一、选用和设计培养基的原则和方法
（一）配制培养基的4个原则
1.目的明确
培养不同的微生物必须采用不同的培养条件；培养目的不同，原料的选择和配比不同；
例如枯草芽孢杆菌：
一般培养：肉汤培养基或LB培养基；
自然转化：基础培养基；
观察芽孢：生孢子培养基；
产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；
根据不同的工作目的，微生物不同的营养需要，运用自己丰富的生物化学和微生物学知识来配制最佳的培养基。
2.营养协调
微生物细胞组成元素的调查或分析，是设计培养基时的重要参考依据。
微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。
在大多数化能异养菌的培养基中，各营养要素间在量上的比例大体符合以下十倍序列的递减规律：
要素：H2O＞C源+能源 ＞N 源 ＞P、S＞K、Mg＞生长因子
含量：(～10-1) (～10-2) (～10-3) (～10-4) (～10-5) (～10-6)
A.选择适宜的营养物质,实验室的常用培养基：
细菌：牛肉膏蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养基）；
放线菌：高氏1号合成培养基培养；
酵母菌：麦芽汁培养基；
霉菌：查氏合成培养基；
实验室一般培养：普通常用培养基；
遗传研究：成分清楚的合成培养基；
生理、代谢研究：选用相应的培养基配方；
B.营养物质浓度及配比合适
营养物质的浓度适宜, 营养物质之间的配比适宜；
高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起
到抑制或杀菌作用。
培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和（或）代谢产
物的形成和积累，其中碳氮比（C／N）的影响较大。
真菌需C／N比较高的培养基；（素食）
细菌（动物病原菌）需C／N比较低的培养基；（荤食）
发酵生产谷氨酸时：
碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；
血培养标本采集技术操作流程图及要点说明
操作流程 要点说明
核对：
根据“标本采集原则”进行核对，并贴标签或电子条形码于采集容器上
电子条形码应竖贴在管上，不能遮挡管中的刻度
评估：
1. 患者抗生素使用情况，
2. 患者病情、意识状态、生命体征、正进行的治疗
3. 肢体活动情况和静脉充盈情况
4. 穿刺部位皮肤情况：有无水肿、结节、疤痕、伤口等
5. 患者心理状态、患者沟通、理解及合作能力、患者的需求
告知：
1. 血培养标本采集的目的和配合方法
2. 采血后注意事项
准备：
1. 操作者：洗手、戴口罩
2. 用物：常规消毒物品一套、止血带、血培养基、采血针、手套
3. 患者：舒适平卧或坐位
4. 环境：清洁、采光好 1. 注意保护患者隐私
2. 按检查项目及抗生素使用情况准备相应的血培养基和采血量。
3. 检查培养基灭菌有效期、有无破损、胶塞有无松脱、瓶签模糊，瓶内培养液肉眼观察有无絮状物、变质。
实施：
使用密封瓶培养基采血
1. 将密封血培养瓶口的保护帽剔去，消毒瓶盖，干燥 1min
2. 选择合适的静脉和穿刺点，在穿刺点上方约 6CM 处系止血带，
常规消毒皮肤，嘱患者握拳
3. 戴手套后用采血针头按静脉穿刺法穿刺血管，见回血后用胶布固定针翼，接培养瓶，当针头出血速度变慢（由线状变点滴状）时反折针头，拔出培养瓶
4. 嘱患者松拳，迅速拔出针头，用干棉签按压穿刺点 5 min
5. 再次核对患者身份和采血项目
整理：
1. 协助患者舒适体位
2. 按医疗废物处理条例处置用物，脱手套，洗手
3. 根据“标本采集原则”再查对和标本转送，记录
1. 成人血培养采血 5ml
2. 儿童 2-3ml，婴儿 1-2ml
3. 亚急性细菌性心内膜炎患者为提高细菌培养阳性率，采血量可增至 10-15ml
1. 采集血标本应严格执行无菌操作
2. 严禁在正在输液或输血的肢体或针头、输液或输
液穿刺点上方、皮管内采血标本。应在对侧肢体采
STANDARD OPERATING PROCEDURE PAGE 1/8
血培养标本检测程序
血培养检验的操作规程
目录
1 目的 ...................................................................................................................................................... 2
2 标本类型............................................................................................................................................... 2
3 标本的采集与运送............................................................................................................................... 2
3.1 采集时间： .............................................................................................................................................. 2
3.2 采集部位和采样次数： .......................................................................................................................... 2
血培养操作流程及评分标准
项目 内 容 分值 扣分标准 扣分
目的 按照正确的方法采集血培养，排除污染。 5 -5
用物准备 注射盘、75%酒精棉球（独立包装）、碘酊、2付针筒、采血针、2套培养瓶、手消剂。 5
-1
素质要求 仪表大方，衣帽整洁，修剪指甲，洗手，戴口罩。 5
-1
操
作
步
骤 1、携用物至床边，用2种方法确认患者身份进行核对 5 -5
2、向患者/家属解释血培养的目的 5 -5
3、将病人放置合适体位，充分暴露操作区域（注意保暖及病人隐私权的保护）。 5 -5
4、洗手（用手消剂），消毒肘静脉穿刺部位皮肤及周围，选择静脉和穿刺点，用 75% 乙醇从中心点向外消毒皮肤，再用碘酊按同样的方法消毒，待干后（0.5-lmin ）用乙醇棉球擦去碘迹，再用双针采血系统直接穿刺肘静脉。 5 -5
5、去除培养瓶上的封盖瓶帽，用75%酒精棉球用机械力摩擦消毒培养瓶橡皮盖，待干。 5 -5
6、抽血量 成人：8 一 10ml 血液／成人瓶; 儿童或婴幼儿：1
一 3ml 血液／儿童瓶。 5 -5
7、成人在不同部位采集两套血，每套两瓶（需氧、厌氧各一瓶），至少应采集一套血培养（需氧、厌氧应从不同部位分别采集）；儿童应采集两瓶儿童需氧瓶（从两个部位分别采集）。 10 -5
-5
8、用 75 ％乙醇去除血培养瓶上的血液并进行消毒。 10 -5-5
9、中心静脉留置导管血标本的采集：用 75 ％乙醇消毒导管及其周围皮肤，再用碘酊按同样的方法消毒，待干（0.5﹣lmin ) ，拔去导管盖，消毒针心，先插入无菌注射器抽取至少 0.5﹣1.0ml
血液弃去（以消除干扰因素和导管末端的污染），另取一无菌注射器抽取 0.5﹣1.0ml 血液注入儿童培养瓶内送检，然后在导管内注入肝素或无菌生理盐水。 10 -5
