2019_2020学年高二人教版生物选修一课件：2.1 微生物的实验室培养(一)

专题2 微生物的培养与应用

课题1 微生物的实验室培养

理一理

判一判

1.所有的培养基中都要加入琼脂。(×)

2．微生物在液体培养基表面生长可形成菌落。(×)

3．培养不同微生物的培养基成分完全一样。(×)

4．培养纯净培养物的关键是防止杂菌污染。(√) 5．相对于消毒，灭菌对微生物的杀灭更彻底。(√)

6．无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(×)

7．培养基最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。(√)

8．倒平板后，待平板冷凝之后需将其倒置。(√)

9．若皿盖和皿底之间溅上培养基，这个培养基不可再用。(√)

10．采取平板划线接种法时，每一次划线前都要挑取菌种。(×)

11．对微生物进行计数时最好采用稀释涂布平板法。(√)

12．需要一个不接种的培养基放在相同条件下培养以检验培养基的灭菌是否合格。(√)

悟一悟

1.牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和维生素，蛋白胨提供的主要营养是碳源、氮源和维生素。

2．溶化后如需调整pH，应先调节pH，再灭菌。

3．培养基灭菌后要冷却到50 ℃左右时开始倒平板，其原因是琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃会烫手，低于50 ℃时，若不及时操作，琼脂会凝固。

4．倒平板时，要使锥形瓶的瓶口通过火焰。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

5．平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可避免培养基中的水分过快地蒸发。

6．在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平板不能用来培养微生物，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。

感悟体会：

练一练

1.[2019·江苏高考题]下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是( ) A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌

第一章 无菌操作技术实践 1。1 微生物的实验室培养二

教学目标：

1、知识与技能： 研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定，常用的分离、培养微生物的固体培养基

2、过程与方法： 通过分离、培养微生物，掌握分离技术

3、情感态度价值观： 培养学生探究生物的热情。

教学重点: 对土样的选取和选择培养基的配制.

教学难点： 对分解尿素的细菌的计数

教学方法： 实验、合作、探究

教具使用： 菌种,实验仪器

共案部分 个案部分

教学过程 教师主导活动 学生主体活动

课前：

安排学生预习:

预习提纲（见导学案）

课前检查预习情况。 学生根据预习提纲进行自学。

课中：

活动一:对上节课内容进行回顾，作业中存在的问题进行探讨.

活动二：阅读教材，归纳总结微生物的分离与纯化：

（1)实验原理：

（2）材料用具：

(3)方法步骤：

①稀释：②划线或涂布：

【问题讨论】

学生活动一：上节存在问题总结。

学生活动二：阅读教材15-20页

归纳总结微生物的分离与纯化：

（1）实验原理：

（2)材料用具：

（3)方法步骤：

①稀释：②划线或涂布：

并动手实验。

问题1：如何判断选择培养基是否起到了选择作用?

提示：制备牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，将稀释相同倍数菌液分别涂布在牛肉膏蛋白胨和选择培养基上，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长菌落数目明显多于选择培养基上的数目，用来判断选择培养基起到了选择作用.

问题2：以尿素作为惟一氮源培养基，是否意味在这个选择培养基上生长都是分解尿素微生物？如何进行验证？

活动三：

1．什么叫菌落？什么是菌苔？各种微生物形成的菌落表观特征有哪些？

问题讨论：1.2

分小组讨论问题。1—4

课堂检测:独立完成。

2．最常用的分离、培养微生物的固体培养基是什么？

3．常用的平板分离法有哪几种?采用各种平板分离法的目的是什么?

课题1　微生物的实验室培养

学习目标：1.知道培养基的种类、营养要素及配制原则。(重点)　2.掌握消毒、

灭菌的原理和方法。(重点)　3.学会配制培养基和纯化大肠杆菌的方法。(重、难点)

1．培养基

(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营

养基质。(2)种类：

按物理性质分{液体培养基：配制成的液体状态的基质（加入凝固剂，如琼脂）固体培养基：配制成的固体状态的基质)

(3)营养组成：各种培养基一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提

供氮元素的物质)和无机盐，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质(如

维生素、氨基酸和碱基等)以及氧气的要求。2．无菌技术(1)无菌技术的目的是防止外来杂菌的入侵。主要内容包括：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。(2)消毒和灭菌：消毒灭菌

概念使用较为温和的物理或化学方法杀

死物体表面或内部的部分微生物(不使用强烈的理化因素杀死物体

内外所有的微生物(包括芽孢和包括芽孢和孢子)孢子)

常用

方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药

剂消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽

灭菌

适用对象操作空间、操作者双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

3.大肠杆菌的纯化培养

(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

①{最常用的细菌培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基配制步骤：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板)

②培养基应采用高压蒸汽灭菌；倒平板时要待培养基冷却至50 ℃左右时，在

酒精灯火焰附近进行，等平板冷凝后将平板倒置。(2)纯化大肠杆菌

①纯化培养的原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可

见的菌落，即获得较纯的菌种。

②纯化培养方法：在牛肉膏蛋白胨培养基上纯化大肠杆菌，最常用的方法有

1 课题1 微生物的实验室培养

1.在微生物培养过程中,需要对培养基等进行灭菌,其标准是( )

A.杀死所有的病原微生物

B.杀死所有的微生物的细胞

C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子

D.使病原菌不生长

解析:灭菌是指利用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。

答案:C

2.下列有关倒平板的叙述,错误的是( )

A.在酒精灯的火焰旁进行操作

B.将打开的锥形瓶瓶口迅速通过酒精灯的火焰

C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌面上

D.待平板冷却凝固后需要倒过来放置

解析:整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵,因此,应在酒精灯的火焰旁进行操作,打开的锥形瓶瓶口应迅速通过酒精灯的火焰。培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙进行操作,不能将培养皿盖完全打开。平板冷却凝固后需要倒过来放置。

答案:C

3.下列有关微生物培养的叙述,正确的是( )

A.培养基一般都含水、碳源、氮源和无机盐

B.涂布接种时,涂布器应在干热灭菌箱中灭菌冷却后再使用

C.纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养

D.观察菌落时,应将培养皿盖拿掉后在显微镜下进行观察计数 2 解析:涂布接种时,涂布器应在酒精灯火焰引燃灭菌,冷却后再使用;用液体培养基培养微生物时,应放在摇床上,培养皿中的是固体培养基,应倒置放在恒温培养箱内培养;菌落肉眼可见,不需要借助于显微镜。

答案:A

4.下列操作与消毒或灭菌无关的是( )

A.接种前用酒精灯的火焰灼烧接种环

B.接种前用酒精擦拭双手

C.将平板倒置,放入培养箱中培养

D.接种在酒精灯的火焰旁完成

解析:接种用具、器皿上以及空气中都有微生物,都有导致污染的可能,必须严格消毒、灭菌。A、B、D三项都属于实验操作过程中的消毒或灭菌。将平板倒置,放入培养箱中培养是为了防止杂菌污染,不属于消毒或灭菌。

答案:C

5.微生物培养是微生物工程中的基础技术。下列相关叙述正确的是( )