酸热法提取酵母油脂的条件的研究
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几种真菌油脂的分析
摘 要 ： 实验 室条件 下培 养提 取 所 得 的 几种 真 菌 油脂 经 水 解后 进行 薄 层层 析 ， 在 结果 表 明油 溶 性 成分 因 菌种 而异 ； 脂肪 酸 分析 表 明 在 不 同培 养 条件 下菌种 脂 结 构也 不 同 ； 土 生假 丝 酵母 在 优 对
化 条 件 下 合 成 的 类 可 可 脂 经 甘 三 酯 组 成 测 定 和 差 示 扫 描 量 热 法 分 析 ， 明 了 此 条 件 下 所 产 的 证
维普资讯
第２ ３卷 第 ２期
２０ ０ ２年 ６ 月
郑 州工程 学 院学报
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｈｅ ｇ ｈ ｕ Ｉ ｓｉｕｅ ｏ ｅ ｈ ｏｏ ｙ ｏ ｒ ａ ｆＺ ｎ ｚ ｏ ｎ ｔｔｔ ｆＴ ｃ ｎ ｌｇ
Ｖ １２ ， ｏ ２ ｏ．３ Ｎ ．
脱 液 ， 腈 ： 酮 ：４ ：０ 乙 丙 ０６．
１ ４． 产 品 物 理 性 质 的 评 价 方 法 ｌ ． ７ ５
酵 母 采 用 分 段 培 养 ， 种 接 在 斜 面 上 活 化 菌
２ ， 种 １ ／ Ｌ菌 悬 液 ０ ２ Ｌ于 装 有 ２ ｍ ｄ接 ０个 ｍ ．ｍ ０ Ｌ培 养基 的 １０ ０ ｍＬ三 角 瓶 进 行 种 子 液 培 养 ２ ｈ 再 倒 ５， 入装 有 ７ ｍ ０ Ｌ培养 基 的 ２ ０ Ｌ三 角 瓶 进 行 ４ ｈ生 ５ｍ ８ 物量 培 养 ， 后 倒 入 装 有 １０ Ｌ培 养 基 的 ５０ 然 １ｍ ０ ｍＬ 三 角 瓶 中进 行 ７ ｈ产 脂 培 养 ； 枝 毛 霉 用 装 有 ２ 卷 １０ Ｌ培养 基 的 ５０ Ｌ三 角瓶 连 续 培养 ５ ［ １ｍ ０ｍ ｄ ．
类 可 可脂 是较 理 想的 类 可 可脂 ．
关 键 词 ： 菌 ； 溶 成 分 ； 结 构 ； 可 可 脂 真 油 脂 类
尼罗红染色法筛选产油酵母及定量检测胞内油脂含量的研究_林义
Abstract: [Objective] To establish a simple method to screen oleaginous yeast and determine the intracellular lipid content. [Methods] The study is based on the theory that the combination of nile red and intracellular oil will emit fluorescence when induced by UV light and the fluoresence indensity is associated with the lipid content. We cultivate yeast in the culture medium added with nile red, and screen the oleaginous yeast strains from the 385 deep-sea yeasts by measns of obeserving the fluorescence of the yeast colony. We have identified the screened oleaginous yeast strains by the 26S rDNA D1/D2 series analysis method. Designating one of the oleaginous yeasts (2A00015) as the test strain, the lipid content rapid determination method by nile red dyeing was established. [Results] 22 oleaginous yeasts were obtained with the lipid content reaching up to 62.9%. Based on the molecular identification, it showed that the 22 yeasts are separately belong to Candida viswanathii, Candida parapailosis, Rhodotorla mucilaginosa, Debaryomyces hansenii, Pichia guilliermondii and Rhodosporidium paludigenum. The optimum condition for lipid content determination by nile red dyeing is: bacterium suspension OD600 lower than 1.2, nile red concentration 0.5 mg/L, dyeing time 5 min, exciting wavelength 488 nm, ssion wavelength 570 nm. The relative fluorescence intensity obtained by this method exhibits a positive association with the lipid content obtained by weighing method, which can be explained as R2=0.9637. Keywords: Nile red dyeing, Oleaginous yeast, 26S rDNA D1/D2, Fluorescence, Lipid content 在适宜条件下, 某些微生物产生并储存的油 脂占其生物总量的 20%以上, 具有这样表型的菌 株称为产油微生物, 包括细菌、酵母、霉菌、藻 类[1−2]。 其生产的油脂与植物油脂相似, 多以 C16、 硬脂酸、 油酸、 亚油酸等 。 C18 为主, 如棕榈油、 传统产油微生物筛选主要通过染色观察、提取油 脂、测定含量等一系列步骤, 过程十分繁琐, 不 利于大量筛选。 尼罗红是一类苯吩哑嗪酮类化合物, 能够与 脂类物质结合发出很强荧光, 不溶于水且易溶于 有机溶剂
产油脂丝状真菌的研究
武汉工业学院硕士学位论文产油脂丝状真菌的研究姓名：殷梦华申请学位级别：硕士专业：粮食、油脂及植物蛋白工程指导教师：陈涛20070601摘要传统油脂主要来源于动、植物的油脂。
在当今世界工业生产高速发展，人民生活水平不断提高的情况下，食用油脂呈现出供不应求的趋势，传统的油料资源将无法满足人们的需要。
针对这一情况，筛选和选育高产油脂微生物，利用发酵技术和油脂工程技术把使用价值较低的农副产品和工业废弃物转化为微生物油脂，将为食用油脂及特种油脂提供一个新的来源。
此外，当前生物柴油的研究已是世界科研的焦点，而其原料的来源更是人们急切需要解决的问题。
如果能够开发利用微生物油脂为生物柴油的生产提供原料油脂，这将是又一项有重大意义的研究。
本课题的研究内容包括：从全国各地采集土壤样品，将采集的土样进行分离、初筛，获得丝状真菌；将初筛菌株转入发酵复筛，测定含油量，并对脂肪酸组成进行分析，获得高产油脂或特殊脂肪酸的丝状真菌；将获得的菌株通过分子生物学方法进行分类鉴定。
从全国十多个省市广泛采集土壤样品150份。
通过土样富集培养液摇瓶富集培养后，在分离平板上采用划线分离的方法获得丝状真菌的单菌落。
挑取单菌落在PDA 平板上培养，从而获得纯的丝状真菌165株。
这165株丝状真菌经过发酵初筛，苏丹黑B染色观察油脂微滴，获得56株丝状真菌。
对初筛获得的56株菌株进行菌落形态观察和细胞形态观察，初步分类。
这些菌大多属于曲霉属、根霉属和镰刀菌属。
将这56株菌转入发酵复筛，采用索氏抽提法测定含油量，从而确定是否为产油脂丝状真菌。
通过筛选，获得含油量大于8%的丝状真菌16株。
对其中3株产油量高的菌株21-5-1、31-4、113-2进行3次发酵，观察其生长稳定性，并对脂肪酸组成进行气相色谱分析，结果为：21-5-1生物量24.71g/L，含油量16.93%，主要脂肪酸组成为：棕榈酸11.2%，硬脂酸3.5%，油酸31.7%，亚油酸43.7%，γ-亚麻酸5.0%，α-亚麻酸3.1%，D H A（docosahexaenoic acid）0.6%；31-4生物量38.83g/L，含油量13.49%，主要脂肪酸组成为：棕榈酸11.0%，硬脂酸4.2%，油酸21.5%，亚油酸56.2%，α-亚麻酸5.0%，DHA0.7%；113-2生物量38.90g/L，含油量8.80%，主要脂肪酸组成为：棕榈酸10.4%，硬脂酸3.5%，油酸23.0%，亚油酸57.0%，α-亚麻酸4.4%，DHA0.8%。
优化酿酒酵母中响应面法母产油脂条件
优化酿酒酵母中响应面法母产油脂条件发表时间：2016-04-18T15:33:07.887Z 来源：《工程建设标准化》2015年12月供稿作者：林燕环[导读] 漳州职业技术学院由于细菌的产量较低，因此目前的研究主要集中在藻类和真菌。
（漳州职业技术学院，福建，363000）【摘要】本文主要针对酿酒酵母产油脂以及发酵条件优化进行分析研究，采用 Packet-Barman 设计对影响其产油脂相关因素进行评估，筛选出效应较为显著的因素：柠檬酸,CaCl2和初pH值。
运用Box-Betoken设计响应面的分析方法，经过优化后最终优质产率（干重）可以达到14.55%，种子培养基中的优质产率为4.76，与之前相比，是原来的3倍左右。
【关键词】酿酒酵母；油脂条件；响应面法；引言我们俗称的微生物油脂，通常是指某些微生物中所含有的酵母菌、藻类以及霉菌在细胞之内储存数量过大之后的脂肪酸甘油酯。
微生物细胞一般来说，只含有2%-3%的油脂，还是有少数的微生物中油脂含量可达七成以上，因此高含油脂量就使得微生物的油脂实际开发变成可能。
由于细菌的产量较低，因此目前的研究主要集中在藻类和真菌。
有关专家从产油脂角度出发深入研究，发现酵母中含油脂量较为丰富的是棕酵母、假丝酵母(Candida)、油脂酵母(Transcendentalism)等，这些酵母含油脂可以高达7成。
现阶段对酿酒酵母产油脂的相关研究极为稀少，因此对酿酒酵母的油脂产量进行深入研究具有重要的现实意义。
文章对酿酒酵母产油脂做了简单的分析，利用响应面法(RSM)对酿酒酵母的产油脂发酵条件进行了优化。
通过运用Packet-Barman设计、最陡爬坡实验以及Box-Betoken设计和RSM法得到酿酒酵母产油脂发酵培养基。
在这个实验的完成过程中，产生的相关数据以及结论是在Mini tab 15.0 统计软件的帮助下完成，并且得出最终的结论。
一、实验所需材料与方式方法1．菌种酿酒酵母YS582．培养基和培养的客观条件种子培养基(YPD)RSM 实验与Packet-Barman 实验培养条件：30°C、180 r/min。
我国公布今年减排目标 二氧化硫排量降40万吨
（ ） ：６ －６ ４ ７ ９．
按 正 交试 验 确 定 的 最 佳 条 件进 行 验 证 实 验 ，
中国环境保护工作会议 １ ５ 在北京召开，环境保护部部长周生 贤公布了２ １年污染减排 目标以 月２ 日 ００ 及２０ 年污染减排完成情况 。２ １年 中国二氧化硫排放量将力争 １２ ０ 年再削减４ 万吨；化学需氧量减 ０９ ００ ： ０９ Ｌ ０
种 因 素 对 提 取得 率 的 影 响 ，结 果 表 明 ：酵 母 细 胞
中的油脂 提取 收率受 盐酸浓度及用量 、处理时间 等 因素 的影 响 。通过 单 因素 和正交 试验 确定 ： ０５ 干菌体用 １ｍ ４ ｏ／盐酸沸水浴处理８ ｉ， ． ｇ ０Ｌｍ ｌ Ｌ ｍ ｎ 油脂得率最 高 。在加入有机溶剂萃取前添加无水 乙醇有 助于油脂 的抽提 ；用石油醚 和乙醚等体积 混合使用油脂得率 比使用单一萃取溶剂好 。
参考 文献
… 李植峰 ，张玲 等 ． 四种真 菌 油脂提 取 方 法的 比较 研 究
［】 生 物 学通 报 ：２ ０ ，２ （ ） ： ７—７ ． Ｊ． 微 ０１ ８ ６ ２ ５
［】杨 文 ，吉春 明 ． 种 简单的胞 壁破碎 方 法【］微 生物 学 ２ 一 Ｊ．
通 报 ：１ ９ ，２ （ ） ．ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ５ ２ １ ９
由极 差 分 析 可 以看 出 ：Ｒ ＞ Ｒ ，表 明 盐 Ｒ ＞
［】相 光明 ，赵祥 颖等 ． ５ 高产油脂 酵母 菌株 的选育［］山东 Ｊ．
０８ －１ ２ 酸用量 对油 脂 提取 的影 响 大于 酸热 时 间大于 乙 食 品 发 酵 ，２ ０ ，４：９ ． ４ 产 Ｄ． 醇用量对油脂提取 的影响 。该试验的最佳提取条 【】 相 光 明 ． 油脂 酵母 菌株 的 筛选 ［］ 山 东农业 大 学，
按 正 交试 验 确 定 的 最 佳 条 件进 行 验 证 实 验 ，
中国环境保护工作会议 １ ５ 在北京召开，环境保护部部长周生 贤公布了２ １年污染减排 目标以 月２ 日 ００ 及２０ 年污染减排完成情况 。２ １年 中国二氧化硫排放量将力争 １２ ０ 年再削减４ 万吨；化学需氧量减 ０９ ００ ： ０９ Ｌ ０
种 因 素 对 提 取得 率 的 影 响 ，结 果 表 明 ：酵 母 细 胞
中的油脂 提取 收率受 盐酸浓度及用量 、处理时间 等 因素 的影 响 。通过 单 因素 和正交 试验 确定 ： ０５ 干菌体用 １ｍ ４ ｏ／盐酸沸水浴处理８ ｉ， ． ｇ ０Ｌｍ ｌ Ｌ ｍ ｎ 油脂得率最 高 。在加入有机溶剂萃取前添加无水 乙醇有 助于油脂 的抽提 ；用石油醚 和乙醚等体积 混合使用油脂得率 比使用单一萃取溶剂好 。
参考 文献
… 李植峰 ，张玲 等 ． 四种真 菌 油脂提 取 方 法的 比较 研 究
［】 生 物 学通 报 ：２ ０ ，２ （ ） ： ７—７ ． Ｊ． 微 ０１ ８ ６ ２ ５
［】杨 文 ，吉春 明 ． 种 简单的胞 壁破碎 方 法【］微 生物 学 ２ 一 Ｊ．
通 报 ：１ ９ ，２ （ ） ．ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ５ ２ １ ９
由极 差 分 析 可 以看 出 ：Ｒ ＞ Ｒ ，表 明 盐 Ｒ ＞
［】相 光明 ，赵祥 颖等 ． ５ 高产油脂 酵母 菌株 的选育［］山东 Ｊ．
０８ －１ ２ 酸用量 对油 脂 提取 的影 响 大于 酸热 时 间大于 乙 食 品 发 酵 ，２ ０ ，４：９ ． ４ 产 Ｄ． 醇用量对油脂提取 的影响 。该试验的最佳提取条 【】 相 光 明 ． 油脂 酵母 菌株 的 筛选 ［］ 山 东农业 大 学，
柠檬酸在产油酵母油脂积累过程中的中心作用
柠檬酸在产油酵母油脂积累过程中的中心作用
唐文佳;张怀渊;陈卫;宋元达
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2013(034)019
【摘要】产油酵母可以积累大量油脂,具有重要的应用价值,近年来,关于柠檬酸和脂质合成的关系的研究报道很多,研究发现产油酵母整个油脂积累的过程都需要柠檬酸的参与,油脂积累所需要的乙酰辅酶A主要由柠檬酸提供,柠檬酸在线粒体膜和细胞膜上的转运对产油酵母油脂含量的影响较大.细胞质和线粒体内的柠檬酸对油脂积累过程中的许多重要酶具有调节作用.柠檬酸是连接糖代谢与脂代谢的桥梁,在产油酵母油脂积累过程中起到中心作用.本文通过对柠檬酸在产油酵母油脂积累代谢的中心作用进行综述,以期为探究产油酵母油脂积累机制提供一定的参考.
【总页数】4页(P326-329)
【作者】唐文佳;张怀渊;陈卫;宋元达
【作者单位】江南大学食品学院,江苏无锡 214122;江南大学食品学院,江苏无锡214122;江南大学食品学院,江苏无锡 214122;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡 214122;江南大学食品学院,江苏无锡 214122
【正文语种】中文
【中图分类】Q939.97
【相关文献】
1.溶氧对耶氏解脂酵母油脂积累和柠檬酸分泌的影响 [J], 亢新鑫;杨俊换;张怀渊;宋元达
2.产油酵母利用木薯粉水解液发酵产油脂的研究 [J], 毕桂灿;王玉琪;黄强明;谢君
3.木糖对产油假丝酵母油脂积累的影响 [J], 刘秀花;孔冠楠;王莉;宋兆齐;梁峰
4.重金属离子对耶氏解脂酵母油脂积累量及柠檬酸分泌量的影响 [J], 张鲁宁; 宋元达; 张怀渊
5.基于酶标仪测定的斯氏油脂酵母发酵产油脂条件优化研究 [J], 李艾;郝玉翠
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微生物发酵制备油脂的研究
软脂酸（ 棕榈酸） １６∶０
Δ９ 去饱和 # 棕榈酸油 Δ９－ １６∶１
＋Ｃ２ 延长 " 硬脂
# #
Δ９ 去饱和 "
油酸 Δ９－ １８∶１
Δ６ 去饱和 "
Δ － ６，９，１２，１５ １８∶４
Δ１２ 去饱和 " 亚油酸 Δ９，１２－ １８∶２
Δ６ 去饱和 " γ－ 亚麻酸 Δ６，９，１２－ １８∶３
Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｒｙ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｌｉｐｉｄｓ ｗｅｒｅ ｒｅｖｉｅｗｅｄ， ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｒｃｅ、ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｓｏｕｒｃｅ、ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ、ｐＨ ｖａｌｕｅ、ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｉｍｅ ａｎｄ ａｅｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｌｉｐｉｄ ｗｅｒｅ ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ． Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ， ｓｏｍｅ ｋｅｙ ｐｒｏｃｅｓｓ ｉｎ ｔｈｅ ｌｉｐｉｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｗｅｒｅ ｅｘｐｌａｉｎｅｄ， ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｈｅ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ， ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｌｉｐｉｄ， ｒｅｆｉｎｉｎｇ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｌｉｐｉｄ， ａｎａｌｙｚｉｎｇ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｌｉｐｉｄ ａｎｄ ｓｏ ｏｎ． Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ， ｔｈｅ ｐｒｏｓｐｅｃｔ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｌｉｐｉｄ ｉｎ ｆｕｔｕｒｅ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｌｉｐｉｄ ｉｎ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏｄｉｅｓｅｌ ｗｅｒｅ ｐｒｏｐｏｓｅｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｌｉｐｉｄ； ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ； ｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ； ｂｉｏｄｉｅｓｅｌ
圆红冬抱酵母利用生物柴油副产物粗甘油产油脂的影响因素分析
第一作者:高振( 1992-) ,男,博士研究生,主要研究方向为餐厨垃圾发酵处理。 ustb_gz@ 163. com
∗通信作者:吴川福( 1983-) ,男,博士,副教授,主要研究方向为固体废弃物的处理及其资源化与能源化技术。 wucf@ ustb. edu. cn
第8期
53
高 振,等:圆红冬孢酵母利用生物柴油副产物粗甘油产油脂的影响因素分析
lipid production and lipid yield rate reached 10. 56 g / L and 0. 229, respectively. Compared with inorganic ammonium sulfate,
the addition of organic peptone significantly increased the lipid content and lipid production. The performance of biodiesel was
glycerol, but also provide a economical raw materiБайду номын сангаасl for the production of biodiesel.
Keywords: microbial lipid; Rhadosporidium toruloides; crude glycerol; influence factors; aerobic fermentation
第 38 卷 第 8 期
环 境 工 程
Environmental Engineering
2020 年 8 月
Vol. 38 No. 8
Aug. 2020
圆红冬孢酵母利用生物柴油副产物
微生物油制备与应用的技术研究
微生物油制备与应用的技术研究微生物油，也被称为单细胞油，是一种由微生物合成的油脂，具有多样的应用潜力。
本文将讨论微生物油的制备方法以及其在不同领域的应用。
一、微生物油的制备方法1. 原料选择：微生物油可以利用多种微生物来制备，如酵母菌、真菌、藻类等。
根据目标油脂的特性和需求，选择合适的微生物作为生产菌株。
2. 培养条件优化：为了提高微生物油的产量和质量，需要对培养条件进行优化。
包括温度、pH值、碳源和氮源的选择，以及搅拌速度和通气条件等。
3. 油脂提取：微生物油一般以细胞内油脂的形式存在，因此需要进行油脂的提取。
常用的方法有溶剂提取、机械压榨和超临界流体萃取等。
4. 油脂纯化：提取得到的油脂含有杂质，需要进行纯化处理。
常用的方法包括酯化、凝胶渗透色谱和超滤等。
二、微生物油的应用领域1. 生物柴油生产：微生物油可以通过转化成生物柴油来替代传统的化石燃料。
生物柴油具有低排放、低污染和可再生等优点，对环境友好。
通过优化微生物油的制备方法，可以提高生物柴油的产量和质量。
2. 食品工业：微生物油可以被用于食品工业中的植物油替代品。
它可以用于烹饪、烘焙和调味等，具有健康和营养的特点。
微生物油还可以用于制作食品添加剂，如乳化剂和抗氧化剂等。
3. 医药行业：微生物油中的脂肪酸可以提取出来，用于合成药物和生物活性物质。
微生物油还可以用作药物载体，提高药物的稳定性和溶解度。
4. 化妆品和个人护理产品：微生物油可以用于制备化妆品和个人护理产品，如洗面奶、护肤霜和沐浴液等。
微生物油具有良好的润滑性和渗透性，能够滋润肌肤，保持皮肤的湿润度。
5. 动物饲料：微生物油中富含脂肪酸和营养物质，可以用于动物饲料的制作。
微生物油在动物饲料中的添加可以提高动物的生长性能和免疫力。
6. 清洁剂：微生物油中的脂肪酸可以用于制备润滑剂和清洁剂。
这些产品具有良好的润滑和清洁效果，并且对环境没有污染。
7. 其他应用领域：微生物油还可以用于制备生物塑料、生物润滑油、生物蜡和生物油墨等。
《产油酵母的研究现状述评_热点与趋势》范文
《产油酵母的研究现状述评_热点与趋势》篇一产油酵母的研究现状述评_热点与趋势一、引言产油酵母作为一种具有高附加值的微生物资源，近年来在生物工程和生物能源领域的研究中备受关注。
其通过利用可再生资源进行生物产油，不仅有助于缓解能源危机，还能为农业和工业提供重要的原料。
本文旨在全面分析产油酵母的研究现状，探讨其热点与趋势。
二、产油酵母研究背景产油酵母，又称油脂酵母，是一种能高效积累油脂的微生物。
其具有生长迅速、繁殖能力强、油脂含量高等特点，因此被广泛应用于生物柴油、食品添加剂、饲料等领域。
近年来，随着生物能源和生物技术的快速发展，产油酵母的研究逐渐成为热点。
三、研究热点1. 高效产油酵母菌株的选育与改良：针对不同来源的产油酵母菌株，通过基因工程、诱变育种等技术手段，选育出高产油、高生长速率的优良菌株。
此外，针对产油酵母的代谢途径进行优化，提高油脂的合成效率。
2. 生物柴油制备技术：利用产油酵母生产的油脂可制备生物柴油。
目前，研究热点包括优化产油酵母的发酵工艺、提高油脂品质和产量，以及探索生物柴油的环保应用领域。
3. 食品添加剂与饲料：产油酵母富含多种营养成分，如蛋白质、维生素和矿物质等。
因此，其在食品添加剂和饲料领域的应用也备受关注。
研究重点包括产油酵母的发酵条件优化、营养成分的提取与分离等。
四、研究趋势1. 合成生物学在产油酵母研究中的应用：随着合成生物学技术的发展，越来越多的研究者开始探索其在产油酵母研究中的应用。
通过构建合成酵母基因组，实现对产油酵母代谢途径的精确调控，进一步提高油脂产量和品质。
2. 产油酵母与其他微生物的共培养技术：通过共培养技术，将产油酵母与其他微生物进行协同作用，以提高油脂产量和品质。
此外，共培养技术还有助于提高产油酵母对不同环境的适应能力，拓宽其应用领域。
3. 环保与可持续发展：随着环保意识的提高，产油酵母的环保应用受到越来越多的关注。
未来研究方向包括利用产油酵母处理有机废物、生物修复污染环境等。
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提取率 的影 响， 结果见 附图Ｄ。
从 附图Ｄ可以看 出， 无水 乙醇加入１ｍ ０ Ｌ时油脂得率 最
高， 乙醇用量为５ Ｌ ｍ 时油脂相对收率为９ ％， ２ 菌体 中的油脂 已经基本提取出来， 考虑经济节约故选择 乙醇的用量为５ 。 ｍＬ ２５萃取有机溶剂 的确 定 ． 油脂 不溶于水 ， 易溶于 乙醚、 石油醚 、 汽油 、 丙酮 、 苯、
微 生物油脂 （ ｃｏ ｉ ｌ 又称单细胞油脂 （ｎ ｌｃｌ ｍｉ ｂａｏ ｓ ｒ ｌ ｉ） ｓ ｇｅ ｅｌ ｉ ｏｌＳ Ｏ） 是微 生物 菌体在 一定培 养条件 下 ， 化碳水化 ｉ Ｃ ， ， 转 合物 碳氢化合物 在细胞 内积累的大量 油脂 。微 生物油脂 作为一种新型油脂引起人们 的广泛关注 ， 微生物油脂 的开 发与利用不仅丰 富了传统 的油脂生产技术 ， 而且将会成 为
率 的影 响， 并通过 正交试 验确定 了最佳提取条件 。
１材 料 与 方 法
开展微生物油脂 的研 究 ， 首先要进行油脂的提取和分 析 。目前 ， 究者常采用的油脂提取方法主要有索 氏抽提 研 法、 有机溶剂浸提法、 酸热法 、 超临界Ｃ ： Ｏ 萃取法等【 索 氏 ” 。
１ ． １实验 菌种
间为 ８ ｎ ｍｉ。 ２ 无 水 乙醇 用 量 的确 定 － ４ 在酸热法提取油脂过程 中， 胞酸解后加入适量 的 乙 细
盐酸用量对 油脂提取 的影 响大于酸热 时间大于 乙醇用量 对 油脂 提取的影响 ； 在试验范 围内， 酸用量 、 盐 酸热时间和 乙醇用 量的Ｆ 值均不显 著。 试验 的最佳提 取条件为Ａ２。， ＢＣ ， 即盐酸用量为１ｍＬ 酸热时间８ ｎ 无水 乙醇用量 １ｍＬ ０ ， ｍｉ， ０ 。
Ｉｓｔｔ Ｆ ｏ ｎ ｅ ｅｔｔｎＩｄ ｓ ｅ ｆ ｈｎ ｏｇＰｏ ｉｃ，ｉａ ５ ０ ３ Ｃ ｉａ ｎ ｔｕｅ ｆ ｏ ｄａｄＦｒ ｎ ｉ ｎ ｕｔ ｓ Ｓ ａｄ ｎ ｒｖ ｅＪ ｎ２ ０ １ 。 ｈｎ ） ｉ ｏ ｍ ａ ｏ ｉ ｒ ｏ ｎ ｎ Ａ ｓａｔＴ ｅ ｃ －ｅｔｇｅｔ ｃｏ ａ ｓ ｐｅ ｎ ｆｃｅｔ ｔ ｄ ｆｉ ｄ ｘｒ ｔ ｎ Ｔ ｅｓ ｇｅ ａｔｒｕｈａ ｈｄｏｈ ｒ ｃ ｎｅｔ ｔ ｎ ｂｔ ｃ ｈ ｉ ｈａｎ ｒ ｔｎｗ ｓ ｍ ｌａｄｅ ｉ ｈ ｉ ｔ ｃｉ ． ｈ ｎｌ ｆ ｏ ｃ ｓ ｙ ｒｃｌ ｃ ｉ ｃ ｃｎｒ ｏ ， ｒ ： ａｄ ｉ ｘａ ｉ ａｉ ｉ ｎ ｍｅ ｏ ｏ ｌ ｅ ａ ｏ ｐ ｉ ｃ ｓ ｏ ａｄｏ ｉ ａ ｉ
总第 ２ ８期 １ ・ ４５ １ ．
加， ０ ｎ 在１ｍｉ时达到最大；０ ｎ １ｍｉ后随着酸热时 间的增加 ， 油
脂得率反而降低Βιβλιοθήκη 原因可能是酸热时间过长导致浸提 出的 油脂发生 了分解等反应 ， 以致萃取 出的油脂 收率 降低 。酸 热 时间为８ ｎ ， ｍｉ时 油脂 相对 收率 为９ ． ５８ 已经 比较 完全 ％， 地提取 了菌体 中的油脂 ， 从节 约 的角 度考 虑 选择 酸 热 时
ＫＯ Ｇ ａｍｉ Ｚ ＡＯＸｉ ｇ ｉｇ， Ｉ Ｎ ａｊｎ， ＵＯ Ｔａｑｎ３ＬＵＪ ｎｕ Ｎ Ｆ ｎ ｎ， Ｈ ａ ｙｎ ￣ＴＡ Ｙ ｎｕ Ｇ ｉ ｉ ， Ｉ ａｊｎ。 ｎ ｎ ｇ ｉ
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萃 取时 ， 脂得 率最 高 ； 油 并对 提 取 的油 脂进 行 了气 相 色谱 分析 ， 果表 明 ： 结 棕榈 酸为 ２．８ 硬 脂 酸为 ４ ７ 油 酸为 ５．％， 油 酸 为 ０７％， ． ％， ５ ９９ 亚
１ ． ％， １ ６ 亚麻 酸 为０２ ％， 他３ １％。 ３ ． ３ 其 ． ６ 关 键 词 ： 生物 油 脂 ； 微 隐球 酵母 ； 脂提 取 油
中图分 类号 ： ３ ３ ５ Ｑ９ — ３
文 献标 识码 ： Ｂ
文章 编号 ：２ ４ ５ ７ （０ ０ ０ — １ ３ ０ ０ ５ — ０ １ ２ １） ５ ０ ４ — ３
Ｌｉｉ ｘ ｒｃｉｎｏ ｙ ａｔ ｙａ ｉ－ ｅ ｔ ｇｅ ｔａ ｔ ｎ ｐ ｄｅ ｔ ｔ ｆ ｅ ｓ ｂ ｃｄｈ ａｉ ｒｃ ｏ ａ ｏ ｎ ｘ ｉ
工 业 化 生 产 油 脂 的有 效 途 径 之 ～ 。
使 细胞壁进 一步被破坏， 然后用有机溶剂萃取 出细胞 中的
油 脂Ⅲ。
本研究 以实验室 筛选的一株 产油脂 的隐球酵 母菌 为
原 料 ， 中考 查 了酸热 法 中盐 酸浓 度 、 集 盐酸 用量 、 热 时 酸 间、 无水 乙醇用 量 、 有机 溶剂种类 等单 因素 对油脂提 取得
以上 培养基 均在１ ５ ℃灭菌２ ｍｉ。 ｌ ０ ｎ
１３ 试 剂 ＿
无水 乙醚， 石油醚 （０ ６ ） 正 己烷 ， ３～ ０ ， 无水 乙醇 ， 盐酸 。
１ 方 法 ． ４
１． ． １酵母细胞 的培养 ４ 将 低温 保 存 的 隐球 酵 母接 种 于Ｙ Ｐ Ｅ Ｄ固体 斜 面上 ，
经验交流
中 国 酿
造
２１ 年 第５ ００ 期
总第 ２ ８期 １ ・４ １
酸 热 法提 取酵 母 油脂 条件 的研 究
孔几敏 赵祥 颖 ｚ ， ， 军 国天 庆３ 田延 ， 刘建 军
（． １山东农业大学 食 品科学与工程学院 ， 山东 泰安 ２ ０ １； ． ７０ ８２山东省食 品发 酵工程 重点实验 室， 山东 济 南 ２ ０ １ ； ． ５ ０ ３ ３山东省食 品发酵工业研 究设计 院， 山东 济南 ２ ０ １ ） ５ ０ ３
１ ． ２培养基
Ｙ Ｐ 培养 基 ： 萄￣ ２ ｇ ， ＥＤ 葡 ｏ／ 酵母 粉 １ｇＬ 蛋 白胨 ｌｇ ， Ｌ ０ ／， Ｏ／ Ｌ
ｐ ５ ～ ． 为液 体种子培养基 ； 面培养基 是在Ｙ Ｐ Ｈ． ６作 ８ ０ 斜 Ｅ Ｄ培 养 基的基 础上加上琼脂２ ｇ ０。
发酵培养基： 葡萄糖 １０ ／， ２ ｇ 硝酸钾 ｌ／， Ｌ ｇ 玉米浆２ ｇＬ Ｌ ． ／， ５
表２ 酸 热 提 取 油 脂 Ｌ （ｐ正 交 试 验 数 据 及 结 果 分 析 。３）
Ｔ ｂｅ ２ ｂ（ ３Ｏｒ ｏ ｏ ａ ｓ ｓ ｎ ｈ ｓ ｌ ａ ａｙ ｉ ａ ｌ ． ３ ） ｔ ｇ ｎ ｌｅ ｔ ｉ ａ ｄ ｔ ｅ ｒ ｕｔ ｎ ｌｓ ｈ ｔ ｌｔ ｅ ｓ
醇 可 以除去杂 蛋 白、 多糖和 色素 【 并且 可 以减轻乳 化 作 ４ ｌ ， 用， 有利于油脂 的萃取 。试验考查 了无水 乙醇用 量对 油脂
摘 要： 以一株 隐球 酵 母为 材料 ， 查 了酸 热 法 中盐 酸浓 度 、 考 盐酸 用 量 、 热 时 间 、 酸 无水 乙醇用 量 、 有机 溶 剂单 因素对 油 脂提 取 收率 的 影响， 并通 过 正交试 验 确定 了０５干 菌 体用 １ｍＬ４ ｏ Ｌ ． ｇ ０ ｍ ｌ 盐酸 沸水 浴 处理 ８ ｎ 加 入无 水 乙 醇用 量 １ｍＬ 用 乙醚 １ｍＬ 石 油醚 １ｍＬ ／ ｍｉ， ０ ， ２ 和 ２
实验室保藏 的一株 隐球酵 母 （ ｒｐｏ ｏｃ ｓ［ Ｃｙ ｔ ｃｕ）］ ｃ ３ 。
抽提法 是经典 的脂肪提取方法 ， 该方法利 用石油醚等长时 问回流干菌体 ， 浸提菌 体 内的油脂 类物质 ， 取 的效 果较 提
好， 该法样 品需求 量大， 作时间长 ， 但 操 不适合作为菌株快 速筛选和条件优化 时的提取方法 。超临界Ｃ ： 取法需要 Ｏ萃 专用设备 ， 只适合规模化提取 。有机溶剂法 是用 有机溶剂 直接浸 提细胞 ， 收率较低 ， 并且所用溶 剂毒性较 大 。相 比
来结构紧密 的细胞壁变 得疏松 ， 再经沸 水浴及速冻 处理 ，
收 稿 日期 ： ０ ００ —９ ２ １ —１１
作者简介： 孔凡敏 （９ ３ ， 山东济 宁人 ， 士研 究生； 建军＋ 教授 ， １ ８ 一 女， ） 硕 刘 ， 通讯 作者 。
经验交流
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造
２１ 年 第５ ００ 期
ｈ ｄ ｏ ｈ ｏｉ ｃｄ ｄ ａ ，ｐ ｏｃ ｓｉ ｇ ｔ ｅｂ ｈ ｒ ｏ ｈｏｒｃａ ｉ ａｃ ｈｏ ｏ ａ ｎ ｒ ａ ｉ ｏ ｖ ｎｔｗｅ ｅｄ ｔｒ ｉ ｄ， ｄ ｔ ｅｂ ｓ ｘ ｒｃ ｏ ｏ ｄｉ ｙ ｃ ｌ ｒｃａ ｉ ｏｓｇｅ ｒ ｅ ｓｎ ｉ ｙ ｙｄ ｃ ｌ ｉ ｃｄ， ｌｏ ｌｄ ｓ ｇｅａ ｄ ｏ ｇ ｎ ｃｓ ｌ ｅ ｒ ｅ ｅｍ ｎｅ ａ ｅ ｔｅ ｔａ ｔ ｎ ｃ ｎ — ｒ ｍ ｎ ｈ ｉ ｉ ｆ ｎｓｔｒ ｕｇ ｒｈ ｏ ａ ｘｐ ｒｍ ｅ ｔｗｅ ｅｓ ｌｃｅ ｏ ｕ ｅ ｔ ｙ． ｅｒ ｓ ｌｓｗ ｅｅａ ｏｌ ｗ ｓ ｅ ｅ ０ ｍｌａ ｄ ｐ ｔｏ ｅ ｍ ｔ ｅ ０ｍ ｌｈｙ ｏ ｈ ｏ ｏ ｏ ｈ ｏ ｔｏｇ ｎ ｌｅ ｅ ｉ ｎ ｒ ｅｅ ｔｄ ｆｒｆ ￣ ｒｓｕｄ Ｔｈ ｅ ｕ ｔ ｒ ｓｆ ｌ ｈ ｏ ：ａ ｔ ｒ１ ｎ ｅ ｌｕ ｅ ｒ１ ， ｄ ｃ ｌ — ｈ ｒ ｈ ｒ ｔｃ ａ ｉ ｏ ｅ ｒａ ｏ ｏ／ ｈｙ ｏ ｈｏｒｃａ ｉ ｏｓｇｅ １ ｌ ｒ ｃ ｓｉ ｉ ｅｂ ｈ ｄ ｏ ｈｌ ｉｃａ ｉ ｉ，ａｃ ｈ ｓ ｇ ２ ｍ１ Ｉ ｓｃ ｎｔｎｔ ａｔ ｉ ｃ ｄｃ ｎｃ ｎｔ ｔ ｎ ４ ｍ ｌ ｉ Ｌ， ｄ ｃ ｌ ｉ ｃｄ ｄ ａ ０ ｍ ，ｐ ｏ ｅ ｓｎｇ ｔ ｙ ｙ ｒ ｍ ｒ ｃ ｏｒ ｃｄ ８ ｍ ｎ ｌｏ ｏｌ ｄｏ ａ ｅ １ ． ｆ ｏ ｅ ｔ ｆ ｙ ａ ｉ ｅｅｐ ｌ ｉｉ ｃｄ２ ７８％ ， ｔａ ｉ ｃｄ４．７ ％ ， ｌ ｉ ｃｄ５９９％ ，ｉ ｏｅ ｃａ ｉ １ ．６ ｌ ｏｅ ｉ ｃｄ ． ｃｄｗ ｒ ａｍ ｔｃａ ｉ Ｏ． ｓｅ ｒｃａ ｉ ５ ｏ ｅｃａ ｉ ． ｌ ｌｉ ｃｄ ３ ， ｉ ｌｎ ｃａ ｉ Ｏ２３％ ， ｈ ｒ ．６ ％ ． ｎ １ ｎ ｏｔｅ ｓ３ １ Ｋｅ ｒ ｓ ｍ ｉｒ ｂｉｌ ｉｓ Ｃｒ ｐｔｃ ｃ ｓ ｌ ｄ ｅ ｔａ ｔｏ ｙｗｏ ｄ ： ｃ ｏ ａ ｌ； ｙ ｏ ｏｃ ｕ ；ｉ ｘ ｃｉｎ ｏ ｐｉ ｒ
从 附图Ｄ可以看 出， 无水 乙醇加入１ｍ ０ Ｌ时油脂得率 最
高， 乙醇用量为５ Ｌ ｍ 时油脂相对收率为９ ％， ２ 菌体 中的油脂 已经基本提取出来， 考虑经济节约故选择 乙醇的用量为５ 。 ｍＬ ２５萃取有机溶剂 的确 定 ． 油脂 不溶于水 ， 易溶于 乙醚、 石油醚 、 汽油 、 丙酮 、 苯、
微 生物油脂 （ ｃｏ ｉ ｌ 又称单细胞油脂 （ｎ ｌｃｌ ｍｉ ｂａｏ ｓ ｒ ｌ ｉ） ｓ ｇｅ ｅｌ ｉ ｏｌＳ Ｏ） 是微 生物 菌体在 一定培 养条件 下 ， 化碳水化 ｉ Ｃ ， ， 转 合物 碳氢化合物 在细胞 内积累的大量 油脂 。微 生物油脂 作为一种新型油脂引起人们 的广泛关注 ， 微生物油脂 的开 发与利用不仅丰 富了传统 的油脂生产技术 ， 而且将会成 为
率 的影 响， 并通过 正交试 验确定 了最佳提取条件 。
１材 料 与 方 法
开展微生物油脂 的研 究 ， 首先要进行油脂的提取和分 析 。目前 ， 究者常采用的油脂提取方法主要有索 氏抽提 研 法、 有机溶剂浸提法、 酸热法 、 超临界Ｃ ： Ｏ 萃取法等【 索 氏 ” 。
１ ． １实验 菌种
间为 ８ ｎ ｍｉ。 ２ 无 水 乙醇 用 量 的确 定 － ４ 在酸热法提取油脂过程 中， 胞酸解后加入适量 的 乙 细
盐酸用量对 油脂提取 的影 响大于酸热 时间大于 乙醇用量 对 油脂 提取的影响 ； 在试验范 围内， 酸用量 、 盐 酸热时间和 乙醇用 量的Ｆ 值均不显 著。 试验 的最佳提 取条件为Ａ２。， ＢＣ ， 即盐酸用量为１ｍＬ 酸热时间８ ｎ 无水 乙醇用量 １ｍＬ ０ ， ｍｉ， ０ 。
Ｉｓｔｔ Ｆ ｏ ｎ ｅ ｅｔｔｎＩｄ ｓ ｅ ｆ ｈｎ ｏｇＰｏ ｉｃ，ｉａ ５ ０ ３ Ｃ ｉａ ｎ ｔｕｅ ｆ ｏ ｄａｄＦｒ ｎ ｉ ｎ ｕｔ ｓ Ｓ ａｄ ｎ ｒｖ ｅＪ ｎ２ ０ １ 。 ｈｎ ） ｉ ｏ ｍ ａ ｏ ｉ ｒ ｏ ｎ ｎ Ａ ｓａｔＴ ｅ ｃ －ｅｔｇｅｔ ｃｏ ａ ｓ ｐｅ ｎ ｆｃｅｔ ｔ ｄ ｆｉ ｄ ｘｒ ｔ ｎ Ｔ ｅｓ ｇｅ ａｔｒｕｈａ ｈｄｏｈ ｒ ｃ ｎｅｔ ｔ ｎ ｂｔ ｃ ｈ ｉ ｈａｎ ｒ ｔｎｗ ｓ ｍ ｌａｄｅ ｉ ｈ ｉ ｔ ｃｉ ． ｈ ｎｌ ｆ ｏ ｃ ｓ ｙ ｒｃｌ ｃ ｉ ｃ ｃｎｒ ｏ ， ｒ ： ａｄ ｉ ｘａ ｉ ａｉ ｉ ｎ ｍｅ ｏ ｏ ｌ ｅ ａ ｏ ｐ ｉ ｃ ｓ ｏ ａｄｏ ｉ ａ ｉ
总第 ２ ８期 １ ・ ４５ １ ．
加， ０ ｎ 在１ｍｉ时达到最大；０ ｎ １ｍｉ后随着酸热时 间的增加 ， 油
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ＫＯ Ｇ ａｍｉ Ｚ ＡＯＸｉ ｇ ｉｇ， Ｉ Ｎ ａｊｎ， ＵＯ Ｔａｑｎ３ＬＵＪ ｎｕ Ｎ Ｆ ｎ ｎ， Ｈ ａ ｙｎ ￣ＴＡ Ｙ ｎｕ Ｇ ｉ ｉ ， Ｉ ａｊｎ。 ｎ ｎ ｇ ｉ
（ ． ｏｌｇ ｆ ｏ ｃｅ ｃ ｎ ｎ ｉ ｅｒｎ ， ｈ ｎ ｏ ｇＡｇ ｉｕｔｒｌ ｉｅｓｔ， ａ＇ ７ ０ ８ ｈｎ ； １ Ｃ ｌ ｅｏ Ｆｏ ｄＳ ｉｎ ｅａ ｄＥ ｇｎ ｅ ｇ Ｓ ａ ｄ ｎ ｅ ｉ ｒ ｌ ａ ｖｒｉ Ｔ ｉ ｎ２ １ １ ，Ｃ ｉａ ｃ ｕ Ｕｎ ｙ ａ ２ Ｆｏ ｄ＆ Ｆ ｒ ｎｔｔ ｎＥ ｇｎ ｅｉｇＫｅ ａ ｆ ｈ ｎ ｏ ｇＰ ｏ ｉ ｃ ｉａ ５ ０ ￣ Ｃ ｉａ ３ Ｒｅｅ ｒｈａ ｄＤｅ ｉｎ ． ｏ ｅｍｅ ａｉ ｎ ｉｅ ｒ ｏ ｎ ｙＬ ｂｏ Ｓ ａ ｄ ｎ ｒ ｖｎ ￣Ｊ ｎ２ ０ １ ｈｎ ； ． ｓ ａｃ ｎ ｎ ｓ ｇ
萃 取时 ， 脂得 率最 高 ； 油 并对 提 取 的油 脂进 行 了气 相 色谱 分析 ， 果表 明 ： 结 棕榈 酸为 ２．８ 硬 脂 酸为 ４ ７ 油 酸为 ５．％， 油 酸 为 ０７％， ． ％， ５ ９９ 亚
１ ． ％， １ ６ 亚麻 酸 为０２ ％， 他３ １％。 ３ ． ３ 其 ． ６ 关 键 词 ： 生物 油 脂 ； 微 隐球 酵母 ； 脂提 取 油
中图分 类号 ： ３ ３ ５ Ｑ９ — ３
文 献标 识码 ： Ｂ
文章 编号 ：２ ４ ５ ７ （０ ０ ０ — １ ３ ０ ０ ５ — ０ １ ２ １） ５ ０ ４ — ３
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工 业 化 生 产 油 脂 的有 效 途 径 之 ～ 。
使 细胞壁进 一步被破坏， 然后用有机溶剂萃取 出细胞 中的
油 脂Ⅲ。
本研究 以实验室 筛选的一株 产油脂 的隐球酵 母菌 为
原 料 ， 中考 查 了酸热 法 中盐 酸浓 度 、 集 盐酸 用量 、 热 时 酸 间、 无水 乙醇用 量 、 有机 溶剂种类 等单 因素 对油脂提 取得
以上 培养基 均在１ ５ ℃灭菌２ ｍｉ。 ｌ ０ ｎ
１３ 试 剂 ＿
无水 乙醚， 石油醚 （０ ６ ） 正 己烷 ， ３～ ０ ， 无水 乙醇 ， 盐酸 。
１ 方 法 ． ４
１． ． １酵母细胞 的培养 ４ 将 低温 保 存 的 隐球 酵 母接 种 于Ｙ Ｐ Ｅ Ｄ固体 斜 面上 ，
经验交流
中 国 酿
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２１ 年 第５ ００ 期
总第 ２ ８期 １ ・４ １
酸 热 法提 取酵 母 油脂 条件 的研 究
孔几敏 赵祥 颖 ｚ ， ， 军 国天 庆３ 田延 ， 刘建 军
（． １山东农业大学 食 品科学与工程学院 ， 山东 泰安 ２ ０ １； ． ７０ ８２山东省食 品发 酵工程 重点实验 室， 山东 济 南 ２ ０ １ ； ． ５ ０ ３ ３山东省食 品发酵工业研 究设计 院， 山东 济南 ２ ０ １ ） ５ ０ ３
１ ． ２培养基
Ｙ Ｐ 培养 基 ： 萄￣ ２ ｇ ， ＥＤ 葡 ｏ／ 酵母 粉 １ｇＬ 蛋 白胨 ｌｇ ， Ｌ ０ ／， Ｏ／ Ｌ
ｐ ５ ～ ． 为液 体种子培养基 ； 面培养基 是在Ｙ Ｐ Ｈ． ６作 ８ ０ 斜 Ｅ Ｄ培 养 基的基 础上加上琼脂２ ｇ ０。
发酵培养基： 葡萄糖 １０ ／， ２ ｇ 硝酸钾 ｌ／， Ｌ ｇ 玉米浆２ ｇＬ Ｌ ． ／， ５
表２ 酸 热 提 取 油 脂 Ｌ （ｐ正 交 试 验 数 据 及 结 果 分 析 。３）
Ｔ ｂｅ ２ ｂ（ ３Ｏｒ ｏ ｏ ａ ｓ ｓ ｎ ｈ ｓ ｌ ａ ａｙ ｉ ａ ｌ ． ３ ） ｔ ｇ ｎ ｌｅ ｔ ｉ ａ ｄ ｔ ｅ ｒ ｕｔ ｎ ｌｓ ｈ ｔ ｌｔ ｅ ｓ
醇 可 以除去杂 蛋 白、 多糖和 色素 【 并且 可 以减轻乳 化 作 ４ ｌ ， 用， 有利于油脂 的萃取 。试验考查 了无水 乙醇用 量对 油脂
摘 要： 以一株 隐球 酵 母为 材料 ， 查 了酸 热 法 中盐 酸浓 度 、 考 盐酸 用 量 、 热 时 间 、 酸 无水 乙醇用 量 、 有机 溶 剂单 因素对 油 脂提 取 收率 的 影响， 并通 过 正交试 验 确定 了０５干 菌 体用 １ｍＬ４ ｏ Ｌ ． ｇ ０ ｍ ｌ 盐酸 沸水 浴 处理 ８ ｎ 加 入无 水 乙 醇用 量 １ｍＬ 用 乙醚 １ｍＬ 石 油醚 １ｍＬ ／ ｍｉ， ０ ， ２ 和 ２
实验室保藏 的一株 隐球酵 母 （ ｒｐｏ ｏｃ ｓ［ Ｃｙ ｔ ｃｕ）］ ｃ ３ 。
抽提法 是经典 的脂肪提取方法 ， 该方法利 用石油醚等长时 问回流干菌体 ， 浸提菌 体 内的油脂 类物质 ， 取 的效 果较 提
好， 该法样 品需求 量大， 作时间长 ， 但 操 不适合作为菌株快 速筛选和条件优化 时的提取方法 。超临界Ｃ ： 取法需要 Ｏ萃 专用设备 ， 只适合规模化提取 。有机溶剂法 是用 有机溶剂 直接浸 提细胞 ， 收率较低 ， 并且所用溶 剂毒性较 大 。相 比
来结构紧密 的细胞壁变 得疏松 ， 再经沸 水浴及速冻 处理 ，
收 稿 日期 ： ０ ００ —９ ２ １ —１１
作者简介： 孔凡敏 （９ ３ ， 山东济 宁人 ， 士研 究生； 建军＋ 教授 ， １ ８ 一 女， ） 硕 刘 ， 通讯 作者 。
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２１ 年 第５ ００ 期
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