早熟艾美耳球虫上海株的分离鉴定及生物学特性观察

毒害艾美耳球虫早熟株与亲本株繁殖力的观察李赟;古少鹏;赵剑【摘要】为选育毒害艾美耳球虫(E.necatri)早熟株,了解其繁殖力,为早熟弱毒活苗的研制奠定基础,本试验运用球虫的单卵囊分离技术得到一株E.necatrix(P0),并对其进行了早熟选育,得到了E.necatrix早熟株P8.P0和P8分别以0.05×104、0.1×104、0.5×104和1×104个/只的剂量接种11日龄雏鸡,接种后第7～13天每天检测粪便中的卵囊产量.结果表明,P0与P8均为接种0.5×104个/只的卵囊产量最大;P8的繁殖力是P0的55%;P8的卵囊高峰期较P0有提前趋势.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2010(037)006【总页数】4页(P151-154)【关键词】毒害艾美耳球虫;分离鉴定;早熟选育;繁殖力【作者】李赟;古少鹏;赵剑【作者单位】山西农业大学动物科技学院,太谷030801;山西省太原市家畜防疫检疫站,太原030027;山西农业大学动物科技学院,太谷030801;山西农业大学动物科技学院,太谷030801【正文语种】中文【中图分类】S852.72+3鸡球虫病是造成现代养禽业经济损失最大的寄生虫病。

毒害艾美耳球虫(E.nacatrix)是9种球虫中致病力最强的虫种之一。

全球每年因球虫病造成的损失达80亿美元(A llen等,2002)。

当前,疫苗预防仍是防控球虫病的首选方法,而采用早熟选育法制备的球虫疫苗,因其具有致病力大大下降,免疫原性良好的特性,已被广泛应用于实践。

但同种球虫早熟选育后,其繁殖力与亲本株有何差异及差异大小,直接决定此早熟虫株是否适用于制备疫苗,或疫苗制备过程中虫株所需的数量及接种鸡体的最佳剂量。

因此,对同种球虫早熟株与亲本株的繁殖力进行研究,了解在早熟选育过程中,卵囊繁殖力的变化,对疫苗的制备具有极其重要的意义。

本试验通过观察E.nacatrix山西分离株的亲本株与早熟株繁殖力变化,为选育早熟疫苗所需的虫株及实验室研究E.nacatrix提供了理论依据,也为进一步开展鸡球虫病的损伤机理与免疫机制研究奠定了基础。

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堆形艾美耳球虫早熟株生物学特性及其抑制消减cDNA文库的构建的开题报告该开题报告的主要内容是关于堆形艾美耳球虫早熟株生物学特性及其抑制消减cDNA文库的构建的研究计划。

1. 研究背景及意义堆形艾美耳球虫是一种常见的土壤寄生线虫，常常会引起植物根部的病害。

其寄生生活史具有显著的物种特异性和适应性。

目前，针对线虫的防治方法主要是化学控制和土地轮作等传统方法，但这些方法的应用存在着一系列的限制和不足，例如副作用大、易产生抗药性等等。

因此，寻求新的、高效的线虫防治方法就变得至关重要。

2. 研究目的本研究旨在探究堆形艾美耳球虫早熟株生物学特性，揭示其生命周期、生殖特征等方面的规律，同时以抑制、消减种群为出发点，构建cDNA文库并筛选相关的基因，在基因水平上探讨防治新方法。

3. 研究方法（1）线虫生物学特性的研究：通过定期观察、计数和微环境模拟等方式，探究堆形艾美耳球虫早熟株的生命周期、生殖特性等方面的生物学特性。

（2）构建cDNA文库：使用高通量测序技术构建抑制、消减堆形艾美耳球虫早熟株种群的cDNA文库。

（3）生物信息学分析：对cDNA文库数据进行序列比对、拼接、注释以及基因表达谱分析等方法，筛选与抑制消减相关的差异表达基因并进行注释。

（4）基因功能实验：通过基因克隆、表达、敲除等方法，验证差异表达基因在防治堆形艾美耳球虫中的作用机制。

4. 研究意义及预期结果本研究将揭示堆形艾美耳球虫早熟株的生物学特性和生殖行为，为防治堆形艾美耳球虫提供新的理论基础；同时构建的cDNA文库和基因水平上的研究将有助于发现具有防治作用的新型靶标，为无害、低毒的线虫防治提供新的思路和方法。

预期结果包括：发现新型抑制消减堆形艾美耳球虫的基因、深入探究其功能机制，为农业生产中的线虫防治提供新的思路和技术支持。

7ShiYan YanJiu不同地理株柔嫩艾美耳球虫(E.tenela)杂交虫株(F2)的培育王 晶1，刘向军2，赵 权1*1.吉林农业大学动物科学技术学院，吉林长春 130118；2.吉林市动物疫病预防控制中心，吉林吉林市 132000摘 要：将山东株(S)与吉林株(J)柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊通过单卵囊技术接种雏鸡，收获卵囊后提取基因组DNA，利用RAPD 技术分析DNA，筛选出杂交株(F1)，再用该F1代与黑龙江株(H)柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊单卵囊接种雏鸡，相同方法鉴别筛选，确定了1株为山东株、吉林株和黑龙江株三个地理株的杂交(F2)卵囊。

该结果为深入研究球虫的免疫机制奠定了基拙。

关键词：柔嫩艾美耳球虫；杂交株；RAPD鸡球虫病是由一种或多种球虫引起、对家禽养殖业危害严重的肠道寄生虫病[1]。

全世界每年因球虫病造成的经济损失达6 000万到1.2亿美元[2]，全球每年的预防成本约为24亿美元。

鸡柔嫩艾美耳球虫主要寄生在鸡的盲肠，通过裂殖体在盲肠上皮细胞中大量增殖，破坏肠黏膜，引起肠管发炎、上皮细胞崩解，鸡表现为排血便，影响体重增长，严重时会导致死亡。

不同种株、不同发育阶段的球虫，抗原成份都会有所不同，因此找出各不同虫株的保护性抗原，对免疫机理的研究及球虫疫苗的研制有重要意义。

利用杂交技术，将不同虫株的柔嫩艾美耳球虫孢子囊混合感染雏鸡，球虫配子在鸡体内发生随机交配，获得等量的母型和杂交型合子，杂交株可以得到亲本株的某些遗传性状（如抗原、同工酶、耐药性）[3,4]。

本研究对我国3个不同地理株E.tenela（山东、吉林、黑龙江）进行杂交，利用单卵囊技术、RAPD 技术，分离、培育杂交虫株，从而为球虫疫苗的研制及球虫免疫保护性机制的研究奠定基础。

1 材料与方法1.1 材料与仪器1.1.1 虫株S：山东株E.tenella J：吉林株E.tenella H：黑龙江株E.tenella均为吉林农业大学寄生虫实验室分离鉴定保存，孢子化率在80%以上。

鸡球虫病是由艾美耳属球虫寄生于鸡的肠道上皮细胞而引起的寄生虫病。

临床上以消瘦、贫血、下痢、便血为特征。

该病分布范围广，特别是集约化、封闭的或笼养的大型养鸡场，给养鸡业造成较大的经济损失［1，2］。

1病例情况2022年新疆乌鲁木齐市米东区某散养土鸡场养殖一批20日龄肉用商品鸡1000羽，8月中旬，部分鸡开始发病，羽毛蓬乱，无光泽，精神不振，翅膀下垂，食欲下降，饮欲增加，出现下痢、便血，甚至排出鲜血，病鸡战栗、拥挤成堆。

现场剖解发病或死亡不久的鸡，主要为出血性肠炎，十二指肠上皮细胞遭到破坏，黏膜有明显的出血点，浆膜可见灰白色的小斑点，小肠中段也可见肠壁轻微出血，大部分鸡剖检可见盲肠极度肿大，外观看呈“鲜肠”样或整个呈暗红色。

剖开见肠黏膜增厚出血且有大量的血凝块。

主诉共发病510羽，发病率为51%，死亡160羽，死亡率为16%。

2诊断2.1临床检查病鸡消瘦精神沉郁，拥挤在一起，食欲不振，饮欲增加，嗉囊内充满液体，呆立嗜睡，翅膀下垂，鸡冠苍白，被毛膨乱无光泽。

鸡舍地面（特别是在清晨）可见便血，下痢，排出大量的红色或暗红色带血液的粪便，部分血便还带有白色黏液，有时肛门周围羽毛因排泄物污染而粘连成块，最后两脚无力，瘫倒不起［3］。

2.2实验室检查2.2.1器材与试剂50%甘油水溶液（或普通水），100~200mL 烧杯（或塑料杯），上海XSP-2C 生物显微镜（具备10倍目镜和低倍、高倍物镜及油镜），盖玻片、载玻片、牙签、洗瓶、乳钵，剪刀及手术刀，离心管，饱和食盐水（或硫酸镁，蔗糖），直径0.5~1.0cm 金属圈，金属筛（或纱布），蛋白酶，重铬酸钾等。

2.2.2方法1）直接涂片镜检法。

取少许病鸡粪便于载玻片上；加等量甘油饱和生理盐水（1~2滴）用牙签混匀；加上盖玻片，置于显微镜上观察。

2）饱和盐水漂浮法（即烧杯法）。

取新鲜的鸡粪5~10g ，放入小烧杯内；先加少量的漂浮液饱和食盐水（或硫酸镁，蔗糖）搅拌均匀，再加入约20倍的漂浮液搅拌均匀，用双层纱布过滤于另一个小烧杯中；滤液放置40min 左右，此时球虫卵漂浮至液面上；用直径0.5~1.0cm 的小金属圈接触液面，蘸取一层水膜，抖在载玻片上。

福建早熟柔嫩艾美耳球虫的选育研究
福建早熟柔嫩艾美耳球虫的选育研究，是指通过人工的方式选育福建
早熟柔嫩艾美耳球虫，以提高其生长速度、柔嫩程度等优良特性。

本文将
从选育目标、选育方法、选育过程等方面对福建早熟柔嫩艾美耳球虫的选
育研究进行详细阐述。

福建早熟柔嫩艾美耳球虫是一种海洋生物，具有独特的口感和滋味，
因此深受消费者喜爱。

然而，传统的养殖方式中，福建早熟柔嫩艾美耳球
虫的生长速度较慢，柔嫩度不够，不足以满足市场需求。

因此，选育出生
长速度快、柔嫩度高的福建早熟柔嫩艾美耳球虫对于养殖业具有重要意义。

在选育目标上，福建早熟柔嫩艾美耳球虫的选育主要目的是提高其生
长速度和柔嫩度。

通过选育，使得福建早熟柔嫩艾美耳球虫在相同时间内
能够长出更大的个体，提高产量和效益。

同时，还要通过选育改善福建早
熟柔嫩艾美耳球虫的口感和风味，使其更加柔嫩可口，增加消费者的满意度。

在选育过程中，首先需要收集并筛选出具有潜力的福建早熟柔嫩艾美
耳球虫种群。

之后，可以通过人工饲养和繁殖，加强对福建早熟柔嫩艾美
耳球虫个体的观察和记录，并进行生理指标和遗传分析。

通过对福建早熟
柔嫩艾美耳球虫生长速度、柔嫩度等特性的测定和评估，筛选出优良个体
并进行配对繁殖。

通过多代的选择和筛选，最终选育出优良品种。

总之，福建早熟柔嫩艾美耳球虫的选育研究是一个复杂而重要的课题。

通过选育出生长速度快、柔嫩度高的福建早熟柔嫩艾美耳球虫，可以提高
养殖业的效益，满足市场需求，推动相关产业的发展。

上海地区家鸭球虫种类初步调查
上海地区家鸭球虫种类初步调查
为初步了解上海地区家鸭的球虫种类,本试验从上海市郊8个鸭场采集鸭粪便,实验室离心、分离球虫后,经2.5%重铬酸钾溶液培养至孢子化.用带SPOT拍摄系统的显微镜观察、拍摄孢子化卵囊,记录其大小、面积以及卵囊内部结构,并对照文献进行种类初步鉴定.鉴定结果显示,上海地区家鸭的球虫有3属10种,即艾美耳属(Eimeria)6种、温扬属(Wenyonella)3种、等孢属(Isospora)1种.本调查结果为有效防治鸭球虫病提供了基础资料.
作者：姚倩韩红玉黄兵董辉赵其平姜连连郭涛YAO Qian HAN Hong-yu HUANG Bing DONG Hui ZHAO Qi-ping JIANG Lian-lian GUO Tao 作者单位：姚倩,郭涛,YAO Qian,GUO Tao(上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234;中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200241)
韩红玉,黄兵,董辉,赵其平,姜连连,HAN Hong-yu,HUANG Bing,DONG Hui,ZHAO Qi-ping,JIANG Lian-lian(中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200241) 刊名：中国动物传染病学报英文刊名：CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY 年，卷(期)：2009 17(1) 分类号：S858.322.723 关键词：鸭球虫艾美耳球虫温扬球虫等孢球虫种类调查。

鸡巨型艾美耳球虫早熟株免疫效果试验李瑞琪;王天成;郑明学;白瑞;张黎;张雪松;康慧鑫;杨洪静;雷璇【摘要】为确定使雏鸡获得良好免疫效果的最小巨型艾美耳球虫(E.maxima)早熟株接种量,分别于4日龄对免疫攻毒维以不同剂量进行首免,11日龄以首免2倍剂量对二次免疫攻毒组鸡进行二免.一次或二次免疫后7d或10 d用同源亲本株进行攻毒,检测免疫攻毒鸡相对增重率、卵囊减少率、病变记分减少率(RLS)和抗球虫指数(ACI).结果显示,一次免疫剂量≥400个孢子化卵囊/只或两次免疫的一免剂量和二免剂量≥100个孢子化卵囊/只和200个孢子化卵囊/只时,各免疫攻毒鸡的相对增重率≥85％,RLS≥70％,卵囊减少率≥75％,相对保护率≥90％,ACI≥170,均达到良好免疫效果.故将E.maxima早熟株的一次免疫最小免疫剂量定为400个孢子化卵囊/只,两次免疫最小免疫剂量定为一免100个孢子化卵囊/只和二免200个孢子化卵囊/只.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2019(055)001【总页数】4页(P50-53)【关键词】巨型艾美耳球虫;早熟株;免疫剂量【作者】李瑞琪;王天成;郑明学;白瑞;张黎;张雪松;康慧鑫;杨洪静;雷璇【作者单位】山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801;山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801【正文语种】中文【中图分类】S852.7鸡球虫病是鸡球虫寄生在鸡肠道黏膜上皮细胞内引起的一种原虫病,对现代养禽业造成巨大经济损失。

已报道有9种鸡球虫,其中巨型艾美耳球虫(E.maxima)是危害最严重的虫种之一,也是集约化养殖最常见的3种球虫之一,呈世界性分布。

活动目标：
一、能用目测的方式判定、比较物体的粗细与宽窄。

二、情愿用语言表述活动的结果。

3、培育幼儿比较和判定的能力。

4、进展幼儿逻辑思维能力。

五、引导幼儿踊跃与材料互动，体验数学活动的乐趣。

活动重难点：
能用目测的方式判定、比较物体的粗细与宽窄。

活动预备：
一、班级环境中布置一些粗细、宽窄不同的物品，[文.章出自快思教.案网]如：绳索、平稳板、圆柱积木等。

二、大象和长颈鹿图片各一张，幼儿画出。

活动进程：
一、观看动物图片，区别粗细。

一、出示大象和长颈鹿的图片，引导幼儿观看。

提问：大象和长颈鹿比，谁的腿粗，谁的腿细?学说：大象腿粗，长颈鹿腿细。

二、拓展体会：明白哪些东西有粗细。

如吸管有粗有细等。

二、观看积木板，区别宽窄。

以大象和长颈鹿要过桥的游戏情节，引导幼儿比较桥面的宽和窄。

三、观看班级环境中的物品，找粗细。

请幼儿举出相关的例子，如有的笔粗，有的笔细等。

四、游戏：比一比，找一找。

一、到户外场地将幼儿分成两组游戏：教师发出指令，如：“抱一抱粗树干。

”一组幼儿
找到粗树干抱一抱，另一组幼儿观看、评判是不是找对了。

游戏继续进行：找细树干，从宽宽的小桥上走过，从窄窄的小路上走过……
二、游戏几回后两组交流。

活动反思：
在本课的设计中，情境的创设、游戏的开展，都有效的调动了学生参与学习的主动性，整堂课气氛活跃，学生的发言出色、准确，能够说达到了预期的教学目标。

兔艾美耳球虫分子生物学鉴定技术研究进展樊翀宇;吕继洲;杨晓野;吴绍强【摘要】感染兔的艾美耳属球虫主要有11种,其对世界养兔业的危害日益严重.论文综述了国内外兔艾美耳球虫分子生物学鉴定技术的研究进展,基于不同靶标序列分类总结和分析了鉴定技术的优点和存在的问题,展望了未来兔艾美耳球虫分子生物学鉴定技术的应用前景和发展趋势,以期为兔艾美耳球虫病的诊断、预防和控制提供技术手段和方法依据.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2016(037)008【总页数】4页(P87-90)【关键词】兔;艾美耳球虫;分子生物学;鉴定技术【作者】樊翀宇;吕继洲;杨晓野;吴绍强【作者单位】内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特010018;中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所,北京100029;中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所,北京100029;内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特010018;中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所,北京100029【正文语种】中文【中图分类】S852.723兔球虫病是家兔中常见的一类寄生虫病，对养兔业危害很大，是养兔生产中长期存在的一个难题。

各品种家兔对艾美耳球虫(Eimeria)都易感染，特别是断奶到4月龄的小兔最易发病[1]。

幼兔的球虫感染率一般为90%，病死率为40%～70%[2]。

耐过球虫病未死亡的或经治愈的家兔多成为长期带虫者，是该病的传染源[3]。

鉴于兔球虫病危害的严重程度，我国农业部将其列入《一、二、三类动物疫病病种名录》中的二类动物疫病。

为防止该病跨境传入传出，2013年发布的《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》中也收录了兔球虫病。

兔球虫病主要是由寄生在肠道和胆管上皮细胞的艾美耳属球虫引发[4]。

世界上已报道的感染兔的艾美耳球虫包括斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)、小型艾美耳球虫(E.exigua)、中型艾美耳球虫(E.media)、大型艾美耳球虫(E.magna)、黄艾美耳球虫(E.flavescens)、盲肠艾美耳球虫(E.coecicola)、肠艾美耳球虫(E.intestinalis)、无残艾美耳球虫(E.irresidua)、梨形艾美耳球虫(E.piriformis)、维氏艾美耳球虫(E.vejdovskyi)及穿孔艾美耳球虫(E.perforans)[5-8]。

实验十七动物球虫病实验室诊断技术一、实验目的及要求1。

熟悉球虫卵囊的形态特征.2.掌握分离球虫卵囊的方法。

3。

了解常见球虫的种类。

4。

熟悉鸡球虫感染后的病变记分和粪便记分方法。

二、实验器材1。

仪器设备。

上海XSP-2C生物显微镜(具备10倍目镜和低倍、高倍物镜及油镜)；目镜测微尺和物镜测微尺；盖玻片、载玻片、牙签、洗瓶、平皿；剪刀及手术刀；离心管;血细胞计数板。

2.实验材料。

感染球虫的患鸡，常见的球虫卵囊，蔗糖、食盐、硫酸镁、铬硫酸、重铬酸钾等。

三、实验方法、步骤和操作要领（一）球虫的形态观察随宿主粪便排出的卵囊呈卵圆形、圆形或球形;无色、淡黄色或淡绿色，其形态大小随球虫种类而异。

外被有两层囊壁,外壁较厚,轮廓清晰；内壁较薄。

内含颗粒状的胞质(即原生质团）。

卵囊内具有一至多个孢子囊，每个孢子囊内含有一至多个子孢子，因种类而异。

艾美耳属的球虫种类经发育后，原生质团分裂为四个孢子囊，每个孢子囊内含有两个子孢子。

有些种类的球虫在卵囊的极端具有明显的卵膜孔,有些球虫的卵囊内膜突出于卵膜孔之外，形成极帽。

畜禽常见球虫的种类：1．牛球虫. 文献报道的有10种，其中9种为艾美耳属（Eimeria）球虫,另外一种为阿沙卡等孢球虫(Isospora akscaica）。

以邱氏艾美耳球虫(E. zurnii)致病力最强，牛艾美耳球虫（E.bovis）致病力较强，它们寄生于牛消化道的上皮细胞。

（1)邱氏艾美耳球虫（E. zurnii)。

卵囊呈亚球形或球形，平均直径为18.6μｍ×14.6μｍ。

淡黄色,无卵膜孔，胞质充满整个卵囊，无极体.卵囊孢子化时间为24~72小时。

（2)牛艾美耳球虫（E。

bovis). 卵囊呈卵圆形,褐色，有卵膜孔，平均大小27.7μｍ×20.3μｍ，卵囊孢子化时间为48～72小时。

2. 兔球虫。

种类很多,有16种，属艾美耳属。

仅介绍两种如下。

（1）斯氏艾美耳球虫（E.stiedae）. 寄生于肝、胆管上皮细胞内。