06核酸的提取及其组分的鉴定

核酸的提取与鉴定实验报告一、实验目的1、掌握从生物样本中提取核酸（DNA 或 RNA）的基本原理和方法。

2、学习使用各种试剂和仪器进行核酸提取的操作步骤。

3、了解核酸鉴定的常用方法及其原理。

4、培养实验操作技能和科学研究的严谨态度。

二、实验原理核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），是生物体遗传信息的携带者。

核酸提取的基本原理是利用细胞裂解液将细胞破碎，使核酸释放出来，然后通过一系列的物理和化学方法将核酸与其他细胞成分分离，最后得到纯度较高的核酸样品。

DNA 提取常用的方法有酚氯仿抽提法、盐析法等。

酚氯仿抽提法是利用酚和氯仿的混合液去除蛋白质，然后通过乙醇沉淀得到 DNA。

盐析法是利用高浓度的盐使蛋白质变性沉淀，从而分离出 DNA。

RNA 提取常用的方法有异硫氰酸胍法、Trizol 法等。

Trizol 法是基于异硫氰酸胍和酚的作用，能够有效地裂解细胞并抑制 RNA 酶的活性，从而提取出完整的 RNA。

核酸鉴定的方法主要有紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法等。

紫外分光光度法通过测定核酸在 260nm 和 280nm 处的吸光度值（A260 和 A280）来评估核酸的纯度和浓度。

A260/A280 的比值在 18 20 之间表示 DNA 纯度较高，在 19 21 之间表示 RNA 纯度较高。

琼脂糖凝胶电泳法则是根据核酸分子在电场中的迁移率不同来分离和鉴定核酸，DNA 分子在琼脂糖凝胶中迁移距离与分子量大小成反比，RNA 通常会呈现出 28S、18S 和 5S 三条带。

三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜的动物组织（如肝脏、肌肉等）或培养的细胞。

大肠杆菌菌液。

2、实验试剂细胞裂解液（含蛋白酶 K）。

酚氯仿混合液（酚：氯仿＝ 1:1）。

无水乙醇、75%乙醇。

3M 醋酸钠（pH 52）。

Trizol 试剂。

异丙醇。

RNA 酶抑制剂。

琼脂糖。

50×TAE 电泳缓冲液。

核酸染料（如 EB 或 GelRed）。

一、实验目的1. 学习核酸的提取方法。

2. 鉴定核酸的组成成分，包括戊糖、磷酸和碱基。

3. 掌握比色法测定核酸含量的原理和方法。

二、实验原理核酸是生物体内的重要生物大分子，包括核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）。

核酸的组成成分主要包括戊糖、磷酸和碱基。

本实验通过提取动物组织中的核酸，鉴定其组成成分，并测定核酸含量。

1. 核酸提取：利用组织匀浆和酚-氯仿法提取动物组织中的核酸。

2. 组成成分鉴定：通过酸水解法使核酸水解，然后利用比色法分别测定戊糖、磷酸和碱基的含量。

3. 核酸含量测定：利用定磷法测定核酸中的磷含量，进而推算出核酸含量。

三、实验器材与试剂1. 实验器材：组织匀浆器、离心机、分光光度计、电炉、水浴锅、试管、吸管、刻度管、容量瓶等。

2. 实验试剂：动物组织匀浆剂、酚、氯仿、异丙醇、NaCl、NaOH、HCl、磷酸二氢钾、钼酸铵、硫酸等。

四、实验步骤1. 核酸提取：（1）取动物组织匀浆剂，加入动物组织匀浆，匀浆后加入酚-氯仿混合液（1:1），充分振荡，静置分层。

（2）将上层含核酸的酚相转移至新试管中，加入等体积的氯仿，充分振荡，静置分层。

（3）将上层含核酸的氯仿相转移至新试管中，加入等体积的异丙醇，充分振荡，静置沉淀。

（4）弃去上清液，将沉淀用少量70%乙醇洗涤，弃去洗涤液，真空干燥，得到核酸粗制品。

2. 组成成分鉴定：（1）戊糖鉴定：将核酸粗制品溶解于水中，加入浓HCl，沸水浴水解30分钟，加入苯酚-硫酸试剂，观察颜色变化。

（2）磷酸鉴定：将核酸粗制品溶解于水中，加入浓HCl，沸水浴水解30分钟，加入钼酸铵试剂，观察颜色变化。

（3）碱基鉴定：将核酸粗制品溶解于水中，加入浓HCl，沸水浴水解30分钟，加入硝酸钠试剂，观察颜色变化。

3. 核酸含量测定：（1）标准曲线绘制：配制一系列不同浓度的标准磷溶液，测定其在特定波长下的吸光度，绘制标准曲线。

（2）样品测定：将核酸粗制品溶解于水中，加入浓HCl，沸水浴水解30分钟，加入钼酸铵试剂，测定其在特定波长下的吸光度，从标准曲线上查得磷含量，进而推算出核酸含量。

实验十六动物组织中核酸的提取及其组成成分的鉴定【实验名称】：动物组织中核酸的提取及其组成成分的鉴定09救援一班第三大组李岚宇2009222336室温：20°（一）实验目的：1、学习离心技术，掌握离心机的使用方法。

2、了解本实验的设计思路。

（二）实验原理：核酸包括两个部分：核糖核酸（RNA）、脱氧核糖核酸（DNA），广泛存在于生物细胞中，本实验从动物肝组织分离提取RNA和DNA，用酸水解法使之水解产生其基本组成成分，戊糖、磷酸和碱基，然后分离鉴定。

动物组织细胞中的RNA和DNA大部分与蛋白质结合而形成核蛋白，核蛋白可被三氟醋酸沉淀，再用95％乙醇加热可以去除附着在沉淀上的脂类杂质，然后用10％Nacl溶液提取出核酸的钠盐，再加入乙醇使核酸钠沉淀出。

核酸钠微溶于冷水，不溶于乙醇，加热时核酸的钠盐形成清澈的溶液。

RNA和DNA均可以被硫酸水水解，生成磷酸、嘌呤与嘧啶碱基和戊糖。

①、磷酸与钼酸铵作用产生磷钼酸，后者在还原剂的氨基萘酚磺酸作用下形成兰色的钼兰。

②、嘌呤碱能与硝酸银作用产生灰褐色的絮状嘌呤银化合物。

③、核糖经浓硫酸或浓盐酸作用则生成糖醛，后者能和3、5二羟甲苯反应生成绿色复合物。

④、脱氧核糖在浓酸中生成ω—羟基γ—酮基戊醛，它和二苯胺作用生成兰色化合物。

（三）实验材料与仪器:1、材料：猪肝、2％三氯醋酸、95％乙醇、5％硫酸、浓氨水、钼酸铵、3、5-二羟甲苯、二苯胺、5％硝酸银、氨基萘酚磺酸、。

2、器材：离心管、离心机、玻璃棒、滤纸、小烧杯、水域加热炉、10ml试管、沸水浴锅。

（四）实验步骤1、制备匀液：称取新鲜猪肝置于研钵中加入细沙少许，充分研磨制备成匀液，加入等量的生理盐水。

2、分离抽提：①将肝匀浆倒入离心管内，立即加入2％三路醋酸4ml，用玻璃棒搅拌，然后静止3分钟，离心3500转每分钟，离心2分钟。

②、倾去上层酒精液，在沉淀中加入10％NaCl溶液4ml搅匀，再置于沸水中加热8分钟，并用玻璃棒不断搅拌，取出冷却后在离心（3500转每分钟，2分钟）。

核酸的分离纯化及鉴定技术生化分析描述一、核酸的分离纯化技术1.超声破碎法超声破碎法是一种通过超声波的振动作用破碎细胞膜，释放细胞内的核酸分子的方法。

该方法操作简便，效果较好。

2.酚-氯仿提取法酚-氯仿提取法是一种经典的核酸提取方法，通过酚和氯仿相间重复萃取的方法，将细胞或组织中的核酸分子提取到有机相中，然后用酒精沉淀。

3.离心沉淀法离心沉淀法是利用不同物质在不同离心力下沉降速度的不同，将核酸从其他组分中分离出来的方法。

可通过高速离心使核酸沉淀到底部，将上清液中的其他杂质倒掉，最后用缓冲液重悬核酸。

4.配对离心法配对离心法是利用核酸的碱基配对性质，在特定的条件下使目标DNA 与特异性探针配对，然后通过离心将核酸-探针复合物从其他杂质中分离出来。

这种方法常用于核酸的富集和寡核苷酸修饰位点的分析。

二、核酸的鉴定技术1. 紫外-可见分光光度法（UV-Vis）紫外-可见分光光度法是通过核酸分子在紫外光或可见光波长范围内的吸收特性来确定其存在和浓度的方法。

根据核酸中含有的吸收波长为260 nm处的碱基特征吸光峰，可以判断核酸的纯度和浓度。

2.电泳分析法电泳分析法是通过核酸分子在电场中的迁移速率和特定条件下的尺寸分离效应来分析核酸的方法。

主要包括琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种方法。

核酸经电泳后可以观察到DNA或RNA在凝胶中的特征性带状图案，确定其分子大小、纯度和带电性。

3.PCR（聚合酶链式反应）PCR是一种常用的核酸鉴定技术，通过特定引物和聚合酶的作用，在体外进行核酸的扩增以达到检测目的。

PCR可用于快速检测目标DNA的存在与否，以及定性和定量分析。

4.基因测序技术基因测序技术是指利用测序反应将核酸序列信息转化为比特（通常指二进制），然后通过计算机软件分析的方法对核酸序列进行鉴定。

常用的基因测序技术有dideoxy测序和串联反应测序。

三、应用核酸的分离纯化及鉴定技术广泛应用于生物医学研究、遗传学、分子生物学、基因工程和疾病诊断等领域。

教案与讲稿一、教案2005级医学心理，2005级临床动物组织中核酸的课程名称授课专业和班级本科9班，2005级临床本科6提取与组分的鉴定班，2005级药学专科授课学授课内容纸层析鉴定转氨作用4学时时2006.11.27，6、7、8、9节，6、2006.11.30，7、8、9节，1、2、授课地点分析实验室日期节次2006.12.1，3、4节，1、2、3、2006.12.284节教学目的熟悉苯酚法提取动物组织中核酸的原理和操作方法；了解核酸的组成，掌握核酸组分的鉴定方法。

教学重点动物组织中核酸提取的原理和操作方法；核酸组分的鉴定教学难点核酸提取的操作；核酸组分的鉴定教具黑板、粉笔、实验材料、实验仪器等。

教学方法小班讲课动物组织中核酸提取的原理和操作方法10分钟教学过程核酸组分的鉴定10分钟学生实验操作130分钟实验结果观察及讨论分析10分钟（1）刘粤梅朱怀荣主编《生物化学实验教程》（人民卫生出版社）（2）张文峰黄林邦主编《分析与实验检测技术》（江西高校出版社）思考题课后总结影响本次实验的因素？参考书籍二、讲稿（一）实验原理：核酸由磷酸、戊糖、含氮碱基化合物组成，根据戊糖的不同可分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两大类。

由于它们在组织细胞中大部分与蛋白质结合成核蛋白，因此，提取核酸时必须使核酸与蛋白质分离开并去掉蛋白质。

核蛋白可用水从动物组织（实验中用肝）中提取，再用水饱和的酚去蛋白，释放出核酸，最后用乙醇沉淀出核酸。

核酸可被硫酸水解得到磷酸、戊糖、含氮碱基化合物，根据这三种物质的性质特点可用不同的方法加以鉴定：1．磷酸：可与钼酸试剂作用产生磷钼酸，后者在还原剂（如维生素C或氨基萘酚磺酸等）作用下可立即被还原成蓝色的钼蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比。

2．含氮碱基化合物：嘌呤碱可与硝酸银作用生成灰褐色的絮状嘌呤银。

3．戊糖：核糖：与浓酸（浓盐酸或浓硫酸）共热得到糠醛，后者与3，5-二羟甲苯缩合而成绿色化合物。

一、实验目的1. 熟悉核酸提取、纯化及鉴定的基本原理和方法。

2. 掌握使用紫外分光光度计测定核酸浓度和纯度的技术。

3. 了解核酸的组成成分，包括DNA和RNA，并学会区分它们。

4. 鉴定核酸的完整性。

二、实验原理核酸是生物体内重要的生物大分子，包括DNA和RNA两种。

DNA主要存在于细胞核中，携带遗传信息；RNA则主要存在于细胞质中，参与蛋白质合成等生命活动。

1. 核酸提取：利用细胞破碎、盐析、有机溶剂抽提等方法，将核酸从细胞或其他生物材料中提取出来。

2. 核酸纯化：通过离心、凝胶电泳、柱层析等方法，去除提取过程中混入的杂质，得到纯净的核酸。

3. 核酸鉴定：利用紫外分光光度计测定核酸的浓度和纯度；通过琼脂糖凝胶电泳观察核酸的分子量大小和完整性；通过核酸序列分析确定核酸的种类和碱基序列。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：大肠杆菌细胞、质粒DNA、RNA提取试剂盒、琼脂糖、TAE缓冲液、DNA Marker、DNA电泳试剂盒等。

2. 实验仪器：紫外分光光度计、凝胶成像系统、PCR仪、电泳仪、离心机、冰箱等。

四、实验步骤1. 核酸提取：- 将大肠杆菌细胞用超声波破碎。

- 加入RNA提取试剂盒中的试剂，进行细胞裂解和核酸释放。

- 离心分离细胞碎片和核酸。

- 收集上清液，即为提取的核酸。

2. 核酸纯化：- 将提取的核酸用乙醇沉淀。

- 离心收集沉淀，用无菌水洗涤沉淀。

- 离心收集沉淀，即为纯化的核酸。

3. 核酸鉴定：- 浓度和纯度测定：- 将纯化的核酸用紫外分光光度计测定A260/A280值，计算核酸的浓度和纯度。

- 分子量大小和完整性鉴定：- 将纯化的核酸进行琼脂糖凝胶电泳。

- 用DNA Marker作为参照，观察核酸的分子量大小和完整性。

- 核酸种类鉴定：- 对提取的核酸进行PCR扩增，检测DNA和RNA的存在。

五、实验结果与分析1. 浓度和纯度测定：- 核酸A260/A280值为1.8，说明核酸纯度较高。

第1篇一、实验目的1. 掌握核酸分离与鉴定的原理和方法。

2. 了解核酸的组成和结构。

3. 学会使用实验仪器和试剂，进行核酸的分离与鉴定。

二、实验原理核酸是生物体内重要的生物大分子，包括DNA和RNA。

DNA主要存在于细胞核中，负责遗传信息的存储和传递；RNA主要存在于细胞质中，参与蛋白质的合成和调控。

核酸的分离与鉴定是分子生物学研究的基础。

核酸分离与鉴定主要包括以下步骤：1. 核酸提取：利用细胞破碎技术，将细胞内的核酸释放出来。

2. 核酸纯化：去除杂质，得到纯净的核酸。

3. 核酸鉴定：通过物理、化学或生物学方法，鉴定核酸的种类和结构。

本实验以酵母细胞为实验材料，采用碱法提取RNA，并通过紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法进行鉴定。

三、实验材料与试剂1. 实验材料：酵母细胞2. 试剂：0.04mol/L NaOH溶液、酸性乙醇溶液、琼脂糖凝胶、缓冲液、核酸染料、DNA/RNA Marker等四、实验步骤1. 核酸提取（1）称取1g干酵母细胞，加入2ml 0.04mol/L NaOH溶液，研磨至匀浆状。

（2）加入4ml 0.04mol/L NaOH溶液，混匀，转移至离心管中。

（3）沸水浴加热30min，冷却后离心（2000r/min，15min）。

（4）取上清液，加入等体积的酸性乙醇溶液，混匀，静置2h。

（5）离心（2000r/min，15min），弃去上清液。

（6）加入70%乙醇洗涤沉淀，离心（2000r/min，15min），弃去上清液。

2. 核酸鉴定（1）紫外分光光度法：取适量RNA溶液，在260nm和280nm波长下测定吸光度值，计算RNA浓度。

（2）琼脂糖凝胶电泳：将提取的RNA与DNA/RNA Marker混合，加样至琼脂糖凝胶孔中，电泳（100V，30min）。

观察电泳结果，判断RNA的纯度和完整性。

五、实验结果与分析1. 紫外分光光度法测定结果显示，RNA浓度为0.5mg/ml。

2. 琼脂糖凝胶电泳结果显示，RNA条带清晰，无杂质带，表明RNA纯度和完整性良好。

动物组织中核酸的提取与鉴定实验报告1. 引言核酸（DNA和RNA）是生物体内存储遗传信息和调控基因表达的重要分子。

对于研究生物的遗传特征和进化过程，核酸的提取与鉴定是必不可少的实验步骤。

本实验旨在通过提取动物组织中的核酸，使用常用的鉴定方法分析核酸的质量和纯度。

2. 实验原理核酸提取与鉴定的基本原理是将动物组织中的核酸从其他的细胞组分（如蛋白质、唾液等）中分离出来，并通过吸光度测定和凝胶电泳等方法进行核酸的定性和定量。

2.1 核酸提取核酸提取的步骤包括细胞破碎、蛋白质的去除和核酸的沉淀。

常用的核酸提取方法包括酚-氯仿法、柱式提取法和商业试剂盒法等。

2.2 核酸定性和定量核酸的定性主要通过凝胶电泳进行，通过核酸带的迁移速度和分子量，可以初步判断核酸的纯度和是否受到降解。

核酸的定量则是通过吸光度测定，利用核酸特征的吸收峰波长（260 nm）测定核酸的浓度。

3. 实验材料与方法3.1 实验材料•动物组织样品•细胞破碎缓冲液•蛋白酶•酚-氯仿提取液•乙醇•TE缓冲液•焦亚硫酸铵•乙酸•0.8%琼脂糖凝胶3.2 实验步骤1.将动物组织样品切碎并加入细胞破碎缓冲液，用超声波破碎细胞壁。

2.加入蛋白酶进行蛋白质的消化。

3.加入酚-氯仿提取液，离心分离上层的核酸。

4.将上层的核酸转移到新离心管中，加入等体积的冷乙醇沉淀核酸。

5.离心沉淀的核酸，去除上层的乙醇并用TE缓冲液重悬核酸。

6.使用吸光度计测定核酸的纯度和浓度。

7.进行凝胶电泳，观察核酸的迁移带和分子量。

4. 结果与分析4.1 核酸提取结果通过核酸提取实验，成功从动物组织中提取到了核酸。

提取的核酸样品呈现无色透明的状态，说明核酸净化得较好。

4.2 核酸定性和定量结果将提取得到的核酸样品进行凝胶电泳，观察到了明显的核酸带。

通过与分子量标准品的比较，可以初步判断核酸的分子量范围是否正常。

通过吸光度测定，确定了核酸的浓度。

5. 结论通过本实验，成功提取到了动物组织中的核酸，并通过凝胶电泳和吸光度测定等方法对核酸进行了定性和定量分析。

核酸提取原理及方法
核酸提取是分子生物学实验中的一项重要技术，它是从样本中提取出核酸（DNA或RNA）的过程。

核酸提取的成功与否直接影响到后续实验的结果，因此掌握核酸提取的原理和方法对于科研工作者来说至关重要。

核酸提取的原理主要包括细胞破裂、核酸溶解和纯化三个步骤。

首先，细胞膜和细胞壁的破裂是核酸提取的第一步，它能够释放出细胞内的核酸。

其次，核酸需要被溶解于溶液中，以便后续的纯化步骤。

最后，通过一系列的纯化步骤，如酚-氯仿提取、硅胶柱层析等，可以得到纯净的核酸。

核酸提取的方法多种多样，常用的包括酚-氯仿法、硅胶柱法、离心柱法等。

酚-氯仿法是最早的核酸提取方法之一，它通过酚和氯仿的密度差异来分离核酸。

硅胶柱法则是利用硅胶膜的亲和性吸附核酸，再经过洗脱步骤将核酸纯化。

离心柱法则是利用离心柱的孔径和膜的特性，将核酸分离纯化。

在实际操作中，选择合适的核酸提取方法需要考虑样本的性质、实验的目的以及实验室的设备条件等因素。

例如，对于大量样本的高通量提取，离心柱法可能更为适合；而对于特定类型的样本，如血液、组织等，硅胶柱法可能更具优势。

此外，在核酸提取过程中，还需要注意一些常见的注意事项，如避免核酸的降解、避免污染等。

在操作中，要严格控制各步骤的时间和温度，避免核酸的降解。

另外，要注意使用无核酸酶的试剂和消毒实验台等方法，避免核酸的污染。

总之，核酸提取是分子生物学实验中的基础技术，掌握其原理和方法对于后续实验结果的准确性和可靠性至关重要。

在选择提取方法时，需要根据实际情况进行合理的选择，并严格控制操作过程中的各项细节，以确保提取出的核酸具有高纯度和良好的质量。

核酸的分讲义离纯化及鉴定技术生化分析详解核酸的分离纯化及鉴定技术在生化分析领域具有重要的应用价值。

核酸是生物体内重要的生物大分子，它们具有保存、传递和表达遗传信息的功能。

为了研究核酸的结构和功能，需要对其进行分离、纯化和鉴定。

本文将详细介绍核酸的分离纯化和鉴定技术的生物化学分析。

1.核酸的提取与分离核酸提取是获得核酸样品的第一步，通过破碎细胞膜和细胞壁来释放核酸。

核酸的提取方法主要包括酸性酚/氯仿提取法、盐酸酚/氯仿提取法以及商业化的核酸提取试剂盒等。

2.核酸的纯化核酸提取后，常常需要对核酸进行纯化。

纯化目的是去除杂质，使核酸得到高纯度、高浓度、完整和可靠的分离。

核酸纯化方法主要有：凝胶柱层析、离心柱层析、沉淀、电泳、凝胶电泳纯化、离心纯化、溶液法纯化等。

3.核酸的鉴定核酸的鉴定一般包括酶切鉴定、PCR扩增鉴定和测序鉴定等。

(1)酶切鉴定酶切鉴定是通过限制性内切酶作用分析核酸的序列和结构。

通过将样品与不同酶切加入，并经过酶切电泳后，观察电泳图的特征带，可以推测样品的核酸类型和纯度。

(2)PCR扩增鉴定PCR扩增鉴定是通过聚合酶链式反应（PCR）扩增特定片段的核酸。

通过选择特异的引物，可以扩增出目标核酸片段，从而确定核酸的存在和纯度。

(3)测序鉴定测序鉴定是通过测序技术研究核酸的序列。

常见的测序技术包括Sanger测序、下一代测序（NGS）和单分子测序等。

通过测序，可以确定核酸的准确序列，从而判断核酸的类型和功能。

整体而言，核酸的分离纯化及鉴定技术是生化分析中核心的内容。

通过这些技术，可以获得高纯度、高质量的核酸样品，并准确地鉴定核酸的存在和序列信息。

这些技术的应用广泛，包括基因组学、生物信息学、分子生物学、疾病诊断和药物研发等领域。

随着生化分析技术的不断发展，核酸的分离纯化及鉴定技术将越来越重要，为科学研究和生物医学领域的发展提供强有力的支持。

肝组织中核酸的分离和核酸组分的鉴定[原理]动物肝组织中的核蛋白可用水提取，用酚破坏核酸与蛋白质之间的结合键，再用乙醚抽提除去蛋白质及其杂质，最后用乙醇沉淀核酸。

核酸（DNA 和RNA ）可被酸水解成磷酸、有机碱（嘌呤碱和嘧啶碱）以及戊糖（核糖和脱氧核糖）。

它们分别可用下列方法鉴定：1． 磷酸的鉴定： 磷酸能与钼酸试剂作用生成磷钼酸，后者在还原剂氨基萘酚磺酸钠的作用下还原成蓝色的钼蓝。

H 3PO 4+12H 2MoO 4 H3PO 4·12MoO 3·12H 2O磷酸钼酸 磷钼酸6H+H 3PO 4·12MoO 3·12H 2OH 3PO 4·6MoO 3·3MoO 5·12H 2O+3H 2O磷钼酸 钼蓝2．嘌呤碱的鉴定： 嘌呤碱能与苦味酸作用形成针状结晶。

3．核糖的鉴定： 核糖与强酸共热生成糠醛，后者与苔黑酚（3,5,-二羟甲苯，orcinol ）反应，缩合成绿色化合物。

4． 脱氧核糖的鉴定 脱氧核糖在强酸中加热可生成ω-羟基-γ-酮基戊醛，后者与二苯胺作用生成蓝色化合物。

还原剂 H 3糠醛 3,5-二羟甲苯 绿色化合物 + H HHO —C C —OH H —C —H C —C H 核糖 O +3H 2O 糠醛 H[试剂]（一）90%苯酚溶液。

（二）乙醚。

（三）95%乙醇。

（四）5%硫酸（五）钼酸试剂钼酸铵5g溶于100ml蒸馏水中，再加入浓硫酸15ml，冷却后加蒸馏水至1000ml。

冷处保存（一个月内稳定）。

（六）氨基萘酚磺酸钠溶液1,2,4-氨基萘酚磺酸钠0.5g溶于195ml 15%亚硫酸氢钠与5ml 20%亚硫酸钠溶液中，加塞振摇助溶。

贮存于棕色瓶中，冰箱保存（可用4周）用时取上清液。

（七）饱和苦味酸溶液苦味酸约1.3g溶于100ml蒸馏水中，静置过夜。

临用前取上清液。

（八）Bial试剂苔黑酚1.5g加入浓盐酸500ml中，再加10%氯化高铁20~30滴。

实验十六：动物组织中核酸的提取及其组成成分的鉴定__实验报告实验十六：动物组织中核酸的提取及其组成成分的鉴定一、实验目的1.掌握动物组织中核酸的提取方法；2.了解核酸的基本组成成分；3.学会利用分光光度计测定核酸含量；4.通过实验，加强理论与实践的结合，提高实验技能。

二、实验原理核酸是生物体内的一种重要生物大分子，包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两种。

在动物组织中，DNA主要存在于细胞核中，而RNA主要存在于细胞质中。

核酸的提取通常采用酚-氯仿抽提法，其原理是利用两种物质的极性差异进行分离。

酚（Phenol）是一种弱酸，可与水形成氢键，但与氯仿（Chloroform）不溶，因此可以将酚相和水相分离。

在水相中，氯仿与水互不相溶，而酚与氯仿互溶，因此可以将酚从水相中去除。

通过多次抽提，可以将DNA和RNA有效分离。

三、实验步骤1.实验准备（1）实验材料：动物组织（肝脏、肌肉等）、研钵、离心管、移液器、枪头、称量纸、酚、氯仿、异戊醇、无水乙醇、70%乙醇、0.15mol/L NaCl溶液、0.01mol/L Tris-HCl缓冲液（pH=7.0）、0.001mol/L EDTA溶液（pH=8.0）、0.04mol/L Na2HPO4溶液（pH=7.0）、0.04mol/L NaH2PO4溶液（pH=7.0）、双蒸水。

（2）设备仪器：冷冻高速离心机、漩涡振荡器、电子天平、烘箱、分光光度计。

2.实验步骤（1）样品制备：称取50-100mg动物组织，在研钵中研磨成粉末状，加入适量双蒸水，漩涡振荡器混匀。

将悬浊液转移到离心管中，以12000rpm离心10分钟，弃上清液。

用70%乙醇洗涤沉淀两次，4℃下8000rpm离心10分钟，弃上清液。

将沉淀物真空干燥后保存。

（2）核酸提取：在沉淀物中加入适量酚-氯仿混合液（体积比1:1），用枪头充分振荡混匀。

将混合液转移到离心管中，以12000rpm离心10分钟，将水相和酚相分离。