生化过程的检测与控制(西农)

生化实验操作方法生化实验操作方法是进行生化实验的步骤和操作流程的总称。

生化实验通常用于研究生物体内的生物大分子结构、组成、功能以及生物反应等方面的变化。

下面我将详细介绍生化实验的操作方法。

首先，实验前要做好准备工作。

包括准备实验所需的试剂和仪器设备，并检查仪器设备的工作情况。

同时，要进行实验场地的清洁和消毒，以确保实验的严密性和安全性。

接下来，进行实验前的样品处理。

样品可以是生物体的组织、细胞或者生物体内的某种物质。

样品处理的目的是提取和纯化所需的生物大分子或物质，使其达到实验所需的浓度和纯度要求。

常用的样品处理方法有离心、超声波破碎、酶解等。

然后，进行实验的具体操作。

根据实验的目的和要求，选择相应的实验方法和技术进行操作。

常见的生化实验方法包括蛋白质分离与纯化、核酸提取与分析、酶活性分析、分子克隆、酶联免疫吸附实验等。

在实验操作过程中，要严格按照实验方法和步骤进行操作，掌握好技术细节。

操作时要注意消毒、洗手、穿戴实验服和手套等个人防护措施，确保实验过程的安全。

实验中要保持实验器皿和工作台的清洁，并避免交叉污染。

实验后，要进行实验数据的记录和分析。

实验结果一般通过测定生物大分子的浓度、活性或者结构等指标来进行评价。

实验数据的记录可以通过手动记录、仪器记录或电脑记录等方式进行，同时要对实验数据进行统计和分析，以得到科学可靠的结论。

最后，进行实验材料和实验场地的清理工作。

彻底清洗和消毒实验器皿和设备，将废液和废弃物妥善处理。

同时对实验室进行清洁，保持环境整洁。

总结起来，生化实验操作方法包括实验准备、样品处理、实验操作、数据记录与分析以及实验清理等步骤。

准确掌握操作方法，合理选用适当的实验技术，严格遵循实验操作的规范和安全要求，才能获得可靠的实验结果，并为科研工作或医药领域的应用提供有力的支持。

度、波长等。
➢ 建立适合本室的仪器使用和维护保养程序
A
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➢ ②认真做好室内质控及结果分析 与失控的处理
A
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➢ 室内质控
是由实验室的工作人员采用一系列统计 学的方法，连续地评价本实验室测定工作的 可靠程度，判定检验报告是否可发出的过程， 其目的是检测、控制本实验室测定工作的精 密度（重复性），并检测其准确度的改变， 提高常规测定工作的批间、批内标本检测结 果的一致性。
A
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总胆固醇TC 酶法（仪器和手工）
血清中的胆固醇酯被胆固醇酯酶(CE)水 解成游离胆固醇，后者被胆固醇氧化酶 (COD)氧化成4-胆甾-3-烯酮并产生过氧化 氢，再经过氧化物酶(POD)催化4—氨基安 替比林(4-AAP)与酚(三者合称PAP),生成红 色醌亚胺(Trinder’s反应)。在505nm比色 测定，其吸光度与样品中总胆固醇(TC)含 量成正比。与经过同样处理的校准品进行 比较，即可计算出样品中总胆固醇含量。
A
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血脂类 ➢ 总胆固醇 ➢ 甘油三酯
其它 ➢ 葡萄糖 ➢ 淀粉酶
A
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各项目检验方法
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丙氨酸氨基转移酶 ALT
底物L-丙氨酸与a-酮戊二酸在 ALT作用下生成丙酮酸，生成的丙 酮酸在乳酸脱氢酶作用下转化成L乳酸，同时伴随着NADH的氧化， 引起在波长340nm处吸光度下降， 下降速率与血清中ALT活力成正比
A
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总胆红素TBil
✓ 改良J-G法（仪器和手工）
重氮反应， 600nm比色。
✓ 钒酸盐氧化法（仪器）
总胆红素在表面活性剂TritonX-100 存在下，被钒酸盐氧化，生成胆绿素， 测定450nm处吸光度的减少与总胆红 素的浓度成正比。

生化检验的质量控制（一）引言概述：生化检验是临床医学中一项重要的检验手段，能够提供临床医生对患者的生理状况进行准确评估的依据。

然而，对于生化检验结果的准确性和可靠性，质量控制是至关重要的。

本文将从标本采集、仪器校准、质控品使用、结果解释、异常检测等五个大点阐述生化检验的质量控制方法。

正文：一、标本采集1. 确保标本采集操作规范：标本采集前，操作人员应进行合适的手卫生和佩戴个人防护装备。

2. 采集合适的标本量：确保标本量足够，以避免可能导致结果偏低或偏高的情况。

3. 标本保存和运输要求：确保标本保存在适宜的温度和环境下，避免过久时间或错误的保存和运输导致结果偏差。

二、仪器校准1. 定期进行仪器校准：根据仪器厂家的要求，定期进行仪器的校准，以保持仪器的准确性和可靠性。

2. 校准记录的保存：对仪器校准的结果进行记录和保存，以供追溯和审计。

3. 增加质控测试频率：在仪器校准前后进行质控测试，确保仪器的稳定性和准确性。

三、质控品使用1. 选择合适的质控品：根据检验项目的特点，选择合适的质控品进行测试，以保证结果的准确性和可靠性。

2. 质控品的保存和管理：质控品在使用前后应妥善保存，并参照质控品的说明进行管理，以避免质控品老化或受污染导致结果误差。

3. 质控结果的分析和判读：对质控结果进行及时的统计和分析，判断质控的稳定性和可靠性。

四、结果解释1. 结果解释的标准：根据临床实际需求和指南，制定结果的解释标准，避免结果误读和误诊。

2. 异常结果的分析：对异常结果进行分析和判定，确定是否为技术问题、生理变化或疾病所致。

3. 结果报告的准确性：确保结果的准确性，核对结果报告的信息和标识，避免因信息错误导致结果误读。

五、异常检测1. 技术问题的排查：对异常结果进行技术问题排查，包括设备故障、试剂问题等，及时处理和修复。

2. 生理变化的判断：对结果异常的患者，结合临床相关信息进行综合判断，确定是生理变化还是疾病引起的。

西农高级生化名词解释总结01-02年解释下列名词1.亮氨酸拉链：由伸展的氨基酸组成，每7个氨基酸中的第7个氨基酸是Leu，Leu是疏水性氨基酸，排列在螺旋的一侧，所有带电荷的氨基酸残基排在另一侧。

当2个蛋白质分子平行排列时，Leu之间相互作用形成二聚体，形成“拉链”。

2.蛋白质的结构域：球蛋白分子内存在紧密的球状亚结构，独立的结构单位、独立的功能单位和独立的折叠单位。

3.膜锚蛋白：以共价结合的脂质疏水链插入脂双层分子内，把蛋白质锚定在膜表面，是一种亲水蛋白。

4.糖形：指肽链相同而糖链结构不同的糖蛋白。

5.酶的差示标记:先用底物类似物保护活性中心，加入修饰剂，与活性中心以外的基团反应，然后除去底物类似物，再加入放射性标记的修饰剂，此时修饰剂只能与活性中心的基团反应，测定放射性的位置，即可找到活性中心。

6.核酶：具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂。

7.SH2结构域：最先发现Src家族蛋白质酪氨酸激酶，由大约100个氨基酸组成，两侧为两个α-螺旋，中间是由5个短β-股形成的两个片层，特异性结合磷酸化的酪氨酸残基。

8.氧化磷酸化：NADPH和AFADH2上的电子通过一系列电子传递载体传递给伴随NADPH和AFADH2的在氧化，将释放的能量将ADP磷酸化ATP的过程。

9.DNA的物理图谱：DNA的限制性内切酶酶解片断沿DNA分子的物理位置即其排列顺序10.基因芯片：又陈DNA微阵列，是指固着在固相载体上的高密度DNA微点阵，具体的说就是将大量靶基因或者核苷酸片段有序的高密度的列在载体上。

11.蛋白质组学：直接研究某一物种、个体、器官、组织及至细胞中全部蛋白质，获得整个体系内所有蛋白质组分的生物学和理化参数，并利用软件等手段对其进行分析，揭示其规律。

12.监护蛋白：是一类能够结合新生肽链、调整乃至辅助肽链折叠的蛋白质。

13.DNA的局部构象：04-05年比较下列概念主要异同点1.遗传密码与蛋白质卷曲密码蛋白质卷曲密码（立体密码）：多肽链的氨基酸序列包含指导其折叠成天然构象的信息。

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4．质控品
定义
为质控目的而制备的标本称为质控品。质 控品含有与测定标本同样的基础物质（通常为 小牛血清）其分析物应具有参考值、病理值和 医学决定水平三种水平浓度。
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医学决定水平
➢定义：
是指对临床诊治疾病具有决定性作用的被 分析物的浓度，是临床上按照不同病情给予 不同治疗方案而确定的阈值。
⑥在实验室的有效期应在一年以上。
⑦合理的成本。
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质控品的正确使用和保存
①严格按质控品说明书操作。 ②冻干质控品的复溶要确保溶剂的质量。 ③冻干质控品复溶的加量要准确一致。 ④冻干质控品复溶应轻轻摇匀切忌剧烈震摇。 ⑤质控品应按规定方法保存不用超期质控品。 ⑥质控品应与标本同样测定条件下测定。
生物化学检验的质量控制
广东药学院附属第一医院 陈少莲
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定义：
质量控制（quality control，QC）是利用 现代科学管理的方法和技术检测分析过程中 的误差，控制与分析有关的各个环节，确保 实验结果的准确可靠。也称为实验室质量保 证。
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查发现不同实验室对同一份标本的 实验结果有惊人的误差。
① 要有一支素质较高的质控技术队伍 ② 室间质评要有室内质控的基础 ③ 要有良好质控血清作为调查样本 ④ 样本定值方法可靠，有参考实验室作后盾 ⑤ 统一测定方法及校准品
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（二）室间质评的方法
1．方法
组织若干实验室，共同在规定时间内测定同 一批样品、收集测定结果，作统计分析并按规定评 分。
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（一）分析前质量控制
内容主要为： ① 人员的素质和稳定性 ② 实验室的设置和工作环境 ③ 实验仪器的质量保证 ④ 检测方法的选择和评价 ⑤ 试剂盒的选择与评价 ⑥ 病人准备 ⑦ 标本的采集、处理和储存 ⑧ 实验室用水等

本实验指导从一定角度反映了我国生物化学研究技术目前的水平和状况，内容不求全，而 力求其可靠性和方法实用性。在编写过程中，力求做到原理阐述简明扼要，通俗易懂，方法操 作具体详尽，重复性好，灵敏度高。且注重培养学生严谨的科学态度，提高独立分析、解决问 题的能力，为促成其良好的科研素质奠定基础。
本实验指导的出版是集体劳动的结晶。主要由在教学第一线多年从事酶工程理论与实验课 教学与研究工作的教授、副教授和具有博士、硕士学位的中青年教师等共同编写。正是大家长 期不懈的辛勤劳动以及在编写工作中给予的极大支持，才使本实验指导得以顺利出版。编者在 此一并表示深深的谢意。
（二）每组配置：洗瓶1个，离心管（10ml）2根。 五、玻璃器皿（以组为单位）
试管（ 6 根），100 ml 烧杯（ 1 个），吸管（ 2 个）、玻棒（ 1 个），移 液管或移液器 5ml(1) 、 1ml(2) 、 0.5ml （ 1 ），漏斗（ 3个），滤纸（ 3~6 张），
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试管架（1）
六、实验试剂
酪蛋白是一种蛋白质，它被菠萝蛋白酶降解生成的酪氨酸在紫外光区 275nm 处有吸收峰， 根据测定 275nm 处的吸收值，可以判定菠萝蛋白酶的酶活力。吸收 值的大小与酪氨酸含量的多少有关，吸收值大说明酪氨酸含量高，也就是说菠萝蛋 白酶分解的酪蛋白多，酶活力高。 三、实验材料
新鲜菠萝皮 四、仪器设备
（一）全班共用：（ 1 ） 电力搅拌器1 台；（ 2 ）离心机 4000~1000rpm 4 台；（ 3 ） 754 紫外分光光度计（石英比色杯） 2-4 台；（ 4 ）水浴箱 2 台； （ 5 ）台式天平（离心平衡用） 2 台；（ 6 ）大漏斗1个，纱布1块；（ 8）蒸馏 水瓶（ 25L 或 50L ） 1 个。
八 、结果计算

5、生化质量控制流程引言：生化质量控制流程是在生物化学实验室中进行的一系列操作和措施，旨在确保实验结果的准确性和可靠性。

本文将详细介绍生化质量控制流程的四个部份，包括样品准备、实验操作、数据分析和结果验证。

一、样品准备：1.1 样品采集和储存：正确的样品采集和储存是保证实验结果准确性的关键。

首先，确保样品的采集过程符合规范，避免污染和损坏。

其次，选择适当的储存条件，例如低温、避光和干燥，以保持样品的稳定性和完整性。

1.2 样品预处理：在进行实验之前，可能需要对样品进行一些预处理步骤，以去除干扰物质或者提取目标分析物。

这可能包括离心、过滤、稀释或者提取等步骤。

确保预处理步骤的准确性和一致性，以避免对实验结果产生不良影响。

1.3 样品标记和记录：对每一个样品进行准确的标记和记录是质量控制的重要环节。

在标记样品时，应包括样品编号、日期、采样者和样品类型等信息。

同时，建立一个完整的样品记录系统，包括样品的存储位置、使用情况和处理结果等信息，以便追溯和审核。

二、实验操作：2.1 仪器和试剂准备：在进行实验之前，必须确保所使用的仪器和试剂处于良好的工作状态。

对仪器进行定期的校准和维护，保证其准确性和可靠性。

同时，检查试剂的质量和有效期，避免使用过期或者质量不佳的试剂。

2.2 实验条件控制：在进行实验操作时，必须严格控制实验条件，包括温度、湿度、pH值等。

这些条件的变化可能会对实验结果产生影响，因此需要进行恒温、恒湿和pH调节等措施，以确保实验条件的稳定性和一致性。

2.3 样品分析技术：选择适当的分析技术对样品进行分析是生化质量控制流程中的关键步骤。

根据样品的性质和分析目的，选择合适的分析方法，例如光谱法、色谱法或者质谱法等。

同时，严格按照分析方法的操作步骤进行实验，确保实验操作的准确性和可重复性。

三、数据分析：3.1 数据采集和整理：在实验过程中，必须准确记录实验数据。

对于每一个实验结果，包括样品编号、分析数据和实验条件等信息。

生化质量控制生化质量控制简介生化质量控制是指通过一系列的质量控制措施和方法，确保生化检验结果的准确性和可靠性。

生化检验是临床医学中常用的一种检验方法，可以通过测定血液、尿液和其他体液中的生化指标，辅助医生进行疾病诊断和治疗监测。

而质量控制则是保证生化检验结果准确性的关键环节。

质量控制原理质量控制是通过一系列的控制样本和质量控制品，监控仪器的准确性和稳定性。

通常，质量控制原理遵循以下几个步骤：1. 选择适当的质量控制品：质量控制品应具有与患者样本相似的理化性质，确保能够准确模拟实际样本的特征。

常见的质量控制品包括纯化的标准物质、患者样本中提取的物质或某种代表性样品。

2. 制备质量控制样本：质量控制样本应该经过精确的稀释或配制工作，以保证控制样本的浓度和特性与实际样本相似。

制备过程应详细记录，确保可追溯性。

3. 进行质量控制：控制样本和患者样本在同一实验批次中进行测试。

在仪器分析过程中，质量控制样本和患者样本交替进行测定，以确保仪器的准确性和稳定性。

通过对质量控制样本的多次测定，可以计算出质量控制的均值和标准差，反映了仪器的精确性和稳定性。

4. 判断结果的可靠性：根据质量控制样本的测定结果，可以进行判断是否满足质量控制的要求。

通常使用西格玛规则来判断结果的可靠性，即根据标准差的倍数来确定正常范围。

质量控制方法实施生化质量控制需要采取一系列的质量控制方法，包括以下几个方面：1. 响应性评估：在引入新的生化检验项目或更换仪器的时候，需要进行响应性评估。

这是通过对一组质量控制样本进行重复测试，评估仪器的精密度和准确性。

2. 日常质量控制：在日常实验过程中，需要每天进行质量控制样本的测定。

质量控制样本应体现生化指标的正常范围，并且要覆盖常见的变异范围。

通过不同浓度的质量控制样本进行测定，可以评估仪器的准确性和稳定性。

3. 质量控制标准曲线：建立一条合适的质量控制标准曲线，用于定量分析结果的校准和判读。

质量控制标准曲线通常由多个已知浓度的质控样本构成，通过拟合曲线来进行结果的定量计算。

1、必需氨基酸（一笨蛋来宿舍歇凉）/半必需氨基酸---精氨酸、组氨酸2、茚三酮反应试剂：(DNS-Cl，Dansyl chloride)二甲氨基萘磺酰氯；丹磺酰氯3、Sanger反应试剂：2,4-二硝基氟苯（FDNB/DNFB）产物为黄色的DNP-AA4、Edman反应试剂：苯异硫氰酸苯酯（PITC）生成苯乙内酰硫脲--PTH-AA5、D-\L-AA紫外吸收（280nm 色酪苯）6、蛋白质的平均含氮量为16%，所以蛋白质含量=蛋白氮*6.25（凯式定氮）7、蛋白质的化学结构/共价结构包括肽链数目、端基组成、氨基酸序列和二硫键的位置。

一级结构:指多肽链的氨基酸序列。

8、构型(configuration)是指一个分子由于其中各原子特有的固定的空间排列，而使该分子所具有的特定的立体化学形式。

构象(conformation) 在立体异构体中，取代基团当单键旋转时可能形成的不同的立体结构。

9、维持三维结构的主要作用力：氢键、范德华力、疏水作用、盐桥、二硫键10、蛋白质结构层次：一级结构、二级结构、超二级结构、结构域、三级结构、四级结构11、寡肽：含有几个至十几个氨基酸残基的肽成为寡肽12、四级结构的蛋白质中每个球状蛋白质称为亚基，亚基一般是一条多肽链13、对称性是四级结构蛋白质的重要性质之一14、Motif--超二级结构结构域--domain15、蛋白质二硫键异构酶 PDI 肽基脯氨酰顺反异构酶PPI16、别构效应（allosteric site）：蛋白质与配基结合改变蛋白质的构象，进而改变蛋白质的生物活性的现象。

17、镰刀型贫血病：血红蛋白β亚基N端的第6号氨基酸残基发生了变异Glu变为V al18、BPG—2,3-二磷酸甘油酸ELISA---酶连免疫吸附测定19、蛋白质结构与功能的关系：蛋白质的结构决定功能，功能是其结构的体现1.一级结构与功能的关系蛋白质中的氨基酸序列与生物功能密切相关，一级结构的变化往往导致蛋白质生物功能的变化。

N H 4 OH → N H 3 ↑ + H 2 O
（NH4）2SO4+2NaOH →2NH4OH+Na2SO4 蒸馏出的氨被硫酸吸收： 2NH3+H2SO4 →（NH4）2SO4 过量的硫酸用氢氧化钠滴定：
加热
全氮(% ) =
(NV )H SO − (NV )
2 4
NaOH
× 0.01401× 100 × 1 ×100% 50 W
氮(毫克/100毫升) = NV × 14.01×
100 100 × 25 5
甲基红－溴甲酚绿指示剂(试剂 1－32)。向蒸馏器内缓慢加入 15 毫升 30％氢氧化 钠溶液，碱液流尽前，于漏斗上加少量水，当作水封。通入水蒸汽，蒸馏 15 分钟， 让硼酸液面离开接收管再蒸 2 分钟，以水冲洗接收管。取下三角瓶，以 0.01N 的盐 酸溶液滴定溶液由蓝绿色变为浅紫粉色即为终点。(另做一空白试验，所耗盐酸量 从样品所耗盐酸中扣除。)计算：式中 N——盐酸溶液的当量浓度 V——消耗盐酸溶液的体积（毫升） 14.01——氮的毫克当量（毫克） 100/25——25 为吸取稀释消化液的体积（毫升） 100 为消化液稀释的体积（毫升） 100/5——5 为吸取试液的体积（毫升） 100 为换算成 100 毫升试样中含氮量 4、计算 A 区（氮毫克/100 毫升）=N 总-NBC B 区（氮毫克/100 毫升）=NBC-NC C 区（氮毫克/100 毫升）=NC 高、中、低含氮化合物的百分比：式中
A区百分比 = B区百分比 = C区百分比 =
N N N N
总
− N BC
总
N
BC
× 100% × 100%
− NC
总
N

本章主要内容
❖ 第一节 直接参数的检测与控制 ❖ 第二节 生物传感器 ❖ 第三节 生产过程中的染菌及其控制
教学时数：4学时 教学目的与要求：了解生化过程参数的分类及生物 传感器的种类及特点，能利用生物传感器对生化反 应中的直接参数进行检测，并通过参数判断生产过 程是否染菌，掌握杂菌染菌的途径及挽救； 教学重点：直接参数的检测、生产过程中的染菌及 其控制； 教学难点：直接参数的检测、生产过程中的染菌及 其控制；
定，再关闭自控装置，测量温度随时间上升
的速率S。 Q发酵=(M1C1+M2C2)S/V
M1----------发酵液重量;M2----------发酵 罐重量;C1----------发酵液比热;C2---------发酵罐材料比热;S----------温升速率 Q发酵---------发酵热
(3)根据化合物的燃烧值计算发酵过程中生物热的 近似值。
渗出，增加了染菌的机会。
4. 由于泡沫的液位变动，以及不同生长周期微 生物随泡沫漂浮，使微生物生长的环境发生了 变化，影响了微生物群体的效果，增加了微生 物群体的不均一性。 5. 影响了搅拌的正常进行，妨碍了微生物的呼 吸。 6. 使微生物提早自溶。 7. 为了控制泡沫，需加入消泡剂。对产物的提 取不利。
液位电极控制消泡剂的流加 液位电极是根据空气与带有发酵液的泡沫 导电率不同的原理制造。 采用双位式的控制方法，当反应物液面达 到一定的高度时，自动打开消泡剂的阀门，
当液面降回到正常时，自动关闭消泡剂 的阀门。
第二节 生物传感器
传感器（电极或探头）：能感受规定的被测量并 按照一定的规律将其转换成可用信号的器件或装 置，它通常由敏感元件、转化元件及相应的机械 结构和线路组成。 生物传感器：是利用酶、抗体、微生物等作为敏 感材料，将所感受的生物体信息转换成电信号进 行检测的传感器。

I. pH测量的意义
1. pH对菌体细胞的生长和代谢的影响
2) pH变化对酶的生长影响，例对 E.Coli菌虽然在 pH4.5—9之间能生长，但对菌体脱氨酶和脱羧酶的 形成则有严重的影响。
I. pH测量的意义
1. pH对菌体细胞的生长和代谢的影响
3) 即使酶的体系已形成，但由于环境pH的不同，使酶 的活性受到抑制，因而改变了代谢产物的形成。
氯化银电极电位的温度系数随参比电解质溶液 中氯离子浓度增大而减小，故氯化银电极通常都充有 较高浓度的氯化钾溶液。
3. 测量电极
B. 指示电极
对指示电极的基本要求是其电极电位值随被测 溶液氢离子活度的变化而变化。原则上讲，任何与氢 离子可逆反应的电极都可以用来测定溶液中的pH值。 如铂／氢电极、金属电极等。
I. pH测量的意义
2. 菌体细胞的生长和代谢对环境pH的影响
所以，培养液pH变化是特定环境条件下微生物 生命活动的综合结果，在同一时间也许既存在pH上升 的因素，又存在使pH降低的可能，最后趋势则决定于 这些因素的综合结果，如果不对pH加以控制调节的话， 就要影响过程的进行。
pH对菌体细胞的生长 和代谢的的关系
E＝E* － D × pH
2. pH测量原理
式中 E ——测量电池产生的电动势； E*—— 测 量 电 池 的 电 动 势 常 数 （ 其 与 温 度 有
关）； pH——溶液的 pH值； D——测量电极的响应级差（其与温度有关）。 因此，若已知E*和D，则只要准确地测量两个电
极间的电动势，就可以测得溶液中的pH值了。
根据电极法原理构成的测量系统，无论是实 验室或工业用测量系统，它应有发送器（即电极部 分）和测量仪器（如变送器等）两大部分组成。

生化反应速率的测量与控制生化反应速率是指化学反应中发生物质转化的速度，通常通过反应速率常数来表示。

在许多生物过程中，比如酶反应和代谢过程中的反应速率都是非常重要的。

因此，测量和控制生化反应的速率是很有必要的。

一、测量生化反应速率的方法1.滴定法：滴定法是一种测量化学反应速率的经典方法，主要利用反应产物或反应物的滴定来确定反应速率。

优点是测定结果准确，不需要特殊的设备，但实验过程可能较为繁琐，而且并不适用于所有类型的生化反应。

2.比色法：比色法是利用反应物或产物的光学性质来确定反应速率的方法。

比如一些酶催化的反应会引起光吸收或散射现象，可以通过光谱法或颜色反应来测定反应速率。

比色法的优点是快速简便，但需要准确的光学设备。

3.电化学法：电化学法利用电化学反应的原理来测定生化反应速率。

一些电化学反应会产生电流或电压变化，可以通过电化学计来测定反应速率。

电化学法的优点是灵敏度高，可以用于测量微量反应物或产物，但需要精确的电化学仪器，并且对反应条件要求高。

4.连续荧光测定法：连续荧光测定法是一种新近发展的测量生化反应速率的方法，主要通过荧光分子对反应物或产物的高效响应来实现。

这种方法优点是快速、准确、精度高，能够测量微量分子的浓度和反应速率，而且不需要特殊的仪器和样品处理。

二、控制生化反应速率的方法1.温度控制：生化反应速率常数和温度密切相关，通常反应速度会随着温度的升高而加快。

因此，控制温度是控制生化反应速率的重要方法。

不同的生化反应速率温度依赖性不同，通常需要根据具体情况采用不同的升温或降温速率。

2.酶浓度控制：在许多生化反应中，酶作为催化剂对反应速率起着至关重要的作用。

调节酶的浓度可以改变反应速率，因此控制酶浓度是一种有效的方法。

3.反应条件控制：生化反应速率通常受到一系列反应条件的影响，如pH、离子强度、溶液浓度等。

通过调节这些条件可以影响生化反应的速率，从而控制反应速率。

比如，可以通过调节pH来改变酶的活性和选择性，从而影响反应速率。

因为上传问题，特别添加了三个无关的图片，不然没法让其他人阅读自己下完后删除即可多打些无感的字，减小与另一个的相似率一、绪论1、基本概念生化过程：即(发酵过程)，利用微生物细胞或酶转化基本原料合成目的产物的过程。

状态变量：可显示过程状态及其特征的参数，一般指反应生物浓度、生物活性及反应速率的参数。

测量变量：指那些可以测量的状态变量。

操作变量：所谓的环境因子或操作条件，而改变这些环境因子和操作条件，可以造成生化过程状态变量的改变。

构造模型：包含胞内代谢网络在内，细致到考虑细胞内构成成分变化的数学模型。

非构造模型：介于构造模型和状态模型之间,把生物过程的理论定理与经验公式结合起来，生化过程控制和优化中使用最广泛的模型。

状态模型：完全基于生物过程状态变量和操作变量时间序列数据的模型。

2、简答题1、简述生化过程的控制特点。

答：(1)不需太高的控制精度，除温度、pH感受强的菌株发酵过程外，控制指标不需精确也不可能100%地控制在某一水平；(2)生物过程的各状态变量之间存在一定的连带关系，难以检测的生物量在一定程度上可通过易检测的物理化学量间接检测，因此相当部分的生化过程控制是一种间接的优化和控制；(3)相当数量的工业规模或实验室规模的生物过程，没有合适的定量数学模型可循，控制和优化操作必须依靠操作人员的经验和知识。

2、实现发酵过程的优化与控制，必须解决的5个问题答：(1)系统动力学；(2)生物模型；(3)传感器技术；(4)适用于生物过程的最优化技术；(5)计算机─检测系统─发酵罐之间的接口技术(如神经网络、专家系统)3、生化过程控制理论存在的难点。

答：(1)无论是前馈还是反馈控制，都必须建立在在线监测的各种参数上，但适用于生化反应过程的传感器的研究大大落后于生物工业的发展。

(2)各种微生物具有独特的生理特性、生产各种代谢产物又有各自的代谢途径，应用于生化反应过程的控制理论不具有普适性。

(3)控制理论自身的局限，至今不能模拟生化反应过程的高度非线性的多容量特性。

（二）室内质控的实际操作
1、确定质量目标
质量目标是实验室选用的质控方法 （包括质控规则和质控品测定的个数）所 需达到的目标，可以用总允许误差的形式 表示。目前中国尚未确立各项目的总允许 误,可参考美国和欧洲提出的各项目可接 受的允许误差范围。
2、设定靶值和控制限
实验室应使用自己现行的测定方法， 测定新批号质控品各个项目的靶值，定值 质控品的标定值只能作为确定靶值的参考。 同时应确定新批号质控品的控制限，控制 限通常以标准差倍数表示。
-- 质控品平均分布于整个批内，可监测漂移。 -- 随机插于患者标本中，可检出随机误差。 注：应在报告患者结果前评价质量控制结果。质控 品放在校准品后面，得到的质控结果是对分析不精 密度的不真实的估计，对批量标本检测时出现的偏 倚或漂移无法作出估计。
6、失控原因分析及纠正措施
1）填写失控报告 上报实验室负责人； 2）简单迅速地回顾整个操作过程，分析查
用以查明人为误差，每一步都应认真仔细操作， 以查明失控原因；另外，这一步还可以查出随 机误差，如是随机误差则重测的结果应在允许 范围内(在控)，若重测结果仍不在允许范围则 可以进行下一步操作。
② 新开一瓶质控品（图3），重测失控项目 如果
新开的质控血清结果正常，那么原来那瓶质控血 清可能过期或在室温放置时间过长而变质，或者 被污染，若结果仍不在允许范围，则进行下一步。
不够;12s为控制规则，对误差识别的特异性不够。）
+3s +2s
x
－2s质控技术可揭示一些潜在的质量问 题。其中有些规则对随机误差敏感，有些对系统误 差敏感。
1） 方法 Westgard用一组质控规则来判定分
析是否在控，推荐使用六个不同的规则来判断分析

组织细胞破碎技术方法简介细胞破碎，即破坏细胞壁和细胞膜，使细胞内或亚细胞产物最大程度的释放或转移到液相。

以便浸提出来进行后续的操作。

技术方法:化学法：渗透冲击、酶消化法、增溶法、脂溶法、碱处理法机械法：捣碎机法(片型匀浆法)、研磨法、超声波法、匀浆法(孔型匀浆法)、珠磨破碎思考题1 常用的细胞破碎的方法有哪些？机械法，酶法，化学法，物理法2 有机溶剂法破碎细胞原理，常用的有机溶剂有哪些有机溶剂溶解细胞壁并使之失稳。

比如笨、甲苯、氯仿、二甲苯及高级醇等层析技术方法简介层析技术是利用混合物中各组分理化性质的差别（分子亲和力、吸附力、分子的形状和大小、分配系数等），使各组分以不同程度分布在两个相，其中一个是固定相，另一个是流动根据交换剂的属性、层析的分离的原理可将层析分类如下相，从而使各组分以不同速度移动而使其分离的方法。

分类（1）分配层析（2）离子交换层析（3）凝胶过滤层析（4）亲和层析（5）吸附层析一、离子交换层析㈠基本流程上样：洗脱：pH梯度洗脱；或离子强度梯度洗脱检测、记录分部收集。

㈡离子交换分离基本原理不同氨基酸（蛋白质、酶、蛋白激素等）等电点不同，在同pH条件下带电性能不同，与交换剂结合力大小不同，结合较松的先被洗脱出来，结合较紧的后被洗脱出来，从而被分开。

阳离子交换剂交换原理：RC-C1++C2+ RC-C2++C1+㈢离子交换层析过程中的关键技术1、交换剂处理①漂洗目的是除去杂质用倾倒法除去细小颗粒（这一步一定要到做位。

留下细小颗粒会堵塞层析柱下的尼龙网眼。

）直至水清澈无色。

②处理用酸碱轮换浸泡，以便使交换剂带上需要的平衡离子。

③平衡经处理后，要用大量的水悬浮交换剂，最后用缓冲液平衡2、柱的选择与装柱装填均匀，松紧一致，没有气泡，没有裂缝。

3、上样要求加入样品液的体积一般应小于床体积的1/3。

4、洗脱剂原则四条：①阴离子交换剂选用阳离子缓冲液（如氨基乙酸、铵盐、Tris等），阳离子交换剂选用阴离子缓冲液（如乙酸盐、磷酸盐等），以防缓冲离子参与交换过程，降低交换剂的交换容量。

5、生化质量控制流程生化质量控制流程是在生物化学实验室中进行的一系列操作和措施，旨在确保实验数据的准确性和可靠性。

本文将从引言概述、正文内容和总结三个方面，详细阐述生化质量控制流程。

引言概述:生化质量控制流程是生物化学实验室中不可或缺的一环，它对实验结果的准确性和可重复性起着至关重要的作用。

通过严格遵循一系列的质量控制步骤和标准，实验室能够确保实验数据的可靠性，并提高实验结果的可比性和可重复性。

下面将从五个大点来详细阐述生化质量控制流程。

正文内容:1. 样品准备1.1 样品收集和保存：样品的收集和保存是生化质量控制流程中的重要步骤。

样品的收集应遵循标准操作程序，并确保样品的完整性和纯度。

同时，样品的保存应遵循适当的条件和方法，以防止样品的降解和污染。

1.2 样品处理：样品处理是生化质量控制流程中的另一个重要环节。

在进行实验之前，样品可能需要进行预处理，如离心、过滤、稀释等。

样品处理的目的是去除干扰物质，提高实验的准确性和可靠性。

2. 试剂质量控制2.1 试剂选择：在进行生化实验之前，必须选择合适的试剂。

试剂的选择应基于其纯度、稳定性和适用性等因素。

同时，试剂的来源也应可靠，以确保试剂的质量和一致性。

2.2 试剂标定：试剂标定是生化质量控制流程中的关键步骤。

通过准确标定试剂的浓度，可以确保实验结果的准确性和可比性。

试剂标定应遵循标准操作程序，并使用适当的标准物质和仪器进行。

3. 仪器校准和验证3.1 仪器校准：仪器校准是生化质量控制流程中的重要环节。

通过定期校准仪器，可以确保仪器的准确性和可靠性。

仪器校准应遵循标准操作程序，并使用适当的校准物质和方法进行。

3.2 仪器验证：仪器验证是确保仪器在使用过程中的可靠性和稳定性的一项重要任务。

通过仪器验证，可以验证仪器的性能是否符合规定要求，并进行必要的调整和修正。

4. 实验操作控制4.1 实验标准操作程序：实验室应建立标准操作程序，并确保实验人员严格遵守。