LY294002对人胃腺癌细胞株BGC-823糖酵解水平的影响及其机制探讨
袁济钢;陈敏;李旭;赵燕;沈永华;邹晓平
【期刊名称】《胃肠病学》
【年(卷),期】2013(018)005
【摘 要】背景:有氧糖酵解是肿瘤细胞的特征性表型之一,靶向糖酵解有望成为一种有效的肿瘤治疗策略.M2型丙酮酸激酶(PKM2)在肿瘤组织中呈高表达,参与肿瘤细胞的有氧糖酵解.缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是调控肿瘤细胞糖酵解相关基因表达的重要转录因子,而PI3K信号在肿瘤细胞中可上调HIF-1α表达.目的:探讨PI3K特异性抑制剂LY294002对人胃腺癌细胞增殖和糖酵解水平的影响及其可能机制.方法:以不同浓度LY294002(10~100 μmol/L)在不同条件下(常氧或缺氧)处理人胃腺癌细胞株BGC-823,CCK-8实验和流式细胞分析检测细胞增殖和细胞凋亡,蛋白质印迹法检测p-Akt、p-mTOR、HIF-1α、PKM2表达,比色法检测反映糖酵解水平的胞内乳酸脱氢酶活性和胞外乳酸浓度.结果:LY294002可呈浓度和时间依赖性地抑制BGC-823细胞增殖,在较高浓度时可诱导细胞早期凋亡.LY294002可呈浓度依赖性地抑制p-Akt、p-mTOR、HIF-1α表达,在较高浓度时可抑制PKM2表达,同时降低糖酵解水平.缺氧诱导可消除LY294002对HIF-1α、PKM2表达和糖酵解水平的抑制作用.结论:LY294002可通过阻断PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制人胃腺癌细胞增殖及其糖酵解水平,而HIF-1α介导了糖酵解的抑制过程.%Background:
Aerobic glycolysis is considered as a characteristic phenotype of cancer
cells, which makes it to be a promising target for cancer therapy. Pyruvate
1064
Guangxi Medical Journal $ May. 2018 $
Vol. 4Q
$No. 9
论著•基础研究
芬太尼及Ly294002对人肝癌HepG2
细胞增殖及迁移的抑制作用及其机制！
陈玲珊"$2
伍天影"$2
李志强"$2
陈冠宇"$2
周成茂3
阮林1
(
1广西医科大学附
属肿瘤医院麻醉科，
南宁市
530021，
电子邮箱:
441777635@qq
.c〇m;
2广西医科大学研究生院，
南宁市
530021;
3广东省肇庆市医学专科学校附属医院麻醉科，
肇庆市
526000)
【
摘要】
目的探讨芬太尼及
Ly294002对人肝癌
HepG2细胞增殖、迁移的抑制作用及其机制。方法将对数生长期
的人肝癌
HepG2细胞分为芬太尼组、
Ly294002组、联合组和对照组，分别给予
500 ng/ml芬太尼、
25 !mol/L Ly294002、
500 ng/ml芬太尼联合
25 !mol/L Ly294002、等量培养基进行干预。用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖活性，用吸光度
# {
表示，划痕实验观察细胞迁移能力并计算愈合率，流式细胞仪观察细胞周期和细胞凋亡情况，实时荧光定量
PC@法检测细
胞中人第
10号染色体缺失的磷酸酶（！
7)N)m@NA和核转录因子
KB(NQ/S)m@NA的表达水平。结果芬太尼组、
L〇
94002组和联合组的
#值、愈合率、（
S + G2/M)期细胞比例、
NQ/- m@NA相对表达水平均低于对照组（均！
<0. 05)，而
期细胞比例、凋亡率、！
4)N 〇
@NA相对表达水平高于对照组（！
<0. 05);联合组的
#值、愈合率、（
S + G2/M)期比例、
mRNA相对表达水平低于芬太尼组及
[7294002组
(！
<0.05)，而
G。
/[期细胞比例、凋亡率、
o@NA相对表达水平
高于芬太尼组及
Ly294002组（！
<0. 05)。结论芬太尼和
Ly294002均可抑制人肝癌
HepG2细胞增殖和迁移，且两者有协
PI3K抑制剂LY294002对结肠癌细胞SW480细胞株的影响及机制的开题报告
研究背景：
结肠癌是一种常见的恶性肿瘤，也是全球范围内的主要死因之一。目前，对于晚期结肠癌缺乏有效的治疗方法，因此需要开发新的治疗策略。PI3K（磷脂酰肌醇3激酶）信号通路在结肠癌的发生和发展中发挥重要作用，因此PI3K抑制剂被认为是治疗结肠癌的潜在药物。
研究目的：
本研究旨在探讨PI3K抑制剂LY294002对结肠癌细胞SW480的生长、凋亡以及相关的机制。
研究方法：
使用MTT法测定LY294002对SW480细胞的生长抑制作用，实时荧光定量PCR检测LY294002对PI3K/Akt信号通路的影响，使用Western blot法检测凋亡相关蛋白表达的变化，荧光显微镜观察细胞凋亡情况。
预期结果：
预计LY294002会抑制SW480细胞的生长，并抑制PI3K/Akt信号通路，导致细胞凋亡。通过Western blot法和荧光显微镜观察，预计可以发现凋亡相关蛋白（如caspase-3、Bax、Bcl-2等）的表达变化以及细胞凋亡现象。
研究意义：
本研究对于研究结肠癌的发生和发展机制、发现新的治疗方法具有重要意义。同时，对于PI3K抑制剂LY294002这种潜在药物的研究也具有重要的指导意义。
顺铂治疗肿瘤的原理是
顺铂（Cisplatin）是一种常用的化疗药物，广泛用于各种类型的肿瘤治疗中。其治疗原理主要涉及DNA结构的改变和损伤，进而导致细胞凋亡和增殖抑制。
顺铂通过与DNA发生化学反应而起效。它主要与DNA中的鸟嘌呤（G）和胸腺嘧啶（T）形成共价键结合。这种结合导致DNA双链断裂，并干扰 DNA的复制和转录，从而阻碍了细胞的DNA合成和修复过程。此外，顺铂还可以与细胞核蛋白结合，干扰细胞的重要信号通路和相关生物分子的功能。
细胞对顺铂的反应与其DNA修复机制有关。细胞中有一系列的修复系统，用于修复 DNA中的损伤。顺铂能够抑制两种主要的DNA修复机制：核苷酸切除修复和重组修复。核苷酸切除修复是一种通过切除损伤 DNA片段并用新的 DNA片段替换来修复 DNA的机制。重组修复则涉及同源重组和非同源重组，以修复复杂的 DNA损伤。由于顺铂干扰了这些修复机制，细胞的 DNA修复能力被大大削弱，进而导致细胞死亡。
细胞凋亡是另一个顺铂抗肿瘤作用的重要机制。顺铂通过激活细胞凋亡途径，将肿瘤细胞引向死亡。在顺铂治疗中，细胞通过激活细胞内死亡受体或细胞内红外表达，导致半胱氨酸蛋白酶家族活化，最终产生一系列的信号级联反应，包括去磷酸化的 p53通过上调Bax、p21等促进细胞凋亡的因子，并下调抑制凋亡的因子，如Bcl-2，从而触发细胞凋亡。
除了直接影响肿瘤细胞的生长和生存机制，顺铂还可以影响肿瘤微环境。有研究表明，顺铂能够抑制肿瘤相关的血管生成，减少肿瘤微环境中的血管密度。这主要是通过抑制肿瘤中内皮细胞增殖和迁移，并阻断血管生成的信号通路来实现的。
顺铂在肿瘤治疗中是一种广泛使用的药物。然而，它也具有一些副作用，包括骨髓抑制、肾脏损伤、神经毒性和耳毒性等。因此，在使用顺铂时需要仔细监测患者的药物剂量和副作用，并在治疗中对其进行合理的管理。
总之，顺铂是一种通过与DNA发生化学反应而抑制DNA合成和修复的化疗药物。通过这种机制，顺铂可以诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖，从而抑制肿瘤的生长和扩散。此外，顺铂还可以通过影响肿瘤微环境来进一步增强其抗肿瘤效果。虽然顺铂在治疗中具有一些副作用，但其疗效在肿瘤治疗中得到广泛认可。
