实验一硫酸－苯酚法测多糖含量1．目的要求测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量2．方法原理糖在浓硫酸作用下，水解生成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚缩合成橙黄色化合物，且颜色稳定，在波长490 nm处和一定的浓度范围内，其吸光度与多糖含量呈线性关系正比，从而可以利用分光度计测定其吸光度，并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量，本方法可用

苯酚-硫酸法苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。[试剂]6%苯酚：先配置80%苯酚：80g苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20g水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。再配置6%苯酚：取75ul的80%苯酚于烧杯中，加入960ul水（每次测定均需现配），测定的时候就用6%的苯酚来测！浓

一、硫酸苯酚法测多糖含量1、试剂配制1. 浓硫酸：分析纯，95.5%2. 5%苯酚：取苯酚5 g，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后，置棕色试剂瓶中，冰箱中冷藏储存备用。3. 标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）或分析纯葡萄糖。准确称取20m g经105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中，蒸馏水溶解定容。2、制作标准曲

一、硫酸苯酚法测多糖含量1、试剂配制①浓硫酸：分析纯，95.5%②80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。（每次测定均需现配）③5%苯酚：取苯酚100 g，加铝片0. 1 g和碳酸钠0. 05 g，常压蒸馏,收集182℃馏分。称取该馏分(100%苯酚)5 g，置100 ml容量瓶

多糖浓度测定及标准曲线谭夕东苯酚-硫酸法1. 对照品的溶液的制备取干燥至恒重的无水葡萄糖0.1g，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。供试品的溶液的制备精密量取本品50ml，置250ml量瓶中，加30%硫酸锌溶液5ml，在水浴中加热5分钟后，在振摇下立即加入亚铁氰化钾试液5m

实验一硫酸－苯酚法测多糖含量1．目的要求2．测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量3．2．方法原理4．糖在浓硫酸作用下，水解生成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚缩合成橙黄色化合物，且颜色稳定，在波长490 nm处和一定的浓度范围内，其吸光度与多糖含量呈线性关系正比，从而可以利用分光度计测定其吸光度，并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量

多糖浓度测定及标准曲线谭夕东苯酚-硫酸法1. 对照品的溶液的制备取干燥至恒重的无水葡萄糖0.1g，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。供试品的溶液的制备精密量取本品50ml，置250ml量瓶中，加30%硫酸锌溶液5ml，在水浴中加热5分钟后，在振摇下立即加入亚铁氰化钾试液5m

随着对生物药物、天然药物和保健食品研究的深入，多糖的研究进展很快。目前多糖含量的测定方法尚无统一标准，广泛应用的是苯酚－硫酸比色法。该法具有简单、快速、无需多糖纯品和贵重仪器等优点，且对水溶性样品和非水溶性样品均可测定。１ 苯酚－硫酸比色法原理苯酚－硫酸比色法测定多糖含量是由Ｄｕｂｏｉｓ等［１，２］提出的。其原理是：多糖或寡糖被浓硫酸在适当高温下水解，产生单

硫酸苯酚法测可溶性总糖含量一、测定原理可溶性糖主要有能溶于水及乙醇的可溶性单糖和寡聚糖。糖在浓硫酸作用下脱水生成糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚所合成一种橙红色化合物，在10~100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，因此可用比色法在此波长下测定。硫酸苯酚法可以用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高且不受蛋白质存在

实验一硫酸－苯酚法测多糖含量1．目的要求2．测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量3．2．方法原理4．糖在浓硫酸作用下，水解生成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚缩合成橙黄色化合物，且颜色稳定，在波长490 nm处和一定的浓度范围内，其吸光度与多糖含量呈线性关系正比，从而可以利用分光度计测定其吸光度，并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量

总糖的测定：苯酚硫酸法2008-12-06 22:38:00 作者：来源：互联网浏览次数：758 文字大小：【大】【中】【小】苯酚-硫酸法测定总糖[原理]多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。[试剂]1．浓硫酸：分析纯，95.5%2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解

苯酚-硫酸法测多糖含量原理多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。1．制作标准曲线：准确称取葡萄糖标准贮备液（25mg/100ml），1.4、1.2、1.0、0.8、0.6、0.4、0.2ml,于10ml容量瓶中定容，各取2ml置于试管中，准确加入5%苯酚1.0ml及98%浓硫酸5.0ml,摇匀,

苯酚硫酸法苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。试剂1．浓硫酸：分析纯，95.5%2．80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。3．6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。（每次测定均需现配）4．标准葡聚糖。操作制作标准曲线：准确称取标准葡

苯酚—硫酸法测定党参总糖1．材料与方法1．1 材料与试剂，仪器1.1.1 材料、试剂党参（肉党、普通纹党、产于中寨的纹党）；95％乙醇；苯酚；浓硫酸均为分析纯。1.1.2 仪器与设备FA-2400分析天平，101A型电热鼓风干燥箱，Mb型可调式电热板，电热恒温水浴锅，SK5200H超声清洗器，UV-9100紫外-可见分光光度计1.2 方法1.2.2 供试品溶

苯酚—硫酸法测定党参总糖1．材料与方法1．1 材料与试剂，仪器1.1.1 材料、试剂党参（肉党、普通纹党、产于中寨的纹党）；95％乙醇；苯酚；浓硫酸均为分析纯。1.1.2 仪器与设备2400分析天平，101A型电热鼓风干燥箱，型可调式电热板，电热恒温水浴锅，5200H超声清洗器，9100紫外-可见分光光度计1.2 方法1.2.2 供试品溶液的制备取党参粉末2

原理：苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。步骤：. 5%苯酚溶液：取适量苯酚(A.R)，高温蒸馏，收集180℃馏分，称取50.0g，用水溶解，最后定容于1000m1棕色容量瓶中，

一、总糖含量标准曲线的绘制准确称取无水葡萄糖10 mg，溶解后转入100 mL容量瓶定容。按表4所示操作。表4 总糖含量标准曲线绘制方法管号0 1 2 3 4 5标准葡萄糖溶液（mL）0 0.2 0.6 1.0 1.4 1.8蒸馏水（mL）2.0 1.8 1.4 1.0 0.6 0.2 6%苯酚各1.0 mL浓硫酸各5.0 mL检测摇匀后沸水加热10 min

一、硫酸苯酚法测多糖含量1、试剂配制1. 浓硫酸：分析纯，95.5%2. 5%苯酚：取苯酚5 g，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后，置棕色试剂瓶中，冰箱中冷藏储存备用。3. 标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）或分析纯葡萄糖。准确称取20m g经105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中，蒸馏水溶解定容。2、制作标准曲

硫酸－苯酚法测多糖含量1．目的要求测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量，如1型。2．方法原理糖在浓硫酸作用下，水解生成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚缩合成橙黄色化合物，且颜色稳定，在波长490 nm处和一定的浓度范围内，其吸光度与多糖含量呈线性关系正比，从而可以利用分光度计测定其吸光度，并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量，本方法

分子量大于10，000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后，加入碱性铜试剂，选择性地从其他高分子物质中沉淀出葡聚糖，沉淀部分与苯酚-H2SO4反应，生成有色物质，在485nm条件下，有色物质的吸光度值与葡聚糖浓度成正比。2. 适用范围参照AOAC方法。适用于检测含有分子量大于10，000道尔顿葡聚糖的样品。3.仪器（1）分光光度计（2）离心机（3）旋转混匀器（4）