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生猪屠宰检疫的流程及检疫要点生猪屠宰检疫是指在猪只屠宰前，对猪只进行检测并排除有害物质，以确保猪肉安全卫生的一项程序。
下面将详细介绍生猪屠宰检疫的流程和要点。
1. 接触初检：在猪只进栏前，对猪只的精神状态、体质素质等进行初步检查。
2. 外观检查：目视检查猪只的体表，如是否有皮肤病、伤口、肿瘤、疮痂等异常情况。
3. 内脏检查：猪只经过宰杀后，进行内脏的检查，主要检查肝、肺、脾、肾等脏器是否有异常情况。
4. 环节检查：对于猪只的肉类进行检查，主要检查是否有生肉“黑心”、溃疡、肉中带水和臭味等情况。
5. 核查管理：对猪只的来源、存储等信息进行核查，确保生猪的信息真实。
1. 应选择正规、有资质的屠宰场进行屠宰，遵守安全卫生规范，建立标准屠宰工艺，做好猪只的检疫工作。
2. 应选用无菌、干净的屠宰设备，并做好设备的保养和消毒工作。
3. 应定期对屠宰场的设施设备、人员的健康情况、认真做好疫情监测。
4. 屠宰后应对生猪肉进行分类，进行质量检验，严格控制猪肉的出厂质量。
5. 应建立健全的追溯管理制度，对生猪来源、交易、运输、保存、屠宰等环节进行全程监管，确保生猪肉的质量安全。
6. 对屠宰过程中发现的问题，应及时对处理，在屠宰过程中要有质量管理人员到场监督。
7. 屠宰过程中尽量减少手工进程，采用自动化设备，避免猪只在屠宰过程中受到伤害。
8. 屠宰场应建立于区分不同等级的储存场所，避免产生误交混淆等情况，使各种猪肉得到高质量的区分储存。
9. 应保证员工的工资福利和安全防护措施的配备，加强员工的培训和安全意识的理解，增强员工的责任感和质量意识。
通过以上详细介绍，相信大家对生猪屠宰检疫的流程和要点有了更为深入的了解。
同时，我们也要明白，做好生猪屠宰检疫工作，不仅要依靠检疫工作人员的技能，更需要全社会的共同努力，做好管理和监督，提高生猪肉质量安全的保障水平。
2024年畜禽屠宰质量安全风险监测计划为落实《中华人民共和国畜牧法》规定，及时掌握畜禽屠宰环节质量安全风险状况，有针对性开展监督管理，不断提高畜禽产品质量安全水平，制定本计划。
一、任务分工2024年畜禽屠宰质量安全风险监测包括部级监测和省级监测两部分。
（一）部级监测1.病原微生物监测。
重点针对跨省流通产品的生猪屠宰企业开展病原微生物风险监测，包括冷却肉和热鲜肉中菌落总数、大肠菌群、沙门氏菌，猪肉表面和屠宰环境中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特氏菌。
农业农村部屠宰技术中心（以下简称“部屠宰技术中心”）负责河南省和辽宁省共200份微生物样品监测任务，中国动物卫生与流行病学中心（以下简称“动卫中心“）负责吉林、山东、湖北、广西、四川、陕西、青海等7省份共1000份微生物样品监测任务。
2.违法添加物和药物残留监测。
重点针对跨省流通产品的猪、牛、羊屠宰企业开展违法添加物和药物残留监测。
对猪肝、牛肝和羊肝开展7种B-受体激动剂（克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林、西马特罗、氯丙那林和妥布特罗）违法添加监测、6种糖皮质激素（泼尼松、泼尼松龙、地塞米松、倍他米松、倍氯米松和氢化可的松）残留监测。
监测任务由部屠宰技术中心、动卫中心、中国农业科学院农产品加工研究所共同承担（监测任务见附件DO （二）省级监测重点针对省内流通产品的猪、牛、羊屠宰企业开展水分监测、违法添加物和药物残留监测。
1.水分监测。
对猪肉（2号或4号肉）、牛肉（黄瓜条或外脊）、羊肉（后腿或里脊）开展水分监测。
2.违法添加物和药物残留监测。
对猪肝、牛肝和羊肝开展7种B-受体激动剂（克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林、西马特罗、氯丙那林和妥布特罗）违法添加监测、6种糖皮质激素（泼尼松、泼尼松龙、地塞米松、倍他米松、倍氯米松和氢化可的松）残留监测。
原则上省内生猪屠宰企业数量在10家及以下的全部抽取，10—200（含）家的抽取15%（最少抽取10家），200家以上的抽取10%（最少抽取30家），年屠宰20000头（含）以下企业数量占比不低于全部监测企业的70%o省内牛屠宰企业数量在10家及以下的全部抽取，10—100（含）家的抽取25%（最少抽取10家），100家以上的抽取15%（最少抽取25家），羊屠宰企业抽取规则同上；年屠宰3000头（含）以下的牛屠宰企业或年屠宰30000只（含）以下的羊屠宰企业数量占比不低于全部牛或羊监测企业的70%。
农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2008,16(3):373~379*基金项目： 国家自然科学基金资助项目 （No.30771588） 资助。
**通讯作者。
Author for correspondence.教授， 主要从事为兽医公共卫生及黏膜免疫病理学研究。
Email:<sheruiping@>. 收稿日期：20070810 接受日期：20070910 ·研究论文· 屠宰猪肝脏中戊型肝炎病毒 （HEV ） 的检测及组织病理学观察 *王英华 1 ， 韦海涛 2 ， 佘锐萍 1 **， 赵景义 2 ， 李文贵 1 ， 李秀敏 2 ， 刘利强 1 ， 韩德平 1 ， 王德成 1 ， 于 品 1， 孙 泉 1（1.中国农业大学动物医学院， 北京 100094； 2.北京畜牧兽医总站， 北京 100107 ）摘要： 从北京、 河北和河南三地的屠宰场共采集了 581头屠宰猪的肝脏。
用抗 人戊型肝炎病毒 （HEV ） 抗体做肝脏中HEV 抗原的免疫组织化学染色，用针对 ORF2 区设计的通用引物进行巢式RTPCR ， 结果发现，6 个地区 581 头屠宰猪的肝脏 HEV 免疫组织化学阳性率都在 90%以上。
从 114份肝脏样品中扩增到2条产物， 与预期片段 348bp 大小基本一致， 位于 ORF2区， 序列分析、 比较显示， 扩增出的 2 个片段(GenBank 登录号为： EU326142 和EU375565)同源性为 99.2%， 与 基因玉、 域、 芋和郁型的同源性分别为 74.9%～78.7%，73.9%～74.1%， 74.6%～77%和 81.2%～93.7%。
用扩增的核苷酸片段绘制的 基因进化树显示，2个分离株与 基因Ⅳ型AJ344171、AJ344172和 AJ344183位于同一分支， 属于 基因郁型。
关键词： 戊型肝炎病毒 （HEV ）； 免疫组化； 组织病理学； 巢式 RTPCR ； 屠宰猪 中图分类号: S185，S188 文献标识码: A 文章编号:10061304(2008)03037307Detection of the （HEV ）and Its HistopathologicObservation in Liver of Slaughtered SwineWANG Yinghua 1 ,WEI Haitao 2 ,SHE Ruiping 1 **,ZHAO Jingyi 2 ,LI Wengui 1 ,LI Xiumin 2 ,LIU Liqiang 1,HAN Deping 1 ,WANG Decheng 1 ,YU Pin 1 ,SUN Quan1Five hundred and eighty one swine liver samples were collected from Slaughterhouse in Beijing,Henan and HebeiProvinces.Immunohistochemical stain and nested RTPCR were carried out to analysis the current status of(HEV)infection.Results showed that over 90%of the livers were positive for immunohistochemical stain.And 2positive samples for HEV RNA were found from 114liver samples detected by nested RTPCR.Sequence comparison showed that 2Beijing strains(GenBank accession No.EU326142 and EU375565) shared 99.2%homology within each other,and 74.9%～78.7%,73.9%～74.1%,74.6%～ 77%and 81.2%～93.7%to genotypes Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ and Ⅳ,respectively.Phylogenetic tree analyses further revealed that the two positive swine HEV isolates were closely related to HEV AJ344171， AJ344172and AJ344183isolates andbelonged to genotype Ⅳ.;immunohistochemistry;histopathology;nested RTPCR ;slaughtered swine,戊型肝炎 （hepatitis E ） 是由戊型肝炎病毒 （,HEV ）引起的一种急性病毒性肝 炎。
我国所发生的急性病毒性肝炎中， 戊型肝炎约占 10%， 而且戊型肝炎致死率高， 尤其在孕妇中致死率 高达 25%， 极大地危害着人类的健康。
从 Meng （2003） 首次从美国的猪血清中分离到猪戊型肝炎病毒(SHEV) 野毒株至今的 10 年间,越来越多的研究 证明戊型肝炎是一种人兽共患病。
猪是戊型肝炎病 毒最主要的动物贮存宿主（Emerson and Purcell ，2003； Tamada ， 2004）。
Tamada .（2004）、Yazaki（2003） 和 Matsuda （2003） 曾报道了在日本有人因吃了未煮熟的猪肝发生戊型肝炎的病 例，而且从病人体内分离到了和猪肝脏中相同的病毒，这表明猪的 HEV 能感染给人。
我国是养猪大 国， 猪肉是最主要的肉食品之一， 屠宰猪的健康状况 如何直接关系到人类的食品安全，而屠宰猪 HEV 的感染情况也可能会影响人类 HEV 的感染与流 行。
农 业 生 物 技 术 学 报 2008年本研究采用免疫组织化学对 6个地区 581头屠 宰猪肝脏中 HEV抗原的分布情况进行了观察检测,并用对 HEV ORF2区设计的通用引物对屠宰猪肝 脏样品进行巢式 RTPCR，扩增的产物测序后与人 的 HEV核苷酸的同源性比较，以了解屠宰猪肝脏 中 HEV的感染情况及其与人类 HEV的关系。
1材料和方法1.1 材料1.1.1肝脏的来源 肝脏组织采自北京、河北和河 南的生猪屠宰场， 猪源分别来自黑龙江、 吉林、 辽宁、 河北、 北京等地的集约化猪场， 河南的个体散养户和 集约化猪场饲养的商品猪。
1.1.2试剂 兔抗人 HEV多克隆抗体（一抗）， 购 自北京博奥森生物有限公司；二抗及其它免疫组化 试剂购自北京中杉生物有限公司； Trinzol购自北京 普博欣公司； DNA聚合酶和 dNTP购自北京博 大泰克公司； 引物购自北京奥科生物公司。
1.2 方法1.2.1肝脏的采取 在屠宰加工的流水线上，猪被 开膛后，迅速由肝脏左叶边缘向内剪取大约 3cm 长、 2cm宽的长条形组织块，置于多聚甲醛 戊二 醛混合固定液中固定。
1.2.2病理组织切片制作和免疫组织化学染色按常规石蜡切片制作技术制作连续切片，分别进行 苏木素 伊红染色和 HEV免疫组织化学染色。
苏木 素 伊红染色按常规方法进行，免疫组织化学染色 方法按试剂操作说明书进行。
阴性染色对照不加一 抗。
1.2.3免疫组织化学染色结果的判定 在显微镜 下， HEV免疫组织化学染色阳性反应信号为棕红色 或棕黄色团块状或颗粒状。
1.2.4巢式 RTPCR检测 引物依据 GenBank中注 册的各基因型， 设计通用引物， P1和 P2为外引物， P3和 P4为内引物。
P1： AAYTATGCMCAGTACCGGGTTG；P2:CCCTTATCCTGCTGAGCATTCTC；P3： GTYATGCYTYTGCATACATGGCT；P4： AGCCGACGAAATYAATTCTGTC。
进行巢式 RTPCR检测。
Trizol法从屠宰猪肝 脏中提取 RNA，逆转录体系：RNA10滋 L， 5伊逆转 录缓冲液 4滋 L，20mmol/L P 2 0.5滋 L，10mmol/L dNTP2滋 L，MMLV（100U/滋 L）1滋 L,Rnase Inhibitor0.5滋 L， DEPC水 2滋 L， 混匀后 42 ℃ 1h， 70 ℃10min。
第 1轮 PCR体系：4滋 L cDNA，10伊 PCR buffer2.5滋 L，引物 20mmol/L P1、 P 2各 0.5滋 L， 10mmol/L dNTP1滋 L， DNA聚合酶 0.5滋 L（2.5U/滋 L）， 加灭菌水补足至 25滋 L。
扩增条件： 预变性 94 ℃4min； 94 ℃ 45s， 55 ℃ 45s， 72 ℃ 45s ， 30个循环； 72 ℃延伸 10min。
第 2轮 PCR体系： 取 4滋 L第 1轮 PCR产物， 其它同上。
第 2轮 PCR产 物用 2%的琼脂糖凝胶电泳， 紫外灯下观察结果， 回 收目的条带， 送优博基因公司测序。
1.2.5对测序结果进行多重分析并绘制遗传进化 树 用 DNAMAN和 MEGA4.0比较分离株 HEV BJ1和 HEVBJ2的核苷酸序列及其与各基因型的 核苷酸序列同源性， 并绘制遗传系统进化树。
2结果2.1 HEV免疫组织化学染色观察2.1.1各地屠宰猪肝脏中 HEV抗原免疫组织化学 检测结果统计 六个地区 HEV抗原免疫组织化学 染色结果除了采自河南一个偏僻的小村庄 33头屠 宰猪肝脏， 阳性检出率为 33.3%外， 其它各地(包括 来自河南集约化猪场饲养的商品猪)的阳性检出率 均在 90%以上， 甚至高达 100%。
各地区 581例屠宰 猪肝脏中 HEV抗原免疫组织化学检测结果见表 1。
表 1581例屠宰猪肝脏中 HEV抗原免疫组织化学检测结果 Table1Detection results of HEV antigen in liver of the581 samples slaughtered swine by immunohistochemical analysis2.1.2屠宰猪肝脏中 HEV抗原的分布定位 虽然 六个地区屠宰猪肝脏 HEV免疫组织化学阳性检出 率都很高，但各地屠宰猪肝脏组织内 HEV抗原免 疫组织化学阳性反应信号的强弱不尽相同，其中北 京地区屠宰猪肝脏组织的阳性反应信号最强，其次 是河北、东北三省，来自河南的屠宰猪肝脏组织内 HEV阳性反应信号最弱。
