肿瘤微环境响应型聚乙二醇聚合物胶束的制备及抗肿瘤作用研究

响应性高分子抗肿瘤药物纳米微胶束的构筑袁建超;骆雯博;宋开润;曾宪武【期刊名称】《西北师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(052)004【摘要】合成了聚（4‐甲基丙烯酰‐醛基苯甲酸酯）‐聚乙二醇‐聚叶酸[P（HBA‐TMOBA）‐PEG‐PFA]两亲性嵌段聚合物．透射电镜（TEM）照片显示制备的胶束成球形，平均粒径约为106 nm ．模拟细胞内释药结果表明，在体外药物输送过程中，仅有14.62％的阿霉素在48 h释放，而在p H＝5.0的条件下（在胞内体／溶酶体内），48 h释放率达到78.87％．细胞毒性（MTT）证明合成的聚合物P （HBA‐T M OBA ）‐PEG‐PFA 纳米药物载体微胶束对正常组织细胞无毒性，并且对人体宫颈癌（HeLa）细胞有良好的抑制作用．%T he poly (4‐methacryloxy‐aldehyde benzoate )‐polyethylene glycol‐poly folic acid[P(HBA‐T M OBA )‐PEG‐PFA ] amphiphilic block polymer is prepared . T EM show s that prepared micelles is spherical and particle size is about 106nm . The in vitro release DOX under physiological conditions is only 14.62% of the doxorubicin release after 48 h , and under the pH = 5.0 condition , 78.87% of DOX release .Cytotoxic ity tests demonstrate polymer P (HBA‐TMOBA)‐PEG‐PFA nano‐micelles is non‐toxic to normal tissues and has higher activity to human cervical carcinoma (Hela) cells .【总页数】7页(P57-63)【作者】袁建超;骆雯博;宋开润;曾宪武【作者单位】西北师范大学化学化工学院，甘肃省高分子材料重点实验室，甘肃兰州 730070;西北师范大学化学化工学院，甘肃省高分子材料重点实验室，甘肃兰州 730070;西北师范大学化学化工学院，甘肃省高分子材料重点实验室，甘肃兰州 730070;甘肃省肿瘤医院，甘肃兰州 730050【正文语种】中文【中图分类】TQ317.5【相关文献】1.刺激响应性聚合物载药纳米胶束研究进展 [J], 宋一凡;柴云;张普玉2.刺激响应性聚合物纳米胶束在药物控释中的应用研究 [J], 张海博;党婧3.还原响应性含硒纳米胶束的制备及其载药性能研究 [J], 王金梅;周原;黄娟4.羧甲基壳聚糖纳米胶束的制备与光响应性研究 [J], 张玲;刘娜;向锐;朱翠婷;刘雅嘉;易英;殷以华5.抗肿瘤药物纳米胶束制剂对人肝癌干细胞作用的研究 [J], 肖丽丽;梁暖;徐晖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

肿瘤微环境刺激响应的纳米药物递送体系的构建与抗肿瘤应用通过物理包覆或化学键合的方式将小分子化疗药物与载体结合制备纳米药物,可以克服小分子化疗药物靶向性差、毒副作用大的缺陷,提高肿瘤治疗效果。

根据肿瘤微环境设计的刺激响应性纳米药物可以靶向地富集在肿瘤部位,并通过对肿瘤部位微环境的刺激发生响应而靶向释放药物,更好地抑制肿瘤增长,减少对正常细胞的损伤。

本论文选用具有良好生物相容性和可降解性的聚合物为载体材料,设计合成了肿瘤细胞微环境刺激响应的纳米药物递送体系,主要完成两方面的工作:构建基于聚硫辛酸的pH和还原双响应性纳米药物递送体系;以及利用聚谷氨酸为主体构建乏氧响应性纳米药物递送体系。

具体如下:(1)通过简便的方法合成PEG化的聚(α-硫辛酸)(mPEG-PαLA),并担载阳离子抗肿瘤药物阿霉素DOX,制备pH 和还原双响应的纳米药物PPLA@DOX。

mPEG-PαLA对DOX的载药效率高达87.7%。

流式细胞术分析和激光共聚焦显微镜数据表明:PPLA@DOX可以被4T1癌细胞有效内吞,到达肿瘤细胞后,肿瘤细胞的酸性环境和高谷胱甘肽浓度会触发DOX的释放。

MTT数据证明:PPLA@DOX可以有效地抑制4T1癌细胞增殖。

动物实验结果进一步证明:PPLA@DOX对携带4T1肿瘤的小鼠有很好的治疗效果。

(2)选择亲水性mPEG为大分子引发剂,引发γ-炔丙基-L-谷氨酸酯N-羧基内酸酐(PLG-NCA)开环聚合制备mPEG-PPLG,并通过“click”反应将乏氧敏感性小分子4-硝基苄基(3-叠氮基丙基)氨基甲酸酯(AP-NC)修饰到mPEG-PPLG侧链上合成mPEG-PLG-NC。

两亲性的mPEG-PLG-NC可以自组装成纳米粒子并包载DOX,构建乏氧响应的纳米药物PPGN@DOX。

由于疏水的AP-NC与DOX之间强烈的π-π相互作用使纳米粒子对DOX的载药率高达97.8%。

体外模拟细胞乏氧条件下,DOX可以响应性的从PPGN@DOX中释放出来。

《叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束的制备及体外抗肿瘤作用研究》篇一一、引言随着纳米技术的发展，纳米药物在肿瘤治疗中的应用越来越广泛。

叶酸作为一种具有良好生物相容性和生物可降解性的药物载体，近年来被广泛应用于肿瘤治疗的纳米药物设计中。

pH敏感的聚乙二醇（PEG）-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束是一种新型的纳米药物载体，它能够在肿瘤组织中形成具有良好稳定性和有效药物载荷的纳米胶束，并通过控制pH环境来实现药物的精准释放。

本实验以叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束为研究对象，探究其制备工艺及其对体外肿瘤细胞的抗肿瘤作用。

二、材料与方法1. 材料本实验所需材料包括：叶酸、聚乙二醇、壳聚糖、硬脂酸、肿瘤细胞株等。

2. 制备方法（1）制备叶酸修饰的PEG-壳聚糖共聚物：将叶酸与PEG-壳聚糖共聚物进行化学修饰，得到叶酸修饰的PEG-壳聚糖共聚物。

（2）制备叶酸修饰的纳米胶束：将叶酸修饰的PEG-壳聚糖共聚物与硬脂酸进行自组装，形成纳米胶束。

（3）载药纳米胶束的制备：将药物与叶酸修饰的纳米胶束混合，制备载药纳米胶束。

3. 实验方法（1）透射电子显微镜（TEM）观察纳米胶束的形态和大小；（2）体外细胞实验：将载药纳米胶束与肿瘤细胞共培养，观察其抗肿瘤作用及药物释放情况；（3）MTT法测定细胞活力；（4）流式细胞术检测细胞凋亡等。

三、结果1. 纳米胶束的形态和大小TEM观察结果显示，制备的叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束形态规整，大小均匀，粒径约为XX nm。

2. 体外抗肿瘤作用体外细胞实验结果显示，载药纳米胶束对肿瘤细胞具有明显的抑制作用，且随着药物浓度的增加，抑制作用逐渐增强。

MTT 法测定结果显示，与对照组相比，实验组细胞活力显著降低。

流式细胞术检测结果显示，载药纳米胶束能够诱导肿瘤细胞凋亡，并促进细胞死亡。

3. 药物释放情况在pH敏感的环境下，叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束能够实现在肿瘤组织中的精准药物释放。

《叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束的制备及体外抗肿瘤作用研究》篇一一、引言近年来，随着纳米技术的快速发展，纳米药物载体在肿瘤治疗领域的应用日益受到关注。

叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束作为一种新型的纳米药物载体，具有独特的优势。

本文旨在研究该纳米胶束的制备方法及其在体外抗肿瘤作用方面的应用。

二、材料与方法1. 材料本研究所用材料包括：叶酸、聚乙二醇、壳聚糖、硬脂酸等。

所有试剂均为分析纯，购自国内知名化学试剂供应商。

2. 方法（1）叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束的制备首先，将叶酸与聚乙二醇进行化学连接，形成叶酸修饰的聚乙二醇。

然后，将壳聚糖与硬脂酸进行共价连接，形成壳聚糖-硬脂酸共聚物。

最后，将叶酸修饰的聚乙二醇与壳聚糖-硬脂酸共聚物进行自组装，形成纳米胶束。

（2）体外抗肿瘤作用研究采用人乳腺癌细胞株作为实验对象，通过MTT法检测纳米胶束对癌细胞的增殖抑制作用。

同时，通过流式细胞术、激光共聚焦显微镜等技术研究纳米胶束对癌细胞的凋亡、细胞周期等生物学行为的影响。

三、结果与讨论1. 叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束的制备结果通过自组装法成功制备了叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束。

透射电镜结果显示，纳米胶束呈球形，粒径分布均匀，平均粒径约为XX nm。

动态光散射实验表明，纳米胶束具有良好的稳定性，在pH值发生变化时，其粒径和电位会发生变化，表现出pH敏感性。

2. 体外抗肿瘤作用研究结果MTT法检测结果显示，叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束对乳腺癌细胞具有显著的增殖抑制作用。

流式细胞术和激光共聚焦显微镜结果显示，纳米胶束能够诱导癌细胞发生凋亡，并影响其细胞周期等生物学行为。

此外，叶酸的存在使得纳米胶束具有更好的靶向性，能够更有效地作用于癌细胞。

讨论：本研究制备的叶酸修饰的pH敏感聚乙二醇-壳聚糖-硬脂酸纳米胶束具有良好的生物相容性和稳定性。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810005217.X(22)申请日 2018.01.03(71)申请人 上海市肿瘤研究所地址 200032 上海市徐汇区斜土路2200弄25号(72)发明人 刘培峰　刘红梅　马丁　吴亮亮　孔宪明　(74)专利代理机构 上海骁象知识产权代理有限公司 31315代理人 赵峰(51)Int.Cl.A61K 9/107(2006.01)A61K 47/32(2006.01)A61K 47/42(2017.01)A61K 31/7105(2006.01)A61K 48/00(2006.01)A61P 35/00(2006.01)(54)发明名称一种肿瘤微环境响应型基因纳米胶束及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供了一种肿瘤微环境响应型基因纳米胶束，包括聚乙烯亚胺-苯基硼酸和聚乙烯亚胺-马来酸酐-靶向基团，所述的聚乙烯亚胺-苯基硼酸和聚乙烯亚胺-马来酸酐-靶向基团的质量比为1:1-1:2。

本发明还提供了上述肿瘤微环境响应型基因纳米胶束的制备方法。

本发明还提供了上述的肿瘤微环境响应型基因纳米胶束在制备治疗癌症的药物中的应用以及作为药物载体的用途。

本发明的纳米胶束可高效荷载与递送RNA，并具有微环境响应型递送基因药物进入肿瘤细胞靶点发挥作用，特别适用于负载RNA用于基因治疗恶性肿瘤。

本发明制备方法简便，适于大规模生产。

权利要求书2页 说明书7页 附图7页CN 108186564 A 2018.06.22C N 108186564A1.一种肿瘤微环境响应型基因纳米胶束，其特征在于：包括聚乙烯亚胺-苯基硼酸和聚乙烯亚胺-马来酸酐-靶向基团，所述的聚乙烯亚胺-苯基硼酸和聚乙烯亚胺-马来酸酐-靶向基团的质量比为1:1-1:2，所述的聚乙烯亚胺的分子量为1800～2500Da。

2.根据权利要求1所述的肿瘤微环境响应型基因纳米胶束，其特征在于：所述的纳米胶束的粒径为100-200nm，形态为球形。

聚乙二醇化纳米药物的制备及抗肿瘤性能研究传统小分子化疗药物治疗选择性差,毒副作用大,在新研发的化疗药物中,聚乙二醇化修饰的纳米药物最有希望替代现有化疗药物。

通过聚乙二醇化修饰,纳米药物表面水溶性增加,且可以有效防止免疫系统的追踪,延长了纳米药物的体内循环时间。

然而,通过自组装形成的纳米药物在血液循环中易解组装,引发药物到达肿瘤部位前提前释放。

本文设计制备了三种新型交联固定纳米结构的还原响应聚乙二醇化纳米药物,为聚乙二醇化纳米药物的潜在临床应用提供了新思路。

嵌段聚合物的自组装是制备聚合物纳米药物的主要方法之一,本文提出了一种简易制备还原响应核交联聚乙二醇化纳米药物的新方法。

采用免官能团保护的“一锅”缩聚法合成了疏水段含有多巯基的聚乙二醇化脂肪族聚酯,在自组装形成负载紫杉醇胶束的同时,通过对巯基的氧化交联或原位巯—烯“点击”交联制备了核交联载药胶束。

该聚乙二醇化纳米药物可以在还原环境下快速解交联,释放紫杉醇,并表现出良好的抑制肿瘤细胞生长的能力。

有望作为一种可降解纳米药物实现规模化制备和应用。

简单明确的化学组成更利于纳米药物的理化性能分析及临床审批。

本文设计合成了一种仅含两组分的核交联聚乙二醇化纳米药物。

含有两官能度金刚烷修饰的喜树碱前药与疏水段含有多个环糊精的聚乙二醇嵌段聚合物自组装形成胶束时发生主客体包合,实现药物稳定负载的同时实现了纳米药物的核交联。

与传统化学交联的纳米药物相比,该以主客体包合物为物理交联点的纳米药物制备方式更加简便,化学组成更加明确,更有利于实现纳米药物的临床应用。

对于寡聚乙二醇与药物化学键合形成的纳米药物,往往具有较高的临界胶束浓度,纳米药物容易解组装,而对其进行化学交联将使纳米药物化学构成复杂化,很难通过药监部门的审批。

本文设计制备了一种基于主客体作用的超分子聚乙二醇化纳米药物:通过二硫键连接金刚烷与喜树碱,合成了结构明确的还原敏感小分子前药;通过对环糊精的聚乙二醇化修饰,制备了含多个仲氨基团的聚乙二醇—环糊精键合物;以上两者通过主客体包合即可形成两亲性超分子聚乙二醇化前药,在水中自组装得到纳米药物;对聚乙二醇—环糊精部分进行化学交联可进一步提高纳米药物的稳定性。

pH响应性聚合物胶束及其在抗癌药物给药系统中的研究进展摘要：聚合物纳米粒作为一种有效的药物运送载体已经受到广泛的关注，具有环境响应性的聚合物胶束的制备及应用是目前引人瞩目的研究方向。

本文综述了pH值响应性的聚合物胶束的两种主要制备策略，并介绍了其在抗癌药物给药系统中的应用。

关键词：聚合物胶束；pH响应性；抗癌药物；载体Advance in pH-responsive polymeric micelles as delivery system foranticancer drugsAbstract: Polymeric nanoparticles as a kind of effective drug carrier have been widely concerned on. Particularly, more attentions have been paid to the applications of pH-responsive polymeric micelles. This paper reviews recent progress in synthetic strategy of polymeric micelles with pH-responsive structure and its applications as delivery system for anticancer dugs.Keywords:polymeric micelles; pH-responsive;anticancer drugs; carrier前言聚合物胶束是两亲性的高分子物质在水中自发形成的一种自组装结构，它具有疏水性内核与亲水性外壳的典型结构。

聚合物胶束近年来已被发展为一种新型药物释放系统，正不断地获得越来越多的关注。

根据自聚集形成胶束的原理不同，聚合物胶束可大致分为三类：嵌段共聚物胶束；接枝共聚物胶束；聚电解质胶束。

抗肿瘤药H6聚合物胶束的制备及体外抗肿瘤作用研究潘超;刘会丽;许俊鹏;唐俏欣;万丽【期刊名称】《中国药房》【年(卷),期】2017(028)004【摘要】目的：制备抗肿瘤药H6（内酯类化合物）聚合物胶束，考察其体外抗肿瘤作用。

方法：以甲氧基聚乙二醇-聚（ε-己内酯）（mPEG2000-PCL4000）为载药材料，制备H6/mPEG2000-PCL4000胶束。

以粒径、多分散系数（PDI）和48 h是否产生沉淀为指标筛选处方投料比、H6质量浓度、有机溶剂体积比，检测所制胶束的包封率和载药量。

采用MTT法检测所制胶束与H6溶液对人非小细胞肺癌细胞A549、人肺癌细胞H460的毒性。

结果：确定处方为投料比为1∶25、H6质量浓度为2 mg/mL、乙醇-氯仿为1∶1（V/V）；所制备的H6/mPEG2000-PCL4000胶束的粒径为（40.74±0.1163）nm，PDI为0.101±0.006，包封率为（94.87±0.0163）％，载药量为（7.07±0.0015）％（n ＝3）。

胶束和H6溶液对A549细胞的IC50分别为15.62、12.57 nmol/L，对H460细胞的IC50分别为27.68、15.19 nmol/L。

结论：成功制得H6/mPEG2000-PCL4000胶束，其具有体外抗肿瘤作用。

%OBJECTIVE:To prepare anti-tumor drug H6(lactone compound)polymeric micelles,and to investigate its in vitro anti-tumor effects. METHODS:Using mPEG2000-PCL4000 as carrier,H6/mPEG2000-PCL4000 micelles were prepared. Using particle size, PDI and 48 h whether to produce precipitation as indexes,feeding ratio,H6 concentration,volume ratio of organic solvent were screened. The encapsulation efficiency and drug-loading amount ofmicelle were all detected. MTT assay was used to detect the tox-icity of micelles and H6 solution to human non-small cell lung cancer cell A549 and human lung cancer cell H460. RESULTS:The screened formulation was as follows as feeding ratio of 1∶25,H6 concentration of 2 mg/mL,the ratio of ethanol to chloroform of 1∶1(V/V). The parameters of preparedH6/mPEG2000-PCL4000 micelles were as follows as particle sizeof(40.74±0.116 3)nm,PDI of(0.101±0.006),encapsulation efficiencyof(94.87±0.016 3)%,drug-loading amount of(7.07±0.001 5)%(n=3). IC50 of mi-celles and H6 solution to A549 cell were 15.62 and 12.57 nmol/L;IC50 of micelles and H6 solution to H460 cell were 27.68 and 15.19 nmol/L. CONCLUSIONS:H6/mPEG2000-PCL4000 micelles are prepared successfully and show in vitro anti-tumor effects.【总页数】4页(P533-535,536)【作者】潘超;刘会丽;许俊鹏;唐俏欣;万丽【作者单位】成都中医药大学药学院，成都 611137; 四川大学生物治疗国家重点实验室，成都 610041;四川大学生物治疗国家重点实验室，成都 610041;成都中医药大学药学院，成都 611137;成都中医药大学药学院，成都 611137;成都中医药大学药学院，成都 611137【正文语种】中文【中图分类】R943【相关文献】1.九节龙皂苷Ⅰ聚合物载药胶束的制备及体外表征 [J], 雷丸;唐鹏;王莹;周婷;王晓娟2.多柔比星聚合物胶束制备、表征及其体外释药研究 [J], 典灵辉;郭向华;程纪伦;林晓;严雄;于恩江;毛志慧3.地塞米松纳米胶束的制备及体外抗肿瘤作用研究 [J], 侯杰荣;侯思奎;杨欣;姚小东4.双靶向紫杉醇聚酰胺聚合物胶束体外抗肿瘤作用及机制 [J], 赵红阳;王莹;盛世东;姜琳;刘月平;赵庆兰5.细胞穿膜肽PFV修饰紫杉醇/青蒿琥酯共载靶向胶束的制备及体外抗肿瘤作用研究 [J], 王为;李学涛;孔亮;姜爽;罗一夫;王晓波因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。