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白色念珠菌水溶物诱导小鼠冠状动脉损伤模型的建立

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状 动 脉 损 伤 模 型 的 可 行 性 。方 法 将 ４ ８只 ４～６周 龄 Ｃ ７ Ｌ ６小 鼠 随 机 分 为 实 验 组 和 对 照组 ，各 ２ ５Ｂ ／ ４只 。先 连 续 ５ｄ分 别 给 予 实 验组 和对 照 组 小 鼠腹 腔 注 射 ０ ｇＣ ＷＳ和磷 酸 盐缓 冲 液 。完 成最 后 一 次 注 射后 的 ２ 、３ｄ ．ｍ Ａ ４ ４ｈ 、 ７ｄ及 ２ ，两 组 各 取 ６只 小 鼠 处死 ，留 取 心脏 标 本 ，组 织 切 片并 苏 木精 一 红 （ ） 色 ；测量 小 鼠体 质 量 、 心 ８ｄ 伊 ＨＥ 染 脏 质 量 及 心 脏／ 质 量 比值 。 结 果 体 实 验 组 小 鼠 ３ｄ 体 质 量 、心 脏 质 量 、及 心 脏／ 质 量 比值 较 对 照 组 降 、７ｄ的 体
０ ｇＣ ＷＳ ｒ Ｂ ｃｏｄｎｌ ａｓ ． ｆ ｒｈ ｓｉｊｃ ｏ ．６ｍｃ ａｈ ｎｔｅ ｏ ｏｐ ｅｅｓｃｉｃｄａ ． ｍ Ａ Ｓａｃｒｉｇ ｏ ｄｙ ｔ ５ Ａｔ ｅｌ ｔｎｅｔ ｎ ｉ ｅｃ ｔ ｇ ｕ ｓ ｒ ｒ ｅ ４ ｏＰ ｙｎ １ｏ ｅｔ ａ ｉ ｅ ｉ ｈ ｂ ｈｒ ｗ ａ ｆ ｉ ｔ
１０ — ６ ６ ２ １ ）２ ０ ７ — ３ ０ ０ ３０ （０ ２ ０ — １ ２ ０
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Ａｆ ｉｅ ｏＳａｇ ａ Ｊ ｏ ｎ ｎｖｒｉ ，Ｓ ａｇａ ００ ０ ｈｎ ） ｆ ｌ ｔ ｈｎｈ ｉ ｉ ｔ ｇＵ ｉ ｓｙ ｈ ｈ ２ ０４ ，Ｃ ｉ ｉ ａ ｄｔ ａ ｏ ｅ ｔ ｎ ｉ ａ
Ａｂｔａｔ ｓ ｃ： ｒ ０ｈｅｔ ｅ ｏｅｔｂｉ ｎａｉ ｌ ｄ ｌ ｆ ｏｏａｙａｔ ｓ ｎｉｄ ｃｄｂ ａｄｄ ｂｃ ｉ ｌ Ｔ ｓ ｌ ｈａ ｎ ｅ ｏ ｒｎｒ ｒ ｒ ｌ ｉ ｕ ｅ ｙＣ ｎ ｉａａ ／ ｃｖ ａ ｓ ｍａ ｍｏ ｃ ｅ ｅｏ ｎ ｙ ｌ ｗ ｔｒ ａ ｅ
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１２ ・ ７
临床 儿科杂 志 第 ３ 卷第 ２ ２ １ Ｏ 期 ０ ２年 ２ 月 Ｊ Ｃｉ Ｐ ｄａ ｏ ３ ｏ ｅ ． ０ ２ ｌ ｅｉｒ １０ Ｎ ． Ｆ ｂ２ １ ｎ ｔＶ ． ２
ｄｉ１．９９ ｉ ｎ１０ － ６ ６２ １ ． ． １ ｏ：０３ ６ ￣．ｓ． ０ ３０ ． ２０ ０ ｓ ０ ０ ２２
ｓｌｂｅｆａ ｔ ｎ （ ＡＷＳ）ｉ ｃ ．Ｍｅｈ ｄ Ｆ ｕ ｙｅｇ ｔＣ５ Ｂ ／ ｃ （ ｏｕ ｌ ｒｃｉ ｏ Ｃ ｎ ｍｉｅ ｔ ｏ ｓ ｏ ｒ ．ｉｈ ７ Ｌ ６ ｍｉｅ ４— ６ｗｅ ｋ ｌ ） ｗ ｒ ａ ｄ ｍｌ ｉｉｅ ｔ ｅ ｓｏｄ ｅｅ ｒｎ ｏ ｙｄｖｄ ｄ
低 ，差 异 有 统计 学 意 义 （ ＜０ ５ 。实 验 组 在 ２ 、３ｄ时 ，６只 小 鼠 中各 有 ５只 出现 冠 状 动 脉 损 害 ，表 现 为 以 Ｐ ． ） ０ ４ｈ
中性 粒 细胞 为 主 伴 单 核 细 胞 浸 润 ；７ｄ ８ｄ时 ，６只小 鼠均 出 现 冠 状 动 脉 损 害 ，表 现 为 近 段 扩 张 ，炎 症 细 胞 以 、２ 巨 噬 细 胞 为 主 ，冠 脉 管 壁 出现 成 纤 维 细 胞 增 生 及 弹 力 层 黏液 样 变 性 等 。实 验 组 小 鼠心 脏 病 理 变 化 类 似 川 崎 病 冠 状 动 脉 损 害 。结 论 Ｃ ＷＳ连 续 腹 腔 注 射 能 够 诱 导 Ｃ ７ Ｌ ６小 鼠产 生 冠 状 动 脉损 伤 的 病 理 改 变 ，建 立 一 种 表 现 Ａ ５Ｂ ／
２ ｎ ｎ ｄ ｙ ， ７， ａ ｄ ２ ．， ｅ ｃ ｒ ｉ ｃ ｔ ｓ ｅ ｒ ａ ｖ ｓｅ ４ｈ ａ ｄ ｏ ａ ｓ３ ｎ ８ ｒ ａ ｄ ａ ｉ ｕ ｓｗｅ ｅ ｈ ｒ ｅ ｔ ｄ， ａ ｄ ＨＥ ｓａｎ ｄ ａｔ ｒｈ ｓｏ ｏ ｉａ ｅ ｔ ｎ ｏ ｙ ｈ ｓ ｎ ｔ ｉ ｅ ｆｅ ｉｔｌ ｇｃ ｌｓ ｃｉ ．Ｂ ｄ ｏ
与川崎 病相 似的动物模 型。
关 键 词 ： 白色 念 珠 菌水 溶 物 ； 冠 状 动脉 损 伤 ； 疾 病 模 型
中 图 分 类号 ： Ｑ９ — ５３ 文 献标 志 码 ： Ａ 文章编号 ：
瞄 床 儿科杂右，０ ２ ３ ） １２ ｎ －ｕ， ＡＮ ｉｇｒ
Ｘ ＥＬ￣ａ ，ＷＡ ＧＪ ｎｙ，Ｘ Ａ ｉ －ｎ ，Ｓ Ｎ ，ＨＵ Ｎ ｎ （ ｅａｔ ｎ ａｄ ｌ ｙ ｈｌ ｅ ’Ｈ ｓｉ ｌ Ｉ ｉｉ ｎ Ｎ ｉ — ａ ｉ Ｉ ０ Ｔｎ ｔ ｇ ＨＥ ｅ ｇｉ Ａ Ｇ Ｍｉ Ｄ ｐｒ ｍｅｔｆＣｒｉ ｏ ，Ｃ ｉ ｒｎｓ ｏｐｔ ｏ ｏｇ ｄ ａ
・
论
著・
白色念珠菌水溶物诱导小鼠冠状动脉损伤模型的建立
闫 敬 茹 谢 利 剑 王 健 怡 肖婷 婷 沈 捷 黄 敏
上 海市儿 童 医院 上海 交通 大学 附属儿 童 医院心 内科 （ 上海
摘 要 ： 目的
２０ ４ ） ０ ０ ０
探 讨 建 立 白色 念 珠 菌 水 溶 物 （ ａｄｄ ｂｃｎ ａ ｒ ｏｕ ｌ ｆ ｃ ｏ ，Ｃ ＷＳ 诱 导 幼 年 小 鼠冠 Ｃｎ ｉａ ｌｉ ｓｗ ｔ ｌｂｅ ｒ ｔ ｎ Ａ ） ａ ａ ｅｓ ａ ｉ

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白念珠菌菌落PCR方法的建立和应用

白念珠菌菌落PCR方法的建立和应用


靶点 的发现提供重要线索 。人们对 白念珠菌基 因 功 能 的了解通 常通过 传统 的遗传学 方法来 实 现， 即 敲 除 目的基 因然 后 观 察 基 因缺 失 株 的 表 型 以 发 现该 基 因的功能 。 白念 珠菌是 双倍体 ， 通常需 要 分两 步敲除两个 等位基 因 （ ａ ｌ ｌ ｅ ｌ ｅ ｓ ）才能最终获得
摘
要： 白念珠菌（ Ｃ ａ ｎ ｄ ｉ ｄ ａ ａ ！ ｂ ｉ ｃ ａ ｎ ｓ ） 是 临床上引起 系统 真菌感染 的主要 病原真 菌 ， 在 白念珠菌 临床鉴定 和基 因组 功能研究 中 ，
通常要提取其基 因组 Ｄ Ｎ Ａ以进行 Ｐ Ｃ Ｒ。以 白念珠 菌菌落为材料 ， 通过 蜗牛酶处 理后直接进行 Ｐ Ｃ Ｒ， 从而建立一种简捷快速 的 Ｐ Ｃ Ｒ模 板获取方法 。结果表明 ， 该 方法 避免了提取转化子基因组 Ｄ Ｎ Ａ的过程 ， 可以大大提高工作效率 。 关 键词 ： 白念珠 菌 ； 菌落 Ｐ Ｃ Ｒ； 基 因敲除 ； 基 因型 验证
ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｃ ｏ ｕ ｌ ｄ ｌ ａ ｒ ｇ ｅ ｌ ｙ ｉ ｎ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｗ ｏ ｒ ｋ ｉ ｎ ｇ ｅ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｃ ｙ ｂ ｙ ａ ｖ ｏ ｉ ｄ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｇ ｅ ｎ ｏ ｍｉ ｃ Ｄ ＮＡ．
Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ ：Ｃａ ｎｄ ｉ ｄ ａ ａ ｌ ｂ ｉ ｃ ａ Байду номын сангаасｓ ｒ ；ｃ ｏ ｌ ｏ ｎ ｙ ＰＣＲ；ｇ ｅ ｎｅ ｄｉ ｓ ｒ ｕｐ ｔ ｉ ｏ ｎ；ｇ ｅｎ ｏ ｔ ｙ ｐｅ ｃ ｏ ｎ ｉｒ ｆ ｍａ ｔ ｉ ｏ ｎ
白念珠 菌 ｆ Ｃ ａ ｎ ｄ ｉ ｄ ａ ａ ｌ ｂ ｉ ｃ ａ ｎ ｓ ） 是 临 床 上 最 常 见 的 机 会 型 致 病 真 菌 ，人体 系统 真 菌 感 染 主 要 是 由 白念 珠 菌 引起 的 ｌ 】 ＿ １ 。然 而 ，目前 用 于 临 床 治 疗 系 统 真 菌感 染 的药 物 数 量 有 限 ， 而 且 菌 株 耐 药 性 现 象 日趋 加 重 。 因此 ， 对 白念珠 菌基 因 功 能 的研 究 近 年 来 得 到 人 们 的普 遍 重 视 ，这 将 为抗 真 菌 药 物 新
系统性念珠菌感染小鼠模型的制备

系统性念珠菌感染小鼠模型的制备

系统性念珠菌感染小鼠模型的制备吴玉娥;李航;陈梅玲;龚宝勇;张钰;黄韧【摘要】To establish a stable mouse model of systemic Candida infection and to set up related standard operation procedure .Methods ICR mice were infected with C.albicans or C.parapsilosis by tail vein injection after immunosuppres-sion by cyclophosphamide .The quality control key points included immunosuppression , strain preparation, inoculation doses and the route of inoculation .Survival analysis , bacterial loads and pathological examination were performed to evaluate the prepared model .Results The developed model showed fugal-specific lesions in multiple organs , especially in the kidneys revealed by histopathologicalexamination .Conclusions A stable mouse model of systemic Candida albicans infection can be successfully established by following standardized operation procedure .This mouse model may provide a useful tool for studies on pathogenesis and immune defense of fungal infection and new anti-fungal drug development and so on .%目的：建立稳定的系统性念珠菌感染小鼠模型，规范其操作方法。

免疫抑制小鼠肺白念珠菌感染模型的建立

免疫抑制小鼠肺白念珠菌感染模型的建立

第一作者： 许 群（ 1986-） ，女，在读硕士，主要从事呼吸系统疾病研究。
天，给予 各 免 疫 抑 制 组 小 鼠 腹 腔 内 一 次 性 注 射 环 磷 酰 胺 200 mg / kg〔5〕，正常对照组注射同等量的生理盐水，常规饲养。 在免疫抑制前和抑制后的第 2 和第 3 天对小鼠尾静脉采血，瑞姬氏复合染色液染色后，于显微镜下白细胞计数。免疫抑制的 第 4 天开始，鼻滴组接种时，先用 0. 3% 戊巴比妥钠 80 mg / kg 腹腔注射麻醉小鼠后，使其保持直立位，用枪头吸取制备的菌 悬液40 μl缓慢交替滴入小鼠两侧鼻孔，至菌液完全吸收； 雾化 吸入组小鼠则置于自制的密闭雾化箱中，将制备的菌液 20 ml 倒入雾化杯中，调整雾化量，连续雾化吸入至雾化液无残留； 免 疫抑制组和正常对照组不予处理。 1. 2. 4 小鼠一般状态的观察 每日观察小鼠的活动、毛发、状 态及进食情况。 1. 2. 5 肺组织培养及病理学检查 免疫抑制鼻滴组及雾化吸 入组小鼠于连续染菌 8 d 后颈椎脱臼法处死，超净台中取出肺 组织，观察肺脏形态，无菌生理盐水冲洗，取一部分肺组织中加 入无菌生理盐水 200 μl 后匀浆，混匀吸取 30 μl 至沙氏培养基 上涂布培养 48 h 后观察； 剩余肺组织用 10% 甲醛溶液固定，石 蜡包埋切片，HE 染色，行病理学检查。 1. 3 统计学处理 计量数据以 x ± s 表示，用 SPSS19. 0 数据 统计软件进行 t 检验。
·2112·
中国老年学杂志 2012 年 5 月第 32 卷
鼻滴组小鼠接种白念珠菌后活动减少，体重逐渐下降。见图 1。 2. 3 肺组织匀浆培养结果 免疫抑制鼻滴组小鼠肺组织匀浆 在沙氏培养基上可见数十个乳白色、奶油状、边缘整齐的光滑
表 1 环磷酰胺对小鼠白细胞的影响（ × 109 / L，x ± s，n = 10）
两种方法建立口腔念珠菌病动物模型的比较

两种方法建立口腔念珠菌病动物模型的比较

进 一步 确定 建模 成 功 。结 果 阳性者 停 止涂 白色 念珠
１１ 白色念 珠 菌 ． １ ２ 动物 ．
江 省哈 尔滨市 药 品检验 所 提供 。 Ｗｉａ 大 鼠 ， 自于佳 木 斯 大 学 动 物 实 ｓｒ ｔ 来 验 中心 ， 验开 始 时体 重 ２ ０±１ ， —８周 龄 。饲 实 ０ ０ｇ６
涂 抹大 鼠右 颊侧 口腔 粘膜 ２次 。每周 用 无菌探 针 轻 划 大 鼠右 颊 侧 口腔黏 膜 ３ ， 下 以不划 破 黏膜为 准 。 １３３ 普 通 组 ．． ４ ０只 ， 验 开 始 时大 鼠 的饮 食 不 实 加干 预 ， 每天 在 乙醚麻 醉下 ， 无菌 小油 画笔 蘸浓 度 用
色念珠 菌 的影 响 。 白色 念 珠 菌病 的 动 物模 型 研 究 ， ７ ０年 代 始 获 成 功 。英 国 曼 彻 斯 特 大 学 Ｒ ｓｌ２， ｕｅ 【 ｌ１
Ｊｒｅ引， ｄｍ 等 发表 了研 究结 果 。８ 代初 ， 麦 ｏ ｓ【 Ａ ａ ｓ ｌ ０年 丹 阿胡 斯 皇 家 牙 科 学 院 Ｆｓｅ［ Ｂ ｄ ． ｒ ｎｅ １ 等 ｉ ｒ ｋ ， ｕ ｔ Ｊ ｇ ｓｎ Ｊ ｚｏ ｅ 也对此进 行过 研 究 所 使用 的方 法 基 本 相 同 ， 立 模 建
中国实验诊断学
２ １ ２月 ００年
第ｌ ４卷
第２ 期
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２ ９ 。— ８ ＿ ＿ ＿ —
文 章 编 号 ：０７— ２７２ １ ）２— ２９ ２ １０ ４ ８ （０ ００ ０ ８ —０
两 种 方 法 建 立 口腔 念 珠 菌病 动 物模 型 的 比较
吕秋 菊 马晟利 ， 雪丽 ， 代
型的成功 率 为 ２ ％。其 他 国 家 （ 典 、 威 、 国 ） ５ 瑞 挪 美