BO及Rh血型鉴定流程图
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ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体,确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A/B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型,利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A/B 抗体即反定型,综合正反定型结果确定受检标本ABO血型;利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法ABO/RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清,如果红细胞表面存在A或B或D抗原,就会与对应的抗体发生凝集反应,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶颗粒中,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法ABO/RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清,如果红细胞表面存在A或B或D抗原,就会与对应的抗体发生凝集反应,玻璃微珠具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠,使其悬浮在玻璃微珠层的上端,未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO/RhD血型卡、OTHROBiovueABO/RhD血型卡、2%氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A/B标准血清、抗D标准血清、3%~5%反定型试剂红细胞、1%反定型试剂红细胞。
SOP_10-2 Rh(D)血型鉴定标准操作程序一、目的:确保输血安全,严格检验质量标准,为临床提供及时、可靠的结果报告。
二、适用范围:血型鉴定。
三、操作人员:检验科授权工作人员四、操作步骤:1. 原理:1.1 Rh血型系统:Rh血型是一个极为复杂的血型系统,其重要性仅次于ABO血型系统。
ISBT现已确定Rh血型系统中共有46个血型抗原。
其中主要的抗原D、C、c、E、e分别表示为RH1、RH2、RH3、RH4、RH5或004001、04002、004003、004004、004005。
其抗原中包括了五个抗原之间的复合体以及弱表达等等,但在临床中主要的问题大都出自这五个抗原:抗E、抗e、抗C、抗c、抗D。
用这五种抗血清检查红细胞抗原可以有18种表现型,在临床输血中一般只做D抗原的鉴定。
1.2 D抗原:含有D(正常D抗原);弱D(weak D);不完全D(partial D);不完全弱D;增强性D(elevated D);正常D抗原。
由于红细胞上的D抗原较少,弱D抗原不能与盐水抗体(IgM)凝集,只能通过与不完全抗体的结合用抗球蛋白试验检出Del。
一些非常弱的D型抗原,只能被吸收放散试验(如三氯乙烯和三氯甲烷放散法)检测出来。
1.3 Rh 抗体:Rh血型的免疫原性强度可能仅次于ABO血型,其中以D抗原最强,其次为E、c、C、e。
绝大部分Rh抗体为免疫抗体,但少部分可能为自然发生的抗体。
2 试剂:(1)抗D试剂,包括完全抗体性质的单克隆或多克隆抗体及改性IgG抗体等低蛋白试剂;(2)Rh对照试剂(通常可用自身血清或抗A、B管代替);(3)Rh阳性和阴性5%红细胞悬液;(4)待检2~5%红细胞悬液。
3 方法:3.1 样本采集:真空抽血2ml至一次性抗凝管(EDTA-K2干粉)中,混匀后备用。
3.2 操作:3.2.1 玻片法:使用完全抗体性质的单克隆或多克隆抗体等低蛋白试剂。
不适合于输血前献血者和病人的血型鉴定,仅适合于临床体检时的RH血型鉴定。
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体,确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A/B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型,利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A/B 抗体即反定型,综合正反定型结果确定受检标本ABO血型;利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法ABO/RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清,如果红细胞表面存在A或B或D抗原,就会与对应的抗体发生凝集反应,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶颗粒中,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法ABO/RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清,如果红细胞表面存在A或B或D抗原,就会与对应的抗体发生凝集反应,玻璃微珠具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠,使其悬浮在玻璃微珠层的上端,未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO/RhD血型卡、OTHROBiovueABO/RhD血型卡、2%氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A/B标准血清、抗D标准血清、3%~5%反定型试剂红细胞、1%反定型试剂红细胞。
ABO和Rh (D) 血型鉴定操作规程(盐水法)一.目的规范ABO/Rh (D) 血型鉴定的操作流程;保证临床用血的安全性及有效性。
二.职责血库技术人员负责ABO和Rh (D) 血型鉴定。
三.适用范围适用于血库ABO和Rh(D)血型鉴定血标本。
四.所需材料和设备1.材料抗-A、抗-B、抗-D试剂、A、B、O型反定型试剂红细胞、生理盐水、小试管、滴管、患者血标本。
2.设备普通离心机、显微镜、血型血清学专用离心机。
五.操作步骤1.将标本2000r/分钟离心2分钟,使标本血浆/血清与红细胞分离,并吸取红细胞配制3%悬液。
2.取小试管3支,分别标明-A、抗-B、抗-D,用滴管分别加抗-A、抗-B、抗-D试剂各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者3%红细胞悬液1滴,混匀。
3.另取小试管3支,分别标明A、B、O细胞,用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部,再分别以滴管加入3% A、B、O型试剂红细胞悬液1滴,混匀。
页脚内容14.以1000r/分钟离心1分钟。
5.将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象,如肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上,再以显微镜检查。
6. ABO血型结果判定(见下表):ABO血型结果判断分型试剂+受检者红细胞(正定型)受检者血清+试剂红细胞(反定型)抗-A 抗-B A细胞B细胞O细胞血型注:“+”凝集;“-”不凝集7.Rh(D)血型判定:红细胞与抗-D试剂凝集为Rh (D) 阳性无凝集为Rh阴性。
8.凝集强度判断标准:页脚内容24+ 红细胞凝集成一大块,背景清晰透明;3+ 红细胞凝集成数小块,背景尚清晰;2+ 红细胞凝块分散成许多小块,背景可见到游离红细胞;1+ 肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞;±镜下可见数个红细胞凝集在一块,周围有许多游离红细胞;混合外观凝集(Mixed Field, MF)是指镜下可见少数红细胞凝集,而绝大多数红细胞仍分散分布;-(阴性)镜下未见凝集,红细胞均匀分布。
血型鉴定是确定一个人的血型类型的过程,一般包括以下步骤:
采集血样:使用无菌的针头或采血器具采集被测者的静脉血样本。
常用的采集部位是腕部或肘窝。
血型抗体试验:将被采集的血液样本分成几个小样本,每个样本与已知血型的抗体混合。
根据凝集反应来确定被测者的血型。
常见的血型抗体试验包括ABO血型和Rh血型。
ABO血型鉴定:使用抗A和抗B血清,将其与被测者的血样混合。
如果血样与抗A血清凝集,表示被测者具有A型血;如果血样与抗B血清凝集,表示被测者具有B型血;如果血样与抗A和抗B血清都凝集,表示被测者具有AB型血;如果血样与抗A和抗B血清都不凝集,表示被测者具有O型血。
Rh血型鉴定:使用抗Rh(D)血清,将其与被测者的血样混合。
如果血样与抗Rh(D)血清凝集,表示被测者具有Rh阳性血型;如果血样与抗Rh(D)血清不凝集,表示被测者具有Rh阴性血型。
结果确认:根据凝集反应的结果,确定被测者的血型类型。
结果应该由专业的实验室技师或医生进行解读和确认。