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松果菊苷对细胞外组蛋白介导的细胞损伤及红细胞和血小板聚集的保护作用闫沁远【期刊名称】《湖北职业技术学院学报》【年(卷),期】2024(27)2【摘要】目的:探讨松果菊苷(ECH)对细胞外组蛋白介导的细胞损伤以及红细胞和血小板聚集的保护作用。
方法:采用Calcein-AM和PI双染色法考察ECH与组蛋白共同使用时对组蛋白介导人微血管内皮细胞(HMEC)毒性作用影响以及ECH介导的HMEC损伤的逆转作用;考察ECH对组蛋白诱导的小鼠红细胞聚集作用的影响;进一步考察了ECH对组蛋白介导小鼠体内生物标志物(ALT、LDH、Crea)以及血液学参数(白细胞、血小板、红细胞、血红蛋白)变化的影响。
结果:ECH对组蛋白介导的HMEC损伤作用呈剂量依赖性保护作用,并且E CH(100μg/mL)处理10min后可部分逆转组蛋白介导的HMEC细胞毒性作用;组蛋白可以加速未经处理的红细胞的自然聚集率,而加入200μg/mL的ECH溶液对红细胞聚集具有明显的抑制作用;ECH可以剂量依赖性的抑制血清中生物标记物循环丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酐(Crea)表达,并显著增加小鼠体内的循环血小板、白细胞、红细胞和血红蛋白数量。
结论:ECH可减轻组蛋白介导的细胞毒性,并抑制组蛋白介导的红细胞凝集以及血液学参数变化,ECH体外实验加上相关的体内模型,证实其可通过与细胞外组蛋白作用从而降低脓毒症患者器官损伤和死亡率的治疗潜力。
【总页数】6页(P103-108)【作者】闫沁远【作者单位】湖北职业技术学院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.松果菊苷对刀豆蛋白A所致急性肝损伤小鼠的保护作用及对细胞外组蛋白的影响2.松果菊苷对过氧化氢损伤的PC12细胞的保护作用及机制研究3.松果菊苷对6-羟基多巴胺急性损伤大鼠纹状体细胞外液中单胺类递质的影响4.松果菊苷对血管内皮细胞损伤的保护作用5.松果菊苷对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的保护作用因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
doi:10.3969/j.issn.1000⁃484X.2020.04.09松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应与激活Nrf 通路相关①兰戴天 何 力② 李茂德 赵 源 赵晓晨(四川省医学科学院㊃四川省人民医院普外科,成都610100) 中图分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1000⁃484X (2020)04⁃0428⁃06①本文为四川省中医药管理局科学技术研究专项项目(2018QN066)㊂②通讯作者㊂作者简介:兰戴天,男,主治医师,主要从事普通外科学研究,E⁃mail:623340234@㊂[摘 要] 目的:研究松果菊苷对脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应的作用及机制㊂方法:实验设置假手术组(Sham)㊁模型组(Model)㊁松果菊苷低剂量组(ECH⁃L)㊁松果菊苷中剂量组(ECH⁃M)㊁松果菊苷高剂量组(ECH⁃H)㊁阳性对照组(DEX),每组20只大鼠㊂在造模之前1h,通过尾静脉分别注射生理盐水㊁松果菊苷25㊁50㊁100mg /kg㊁地塞米松10mg /kg㊂通过盲肠结扎和穿刺(CLP)模式诱导脓毒症大鼠模型㊂HE 染色观察肝损伤,试剂盒检测肝功能相关指标及氧化应激相关指标,ELISA 检测炎症因子,通过流式分选CD4+和CD8+,蛋白印迹法检测Nrf2通路相关蛋白㊂结果:与模型组相比,松果菊苷高剂量组肝脏组织的水肿和炎症细胞浸润程度减轻,丙氨酸氨基转移酶和碱性磷酸酶活性㊁总胆红素含量明显减少(P <0.05),丙二醛含量明显减少(P <0.01),过氧化氢酶㊁超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性明显增加(P <0.01),炎症因子TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1β㊁HMGB1含量减少(P <0.01),而CD4+㊁CD8+㊁CD4+/CD8+所占百分比明显增加(P <0.01),NQO1㊁HO⁃1㊁Nrf2蛋白表达明显上调(P <0.01)㊂结论:松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应,并激活Nrf 通路㊂[关键词] 松果菊苷;脓毒症;肝损伤;炎症反应;Nrf 通路Echinacoside improves liver damage and inflammatory response in septic rats by activating Nrf pathwayLAN Dai⁃Tian ,HE Li ,LI Mao⁃De ,ZHAO Yuan ,ZHAO Xiao⁃Chen .Sichuan Academy of Medical Sciences Sichuan People′s Hospital General Surgery ,Chengdu 610100,China[Abstract ] Objective :To investigate the effect and mechanism of echinacoside on liver injury and inflammatory response inseptic rats.Methods :This experiment was performed with sham operation group,model group,low dose group of echinacoside(ECH⁃L),middle dose of echinacoside (ECH⁃M),high dose of echinacoside,group (ECH⁃H),positive control group (DEX),20rats per group.Normal saline,echinacoside 25,50,100mg /kg and dexamethasone 10mg /kg were injected through the tail vein 1h before mod⁃eling.A rat model of sepsis was induced by cecal ligation and puncture (CLP).Liver injury was observed by HE staining.The liver function related indicators and oxidative stress related indicators were detected by the kits.The inflammatory factors were detected byELISA.CD4+and CD8+were sorted by flow cytometry,and the Nrf2pathway was detected by Western blot.Related proteins.Results :Compared with the model group,the degree of edema and inflammatory cell infiltration in the liver tissue of the high dose group of echi⁃nacoside was alleviated.Alanine aminotransferase and alkaline phosphatase activity,total bilirubin content were significantly reduced (P <0.05).Malondialdehyde content was significantly reduced (P <0.01).Catalase,superoxide dismutase and glutathione peroxidase activities were significantly increased (P <0.01).The levels of inflammatory factors TNF⁃α,IL⁃6,IL⁃1βand HMGB1were decreased (P <0.01).The percentage of CD4+,CD8+,CD4+/CD8+were increased (P <0.01).The expression of NQO1,HO⁃1and Nrf2proteins was significantly up⁃regulated (P <0.01).Conclusion :Echinacoside can improve liver injury and inflammatory response in rats withsepsis and activate Nrf pathway.[Key words ] Echinacoside;Sepsis;Liver injury;Inflammatory response;Nrf pathway 脓毒症是一种由宿主对感染的反应失调引起,可导致全身炎症和多器官功能障碍综合征的致命性疾病㊂尽管使用了积极的外科治疗㊁特定的抗生素和其他药物制剂,脓毒症与住院死亡率相关性仍高于10%[1]㊂脓毒症发展和进展的主要病理生理机制在于中炎症介质和抗炎因子之间动态平衡的失调[2]㊂肝功能障碍和衰竭是脓毒症的传统并发症,影响内源性和外源性的生物转化和运输,是脓毒症的早期和频发事件[3]㊂虽然肝功能障碍的发生率比其他重要器㊃824㊃中国免疫学杂志2020年第36卷官的功能障碍的发生率低40%左右,但肝功能障碍患者的死亡率比脓毒症引起的呼吸系统功能障碍(最常见的器官功能障碍)患者的脓毒症死亡率高54%[4]㊂此外,有研究表明在肝病患者中,脓毒症的发病率比普通ICU 患者高30%~50%[4]㊂考虑到肝脏在脓毒症发病㊁发展和结局中的关键作用,肝损伤是脓毒症患者临床管理中开发新的治疗工具的重要目标㊂松果菊苷(Echinaco⁃side,ECH)是一种从中国传统中药肉苁蓉中分离得到的苯乙醇苷类化合物(图1),具有抗氧化㊁抗炎㊁抗肿瘤㊁保护肝脏㊁保护神经㊁改善学习记忆及调节免疫等多种药理作用[5],因此,预测松果菊苷可改善脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应㊂本文主要研究松果菊苷对脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应的作用及机制㊂1 材料与方法1.1 材料 120只体重为180~200g 的雌性Wistar 大鼠,购自四川夏派森医药科技有限公司,许可证号:SYXK(川)2017⁃203㊂大鼠在25℃,12h 光照/12h 黑暗循环的饲养室,自由获取水和食物㊂在实验前1周开始适应性喂养㊂松果菊苷(HPLC≥98%,百灵威科技有限公司,货号:82854⁃37⁃3),地塞米松(上海联硕生物科技有限公司,货号:D1756),苏木素伊红(Hematoxylin eosin,HE)染色试剂㊁过氧化氢酶检测试剂盒㊁谷胱甘肽过氧化物酶活性检测试剂盒㊁超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒(索莱宝科技有限公司,货号:G1120㊁BC0200㊁BC1190㊁BC0170),总蛋白定量测试盒㊁白蛋白含量测试盒㊁碱性磷酸酶试剂盒㊁丙氨酸氨基转移酶㊁总胆红素㊁γ⁃谷氨酰环化转移酶㊁IL⁃1β㊁IL⁃6㊁TNF⁃αELISA 试剂盒(上海联硕生物刻科技有限公司,货号:ml016898㊁ml076981㊁ml016867㊁ml037336㊁ml016910㊁ml027458㊁ml037361㊁ml002813⁃1㊁ml002859),HMGB1ELISA 试剂盒(上海基免实业有限公司,货号:JM⁃ELISA⁃0126),TBARS 试剂盒(上海起发实验试剂有限公司,货号:0801192)㊂图1 松果菊苷的结构式Fig.1 Structural formula of echinacoside1.2 方法1.2.1 给药及模型构建 将大鼠分为假手术组(Sham)㊁模型组(Model)㊁松果菊苷低剂量组(ECH⁃L)㊁松果菊苷中剂量组(ECH⁃M)㊁松果菊苷高剂量组(ECH⁃H)㊁阳性对照组(DEX),每组20只㊂在造模前1h,通过尾静脉分别注射生理盐水㊁松果菊苷25㊁50㊁100mg /kg [6]㊁地塞米松10mg /kg [7]㊂通过盲肠结扎和穿刺(cecal ligation and puncture,CLP)模式诱导脓毒症[8]㊂简单地说,通过腹膜内注射15mg /kg 氯胺酮和7.5mg /kg 甲苯噻嗪麻醉动物㊂然后,在前腹部正中切开3cm,露出盲肠㊂将粪便拖至盲肠用5/0丙烯线结扎并固定在回盲部连接杆下方,但不能引起肠梗阻㊂用18号针头将盲肠穿刺10次并稍微挤压直至出现一小滴粪便㊂将盲肠重新放于腹腔,缝合伤口㊂假手术动物接受了相同的剖腹手术,但没有盲肠穿刺,并作为对照组㊂手术后不久,所有动物皮下注射2ml 0.9%氯化钠溶液㊂1.2.2 HE 染色观察肝损伤 肝脏固定在10%福尔马林中,石蜡包埋,切成5μm 厚,二甲苯脱蜡,乙醇浓度降低时连续脱水㊂切片用苏木精⁃伊红染色,光镜下观察并使用ColorViewⅡ相机获取20个随机场(400倍放大)的图像,并由两名资深病理学家独立评估肝脏损伤的组织形态学㊂1.2.3 血清指标检测肝功能 根据所提供的试剂盒手册,评估血清总蛋白㊁白蛋白㊁天冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)㊁丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT),总胆红素(total bilirubin,TBil)㊁碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和γ⁃谷氨酰转移酶(γ⁃glutamyl transferase,γ⁃GT)的水平来分析肝功能㊂1.2.4 肝脏氧化应激分析 根据所提供的试剂盒手册,肝脏组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)和巯基水平,以及抗氧化酶过氧化氢酶(catalase,CAT)㊁超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)的活性来分析肝脏氧化应激情况㊂1.2.5 炎症因子检测 按照ELISA 试剂盒说明书操作:将样品加入各反应孔,37℃反应45min ㊂接着用洗涤液洗涤4次,再分别加入生物素标记IL⁃1β㊁IL⁃6㊁TNF⁃α㊁HMGB1的抗体,在37℃孵育30min㊂洗涤后加链霉亲和素⁃HRP 混合均匀,在37℃反应30min㊂接着加入显色剂避光显色㊂最后加终止液终止反应,检测结果㊂1.2.6 流式细胞术分选CD8+和CD4+ 分离肝脏组织,将肝脏组织剪碎研磨,用200目钢网研磨过㊃924㊃兰戴天等 松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应与激活Nrf 通路相关 第4期滤,用红细胞裂解液进行裂解5min,然后用33.75%Percoll分离纯化细胞,2000r/min离心20min,再用0.5%BSA⁃PBS缓冲液重悬㊂用PMA 和离子霉素刺激细胞4h,并用针对PE⁃CD8和FITC⁃CD4的荧光缀合的抗体染色㊂在FACS Calibur 流式细胞仪中分析CD8+和CD4+细胞的频率㊂1.2.7 蛋白印迹法检测 在裂解缓冲液中提取总蛋白质,并用BCA测定试剂盒测量蛋白质浓度㊂将10μg蛋白样品用10%SDS⁃PAGE分离后转移至PVDF膜上㊂用5%脱脂奶粉封闭膜,然后用一抗(NQO11∶500㊁HO⁃11∶500㊁Nrf21∶1000)在4℃封闭过夜,接着加入对应辣根过氧化物酶偶联的二抗室温孵育1h,最后滴ECL曝光㊂以GAPDH为内参,使用Quantity One软件进行分析目标蛋白质的相对表达水平㊂1.3 统计学分析 用统计软件SPSS21.0分析实验数据,数据以x±s表示㊂数据进行正态分布和方差齐性分析,发现均呈正态分布且方差齐㊂单因素方差分析,组间两两比较采用LSD⁃t方法检验,检验标准为α=0.05(双侧)㊂2 结果2.1 松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝损伤 Sham组显示正常大鼠的肝组织没有炎症㊁坏死的迹象; Model组大鼠的肝脏组织存在着明显的水肿和炎症细胞的浸润;ECH各组随着给药浓度的增加,肝脏组织的水肿和炎症细胞浸润程度逐渐减轻(图2)㊂2.2 松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝功能 各组大鼠的血清总蛋白含量㊁γ⁃谷氨酰转移酶和天冬氨酸氨基转移酶活性无明显变化㊂与Sham组相比, Model组大鼠丙氨酸氨基转移酶和碱性磷酸酶活性㊁总胆红素含量明显增加(P<0.05,图3);与Model组相比,ECH⁃H组大鼠丙氨酸氨基转移酶和碱性磷酸酶活性㊁总胆红素含量明显减少(P<0.05,图3),其他各组无明显变化;说明高剂量的松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝功能㊂2.3 松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝氧化应激 与Sham组相比,Model组大鼠丙二醛含量明显增加,过氧化氢酶㊁超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶明显减少(P<0.01,图4);与Model组相比,ECH⁃L组大鼠丙二醛含量㊁过氧化氢酶㊁超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性无明显变化,ECH⁃M组大鼠丙二醛含量明显减少,过氧化氢酶㊁超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶明显增加(P<0.05,图4),ECH⁃H组和DEX组大鼠丙二醛含量明显减少,过氧化氢酶㊁超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶明显增加(P<0.01,图4);说明高剂量的松果菊苷和地塞米松一样能够改善脓毒症大鼠的肝氧化应激㊂2.4 松果菊苷改善脓毒症大鼠的炎症反应 与Sham组相比,Model组大鼠炎症因子TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1β㊁HMGB1含量增加,而CD4+㊁CD8+㊁CD4+/ CD8+所占百分比均明显减少(P<0.01,图5㊁6);与Model组相比,ECH⁃L组大鼠炎症因子TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1β㊁HMGB1含量及CD4+㊁CD8+㊁CD4+/CD8+所占百分比无明显变化,ECH⁃M组大鼠炎症因子TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1β㊁HMGB1含量减少而CD4+㊁CD8+㊁CD4+/CD8+所占百分比明显增加(P<0.05,图5㊁图2 HE染色观察肝损伤程度Fig.2 Degree of liver injury was observed by HEstaining图3 通过试剂盒检测肝功能指标Fig.3 Liver function indicators detected by kit Note:A.Total protein content;B.γ⁃glutamyl transferase;C.Aspartate aminotransferase activity;D.Alanine aminotransferase activity;E.Alkaline phosphatase activity;F.Total bilirubin content;*.P<0.05versus sham group;#.P<0.05versus model group.㊃034㊃中国免疫学杂志2020年第36卷6),ECH⁃H 组和DEX 组大鼠炎症因子TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1β㊁HMGB1含量减少㊁而CD4+㊁CD8+㊁CD4+/CD8+所占百分比明显增加(P <0.01,图5㊁6);说明高剂量的松果菊苷和地塞米松一样能够改善脓毒症大鼠的炎症反应㊂2.5 松果菊苷激活脓毒症大鼠Nrf2信号通路 转录因子核因子红细胞2相关因子2(nuclear factor⁃erythroid⁃2⁃related factor 2,Nrf2)信号通路是治疗脓毒症所致肝损伤过程中关键信息通路,通过蛋白印迹检测Nrf2信号通路相关蛋白还原型辅酶/醌氧化图4 通过试剂盒检测肝氧化应激水平Fig.4 Liver oxidative stress levels were detected by each kitNote:A.Malondialdehyde content;B.Superoxide dismutase;C.Catalase;D.Glutathione peroxidation;**.P <0.01versus sham group;#.P <0.05,##.P <0.01versus modelgroup.图5 通过ELISA 检测相关炎症因子表达水平Fig.5 Expression levels of inflammation⁃related factorswere detected by ELISANote:A.TNF⁃αcontent was detected by ELISA;B.IL⁃6content wasdetected by ELISA;C.IL⁃1βcontent was detected by ELISA;D.HMGB1content was detected by ELISA;**.P <0.01versussham group;#.P <0.05,##.P <0.01versus model group.还原酶[NAD (P )H:quinone oxidoreductase⁃1,NQO1]㊁血红素加氧酶⁃1(heme oxygenase⁃1,HO⁃1)㊁Nrf2表达发现:与Sham 组相比,Model 组大鼠NQO1㊁HO⁃1㊁Nrf2蛋白表达明显下调(P <0.01,图7);与Model 组相比,ECH⁃L 组大鼠NQO1㊁HO⁃1㊁Nrf2蛋白表达无明显变化,ECH⁃M 组大鼠NQO1㊁图6 通过流式细胞术检测肝脏CD8+和CD4+T 细胞的比例Fig.6 Proportion of liver CD8+and CD4+T cells by flow cytometryNote:A.CD8+and CD4+were sorted by flow cytometry;B.Percentage ofCD4+;C.Percentage of CD8+;D.CD4+/CD8+ratio;**.P <0.01versus sham group;#.P <0.05,##.P <0.01versus modelgroup.图7 通过蛋白印迹检测NQO1㊁HO⁃1㊁Nrf2蛋白表达水平Fig.7 NQO1,HO⁃1,Nrf2protein expression levels weredetected by Western blotNote:**.P <0.01versus sham group;#.P <0.05,##.P <0.01versusmodel group.㊃134㊃兰戴天等 松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应与激活Nrf 通路相关 第4期HO⁃1㊁Nrf2蛋白表达明显上调(P<0.05,图7), ECH⁃H组大鼠NQO1㊁HO⁃1㊁Nrf2蛋白表达明显上调(P<0.01,图7);说明高剂量的松果菊苷激活脓毒症大鼠Nrf2信号通路㊂3摇讨论脓毒症是由如内毒素㊁外毒素㊁病毒或成熟因子等多种因素引起的全身性炎症反应,可激活强大的免疫反应,甚至免疫失调,从而引起器官功能障碍和器质损害㊂尽管在治疗方法和重症监护方面有所改善,但脓毒症的发生率和死亡率仍在继续增加[9]㊂脓毒症患者通常发生多器官功能衰竭,肺㊁肝㊁肾和心脏是严重受影响的器官,有研究表明,每增加一个器官的衰竭,患者死亡风险增加15%~20%[10]㊂肝功能障碍是一种与脓毒症密切相关的临床并发症,并已作为严重脓毒症和感染性休克的重症患者高死亡率的有力预测因子[11]㊂本研究发现,松果菊苷能够明显降低脓毒症大鼠的丙氨酸氨基转移酶和碱性磷酸酶活性㊁总胆红素含量㊂其中,丙氨酸氨基转移酶被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标;碱性磷酸酶是一种经肝脏向胆外排出的酶,是诊断胆道系统疾病时常用的指标;总胆红素是胆汁的重要成分之一,临床上主要用于诊断肝脏疾病和胆道梗阻㊂且已有研究表明松果菊苷对小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用[12],这与本文研究结果相一致㊂有证据证实氧化应激是脓毒症的一个病理过程,它会损害细胞功能,最终导致多个器官功能障碍㊂因此,人们提出了几种抗氧化处理方法,并取得了成功㊂如,褪黑素通过抗氧化治疗脓毒症后肝功能损害[13]㊂本文研究表明松果菊苷能减少脓毒症大鼠肝组织中丙二醛含量,增加过氧化氢酶㊁超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,从而改善脓毒症大鼠的肝氧化应激,进而减轻脓毒症后肝功能损害㊂脓毒症肝损伤的主要原因是炎症介质的过度生成㊂在脓毒症中,肝细胞尤其是库普弗细胞被微生物因子激活,激活库普弗细胞产生大量的炎症介质如IL⁃1β㊁IL⁃6和TNF⁃α等[14]㊂这些介质或被释放到体循环中介导多器官损伤,或通过旁分泌介导肝损伤与肝细胞和窦内皮细胞相互作用㊂已有研究表明,抑制肝脏炎症可减轻肝损伤,降低脓毒症的发病率和死亡率[15]㊂在脓毒症炎症的初始阶段,TNF⁃α是第一个释放的促炎因子㊂IL⁃1β和IL⁃6的持续增加表明脓毒症的预后不良㊂晚期的炎症反应可以通过单核巨噬细胞激活HMGB1的大量分泌㊂本文研究发现,松果菊苷能减少脓毒症大鼠肝组织中TNF⁃α㊁IL⁃6㊁IL⁃1β㊁HMGB1含量㊂促炎和抗炎不平衡导致脓毒症的发生,T淋巴细胞亚群在一定程度上可针对细胞免疫状态诱导相应的反应㊂脓毒症会引起CD4+和CD8+含量的下降,据报道,CD4+/CD8+下降表明脓毒症加重且预后较差[16]㊂CD4+T细胞为辅助/诱导T淋巴细胞,其在细胞免疫反应方面作用的发挥主要是通过分泌细胞因子和趋化因子的激活和(或)募集靶细胞来实现㊂CD4+T细胞在多种病原微生物脓毒症中具有启动免疫反应的作用,促进早期病原菌细胞的清除,从而减轻脓毒症引起的器官损伤[17]㊂CD8+T细胞在抗胞内感染的免疫机制中,细胞杀伤效应占重要地位,能识别和溶解靶细胞,杀伤病原体,对细胞内病原体产生有效和持久的免疫应答㊂CD4+㊁CD8+的变化基本可以反映脓毒症患者的细胞免疫状况㊂本文研究发现,松果菊苷能增加脓毒症大鼠CD4+和CD8+含量,并增加CD4+/CD8+,说明松果菊苷能通过调节免疫反应来减轻脓毒症㊂治疗脓毒症肝损伤的有效途径之一就是Nrf2信号通路,如骨髓间充质干细胞通过激活Nrf2信号通路改善脓毒症模型大鼠肝脏损伤[3]㊂Nrf2由NFE2L2基因编码,是碱性亮氨酸拉链转录因子㊂在静止条件下,Nrf2通过其阻遏型kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)保持在细胞质中,并通过酶降解将其除去㊂当细胞暴露于氧化应激㊁炎症等有害攻击时,Nrf2从Keap1解离并转化为细胞核,在那里它与其下游基因启动子内的抗氧化反应元件(anti⁃oxidant response element,ARE)结合,包括尿苷5′⁃二磷酸葡萄糖醛酸转移酶,还原型辅酶/醌氧化还原酶[NAD(P)H:quinone oxidoreductase⁃1,NQO1],血红素加氧酶⁃1(heme oxygenase⁃1,HO⁃1),谷胱甘肽S⁃转移酶,谷氨酸半胱氨酸连接酶和谷胱甘肽过氧化物酶等[18]㊂这些基因中的大多数是重要的抗氧化酶和细胞保护基因㊂Nrf2通过与ARE结合可以上调NQO1的表达,进而调节抗氧化和炎症细胞因子㊂HO⁃1被认为是血红素降解的初始和限速酶的诱导型同种型,有助于免疫调节和抗炎功能,可以通过Nrf2核转位来调节氧化应激反应和炎症反应[19]㊂已有研究表明,松果菊苷通过Nrf2/HO⁃1依赖途径保护血管内皮细胞免受高糖诱导的氧化应激[20]㊂本文研究发现,松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应与激活Nrf通路相关㊂综上所述,松果菊苷能够减轻肝损伤,改善肝功能㊁肝氧化应激和炎症反应,并激活Nrf通路,分子机制还有待进一步研究㊂本文为松果菊苷的开发利用提供参考数据,为脓毒症的预防和治疗奠定基础㊂(下转第438页)cancer and its effect on cervical cancer cell function[D].Nanning:Guangxi Med Univ,2016.[8] 王霖玲,曾健梅,阎优优,等.土木香乙酸乙酯提取物对人胰腺癌Capan⁃2细胞增殖的抑制作用及机制研究[J].中国药房, 2017,28(31):4384⁃4388.Wang LL,Zeng JM,Yan YY,et al.Study on the inhibitory effect and mechanism of inula helenium ethyl acetate extract on proliferation of human pancreatic cancer Capan⁃2cells[J].China Pharmacy,2017,28(31):4384⁃4388.[9] Wei M,Zhou W,Bi Y,et al.Rising mortality rate of cervical cancerin younger women in urban China[J].J Gen Intern 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松果菊苷对大鼠急性肝损伤的保护作用吴煜;许桂林;楼敏;曾珍【期刊名称】《胃肠病学和肝病学杂志》【年(卷),期】2008(17)5【摘要】目的研究松果菊苷对大鼠急性肝损伤的保护作用及机制.方法随机将大鼠分为急性肝损伤组、药物干预组和正常对照组.大鼠经腹腔注射四氯化碳制备急性肝损伤模型;药物干预组大鼠给予松果菊苷连续灌胃7d,然后再进行四氯化碳染毒.染毒24h后测定各组大鼠血清ALT、AST水平,肝组织MDA浓度和SOD活性以及肝组织caspase-3活性和TNF-α水平;HE染色观察肝组织病理形态学改变.结果急性肝损伤组大鼠血清ALT、AST水平以及组织MDA含量显著升高,伴SOD活性明显下降,与正常对照组相比差异非常显著;同时肝组织caspase-3活性和TNF-α水平亦显著高于对照组.预先给予松果菊苷能显著改善大鼠肝损伤,降低血清ALT、AST、MDA和caspase-3、TNF-α水平,并升高组织SOD活性.结论松果菊苷对大鼠急性肝损伤有明显保护作用,机制可能与其抗氧化效应和清除自由基的作用有关.【总页数】3页(P410-412)【作者】吴煜;许桂林;楼敏;曾珍【作者单位】解放军302医院感染八科,北京,100039;解放军302医院感染八科,北京,100039;解放军302医院感染八科,北京,100039;解放军302医院感染八科,北京,100039【正文语种】中文【中图分类】R575【相关文献】1.松果菊苷对刀豆蛋白A所致急性肝损伤小鼠的保护作用及对细胞外组蛋白的影响 [J], 雷箴;温韬2.西维来司钠对大鼠重症急性胰腺炎后急性肝损伤的保护作用 [J], 赵宝川;脱红芳;彭彦辉;耿晓峰3.松果菊苷对四氯化碳诱导大鼠急性肾损伤的保护作用及机制研究 [J], 姜瑞凤; 衣少娜; 王媛媛; 葛俊4.松果菊苷对严重烧伤大鼠急性肾损伤的保护作用及其机制 [J], 李露;刘晓茜;王清艳;魏茹5.基于STAT3信号通路探讨艾司洛尔对脓毒症大鼠急性肝损伤的保护作用 [J], 张欣桐;蒲晨;杜转环;李盼;刘景卓;甄玲玲;马莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
松果菊苷治疗作用研究进展松果菊苷为极具潜力的中药成分，具有抗氧化、抗炎、神经保护、改善学习记忆、抗肿瘤、肝脏保护等诸多药理作用，因此可用于多个系统疾病的治疗，对其进行药效机制的进一步探究和开发具有重要意义。
本文参阅近年来的相关文献对松果菊苷的治疗作用进行综述，旨在为本药物的深入研究提供参考。
[Abstract]Echinacoside is a potent medicinal component with pharmacological effects of antioxidant，anti-inflammatory，neuroprotective，improving learning and memory，anti-tumor，liver protection and so on.Therefore，it can be used for the treatment of multiple diseases.The further exploration and development of the mechanism is of great significance.Referred to relevant literatures in recent years on echinacoside，this paper reviews its therapeutic effect in order to provide a reference for in-depth research on the herb.[Key words]Echinacoside；Therapeutic effect；Research progress松果菊苷（Echinacoside，ECH）來源于松果菊属植物的根茎，主要提取自肉苁蓉，是一种苯乙醇苷类化合物。
中医认为，肉苁蓉具有极高的药用价值，具有补肾阳、益精血、润肠通便等功效[1]。
强的松增强 HBV 感染小鼠体内病毒复制表达于毅;刘凤君;石瑶;陆明娇;魏小丽【摘要】Objective:To detect the effect of glucorticoid on HBV replication of mice in vivo.Methods:HBV replication com-petent plasmid pAAV/HBV1 .2 was transferred into male C57L /6 mice by hydrodynamics-based in vivo transfection.24 h after transfec-tion,the mice were matched by body weight,age and serum level of Hepatitis B e antigen (HBeAg)and were divided into experiment group and control group,and then treated orally with prednisone or normal saline at interval of twenty four hours for 3 and 10 days.Four to six hours after the last administration,the mice were killed.HBV-DNA replication intermediates in liver were analyzed by Southern Blot Hybridization.The serum HBsAg and HBeAg were detected by chemiluminescent detection system.Results:HBV-DNA replication intermediates were detected in the livers of mice after treating orally with prednisone or normal saline for 3 days,the level of HBV-DNA replication intermediates of the experimental group was 0.127 times higher than that of the control group.However,after treatment for 10 days,compared with the control group of mice,the level of HBV-DNA replication intermediates of the experimental mice increased greatly.Quantitative analysis showed that prednisone enhanced the level of HBV-DNA replication intermediates appropriately 1 .534 fold.Three days after the above treatment,the serum HBsAg of the control mice and the experimental mice were 1 618.28 μg /μL and 1 666.23 μg /μL on average respectively,which showed nosignificant difference.Similarly,there was no significant difference in the se-rum HBeAg,which showed as follows:14.68 μg /μL,14.95 μg /μL on average respectively.In contrast,10 days after the same treat-ment,the serum HBsAg of the control and the experimental of mice were on average 8 059.40 μg /μL,1 1 885.87 μg /μL,respectively, and the serum HBeAg were 183.15 μg /μL,286.14 μg /μL,respectively.Both of the level of serum HBsAg and HbeAg from experi-mental mice were higher than that of control animals.Conclusion:The replication and expression of hepatitis B virus in the HBV infec-tion mice could be increased by prednisone orally and the increasing effect of prednisone on HBV is time-dependant,which provides fur-ther research about HBV reactivation caused by prednisone and other immunosuppressive drugs,and reminds clinicians,especially non-infected professional doctors to pay full attention to HBV reactivation when glucocorticoid is used in patients with HBV infection.%目的：检测糖皮质激素对 HBV 感染小鼠体内 HBV 复制的作用。
摘 要目 的：以天然中草药肉苁蓉（Cistanche Herba ）中主要成分之一的松果菊苷（Echinacoside，ECH）作为实验材料，通过体外作用于肾癌细胞（renal carcinoma cell, RCC），观察松果菊苷对肾癌细胞形态的作用，并进一步分析该药物对肾癌786-O细胞增殖，凋亡以及细胞活力和迁移能力的作用，从细胞水平阐述松果菊苷抗肾癌的作用；同时研究松果菊苷对肾癌786-O细胞内Caspase级联通路和抗凋亡蛋白BCl-2的影响，探讨其影响肾癌786-O细胞的作用靶点，从分子水平阐明松果菊苷对肾癌786-O作用的分子机制，探讨松果菊苷在细胞和分子水平上抑制肾癌细胞的功能及其作用机制，为肾癌的新药开发提供基础数据。
方 法：分别以含松果菊苷浓度为0，1.25，2.5，5，10，20，40 μmol/L体外培养肾癌786-O细胞24 h，用MTT法检测肾癌786-O细胞的增殖情况，同时测量松果菊苷对肾癌786-O细胞的半数抑制率（IC50），并在靠近该数值的基础上选取实验组松果菊苷的浓度继续以下实验。
不同浓度的松果菊苷（0，1，2，3，4，5，6 μmol/L）作用于肾癌786-O细胞24 h和36 h后，MTT法检测不同受试药物浓度对肾癌786-O细胞的影响；使用Transwell体外迁移实验，来检测在松果菊苷（0，1，2，3，4，5，6 μmol/L）作用于肾癌786-O细胞24 h后，对肾癌786-O细胞迁移能力的影响；进一步通过RT-PCR实验检测松果菊苷对肾癌786-O细胞内BCl-2、Caspase-3和Bax mRNA的相对表达量；Western blot实验检测不同受试药物浓度对肾癌786-O细胞内抑制凋亡效应蛋白BCl-2和凋亡效应蛋白Caspase-3表达的影响。
结 果：（1）不同浓度松果菊苷对肾癌786-O细胞的增殖抑制率随着药物浓度的升高逐渐升高，且通过实验数据测得松果菊苷对肾癌786-O细胞的半抑制浓度IC50为5.443 μmol/L；（2）显微镜下进行观察不同浓度的松果菊苷处理肾癌786-O细胞的形态，发现与未进行药物处理的肾癌786-O细胞相比，药物处理组的细胞形态发生变化，生长状态变差，且细胞数目明显减少；（3）药物处理组可降低肾癌786-O细胞的生存率，极显著促进肾癌786-O细胞的凋亡（P<0.01），药物处理组对肾癌786-O细胞进行诱导24 h和36 h后，细胞的增殖率随着药物浓度的升高而呈现下降趋势，有明显的抑制作用（P<0.01），可引起细胞凋亡，与对照组相比，药物处理组细胞增殖率呈现出药物浓度依赖性的特点；药物处理组作用肾癌786-O细胞24 h后，与对照组相比，肾癌786-O细胞的迁移能力有明显下降的趋势（P<0.01）；（4）根据RT-PCR所得出的数据显I示，与对照组相比较，不同浓度的药物处理组可显著促进细胞内凋亡切割蛋白Caspase-3、凋亡蛋白Bax的mRNA表达水平（P<0.05），明显抑制抗凋亡蛋白BCl-2的mRNA表达水平（P<0.05）；（5）通过Western Blot实验分析，与对照组比较，不同浓度的松果菊苷处理组中细胞内BCl-2蛋白的表达含量显著下调，但细胞内Caspase-3蛋白的表达含量具有明显的上调趋势，并且呈现药物浓度依赖关系，表明松果菊苷通过激活Caspase-3和BCl-2引起了肾癌786-O细胞程序性死亡。
松果菊苷通过调节Nrf2表达减轻H2O2致心肌细胞损伤的实验研究杨芳;吴泽幼;包思;梁敬【期刊名称】《中国中医急症》【年(卷),期】2017(026)012【摘要】目的观察松果菊苷(ECH)对过氧化氢(H2O2)所致心肌细胞H9c2损伤的保护作用并探讨其机制.方法体外培养H9c2细胞系,采用MTT法检测H2O2对细胞存活率的影响,筛选最适作用浓度.将细胞分为5组,空白对照组、H2O2模型组(300μmol/L)、松果菊苷低剂量组(5 mg/L)、中剂量组(10 mg/L)、高剂量组(20 mg/L).采用流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位(MMP);采用试剂盒检测培养基心肌激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)释放量;采用蛋白免疫印记(WB)检测细胞质、细胞核中Nrf2蛋白表达水平.采用Nrf2抑制剂鸦胆苦醇预处理心肌细胞,检测细胞凋亡率和线粒体膜电位.结果 H2O2最适作用浓度为300μmol/L.与空白对照组相比,H2O2模型组心肌细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),MMP 显著降低(P＜0.05);与H2O2模型组比较,松果菊苷处理组心肌细胞凋亡率明显下降(P＜0.05),MMP显著升高(P＜0.05).与空白对照组相比,H2O2模型组CK、LDH 和MDA释放率明显升高(P＜ 0.05);松果菊苷处理后CK、LDH和MDA释放率显著降低(P＜0.05).与空白对照组相比,H2O2模型组Nrf2蛋白核转移水平增加(P＜0.05),与H2O2模型组比较,松果菊苷处理组Nrf2蛋白核转移水平进一步显著增加(P＜0.05).与松果菊苷处理组比较,鸦胆苦醇处理组心肌细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),MMP显著降低(P＜0.05).结论松果菊苷可以减轻H2O2对心肌细胞造成的损伤,推测其机制是通过促进Nrf2蛋白核移位激活Nrf2通路实现的.【总页数】5页(P2078-2082)【作者】杨芳;吴泽幼;包思;梁敬【作者单位】南方医科大学南方医院,广东广州510515;南方医科大学南方医院,广东广州510515;南方医科大学南方医院,广东广州510515;南方医科大学南方医院,广东广州510515【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.下调miR-153-3p可促进Nrf2表达从而减轻H2O2诱导的H9C2细胞损伤 [J], 黄兆琦;许卫;黄炯华;卢雄2.姜黄素对H2O2致H9c2心肌细胞损伤的抗凋亡作用及对NF-κB信号通路的调节作用研究 [J], 顾长海;李忠;陈冬玲3.Nrf2/HO-1、cAMP/PKA在TGR5减轻高糖、高脂诱导H9C2心肌细胞损伤中的作用机制 [J], 李熠;冯健4.虎杖苷通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻大鼠急性心肌梗死后心肌细胞损伤[J], 雷斌;唐玲;张亮;赵航天;朱晓丽;李家燕5.姜黄素通过抑制NF-κB信号通路减轻高糖致H9C2心肌细胞损伤的实验研究[J], 夏娟;张书春;代紫阳;王亚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
松果菊苷对人肝癌细胞HepG2生长和缝隙连接细胞通讯的影响杨晓寰【期刊名称】《河北中医》【年(卷),期】2017(039)004【摘要】目的观察松果菊苷(ECH)对人肝癌细胞HepG2生长和缝隙连接细胞通讯(GJIC)的影响.方法 Alamar Blue法绘制HepG2细胞生长曲线,并检测ECH的细胞毒作用;划痕标记染料示踪技术(SL/DT)法观察空白对照组、API阳性对照组、AGA阴性对照组和ECH组对GJIC的影响;异硫氰酸荧光素(FITC)间接免疫荧光法观察ECH对缝隙连接蛋白Cx43表达的影响.结果 HepG2细胞在20 000个/mL的细胞密度Alamar Blue还原率与时间有线性关系.ECH(5、10、20、40和80μM)处理HepG2细胞24 h,细胞存活率分别为(92.69±3.35)%、(88.33±2.12)%、(80.97±2.50)%、(76.95±1.40)%和(69.09±1.11)%(P<0.01).抑制率最高(80 μM浓度下)为30.91%.IC50为467.8 μM(368.3 μg/mL).SL/DT显示阳性对照芹黄素和ECH处理24 h后,荧光染料在划痕外4列细胞出现了明显荧光(++++),说明细胞出现染料传输的现象.间接免疫荧光法对Cx43表达进行计分,空白对照组细胞得分为(1.40±0.55)分,ECH组得分为(1.60±0.55)分.结果表明ECH组的Cx43表达增强不明显.结论 ECH对HepG2细胞有细胞毒作用,同时可增强GJIC功能,但Cx43表达不明显,为ECH抗肿瘤机制提供依据.【总页数】6页(P579-584)【作者】杨晓寰【作者单位】汕头大学医学院第一附属医院中医科,广东汕头 515041【正文语种】中文【中图分类】R-332;R282.710.5;R735.7;R329.25【相关文献】1.姜黄素诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡及对细胞生长周期的影响 [J], 唐永驰;吴志国;胡国煌2.吴茱萸碱对大鼠肝癌细胞缝隙连接细胞通讯功能及连接蛋白表达的影响 [J], 刘向国;方正清;刘自兵;吕磊;周导3.三七总皂甙对人肝癌细胞缝隙连接细胞间通讯的调节机制 [J], 李学东;尚西亮;刘锡文;黄长文;傅华群4.过氧化物酶1对人肝癌细胞HepG2细胞皮下移植瘤生长的影响 [J], 涂青松;何剪太5.漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2增殖、生长周期和细胞凋亡的影响 [J], 李蓉;黎小兵;蔡康荣;黄培春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
松果菊苷治疗作用研究进展
陈乃洁
【期刊名称】《中国当代医药》
【年(卷),期】2017(024)017
【摘要】松果菊苷为极具潜力的中药成分,具有抗氧化、抗炎、神经保护、改善学习记忆、抗肿瘤、肝脏保护等诸多药理作用,因此可用于多个系统疾病的治疗,对其进行药效机制的进一步探究和开发具有重要意义.本文参阅近年来的相关文献对松果菊苷的治疗作用进行综述,旨在为本药物的深入研究提供参考.
【总页数】3页(P17-19)
【作者】陈乃洁
【作者单位】福建中医药大学中西医结合学院,福建福州350122
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71
【相关文献】
1.松果菊苷药理作用研究进展 [J], 李洋;洪莉;刘成;汤剑明
2.浓缩生长因子应用于再生性牙髓治疗作用的研究进展 [J], 黄贲亨;黄彬
3.松果菊苷药动/药效研究进展与思考 [J], 戴亮;郝海平;汪玉馨;王广基
4.干细胞与白癜风发生发展的关系及其对白癜风治疗作用的研究进展 [J], 谭紫凝;甄昱;李珊山
5.中药对胃肠动力紊乱治疗作用的研究进展 [J], 宫彩霞;马骋;张华丹;杨云梅;张勤
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松果菊苷对衰老小鼠免疫功能和线粒体DNA相对含量的影响李媛;宋媛媛;张洪泉【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2010(26)6【摘要】目的观察肉苁蓉提取物松果菊苷(ECH)对实验性小鼠免疫功能和肝细胞线粒体DNA相对含量的影响.方法小鼠皮下注射10% D-半乳糖10 ml·kg-1,每天1次,连续8 wk,建立亚急性衰老模型.阳性组和松果菊苷各组同时灌胃给于维生素E 40 mg·kg-1和ECH 20、40、60 mg·kg-1,每天1次.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中IL-2、IL-6含量;中性红实验测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能;MTT法检测ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化;SDS碱变性法测定肝细胞线粒体DNA相对含量.结果与正常组比较,模型组小鼠血清IL-2含量,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞增殖反应均下降,IL-6和肝脏线粒体DNA相对含量升高.ECH各剂量组和维生素E阴性对照组均能提高衰老小鼠血清IL-2含量、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞增殖反应,降低IL-6和肝细胞线粒体DNA相对含量.结论松果菊苷能够提高机体的免疫功能,降低衰老小鼠肝细胞线粒体DNA相对含量,可能是其延缓衰老的作用机制之一.【总页数】4页(P810-813)【作者】李媛;宋媛媛;张洪泉【作者单位】扬州大学医药研究所,江苏,扬州,225001;扬州大学医药研究所,江苏,扬州,225001;扬州大学医药研究所,江苏,扬州,225001【正文语种】中文【中图分类】R-332;R284.1;R339.38;R342.3;R392.12;R977.9【相关文献】1.Wistar大鼠不同组织线粒体DNA相对含量的测定 [J], 李晓东;高枫;陈清棠2.维生素E对D-半乳糖诱致衰老小鼠脑抗氧化能力、钙稳态和线粒体DNA(mtDNA)损伤的影响 [J], 曲娴;方文娟;李冰;郑浩;吕俊华3.不同游泳形式运动对衰老小鼠模型骨骼肌线粒体DNA缺失的影响 [J], 熊晓玲;孟思进4.益寿丸对衰老小鼠脑线粒体DNA缺失突变的影响 [J], 吴立蓉;黄张杰;黄兆胜5.四君子汤对D-半乳糖诱致衰老小鼠脑抗氧化能力和线粒体DNA(mtDNA)损伤的影响 [J], 李冰;方文娟;孟辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
松果菊苷对db／db小鼠肝脏脂质代谢的影响目的探討松果菊苷（ECH）對db/db小鼠肝脏脂质代谢的影响及其作用机制。
方法采用随机数字表法将21只8周龄体重40～48 g的健康雄性db/db小鼠分为db/db+ECH组[n = 11，ECH灌胃300 mg/（kg·d）]和db/db组（n = 10，给予相应体积的生理盐水灌胃）。
以同窝出生的db/m小鼠为正常对照组，即db/m 组（n = 9，给予相应体积的生理盐水灌胃）。
每周检测小鼠的体重。
连续干预10周后处死小鼠，留取肝脏组织标本，检测小鼠肝湿重、睾丸周围脂肪重量，提取肝脏总RNA用实时定量PCR检测三组小鼠肝脏中过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPAR-α）和脂肪酸氧化的限速酶肉毒碱棕榈酰转移酶-1（CPT-1）的mRNA 表达水平，肝组织苏木精-伊红（HE）、油红O染色评价病理学变化。
处死三组小鼠前1 d禁食12 h后经眼眶后取血，利用全自动生化检测仪检测谷丙转氨酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的水平。
结果与db/m组比较，db/db组小鼠体重、肝湿重、睾丸周围脂肪重量增加，血清中ALT、AST、TG、TC、LDL-C升高，HDL-C降低（P < 0.05或P < 0.01），肝脏组织中肝细胞肿胀，空泡变性，大量的脂质沉积；ECH干预后可降低db/db小鼠体重，肝湿重及睾丸周围脂肪重量，也可以降低db/db小鼠血清中ALT、AST、TG、TC、LDL-C水平，升高HDL-C水平（P < 0.05或P < 0.01），改善肝组织病理改变和脂质沉积情况，上调肝脏组织PPAR-α和CPT-1表达（P < 0.05）。
结论ECH对db/db小鼠肝脏具有保护作用，其机制可能与上调肝脏组织中PPAR-α和CPT-1表达从而改善脂质代谢有关。
松果菊苷通过上调miR-34a减轻心肌细胞缺血再灌注损伤蔡华;张领;李满生;李新峰【期刊名称】《中国循证心血管医学杂志》【年(卷),期】2018(010)006【摘要】目的探究松果菊苷对心肌细胞缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及microRNA-34a(miR-34a)表达的影响.方法培养鼠胚胎H9c2心肌细胞,建立IRI 模型,并随机分为对照组、模型组、阳性药物(盐酸地尔硫卓)组及松果菊苷低、中、高剂量组.阳性药物组造模时用含10％盐酸地尔硫卓血清处理;松果菊苷(ECH)各处理组造模时用含10％对应浓度的ECH血清处理.MTT法检测各组细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;试剂盒检测细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;qRT-PCR检测细胞miRNA-34a水平.结果①心肌细胞IRI后细胞存活率较对照组显著降低(P<0.05);阳性药物组和ECH中、高剂量组心肌细胞存活率较模型组显著升高(P<0.05);ECH中、高剂量组心肌细胞存活率与阳性药物组间的差异无统计学意义(P>0.05).②流式细胞仪结果显示,心肌细胞IRI后细胞凋亡率较对照组显著升高(P<0.05);阳性药物组和ECH中、高剂量组心肌细胞凋亡率较模型组显著降低(P<0.05);ECH高剂量组心肌细胞凋亡率较阳性药物组显著降低(P<0.05).③心肌细胞IRI后生成LDH、CK、MDA量较对照组显著升高(P<0.05),SOD活力较对照组显著降低(P<0.05);阳性药物组和ECH中、高剂量组心肌细胞生成LDH、CK、MDA量较模型组显著降低(P<0.05),SOD活力较对照组显著升高(P<0.05).④qRT-PCR结果显示,心肌细胞IRI后细胞miRNA-34a水平较对照组显著升高(P<0.05);阳性药物组和ECH各剂量组心肌细胞miRNA-34a水平较模型组显著升高(P<0.05).结论松果菊苷对心肌细胞IRI后具有显著保护作用,其机制可能与miR-34a表达上调有关.【总页数】5页(P739-742,745)【作者】蔡华;张领;李满生;李新峰【作者单位】467000 平顶山,河南省平顶山市第二人民医院心内三科;467000 平顶山,河南省平顶山市第二人民医院心内三科;467000 平顶山,河南省平顶山市第二人民医院心内三科;467000 平顶山,河南省平顶山市第二人民医院心内三科【正文语种】中文【中图分类】R542.2【相关文献】1.松果菊苷通过调节Nrf2表达减轻H2O2致心肌细胞损伤的实验研究 [J], 杨芳;吴泽幼;包思;梁敬2.内洋地黄素拮抗剂上调缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞膜钠泵亚基的表达 [J], 柯永胜;储岳峰;杨浩;俞国华3.右美托咪定通过上调miR-579-3p减轻心肌细胞缺氧复氧后的凋亡 [J], 姜玉玉;尹天玥;李小雨;于汝;程向阳4.依托咪酯上调miR-290-5p减轻LPS诱导的大鼠心肌细胞系H9C2损伤 [J], 雷家秀;朱雅萍;张雨5.氯吡格雷上调长链非编码RNA-4231减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤 [J], 刘婷婷;宋巧凤;王希柱;闫玉敏;刘小雪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
