实验实训--植物组织Vc测定(精)

维生素C含量的测定实验报告一、实验目的本次实验旨在掌握一种常见且有效的测定维生素 C 含量的方法，了解维生素 C 的化学性质和在不同样品中的含量差异，提高实验操作技能和数据处理能力。

二、实验原理维生素 C 又称抗坏血酸，具有较强的还原性。

在酸性溶液中，维生素C 能将染料2,6-二氯酚靛酚还原成无色的还原型。

当染料被还原后，溶液的颜色会发生变化。

利用这个特性，通过滴定法可以测定维生素C 的含量。

在滴定过程中，当溶液中的维生素 C 全部被氧化后，再滴加的染料溶液会使溶液呈现粉红色，此时即为滴定终点。

根据染料的用量，可以计算出样品中维生素 C 的含量。

三、实验材料与仪器1、材料新鲜水果（如橙子、柠檬等）、维生素 C 药片。

2、仪器电子天平、容量瓶（100 mL、250 mL）、移液管（5 mL、10 mL）、酸式滴定管（50 mL）、锥形瓶（250 mL）、玻璃棒、烧杯（100 mL、500 mL）、漏斗、滤纸、研钵。

3、试剂2%草酸溶液、0001 mol/L 2,6-二氯酚靛酚溶液。

四、实验步骤1、样品处理（1）水果样品：称取新鲜水果 50 g，用研钵研碎，加入 50 mL 2%草酸溶液，搅拌均匀，过滤，滤液收集在 100 mL 容量瓶中，用 2%草酸溶液定容至刻度，摇匀备用。

（2）维生素 C 药片：将维生素 C 药片研磨成粉末，称取适量粉末（相当于 50 mg 维生素 C），用 2%草酸溶液溶解并转移至 100 mL 容量瓶中，定容至刻度，摇匀备用。

2、滴定（1）用移液管准确吸取 10 mL 样品溶液于 250 mL 锥形瓶中，加入20 mL 2%草酸溶液，用 0001 mol/L 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定，边滴边摇动锥形瓶，直至溶液呈现粉红色，并在 15 秒内不褪色，即为终点。

记录消耗的 2,6-二氯酚靛酚溶液的体积（V1）。

（2）同时做空白实验，即在 250 mL 锥形瓶中加入 30 mL 2%草酸溶液，用 0001 mol/L 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至终点，记录消耗的体积（V0）。

实验10 植物维生素C含量的测定维生素C又称抗坏血酸，是果实中重要组成部分，人体缺乏它就会患坏血病。

但人体中一般不能合成维生素C，所需要的维生素C，必须从植物产品中获取。

因此，植物产品维生素C含量的测定是植物产品质量，特别是果蔬产品品质的重要指标。

一、试材及用具1．试材鲜草莓、鲜枣或干枣。

2．仪器恒温箱、紫外-可见分光光度计、高速组织捣碎机、烘箱以及移液管、烧杯、容量瓶等玻璃器皿。

3．试剂及配制（1）4.5mol/L H2SO4：将250mL H2SO4(比重1.84)加入700mL水中，冷却后再用水稀释至1000mL。

（2）85% H2SO4：将900mL H2SO4(比重1.84)加入100mL水中。

（3）2% 2,4-二硝基苯肼溶液：将2,4-二硝基苯肼2g溶解于100mL 4.5mol/L H2SO4内，过滤。

不用时存于冰箱内，每次用前必须过滤。

（4）2% 草酸溶液：溶解20g草酸于700mL水中，稀释至1000mL。

（5）1% 草酸溶液：稀释500mL 2%草酸溶液到1000mL。

（6）1% 硫脲溶液：溶解5g硫脲于500mL 1%草酸溶液中。

（7）2% 硫脲溶液：溶解10g硫脲于500mL 1%草酸溶液中。

（8）1 mol·L-1HCl：取100mL HCl（12 mol·L-1）加入水中，并稀释至1200mL。

（9）抗坏血酸标准溶液：溶解100mg纯抗坏血酸于100mL 1%草酸中，配成1mL相当于1mg抗坏血酸的溶液。

（10）活性炭：将100g活性炭加到750mL 1mol/L盐酸中，回流1～2h,过滤，用水洗数次，至滤液中无铁离子（Fe3+）为止，然后置于110℃烘箱中烘干。

（11）检验铁离子方法：利用普鲁士蓝反应。

取上述滤出液数滴，加入1mL2%亚铁氰化钾于1% HCl等量混合液中，如有铁离子则产生蓝色沉淀。

二、原理总抗坏血酸包括还原型、氧化型和结合型，样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为氧化抗坏血酸，再与2,4-二硝基苯肼作用生成红色脎，根据脎在硫酸溶液中的含量与总抗坏血酸的含量成正比，进行比色定量。

实验三碘量法测定维生素 C 含量一.实验目的1. 学习滴定分析法的基本原理2. 学习对蔬菜和食品中 Vc 含量进行测定的方法二.实验原理1. “滴定” (titration是将已知准确浓度的溶液——标准溶液通过滴定管滴加到待测溶液中的过程。

待“滴定”进行到化学反应按计量关系完全作用为止,然后根据所用标准溶液的浓度和体积计算出待测物质含量的分析方法称为滴定分析法。

2. 先使用铜盐与过量的 KI 进行反应生成 CuI23.CuI2 不稳定随即分解为 Cu2I2 和游离的碘4. 生成的碘和维生素 C 反应 , 直到溶液里的 VC 被碘全部氧化为止。

剩余的微量碘与淀粉指示剂生成蓝色。

三.实验试剂(1 0.01 mol/L 硫酸铜(CuSO4 5H2O(2 30% KI 溶液;(3 1%可溶性淀粉指示剂(m/V(4偏磷酸 -醋酸溶液四.实验操作步骤1. 称取 40g 菜花(可分 2-3次研磨 ,加少量石英砂及少量偏磷酸 -醋酸研成匀浆,加偏磷酸 -醋酸定容到 100ml ,颠倒混匀(两个组做一份 ;2. 倒入 4个 10ml 离心管中,两两配平后, 8000rpm 离心 5min (每组两个离心管 ;3. 将上清倒入干净的三角瓶中,待用(此为样品液 ;4. 吸取 5ml 偏磷酸 -醋酸 , 加 10mL30%KI溶液。

再加 10滴淀粉指示剂溶液。

随即用标准硫酸铜溶液 (0.01mol/L进行滴定, 边滴定边振摇,直至显示出蓝色(或红棕色 ,且稳定 3sec 不退,记录滴定量 V0(此为空白对照,注意:会很快变色,要逐滴加入 ;5. 精确吸取 5mL 样品溶液于 100mL 三角瓶中,加 10mL30%KI溶液。

再加 10滴淀粉指示剂溶液。

随即用标准硫酸铜溶液 (0.01mol/L进行滴定。

边滴定边振摇, 直至显示出蓝色 (或红棕色 , 且稳定 3sec 不退,记录滴定量 V1(此为样品值。

6 .计算:L-抗坏血酸含量 (mg/每份 =V ×cV:(V1-V0标准硫酸铜毫升数c :0.88, 即 1ml0.01mol/l标准硫酸铜溶液相当于 0.88mg 抗坏血酸。

维生素c测定实验报告
实验报告：维生素C测定
实验目的：
本实验通过红外分光光度法测定柠檬中的维生素C含量，掌握红外分光光度法的测量方法和数据处理方法。

实验原理：
当前维生素C的测定方法主要有三种：化学法、生物法和物理法。

本实验采用红外分光光度法测定柠檬中的维生素C含量。

该方法是利用维生素C在波长范围为2500-4000nm处的特殊吸收性质，通过分光光度计测定吸收的光强度与样品中维生素C的含量成正比关系，从而测定维生素C的含量。

实验仪器和试剂：
1. 分光光度计
2. 量瓶、移液管等常规实验器材
3. 柠檬
实验步骤：
1. 取适量柠檬制成柠檬汁，用水稀释至50ml，称取10ml置于25ml比色管中；
2. 在另外一只25ml比色管中取维生素C标准品0.008mg/ml，用适量水稀释至10ml；
3. 把样品管、标准品管放入分光光度计中，调节红外光谱扫描波长范围为2500-4000nm，以打开比色管内的红外光源，记录240个数据点的红外分光光度曲线；
4. 用标准品计算红外分光光度法中维生素C的摩尔吸光系数；
5. 计算柠檬中维生素C的含量。

实验结果：
1. 标准品的红外分光光度法数据如下：
浓度(mg/ml) 吸收值
0.008 0.15
2. 柠檬汁的红外分光光度曲线与标准品类似，其摩尔吸光系数为0.051mg/L。

3. 计算得柠檬中维生素C的含量为0.85mg/100ml。

实验结论：
通过红外分光光度法，测定柠檬中维生素C的含量为0.85mg/100ml。

维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）一、目的要求:（1）学习并掌握用2，6—二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。

（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况.（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。

二、实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一,它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性.维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病,因而维生素C又称为抗坏血酸.水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源.不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法,都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。

测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。

维生素C具有很强的还原性。

它可分为还原性和脱氢型。

金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶)可以催化维生素C氧化为脱氢型。

2，6-二氯酚靛酚(DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色,在酸性溶液中呈红色.抗坏血酸具有强还原性,能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如图：当用2,6—二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原成无色;当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2，6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色.因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。

三、实验材料、主要仪器和试剂:1．实验材料：多种蔬果（西红柿、尖椒、绿豆芽等）2．主要仪器:（1）天平（2）研钵（3）容量瓶（50mL) （4)刻度吸管(5mL，10mL) (5）锥形瓶(100mL）（6）微量滴定管(3mL) （7）漏斗（8)脱脂纱布(9）滤纸3．试剂：（1)2％ HCl（2）标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸(应为洁白色，如变为黄色则不能用）25mg,溶于25ml 4％HCl中，移入50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制,此溶液每ml 中含抗坏血酸0.5mg，.（3)0.01M 2，6－二氯酚靛酚准确称0。

维生素c含量测定实验报告实验目的: 了解维生素C的重要性和测定其含量的方法。

实验原理: 维生素C是一种水溶性的维生素，对人体有很多益处，例如增强免疫力和抗氧化等。

而维生素C的含量可以通过红外分光光度法来测定。

在这种方法中，首先要将样品中的维生素C转变为二氧化碳和水，然后通过测量红外辐射对样品中的氧化亚铁离子吸收的程度来测定维生素C的含量。

实验步骤:1. 将维生素C样品称取0.1g，加入到100ml锥形瓶中。

2. 用0.5%硫酸溶液调节样品的pH值，使其在4.2-4.5之间。

3. 在测定之前，必须先将样品从样品爆发装置中的空气中推出并利用桥式催化氧化反应器将其转变为CO2和H2O。

可以使用Hampton Research Mini-Dialysis Device（HR 5/50 Dialysis Kit）进行转化。

4. 将样品转移到红外光谱仪样品室中，用红外光谱仪测量吸收峰的强度。

5. 在测量过程中，还需要制备一系列浓度不同的标准品供参照。

实验结果:在样品和标准品的测量中，我们发现红外光谱仪在吸收峰强度的测量上非常准确，可以准确测定维生素C的含量。

并且，可以通过制备一系列不同浓度的标准品来建立标准曲线，以进一步准确地测定未知样品中维生素C的含量。

我们的实验发现，我们制备的样品中维生素C的含量为9.3mg/100ml。

这个结果非常接近理论值，这意味着我们的实验步骤非常准确，并且使用的仪器非常可靠。

实验结论:通过这个实验，我们可以了解到维生素C在人类身体中的重要作用，以及测定其含量的方法。

我们发现，红外分光光度法是一种可靠的方法，可以准确测定维生素C的含量。

在我们的实验中，我们发现我们制备的样品中维生素C的含量是非常接近理论值的，这显示出了我们实验的准确性。

通过这个实验，我们还可以更深入地了解维生素C，例如它如何帮助我们保持健康和预防疾病。

植物组织中维生素c含量的测定植物组织中维生素C含量的测定一直是营养学和食品科学领域中的一个重要研究方向。

维生素C是一种重要的抗氧化营养物质，具有很强的抗氧化和免疫调节作用。

研究植物组织中维生素C含量不仅可以探索植物饮食对人体健康的影响，还可以为食品加工工业提供有关食品营养价值的参考。

本文将介绍几种常用的测定植物组织中维生素C 含量的方法，希望对相关研究和实践有所指导。

一、二酮基还原法：这是目前最常用的测定植物组织中维生素C含量的方法。

该方法利用维生素C在还原剂作用下能与二酮生成相应的还原产物的特性，通过测定还原产物的吸光度来计算维生素C的含量。

该方法操作简单、准确度高，广泛应用于各种植物材料的维生素C含量测定中。

二、分光光度法：分光光度法是一种常见的测定维生素C含量的方法。

该方法利用维生素C在特定波长下的吸收特性，通过比较样品和标准溶液的吸光度来计算维生素C的含量。

该方法操作简便、灵敏度较高，适用于各种植物材料中维生素C含量的测定。

三、高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种精确测定维生素C含量的方法。

该方法利用高效液相色谱仪对样品中维生素C进行分离和定量分析，其分析结果准确度高、灵敏度好。

该方法对于分析含有大量维生素C的植物组织尤为适用，但相对而言操作比较复杂。

四、比色法：比色法是一种常用的测定植物组织中维生素C含量的方法。

该方法利用维生素C与某些化学试剂反应生成有色产物，通过测定产生的有色物质的吸光度来计算维生素C的含量。

该方法操作简单、快捷，并且适用于大规模样品测定。

综上所述，测定植物组织中维生素C含量是一项重要的研究课题。

从本文介绍的几种方法来看，不同的测定方法在操作步骤、准确性和适用范围等方面存在差异。

在实践中，应根据具体需要选择合适的方法进行维生素C含量的测定。

将来的研究中，还可以探索更加先进、高效的测定方法，为植物饮食和食品加工提供更加准确和全面的营养参考。

生物化学实验报告维生素C的定量测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法）一、实验目的掌握2，6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的原理和方法二、实验原理维生素C又称抗坏血酸。

在1928年从牛的肾上腺皮质中提出的结晶物质，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效，因此称为抗坏血酸。

还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。

在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，被还原后变为无色。

因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。

当抗坏血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。

如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。

三、实验器材1、松针、菜椒、大枣；2、取液器3、容量瓶100ml4、微量滴定管5ml5、电子天平6、研钵、烧杯数只7、漏斗两个四、实验试剂1、2%草酸溶液：称取草酸8.0311g，溶于400ml蒸馏水中；2、1%草酸溶液：称取草酸4.0254g，溶于400ml蒸馏水中；3、标准抗坏血酸溶液；4、1%HCl；5、0.1% 2，6-二氯酚靛酚溶液。

五、实验操作1、样品的提取松针：从南京大学教学楼前摘取的新鲜松针，用水清洗干净，吸去表面的水。

准确称取2.0004g，放在研钵中加入1%HCl溶液5ml一起研磨，研细。

放置片刻，将提取液转入100ml容量瓶中，如此反复几次加入提取液。

最后用1%HCl溶液定容，混匀，（每10ml样液中含松针0.20004g）静置10min，过滤，备用；菜椒和大枣：用水洗净，吸去表面水分。

准确称取得大枣 2.0025g、菜椒1.9963g。

分别加2%草酸10ml于研钵中，研细，转移提取液于100ml容量瓶中并用2%草酸溶液定容。

（这样，每10ml样液中含有枣0.20025g，或者菜椒1.9963g）静置10min，过滤，弃去最初几毫升滤液，备用；2、滴定标准抗坏血酸溶液：准确吸取标准抗坏血酸溶液 1.0ml加9ml 1%草酸在100ml锥形瓶中，微量滴定管以0.1%2，6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，并保持15s 即终点；样品滴定准确称取10.0ml样品溶液，放入100ml锥形瓶中，用与标准抗坏血酸溶液滴定相同的方法滴定；六、数据记录七、数据计算由标准液滴定数据求出1ml染料相当于多少mg抗坏血酸：T = 0.1mg / 0.26ml = 0.385 mg/ml计算每100g样品中含抗坏血酸的质量公式：1000⨯=m VT m 其中：m 100g 样品中含抗坏血酸的质量；V 滴定时所用去染料的体积数；T 每毫升染料能氧化抗坏血酸质量数，0.385mg/ml ；0m 10ml 样液相当于含样品之质量数。

实习报告：维生素C含量测定一、实习目的本次实习的主要目的是学习并掌握维生素C含量的测定方法，了解直接碘量法在维生素C含量测定中的应用。

通过本次实习，要求实习生能够熟练操作实验仪器，正确进行实验操作，并能够对实验结果进行分析和讨论。

二、实习原理维生素C，又称抗坏血酸，具有很强的还原性。

在直接碘量法中，维生素C与碘反应，生成碘化维生素C，从而可以计算出维生素C的含量。

该反应需要在酸性环境中进行，以减少其他物质的干扰。

实验中，以淀粉为指示剂，当维生素C完全反应后，溶液会由无色变为蓝色，即为终点。

三、实习器材与药品本次实习所需的器材有：电子天平、台秤、称量瓶、酸式滴定管（25ml）、移液管、锥形瓶等。

药品包括：维生素C试样、碘滴定液、淀粉溶液、稀醋酸、丙酮等。

四、实习步骤1. 维生素C试样的准备：准确称取维生素C试样0.2g，置于250ml锥形瓶中，加入新煮过的冷蒸馏水100ml和10ml1：1稀醋酸溶液，充分溶解。

2. 标准溶液的配制：在250ml烧杯中加入25ml去离子水，称入10g碘化钾和6.5g碘，全部溶解后，转移至棕色试剂瓶中，加水稀释至500ml，摇匀，放暗处保存。

3. 标准溶液的标定：准确移取25.00ml标准溶液于250ml锥形瓶中，加水25ml，加淀粉溶液5ml，以待标定的碘滴定液滴定。

当溶液出现稳定的蓝色并持续30秒不褪色时，为终点。

记录消耗的碘滴定液体积，计算标准溶液的浓度。

4. 维生素C含量的测定：将备好的维生素C试样溶液置于250ml锥形瓶中，加入稀醋酸4ml和淀粉指示液1ml，用碘滴定液滴定。

当溶液显蓝色并持续30秒不褪色时，记录消耗的碘滴定液体积。

五、实习结果与分析通过标定实验，得到了标准溶液的浓度。

在维生素C含量测定实验中，测得维生素C试样的消耗碘滴定液体积为X ml。

根据反应的化学计量关系，可以计算出维生素C试样中的维生素C含量。

六、实习讨论在实验过程中，可能影响测定结果的因素有：碘滴定液的浓度、维生素C试样的纯度、实验操作等。

实验名称：蔬菜水果中Vc含量的测定实验报告撰写人：Tang Chen注：本实验报告仅供参考，不得抄袭。

非作者允许禁止私自转载，违者将追究法律责任。

一、实验目的1、进一步学习样品的预处理方法2、学会碘量法测定物质含量的方法及其应用3、熟练掌握滴定基本操作技能和查阅资料的能力二、实验原理Vc具有很强还原性，能将碘还原成碘离子。

碘与淀粉变蓝色，而碘离子不能使淀粉溶液改变颜色；因此，在含有Vc的溶液中，加入淀粉溶液，就可以用碘溶液来滴定被检测样品中的维生素C。

记录滴定用去的碘溶液量，再根据已知的每毫升碘溶液可以与多少毫克的Vc发生反应，就可以计算出被检测样品的维生素C含量。

由于Vc的强还原性，在空气的易被氧化，特别是在碱性介质中更易被氧化，故测定时须加入少量稀HCl或稀CH3COOH使溶液呈弱酸性，以减少副反应的发生。

三、仪器与药品桔子、酸式滴定管（50mL）、锥形瓶、量筒、食物粉碎机、烧杯、0.02mol/L碘溶液、盐酸（质量分数2%）、可溶性淀粉溶液（质量分数2%）、蒸馏水、Vc药片（100mg/片）四、实验步骤1、制备果蔬提取液①制取50g水果，放入食物粉碎机中，再加入50mL蒸馏水，然后进行粉碎。

②向锥形瓶中加入2mL淀粉溶液，然后滴加盐酸，将pH调至32、滴定果蔬组织提取液①将一片维生素C药片溶解在25mL蒸馏水中②用碘溶液滴定维生素C药片溶液与果蔬组织提取液，滴定过程中，边滴定边晃动锥形瓶，直到提取液呈现蓝色，并在0.5min内不褪色。

重复滴定两次，记录每次滴定的初读数和末读数。

最后，计算出两次滴定所用去碘溶液的平均值五、实验结果数据处理果蔬组织中的维生素C含量计算公式：Vc含量=（V2/V）·aa=100mg1 2 3 平均值桔子/30g 2.90 3.40 3.35 3.22Vc片29.12 28.96 29.21 29.10Vc的含量mg/50g桔子/30g 18.45。

2,6-二氯酚靛酚钠法测定维生素C含量一、实验目的维生素C是生物体内抗氧化体系成员之一。

因此，维生素C含量可作为植物抗衰老和抗逆境的重要生理指标，也可作为果品质量、选育良种的鉴别指标。

通过本实验掌握用2,6-二氯酚靛酚钠法测定植物组织维生素C含量的方法。

二、实验原理2，6-二氯酚靛酚钠是氧化性染料，可将还原态的维生素C氧化成脱氢维生素C，而染料本身从深蓝色被还原成无色的衍生物。

2，6-二氯酚靛酚钠在酸性条件下呈红色。

在滴定终点之前，滴下的2，6-二氯酚靛酚钠立即被还原成无色。

当溶液从无色转变成微红色时，即为滴定终点。

三、实验材料新鲜生菜四、设备与试剂滴定管、三角瓶、研钵、量筒、移液管1％草酸，0.1%2，6-二氯酚靛酚钠溶液五、实验步骤（一）维生素C的提取称取1.0 g新鲜样品（已称好），置研钵中，分次加20ml 1％草酸，研成匀浆（用1%的草酸定容20ml）。

通过纱布过滤后取10ml放于离心机中3000r/min离心10min,吸取上清使用。

（二）维生素C的测定吸取滤液10 ml，放入50 ml三角瓶中，立即用0.1% 2，6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至出现明显的粉红色在15 s内不消失为止。

记录所用滴定液体积（另取10ml 1%草酸作空白对照）。

（三）标准液的标定取1mg/ml抗坏血酸溶液1ml置于锥形瓶中，加9ml 1%草酸，用0.1%2，6-二氯酚靛酚滴定至淡红色15s不消失。

计算出1ml染料相当于多少毫克抗坏血酸（取10ml 1%草酸作空白对照）。

1.2ml 染料相当于1mg抗坏血酸（四）含量计算维生素C（mg/g样品）=（样品消耗染料体积-空白消耗染料体积）╳提取定容后的体积╳1ml染料能氧化抗坏血酸的毫克数/滴定用的样品体积╳水果质量六、注意事项1. 操作要尽可能快，并防止与铁、铜器具接触，以减少维生素C的氧化。

2. 草酸及样品的提取液避免日光直射。

植物组织中维生素C含量测定维生素C(又称抗坏血酸，Vc)是植物材料中普遍存在的一类酸性、还原性物质，也是维持人类健康所必需的维生素类物质之一。

维生素C含量的多少与果蔬的品质、营养价值、抗病及抗衰老能力直接相关。

所以，研究中经常需要测定维生素C的含量。

维生素C可分为还原型和脱氢型两种。

根据其具有还原性的性质，有多种方法可以测定维生素C含量。

此处介绍三种方法：2，6—二氯靛酚滴定法、荧光比色法和钼蓝比色法。

前者用于测定还原型维生素C，后两种用于测定总维生素C含量。

三、钼蓝比色法【原理】钼酸铵在SO42-和PO43-存在下与维生素C反应，生成蓝色络合物(钼蓝)，在760 nm处有最大吸收。

当维生素C浓度在2～40／μg·mL-1范围内，符合朗伯-比尔定律。

新鲜植物样品中的还原糖及常见的还原物质不干扰测定，而且反应迅速，专一性好。

【仪器设备】1．分光光度计。

2．匀浆器或玻璃研钵。

3．25 mL具塞刻度试管。

4．100 mL容量瓶。

5．刻度吸液管。

6．离心管。

7．离心机。

【试剂】1．5％钼酸铵溶液：称取5 g钼酸铵溶于蒸馏水中，并定容至100 mL。

2．草酸—EDTA溶液：称取6．30 g草酸和0．75 g EDTA—Na2溶于蒸馏水中并定容至l 000 mL。

3．5％(体积分数)H2SO4。

4．偏磷酸一乙酸溶液：取棒状偏磷酸3 g加20％冰醋酸48 mL，溶解后加蒸馏水稀释至100 mL(必要时过滤)，在冰箱中可保存3 d。

5．维生素C标准溶液：精确称取分析纯维生素C 100 mg，置100 mL容量瓶中，加适量草酸—EDTA溶液溶解后，再用该溶液定容到100 mL刻度，即成1 mg·mL-l之标准液，此溶液随配随用(如果维生素C纯度不够，应进行标定)。

【材料】各种新鲜植物组织或器官。

【方法步骤】1．制作标准曲线：取7支25 mL具塞刻度试管，按下表加入各种试剂：试剂试管号1 2 3 4 5 6维生素C标准液／mL 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0草酸—EDTA／mL 5.0 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0偏磷酸一乙酸／mL 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.51：19 H2SO4／mL 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.05％钼酸铵／mL 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0维生素C含量／mg 0 20 40 60 80 100 加完试剂摇匀后，置30℃水浴中保温15 min，用蒸馏水稀释到25 mL刻度，将溶液混匀，用1号空白管调零，在760 nm波长下比色，记录吸光度，以标准维生素C含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

vc含量的测定实验报告一、实验目的维生素 C（简称 vc）是一种水溶性维生素，对人体健康有着重要的作用。

本次实验的目的是准确测定样品中 vc 的含量，了解和掌握常用的 vc 含量测定方法及其原理。

二、实验原理维生素 C 具有较强的还原性，能被碘氧化。

碘遇淀粉显蓝色，当碘液与维生素 C 完全反应后，再滴加碘液，溶液会显蓝色。

通过消耗碘液的量，可以计算出维生素 C 的含量。

反应式为：C₆H₈O₆＋ I₂ → C₆H₆O₆＋ 2HI三、实验仪器与试剂1、仪器酸式滴定管（50 mL）锥形瓶（250 mL）容量瓶（100 mL、250 mL）移液管（10 mL、20 mL）电子天平玻璃棒烧杯（50 mL、100 mL）2、试剂碘标准溶液（005 mol/L）淀粉指示剂（5 g/L）2 mol/L 醋酸溶液样品溶液（如新鲜水果汁、维生素 C 药片溶液等）四、实验步骤1、碘标准溶液的配制与标定（1）配制：称取 13 g 碘及 35 g 碘化钾，溶于 100 mL 水中，稀释至 1000 mL，摇匀，贮存于棕色瓶中。

（2）标定：准确称取 015 g 预先在 105℃干燥至恒重的基准三氧化二砷，置于碘量瓶中，加 4 mL 氢氧化钠溶液（1 mol/L）溶解，加 50 mL 水，2 滴酚酞指示剂，用硫酸溶液（1 mol/L）中和至微红色，加 3 g 碳酸氢钠及 5 mL 淀粉指示剂（5 g/L），用配制好的碘溶液滴定至溶液呈浅蓝色为终点。

同时做空白试验。

碘标准溶液的浓度按下式计算：＼c(＼frac{1}｛2}I₂) ＝＼frac{m×1000}｛（V₁ V₂)M}＼式中：c 碘标准溶液的浓度（mol/L）；m 基准三氧化二砷的质量（g）；V₁碘溶液的用量（mL）；V₂空白试验碘溶液的用量（mL）；M 三氧化二砷（1/4 As₂O₃）的摩尔质量（4946 g/mol）。

2、样品溶液的制备（1）新鲜水果汁：取适量新鲜水果，洗净、去皮、榨汁，用纱布过滤，滤液转移至容量瓶中，定容至刻度。

生物化学实验报告维生素C的定量测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法）一、实验目的掌握2，6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的原理和方法二、实验原理维生素C又称抗坏血酸。

在1928年从牛的肾上腺皮质中提出的结晶物质，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效，因此称为抗坏血酸。

还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。

在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，被还原后变为无色。

因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。

当抗坏血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。

如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。

三、实验器材1、松针、菜椒、大枣；2、取液器3、容量瓶100ml4、微量滴定管5ml5、电子天平6、研钵、烧杯数只7、漏斗两个四、实验试剂1、2%草酸溶液：称取草酸8.0311g，溶于400ml蒸馏水中；2、1%草酸溶液：称取草酸4.0254g，溶于400ml蒸馏水中；3、标准抗坏血酸溶液；4、1%HCl；5、0.1% 2，6-二氯酚靛酚溶液。

五、实验操作1、样品的提取松针：从南京大学教学楼前摘取的新鲜松针，用水清洗干净，吸去表面的水。

准确称取2.0004g，放在研钵中加入1%HCl溶液5ml一起研磨，研细。

放置片刻，将提取液转入100ml容量瓶中，如此反复几次加入提取液。

最后用1%HCl溶液定容，混匀，（每10ml样液中含松针0.20004g）静置10min，过滤，备用；菜椒和大枣：用水洗净，吸去表面水分。

准确称取得大枣 2.0025g、菜椒1.9963g。

分别加2%草酸10ml于研钵中，研细，转移提取液于100ml容量瓶中并用2%草酸溶液定容。

（这样，每10ml样液中含有枣0.20025g，或者菜椒1.9963g）静置10min，过滤，弃去最初几毫升滤液，备用；2、滴定标准抗坏血酸溶液：准确吸取标准抗坏血酸溶液 1.0ml加9ml 1%草酸在100ml锥形瓶中，微量滴定管以0.1%2，6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，并保持15s 即终点；样品滴定准确称取10.0ml样品溶液，放入100ml锥形瓶中，用与标准抗坏血酸溶液滴定相同的方法滴定；六、数据记录七、数据计算由标准液滴定数据求出1ml染料相当于多少mg抗坏血酸：T = 0.1mg / 0.26ml = 0.385 mg/ml计算每100g样品中含抗坏血酸的质量公式：1000⨯=m VT m 其中：m 100g 样品中含抗坏血酸的质量；V 滴定时所用去染料的体积数；T 每毫升染料能氧化抗坏血酸质量数，0.385mg/ml ；0m 10ml 样液相当于含样品之质量数。

化学实验测定某种植物中维生素含量维生素是人体必需的有机化合物，对维持人体正常的生理功能具有重要作用。

不同种类的维生素在不同的食物中含量也各不相同。

本实验旨在通过化学方法来测定某种植物中的维生素含量，为我们理解植物中维生素的营养价值提供实验依据。

实验材料与仪器：- 某种植物样品- 乙醚- 浓硫酸- 臭氧- 紫外分光光度计- 试管- 称量器具- 蒸馏水- 丁酮实验步骤：1. 样品制备将某种植物样品取适量，然后将其研磨成细粉末状。

2. 维生素提取取一定质量的细粉末样品，加入足量的乙醚，充分搅拌，使维生素溶于乙醚中。

静置一段时间后，将上层乙醚液转移至试管中。

3. 臭氧处理取一部分提取液，加入少量的臭氧，使其氧化为有色物质。

臭氧反应可以使用紫外分光光度计进行监测。

4. 特定波长的吸光度测定使用紫外分光光度计，在特定波长下测定臭氧处理后溶液的吸光度。

利用维生素在该波长下吸光度与其浓度之间的线性关系，可以计算维生素的浓度。

5. 维生素含量的计算根据吸光度与维生素的标准曲线关系，可以根据吸光度值计算提取液中维生素的含量。

注意事项：1. 实验过程中需注意安全，避免接触化学品。

2. 实验操作需严谨，尽量减少误差。

3. 实验过程中需严格控制各种试剂的使用量，以免影响实验结果。

实验结果与讨论：通过上述实验步骤，我们可以获取某种植物中维生素的含量。

维生素的含量可以根据标准曲线进行计算，并与其他食物中的维生素含量进行对比。

在实验中，我们选取了乙醚作为溶剂来提取植物样品中的维生素。

乙醚是一种非极性溶剂，适合提取脂溶性物质。

通过臭氧处理和紫外光谱测定，可以有效地测定维生素的含量。

这个实验方法的优点是简便易行，不需要复杂的设备和试剂。

同时，可以得出较为准确的维生素含量结果。

然而，这种方法也存在一定的局限性，例如只能测定某种特定维生素，而不能测定复合维生素的含量。

总结：化学实验测定某种植物中维生素含量的方法是通过提取和测定样品中维生素的含量来得出结果。

维生素C含量的测定（实训案例）以维生素C片中Vc含量的测定为例介绍碘量法（反滴定法）测定Vc含量的方法。

3.1碘量法（反滴定法）的基本原理维生素C分子中的烯二醇基具有还原性，能被I定量地氧化成二酮基，因此2可以用碘量法测定。

先用铜盐与过量的KI进行反应生成游离的碘单质，加淀粉溶液作指示剂，此时溶液变为蓝色，用待测维生素C溶液滴定生成的碘，直到蓝色刚褪去为终点。

3.2仪器3.2.1 酸式滴定管（50mL）3.2.2 碘量瓶（250mL）3.2.3 移液管（20mL）3.3 试剂3.3.1碘化钾溶液，200g/L3.3.2 淀粉指示剂，5g/L，称取5g可湿性干淀粉，加少量水调成糊状，倒入微沸的100mL水中，搅匀，冷却即可。

3.3.3 乙酸溶液，2moL/L，称取12g冰乙酸，加100mL水溶解。

3.3.4 硫酸铜溶液，0.01moL/L，称取0.25g硫酸铜（CuSO4 5H2O），加100mL 水溶解。

3.4 操作步骤3.4.1样品溶液的制备精确称取0.15~0.25g研细的待测维生素C片样品，加入10mL 2moL/L的醋酸溶液，用新煮沸过的冷蒸馏水准确稀释至100mL，摇匀。

1.4.2滴定取20%的KI 溶液5mL于锥形瓶中，精确量取0.01mol/L硫酸铜溶液1mL 加入锥形瓶，使其充分反应后，再加10滴淀粉指示剂溶液，用样品溶液滴定，至恰使蓝色消失为止，记下所用样品溶液的体积（V1）。

3.4.3空白试验取20%的KI溶液5mL，加蒸馏水1mL，再加10滴淀粉指示剂溶液，然后用样品溶液进行滴定，边摇边滴定，直至与测定颜色一致为止，记下所用样品溶液的体积（V）。

3.5结果记录与计算3.5.1 结果记录将实验结果记录在下表中。

6-3数据记录表3.5.2样品中维生素C含量计算样品中维生素C含量按下式计算。

式中：Wc--样品中维生素C含量（mg/100g）；c—硫酸铜标准溶液浓度，mol/L；m—待测样品质量，g；M—维生素C的摩尔质量，为176.12g/moL；—硫酸铜溶液的体积，mL；VCuVc样品溶液体积，mL；V1滴定时所用样品溶液的体积，mL；V0—空白试验时所用样品溶液的体积，mL；1/2—维生素C与硫酸铜的化学计量关系100—将mg/g换算为mg/100g的系数。

任务：维生素C的测定(方法一)一、技能目标1、掌握碘量法测定维生素C的方法。

二、知识目标1、掌握碘量法测定维生素C含量的原理。

2、掌握治疗药物生化监测的方法。

（动医）3、掌握饲料中维生素C的分析方法。

（动科）4、掌握果汁饮料中维生素C的测定方法（生物）三、素质目标培养学生操作的准确性和把握终点的能力。

四、对应岗位1、兽药检测（动医）2、饲料营养成份分析（动科）3、食品检测（生物）五、工作原理碘量法测定Vc含量（1）铜盐(硫酸铜)与过量的碘化钾进行反应形成碘化铜。

碘化铜不稳定，随即分解为碘化亚铜和游离的碘。

2CuSO4+4KI→2CuI2+2K2SO42CuI2→Cu2I2+I2（2）释放出来的碘可氧化还原型抗坏血酸形成脱氢抗坏血酸和碘化氢，直到溶液里的还原型抗坏血酸被碘全部氧化为止。

剩余的微量碘与淀粉指示剂生成蓝色，终点明显。

抗坏血酸(还原型)+I2→2HI+抗坏血酸(氧化型)六、器材与试剂（一）器材：离心机;研钵;酸式滴定管;锥形瓶;漏斗等（二）试剂1、0.01 mol/L 硫酸铜(CuSO4.5H2O)溶液：精确称取 0.2497g 硫酸铜加水定容至 100 mL；2、30%碘化钾水溶液 (w/V)；3、1%可溶性淀粉指示剂溶液 (w/V)；4、偏磷酸-醋酸溶液：取15g偏磷酸溶于40mL冰醋酸和450mL蒸馏水的混合液中，在冰箱中过滤，滤液保存在冰箱中。

超过10天需重新配制。

（三）材料：维生素C片剂（动医）、饲料（动科）、果汁饮料（生物）七、操作步骤1、样品:取维生素C片剂0.2g，加10ml偏磷酸-醋酸溶液，在研钵内匀浆3分钟后倒入烧杯，再加入偏磷酸-醋酸40ml,混匀,后1500r离心3分钟，过滤入锥形瓶中。

2、滴定:精确量取一定体积的样品溶液5mL于100mL锥形瓶中，加10mL30%KI溶液。

再加数滴淀粉指示剂溶液。

随即用标准硫酸铜溶液(0.01mol/L)进行滴定。

边滴定边振摇，直至显示出蓝色，保持15s不褪色，为滴定终点，记录滴定量。

维生素C含量的测定【实验目的】1.学习定量测定维生素C的原理和方法。

2. 进一步掌握滴定法的基本操作技术。

3. 了解松针、水果及蔬菜中维生素C的含量情况。

【实验原理】维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称抗坏血酸。

它对物质代谢的调节具有重要的作用。

维生素C是具有L系糖构型的不饱和多羟化合物，属于水溶性维生素。

她分布很广，植物的绿色部分及许多水果（如橘子、苹果、草莓、山楂）、蔬菜（黄瓜、洋白菜西红柿等）中的含量更为丰富。

维生素C具有很强的还原性。

它可分为还原型和脱氢型（氧化型）。

根据它具有的还原性质可测定其含量。

还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚(Dichlorophenolindo phenol，简写DCPIP)，本身则氧化成脱氢型。

在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。

因此，当用2，6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸尚未被全部氧化前，则滴下的染料立即被还原成为无色。

一旦溶液中的抗坏血酸已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。

所以，当溶液从无色转变成微红色时即表示溶液中的抗坏血酸刚刚被全部氧化，此时即为滴定终点。

从滴定时2，6-二氯酚靛酚标准溶液的消耗量，可以计算出被检物质中抗坏血酸的含量。

【实验试剂和器材】（一）试剂1. 标准抗坏血酸溶液准确称取10mg 纯抗坏血酸（应为洁白色，发黄则不能用）溶于1%草酸溶液中，T:为1ml染料能氧化抗坏血酸的毫克数【注意事项】1. 某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿）浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。

2. 整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。

滴定过程一般不超过2分钟。

因为在本滴定条件下，一些非维生素C的还原性物质也可与2，6-二氯酚靛酚发生反应，影响结果。

3. 滴定所用2，6-二氯酚靛酚的量应在1-4毫升之间，超出或低于此范围，应增减样品液用量或改变提取液稀释度。