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2024年高考生物试题分类汇编——生物技术实践2024年高考生物试题分类汇编——生物技术实践一、背景介绍随着生物技术的飞速发展，生物技术实践已经成为高中生物学科教育的重要组成部分。
预计在2024年高考中，生物技术实践将成为生物学科考试的重要内容。
本文将根据历年高考生物试题，分类整理并汇编生物技术实践的相关知识点，以便读者深入理解和掌握相关内容。
二、知识梳理1、基因工程实践：基因工程是生物技术实践的重要领域之一，主要涉及基因克隆、基因转化、基因表达等操作技术。
高考生物试题中可能会涉及基因工程的应用、操作流程及注意事项等知识点。
2、细胞工程实践：细胞工程是利用细胞培养、细胞融合、细胞拆分等技术进行生物制品制备的过程。
高考生物试题中可能会涉及细胞培养的条件、细胞拆分技术的应用等知识点。
3、蛋白质工程实践：蛋白质工程是利用基因工程、蛋白质翻译后修饰等技术对蛋白质进行改造和优化。
高考生物试题中可能会涉及蛋白质的改造、优化以及蛋白质工程的应用等知识点。
4、发酵工程实践：发酵工程是利用微生物发酵技术进行生物制品的生产过程。
高考生物试题中可能会涉及微生物发酵的条件、发酵工艺流程等知识点。
5、免疫技术实践：免疫技术是利用免疫学原理进行疾病诊断和治疗的过程。
高考生物试题中可能会涉及免疫技术的原理、应用等知识点。
三、难点解析生物技术实践涉及的知识点较多，且应用广泛，因此在学习过程中需要抓住各个技术的核心原理和操作流程，理解其在实际应用中的局限性。
同时，需要关注生物技术发展的最新进展，了解其在医学、农业、环保等领域的应用情况。
四、考点归纳1、基因工程实践：基因工程的原理、基因克隆的方法、基因表达的调控等。
2、细胞工程实践：细胞培养的条件、细胞融合的方法、植物组织培养等。
3、蛋白质工程实践：蛋白质的改造、优化方法，蛋白质工程的实际应用等。
4、发酵工程实践：微生物发酵的原理、发酵工艺流程、发酵条件的控制等。
5、免疫技术实践：免疫技术的原理、抗原抗体的制备、免疫诊断方法等。
第31题考查以遗传变异为主的命题1.某种雌雄异株植物为XY型性别决定，无X染色体的个体不能成活。
该植物的蓝花和紫花由位于常染色体的等位基因A、a和X染色体的等位基因B、b共同控制。
已知其紫花形成的生化途径如图所示。
请回答：(1)花色遗传遵循自由组合定律的原因是______________________________。
(2)该种植物蓝花雄株的基因型有______种。
选取雄株(aaX B Y)与杂合紫花雌株杂交，F1中产生一株基因型为AaX B X b Y植株，产生的原因是_________________________________。
(3)以上述正常F1中的植株为实验材料，快速培育出能稳定遗传的紫花雌株，请用遗传图解表示该过程。
答案(1)两对基因分别位于两对同源染色体上(2)4 亲本中的雄株在减数第一次分裂时性染色体未分离(3)如图所示2.(2018·湖州、衢州、丽水教学质量检测)小鼠(性别决定方式为XY型)的弯曲尾与正常尾是一对相对性状(相关基因用A、a表示)，黄毛与灰毛是另一对相对性状(相关基因用B、b表示，且在某一性别中存在致死现象)。
现有一对黄毛弯曲尾和黄毛正常尾个体交配得到的F1，表现型及比例如表所示(不考虑基因突变)。
黄毛弯曲尾黄毛正常尾灰毛弯曲尾灰毛正常尾雌鼠2/7 0 1/7 0雄鼠0 3/7 0 1/7(1)由实验结果推测，黄毛是________性状，控制尾形的基因位于________染色体上，亲本的基因型是________________________。
(2)取F 1的黄毛弯曲尾(甲)和黄毛正常尾(乙)个体自由交配得F 2，则F 2中共有________种基因型，与甲基因型相同的个体占________。
(3)若F 1中偶然出现一只弯曲尾雄鼠，请用遗传图解解释以上原因(只需写出相关基因即可)。
答案 (1)显性 X BbX a X a 和BbX AY (2)10 3/20 (3)如图所示父本减数分裂异常，产生X A Y 的精子，与母本X a 的卵细胞受精，形成X A X aY 的弯曲尾雄鼠。
2013 届高三生物二轮复习针对训练卷生物技术实践1．（2012·广州综合测试二）以下相关物质的提取和分其他说法，错误的选项是（）A．提取洋葱DNA时，需用冲洗剂崩溃细胞膜B．直接用差速离心法可分别动物细胞内的各样物质C．可用电泳法将蛋白质、DNA、 RNA等生物大分子分离D．提取和分别叶绿体色素所用的试剂有无水乙醇、SiO2、 CaCO3、层析液2．（2012·广东韶关二模）（双选）以下相关生物学实验操作、资料、条件等方面的述，正确的选项是（）A．“研究酵母菌种群数量动向变化”实验中，用培养液培养酵母菌叙B．“察看细胞有丝分裂”实验中，用卡诺氏液对根尖进行解离C．“腐乳的制作”实验中，加盐和加酒都能控制微生物的生长D．“分解尿素的细菌的分别”实验中，用尿素为唯一营养的培养基精选目的菌3．（2012·广东珠海综合测试二）某生物兴趣小组为了“研究培养液中酵母菌种群数量的变化”，按甲图装置进行了实验，并绘制了乙图为不相同培养阶段酵母菌种群数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线，请回答以下问题。
甲乙（1）酵母菌与颤藻共有的细胞构造有__________ 、细胞膜、细胞质基质和 __________ 。
（2）甲图装置中排气口的胶管设计成长而波折的目的是________________________________________________________________________ 。
（3）实验的最初阶段，由于 __________________________ 和没有敌害、没有竞争，酵母菌的种群数量呈 __________曲线增添。
（ 4）从乙图知， __________h 后出现无氧呼吸，此过程产生的少量ATP 的发生场所是__________。
（ 5）某同学在乙图中的 3 时取样，统计的酵母菌种群数量明显高于D 点对应的数量，T原因可能有 ____________________________ 、____________________________ 和用血细胞计数板计数时出现错误等。
高考生物二轮生物技术实践专项训练生物学科是一门基础的自然学科，它的内容应有尽有，人们的生活处处都与生物有严密的联络，以下是查字典生物网为大家整理的高考生物二轮生物技术实际专项训练，希望可以处置您所遇到的相关效果，加油，查字典生物网不时陪伴您。
一、选择题(3×12=36分)1.以下有关微生物培育与运用的说法正确的选项是()A.自然培育基是指直接取自自然界不需加工的培育基B.接种前需对培育基、培育皿、接种环、实验操作者的双手等停止严厉的灭菌处置C.大肠杆菌的纯化培育进程包括培育基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D.分别分解尿素的细菌时，尿素是培育基中独一的氮源和碳源[答案] C[解析] 自然培育基是成分不明白的培育基，并不是不需加工配制的培育基;实验者的双手需停止消毒处置;分别分解尿素的细菌时，尿素是独一氮源而不是独一的碳源。
2.加工橘子罐头，采用酸碱处置脱去中果皮(橘络)，会发生严重污染。
目前运用酶解法去除橘络，可增加污染。
以下生长在特定环境中的4类微生物，不能少量发生所用酶的有()A.生长在麦麸上的黑曲霉B.生长在酸奶中的乳酸菌C.生长在棉籽壳上的平菇D.生长在木屑上的木霉[答案] B[解析] 此题考察酶的专注性。
橘络的主要成分是纤维素，将其分解要用纤维素酶，麦麸、棉籽壳、木屑的主要成分也是纤维素，生长在这三种成分上的黑曲霉、平菇、木霉一定能发生纤维素酶，所以可以应用。
而乳酸菌的培育基为牛奶，其主要成分是蛋白质，不含纤维素，所以乳酸菌不能发生纤维素酶。
3.以下有关培育基的配制原那么，表述正确的选项是()A.任何培育基都必需含有碳源、氮源、矿质元素、生长因子B.碳源和氮源必需具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素C.微生物的生长除受营养要素影响外，还遭到pH、氧、浸透压的影响D.营养物质的浓度越高越好[答案] C[解析] 不同的微生物需求的营养不同，如自生固氮菌能应用空气中的N2为氮源，因此培育基中无需添加氮源;营养物质浓度太高，会招致微生物失水。
2017届高考生物二轮复习专题辅导与训练第一部分专题整合篇专题十一生物技术实践编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（2017届高考生物二轮复习专题辅导与训练第一部分专题整合篇专题十一生物技术实践）的内容能够给您的工作和学习带来便利。
同时也真诚的希望收到您的建议和反馈，这将是我们进步的源泉，前进的动力。
本文可编辑可修改，如果觉得对您有帮助请收藏以便随时查阅，最后祝您生活愉快业绩进步，以下为2017届高考生物二轮复习专题辅导与训练第一部分专题整合篇专题十一生物技术实践的全部内容。
第一部分专题整合篇专题十一生物技术实践［满分90分，限时45分钟]一、选择题(每小题6分，共36分，每小题只有一个选项符合题意)1．做“微生物的分离与培养"实验时，下列叙述正确的是A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上解析A项，在高压灭菌的操作过程中，加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降，待压力表的压力降到零时，打开放气阀，旋松螺栓，打开盖子。
B项,倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不是完全取下放到一边。
C项，接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后,再用其挑取菌落。
D项,在微生物的培养中，一般将培养皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。
答案D2．(2016·南京一模)下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行B．步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖C．步骤③中,每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养解析步骤一为倒平板操作，为减少培养基感染杂菌的机会，倒完后立即盖上培养皿盖.3．下列有关生物技术实践相关实验的叙述,正确的是A．制作果酒的温度一般要略高于果醋的制作温度B．制作固定化酵母细胞实验中,需将凝胶珠置于CaCl2溶液中处理适宜的时间C．制作固定化酶的最佳方法是采用海藻酸钠溶液进行包埋固定D．腐乳制作的全过程都离不开以毛霉为主的微生物发挥作用解析制作果酒的温度一般控制在18—25 ℃左右，而制作果醋的温度一般控制在30—35 ℃左右,A项错误。
2020年高考生物二轮专题复习14：生物技术实践（附解析）考纲指导1．近五年的考题中，对微生物的分离和培养的考查尤为突出，侧重考查微生物的培养、分离、计数、无菌技术等基本知识，对传统发酵技术的发酵原理、制作流程等的考查频度也在不断提高。
对植物组织培养、胡萝卜素的提取仅进行了两次考查，前者侧重考查营养条件及有关植物激素的作用等；后者侧重考查胡萝卜素的萃取剂的选择等。
2．本专题以非选择题的形式考查。
常借助某一特定的微生物的分离和培养考查微生物的营养、接种方法等；对于生物技术在食品加工中的应用，常借助发酵实例考查，填充内容多为教材中一些结论性语句等。
植物组织培养技术、植物有效成分的提取的考查也多以教材基础知识为主。
3．2020年备考时应注意：(1)某种微生物数量的测定。
(2)利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。
(3)利用比较法归纳总结并掌握常见传统发酵技术的原理、流程及影响因素等。
(4)列表比较玫瑰精油、橘皮精油及胡萝卜素的提取方法、原理、实验步骤等异同。
思维导图知识梳理考点一微生物的培养、分离与计数1．消毒和灭菌的比较2．平板划线法每次灼烧的目的3．纯化微生物的接种方法4．选择培养基与鉴别培养基的比较技巧方法(1)显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。
②方法：用计数板计数。
③缺点：不能区分死菌与活菌。
(2)间接计数法(活菌计数法)①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
③操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。
同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
换兑市暧昧阳光实验学校高三生物二轮复习最试题汇编08 生物技术实践高考试题分布要求2009 2010 2011 2012 2013 2014预测1.微生物的分离和培养40，34，31课标，39 ，34，6，18√2.某种微生物数量的测403.培养基对微生物的选择作用，31Ⅰ课标，39 ，5 课标Ⅱ，39；，6 √4.利用微生物发酵来生产特的产物以及微生物在其他方面的用课标Ⅰ，39，14、175.从生物材料中提取某些特的成分，25 ，34，34，30，34，34，30√6.运用发酵加工食品的基本方法，1，25，3自选模块，17，21，30 √7.测食品加工中可能产生的有害物质课标Ⅰ，39 8.酶的存在与简单制作方法，22 ，3 ，15 ——9.酶活力测的一般原理和方法——，(五) ——10.酶在食品制造和洗涤方面的用，31 ，3 ，15 ，16，4，30√11.制备和用固相，25 ，(五) ，17 ，6 √化酶，912.植物的组织培养，34 ，31Ⅱ，16，34课标，39课标Ⅱ，40，11√13.蛋白质的提取和分离，5 ，1014.PCR技术的基本操作和用，31Ⅱ，33，8，515.DNA的粗提取和鉴，32 ，19 ，18，4，5√一、选择题(每题5分，共30分)1．（2014高三上学期摸底考试）下列关于用塑料瓶制作果酒和果醋的叙述，正确的是A．为了提高果酒的产量，果汁尽量装满发酵瓶B．醋酸发酵阶段封闭充气口，防止杂菌污染C．制果酒和果醋的过程中每天需适时拧松或打开瓶盖D．果酒制成后，可将装置转移至温度较高的环境中制果醋2. （改编）已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示，下列有关该样品中蛋白质的分离的叙述错误的是( )。
A．将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内，则分子丙也保留在(时间40分钟，满分100分)袋内B．若用凝色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快C．若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲可能不存在于沉淀物中D．若用SDS—聚丙烯酰胺凝电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远3. （原创）如图为月季花药离体培养产生花粉植株的一种途径，下列说法错误的是A.选择花药时要用镜检法选择处于单核期的花药B.灭菌后的花蕾在剥离花药时要彻底去除花丝C.一般通过胚状体阶段发育或愈伤组织发育为植株D.确花粉发育时期一般用甲基绿吡啰红的混合染液4．（高考题改编）下列有关生物技术在实践中的用的叙述，正确的是( ) A．在用稀释涂布平板法设计时，一要涂布至少3个平板B．固化细胞与固化酶是两个相同的生产过程C．尿糖试纸尿糖试纸是一种酶试纸，能反复使用D．分离分解尿素的细菌时，尿素是是唯一的碳源5.（原创）下列有关选择培养基中的选择因素的说法正确是( )①培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌②对培养基用高压蒸汽灭菌③培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌④培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物⑤当培养基的某种营养成分为特化学成分时，也具有分离效果⑥改变微生物的培养条件，不能够达到分离微生物的目的A．①③④⑤⑥B．①②③④⑤C．②③④⑤⑥ D．①②④⑤⑥6.（改编）下图所示的四种菌落分布图中，由稀释涂布平板法得到的是二、简答题(共70分)7.（2014五校第一次模拟）（15分）纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴过程。
课时作业(十六)生物技术实践1.(2017·永州二模)某研究性学习小组制作泡菜、检测亚硝酸盐含量和计数乳酸菌的数量。
(1)永州泡菜鲜美可口，而且开胃、增加食欲，泡菜开胃增加食欲的原因是泡菜中含有促进开胃增加食欲的物质是________。
(2)取泡菜的汤汁制作临时装片在显微镜下观察，制作泡菜选用的菌种是如图的________所示的生物。
(3)尽管泡菜鲜美可口但不能多吃，还是多吃新鲜的蔬菜为佳，因为新鲜蔬菜的亚硝酸盐含量比泡菜________。
(4)测定亚硝酸盐含量实验过程中，在泡菜提取的滤液中加入氢氧化铝的作用是_____________________________________________________________________________________________________________________。
(5)用稀释涂布平板法测定每克泡菜原汁的乳酸菌的含量，泡菜原汁取样于同一时间同一坛泡菜，分别在103、105、107三种稀释倍数下，各种稀释倍数下均涂布了四个平板，每个平板均接种0.1 mL稀释菌液，在无氧、适温条件下培养的实验结果如表：稀释103倍稀释105倍稀释107倍平板(A)中的菌落数平板(B)中的菌落数平板(C)中的菌落数A1A2A2A4B1B2B3B4C1C2C3C4341 303 283 350 308 245 251 284 21 33 39 19(6)最近湘雅医院抢救了一例亚硝酸盐中毒患者，据苏教授说亚硝酸盐具有强氧化性，可将正常的二价铁氧化成三价铁，使患者的________变性失活，出现缺氧症状。
(7)在人体消化道的微生物作用下，亚硝酸盐可转化成具有致癌作用的________。
答案(1)乳酸(2)D(3)低(4)使泡菜提取滤液变得无色透明(5)2.6×108个(6)血红蛋白(7)亚硝胺解析(1)由泡菜制作的原理可知，泡菜开胃增加食欲的原因是泡菜中含有促进开胃增加食欲的物质是乳酸。
广东省部分学校2024年高三二模联考生物试题学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________一、单选题1．绿眼虫是一种介于动物和植物之间的单细胞真核生物。
绿眼虫的同化作用类型为兼性营养型。
有光条件下，利用光能进行光合作用，将CO2和水合成糖类，属于自养；无光条件下，绿眼虫也可通过体表吸收溶解于水中的有机物质，这种营养方式称为渗透营养，属于异养。
下列说法错误的是（）A．绿眼虫细胞具有成形的细胞核，通过叶绿体进行光合作用B．绿眼虫需要染色后才能在显微镜下观察到C．绿眼虫在自然界分布极其广泛，适应环境能力强D．绿眼虫既可作为生产者又可作为分解者2．红藻氨酸（KA）是离子型谷氨酸受体的激动剂，是一种具有强烈的兴奋作用和致癫痫作用的兴奋性毒素。
研究发现，高浓度KA会促进小胶质细胞的凋亡，下列叙述正确的是（）A．同一个体的未凋亡细胞和凋亡细胞中的核酸相同，但蛋白质存在差异B．病毒感染的细胞被免疫系统清除是通过细胞凋亡完成的C．细胞凋亡的本质是细胞坏死，不利于维持生物体内部环境的稳定D．小胶质细胞凋亡是基因控制的程序性死亡，不受环境因素影响3．下图为某真核生物核DNA分子复制过程示意图，有关叙述正确的是（）A．图中DNA分子复制过程需要解旋酶和RNA聚合酶B．图示可体现DNA的复制是一个边解旋边复制的过程C．解旋酶破坏的是相邻核苷酸之间的磷酸二酯键D．图中3个复制起点同时开始DNA复制4．果蝇的长翅和残翅是一对相对性状，由一对等位基因A/a控制。
某研究小组利用纯合的长翅和残翅果蝇进行了如下的杂交实验，结果如下表所示。
下列叙述正确的是（）A．果蝇的长翅和残翅这对相对性状中，显性性状是残翅B．控制果蝇长翅和残翅这对相对性状的等位基因A/a位于X、Y染色体的同源区段上C．若等位基因A/a位于X、Y染色体的同源区段上，则甲组合F1雌雄果蝇杂交后代中雄性长翅占1/4D．若等位基因A/a位于X、Y染色体的同源区段上，则乙组合F1雌雄果蝇杂交后代中雄性长翅占1/35．某学习小组建立了果蝇减数分裂中染色体变化的模型，下列叙述错误的是（）A．实验过程中可以模拟形成16种或更多种子细胞B．因需要制作4对同源染色体，所以需要用4种颜色的橡皮泥C．建立减数分裂中染色体变化的模型采用了物理模型构建法D．模拟减数分裂的后期时，移向细胞同一极的橡皮泥颜色不一定相同6．腺泡细胞是胰腺中最丰富的细胞类型，属于胰腺的外分泌部。
专题八生物技术实践考纲考频(全国卷)1.微生物的分离和培养5年9考2.培养基对微生物的选择作用5年6考3.某种微生物数量的测定5年0考4.利用微生物进行发酵来生产特5年8考定的产物5.运用发酵加工食品的基本方法5年3考6.微生物在其他方面的应用5年0考7.从生物材料中提取某些特定的5年3考成分8.酶活力测定的一般原理和方法5年0考9.酶在食品制造和洗涤等方面的5年0考应用10.制备和应用固相化酶5年0考基础自查明晰考位[纵引横连建网络]提醒：特设长句作答题，训练文字表达能力[边角扫描全面清]1．微生物利用的相关判断(1)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(×)(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(√)(3)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌(×)(4)检测土壤中细菌总数实验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数(×)(5)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌(×)2．传统发酵技术的相关判断(1)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(×)(2)酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精(√)(3)泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵(√)(4)腐乳制作利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶(√)(5)在制作腐乳时，将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量(×)3．植物有效成分提取的相关判断(1)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用干薄荷叶作原料，可采用水蒸气蒸馏法提取(×)(2)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是酒精，原理是薄荷油易溶于有机溶剂酒精中(×)(3)用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是：干燥、粉碎、萃取、浓缩、过滤(×)(4)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解(√)(5)提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定，在鉴定过程中不需要对照(×)考点梳理整合突破整合考点22微生物的培养与应用及传统发酵技术的应用[考点突破固考基]1．图解识记微生物的培养、分离与计数(填图)2．熟记微生物分离与计数的两个实例(填空)(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。
[第32题] 1.生物技术实践(A)1.铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：新生营养芽―→原球茎(类似愈伤组织)――→长芽丛状苗――→长根幼苗请回答以下问题：(1)选用新生营养芽为培养材料的原因是_______________________________，原球茎细胞的细胞壁______(填“厚”或“薄”)。
(2)某小组为研究培养铁皮石斛的培养基中蔗糖和光各自的作用，进行了对照实验，结果如下：根据以上实验结果，下列说法正确的是________。
A.光为生长提供能量，蔗糖促进细胞分化B.整个组培过程中，培养基中都不用加入蔗糖也可发育成幼苗C.光照只会影响到光合作用的效率D.蔗糖为生长、分化提供能量，光促进细胞分化(3)生物碱属于铁皮石斛的________代谢产物，除了从植株中提取，也可以通过将含有原球茎的试管放在摇床上，通过________悬浮培养分散成单细胞，然后培养特定细胞系实现工业化生产。
答案(1)分裂旺盛，全能性容易表达薄(2)D (3)次生液体解析(1)新生的芽幼嫩，分裂能力强，全能性易表达，植物组织培养过程中一般选用新生营养芽为培养材料。
原球茎细胞类似愈伤组织，由于愈伤组织是一团未分化的薄壁细胞，因此，原球茎细胞的细胞壁薄。
(2)通过对比加蔗糖条件下，有光组能够正常分化，无光组无法发生分化，说明光能促进细胞分化；比较不加蔗糖条件下，有无光照均死亡，说明蔗糖为生长提供能量。
若保证组培正常，需要加入蔗糖，故A、B、C错误，D正确。
(3)生物碱属于铁皮石斛的次生代谢产物，获取方法可以从植株中提取，也可以通过液体悬浮细胞培养，将愈伤组织(原球茎)分散成单细胞，然后通过培养特定细胞系实现工业化生产。
2.利用废弃的秸秆生产燃料乙醇，不仅缓解了资源危机、环境污染，同时更为可持续发展提供了保证。
下面是利用玉米秸秆来生产乙醇的流程：玉米秸秆―――→预处理纤维素―――→微生物1发酵葡萄糖―――→微生物2发酵乙醇 (1)从纤维素丰富的土壤中获取微生物1，进行一系列的操作后，用________________将菌种涂布在相应的固体培养基中。
(2)下列有关涂布分离法的叙述，错误的是________。
A.从土壤稀释液中取样时，不能只取悬液B.接种时，涂布工具需先在酒精灯火焰上引燃C.培养后菌落在整个平板表面分散均匀D.涂布分离法比划线分离法更易获得单菌落(3)为了提高生产效率，也可通过培养微生物1获得____________酶，并将该酶固定在某介质上制成固定化酶。
(4)微生物2通常是________________，为了确保获得产物乙醇，接种微生物2时要注意避免________，发酵时要注意________。
发酵获得的低浓度乙醇经过蒸馏、提纯等加工，才可以得到浓度大于90%的燃料乙醇。
答案 (1)玻璃刮刀 (2)A (3)纤维素 (4)酵母菌 杂菌污染 无氧3.(2018·金华十校期末调研)回答与“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测”有关的问题：(1)在酶的固定化时，共价偶联法比吸附法对α-淀粉酶活性的影响更________(填“大”或“小”)。
(2)实验室常用枯草芽孢杆菌来制备α-淀粉酶，枯草芽孢杆菌的α-淀粉酶的最适pH 范围是______________。
(3)在固定化α-淀粉酶水解淀粉作用的检测实验中，固相淀粉酶水解淀粉的鉴定实验结果为：①淀粉溶液加指示剂呈蓝色；②____________________加指示剂呈红色。
(4)枯草芽孢杆菌也是制备蛋白酶的良好原料，为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产菌株，将分别浸过不同菌株(a ～e)的分泌物提取液及无菌水(f)的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37 ℃恒温箱中放置2～3天，结果如下图。
若需要保存a 菌株，可将其接种至斜面上，培养后置于________中保存。
菌株b 提取物周围没有形成明显清晰区的原因：①________________________________________________________________________； ②________________________________________________________________________。
答案(1)大(2)5.5～7.5 (3)亲和层析洗脱液(4)4 ℃冰箱①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足③分泌的蛋白酶活性低(任意答出两点)4.如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。
(1)图中选择培养基应以______为唯一氮源；鉴别培养基还需添加______作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变____色。
(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。
该过程采取的接种方法是_____________，每克土壤样品中的细菌数量为________×108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较________。
答案(1)尿素酚红红(2)涂布分离法 1.75 少解析(1)脲酶由分解尿素的细菌产生，故需用以尿素为唯一氮源的培养基筛选该类微生物。
分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，故培养基中加入酚红指示剂后，菌落周围将出现红色。
(2)涂布分离法常用来统计样品中的活菌数，在计数时一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。
因培养基上两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计结果往往较实际数目少；而用血细胞计数板计数时，死亡的、活的菌体都计数在内。
5.(2018·湖州、衢州、丽水教学质量检测)猕猴桃是人们非常喜爱的一种水果，人们不仅直接食用猕猴桃，还对其进行深加工，制成猕猴桃果汁、果酒等。
下图为生产猕猴桃果汁和果酒的流程示意图，请回答下列问题：(1)在生产猕猴桃汁的流程中，为了提高出汁率，可在压榨前加入一定量的____________处理1小时。
(2)猕猴桃汁在保藏期的某一阶段会产生酚类物质导致果汁褐变或二次浑浊，后来人们发现，漆酶能有效降解酚类物质，使果汁澄清。
将漆酶应用于果汁澄清的过程中，可采用交联法固定该酶，固定化酶技术的优点是__________________________________________。
工业上固定化酶的方式较多，除上述方法外，还有吸附法、________________、共价偶联法等。
(3)制作好的果汁也可继续用于猕猴桃酒的生产。
在进行发酵前需要在猕猴桃汁中接入的菌种是__________，同时添加适量蔗糖，主要目的是________________________________。
在发酵时，当出现________________现象，即表示发酵完毕。
(4)当主体发酵结束后，需将上层“酒液”转移到另一灭菌容器中进行后续贮藏，此时为了防止醋酸菌污染，加入容器中“酒液”的量应为________(A.注满 B.2/3 C.1/3 D.无特殊要求)，以保证果酒的品质。
答案(1)果胶酶(2)酶与产物易分离或酶可反复利用，提高酶的利用率(答出一点即可) 包埋法(3)酵母菌提高果酒的酒精度或甜度(含糖量) 停止产生气泡(4)A6.利用酵母菌生产乳糖酶首先要筛选高产乳糖酶的酵母菌种。
具体如下：(1)在无菌条件下，将经过处理的马奶酒进行稀释，然后用_____法接种于含有乳糖的固体培养基上。
培养后观察到_____；其周围出现水解圈，水解圈的直径大小与_____强弱相关。
(2)筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行扩大培养。
扩大培养通常用________培养基，培养时需要________，其主要目的是供氧。
(3)若要保存菌种，可以采用的保存条件是________。
A.平面培养基、37 ℃B.平面培养基、4 ℃C.斜面培养基、37 ℃D.斜面培养基、4 ℃答案(1)涂布分离单菌落乳糖酶的活性(2)液体振荡(3)D7.(2018·全能生B卷)焚烧农作物秸秆给农村带来了极大污染，为了实现可持续发展的目标，我国科学家想到利用特定的微生物将秸秆中的纤维素分解成葡萄糖，再发酵产生清洁能源乙醇。
(1)欲从土壤中分离获取上述分解秸秆的特定微生物，所用培养基以________为唯一碳源。
在培养基上完成接种后，需将培养皿________，然后置于恒温箱中培养。
(2)将上述菌株进行培养，从中分离得到纤维素酶并制成酶液，将该酶液和秸秆粉碎物混合，从发酵物中分离得到葡萄糖，但是酶不可重复利用，因此需要采用______________技术。
在合适条件下，将提纯的该酶与石英砂混合后，不时搅拌，该方法是________。
(A.吸附法 B.包埋法 C.交联法 D.共价偶联法)。
(3)酵母菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，发酵瓶需要定期排气的主要原因是______________________________________________________________________________。
发酵一定时间后，观察到发酵瓶内液面______________，说明发酵基本完毕。
影响乙醇发酵的因素很多，下图是某研究小组的研究成果，请写出该图的名称：________________。
答案(1)纤维素倒置(2)固定化酶 A (3)发酵过程中会产生大量CO2，使瓶内压力升高而可能引起爆裂停止出现气泡发酵天数和pH对发酵产生的乙醇浓度的影响8.(2018·浙江11月选考，32(一))回答与微生物培养及应用有关的问题：(1)对培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从__________________时开始计时。
对于不耐热的液体培养基，一般可将其转入G6玻璃砂漏斗中，采用________方式可较快地进行过滤灭菌。
(2)与酿造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加________________的过程。
某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是____________。
(3)为筛选胞外α-淀粉酶分泌型菌种，一般从____________(A.果园树下 B.肉类加工厂周围 C.米酒厂周围 D.枯树周围)获得土样，用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培养基上培养，一段时间后在培养基表面滴加碘液，可在菌落周围观察到透明的水解圈。
若要筛选酶活性较高的菌种，需挑选若干个______________________比值大的菌落，分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。
然后将培养液离心，取__________用于检测酶活性。
