培养基的配制和灭菌-北师大版选修1 生物技术实践教案一、实验目的1.学会培养基的配制方法和操作技巧。
2.掌握灭菌技术的方法和注意事项。
3.确认所制备培养基的菌落计数和纯度。
二、实验设备和材料设备•输液器架•移液器和吸头•称量器和量筒•灭菌器•干燥器•培养皿•培养箱材料•营养琼脂•十进制稀释液•生理盐水•蒸馏水•双氧水三、实验步骤1. 营养琼脂的配制1.称取所需量的营养琼脂，加入适量的蒸馏水。
2.用称量器和量筒将混合物搅拌均匀，加热至溶解，约10-15分钟。
3.在灭菌器中灭菌，灭菌温度为121℃，时间约20分钟。
4.取出灭菌器中的营养琼脂，放置于输液器架上，待温度降至约50℃时加入适量的可生长菌液体。
2. 十进制稀释液的配制1.取出所需的十进制稀释液（通常为1ml），加入9ml生理盐水，充分混合后得到以1：10（体积比）稀释的液体。
2.逐步重复以上步骤，分别得到以1：100、1：1000、1：10000等稀释液。
3. 灭菌器的操作1.将培养基和十进制稀释液放入培养皿中。
2.放置于灭菌器中，灭菌温度为121℃，时间约15-20分钟。
3.灭菌后取出，待皿内培养基呈凝固状态时即可使用。
4. 培养基的陈放和保存1.待培养基凝固后，放置于干燥器中，以去除表面的水份。
2.将培养基放入冰箱中保存，避免因沾染杂菌而失去良好的生长环境。
3.不使用时，要记得将培养基与外界隔离，避免细菌的污染。
四、实验注意事项1.培养基配制和灭菌操作必须严格按照以上步骤实施。
2.用于配制培养基的水和其他材料必须是高纯度、无菌的。
3.灭菌器操作时，应注意排放蒸汽防止炸裂发生。
4.实验前需要对实验室进行清洁、消毒和准备操作所需的设备、材料和试剂。
5.操作过程中要注意安全，保护好眼睛、手部等关键部位。
6.实验过程中的仪器、器材和培养基需要严密地保存和处理，避免出现污染。
7.实验结束后要及时清理实验室、设备和材料，做好标记和密封保护。
五、实验结果及评价通过本次实验，可以掌握培养基的配制方法和操作技巧，熟练掌握灭菌技术的方法和注意事项，无需依赖外部资源即可制备出优质的培养基。
