人体疟原虫红内期形态
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(吉氏染色剂染色)
(吉氏染色剂染色)
疟原虫在人体内的发育场所依次为肝细胞内及红细胞内,现以间日疟原虫为例,描述如下:1.早期滋养体(环状体)
胞质纤细呈环状,中间为一空泡,核位于一侧,形似戒指状,故称环状体。
红细胞为正常大小。
2.晚期滋养体(大滋养体)
虫体明显增大,胞质增多,并伸出不规则伪足。
虫体胞质中出现细小杆的疟色素。
被寄生的红细胞胀大,颜色变浅,开始出现被染成红色的小点-薛氏点。
3.裂殖体
(1)未成熟的裂殖体
虫体逐渐变圆,空泡消失,核开始分裂,细胞质未分裂,疟色素分散。
红细胞胀大色浅,有薛氏点。
(2)成熟裂殖体
核分裂到12~24个时,胞质也随之分裂,一团细胞质包绕一个核,形成12~24个椭圆形的裂殖子,疟色素集中成堆,虫体充满胀大的红细胞,胞浆出现红染的薛氏点。
4.配子体
配子体呈圆形或椭圆形,胞质无空泡,内有均匀散在的疟色素。
雌配子体:核小,较致密,深红色,常位于虫体的一侧,胞质深蓝色。
雄配子体:核大而疏松,淡红色,位于虫体中央,胞质浅蓝略带红色。
(吉氏染色剂染色)
(吉氏染色剂染色)
(吉氏染色剂染色)。
人体疟原虫红内期形态涂制于玻片上的红内期疟原虫,经吉氏染色后核呈红色,胞质呈蓝色,疟色素呈黄褐色或深褐色,不着色部分为空泡。
一、薄血膜中疟原虫形态薄血膜涂制均匀时疟原虫着色良好,结构清晰,便于观察形态和鉴别虫种。
薄血膜上各期红内期疟原虫的形态见表1。
表1 薄血膜4种疟原虫形态(吉氏染剂染色)间日疟原虫恶性疟原虫三日疟原虫卵形疟原虫被寄生红细胞大小形状颜色斑点胀大褪色薛氏点,红色,细小数多正常正常或稍紫茂氏点,红色,粗大数少正常或缩小正常齐氏点淡红色,微细正常或稍胀大卵圆形或边缘呈伞矢状褪色薛氏点,粗大数多早期滋养体(环状体)大小核胞质色素较大,约占红细胞直径的1/31个较薄无较小,约占红细胞直径的1/61或2个纤细无中等1个较粗厚偶见细小褐色颗粒中等1个较粗厚无大滋养体大小核胞质色素较大1个阿米巴样,常含空泡黄褐色,细小,杆状,散在分布较小1或2个圆形,空泡不显著黄褐色,细小,结成团块后,呈黑褐色较小1个带状,空泡不显著深褐色,粗大,沿边缘分布较小1个圆形,空泡不显著棕黄色,较粗大未成熟裂殖体大小核胞质色素较大2个以上圆形或不规则,空泡消失黄褐色,分布不匀较小2个以上圆形,空泡消失黑褐色团块状较小2个以上圆形,空泡消失深褐色,分布不匀较小2个以上圆形或卵圆形,空泡消失棕黄色,分布不匀成熟裂殖体大小裂殖子色素大于正常红细胞12~24个,常为16~18个,排列不规则,较大黄褐色,常聚集一侧小于正常红细胞8~32个,常为8~18个,排列不规则,较小黑褐色团块小于正常红细胞6~12个,常为8个,常排列如菊花状,较大深褐色,常聚集中央小于正常红细胞6~12个,常为8个,排列不规则,较大棕黄色,聚集中央或一侧雌配子体大小形状核胞质色素大于正常红细胞圆形1个,较小,致密,深红色,位于一侧深蓝色黄褐色,均匀散在较大新月形,两端尖锐1个,较小,深红色,位于中央深蓝色黑褐色,紧密分布于核周围小于正常红细胞圆形1个,较小,深红色,位于一侧深蓝色深褐色,均匀散在小于正常红细胞圆形1个,较小,深红色,位于一侧深蓝色棕黄色,散在雄配子体大小形状核胞质色素大于正常红细胞圆形1个,较大,疏松,淡红色,位于中央浅蓝色黄褐色,均匀散在较大腊肠形,两端钝圆1个,较大,淡红色,位于中央浅蓝色或淡红色黑褐色,松散分布于核周围小于正常红细胞圆形1个,较大,淡红色,位于中央浅蓝色深褐色,均匀散在小于正常红细胞圆形1个,较大,淡红色,位于中央浅蓝色棕黄色,散在有时大滋养体与即将要成熟的雌配子体形态相似,对两者的鉴别见表2。
形态发育期疟原虫在红细胞内生长、发育、繁殖,形态变化很大。
一般分为三个主要发育期。
(1)滋养体(trophozoite):为疟原虫在红细胞内摄食和生长、发育的阶段。
按发育先后,滋养体有早、晚期之分。
早期滋养体胞核小,胞质少,中间有空泡,虫体多呈环状,故又称之为环状体(ring form)。
以后虫体长大,胞核亦增大,胞质增多,有时伸出伪足,胞质中开始出现疟色素(malarial pigment)。
间日疟原虫和卵形疟原虫寄生的红细胞可以变大、变形,颜色变浅,常有明显的红色薛氏点(Schuffner’s dots);被恶性疟原虫寄生的红细胞有粗大的紫褐色茂氏点(Maurer’s dots);被三日疟原虫寄生的红细胞可有齐氏点(Ziemann’s dots)。
此时称为晚期滋养体,亦称大滋养体。
(2)裂殖体(schizont):晚期滋养体发育成熟,核开始分裂后即称为裂殖体。
核经反复分裂,最后胞质随之分裂,每一个核都被部分胞质包裹,成为裂殖子(merozoite),早期的裂殖体称为未成熟裂殖体,晚期含有一定数量的裂殖子且疟色素已经集中成团的裂殖体称为成熟裂殖体。
(3)配子体(gametocyte):疟原虫经过数次裂体增殖后,部分裂殖子侵入红细胞中发育长大,核增大而不再分裂,胞质增多而无伪足,最后发育成为圆形、卵圆形或新月形的个体,称为配子体;配子体有雌、雄(或大小)之分:雌(大)配子体虫体较大,胞质致密,疟色素多而粗大,核致密而偏于虫体一侧或居中;雄(小)配子体虫体较小,胞质稀薄,疟色素少而细小,核质疏松、较大、位于虫体中央。
超微结构(1)裂殖子:红细胞显微镜下的疟原虫内期裂殖子呈卵圆形,有表膜复合膜(pellicular complex)包绕。
大小随虫种略有不同,平均长1.5µm,平均直径1µm。
表膜(pellicle)由一质膜和两层紧贴的内膜组成。
质膜厚约7.5µm,内膜厚约15µm,有膜孔。
疟原虫形态四种疟原虫在红细胞内的各期形态不尽相同,是诊断、鉴别各种疟原虫的依据。
瑞氏染色或姬氏染色后疟原虫的细胞质呈蓝色,细胞核呈红色,疟色素呈棕褐色。
现将薄血片染色后的间日疟原虫各个时期形态(滋养体、裂殖体、配子体)介绍如下:1.滋养体(trophozoite):是疟原虫在红细胞内摄取营养和发育的阶段。
当裂殖子侵入红细胞后,虫体胞质较少,中间出现大空泡,胞质呈环状,细胞核位于虫体一侧,颇似戒指的宝石。
因此,早期滋养体又称为环状体(ring form)。
环状体继续发育,长大。
间日疟原虫和卵形疟原虫约经8~10小时,恶性疟原虫约经10小时,三日疟原虫约经24小时,虫体增大,伸出伪足,为运动细胞器,同时胞质中出现少量疟色素(malarialpigment);随着虫体继续发育,疟色素增多,伪足活动增加,出现多种形态,虫体有 1或2~3个空泡。
受染的红细胞胀大可达1倍,颜色变淡,并出现能染成淡红色的小点,称薛氏小点(Schhffner,s dots)。
恶性疟原虫的早期滋养体在外周血液中经十几小时的发育,逐渐隐匿于各种器官组织的毛细血管中,继续发育成滋养体。
四种人体疟原虫滋养体形态比较(薄片,吉氏液染色)小滋养体间日疟原虫恶性疟原虫三日疟原虫卵形疟原虫较大,约为红细胞直径的1/3,环粗大,核1或2个;红细胞的多虫感染不多见约为红细胞直径的1/6,环纤细,核1~2个,有些贴于红细胞边缘;红细胞的多虫感染比较常见约为红细胞直径的1/3,环教粗,核1个;红细胞的多虫感染很少见似三日疟原虫大滋养体较大,阿米巴样,空泡明显;核较大,疟色素细小,黄褐色,短杆状 通常在外周血中看不到;中等大小,很少呈阿米巴样。
早期疟色素细小,金黄色,晚期结成块状,黑褐色 常称带状而非阿米巴样,空泡小,疟色素较粗大,深褐色,常沿虫体边缘分布常呈圆形或不整圆形,疟色素粗大,暗褐色 返回标题2.裂殖体(schizont):约经40小时,间日疟原虫晚期滋养体发育成熟,虫体变圆,胞质内空泡消失,核开始分裂,称未成熟裂殖体(immature schizont)。
人体疟原虫红内期形态涂制于玻片上的红内期疟原虫,经吉氏染色后核呈红色,胞质呈蓝色,疟色素呈黄褐色或深褐色,不着色部分为空泡。
一、薄血膜中疟原虫形态薄血膜涂制均匀时疟原虫着色良好,结构清晰,便于观察形态和鉴别虫种。
薄血膜上各期红内期疟原虫的形态见表1。
表1 薄血膜4种疟原虫形态(吉氏染剂染色)间日疟原虫恶性疟原虫三日疟原虫卵形疟原虫被寄生红细胞大小形状颜色斑点胀大褪色薛氏点,红色,细小数多正常正常或稍紫茂氏点,红色,粗大数少正常或缩小正常齐氏点淡红色,微细正常或稍胀大卵圆形或边缘呈伞矢状褪色薛氏点,粗大数多早期滋养体(环状体) 大小核胞质色素较大,约占红细胞直径的1/31个较薄无较小,约占红细胞直径的1/61或2个纤细无中等1个较粗厚偶见细小褐色颗粒中等1个较粗厚无大滋养体大小核胞质色素较大1个阿米巴样,常含空泡黄褐色,细小,杆状,散在分布较小1或2个圆形,空泡不显著黄褐色,细小,结成团块后,呈黑褐色较小1个带状,空泡不显著深褐色,粗大,沿边缘分布较小1个圆形,空泡不显著棕黄色,较粗大未成熟裂殖体大小核胞质色素较大2个以上圆形或不规则,空泡消失黄褐色,分布不匀较小2个以上圆形,空泡消失黑褐色团块状较小2个以上圆形,空泡消失深褐色,分布不匀较小2个以上圆形或卵圆形,空泡消失棕黄色,分布不匀成熟裂殖体大小裂殖子色素大于正常红细胞12~24个,常为16~18个,排列不规则,较大黄褐色,常聚集一侧小于正常红细胞8~32个,常为8~18个,排列不规则,较小黑褐色团块小于正常红细胞6~12个,常为8个,常排列如菊花状,较大深褐色,常聚集中央小于正常红细胞6~12个,常为8个,排列不规则,较大棕黄色,聚集中央或一侧雌配子体大小形状核胞质色素大于正常红细胞圆形1个,较小,致密,深红色,位于一侧深蓝色黄褐色,均匀散在较大新月形,两端尖锐1个,较小,深红色,位于中央深蓝色黑褐色,紧密分布于核周围小于正常红细胞圆形1个,较小,深红色,位于一侧深蓝色深褐色,均匀散在小于正常红细胞圆形1个,较小,深红色,位于一侧深蓝色棕黄色,散在雄配子体大小形状核胞质色素大于正常红细胞圆形1个,较大,疏松,淡红色,位于中央浅蓝色黄褐色,均匀散在较大腊肠形,两端钝圆1个,较大,淡红色,位于中央浅蓝色或淡红色黑褐色,松散分布于核周围小于正常红细胞圆形1个,较大,淡红色,位于中央浅蓝色深褐色,均匀散在小于正常红细胞圆形1个,较大,淡红色,位于中央浅蓝色棕黄色,散在有时大滋养体与即将要成熟的雌配子体形态相似,对两者的鉴别见表2。
人体疟原虫红内期形态
涂制于玻片上的红内期疟原虫,经吉氏染色后核呈红色,胞质呈蓝色,疟色素呈黄褐色或深褐色,不着色部分为空泡。
一、薄血膜中疟原虫形态
薄血膜涂制均匀时疟原虫着色良好,结构清晰,便于观察形态和鉴别虫种。
薄血膜上各期红内期疟原虫的形态见表1。
表1 薄血膜4种疟原虫形态(吉氏染剂染色)
间日疟原虫恶性疟原虫三日疟原虫卵形疟原虫
被寄生红细胞大小
形状
颜色
斑点
胀大
褪色
薛氏点,红色,细
小数多
正常
正常或稍紫
茂氏点,红色,
粗大数少
正常或缩小
正常
齐氏点淡红色,
微细
正常或稍胀大
卵圆形或边缘呈伞矢状
褪色
薛氏点,粗大数多
早期滋养体(环状体) 大小
核
胞质
色素
较大,约占红细胞
直径的1/3
1个
较薄
无
较小,约占
红细胞直径的1/6
1或2个
纤细
无
中等
1个
较粗厚
偶见细小褐色颗粒
中等
1个
较粗厚
无
大滋养体大小
核
胞质
色素
较大
1个
阿米巴样,常含空泡
黄褐色,细小,杆状,
散在分布
较小
1或2个
圆形,空泡不显著
黄褐色,细小,结成
团块后,呈黑褐色
较小
1个
带状,空泡不显著
深褐色,粗大,沿边
缘分布
较小
1个
圆形,空泡不显著
棕黄色,较粗大
未成熟裂殖体大小
核
胞质
色素
较大
2个以上
圆形或不规则,空泡
消失
黄褐色,分布不匀
较小
2个以上
圆形,空泡消失
黑褐色团块状
较小
2个以上
圆形,空泡消失
深褐色,分布不匀
较小
2个以上
圆形或卵圆形,空泡
消失
棕黄色,分布不匀
成熟裂殖体
大小
裂殖子
色素
大于正常红细胞
12~24个,常为16~18
个,排列不规则,较大
黄褐色,常聚集一侧
小于正常红细胞
8~32个,常为8~18
个,排列不规则,较小
黑褐色团块
小于正常红细胞
6~12个,常为8个,
常排列如菊花状,
较大
深褐色,常聚集中央
小于正常红细胞
6~12个,常为8个,
排列不规则,较大
棕黄色,聚集中央或一
侧
雌配子体大小
形状
核
胞质
色素
大于正常红细胞
圆形
1个,较小,致密,深红
色,位于一侧
深蓝色
黄褐色,均匀散在
较大
新月形,两端尖锐
1个,较小,深红色,
位于中央
深蓝色
黑褐色,紧密分布于核
周围
小于正常红细胞
圆形
1个,较小,深红色,
位于一侧
深蓝色
深褐色,均匀散在
小于正常红细胞
圆形
1个,较小,深红色,
位于一侧
深蓝色
棕黄色,散在
雄配子体
大小
形状
核
胞质
色素
大于正常红细胞
圆形
1个,较大,疏松,
淡红色,位于中央
浅蓝色
黄褐色,均匀散在
较大
腊肠形,两端钝圆
1个,较大,淡红色,
位于中央
浅蓝色或淡红色
黑褐色,松散分布于
核周围
小于正常红细胞
圆形
1个,较大,淡红色,
位于中央
浅蓝色
深褐色,均匀散在
小于正常红细胞
圆形
1个,较大,淡红色,
位于中央
浅蓝色
棕黄色,散在
有时大滋养体与即将要成熟的雌配子体形态相似,对两者的鉴别见表2。
表2 晚期大滋养体与即将成熟雌配子体形态鉴别
雌配子体大滋养体
大小几乎充满被寄生的红细胞不超过被寄生的红细胞3/4
核一个,较大且致密,周围有不染色带一个,带状,周围无明显的不染色带
胞质边缘清楚,不含空泡边缘不整齐,多有空泡
疟色素颗粒较多、较粗,均匀分布颗粒较少、较细,分布不均匀
二、厚血膜中疟原虫形态
(一)各期形态
厚血膜由于用血量多,细胞重迭,干燥缓慢,以致虫体皱缩,空泡消失,胞质变形,加之红细胞被溶解,所以虫种和虫体的鉴别比薄血膜困难。
厚血膜中4种疟原虫形态鉴别要点见表3
表3 厚血膜中4种疟原虫形态鉴别(吉氏染色)
间日疟原虫恶性疟原虫三日疟原虫卵形疟原虫
早期滋养体(环状体)较大。
核1个,较大,胞
浆较厚。
常呈"!"或","
状
较小。
核1~2个,较
小,胞浆纤细。
常呈"!
"、"飞鸟"、"V"和"断
环"状
中等。
核1个,
较大,胞浆粗厚。
常呈"环状"或"
鸟眼"状
大小与间日疟原虫
相似,胞质致密,核
较大。
大滋养体较大。
呈阿米巴样,形状
不规则。
核位于胞质中或
外边,胞质常缩成圆形或
断裂成数块。
色素分布不
匀较小。
常呈圆形,色素
细小或结成1~2个团
块
中等。
常呈圆形,
色素粗大
大小与间日疟原虫
相似,胞质呈深蓝
色,核较大
裂殖体较大。
裂殖子12~24个。
裂殖子较大较小。
裂殖子8~26个。
裂殖子较小
较小。
6~12个。
裂殖子大于间日
疟原虫裂殖体
大小与间日疟原虫
相似,裂殖子6~14
个,核较大
配子体较大。
圆形,色素粗大。
雌配子体较大,核小,胞
质深蓝色,雄配子体较
小,核大,胞浆浅蓝色雌配子体新月形,雄配
子体腊肠形
与间日疟原虫相
似,但较小。
色
素较粗大
卵圆形,大小与间日
疟原虫相似,雌配
子体核致密,偏于一
侧,雄配子体核疏松
色素黄褐色,细小。
杆状,或
结成粗大颗粒。
分布不匀黄褐色,颗粒细小,结
成团块后呈黑褐色。
配
子体色素粗大,分布于
核周围
有时小滋养体可
见色素。
深褐色
较粗大。
沿边分
布
色素颗粒较大,呈深
棕色,分布弥散
被寄生红细胞常见红细胞“影子”和薛
氏点可见红细胞“影子”和茂
氏点
可见红细胞“影
子”
小滋养体时即可见薛
氏点
其他常可查到各阶段的疟原
虫仅见早期滋养体和/或
配子体。
一般不见大滋
养体和裂殖体
常可查到各阶段
疟原虫
常可查到各阶段疟
原虫
(二)杂质与疟原虫的鉴别
由于在染液和玻片上可能存在杂质以及染液酸硷度的影响等,常易与疟原虫混淆,应注意鉴别。
1. 疑似疟色素血膜上的染料残渣及灰尘,有时误为疟色素,可依据颗粒大小,色泽及分布范围加以区别。
转动显微镜的微调时,可见它浮于红细胞之上,与原虫不在一个平面上。
2. 疑似疟原虫核细菌尤其是球菌或白细胞破裂后散出的颗粒,皆为红色小点,与疟原虫的核相似,最易混淆。
但球菌形体较大,边缘光滑,常见多个聚集一处,分布较广。
嗜中性和嗜酸性白细胞的颗粒,着色较淡,边缘整齐,附近常有白细胞的碎屑。
3. 疑似疟原虫胞质网织红细胞残留物和白细胞残留物通常为蓝色,与疟原虫的胞质相似,如因与某些红点巧合一起,易误认为疟原虫。
鉴别时如形同大滋养体,可依据疟色素的特点加以区别;如形状似小滋养体,可依据虫体大小、折光是否均匀以及核与胞质是否在一个平面上予以区别。