测定及提高亚微乳载药系统包封率的研究进展
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式中，RR- 相对回收率 ；cMM- 灌注液中药物 浓度 ；cMS- 渗析液中药物浓度 ；cT- 总药物浓度 ； r- 水相体积分数。
Yue 等 [12] 比较了微渗析技术、离心超滤法和 低温高速离心法测定葛根素亚微乳包封率。3 种方 法测得包封率分别为 86.5％、72.8％和 55.8％，并 认为微渗析技术测定的包封率与其它两种方法具有 显著性差别。原因可能是微渗析技术可较好地分离 游离药物和亚微乳、脂质胶束 ；而离心超滤法不能 分离胶束，致使胶束可以透过超滤膜进入超滤液 ；
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中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2010, 41(6)
低温高速离心法不能彻底分离油相和水相，而且可 能造成亚微乳的破坏而导致药物的重新分布，所以 3 种方法测定包封率差别较大。
李杰等 [13] 利用微渗析技术测定克拉霉素亚微 乳的相分布，以亚微乳的分散介质为渗析介质，用 反相渗析法测定回收率。结果测得微渗析探针回收 率为 86.2％ ；90％以上的药物分布于亚微乳剂的油 相中，提示微渗析技术可用于亚微乳剂的相分布和 包封率测定。 2 提高包封率的方法 2.1 筛选合适的油相
摘要 ：包封率是亚微乳质量评价中的重要指标之一。近年来发展了许多包封率的测定方法，尤其是离心超滤、微渗析 技术等测定方法测得的包封率结果更客观可靠。本文还综述了提高亚微乳包封率方法 ( 如 SolEmul 技术、复合物 - 相转 变 - 均质化技术等 ) 的研究进展。 关键词 ：包封率 ；亚微乳 ；微渗析 ；SolEmul 技术 ；复合物 - 相转变 - 均质化技术 ；综述 中途分类号：R944.9 文献标志码：A 文章编号：1001-8255(2010)06-0464-04
Progress of Determination and Improvement of the Entrapment Efficiency of Submicron Emulsions
YUE Pengfei1, ZHENG Qin1, HU Pengyi1, YANG Ming1, YUAN Hailong2
(1. Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Key Lab. of Modern Preparation of TCM, Ministry of Education, Nanchang 330004; 2. 302 Hospital of PLA&PLA Institute of Chinese Materia Medica, Beijing 100039)
利用亚微乳和游离药物相对分子质量 ( Mr) 的 差异进行分离，但存在洗脱时间长、洗脱液体积大、 药物浓度低等问题。由于亚微乳分散体系属于热力 学和动力学不稳定体系，分离过程本身可能破坏亚 微乳或造成药物的渗漏。 1.3 高速离心法 (ultracentrifugation)[8]
根据各相密度的不同，在离心力作用下沉降 速度不同而进行分离，但成本较高，通常需要离心 1 h 以上，且方法重现性差。计算公式如下 ：
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中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2010, 41(6)
测定及提高亚微乳载药系统包封率的研究进展
岳鹏飞1，郑 琴1，胡鹏翼1，杨 明1，袁海龙2
(l．江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室，江西南昌 330004； 2. 中国人民解放军302医院解放军中药研究所，北京 100039)
收稿日期：2009-09-23 基金项目：“十一五重大新药创制专项”中药复方释药技术平台项 目(2009ZX09310-005) 作者简介：岳鹏飞(1982-)，男，硕士，讲师，从事药物新剂型与 新技术研究。 E-mail：ypfpharm@
封率不高、稳定性差等问题，尤其对于脂溶性差的 药物。提高包封率是保证亚微乳质量和疗效的重要 指标。目前，提高亚微乳包封率的理论及方法也在 不断探讨中。本文综述了包封率测定方法的新进展 及提高亚微乳包封率的新理论和新技术，以促进亚 微乳的研发。 1 包封率的测定方法及优缺点
微渗析的基本原理是 ：在待测亚微乳样品溶液 中放入微渗析探针 (microdialysis probe，外径一般 为 150 ～ 500 µm)，使灌注液以一定的速度 ( 一般 为 0.1 ～ 10 µl/min) 通过微渗析探针，在渗析膜 ( 由 纤维素、聚碳酸酯等材料组成，截留分子量 5 k ～ 50 k) 的两侧则产生药物浓度梯度。由于物质通过 渗析膜的扩散遵守 Fick 扩散定律，如果探针周围 亚微乳分散液中药物的浓度大于灌注液中的浓度， 药物会扩散进入探针中 [10]。由于灌注液的流速较 低，探针回路中不会产生压力，由此引起的超滤现 象 (ultrafiltration) 可忽略。根据实验要求和药物的 性质，选择应用不同截留分子量的探针进行实验。 该法包封率的计算公式如下 [12] ：
亚微乳分散体系中存在水相、油相、磷脂界面 膜，若存在过量乳化剂还可形成类似脂质体或胶束 的结构 (liposome-micellar)[6,7]。药物根据自身性质 的不同，可分布在上述的一种或几种结构中。以下 介绍几种测定亚微乳包封率的方法。 1.1 透析法 [8]
透析袋中放置一定体积的载药亚微乳，扎紧后 置入一定量介质中，连续电磁搅拌，通过测定外围
以往油相主要是选用植物来源的长链甘油三酯 ( LCT)，如大豆油、麻油、红花油、棉子油、藏红 花油、玉米油等。20 世纪 80 年代中期，在确定了 LCT 制成的亚微乳对免疫功能有抑制作用之后，德 国 B. Braun 公司研制了中 / 长链脂肪乳注射液 ( 商 品名为 Lipofundin)[14]。中链甘油三脂 (MCT) 是从 椰子油水解而得的游离脂肪酸中分离出的含有 6 ～ 12 个碳原子的饱和脂肪酸与甘油酯化而得。其相 对分子质量小于 LCT，而水溶性却较 LCT 高约 100 倍，与 LCT 亚微乳相比，中 / 长链亚微乳注射 液由于 MCT 的加入使得在整个体系中油相亲脂性 相对降低，可以增加极性大的药物的包封率 。 [15] 2.2 选择合适的乳化剂或增溶附加剂
Key Words: entrapment efficiency; submicron emulsion; microdialysis; SolEmul technology; complex-phase inversion-homogenization; review
亚微乳 (submicro emulsion) 是以植物油为基 质，由油相、乳化剂 ( 磷脂 )、水相制成粒径在 100 ～ 1 000 nm 范围的稳定的 o/w 型分散体系。药 物可包封于油相和磷脂界面膜中，外观呈不透明的 浑浊或乳状，属于热力学和动力学不稳定体系 。 [1,2] 作为一种新型药物转运系统，它可选择性地蓄积于 炎症及肿瘤部位，使治疗药物在靶区浓度超出传统 制剂的数倍至数百倍 [3,4]，明显提高疗效。同时药 物在正常组织分布量较少，可减轻不良反应，达到 高效低毒的效果பைடு நூலகம்[5]。但亚微乳作为药物载体存在包
ABSTRACT: The entrapment efficiency (EE) is one of the important indexes of quality evaluation of submicron emulsions. Many methods for determination of EE were developed in recent years. The results of centrifugationultrafiltration method and microdialysisy are more objective and reliable among them. The progress of the improvement of EE, such as SolEmul technology and complex-phase inversion-homogenization, is also reviewed in this paper.
将用超滤膜隔开的封闭管放入离心管中，在低 速离心条件下分离水性分散介质中的乳滴。应根据 游离药物的分子量，选择合适孔径的超滤膜。超滤 膜与药物间没有特异性吸附，仅允许游离的小分子 药物通过。该法方便快速，为测定亚微乳包封率最 常用的方法 ；缺点是较强的离心力可能使亚微乳或 胶束结构发生变化，从而改变药物的分布，因此应 控制适宜的转速。计算公式如下 ：
2.3 选择合适的制备工艺 2.3.1 两步高压匀质法
药物和 ( 或 ) 乳化剂溶于加热到适宜温度的水 相或油相中后，将油水两相在高速搅拌下混合制得 粗分散体，随后冷却到 20 ℃以下，再用两步高压 乳匀机均质化，调至 pH 7 ～ 8，经 0.45 µm 滤膜过 滤后热压灭菌，即得细分散的亚微乳。此法可使脂 溶性药物充分溶解并包封于油相中，并可依靠高压 匀质技术减小亚微乳粒径，提高亚微乳载药面积而 提高包封率，是一种最常规、应用最广泛的制乳方 法。 2.3.2 SolEmul 技术
静脉注射用亚微乳中最常用的乳化剂是卵磷 脂、大豆磷脂、泊洛沙姆 F68，有时也用聚氧乙烯 蓖麻油、氢化蓖麻油、甘油单乙酸酯等。由于吐 温 -80 有一定的溶血作用，故甚少应用。在制备亚 微乳过程中，使用磷脂及泊洛沙姆做复合乳化剂能 使以液晶态存在的界面膜具有更高的黏弹性，提高 亚微乳的稳定性，从而提高包封率，防止药物的泄 露 。 [16]
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介质中游离药物的浓度，从而测得亚微乳的包封率。 此法由于需要加入水性介质，可能导致包封药物向 水相扩散或分配，从而导致测得的包封率可能较理 论值偏低。 1.2 葡聚糖凝胶柱色谱法 [8]
式中，EE- 包封率 ；cw- 水相中药物浓度 ；cT亚微乳中总药物浓度 ；r- 水相体积分数。
Yue 等 [12] 比较了微渗析技术、离心超滤法和 低温高速离心法测定葛根素亚微乳包封率。3 种方 法测得包封率分别为 86.5％、72.8％和 55.8％，并 认为微渗析技术测定的包封率与其它两种方法具有 显著性差别。原因可能是微渗析技术可较好地分离 游离药物和亚微乳、脂质胶束 ；而离心超滤法不能 分离胶束，致使胶束可以透过超滤膜进入超滤液 ；
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低温高速离心法不能彻底分离油相和水相，而且可 能造成亚微乳的破坏而导致药物的重新分布，所以 3 种方法测定包封率差别较大。
李杰等 [13] 利用微渗析技术测定克拉霉素亚微 乳的相分布，以亚微乳的分散介质为渗析介质，用 反相渗析法测定回收率。结果测得微渗析探针回收 率为 86.2％ ；90％以上的药物分布于亚微乳剂的油 相中，提示微渗析技术可用于亚微乳剂的相分布和 包封率测定。 2 提高包封率的方法 2.1 筛选合适的油相
摘要 ：包封率是亚微乳质量评价中的重要指标之一。近年来发展了许多包封率的测定方法，尤其是离心超滤、微渗析 技术等测定方法测得的包封率结果更客观可靠。本文还综述了提高亚微乳包封率方法 ( 如 SolEmul 技术、复合物 - 相转 变 - 均质化技术等 ) 的研究进展。 关键词 ：包封率 ；亚微乳 ；微渗析 ；SolEmul 技术 ；复合物 - 相转变 - 均质化技术 ；综述 中途分类号：R944.9 文献标志码：A 文章编号：1001-8255(2010)06-0464-04
Progress of Determination and Improvement of the Entrapment Efficiency of Submicron Emulsions
YUE Pengfei1, ZHENG Qin1, HU Pengyi1, YANG Ming1, YUAN Hailong2
(1. Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Key Lab. of Modern Preparation of TCM, Ministry of Education, Nanchang 330004; 2. 302 Hospital of PLA&PLA Institute of Chinese Materia Medica, Beijing 100039)
利用亚微乳和游离药物相对分子质量 ( Mr) 的 差异进行分离，但存在洗脱时间长、洗脱液体积大、 药物浓度低等问题。由于亚微乳分散体系属于热力 学和动力学不稳定体系，分离过程本身可能破坏亚 微乳或造成药物的渗漏。 1.3 高速离心法 (ultracentrifugation)[8]
根据各相密度的不同，在离心力作用下沉降 速度不同而进行分离，但成本较高，通常需要离心 1 h 以上，且方法重现性差。计算公式如下 ：
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中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2010, 41(6)
测定及提高亚微乳载药系统包封率的研究进展
岳鹏飞1，郑 琴1，胡鹏翼1，杨 明1，袁海龙2
(l．江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室，江西南昌 330004； 2. 中国人民解放军302医院解放军中药研究所，北京 100039)
收稿日期：2009-09-23 基金项目：“十一五重大新药创制专项”中药复方释药技术平台项 目(2009ZX09310-005) 作者简介：岳鹏飞(1982-)，男，硕士，讲师，从事药物新剂型与 新技术研究。 E-mail：ypfpharm@
封率不高、稳定性差等问题，尤其对于脂溶性差的 药物。提高包封率是保证亚微乳质量和疗效的重要 指标。目前，提高亚微乳包封率的理论及方法也在 不断探讨中。本文综述了包封率测定方法的新进展 及提高亚微乳包封率的新理论和新技术，以促进亚 微乳的研发。 1 包封率的测定方法及优缺点
微渗析的基本原理是 ：在待测亚微乳样品溶液 中放入微渗析探针 (microdialysis probe，外径一般 为 150 ～ 500 µm)，使灌注液以一定的速度 ( 一般 为 0.1 ～ 10 µl/min) 通过微渗析探针，在渗析膜 ( 由 纤维素、聚碳酸酯等材料组成，截留分子量 5 k ～ 50 k) 的两侧则产生药物浓度梯度。由于物质通过 渗析膜的扩散遵守 Fick 扩散定律，如果探针周围 亚微乳分散液中药物的浓度大于灌注液中的浓度， 药物会扩散进入探针中 [10]。由于灌注液的流速较 低，探针回路中不会产生压力，由此引起的超滤现 象 (ultrafiltration) 可忽略。根据实验要求和药物的 性质，选择应用不同截留分子量的探针进行实验。 该法包封率的计算公式如下 [12] ：
亚微乳分散体系中存在水相、油相、磷脂界面 膜，若存在过量乳化剂还可形成类似脂质体或胶束 的结构 (liposome-micellar)[6,7]。药物根据自身性质 的不同，可分布在上述的一种或几种结构中。以下 介绍几种测定亚微乳包封率的方法。 1.1 透析法 [8]
透析袋中放置一定体积的载药亚微乳，扎紧后 置入一定量介质中，连续电磁搅拌，通过测定外围
以往油相主要是选用植物来源的长链甘油三酯 ( LCT)，如大豆油、麻油、红花油、棉子油、藏红 花油、玉米油等。20 世纪 80 年代中期，在确定了 LCT 制成的亚微乳对免疫功能有抑制作用之后，德 国 B. Braun 公司研制了中 / 长链脂肪乳注射液 ( 商 品名为 Lipofundin)[14]。中链甘油三脂 (MCT) 是从 椰子油水解而得的游离脂肪酸中分离出的含有 6 ～ 12 个碳原子的饱和脂肪酸与甘油酯化而得。其相 对分子质量小于 LCT，而水溶性却较 LCT 高约 100 倍，与 LCT 亚微乳相比，中 / 长链亚微乳注射 液由于 MCT 的加入使得在整个体系中油相亲脂性 相对降低，可以增加极性大的药物的包封率 。 [15] 2.2 选择合适的乳化剂或增溶附加剂
Key Words: entrapment efficiency; submicron emulsion; microdialysis; SolEmul technology; complex-phase inversion-homogenization; review
亚微乳 (submicro emulsion) 是以植物油为基 质，由油相、乳化剂 ( 磷脂 )、水相制成粒径在 100 ～ 1 000 nm 范围的稳定的 o/w 型分散体系。药 物可包封于油相和磷脂界面膜中，外观呈不透明的 浑浊或乳状，属于热力学和动力学不稳定体系 。 [1,2] 作为一种新型药物转运系统，它可选择性地蓄积于 炎症及肿瘤部位，使治疗药物在靶区浓度超出传统 制剂的数倍至数百倍 [3,4]，明显提高疗效。同时药 物在正常组织分布量较少，可减轻不良反应，达到 高效低毒的效果பைடு நூலகம்[5]。但亚微乳作为药物载体存在包
ABSTRACT: The entrapment efficiency (EE) is one of the important indexes of quality evaluation of submicron emulsions. Many methods for determination of EE were developed in recent years. The results of centrifugationultrafiltration method and microdialysisy are more objective and reliable among them. The progress of the improvement of EE, such as SolEmul technology and complex-phase inversion-homogenization, is also reviewed in this paper.
将用超滤膜隔开的封闭管放入离心管中，在低 速离心条件下分离水性分散介质中的乳滴。应根据 游离药物的分子量，选择合适孔径的超滤膜。超滤 膜与药物间没有特异性吸附，仅允许游离的小分子 药物通过。该法方便快速，为测定亚微乳包封率最 常用的方法 ；缺点是较强的离心力可能使亚微乳或 胶束结构发生变化，从而改变药物的分布，因此应 控制适宜的转速。计算公式如下 ：
2.3 选择合适的制备工艺 2.3.1 两步高压匀质法
药物和 ( 或 ) 乳化剂溶于加热到适宜温度的水 相或油相中后，将油水两相在高速搅拌下混合制得 粗分散体，随后冷却到 20 ℃以下，再用两步高压 乳匀机均质化，调至 pH 7 ～ 8，经 0.45 µm 滤膜过 滤后热压灭菌，即得细分散的亚微乳。此法可使脂 溶性药物充分溶解并包封于油相中，并可依靠高压 匀质技术减小亚微乳粒径，提高亚微乳载药面积而 提高包封率，是一种最常规、应用最广泛的制乳方 法。 2.3.2 SolEmul 技术
静脉注射用亚微乳中最常用的乳化剂是卵磷 脂、大豆磷脂、泊洛沙姆 F68，有时也用聚氧乙烯 蓖麻油、氢化蓖麻油、甘油单乙酸酯等。由于吐 温 -80 有一定的溶血作用，故甚少应用。在制备亚 微乳过程中，使用磷脂及泊洛沙姆做复合乳化剂能 使以液晶态存在的界面膜具有更高的黏弹性，提高 亚微乳的稳定性，从而提高包封率，防止药物的泄 露 。 [16]
中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2010, 41(6)
· 465 ·
介质中游离药物的浓度，从而测得亚微乳的包封率。 此法由于需要加入水性介质，可能导致包封药物向 水相扩散或分配，从而导致测得的包封率可能较理 论值偏低。 1.2 葡聚糖凝胶柱色谱法 [8]
式中，EE- 包封率 ；cw- 水相中药物浓度 ；cT亚微乳中总药物浓度 ；r- 水相体积分数。
