水提法优化广南铁皮石斛多糖的提取工艺
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１ ． ２ ． ２ ． １ ． １ 料 液 比的选 择
酚试剂 、 蒸馏水、 乙醚、 浓硫酸 、 丙酮、 葡萄糖 、 氯仿 、
８ ０ ％ 的三氯 乙酸溶 液 、正丁 醇 （ 分 析纯 ） 。
收 稿 日期 ：２ ０ １ ４—１ １ —１ １
精密称取 １ ０ ｇ 铁皮石斛粗粉 ，固定浸提温度为
干烦渴 ，食 少干呕 ，病后虚热 ，目暗不 明 １ ２ ］ 。铁皮
石斛 已被 列 为 国家二 级 保 护濒 危植 物 。同 时也 被列
普通离心机 （ 上海安亭科学仪器 厂 ） ，Ｓ Ｘ Ｔ 一 ０ ２ 索 氏 提取器 （ 杭州 汇尔仪器有 限公 司 ） ，Ｈ Ｈ 一 ２数显恒 温水 浴 锅 （ 常 州 国华 电器 有 限公 司 ） ，旋 转 蒸 发 仪
摘要 ：在单 因素实验 的基础上 ，通过正交试验优化热水浸提法提取广南铁皮石斛多糖的工艺，利用紫外 分 光光度法测定 多糖含量。结果表 明，铁皮石斛 多糖 热水浸提法 的最佳提取工 艺为浸提次数 ３ 次 ，料液 比 １： ４ ０ ， 浸提温度 ９ ０ ℃ ，此条件下多糖的得率为 ２ ４ ． ６ ％。 关键词 ：铁皮石斛；正交实验；水提法；硫酸苯酚法；醇沉；离心 中图分 类号 ：Ｇ ９ ４ ９ ． ７ １ ８ ． ４ ３ 文献 标志 码 ： Ａ 文章编 号 ：１ ６ ７ ４—９ ２ ０ ０（ ２ ０ １ ５） ０ ３ —０ ０ ０ ８—０ ４
有 限公 司 ） ，电 子 天平 （ 浙 江 凯 丰 集 团有 限公 司 ） ，
是 兰科 （ Ｏ ｒ ｃ ｈ ｉ ｄ ａ ｃ ｅ ａ ｅ ）石 斛 属 （ Ｄｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ）多 年
生附生草本植物 ，干品称为铁皮枫斗 ，是我 国传统
名 中药 【 ｎ，是石 斛 中的极 品。用 于 阴 伤津 亏 ， 口
基金项 目：云南省应用基础研究基金项 目 “ 广南铁皮石斛质量标 准的研究 ” （ ２ ０ １ ２ Ｆ Ｄ ０ ５ ９ ）。 作者简介 ：李程程 ，文 山学 院化学与工程学院助教 ，硕士。
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李程程 ，等 ： 水提法优化广南铁皮石斛多糖 的提取工艺
９ ０℃，浸提次数为 ２ 次 ，选择料液 比为 １： ２ ０ 、１： ３ ０ 、 １－ ４ ０ 、 １－ ５ ０ ，提取 多糖并 对提 取率 进行 测定 。 １ ． ２ ． ２ ． １ ． ２ 浸提 温度 的选 择 精 密称 取 ｌ ０ ｇ 铁 皮 石 斛 粗 粉 ， 固 定 料 液 比为
滤 、挥 干溶 剂 【 ９ 】 一 加 入 蒸 馏水 水浴 浸 提 残 渣 反 复 提 取 一 趁 热 过 滤 一 合 并 滤 液一 减 压 浓 缩 一 脱 蛋
白 取其上 清液加 ４ 倍 体积 ９ ５ ％ 乙醇一冰箱 中静 置过 夜一倾 出上清液一沉 淀物用无水 乙醇 、丙酮、 乙醚依次洗 涤 【 ｌ ０ Ｊ 一将 多糖 提取物加蒸馏水定 容到
其 含量 进 行测 定 ，为 建 立 云南 文 山广 南 铁 皮石 斛 质 量标 准提 供 了理 论依 据 。
１ ． ２ ． １ 工 艺 流程
取铁皮 石斛粗 粉 １ ０ ｇ 一 加石 油醚一 回流提 取 １ ｈ ［ ８ １ 一 挥干溶 剂一 加 ８ ０ ％ 乙 醇一 回流 提取 １ ｈ一 过
是 铁 皮 石 斛 的 主 要 成 分 ，水 溶 性 多 糖 含 量 高 达 ２ ２ ． ７ ％［ ４ １ ，石 斛 生理 活 性 的强 弱与 其 多糖 含 量密 切相
关 ，多糖含量越高 ，质越重，嚼之越有粘性 ，质量 更优 ［ ５ － ７ １ 。 云 南 省 文 山州 广 南 县 铁 皮 石 斛 经 检测 药 用价值可完全媲美野生铁皮石斛 ，该铁皮石斛 已于 ２ ０ １ ２年被 国家 质 检 总 局批 准 为地 理 标 志 保 护 产 品 。 文章用水提法优化广南铁皮石斛多糖的提取 ，并对
（ 杭 州汇 尔仪 器有 限公 司 ） ，Ｓ Ｓ 一 ３循环 式多 用真 空泵 （ 杭州 汇尔仪 器有 限公 司 ） ，Ｕ Ｖ ２ ５ ５ ０型紫 外分 光光度 计 （Ｆ ｔ 本 岛津公 司 ） 。
１ ． ２ 方 法
入《 国家重点保护野生药材物种名录》 《 中华人 民共 和国珍稀濒危植物名录 》［ ３ ］ 。多糖 （ ｐ ｏ ｌ ｙ ｓ ａ ｃ ｃ ｈ ａ ｒ ｉ ｄ ｅ ）
１ ． １ 材料 与试 剂
１ ． １ ． １ 实验 材料
广 南铁 皮石 斛 （ 洗 净 、烘干 、粉 碎 、备 用 ） ：购 于云南 省文 山州 。
１ ． １ ． ２ 实验 试剂 石 油 醚 、８ ０ ％ 乙 醇 、９ ５ ％ 乙醇 、无 水 乙醇 、苯
提取次数 ３ 个实验因素，每个 因素 ４ 个水平进行单 因素实验 。
第２ ８ 卷 第３ 期
２ ０ １ ５年 ６月
文 山学 院学 报
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ Ｗ ＥＮＳ ＨＡＮ ＵＮＩ ＶＥ ＲＳ Ｉ Ｔ Ｙ
Ｖｏ １ ． ２８ Ｎｏ ． ３
Ｊ ｕ ｎ ． ２ ０ １ ５
水提法优化广南铁 皮石斛 多糖 的提取工艺
李程程 ，丁长春
（ １ ． 文 山学院 化 学与 工程 学院 ，云 南 文山 ６ ６ ３ ０ ９ ９ ；２ ． 文 山学院 环境 与 资源 学院 ，云 南 文山 ６ ６ ３ ０ ９ ９）
１ ０ ０ ｍ Ｌ 一 再从容量瓶 中提取 １ ｍ Ｌ 定容 到 １ ０ ０ ｍ Ｌ 待测 。 １ ． ２ ． ２ 多糖 提取工 艺条 件优化 １ ． ２ ． ２ ． １ 单 因素实验 根 据多糖 的提 取特 性 ，选择料 液 比、浸 提温 度 、
１ 材 料 与 方 法
铁 皮石斛 （ Ｄｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｃ ａ ｎ ｄ ｉ ｄ ｕ ｍ Ｗ ａ ｌ １ ． ｅ ｘ Ｌ ／ ｎ ｄ ／ ）
１ ． １ ＿ ３ 仪器与设备 Ｊ Ｆ Ｓ Ｏ 一 １ ０ ０型植物粉碎机 （ 浙江托普仪器有限公 司） ，Ｄ Ｇ Ｘ 一 ８ １ ４ ３ Ｂ电热鼓风干燥箱 （ 杭州汇尔仪器
酚试剂 、 蒸馏水、 乙醚、 浓硫酸 、 丙酮、 葡萄糖 、 氯仿 、
８ ０ ％ 的三氯 乙酸溶 液 、正丁 醇 （ 分 析纯 ） 。
收 稿 日期 ：２ ０ １ ４—１ １ —１ １
精密称取 １ ０ ｇ 铁皮石斛粗粉 ，固定浸提温度为
干烦渴 ，食 少干呕 ，病后虚热 ，目暗不 明 １ ２ ］ 。铁皮
石斛 已被 列 为 国家二 级 保 护濒 危植 物 。同 时也 被列
普通离心机 （ 上海安亭科学仪器 厂 ） ，Ｓ Ｘ Ｔ 一 ０ ２ 索 氏 提取器 （ 杭州 汇尔仪器有 限公 司 ） ，Ｈ Ｈ 一 ２数显恒 温水 浴 锅 （ 常 州 国华 电器 有 限公 司 ） ，旋 转 蒸 发 仪
摘要 ：在单 因素实验 的基础上 ，通过正交试验优化热水浸提法提取广南铁皮石斛多糖的工艺，利用紫外 分 光光度法测定 多糖含量。结果表 明，铁皮石斛 多糖 热水浸提法 的最佳提取工 艺为浸提次数 ３ 次 ，料液 比 １： ４ ０ ， 浸提温度 ９ ０ ℃ ，此条件下多糖的得率为 ２ ４ ． ６ ％。 关键词 ：铁皮石斛；正交实验；水提法；硫酸苯酚法；醇沉；离心 中图分 类号 ：Ｇ ９ ４ ９ ． ７ １ ８ ． ４ ３ 文献 标志 码 ： Ａ 文章编 号 ：１ ６ ７ ４—９ ２ ０ ０（ ２ ０ １ ５） ０ ３ —０ ０ ０ ８—０ ４
有 限公 司 ） ，电 子 天平 （ 浙 江 凯 丰 集 团有 限公 司 ） ，
是 兰科 （ Ｏ ｒ ｃ ｈ ｉ ｄ ａ ｃ ｅ ａ ｅ ）石 斛 属 （ Ｄｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ）多 年
生附生草本植物 ，干品称为铁皮枫斗 ，是我 国传统
名 中药 【 ｎ，是石 斛 中的极 品。用 于 阴 伤津 亏 ， 口
基金项 目：云南省应用基础研究基金项 目 “ 广南铁皮石斛质量标 准的研究 ” （ ２ ０ １ ２ Ｆ Ｄ ０ ５ ９ ）。 作者简介 ：李程程 ，文 山学 院化学与工程学院助教 ，硕士。
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李程程 ，等 ： 水提法优化广南铁皮石斛多糖 的提取工艺
９ ０℃，浸提次数为 ２ 次 ，选择料液 比为 １： ２ ０ 、１： ３ ０ 、 １－ ４ ０ 、 １－ ５ ０ ，提取 多糖并 对提 取率 进行 测定 。 １ ． ２ ． ２ ． １ ． ２ 浸提 温度 的选 择 精 密称 取 ｌ ０ ｇ 铁 皮 石 斛 粗 粉 ， 固 定 料 液 比为
滤 、挥 干溶 剂 【 ９ 】 一 加 入 蒸 馏水 水浴 浸 提 残 渣 反 复 提 取 一 趁 热 过 滤 一 合 并 滤 液一 减 压 浓 缩 一 脱 蛋
白 取其上 清液加 ４ 倍 体积 ９ ５ ％ 乙醇一冰箱 中静 置过 夜一倾 出上清液一沉 淀物用无水 乙醇 、丙酮、 乙醚依次洗 涤 【 ｌ ０ Ｊ 一将 多糖 提取物加蒸馏水定 容到
其 含量 进 行测 定 ，为 建 立 云南 文 山广 南 铁 皮石 斛 质 量标 准提 供 了理 论依 据 。
１ ． ２ ． １ 工 艺 流程
取铁皮 石斛粗 粉 １ ０ ｇ 一 加石 油醚一 回流提 取 １ ｈ ［ ８ １ 一 挥干溶 剂一 加 ８ ０ ％ 乙 醇一 回流 提取 １ ｈ一 过
是 铁 皮 石 斛 的 主 要 成 分 ，水 溶 性 多 糖 含 量 高 达 ２ ２ ． ７ ％［ ４ １ ，石 斛 生理 活 性 的强 弱与 其 多糖 含 量密 切相
关 ，多糖含量越高 ，质越重，嚼之越有粘性 ，质量 更优 ［ ５ － ７ １ 。 云 南 省 文 山州 广 南 县 铁 皮 石 斛 经 检测 药 用价值可完全媲美野生铁皮石斛 ，该铁皮石斛 已于 ２ ０ １ ２年被 国家 质 检 总 局批 准 为地 理 标 志 保 护 产 品 。 文章用水提法优化广南铁皮石斛多糖的提取 ，并对
（ 杭 州汇 尔仪 器有 限公 司 ） ，Ｓ Ｓ 一 ３循环 式多 用真 空泵 （ 杭州 汇尔仪 器有 限公 司 ） ，Ｕ Ｖ ２ ５ ５ ０型紫 外分 光光度 计 （Ｆ ｔ 本 岛津公 司 ） 。
１ ． ２ 方 法
入《 国家重点保护野生药材物种名录》 《 中华人 民共 和国珍稀濒危植物名录 》［ ３ ］ 。多糖 （ ｐ ｏ ｌ ｙ ｓ ａ ｃ ｃ ｈ ａ ｒ ｉ ｄ ｅ ）
１ ． １ 材料 与试 剂
１ ． １ ． １ 实验 材料
广 南铁 皮石 斛 （ 洗 净 、烘干 、粉 碎 、备 用 ） ：购 于云南 省文 山州 。
１ ． １ ． ２ 实验 试剂 石 油 醚 、８ ０ ％ 乙 醇 、９ ５ ％ 乙醇 、无 水 乙醇 、苯
提取次数 ３ 个实验因素，每个 因素 ４ 个水平进行单 因素实验 。
第２ ８ 卷 第３ 期
２ ０ １ ５年 ６月
文 山学 院学 报
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ Ｗ ＥＮＳ ＨＡＮ ＵＮＩ ＶＥ ＲＳ Ｉ Ｔ Ｙ
Ｖｏ １ ． ２８ Ｎｏ ． ３
Ｊ ｕ ｎ ． ２ ０ １ ５
水提法优化广南铁 皮石斛 多糖 的提取工艺
李程程 ，丁长春
（ １ ． 文 山学院 化 学与 工程 学院 ，云 南 文山 ６ ６ ３ ０ ９ ９ ；２ ． 文 山学院 环境 与 资源 学院 ，云 南 文山 ６ ６ ３ ０ ９ ９）
１ ０ ０ ｍ Ｌ 一 再从容量瓶 中提取 １ ｍ Ｌ 定容 到 １ ０ ０ ｍ Ｌ 待测 。 １ ． ２ ． ２ 多糖 提取工 艺条 件优化 １ ． ２ ． ２ ． １ 单 因素实验 根 据多糖 的提 取特 性 ，选择料 液 比、浸 提温 度 、
１ 材 料 与 方 法
铁 皮石斛 （ Ｄｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｃ ａ ｎ ｄ ｉ ｄ ｕ ｍ Ｗ ａ ｌ １ ． ｅ ｘ Ｌ ／ ｎ ｄ ／ ）
１ ． １ ＿ ３ 仪器与设备 Ｊ Ｆ Ｓ Ｏ 一 １ ０ ０型植物粉碎机 （ 浙江托普仪器有限公 司） ，Ｄ Ｇ Ｘ 一 ８ １ ４ ３ Ｂ电热鼓风干燥箱 （ 杭州汇尔仪器
