求杀菌剂EC50的公式(不需要转换)

（二）公式法公式法最初由Ball 提出，后来经美国制罐公司热工学研究组简化后，用来计算简单型和转折型传热曲线上杀菌时间和F 值，简化虽会引起一些误差但无明显影响。

现已列入美国食品药物管理局有关规定，在美国得到普遍应用。

公式法是根据罐头在杀菌过程中内容物温度的变化在半对数坐标纸上所绘出的加热曲线，以及杀菌一结束，冷却水立即进入杀菌锅进行冷却的曲线才能进行推算并找出答案。

它的优点是可以在杀菌温度变更时算出杀菌时间，但其缺点是计算较繁，费时，用公式法计算比较费时，尤其是产品传热呈转折型加热曲线时，还容易在计算中发生错误，又要求加热曲线必须呈有规则的简单型加热曲线或转折型加热曲线，才能求得较正确的结果。

1标绘加热曲线计算时首先将罐内冷点温度变化数据与时间绘在半对数坐标纸上，如果所得传热曲线呈一条直线时为简单加热曲线，如呈二条直线，则为转折型加热曲一线，可求得传热速率f h （及f 2）和滞后因子j 、μ，如为转折型加热曲线时，还须绘制冷却曲线，求得X 、f c ，计算时需有F i 表、f ／u ：log ｇ图和r ：log ｇ图。

2杀菌值（F 0值）和杀菌时间计算 各符号含义介绍：Z ——热力杀菌时对象菌的热力致死时间曲线的斜率（min ），也即对温度变化时热力致死时间相应变化或致死速率的估量。

低酸性食品按Z=10℃肉毒杆菌计算；酸性食品在低于100℃杀菌时可按Z=8℃计算。

f h ——加热曲线中直线部分的斜率，机横跨一个对数周期所需要的时间（min ）。

在转折型加热曲线中转折点前第一条加热曲线部分的斜率也为f h 。

f 2——加热曲线中转折点后第二条曲线的斜率（min ）。

j ——在半对数坐标纸上加热曲线呈直线前加热时间的滞后因子，IjIIT RT T I RT j =-''-=。

RT ——杀菌或杀菌锅温度（℃）。

IT ——罐头食品初温（℃），杀菌锅进蒸汽前容器内装食品的平均温度。

T I ''——假初温，它处于横坐标上按58%升温时间标定的点引出的垂直线和加热曲线直线部分延长线相交的交点上，该交点视为假起始点。

浓度
CK R Y= lgLC50= LC50= LC95=
浓度对数 #NUM! #NUM! #NUM! #NUM! #NUM! #NUM!
#NUM! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!
毒力方程计算
菌落直径(mm)
对照菌落直径-处理菌落直 径
0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
浓度
500.00 250.00 100.00 50.00 10.00
5.00 CK R
浓度对数 2.6990 2.3979 2.0000 1.6990 1.0000 0.6990
0.9794
菌落直径(mm)
9.00 13.00 23.00 36.00 47.00 66.00 75.00
对照菌落直径-处理菌落直 径
66.00 62.00 52.00 39.00 28.00 9.00 0.00
抑制率 %
88.00 82.67 69.33 52.00 37.33 12.00 0.00
校正抑制率 %
0.8800 0.8267 0.6933 0.5200 0.3733 0.1200
Y=
3.2894
+
1.0898
X
lgLC50=
抑制率 %
#DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!
+
#DIV/0!
X
lgLC95=

#DIV/0!
SE=
#DIV/0!
0.05置信限
校正抑制率 %
#DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0! #DIV/0!

主要目的：——为了测定样品清除DPPH自由基的能力。

主要原理：——自由基清除剂与DPPH单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系，因而可用酶标仪进行快速的定量分析。

实验室签章一、试剂——1 ,1-二苯基-1-苦味肼基自由基（DPPH）——甲醇（分析纯）二、仪器设备——96孔酶标板——UV-Vis可见多功能酶标仪——移液枪——200 µL量程枪头三、实验方法◆前期准备配置2 g/L 的DPPH甲醇标准溶液。

◆DPPH自由基清除能力参照Brand-Williams (1995)[1]报道的方法，将其稍加改动后应用在96孔酶标板中[2]。

在酶标板的每孔中，依次加入不同体积（10、20、30、40、50、60、70、80、90和100 µL）的样品溶液和200 μL的DPPH标准溶液（2 g/L），最后用甲醇溶液补齐至总体积300 µL。

室温反应30 min后，于515 nm下用UV-Vis可见多功能酶标仪测定其吸光度（EL 340, Bio-Tek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA）。

番茄样品消除自由基的能力表示为EC50（清除1 µg DDPH至50 %所需的样品用量（µg干重））。

EC50越小，表示抗氧化活性越高。

平行测定三次，取平均值计算。

清除DPPH自由基能力用如下公式计算：清除率%=（1-Ac AjAi）×100%其中：Ai为样品溶液加DPPH试剂混合液的吸光度，Aj为样品溶液加甲醇的吸光度，Ac为DPPH溶液加样品溶剂的吸光度。

[1] Brand-Williams W, Cuvelier M E. Berset C. Use of a free radical method to evaluateantioxidant activity [J]. LWT - Food Science and Technology, 1995, 28(1): 25-30.[2] Verma A R, Vijayakumar M, Rao C V. Mathela C S. In vitro and in vivo antioxidant propertiesand DNA damage protective activity of green fruit of Ficus glomerata [J]. Food and Chemical Toxicology, 2010, 48(2): 704-709.。

（二）公式法公式法最初由Ball 提出，后来经美国制罐公司热工学研究组简化后，用来计算简单型和转折型传热曲线上杀菌时间和F 值，简化虽会引起一些误差但无明显影响。

现已列入美国食品药物管理局有关规定，在美国得到普遍应用。

公式法是根据罐头在杀菌过程中内容物温度的变化在半对数坐标纸上所绘出的加热曲线，以及杀菌一结束，冷却水立即进入杀菌锅进行冷却的曲线才能进行推算并找出答案。

它的优点是可以在杀菌温度变更时算出杀菌时间，但其缺点是计算较繁，费时，用公式法计算比较费时，尤其是产品传热呈转折型加热曲线时，还容易在计算中发生错误，又要求加热曲线必须呈有规则的简单型加热曲线或转折型加热曲线，才能求得较正确的结果。

1标绘加热曲线计算时首先将罐内冷点温度变化数据与时间绘在半对数坐标纸上，如果所得传热曲线呈一条直线时为简单加热曲线，如呈二条直线，则为转折型加热曲一线，可求得传热速率f h （及f 2）和滞后因子j 、μ，如为转折型加热曲线时，还须绘制冷却曲线，求得X 、f c ，计算时需有F i 表、f ／u ：log ｇ图和r ：log ｇ图。

2杀菌值（F 0值）和杀菌时间计算 各符号含义介绍：Z ——热力杀菌时对象菌的热力致死时间曲线的斜率（min ），也即对温度变化时热力致死时间相应变化或致死速率的估量。

低酸性食品按Z=10℃肉毒杆菌计算；酸性食品在低于100℃杀菌时可按Z=8℃计算。

f h ——加热曲线中直线部分的斜率，机横跨一个对数周期所需要的时间（min ）。

在转折型加热曲线中转折点前第一条加热曲线部分的斜率也为f h 。

f 2——加热曲线中转折点后第二条曲线的斜率（min ）。

j ——在半对数坐标纸上加热曲线呈直线前加热时间的滞后因子，IjIIT RT T I RT j =-''-=。

RT ——杀菌或杀菌锅温度（℃）。

IT ——罐头食品初温（℃），杀菌锅进蒸汽前容器内装食品的平均温度。

T I ''——假初温，它处于横坐标上按58%升温时间标定的点引出的垂直线和加热曲线直线部分延长线相交的交点上，该交点视为假起始点。