下(15-25℃)可保存一年， Proteinase K置于-20℃保存。

III 产品简介本试剂盒用于多种组织中总DNA的分离纯化，纯化过程无需苯酚或氯仿，无需乙醇沉淀，提取后可以立即使用。

优化的缓冲液体系使裂解液中的DNA高效的结合在吸附柱上，吸附柱可吸附分子量最大为50kb的DNA，同时对100bp 的DNA片段也能有效的回收。

DNA特异性结合到硅胶膜上而其他污染物可流过膜。

PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步有效的洗涤步骤被完全去除，低盐缓冲液或水洗脱下来的纯化DNA可以直接用于AFLP；RFLP；RAPD；Southern Blot；Real-time PCR等下游操作。

IV 注意事项1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。

2．第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。

3．若Buffer GL 和Buffer OTL中有沉淀，可在56℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。

DirectAmp Plasmid Kit直接扩增质粒DNA试剂盒Version 03232010‐1.1I 组分说明Catalog no. CW0508Number of preps/amplifications 50DirectAmp MasterMix 1.2 mlDirectAmp PrimerMix 25 μlDirectAmp Positive Control (pUC19，1ng/μl) 50 μlNuclease-Free Water 1.8 mlProtocol 1II 保存条件自收到之日起，该试剂盒-20℃可保存一年。

III 产品简介本试剂盒可从细菌菌落快速扩增获得高质量质粒DNA，试剂盒中提供的引物可结合在E. coli 中的ColE1复制起始区，通过反向PCR得到完整、线性、双链质粒DNA，几乎没有RNA和内毒素的污染。

无需菌液培养，较常规的质粒提取更加快速简便节省时间，可通过扩大反应体系增加产物量。

产物可直接进行下游测序、酶切分析、亚克隆等操作。

IV 注意事项1.一些培养基成分可能会抑制PCR扩增，这里推荐用SOB培养基以减少对PCR扩增反应的抑制。

SOB培养基配方见附表1。

2.使用之前使DirectAmp MasterMix和DirectAmp PrimerMix完全溶解并充分混匀。

3.反应体系配置过程在冰上进行操作。

附表1： SOB培养基配方成分 含量tryptone 2%Yeast extract 0.5%NaCl 10mMKCl 2.5mMMgCl210mMMgSO410mMagar 2%V 操作步骤1.用无菌的Tip头或接菌环挑取固体培养基上的单菌落。

注意：1） 不要将琼脂和菌落一起挑起以免影响后续的PCR反应。

2） 培养时间小于24小时的菌落中的DNA产量最高，不要将菌培养2天以上。

2.取10µl Nuclease-Free Water于一个0.5ml离心管中，将含有菌落的Tip头或接菌环在液体中搅动5秒钟使菌落重悬。

RNA试剂盒所含药品：Component CW0559S 50 preps DNase I（DNA酶Ⅰ）1000 U 10×Reaction Buffer（10×缓冲液）1000 μlBuffer RL 35 mlBuffer RLC 35 mlBuffer RW1 40 mlBuffer RW2（concentrate）11 ml RNase-Free Water（无RNA酶的水）10 ml50Spin Columns FL with Collection Tubes（含收集管的吸附柱FL）50Spin Columns RM with Collection Tubes（含收集管的吸附柱RM）50RNase-Free Centrifuge Tubes（1.5 ml）（无RNA酶的离心管）自备试剂：β-巯基乙醇、无水乙醇（新开封或提取RNA专用）。

实验前准备及重要注意事项：1．预防RNase污染，应注意以下几方面：1）使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。

2）配制溶液应使用无RNase的水。

3）操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。

2．预防RNase污染，应注意以下几方面：1）使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。

2）玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。

3）配制溶液应使用无RNase的水。

4）操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。

3．提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取的量和质量。

4．Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇，1 ml Buffer RL加10 μl β-巯基乙醇。

加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。

Buffer RLC使用时不需加β-巯基乙醇。

5．第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。

BloodGen Maxi Kit血液基因组大量提取试剂盒Version 05012010I 组分说明Catalog no. CW0542Number of preps 10Buffer GR 126 mlBuffer GL 126 mlBuffer GW1（concentrate）27 mlBuffer GW2（concentrate）17mlBuffer GE 22 mlProtease 5 mlSpin Columns DX 10Collection Tube（50 ml）10Protocol 1II 保存条件自收到之日起，该试剂盒室温干燥条件下(15-25℃)可保存一年。

Protease 置于-20℃保存。

III 产品简介本试剂盒适用于从全血、血浆、血清、骨髓、无细胞体液、淋巴细胞、培养细胞、组织等样本中提取总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA。

可处理3-10 ml的人全血，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染。

所提DNA产量高、质量好，可直接用于PCR、酶切和Southern Blot等实验。

IV 注意事项1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA 片段较小且提取量也下降。

2．本试剂盒最多可以提取3-10 ml全血样品或2 x 108个白细胞。

3．若Buffer GL中有沉淀，可在56℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。

4．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下进行离心。

5．第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。

V 操作步骤此步骤以提取3-5 ml全血为例，如需提取大体积的样品，提取液的量按比例增加，本试剂盒最多可以从10ml全血中提取基因组DNA。

1.在50ml离心管底部加入500μl Protease。

2.加入3-5ml血液样品，不足5ml加Buffer GR补足至5ml，轻轻混匀。

3.向样品中加入6 ml Buffer GL，上下颠倒离心管15次使样品充分混匀，然后剧烈震荡至少1分钟。

组织基因组DNA提取试剂盒（柱式法）使用说明书（Cat#Yu-TD01-1）【产品介绍】组织基因组DNA提取试剂采用国内领先的专利技术合成的纳米磁珠颗粒和多次实验优化的缓冲液体系，能从样品中分离纯化高质量DNA。

在一定条件下，吸附柱表面修饰的基团高效吸附目的DNA，而当条件改变时，吸附柱释放吸附的DNA，达到快速分离纯化DNA的目的。

整个过程安全、无毒、便利，提取的DNA质量稳定、纯度高。

纯化后的DNA适用于多种后续实验。

本试剂盒可以从少量动物组织中分离纯化出高质量、高浓度的DNA。

【产品特点】1. 效率高：DNA提取得率高，操作简便。

2. 安全、无毒害：整个操作过程无需使用苯酚、氯仿等有毒物质，提取环境更加安全。

3. 高纯度：OD260/230在1.5左右，OD260/280在2.0左右。

可直接用于各种分子生物学实验。

【试剂盒组成】【规格】50T/盒【自备试剂】无水乙醇，异丙醇【贮藏与有效期】裂解吸附液和Buffer AW1必须室温（15-25℃）避光保存；磁珠室温保存；其他所有试剂室温保存，有效期为1年。

【注意事项】1、Buffer AW1使用前，加入18mL无水乙醇，混匀，使乙醇含量为60%。

★2、Buffer AW2使用前，加入21mL无水乙醇，混匀，使乙醇含量为70%。

★3、组织最好置于组织核酸（DNA/RNA）保存液（Cat#Yu-TP01）或液氮中保存。

【操作步骤】1、样本的处理1.1、液氮中保存的组织将组织在液氮中磨成粉末后，使液氮充分挥发。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液，充分研磨，混匀。

以下进入步骤2。

1.2、组织核酸保存液中保存的组织取出在组织保存液中保存的组织，加入1mL 无水乙醇洗涤组织两次。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液，充分研磨混匀。

以下进入步骤2。

2、吸取400µL研磨后的裂解吸附液转入1.5mL的EP管中，加入5µL蛋白酶K，60℃1500rpm10分钟。

Version 10112010 TissueGen DNA Kit动物组织基因组提取试剂盒Cat. No. CW0546保存：Proteinase K：-20℃其他组分：室温组分说明Cat. No. CW0546CW0546AKit Size 50 6Buffer GTL 15 ml 3 mlBuffer GL 15 ml 3 mlBuffer GW1（concentrate）19 ml 3.8 mlBuffer GW2（concentrate）13 ml 2.6 mlBuffer GE 15 ml 2 mlProteinase K 1.25 ml 150 μlSpin Column DM 50 6Collection Tube（2ml） 50 6产品简介本试剂盒用于新鲜或冰冻动物组织、细胞、血液或细菌的高纯度总DNA的分离纯化。

纯化过程无需苯酚或氯仿，无需乙醇沉淀，提取后可以立即使用。

优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效结合在吸附柱上，吸附柱可吸附分子量最大为50kb 的DNA片段，同时对100bp的DNA片段也能有效回收。

DNA特异性结合到硅胶膜上而其他污染物可流过膜，PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步有效的洗涤步骤被完全去除。

低盐缓冲液或水洗脱下来的纯化DNA可以直接用于AFLP、RFLP、RAPD、Southern Blot、Real-Time PCR等下游操作。

注意事项1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。

2．如果提取次生代谢产物大量积累或细胞壁厚的细菌培养物的基因组，建议在对数生长期早期收集样品。

3．第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。

4．若Buffer GL 和Buffer GTL中有沉淀，可在56℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。

5．所有离心步骤均应使用台式离心机，在室温下进行离心。

6．如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在加入Buffer GL前加入4 μl DNase-free的RNase A（100 mg/ml），RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：CW0601。