2018届高考生物二轮专题复习测试题：专题17基因工程和细胞工程含答案

基因工程和细胞工程1．为增加油菜种子的含油量,科研人员将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

(1)研究人员采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因,该技术是利用________的原理,使相应基因呈指数增加。

所含三种限制酶(XbaⅠ、ClaⅠ、SacⅠ)的切点如图所示,则用________和________处理两个基因后,可得到酶D基因和转运肽基因的融合基因。

(2)将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的________中,构建基因表达载体并导入农杆菌中。

为了获得含融合基因的单菌落,应进行的操作是______________________________。

随后再利用液体培养基将该单菌落菌株振荡培养,可以得到用于转化的侵染液。

(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间的目的是_____________________________,进一步筛选后获得转基因油菜细胞,提取上述转基因油菜的mRNA,在逆转录酶的作用下获得cDNA,再依据________的DNA片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检测,可判断融合基因是否完成________。

最后采用抗原—抗体杂交法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。

答案：(1)DNA双链复制ClaⅠDNA连接酶(2)T­DNA将获得的农杆菌接种在含四环素的固体培养基上培养(3)利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞融合基因转录2．人外周血单核细胞能合成白细胞介素2(IL?2)。

该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解。

研究人员将IL?2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,在酵母菌中表达出具有IL?2生理功能且不易降解的IL?2?HSA融合蛋白,技术流程如图。

请回答：(1)图中③过程的模板是________,表达载体1中的位点________应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2。

(2)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL?2蛋白对应的碱基序列不能含有__________,才能成功表达出IL?2?HSA融合蛋白。

基因工程和细胞工程一、单选题1．在动物细胞培养的有关叙述中，不正确的是A．动物细胞培养前先用胰蛋白酶使离体组织分散成单个体细胞B．动物细胞培养的目的就是为了获得大量的分泌蛋白C．动物细胞培养液的成分含葡萄糖、氨基酸、促生长因子、血清等D．将细胞培养在含有毒物质的溶液中，可通过变异细胞的百分率判断有毒物质的毒性【答案】B【解析】试题分析：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

A．动物细胞培养前先用胰蛋白酶使离体组织分散成单个体细胞。

B．动物细胞培养的目的就是为了获得细胞或细胞产物。

C．动物细胞培养液的成分含葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。

D．将细胞培养在含有毒物质的溶液中，可通过变异细胞的百分率判断有毒物质的毒性。

考点：本题考查动物细胞培养的相关知识。

点评：本题意在考查考生的识记能力和理解能力，属于容易题。

2．下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是（）A．叶肉细胞已经高度分化,无法表现出全能性B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织C．融合植物叶肉细胞时,应先去掉细胞膜D．叶肉细胞离体培养时,可以表现出全能性【答案】D【解析】试题分析：叶肉细胞已经高度分化，但在体外培养的条件下也能表现出全能性，A错误；叶肉细胞经脱分化过程可形成愈伤组织，B错误；融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞壁，C错误；叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性，形成完整植株，D正确考点：本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程、条件等基础知识，掌握植物细胞具有全能性的原因，能结合所学的知识准确判断各选项。

3．培育英国克隆羊“多利”、培育番茄—马铃薯、制备单克隆抗体所用的生物工程技术依次为（）。

A．基因工程、细胞工程、基因工程B．细胞工程、细胞工程、细胞工程C．基因工程、细胞工程、细胞工程D．细胞工程、基因工程、基因工程【答案】B【解析】试题分析：克隆羊为核移植技术，为动物细胞工程，番茄—马铃薯为体细胞杂交技术，为植物细胞工程，单克隆抗体为动物细胞工程，B正确。

(5)已知YCF1特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析，转基因杨树比野生 型能更好地适应高Cd环境的原因是________________________________。
相 较 于 草 本 植 物 ， 采 用 杨 树 这 种 乔 木 作 为 Cd 污 染 土 壤 修 复 植 物 的 优 势 在 于 _________(写出两点即可)。
6．愈伤组织的细胞排列整齐而紧密，且为高度液泡化、无定形态的薄壁细胞
( ×) 7．植物产生的种子能发育成新的个体，是种子细胞全能性的体现( × ) 8．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织细胞基因都
是相同的( × ) 9．在动物细胞培养与植物组织培养中，都需要对培养基灭菌，还都需要用到
注：目的基因插入位置：插入至启动子下游，终止子上游
(3)将目的基因导入受体细胞的“3 大方法” ①导入植物细胞——农杆菌转化法(花粉管通道法、基因枪法)。 ②导入动物细胞——显微注射法(一般导入受精卵)。 ③导入微生物细胞——使用 Ca2＋处理细胞。 (4)理清目的基因的检测与鉴定 ①导入检测：DNA 分子杂交技术(使用 DNA 探针)。 ②表达检测转录：分子杂交技术检测mRNA
4．(教材选修3 P36“小知识”)说出植物组织培养的培养基组成。大__多__数__都__是__由__ _无__机__营__养__成__分__、__有__机__营__养__成__分__、__激__素__、__琼__脂__四__部__分__组__成____ 。
5．(教材选修3 P52“生物技术资料卡”)病毒灭活的含义是什么？_灭__活__是__指__用__物__ _理__或__化__学__手__段__使__病__毒__或__细__菌__失__去__感__染__能__力__，__但__是__并__不__破__坏__这__些__病__原__体__的__抗__原__结__构__ 。

高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级（时间：90分钟分数：100分）一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。

每题只有一个选项符合题意。

）1．以下说法正确的是（）A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B．质粒是基因工程中惟一的运载体C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（）A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂3．有关基因工程的叙述正确的是（）A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C.质粒都可作运载体D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（）A.基因工程B.组织培养C.诱变育种D.杂交育种5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体B．培养人的B细胞能够无限地增殖C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥7．以下对DNA的描述，错误的是（）A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息B.同种生物个体间DNA完全相同C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达D.一个DNA分子可以控制多个性状8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（）A.氨基酸结构B.蛋白质空间结构C.肽链结构D.基因结构9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（）A.DNA双螺旋结构模型的建立B.遗传密码的确立及其通用性的发现C.生物体细胞全能性的证明D.遗传信息传递的“中心法则”的发现10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（）A.分子杂交技术B.抗原—抗体杂交C.抗虫或抗病的接种D.基因枪法11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（）A.植物组织培养B. 单克隆抗体C. 植物体细胞杂交D.细胞核移植12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（）A.基本原理相同B.诱导融合的方法类C.原生质体融合D.可用灭活的病毒作诱导剂13．下列哪一项属于克隆（）A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D．将某种瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系14. 在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个）放入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是（）A．640 B．8100 C．600 D．864015.下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是（）A.培养基成分不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株16. 用于核移植的供体细胞一般都选用（）A.受精卵B.传代10代以内的细胞C.传代10~50代以内的细胞D.处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞17.下面对动物细胞融合技术及意义的叙述，不合理的是（）A.将来有可能通过此方法来生产白细胞介素B.通过克服远源杂交不亲和现象来获得新物种C.有助于对细胞这一生命单位的更为科学的认识D.融合本身与生物膜的流动性直接相关18.下列不属于动物细胞工程应用的是（）A．大规模生产干扰素．用于抵抗病毒引起的感染B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞C．大规模生产食品添加剂、香料等D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖19．科学家用小鼠骨髓癌细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓癌细胞融合的是（）A．经过免疫的B淋巴细胞B．不经过免疫的T淋巴细胞C．经过免疫的T淋巴细胞D．不经过免疫的B淋巴细胞20．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。

基因工程和细胞工程1．为增加油菜种子的含油量,科研人员将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种.(1)研究人员采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因,该技术是利用________的原理,使相应基因呈指数增加.所含三种限制酶(XbaⅠ、ClaⅠ、SacⅠ)的切点如图所示,则用________和________处理两个基因后,可得到酶D基因和转运肽基因的融合基因.(2)将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的________中,构建基因表达载体并导入农杆菌中.为了获得含融合基因的单菌落,应进行的操作是______________________________.随后再利用液体培养基将该单菌落菌株振荡培养,可以得到用于转化的侵染液.(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间的目的是_____________________________,进一步筛选后获得转基因油菜细胞,提取上述转基因油菜的mRNA,在逆转录酶的作用下获得cDNA,再依据________的DNA片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检测,可判断融合基因是否完成________.最后采用抗原—抗体杂交法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达.答案：(1)DNA双链复制ClaⅠDNA连接酶(2)T­DNA将获得的农杆菌接种在含四环素的固体培养基上培养(3)利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞融合基因转录2．人外周血单核细胞能合成白细胞介素2(IL?2).该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解.研究人员将IL?2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,在酵母菌中表达出具有IL?2生理功能且不易降解的IL?2?HSA融合蛋白,技术流程如图.请回答：(1)图中③过程的模板是________,表达载体1中的位点________应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2.(2)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL?2蛋白对应的碱基序列不能含有__________,才能成功表达出IL?2?HSA融合蛋白.启动子是________识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA.(3)培养人外周血单核细胞时,需要将温度控制在________℃,此外还需要通入________________(气体).(4)应用____________技术可检测酵母菌是否表达出IL?2?HSA融合蛋白.(5)如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞,经胚胎培养后移入受体母牛子宫内可以存活的生理学基础是__________________________________________________.答案：(1)IL?2的cDNA a(2)终止密码子RNA聚合酶(3)37 无菌的95%空气和5%CO2(4)抗原—抗体杂交(5)母牛子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应3．(广东肇庆模拟)“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一,其本质是利用腺病毒和人P53基因(抑癌基因)拼装得到的重组病毒.人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复,使其恢复正常,或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡,阻止细胞癌变.“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒,其致病力很弱,其基因不整合到宿主细胞的基因组中,无遗传毒性；载体经基因工程改造后,只对细胞实施一次感染,不能复制,不会污染.请回答下列问题：(1)在“今又生”的生产中,为了获得更高的安全性能,在载体一般应具备的条件中,科学家选择性地放弃了一般载体都应具有的________________特点.检测P53基因的表达产物,可以采用________________________技术.(2)如果要大量扩增P53基因,一般采用PCR技术,该技术中需使用一种特殊的酶：________________________.与体内DNA复制相比较,PCR反应要在______________中才能进行,并且要严格控制________条件.(3)如果要获得胚胎干细胞进行研究,则胚胎干细胞可来源于囊胚的________________,或胎儿的原始性腺；在培养时,细胞充满培养皿底部后停止分裂,这种现象称为________.如果想继续培养则需要重新用________处理,然后分瓶继续培养,这样的培养过程通常被称为传代培养.答案：(1)自我复制抗原—抗体杂交(2)热稳定DNA聚合酶(Taq酶) 一定的缓冲溶液温度(3)内细胞团接触抑制胰蛋白酶4．请回答以下有关基因工程的问题：(1)基因工程中切割DNA的工具酶是________.DNA连接酶根据其来源不同,分为________和________.(2)利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成________.(3)____________________是基因工程的核心步骤.启动子是________识别和结合的部位,它能驱动基因转录出mRNA.(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________.(5)要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用的方法是________技术.答案：(1)限制性核酸内切酶(限制酶) E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶(顺序可颠倒)(2)引物(引物对)(3)基因表达载体的构建RNA聚合酶(4)农杆菌转化法(5)DNA分子杂交5．油菜中油酸为不饱和脂肪酸,能降低人体血液的胆固醇含量,减少人体患心血管病的风险.F基因控制合成的油酸酯氢酶催化油酸形成饱和脂肪酸,转反义F基因油菜能提高菜籽油的油酸含量.请分析回答下列问题：(1)从油菜细胞的染色体DNA获取F基因后进行大量扩增的方法为________.利用该方法扩增目的基因的前提是________________.(2)构建反义F基因表达载体时,需要用到的工具酶有________________；农杆菌可用来将反义F基因表达载体导入油菜细胞,从分子角度分析,其具有的特点是________________________________________________________________________.构建反义F基因表达载体时没有设计标记基因,其可能的原因是________________________________________________________________________.(3)Le启动子为种子特异性启动子,将F基因反向连接在Le启动子之后构建了反义F基因.检测转反义F基因油菜细胞内F基因转录的mRNA含量,结果表明,因杂交形成双链RNA,细胞内F基因的mRNA水平下降.由此推测,反义F基因的转录抑制了F基因的________(填“复制”“转录”或“翻译”)过程.若F基因转录时,两条单链(a1、a2)中a1为转录的模板链,则反义F基因转录时的模板链为________.答案：(1)PCR技术有一段F基因的核苷酸序列(2)限制酶、DNA连接酶其Ti质粒上的T－DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA 上无标记基因表达产物,有利于食品安全(3)翻译a26．克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞异常凋亡有关.Bcl?2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系.克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图.请回答：(1)图中重组细胞的细胞核来自________细胞,早期胚胎移入受体子宫继续发育,经桑椹胚、囊胚和________胚最终发育为克隆猪.(2)在PCR 过程中可检测出cDNA 中Bcl ?2 cDNA 的分子数,进而计算总mRNA 中Bcl ?2 mRNA 的分子数,从而反映出Bcl ?2基因的转录水平.①图中X 表示________过程.②在PCR 过程中利用________技术可检测出cDNA 中Bcl ?2 cDNA 的分子数.(3)该过程所涉及的现代生物技术有早期胚胎培养、胚胎移植、________和________.(4)目前使用的供体细胞一般都选择传代10代以内的细胞,原因为________________________________________________________________________.答案：(1)体 原肠(2)①反转录 ②DNA 分子杂交(3)动物细胞培养 核移植技术(4)传代10代以内的细胞保持正常的二倍体核型7．应用植物组织培养技术,不仅可实现种苗的快速繁殖,培育无病毒植株,也可加快作物及苗木育种.下面是培育柑橘耐盐植株的实验流程：茎段→愈伤组织―――――――――――――――→处理1：先用γ射线照射处理2：后在培养基中加入物质X 挑选生长的愈伤组织→耐盐植株 回答下列问题：(1)愈伤组织是由离体的茎段经________________过程形成的,此时愈伤组织细胞_______________(填“具有”或“不具有”)细胞的全能性.(2)对愈伤组织进行了两次处理,处理1中γ射线照射的目的是________________,用γ射线不直接处理茎段而是处理愈伤组织,原因是________________________________；处理2中添加的物质X 为________.(3)植物组织培养技术也被广泛应用于其他作物的育种中.在培育白菜—甘蓝、三倍体无子西瓜、农杆菌转化法获得的抗虫棉中,必须用到植物组织培养技术的是________________.答案：(1)脱分化 具有(2)诱发基因突变 愈伤组织细胞分裂能力强,易诱发基因突变 NaCl(或盐)(3)白菜—甘蓝、抗虫棉8．如图为植物体细胞杂交技术流程图,其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞,其基因型分别是AA 和BB.据图分析回答：(1)经过①过程得到的是________,此过程中用到的试剂是________________________.(2)将若干a和b等量混合后转移到培养基上培养,再经过②和③,得到的c细胞可能的类型有________________(用基因型表示).(3)植物体细胞融合成功的标志是________,其产生与细胞内________(细胞器)有关.(4)④和⑤过程分别是________,获得的杂种植物有________个染色体组.(5)植物体细胞杂交与自然状况下的杂交育种相比,前者的主要意义是________________________________________________________________________.答案：(1)原生质体纤维素酶和果胶酶(2)AABB、AAAA、BBBB、AA、BB(3)形成新的细胞壁高尔基体(4)脱分化和再分化四(5)克服远缘杂交不亲和的障碍9．请回答下列关于生物工程的有关问题：(1)基因工程的核心是____________________；将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________,将目的基因导入动物细胞最有效的方法是________.(2)植物体细胞杂交技术中,诱导原生质体融合的化学方法一般是用________作为诱导剂来诱导细胞融合；动物细胞工程中________技术是其他动物细胞工程技术的基础,动物细胞工程的一项重要应用是单克隆抗体的制备,与普通抗体相比单克隆抗体的最主要优点是________________________________________________________________________.(3)胚胎工程中,为了获得产奶量高的奶牛,要对性别进行鉴定,需要取样囊胚期的________做DNA分析,若对囊胚进行胚胎分割,要注意__________________,否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.答案：(1)基因表达载体的构建农杆菌转化法显微注射法(2)聚乙二醇(PEG) 动物细胞培养特异性强、灵敏度高,并可大量制备(3)滋养层将内细胞团均等分割10．单克隆抗体的制备过程如图所示：(1)植物体细胞杂交和单克隆抗体制备,都应用了细胞融合技术,电激和聚乙二醇都可以诱导相应的细胞融合,在诱导动物细胞融合时,还可以用________.细胞融合的原理是________________.(2)融合后的细胞,仅仅由两个细胞互相融合的类型有________种,其中符合要求的细胞是________,其特点为_________________________________________________________.(3)向动物体内反复注射某种抗原,并从动物血清中分离出抗体,这种抗体与单克隆抗体相比,存在的缺点是________________________.由单克隆抗体技术研制成的“生物导弹”由两部分构成,其中一部分被称为“瞄准装置”,它作用的原理是________,其特点为________________________________________________________________________.答案：(1)灭活的病毒诱导细胞膜的流动性(2)3 杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生特定的抗体(3)产量低、纯度低、特异性差抗原与抗体杂交特异性强。

课时作业(十七)基因工程和细胞工程1.近年兴起CRISPK－Cas技术被用于预防和治疗多种人类遗传病。

该技术的核心是一段具有特定序列的RNA(CRISPRRNA)及与该RNA结合在一起的Cas蛋白构成。

回答下列问题：(1)治疗人类遗传病最有效的手段是基因治疗，通常又分为________和________两种类型。

(2)用该技术治疗遗传病的基本过程是：根据遗传病致病基因的序列设计一段RNA(即CRISPRRNA)，将该RNA与Cas蛋白结合形成复合体，并导入患者细胞中，导入方法与外源基因导入人体细胞相似，可采用________法；进入细胞后的复合体RNA按照________原则准确的结合在致病基因部位，而Cas蛋白则对致病基因进行切割。

由此可见，Cas蛋白应该是一种________酶。

(3)对于患遗传病的个体来说，不可能对每个细胞都注射该复合体，因此，研究人员选用________为运载体，从而使复合体在运载体的协助下能够大量主动进入人体细胞，但在使用前需要对运载体进行________处理，以保证其安全性。

该运载体进入人体细胞的方式通常是________。

答案(1)体内基因治疗体外基因治疗(2)显微注射碱基互补配对限制性核酸内切(3)动物病毒灭毒(或(减毒) 胞吞解析(1)基因治疗分为体内基因治疗和体外基因治疗两种类型。

(2)将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；进入细胞后的复合体RNA按照碱基互补配对原则准确的结合在致病基因部位；Cas蛋白可对致病基因进行切割。

由此可见，Cas蛋白应该是一种限制性核酸内切酶。

(3)利用动物病毒侵染动物细胞的特性，可选用动物病毒为运载体，从而使复合体在运载体的协助下能够大量主动进入人体细胞，但在使用前需要对运载体进行灭毒(或(减毒)处理，以保证其安全性。

该运载体进入人体细胞的方式通常是胞吞。

2.(2017·合肥市三模)下图表示细胞工程的流程图(a、b表示过程)，请据图回答下列问题：(1)若图示为动物细胞融合的过程，则a特有的诱导剂是________。

细胞工程(限时：25分钟)1．(2015·烟台模拟)如图为利用人的成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠的骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图，请回答相关问题。

(1)图示方法是________________技术的应用，该技术的基础是________________技术。

(2)操作所用的成纤维细胞应传代________代以内，诱导融合时需要加入的促融剂是________。

(3)人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成____________细胞，再经过一次________，形成单核细胞。

(4)HAT培养基起________培养作用，培养时温度应为________℃，操作中加入乌本苷的目的是_____________________________________________。

2．(2015·郑州质检)马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。

请分析并回答：(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，经过人工培养获得脱毒苗。

培养基中添加________________(填激素名称)，诱导离体细胞经过________和________完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。

为监控脱毒苗的质量，可采用________________的方法检测病毒的蛋白质。

(2)研究人员研究了茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图所示。

实验结果表明：茎尖越小，____________________________________，因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为________mm。

3．(2015·潍坊模拟)下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图，据图回答下列问题：(1)图中向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有______________(填写抗体的名称)的混合物，这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低，而且纯度低。

专题能力提升练十九基因工程和细胞工程(45分钟·100分)1.(12分)下图是科学家利用小鼠成纤维细胞获得单克隆抗体的示意图。

请据图回答：(1)获取转录因子基因需要的工具酶是，因成纤维细胞较小，过程①将目的基因导入小鼠成纤维细胞时常用的载体是。

(2)过程②称为，在此过程中，成纤维细胞在转录因子基因的作用下，转化为iPS胚性细胞，在体外培养条件下，iPS胚性细胞能不断进行。

(3)过程③为动物细胞融合，此过程常用、灭活的病毒、电刺激等诱导细胞融合，融合后的Y细胞具有的特性。

(4)对杂种细胞Y进行和后，才能筛选出能产生特异性抗体的杂种细胞。

【解题指导】解答本题的关键是明确题图信息：①将目的基因导入受体细胞；②动物细胞培养；③动物细胞融合；④获得单克隆抗体。

【解析】(1)获取转录因子基因需要的工具酶是限制酶。

因成纤维细胞体积较小，过程①将目的基因导入成纤维细胞时最常用的载体是动物病毒。

(2)在体外培养条件下，iPS胚性细胞能不断进行细胞分裂。

(3)动物细胞融合时，常用聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等进行诱导。

融合后的Y细胞既能大量增殖，又能产生单一抗体。

(4)杂交瘤细胞经过克隆化培养，并通过抗原-抗体杂交技术的检测，才可大量生产符合要求的单克隆抗体。

答案：(1)限制酶动物病毒(2)动物细胞培养细胞增殖(细胞分裂)(3)聚乙二醇(PEG) 既能大量增殖，又能产生单一抗体(4)克隆化培养(抗原-)抗体检测2.(14分)(2018·芜湖三模)下图是制备抗埃博拉病毒(EBOV)VP40蛋白单克隆抗体的过程。

请据图回答：(1)利用PCR获取目的基因的过程中，反应体系内要加入含有VP40基因的DNA、dNTP、Taq酶和根据合成的引物，且反应需要在一定的溶液中才能进行。

(2)选用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的优点是；VP40基因进入大肠杆菌细胞，并在大肠杆菌内维持稳定和表达，该过程可称为。

专题整合训练(十五) 基因工程和细胞工程[全员必做题]1、(2017·江西新余一中高三理科综合)内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽。

内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。

ET A是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ET A基因在细胞中高效表达,为后期ET A的体外研究奠定基础。

其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG)。

请分析回答：(1)完成过程①需要的酶是________；(2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使________键断开,形成的黏性末端是________。

用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是_______________________________________。

(3)过程④中需要________酶,去构建重组质粒。

过程⑥中,要用________预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界的DNA。

(4)利用SNAP基因与ET A基因结合构成融合基因,目的是________。

(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。

美容时可以利用注射ET A 达到美白祛斑效果,试解释原因：_____________________________抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。

【答案】 (1)逆转录酶 (2)磷酸二酯—GAGG —C (或—C —GAGCT )可以使目的基因定向连接到载体上(3)DNA 连接酶 Ca 2＋(或CaCl 2)(4)检测ET A 基因能否表达及表达量(5)ET A 能与内皮素结合,减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合【解析】 (1)图中过程①是逆转录,需要逆转录酶的催化。

(2)限制酶能识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定脱氧核苷酸之间切断磷酸二酯键；根据题意可知限制酶XhoⅠ切割DNA 形成的黏性末端是—GAGCT —C (或—C —GAGCT)；两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是可以使目的基因定向连接到载体上(或防止含目的基因的外源DNA 片段和质粒自身环化)。

专题七现代生物科技专题1．(2016·全国卷Ⅲ)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了Eco RⅠ、Bam HⅠ和Sau3AⅠ三种限制内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示用意(载体上的Eco RⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。

图(a)图(b)依照基因工程的有关知识，回答以下问题：(1)经Bam HⅠ酶切后取得的目的基因能够与上述表达载体被________酶切后的产物连接，理由是________________________________________________________________________________。

(2)假设某人利用图(b)所示的表达载体取得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。

这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________，不能表达的缘故是_________ _____________________________________________________。

甲乙丙图(c)(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有________________和________________，其中既能连接黏性结尾又能连接平结尾的是_________________________________________。

解析：(1)分析图(a)可知，限制酶Sau3A Ⅰ与Bam H Ⅰ切割DNA后形成的黏性结尾相同，故经这两种酶切割取得的产物能够用DNA连接酶进行连接。

(2)构建基因表达载体时，为保证目的基因能在宿主细胞中成功表达，目的基因应插入在启动子和终止子之间，据此可判定甲、丙均不符合要求，目的基因均不能被转录。

(3)常见的DNA连接酶有E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶，其中T4 DNA连接酶既能连接黏性结尾又能连接平结尾。

答案：(1)Sau3A Ⅰ两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性结尾(2)甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录(3)E·coli DNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶2．阅读如下资料：资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，取得了体型庞大的“超级小鼠”；科学家采纳农杆菌转化法培育出转基因烟草。

（全国通用）2018届高考生物二轮复习基因工程和细胞工程专题卷3一、单选题1．碱基互补配对发生在下列哪些生理过程或生物技术中（）①受精作用②病毒的增殖过程③细菌的二分裂过程④目的基因与运载体的结合⑤DNA探针的使用⑥细胞的融合A．②③④⑤B．①③④⑤C．②④⑤ D．②③⑤⑥【答案】A【解析】试题分析：受精作用是精子和卵细胞的融合，染色体组的合并，无碱基互补配对发生。

病毒的增殖过程有核酸的复制等活动，所以有碱基互补配对发生。

细菌分裂也要进行遗传物质的复制，所以有碱基互补配对发生。

目的基因与运载体的结合，一般靠黏性末端碱基的互补配对结合。

DNA探针的使用依据的是DNA分子杂交原理，所以有碱基互补配对发生。

细胞融合依据的是膜的流动性，所以没有碱基互补配对发生。

考点：本题考查细胞代谢的相关知识，意在考查基础知识的理解应用。

2．乳腺生物反应器、人工种子和克隆动物均属于生物工程的成果，下列叙述正确的A．三者都涉及基因工程技术 B．三者都是在细胞或细胞器水平操作的C．克隆动物属于无性生殖范畴 D．人工种子的胚状体是由受精卵发育而成【答案】C【解析】克隆动物属于无性繁殖的产物。

3．下列关于细胞工程的叙述，错误的是A．植物体细胞杂交过程和动物细胞融合的原理不完全相同B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C．通过光学显微镜观察比较白菜细胞的形态，可以检验其细胞壁是否已被除去D．某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同【答案】D【解析】试题分析：植物体细胞杂交过程的原理细胞膜的流动性和细胞的全能性，而动物细胞融合的原理是膜的流动性，A正确；去除植物细胞的细胞壁时用纤维素酶和果胶酶处理，将动物组织分散成单个细胞时需用到胰蛋白酶，B正确；通过光学显微镜观察比较白菜细胞的形态，可以检验其细胞壁是否已被除去，C正确；某种植物甲乙两品种的体细胞杂种中染色体数目是甲乙两品种杂交后代的染色体数目的2倍，D错误。

基因工程、细胞工程检测题1．利用转基因奶牛乳腺生物反应器生产人的生长激素，需要构建一种能高水平表达的表达载体，选择合适的基因启动子至关重要。

由于无法由基因表达产物推知启动子的碱基序列，运用PCR技术单独克隆启动子存在困难。

科研人员经过长期研究，终于发明了下图所示的一种克隆启动子的方法。

请回答：(1)培育转基因奶牛时，需要在生长激素编码序列前插入________的启动子。

(2)由基因表达产物无法推知启动子碱基序列，其原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

(1)过程①需选择的限制酶是____________，过程③需选择的限制酶是____________。

过程④需要使用的工具酶是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

(4)过程④中可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计____________进行扩增。

2．转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示(①至④代表过程，A至C代表结构或细胞)：(1)图中①过程用到的酶是________，所形成的B叫做________。

(2)②过程常用________处理农杆菌，使之成为________细胞，利于完成转化过程。

(3)图中③过程叫做________________，④过程叫做________________，将叶盘培养成草莓幼苗的技术是________________。

高考生物专题复习《基因工程》【考点梳理.逐个击破】一、基因工程的操作工具1．限制性核酸内切酶(简称限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)作用：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

(3)结果：产生黏性末端或平末端。

2．DNA 连接酶3．载体(1)作用：携带外源DNA 片段进入受体细胞。

(2)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

(3)条件⎩⎪⎨⎪⎧能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取(1)目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以是具有调控作用的因子。

(2)获取方法⎩⎪⎨⎪⎧从基因文库中获取利用PCR 技术扩增通过化学方法人工合成2．基因表达载体的构建 (1)构建基因表达载体的目的①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。

②使目的基因能够表达和发挥作用。

(2)基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子及标记基因等。

3．目的基因导入受体细胞微生物细胞感受态细胞法(Ca2＋处理法)4．目的基因的检测与鉴定检测目的检测方法判断标准目的基因是否插入转基因生物的DNA DNA分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交技术是否出现杂交带个体水平的检测如抗虫、抗病的接种实验是否表现出相应的特性三、基因工程的应用及蛋白质工程1．基因工程的应用(1)动物基因工程：提高动物生长速度从而提高产品产量；改善畜产品品质；用转基因动物生产药物；用转基因动物作器官移植的供体等。

(2)植物基因工程：培育抗虫转基因植物(如抗虫棉)、抗病转基因植物(如转基因烟草)和抗逆转基因植物(如抗寒番茄)；利用转基因改良植物的品质(如新花色矮牵牛)。

2．基因诊断与基因治疗(1)基因诊断：又称为DNA诊断，是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。

2018年高考生物专题练习基因工程与细胞工程答案1．（1）土壤农杆菌转化启动子终止子标记基因（2）病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因、几丁质酶基因和抗毒素合成基因（3）①不敏感②被分解（4）目的基因的检测与鉴定2．（1）构建基因表达载体启动子限制性核酸内切酶和DNA连接酶（2）受精卵动物受精卵具有全能性(动物不能像植物那样,利用一个除受精卵以外的独立的体细胞直接培养成完整的个体)（3）作为标记基因,以便于筛选抗原（4）基因治疗、动植物改良、利用动植物生产药物等3．（1）PCR(聚合酶链式反应) 引物耐高温的DNA聚合或热稳定DNA聚合标记基因（2）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因Bam HⅠ和Hin dⅢ（3）抗盐基因(或目的基因) 将培育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤中,观察该烟草植株的生长状态4．（1）二者存在生殖隔离（2）基因表达载体的构建不含病毒或含病毒极少分化程度低或易诱导脱分化和再分化(答案必须是两个方面) DNA分子杂交技术（3）原生质体细胞壁（4）定向改造生物(或克服了远缘杂交不亲和的障碍)5．（1）植物体细胞杂交植物组织培养（2）纤维素酶和果胶酶促进原生质体的融合（3）保持原生质体完整性愈伤组织（4）形态和数目黑腐病菌6．（1）脱氧核苷酸不是加热（2）无菌、无毒（3）抗体、干扰素（4）乳腺蛋白基因（5）尿血小板溶素膜蛋白生产周期短、不受性别和年龄的限制7．（1）免疫活性cDNA（2）骨髓瘤有丝分裂（3）融合的杂种(杂交瘤) 克隆化培养和抗体检测(或答“克隆化培养和专一抗体阳性检测”)（4）分泌抗IL-4抗体(答出此意即可) 让O2进入培养瓶以供细胞代谢、使CO2进入培养瓶维持培养液的pH8．（1）没有核膜包被的细胞核（2）能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原脾脏（3）细胞膜的流动性 3 既能大量繁殖又能产生特异性抗体（4）腹腔特异性强,灵敏度高,并可大量制备2018年高考生物专题练习基因工程与细胞工程解析1．解析：（1）将目的基因导入植物细胞的常用方法是土壤农杆菌转化法。

基因工程与细胞工程时间：45分钟满分：100分一、选择题(每题6分，共60分)1．(2014·重庆卷)下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。

以下相关叙述，正确的是( )A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异解析本题考查基因工程培育抗虫植物的相关知识。

通过对课本知识掌握，②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶，故A错；③侵染植物细胞后，不是重组质粒而是目的基因整合到④(植物细胞)的染色体上，故B错；④植物细胞的染色体上若含有抗虫基因，但不一定能表达该基因，故⑤不一定表现出抗虫性状，故C错；⑤只要表现出抗虫性状就表明植株已发生了可遗传变异，故D正确。

答案 D2．(2014·天津卷)为达到相应目的，必须通过分子检测的是( )A．携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B．产生抗人白细胞介素－8抗体的杂交瘤细胞的筛选C．转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D．21三体综合征的诊断解析根据受体菌是否对链霉素产生抗性进行携带链霉素抗性基因受体菌的筛选，不需要分子检测，A错误；用特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，才能获得足够多的能分泌抗人白细胞介素­8抗体的杂交瘤细胞，B正确；转基因抗虫棉是否具有抗虫特性，需要做抗虫的接种实验，C错误；21三体综合征可通过用显微镜直接观察体细胞中的21号染色体数目的方法进行检测，D错误。

答案 B3．(2013·重庆卷)如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。

下列有关叙述，正确的是( )A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群解析本题主要考查单克隆抗体制备的相关知识。

2018届高考生物二轮专题复习检测：基因工程与细胞工程一、选择题1．(2018浙江高考)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。

下列叙述错误的是( )A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子2．(2018·海淀一模)目前人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉，以下说法正确的是( )A．苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达B．抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可通过传粉、受精的方法，使抗虫性状遗传下去C．标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因D．转基因抗虫棉经过种植，棉铃虫不会产生抗性，这样可以有效消灭棉铃虫3．(2018·四川高考)北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。

如图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是( )A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达4．下列关于植物体细胞杂交或植物细胞质遗传的叙述，错误的是( )A．利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种B．不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程C．两个不同品种的紫茉莉杂交，正交、反交所得F1的表现型一致D．两个不同品种的紫茉莉杂交，F1的遗传物质来自母本的多于来自父本的5．(2018·上海高考)关于哺乳动物细胞体外培养的难易程度，下列表述正确的是( ) A．乳腺癌细胞易于乳腺细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞B．乳腺细胞易于乳腺癌细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞C．乳腺细胞易于乳腺癌细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞D．乳腺癌细胞易于乳腺细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞6．(2018·西城二模)下列关于现代生物技术的叙述正确的是( )A．基因工程中常用DNA探针检测目的基因的表达B．动物体细胞培养所依据的原理是细胞的全能性C．愈伤组织再分化需要用一定比例的植物激素调控D．生态农业能够提高物种丰富度和能量传递效率二、非选择题7．(2018·江苏高考)请回答基因工程方面的有关问题：(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。