HPLC法测定银翘解毒颗粒中绿原酸的含量

高效液相色谱／质谱联用法测定银黄颗粒中绿原酸含量

摘 要：目的：建立高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC/ESI/MS)联用测定银黄颗粒中绿原酸含量。方法：以质谱定性，高效液相色谱定量进行检测，检测波长327nm。所用的色谱柱为Spherigel C18色谱柱(200 × 4.6 mm，5m)流动相为乙腈-0.4%磷酸水。结果：在该色谱条件下，绿原酸的含量在1.56g/mL~25g/mL范围内线性关系良好，相关系数为：r=0.9992，加样回收率为99.7%，RSD为2.63%(n=5)，最低检出限为0.05g/mL。结论：该方法操作简单，分离度好，适用于银黄颗粒及其提取物中绿原酸含量的测定。

关键词：高效液相色谱/质谱法(HPLC/MS)；绿原酸；银黄颗粒

银黄颗粒是由金银花、黄芩两味药材加工制成的复方制剂，具有清热、解毒、消炎的功效[1]，主要用于急慢性扁桃体炎、急慢性咽喉炎、上呼吸道感染等症。金银花(Flos lonicerae)为忍冬科(Caprifoaceae)忍冬属(Lonicera)植物，是本方的主药之一[2]。金银花的活性成分之一为绿原酸(结构式如图1)。绿原酸为咖啡酰奎尼酸衍生物，由奎尼酸和咖啡酸缩合而成，易溶于甲醇、乙醇、丙酮等极性溶剂，微溶于乙酸乙酯，难溶于三氯甲烷、乙醚、苯等亲脂性溶剂，是一种重要的生理活性物质。绿原酸为抗菌消炎的主要成分，对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾球菌、伤寒杆菌、肺炎球菌有显著的抑制作用；有抗病毒、升高白细胞、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基等作用；与人体血小板凝集和凝血因子的生成有关，还具有抗生育作用及对免疫系统的调节作用[3，4]。

银黄颗粒中主药金银花的有效成分绿原酸的含量测定主要采用高效液相色谱法[5，6]，本文采用高效液相色谱/质谱联用法，对银黄颗粒中绿原酸的含量进行测定。以期提高银黄颗粒质量标准可控性，为进一步完善该制剂的质量标准提供实验依据。

RP—HPLC法测定复方金银花颗粒中绿原酸的含量

目的：建立高效液相色谱法测定复方金银花颗粒中绿原酸含量的方法。方法：采用Agilent C18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱，甲醇-水-冰醋酸（20：80：1）为流动相，流速为1.0mL/min，检测波长为324nm。结果：绿原酸在77.28μg～772.8μg的范围内呈良好的相关性，相关系数为0.9998，平均回收率分别为99.10%，RSD为0.39%。结论： 本方法操作准确、简便、快速，可有效用于复方金银花颗粒的质量控制。

标签： RP-HPLC法 复方金银花颗粒 绿原酸 含量测定

复方金银花颗粒是由金银花、连翘和黄芩3味中药制成的复方制剂，具有清热解毒、凉血消肿之功效，主要用于风热感冒、喉痹、乳蛾、目痛、牙痛及痈肿疮疖等症的治疗[1]。本品已收载于5卫生部药品标准6中药成方制剂第十册，其质量标准只有性状、鉴别、常规检查及含量测定，含量测定项分别对黄芩苷和连翘苷进行考察并将其作为评价指标，通过大量文献及相关资料表明金银花中的绿原酸也是有效成分之一，具有广泛的抗菌作用[2-3]。所以本研究将对复方金银花中绿原酸的含量进行测定，以确保本品的内在质量[4]。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 仪器和设备

高效液相色谱仪：美国安捷伦（1）1200紫外检测器；美国安捷伦（2）1200紫外检测器；Meltter AE240双量程电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司），AB204-E电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）；紫外分光光度计UV-2401（日本岛津）。

1.1.2 试剂与试药

绿原酸对照品（批号：110753-200413 规格：约20mg，供含量测定用），购自中国食品药品检定研究院；甲醇为色谱纯，乙酸为分析纯，水为重蒸水。

（）

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1.2 实验方法

1.2.1 系统适用性试验及色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（20：80：1）為流动相；检测波长为324nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于6000。

HPLC法测定清热解毒片中绿原酸的含量

【摘要】目的：建立高效液相色谱法测定清热解毒片中绿原酸的含量方法。方法 实验条件为色谱柱：KromasilC18【Abstract】ObjectiveTo establish high

performance liquid chromatography to detect the contents of qingrejiedu films

chlorogenic acid .Methods:the experimental conditions for chromatographic column

KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）,mobile phase:

acetonitrile-0.4%phosphate(20:80),Detected wavelength: 324nm,tending now velocity

of 1.0ml﹒min-1. Results: the average recovery for pingyi 98.89% ,RSD 0.68%

(n=6)。ConclusionThe method is simple,accurate and strong specificity,reproducible

and can be as qingrejiedu films slice quality indexes.

【Key words】HPLC； qingrejiedu films； chlorogenic acid

清热解毒片是由生石膏、金银花、栀子、连翘、黄芩等十二味中药组成，具有清热解毒的功效，临床主要用于热毒壅盛所致发热面赤、烦燥口渴、咽喉肿痛；流感、上呼吸道感染见上述症候者。为临床常用药。其质量标准収载于《卫生部药品标准》[1]，现行质量标准只对绿原酸和栀子苷进行了薄层鉴别，无含量测定的方法。而方中金银花的用量和功用占主导地位。本文参照《中国药典》双黄连口服液[2]和药材金银花[3]的含量测定方法，采用HPLC法以绿原酸为质控指标对清热解毒片中的金银花进行含量测定。实验结果表明，本文所建立的方法，具有良好的专属性、准确度和重现性，并且操作方法简单，所用的色谱系统也很普遍。故将其作为含量测定质控指标之一。

HPLC法测定银翘解毒颗粒中连翘苷和牛蒡子苷的含量

宋伟峰;李瑞明

【期刊名称】《中国医药导报》

【年(卷),期】2011(8)1

【摘 要】目的:建立以RP-HPLC法测定银翘解毒颗粒中连翘苷和牛蒡子苷含量的方法.方法:采用Agilent C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(27∶73),检测波长:280 nm,柱温:30℃,流速:1.0 ml/min.结果:连翘苷在0.021

42～0.107 μg范围内进样量与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为99.93%,RSD为0.71%;牛蒡子苷在0.836 8～6.694 μg范围内进样量与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为99.75%,RSD为0.44%.3批样品中连翘苷和牛蒡子苷的含量分别为0.043 18、1.073 00 mg/g;0.043 06、1.070 00 mg/g;0.043

10、1.071 00 mg/g.结论:本法灵敏、准确,专属性强,重现性好,可作为银翘解毒颗粒中连翘苷和牛蒡子苷的含量测定方法.%Objective: To establish a method for

determination of arctiin and forsythin in Yingqiao Jiedu Granules by HPLC.

Methods: The analytical column C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm) was used.

The mobile phase was composed of acetonitrile and water (27:73) at a

flow rate of 1.0 ml/min. The wavelength of UV detector was 280 nm and

column temperature was 30℃. Results: The linear ranges of arctiin was