HIV初筛阳性标本处理及确认

HIV抗体初筛及初筛阳性标本处理制度
一、概述
初筛用的HIV抗体检测试剂必须是HIV－1/2混合型，常用的初筛检测方法有固相酶联免疫吸附试验（ELISA）、明胶颗粒凝集法（PA）、快速检测法等；由于受试剂组份、标本情况、实验室环境、仪器设备、实验室操作等的影响，出现阳性反应，所以需要一种特异性较高的试剂对初筛阳性的结果予以确定。

确认试验方法包括免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验（LIATEK HIVⅢ）、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）。

国内常用的是WB。

对于所有经WB确认的标本必须重新采集标本用明胶颗粒凝集法或快速法进行最后复检。

二、检测流程图
1、HIV抗体筛查检测流程
2、HIV抗体确认流程。

1 范围本文件规定了用于人免疫缺陷病毒（HIV）检测的全血、血清、血浆、细胞样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。

2 样品种类及相应的用途●全血、血清、血浆样品可用于HIV抗体检测。

●抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。

●血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。

●全血、血浆样品可用于HIV核酸的定性检测。

●全血可用于HIV-1分离培养。

3 操作步骤3.1 采样前准备根据检测项目的具体要求，确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法，按照临床采血技术规范的要求操作，遵守生物安全要求。

要检查所需物品是否已备齐，是否在有效期内，有无破损，是否足量，特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致，并注明样品采集时间。

选择合适的室内（外）采血空间，受检者坐（卧）于合适的位置，准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。

●采血前，先对装有样品的离心管或滤纸进行标记，标记的内容至少应包括：患者姓名、送检科室、床号3.2 样本采集和处理●抗凝全血：消毒局部皮肤，用加有抗凝剂（EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠）的真空采血管抽取适量静脉血，或用一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管中，轻轻颠倒混匀6～8次，备用。

●末梢全血：消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指。

1岁以下儿童采用足跟部）。

用采血针刺破皮肤，用无菌纱布擦掉第一滴血。

收集滴出的血液，备用。

●血浆：将采集的抗凝全血1500～3000r/min离心15min，上层即为血浆，吸出置于合适的容器中，备用。

●血清：根据需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取5～10ml静脉血，室温下自然放●置1～2h，待血液凝固、血块收缩后再用1500～3000r/min离心15min，吸出血清，置于合适的容器中，备用。

实用文档
HIV 抗体初筛实验室疫情报告制度
初筛检测中发现 HIV 抗体阳性反应的标本，应尽快（城区一般要求在 48 小时内，农村要求在 96小时内）将血样连同原始资料（包括厂家批号、试剂种类、有效期，如 ELISA 实验应附上阴性、阳性对照值，Cutoff 值及样品 OD 值）和送检化验单送卫生行政部门指定的初筛中心实验室，再转送确认实验室，或直接送 HIV 抗体确认实验室。

送检化验单必须由初筛实验室一名直接实验操作人员和一名中级技术职称以上的负责人员签名。

初筛实验室不得向受检者宣布初检阳性反应结果；做好标本收集与检测登记工作，每月 5 日按统一表格向卫生行政部门指定的 HIV 抗体初筛中心实验报告检测情况，如无 HIV 抗体初筛中心实验室，则直接向省级 HIV 抗体确认中心报告。

韩城市中医院HIV初筛实验室SOP文件一、样本接收登记、处理程序1.样本的接收1.本院的样品接收2.来自本院门诊和病房的标本由门诊和病房的护士采集，先由检验科标本验收者收取。

规定时间内，由HIV筛查实验室进行登记接收。

3.检查样品的状况，记录有无溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。

对于不合格标本（如溶血、乳糜血等），及时通知护士重新采集。

4.院外的样本接收5.含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。

6.核对标本与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。

如有发现溢漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。

7.检查样品的状况，记录有无严重溶血，微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况，如果污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃，并要将样品情况通知送样人。

8.打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。

样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。

同时应戴口罩，防护镜，以防皮肤或黏膜污染。

9.因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不能用于荧光方法测试。

10.接收样品是应填写HIV筛查试验室标本接收登记。

2.样本的登记记录HIV筛查试验室样本登记表，实验室收到标本后应及时进行有关参数登记，包括受检者的姓名、性别、人群类别、试管编号、检验结果（初筛）、送检日期、报告日期和3.样本的处理标本在室温下自然放置1-2小时，待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min，吸出血清备用。

3.样本的保存用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下，短期（1周内）进行检测的样品可存放于2-8℃。

5.样品的运送实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。

1.应采用WHO提出的三级包装系统1.1第一层容器：装样品，要求防渗漏。

样品应置于带盖的试管内，试管试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者的姓名、种类和采集时间。

一、
目的
如何处理HIV初筛阳性标本及确认
十九、责任
HIV初筛实验室工作人员及使用者严格遵守
二十、程序
１、对HIV抗体初筛试验，呈阴性反应的样品可出具“HIV抗体阴性”报告；对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。

如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告“HIV抗体筛查报告”阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，则应按照《全国HIV 检测管理规范》的要求送艾滋病确认实验室进行确证试验。

对初筛试验呈阳性反应者不能出阳性报告，可出具“HIV抗体待复查”报告。

2、初筛试验呈阳性反应样品，需送上级实验室进行复测或确认，需要填写“HIV抗体复测送检单”，经实验室负责人和1名专业检验人员审核签字。

送疾病控制中心艾滋病筛查中心实验室。

3、若艾滋病中心实验室仍未能确认之标本，应在备注中注明“3个月后复检”，同时进行以下处理：每3个月随访复检一次，连续2次，共6个月。

如果检测时暴露时间已超过3个月，则在3个月后随访一次，将前后2份样本同时送检，对仍呈不确定或阴性反应则报告“HIV抗体阴性”。

如果在随访期间出现带型进展，符合HIV抗体阳性判定标准则报告“HIV 抗体阳性”。

如果确证中心实验室难以确证之样本，则送国家艾滋病参比实验室确证。

3、初筛试验呈阳性反应样品，进一步送检、本室冰冻保存后不在需要的样品的处置应符合《实验室生物安全通用要求》和《消毒技术规范》。

4、从HIV实验室出来的所有废弃物，包括不再需要的样品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，并在高压消毒后再进行处理或废弃。

HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程1. 标本采集1.1 采集过程- 标本采集应由经过相应培训的医务人员进行。

- 采集前应充分向受检者解释采集过程，并获得其知情同意。

- 采集时应采取严格的无菌操作，以避免污染。

- 一般采集静脉全血样本，采集量不少于5ml。

1.2 标本处理- 采集后的标本应尽快送至实验室，避免暴露时间过长。

- 采用专用的血液收集管，确保标本完整无漏。

- 标本送至实验室前，应妥善保存并严禁摇晃。

2. 送检流程2.1 标签标识- 标本送检前，应在采集管上粘贴完整、清晰的条码标签，以确保标本追踪可靠性。

2.2 填写送检单- 标本送检时，应填写完整的送检单，包括受检者个人信息、采集时间、送检目的等相关信息。

2.3 送检方式- 送检可选择邮寄或快递方式，确保标本能够安全送达实验室。

- 快递包装需符合相关规定，避免标本在运输过程中受损。

3. 处理流程3.1 标本分离- 实验室接收标本后，应立即进行核酸分离，以保证分析的准确性。

3.2 核酸提取- 将分离的标本进行核酸提取，提取后的核酸可用于后续的检测操作。

3.3 核酸检测- 采用合适的核酸检测方法，如聚合酶链式反应（PCR）等，对提取的核酸进行检测。

3.4 结果解读- 核酸检测结果应由经验丰富的专业人员进行解读，并做出相应的结果报告。

4. 结论本文档简要介绍了HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程。

标本采集要求医务人员进行，并在采集前向受检者解释采集过程。

送检时需填写完整的送检单，并确保标本的追踪可靠性。

实验室应迅速进行标本分离、核酸提取和核酸检测，并由专业人员进行结果解读。

以上流程的规范实施可提高HIV病毒核酸检测的准确性和可靠性。

样品采集和处理操作规程1目的为了做到安全、规范地进行样品采集和处理，保证合格的样品质量。

2职责检验人员应严格执行本规定，质量监督员对执行情况进行监督。

3适用范围适用于艾滋病抗体和CD4+T淋巴细胞的检测工作。

4样品的采集和处理操作程序：艾滋病最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。

唾液或尿液有时也可作为测试样品。

常用的血液样品的采集和处理方法如下。

4.1血清样品采集和处理：（1）用一次性注射器（或真空采血管）抽取3-5ml静脉血，室温下自然放置1-2h，待血液自然凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min，吸出血清备用。

（2）对所有采集的样品及样品送检单进行现场统一编号，并注明采样日期，一周内检测的样品置2-8℃保存，对需长期保存的样品置-20℃冷冻保存。

4.2抗凝血样品采集和处理：（1）用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管）抽取3-5ml静脉血，立即握住试管两端，颠倒混匀数次，将血液与抗凝剂充分混匀，室温下自然放置1-2h，分离出血浆和血细胞备用。

（2）对做CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品，选用加有K3EDTA或肝素或枸椽酸钠的抗凝管。

采血后立即握住试管两端，颠倒混匀数次，将血液与抗凝剂混匀，以防止凝固，收集样品在24小时以内，送检至省确认实验室或中心筛查实验室。

（3）对所有样品及样品送检单进行现场统一对应编号，并写明日期和收集时间。

4.3采集样品注意事项：（1）采集样品原则上按临床采血技术规范操作（按试剂盒说明书,有特殊要求除外）。

（2）采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者或艾滋病（AIDS）病人血液、体液的操作，应戴双层手套。

（3）对采集样品时产生的废弃物，严格按照感染性医疗废物处理要求进行处理。

4.4采样器具的处理：（1）为防止疾病的传播和造成不必要的事故，必须以安全为原则实行“一人一针一管一消毒”制度。

HIV测定操作规程1.引言HIV（人类免疫缺陷病毒）是一种通过血液、乳汁、精液和阴道分泌物等体液传播的病毒，可以引发艾滋病。

为了及时发现和诊断感染HIV的人群，保障公众健康和人类生命安全，建议建立专业的HIV测定操作规程。

2.目的3.适用范围4.测定方法4.1初筛方法：初筛采用ELISA（酶联免疫吸附试验）方法进行，检测适用于全血、血浆和血清。

4.2 辅助确认方法：初筛阳性样本需进行辅助确认测试，如Western blot法和免疫荧光法等。

4.3PCR（聚合酶链反应）方法：PCR方法对于早期感染者的检测准确性更高，可以用于初筛阳性样本的二次确认。

5.检测前准备5.1检测前应对检测仪器和试剂进行检查和校准。

5.3检测人员应穿戴好防护用品，包括实验服、手套、护目镜等。

6.标本采集6.1标本采集要使用一次性采血器，避免交叉感染。

6.2标本采集需要标记好个人信息和采集时间，以避免混淆。

7.样本处理7.1样本处理的过程中要注意避免外界污染和交叉感染。

7.2样本离心后要准确定量取用，避免过多或过少。

8.试剂添加8.1操作人员须按照试剂说明书要求添加试剂。

8.2添加试剂的过程中要避免污染和交叉感染。

9.检测过程9.1检测过程中要按照试剂说明书的要求操作，遵循正常的操作步骤和流程。

9.2检测中如发现异常，应及时记录并报告相关人员。

10.结果判断10.1根据试剂说明书的要求，判断样本的检测结果。

10.2结果判断要进行复核，确保准确性。

11.结果记录与报告11.1将检测结果记录在指定的表格中，确保结果的准确和可追溯性。

11.2检测结果应及时报告给相关人员或机构，确保及时采取相应措施。

12.质量控制12.1进行质量控制是确保检测结果准确性的重要手段，应定期进行质量控制测试。

12.2检测结果与质量控制结果的差异超出规定范围时，应及时进行排查和修正。

13.安全注意事项13.1操作人员须穿戴好防护用品，避免感染风险。

13.2操作过程中要注意操作规范，避免交叉污染。