小鼠实验操作
（一）、实验动物的选择原则
1、尽量选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物；
2、选用的实验动物的解剖、生理特点应符合实验目的；
3、根据人与实验动物对同一刺激的反应差异，选用具有明显反应的动物；
4、根据生物医学研究必须达到的精确度，选用结构功能简单又能反映研究指标的动物；
5、选用患有人类类似疾病的近交系或突变系动物；
6、选用与实验设计、技术条件、实验方法等相适应的标准化动物；
7、在不影响实验目的与结果的前提下，选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物；
8、供实验用的动物应具备质量合格证。
（二）、常用实验动物的特点
1、小白鼠
是实验室最常用的一种动物。易于大量繁殖，且价廉，适用需要大量动物的实验，如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。
2、大白鼠
与小白鼠相似。一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠，如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。此外，也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管，或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。大白鼠的血压和人相近，且稳定，现常用于抗高血压药物实验。
3、豚鼠
是实验室常用动物之一。对组织胺很敏感，容易致敏，常用于平喘药和抗组胺药的实验。对结核菌亦敏感，故也用于抗结核药的研究。此外还用于离体心脏及平滑肌实验，其乳头肌和心房常用于电生理特性及心肌细胞动作电位实验，研究抗心律失常药物的机理。
（三）、实验动物选择的注意事项
由于动物对外界刺激的反应存在个体差异，在选择实验动物时，还应注意动物的年龄、体重、性别、生理状态、健康状况及其品系、等级等因素对实验的影响。
二、实验动物的性别鉴别与编号
（一）、实验动物的性别鉴别
药理学实验常用的动物中，较大的动物(如家兔、猫、犬等)可以从生殖器分辨其性别，而较小的动物(如小白鼠、大白鼠、豚鼠等)的性别鉴别，通常以肛门与生殖孔之间的距离来判断，距离近者为雌性，距离远者为雄性。
（二）、实验动物的编号
药理实验中常用多只动物同时进行实验，为避免混乱应将动物进行编号。实验动物编号的目的在于将观察范围内的同种动物进行区别，以便于观察。常用的方法有染色法、耳缘剪孔法、烙印法和号牌法等，可根据实验目的、动物种类和具备的条件选用，一般编号应具有清晰易辨、简便耐久的特点。猫、犬、兔等较大的动物可用特别的号码牌固定于身上。小白鼠、大白鼠及白色家兔等用黄色苦味酸涂于动物不同部位进行染色标记而编号。例如在小白鼠，右前肢皮肤外侧涂色标记为1号，腹部右外侧皮肤涂色标记为2号，右后肢皮肤外侧涂色标记为3号，头部皮肤涂色标记为4号，背部正中皮肤标记为5号，尾巴根部标记为6号，7、8、9号在左侧同1、2、3号，第10号不涂黄色。大白鼠的编号与小白鼠相同。
第二节实验动物的捉拿、给药和处死方法
（一）、小白鼠、大白鼠
1、捉拿法：小白鼠可采取双手法和单手法两种形式。
双手法：右手提起鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后方轻拉，小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。此时迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤(图1)，并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部，固定于手中。
单手法：小白鼠置于笼盖上，先用左手食指与拇指抓住鼠尾，手掌尺侧及小指夹住尾根部，然后用左手拇指与食指捏住颈部皮肤。
大白鼠容易激怒咬人，捉持时左手应戴防护手套或用厚布盖住大鼠，先用右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住头部，其余手指与手掌握住背部和腹部(图2)。不要用力过大，切勿捏其颈部，以免窒息致死。
2、给药方法
小白鼠
（1）、灌胃(po)：左手固定小鼠，右手持灌胃器，灌胃针头自口角进入口腔，紧贴上腭插入食道(图3)，如遇阻力，将灌胃针头抽回重插，以防损伤。常用灌胃量为0.1～0.2 ml/10g。
（2）、皮下注射(ih)：可用腹部、背部、腹股沟的皮下，此处皮肤比较松弛，也可由助手协助。注药量一般为0.1～0.2 ml/10g。
（3）、肌肉注射(im)：一人抓住小鼠头部皮肤和尾巴，另一人持连4号针头的注射器，将针头刺入后腿外侧肌肉。注射量一般不超过0.1～0.2 ml/只。
（4）、静脉注射(iv)：将小鼠置入固定器，酒精涂擦尾部，以使血管扩张。自尾部末端刺入，刺入血管后抽针芯可见回血。常用注射量为0.1～0.2 ml/10g。
（5）、腹腔注射(ip)：将小鼠固定后，从下腹部外侧进针，深度较皮下注射深(图4)。常用注射量为0.1～0.2 ml/10g。
大鼠灌胃、腹腔注射、皮下注射及尾静脉注射与小鼠相似。静脉注射也可在麻醉下行舌下静脉注射。
3、处死方法
（1）、颈椎脱位法：
术者左手持镊子或用拇指、食指固定小鼠头后部，右手捏住鼠尾，用力向后
上方牵拉，听到鼠颈部喀擦声即颈椎脱位，脊髓断裂，鼠瞬间死亡。
（2）、打击法：用手抓住鼠的尾并提起，朝地面用力撞击鼠头致死（也可用小木锤用力打击鼠头
（3）、吸入麻醉法：吸过量的乙醚。
（4）、大量放血法：可采用眼眶动、静脉放血致死。
（5）、空气栓塞法：将空气急速注入静脉致死。小白鼠可注入0.3-0.5ml空气。
（三）、豚鼠
1、捉拿法：
豚鼠性情温顺不咬人，可用左手直接从背侧握持前部躯干，体重小者用一只手捉持，体重大者宜用双手，右手托住臀部(图6)
2、给药方法
灌胃（见图6）、皮下注射、肌肉注射及腹腔注射方法基本同小鼠，给药量稍多。静脉注射可选后脚掌外侧静脉或颈外静脉
3、处死方法
豚鼠可采用注射麻醉法，即注射戊巴比妥钠麻醉处死。豚鼠可注射麻醉剂量的3倍以上的量腹腔内注射。还可采用吸入麻醉法。
第二节实验动物的取血方法
一、小鼠和大鼠
1、剪尾取血法：
将清醒鼠装入深颜色的布袋中，将鼠身裹紧，露出尾巴，用酒精涂擦或用温水浸泡使血管扩张，剪断尾尖后，尾静脉血即可流出，用手轻轻地从尾根部向尾尖挤捏，可取到一定量的血液。取血后，用棉球压迫止血。也可采用交替切割尾静脉方法取血。用一锋利刀片在尾尖部切破一段尾静脉，静脉血即可流出，每次可取0.3～0.5 ml，供一般血常规实验。三根尾静脉可替换切割，由尾尖向根部切割。由于鼠血易凝，需要全血时，应事先将抗凝剂置于采血管中，如用血细胞混悬液，则立即与生理盐水混合。
2、眼球后静脉丛取血法：
左手持鼠，拇指与中指抓住颈部皮肤，食指按压头部向下，阻滞静脉回流，使眼球后静脉丛充血，眼球外突。右手持1％肝素溶液浸泡过的自制吸血器，从内呲部刺入，沿内下眼眶壁，向眼球后推进4～5 mm，旋转吸血针头，切开静脉丛，血液自动进入吸血针筒，轻轻抽吸血管(防止负压压迫静脉丛使抽血更困难)，拔出吸血针，放松手压力，出血可自然停止。也可用特制的玻璃取血管(管长7～10 cm，前端拉成毛细管，内径0.1～1.5 mm，长为1 cm，后端管径为0.6 cm)。必要时可在同一穿刺孔重复取血。此法也适用豚鼠和家兔。
3、眼眶取血法：
左手持鼠，拇指与食指捏紧头颈部皮肤，使鼠眼球突出，右手持弯镊或止血钳，钳夹一侧眼球部，将眼球摘出，鼠倒置，头部向下，此时眼眶很快流血，将血滴入预先加有抗凝剂的玻璃管内，直至流血停止。此法由于取血过程中动物未死，心脏不断跳动，一般可取鼠体重4％～5％的血液量，是一种较好的取血方法，但只适用一次性取血。
4、心脏取血：
动物仰卧固定于鼠板上，用剪刀将心前区毛剪去，用碘酒、酒精消毒此处皮肤，在左侧第3～4肋间用左手食指摸到心搏，右手持连有4～5号针头的注射器，选择心搏最强处穿刺，当针头正确刺入心脏时，鼠血由于心脏跳动的力量，血自然进入注射器。
5、断头取血：
实验者带上棉手套，用左手抓紧鼠颈部位，右手持剪刀，从鼠颈部剪掉鼠头迅速将鼠颈端向下，对准备有抗凝剂的试管，收集从颈部流出的血液，小鼠可取血0.8～1.2 ml，大鼠可取血5～10 ml。
6、颈动静脉、股动静脉取血：
麻醉动物背位固定，一侧颈部或腹股沟部去毛，切开皮肤，分离出静脉或动脉，注射针沿动静脉走向刺入血管。20 g小鼠可抽血0.6 ml，300 g大鼠可抽血8 ml。也可把颈静脉或颈动脉用镊子挑起剪断，用试管取血或注射器抽血，股静脉连续多次取血时，穿刺部位应尽量靠近股静脉远心端。
二、豚鼠
1、心脏取血：
需二人协作进行，助手以两手将豚鼠固定，腹部面向上，术者用左手在胸骨左侧触摸到心脏搏动处，一般在第4～6肋间、选择心跳最明显部位进针穿刺。针头进入心脏，则血液随心跳而进入注射器内，取血应快速，以防在试管内凝血。如认为针头已刺入心脏，但还未出血时，可将针头慢慢退出一点即可。失败时应拔出重新操作，切忌针头在胸腔内左右摆动，以防损伤心脏和肺脏而致动物死亡。此法取血量大，可反复采血。
2、背中足静脉取血：
助手固定动物，将其右或左后肢膝关节伸直提到术者面前，术者将动物脚背用酒精消毒，找出背中足静脉，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿注射针刺入静脉，拔针后立即出血，呈半球状隆起，用纱布或棉花压迫止血。可反复取血，两后肢交替使用。
用小鼠做实验的基本知识 1．实验动物环境可分为： 外环境。是指实验动物设施或动物实验设施以外的周边环境。如气候或其他自然因素、邻近的民居或厂矿单位、交通和水电资源等。 内环境。指实验动物设施或动物实验设施内部的环境。内环境又细分为大环境和小环境。前者是指实验动物的饲养间或实验间的整体环境状况;后者是指在动物笼具内，包围着每个动物个体的环境状况，如，温、湿度，气流速度，氨及其他气体的浓度，光照，噪音等等。实验动物环境条件,对动物的健康和质量,以及对动物实验结果有直接的影响，尤其是高等级的实验动物，环境条件要求严格和恒定。因而，对环境条件人工控制程度越高，并符合标准化的要求，生活这样环境中的动物，就越具有质量上的保证，一致性的程度就越高，动物实验结果就有更好的可靠性和可重复性，也使同类型的实验数据具有可比较的意义。 影响实验动物环境的因素及其控制： 气候因素。包括有温度、湿度、气流和风速等。在普通级动物的开放式环境中，主要是自然因素在起作用，仅可通过动物房舍的建筑座向和结构、动物放置的位置和空间密度等方面来作有限的调控。在隔离系统或屏障、亚屏障系统中的动物，主要是通过各种设备，对上述的因素予以人工控制。在国家制定的实验动物标准中，对各质量等级动物的环境气候因素控制，都有明确的要求。 理化因素。包括有光照、噪音、粉尘、有害气体、杀虫剂和消毒剂等。这些因素可影响动物各生理系统的功能及生殖机能，需要严格控制，并实施经常性的监测。普通级动物要在适当的范围内，采取有效的措施，对此予以监控;尤其是清洁级以上等级的动物，应通过实验动物设施内的各种设备，按国家颁布的各个等级标准，严格予以控制。 生物因素。是指实验动物饲育环境中，特别是动物个体周边的生物状况。包括有动物的社群状况、饲养密度、空气中微生物的状况等。例如，在实验动物中许多种类，都有能自然形成具有一定社会关系群体的特性。对动物进行小群组合时，就必须考虑到这些因素。不同种之间或同种的个体之间，都应有间隔或适合的距离。对实验动物设施内空气中的微生物有明确的要求，动物等级越高要求越为严格。国家标准规定，亚屏障系统设施内空气落下的菌数少于或等于12.2个/皿时，屏障系统2.45个/皿时，隔离系统0.49个/皿时。 2．对实验动物设施的环境条件，国家有标准化的规定，检测项目包括温度、相对湿度、气六速度、梯度压差、空气洁净度、空气落菌数、氨浓度、噪声、照度和换气量等。 环境检测的项目 空气洁净度的指标包括有：空气落菌数，是检测空气生物洁净度的指标，用血琼脂培养基，置于被检房舍的空间，暴露30分钟后，计算培养基上的落菌数;尘埃粒子测定，是空气洁净级别的指标，10-20平米的房间布点3-5个，用专用仪器测定，数据作统计分析。 此外还有下列七项指标的测定：温度、湿度测定，包括日温差、温湿度的均匀性等;气流速度测定，使动物处在合理的风速区域;换气次数，测定送风口或出风口的风速，然后参照风口面积和房间容积计算;静压差测定，用压差计测定设施内各区域的压差，分析设施内气流走向的合理性;噪声测定，用噪声计，选离墙壁1米，距地面1.2-1.5米的测点测定;照度测定，常用仪器是照度计，采用多测点测定，检测光照的均匀性;氨浓度测定，该检测项目通
常用实验动物 1、小鼠 喜欢群居，怕热，高温容易中暑 雌雄性小鼠交配后10~12小时，在雌性小鼠阴道口会形成白色的阴道栓 主要解剖学特性 消化系统：食管内壁有角质化鳞状上皮，利于灌胃；有胆囊；胰腺分散，色淡红，似脂肪组织。 生殖系统：雌性小鼠为双子宫型，呈“Y”形，卵巢不予腹腔相通，无宫外孕。 骨髓为红骨髓，无黄骨髓，终身造血。 皮肤无汗腺。 小鼠常用品种、品系 １. 近交系小鼠 C3H：1975年从美国引进，野生色毛； ? C57BL/6：1975年从日本引进，黑色毛； ? BALB/c：Bagg1913年获得小鼠白化株，经近亲繁殖20代以上育成，毛色为白色； ? DBA：分为DBA/1和DBA/2两个品系，1977年由美国实验动物中心引进，毛色均为浅灰色。 2、封闭群小鼠 ①KM小鼠：我国使用量最大的远交种小鼠，白色，抗病、适应力强，繁殖、成活率高。 ②ICR：1973年由日本国立肿瘤研究所引入我国，白色，其显著特点是繁殖
力强。 ③LACA ：1973年由英国实验动物中心引入我国，白色。其实是小鼠改名而成。 ④NIH ：由美国国立卫生研究院培育，白色，繁殖力强，幼仔成活率高，雄性好斗 3、突变系 1、裸鼠：第11对染色体上的裸基因（nu）导致无毛裸体、无胸腺 2、SCID小鼠：第16对染色体上的Scid隐性基因突变基因导致T、B淋巴细胞联合免疫缺陷．外观与普通小鼠差别不大，被毛白色，体重发育正常 3、快速老化模型小鼠：4~6月龄以前与普通小鼠的生长一样，4~6月龄以后迅速出现老化症状。如心、肺、脑、皮肤等器官老化，出现骨质疏松和老化淀粉样变。侏儒症：比正常小鼠体型小，缺少生长素和促甲状腺素，用于内分泌研究。小鼠在医学、生物学的应用 1、重组近交系小鼠将双亲品系的基因自由组合和重组产生一系列的子系，是遗传分析的重要依据，用作基因定位及其连锁关系的研究 2、提供自然的动物模型 2、大鼠染色体数2n=42 喜独居，喜啃咬，性情较凶猛、抗病力强，对新环境适应力强，但对环境刺激、炎症反应敏感。强烈噪音可引起食仔或抽搐；湿度低于40%易发生环尾巴症。行为表现多样，情绪反应敏感，易接受通过正负强化进行的多种感觉指令的训练雌性2.5月龄达到性成熟，具有产后发情、产后妊娠的特点。寿命2.5～3年。解剖学特征
鼠类实验报告 篇一：鼠类中主要常用实验品种介绍 鼠类中主要常用实验品种介绍——小鼠 小鼠（mouse），学名：musmusculus,在生物分类学上属脊椎动物门、哺乳动物纲、啮齿目、鼠科、鼷鼠属、小家鼠种。 小鼠品种之一：icR小鼠 生活习性 生长发育：小鼠在哺乳动物中体型最小，新生仔鼠1.5g左右，45天体重达18g以上。小鼠体重的增长与品系的来源、饲养营养水平、健康状况、环境条件等有密切关系。几个不同品系小鼠的正常生长发育曲线见图 活动规律：小鼠性情温顺，易于捕捉，胆小怕惊，对外来刺激敏感，喜居光线暗淡的环境。习惯于昼伏夜动，其进食、交配、分娩多发生在夜间。一昼夜活动高峰有两次，一次在傍晚后1~2小时内，另一次为黎明前。 采食特性：小鼠门齿生长较快，需常啃咬坚硬食物，有随时采食习惯。繁殖特性：小鼠成熟早，繁殖力强，寿命1~3年。新生仔鼠周身无毛，通体肉红，两眼不睁，两耳粘贴在皮肤上。一周开始爬行，12天睁眼，雌鼠35~50日龄性成熟，配种一般适宜在65~90日龄，妊娠期19~21天，每胎产仔8~12只。可根据阴道栓的有无来判断小鼠是否
发生了交配。 群居特性：小鼠为群居动物，群养时雌雄要分开，雄鼠群体间好斗，群体处于优势者保留胡须，而处于劣势者则掉毛，胡须被拔光。这一现象与因寄生虫性或真菌性皮炎所致的掉毛相区分。 温湿度要求：小鼠对温湿很敏感，一般温度以18~22℃，相对湿度以50％~60％最佳。 常用品系 近交系（inbredstrain）: BaLB/c小鼠形成了许多亚系，如BaLB/cann,BaLB/cJ，BaLB/ccd。BaLB/c小鼠基因型为aabbcc。毛色为白色。其乳腺癌发病率低，但对致癌因子敏感。乳腺肿瘤发生率约为10％~20％。有一定数量的卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病的发生。肺癌发病率雌性26％，雄性29％。白血病发病率雌性12％，雄性10％。血压与其他近交系小鼠相比为最高，有自发高血压症。老年小鼠心脏有某些病变，雌雄小鼠常有动脉硬化。几乎全部20月龄的雄性小鼠均有淀粉样变。对鼠伤寒沙门氏菌c`5敏感，对麻疹病毒中度敏感，易患慢性肺炎，对放射线极度敏感。富于网状内皮细胞的器官（如肝、脾）与体重相比，所占比值很大。常用于单克隆抗体和免疫学研究。BaLB/c小鼠生产性能好，繁殖期长，一般无相互侵袭习性，比较容易群养。平均寿命：有的记载雄鼠为509天，雌鼠为561天；有的记载雄鼠为648天，雌鼠为816天。平均体重252日龄雄鼠为30g，雌鼠为28g。 c57BL小鼠基因型为aaBBcc。毛色为黑色。c57BL小鼠对Graffi白
常见动物实验中实验动物的选择 一、药理学研究中的选择 1、临床药物代谢动物学研究：首选动物及性别，应尽量与药效量或毒理学研究所用动物一致。 药物动力学参数测定：最好使用犬、猴子等大动物，可在同一动物上多次采样。药物分布实验：大、小鼠较方便。药物排泄试验：一般首选大鼠，胆汁采集可在乙醚麻醉，胆管插管引流。 2、一般药理研究 主要药效作用以外广泛药理作用的研究。动物：小鼠、大鼠、猫、犬等性别不限。 3、作用于神经系统的药物研究： 促智药：成年大小鼠一般应用幼年、老年鼠。 镇静催眠药：成年小鼠便于分组。 抗痛药：成年大小鼠，以雄性为宜。 镇痛药：需在整体动物上进行，常用成年小鼠、兔，也可用豚鼠、犬等，雌雄兼用。 中枢性肌松药：小鼠、猫。 解热药：首选兔。兔：品种、年龄、室温、动物活动情况等不同，对发热反应速度和程度有明显影响，应按药典规定进行。 神经节传导阻滞影响药物：首选猫，最常用的是颈神经节，因其前后部易于区分。 4、心血管系统的药物研究： 抗心肌缺血药：狗、猫、兔、大小鼠。 抗心率失常药：豚鼠。小鼠不便操作。 降压药：狗、猫、大鼠。不宜用兔：外周循环对外界环境刺激极敏感，血压变化大。 治疗心功能不全药：狗、猫、豚鼠、兔。一般不用大鼠。 降血压药：大鼠、兔。模型动物：遗传性高脂血症WHHL兔。 抗动脉粥样硬化药：一般用兔、鹌鹑。 抗血小板聚集药、抗凝血药：大鼠、兔，个别也可用小鼠。 5、呼吸系统药物： 镇咳药筛选：首选豚鼠，对化学刺激或机械刺激都很敏感。猫：生理条件下很少咳嗽，可用于刺激喉上神经诱发咳嗽，在初筛基础上进一步肯定药物的镇咳作用。犬：适用于观察药物的镇咳作用持续时间。 兔：对化学、电刺激不敏感。大小鼠：实验可靠性差。 支气管扩张药：常用豚鼠：气道平滑肌对致痉剂药物反应敏感。大鼠：某些免疫和药理学特点与人类较近。 祛痰药：一般用雄性小鼠，兔、猫。 6、消化系统药物： 胃肠解痉药：大鼠、豚鼠、家兔、犬等，雌雄均可。 催吐、止吐：犬、猫、鸽等。兔、豚鼠、大鼠，无呕吐反射，故不选用。 7、泌尿系统药物： 利尿、抗利尿药：雄性大鼠或犬为好。 8、内分泌系统药物：
实验小鼠的种类 A、近交系（inbredstrain）: 1）BALB/c小鼠 形成了许多亚系，如BALB/cAnN,BALB/cJ，BALB/cCd。BALB/c小鼠基因型为Aa***c。毛色为白色。其乳腺癌发病率低，但对致癌因子敏感。乳腺肿瘤发生率约为10﹪~20﹪。有一 定数量的卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病的发生。肺癌发病率雌性26﹪，雄性29﹪。白血病发病率雌性12﹪，雄性10﹪。血压与其他近交系小鼠相比为最高，有自发高血压症。老年小鼠心脏有某些病变，雌雄小鼠常有动脉硬化。几乎全部20月龄的雄性小鼠均有淀粉样变。对鼠伤寒沙门氏菌C`5敏感，对麻疹病毒中度敏感，易患慢性肺炎，对放射线极度敏感。富于网状内皮细胞的器官（如肝、脾）与体重相比，所占比值很大。常用于单克隆抗体和免疫学研究。BALB/c小鼠生产性能好，繁殖期长，一般无相互侵袭习性，比较容易群养。平均寿命：有的记载雄鼠为509天，雌鼠为561天；有的记载雄鼠为648天，雌鼠为816天。平均体重252日龄雄鼠为30g，雌鼠为28g。 C57BL小鼠基因型为aa***C。毛色为黑色。C57BL小鼠对Graffi白血病因子较敏感。对麻疹病毒敏感。乳腺肿瘤发生率低。网状组织肿瘤自发率，雌鼠少于10﹪，雄鼠为4﹪。较老的动物中有垂体腺瘤发生。老年性肾硬化症常见。有些亚系有遗传性的脑积水。C57BL小鼠对化学致癌物诱导作用敏感性低，但全身经放射线照射后，淋巴瘤发生率达90﹪~100﹪。腰椎六个，有许多骨骼方面的变异。亚系C57BL/He和C57BL/An，与其他的C57BL和C58不同，它们有元素Ce的高效肝分解酶。C57BL小鼠适于穴居，非地面生活的小鼠，对逃避侵袭的反应性不敏感。于无特殊病原体（SPF）环境中，在用代乳鼠喂养条件下的平均寿命，雌鼠为580天，雄鼠为645天。 2）C3H/He小鼠 C3H小鼠是Strong于1920年用Bagg白化雌鼠与DBA雄鼠杂交后经连续全同胞近交而育成。C、CBA、CH1和C121等品系亦出于本杂交组合。1930年自Strong处转到Andervont（An）处。经近交繁殖至35代时，于1941年到Heston（He）处，成为C3H/He。到1975年时，繁殖达135代。目前C3H/He小鼠已在各地大量使用，形成了许多亚系，如C3H/HeN，C3H/HeJ等。C3H/He小鼠基因型为AA***c。毛色为白色。其14月龄小鼠自发肝癌发病率达85﹪。自发乳腺肿瘤发病率：繁殖雌鼠平均达90﹪（318日龄雌鼠为100﹪，234日龄繁殖雌鼠为67﹪），272日龄繁殖雄鼠为84﹪。补体活性高。168日龄平均体重：雌鼠为32g，雄鼠为34g。 B、封闭群（closedcolony），又称远交群（outbredstock） 1）KM小鼠： 即昆明小鼠，一直是我国生产量、使用量最大的远交群小鼠，被广泛应用药理学、毒理学等领域的研究，以及药品、生物制品的生产与检定。1926年美国Rockfeller研究所从瑞士引入白化小鼠培育成Swiss小鼠。1944年3月17日卫生部北京生物制品研究所汤飞凡从印度Hoffkine 研究所引进Swiss小鼠，饲养在中国昆明中央防疫处。由于该小鼠起初引入地是昆明，故称之 为昆明小鼠，这就是昆明小鼠品系名称的由来。KM小鼠基因库大，基因杂合率高，目前国内 已从KM小鼠远交群中先后培育出不少近交系小鼠。KM小鼠被毛白色，54日龄性成熟，雄鼠体重31g，平均日增重0.55g，雌鼠平均日增重0.37g。平均窝仔数7.25只。断乳存活率82.15﹪，胎间隔30.9天。肿瘤自发率较高，占淘汰鼠的22﹪，且从生产第一胎就开始出现。经50 多年的选育，现在KM小鼠肿瘤自发率极低。不同地饲养的昆明小鼠封闭群的生长发育与繁殖性能存在一定差异。但其共同特点是抗病力和适应力很强，繁殖率和成活率高。
小鼠胚胎干细胞（mES细胞）、小鼠iPS细胞培养Protocol MEF细胞铺制： 1. 在T25培养瓶中加入0.2%明胶，摇匀后覆盖底面即可，于37℃细胞培养箱至少放置 15min以上。 2. 吸除0.2%明胶，加入事先水浴加热至37℃的MEF完全培养液。一般地，一个T25培 养瓶中加入5ml MEF完全培养液。 3. 按实验需要：小鼠胚胎干细胞使用KM-r P3 MEF或CF-1 P3 MEF；小鼠iPS使用ICR-r P3 MEF，复苏MEF细胞若干支。将冻存管从液氮中取出，置于37℃水浴中使之迅速融解，取出后拿到超净台内用75%酒精擦拭冻存管旋口处及外壁，防止污染。 4. 将冻存管内细胞悬液转移至含2 ml MEF完全培养液的15 ml离心管内，以1000 rpm， 离心5 min，离心后将上清液吸除，另加入新鲜的MEF完全培养液1 ml，重悬后按照一个T25培养瓶铺1 × 106的MEF细胞，平均加入到T25培养瓶中，轻轻摇匀后至于37℃细胞培养箱。24 h以后可以传入小鼠胚胎干细胞或小鼠iPS细胞。 5. 复苏或传代小鼠胚胎干细胞或小鼠iPS细胞前，将T25培养瓶中的MEF完全培养液吸 除，加入2 ml小鼠胚胎干细胞、小鼠iPS细胞完全培养液轻轻冲洗一遍后吸除，加入新鲜的小鼠胚胎干细胞、小鼠iPS细胞完全培养液待用。 复苏： 1. 将小鼠胚胎干细胞、小鼠iPS细胞冻存管从液氮中取出，置于37℃水浴中是之迅速融解， 取出后拿到超净台内用75%酒精擦拭冻存管旋口处及外壁，防止污染。 2. 将冻存管内细胞悬液转移至含3-4 ml小鼠胚胎干细胞，小鼠iPS细胞完全培养液的15 ml离心管内，以1000 rpm，离心5 min。 3. 离心后将上清液吸除，另加入新鲜的小鼠胚胎干细胞、小鼠iPS细胞完全培养液2 ml， 吹打悬浮。 4. 重复吹打，制成单细胞悬液，尽量避免起泡。 5. 转移至1个已经铺好MEF细胞的T25培养瓶中培养。 6. 每天更换小鼠胚胎干细胞、小鼠iPS细胞完全培养液。 传代： 1. 一般在复苏后第2-3天传代，视克隆大小和密度而定。 2. 吸除废液。 3. 用PBS（不含钙镁离子）轻轻冲洗一遍。
鼠类中主要常用实验品种介绍——小鼠 小鼠（mouse），学名：mus musculus,在生物分类学上属脊椎动物门、哺乳动物纲、啮齿目、鼠科、鼷鼠属、小家鼠种。 小鼠品种之一：ICR小鼠 生活习性 生长发育：小鼠在哺乳动物中体型最小，新生仔鼠1.5g左右，45天体重达18g以上。小鼠体重的增长与品系的来源、饲养营养水平、健康状况、环境条件等有密切关系。几个不同品系小鼠的正常生长发育曲线见图 活动规律：小鼠性情温顺，易于捕捉，胆小怕惊，对外来刺激敏感，喜居光线暗淡的环境。习惯于昼伏夜动，其进食、交配、分娩多发生在夜间。一昼夜活动高峰有两次，一次在傍晚后1~2小时内，另一次为黎明前。 采食特性：小鼠门齿生长较快，需常啃咬坚硬食物，有随时采食习惯。 繁殖特性：小鼠成熟早，繁殖力强，寿命1~3年。新生仔鼠周身无毛，通体肉红，两眼不睁，两耳粘贴在皮肤上。一周开始爬行，12天睁眼，雌鼠35~50日龄性成熟，配种一般适宜在65~90日龄，妊娠期19~21天，每胎产仔8~12只。可根据阴道栓的有无来判断小鼠是否发生了交配。 群居特性：小鼠为群居动物，群养时雌雄要分开，雄鼠群体间好斗，群体处于优势者保留胡须，而处于劣势者则掉毛，胡须被拔光。这一现象与因寄生虫性或真菌性皮炎所致的掉毛相区分。 温湿度要求：小鼠对温湿很敏感，一般温度以18~22℃，相对湿度以50％~60％最佳。 常用品系 近交系（inbred strain）: BALB/c小鼠形成了许多亚系，如BALB/cAnN, BALB/cJ，BALB/cCd。BALB/c小鼠基因型为Aabbcc。毛色为白色。其乳腺癌发病率低，但对致癌因子敏感。乳腺肿瘤发生率约为10％~20％。有一定数量的卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病的发生。肺癌发病率雌性26％，雄性29％。白血病发病率雌性12％，雄性10％。血压与其他近交系小鼠相比为最高，有自发高血压症。老年小鼠心脏有某些病变，雌雄小鼠常有动脉硬化。几乎全部20月龄的雄性小鼠均有淀粉样变。对鼠伤寒沙门氏菌C`5敏感，对麻疹病毒中度敏感，易患慢性肺炎，对放射线极度敏感。富于网状内皮细胞的器官（如肝、脾）与体重相比，所占比值很大。常用于单克隆抗体和免疫学研究。BALB/c小鼠生产性能好，繁殖期长，一般无相互侵袭习性，比较容易群养。平均寿命：有的记载雄鼠为509天，雌鼠为561天；有的记载雄鼠为648天，雌鼠为816天。平均体重252日龄雄鼠为30 g，雌鼠为28g。 C57BL小鼠基因型为aaBBCC。毛色为黑色。C57BL小鼠对Graffi 白血病因子较敏感。对麻疹病毒敏感。乳腺肿瘤发生率低。网状组织肿瘤自发率，雌鼠少于10％，雄鼠为4％。较老的动物中有垂体腺瘤发生。老年性肾硬化症常见。有些亚系有遗传性的脑积水。C57BL小鼠对化学致癌物诱导作用敏感性低，但全身经放射线照射后，淋巴瘤发生率达90％~100％。腰椎六个，有许多骨骼方面的变异。亚系C57BL/He和C57BL/An，与其他的C57BL和C58不同，它们有元素Ce的高效肝分解酶。C57BL小鼠适于穴居，非地面生活的小鼠，对逃避侵袭的反应性不敏感。于无特殊病原体（SPF）环境中，在用代乳鼠喂养条件下的平均寿命，雌鼠为580天，雄鼠为645天。
Swiss、KM、ICR、CD-1小鼠品系来源与优缺点 1. 品系名称由来 （1）Swiss：1926年美国Rockfeller研究所的Clara Lynch博士从瑞士（Switzerland）Centre Anticancereux Romand的de Coulon实验室引入非近交 白化小鼠，培育成Swiss小鼠。 （2）KM：1944年3月17日卫生部北京生物制品研究所汤飞凡教授从印度Hoffkine 研究所引进Swiss小鼠，饲养在中国昆明中央防疫处。由于该小鼠起初引入地是昆明，故称之为昆明小鼠，这就是昆明小鼠品系名称的由来。 （3）ICR：1948年，美国费城癌症研究所（Institute of Cancer Research, ICR）Hauschka以多产为目标，用Rockfeller研究所培育出的Swiss小鼠群进行选育，培育出Ha/ICR，以后由美国肿瘤研究协会分送各国饲养实验，各国称为ICR小鼠。中国科学院遗传研究所在1973年从日本国立肿瘤研究所引进，1979中国医学科学院分院动物中心引进，1978年北京检定所引进，1983年上海计划生育研究所从瑞士苏黎世毒理学研究所引进。 （4）CD-1：1948年Edward Mirand博士将费城癌症研究所培育的Ha/ICR引入Roswell Park Memorial Institute，命名为HaM/ICR。1959年美国Charles River Lab引入该品系并于同年进行了剖腹产，并命名CD-1（ICR），并注册CD-1?商标。 2. 优缺点 （1）KM：优点是抗病力和适应力很强，繁殖率和成活率高。KM小鼠基因库大，基因杂合率高，在中国昆明小鼠作为实验动物用于生物医学研究已有半个多世纪之久，一直是我国生产量、使用量最大的远交群（封闭群）小鼠，被广泛应用药理学、毒理学等领域的研究，以及药品、生物制品的生产与检定，药典中甚至将KM小鼠作为某些检测项目的指定用动物。目前国内已从KM小鼠远交群中先后培育出不少近交系小鼠：C-1，615，TA2，AMMS/1等。缺点：国内各地昆明小鼠遗传背景不很一致，不同地饲养的昆明小鼠封闭群的生长发育与繁殖性能存在较大差异。 （2）ICR：优点是除了抗病力和适应力强，繁殖率和成活率高之外，从全球范围来看，ICR小鼠的使用更为普遍，其背景资料也更为丰富，而且发表文章时动物品系这一考核指标更容易被接受。缺点：与KM小鼠相同，不同地域饲养的封闭群差别也较大。 （3）CD-1：是ICR小鼠的升级替代品系。因为Charles River Lab已经注意到了ICR小鼠的缺点，为了减少CD-1小鼠因不同地域饲养而引起的不同封闭群之间在 生长发育与繁殖性能上的差异，Charles River将世界各地繁殖的CD-1种群按计 划定期轮换，形成了具有国际遗传学标准的CD-1 IGS（International genetic standard）小鼠。这也是CD-1小鼠特有的优势，1999年北京维通利华公司从Charles River引入CD-1核心群，成为中国大陆唯一授权使用其注册商标权的单位。 小鼠的品种和品系很多，是实验动物中培育品系最多的动物。目前世界上常用的近交品系小鼠约有250多个，均具有不同特征。突变品系小鼠约有350多个。
MEF小鼠胚胎成纤维细胞知识总结 2008-06-19 00:00 来源：丁香园点击次数：1517 关键词：MEF小鼠胚胎成纤维细胞 知识总结 分享到：收藏夹腾讯微博新浪微博开心网 小鼠胚胎成纤维细胞的富集 1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后，实施断颈法处死小鼠。 2、用70％乙醇擦拭腹部，把皮肤向后拉，暴露出腹膜。用消毒过的工具，剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。 3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。 4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开，分离后切除内脏（所有深色的东西）。将胚胎转移到(有盖)培养皿中，用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。 5、用带有弯钩的眼科剪将组织剪碎，当你剪的很累以致于不能再剪的时候，加入2ml胰蛋白酶/ED TA继续剪。再加入另外5ml胰蛋白酶/EDTA，并在37℃孵育大约20分钟。此时，返回至第一步，对下一只鼠进行操作。 6、执行1－4步，到将胚胎置于胰蛋白酶/EDTA中这一步。 7、吹打胰蛋白酶/EDTA中的胚胎，直到有很少的组织物残留。将皿放回培养箱再孵育10分钟。 8、用20ml培养基以终止胰蛋白酶/EDTA的消化，将皿中的物质转移至50ml锥形管中。 9、混匀管内的物质，加入到含有20ml培养基的T75培养瓶中。每个培养瓶中装大约3个胚胎。 10、将这些培养瓶放在培养箱中37℃培养过夜。
11、将胚胎置于PBS中，并重复第5步。 12、第二天更换培养基，以去除碎片和中毒的细胞及其分泌的物质。 13、当培养瓶中的细胞长到80-90%汇合时并仍处于指数生长期时，是冻存细胞的最佳时期。一般说来，这发生在准备胚胎的第二天。这可能或早或晚发生，所以请注意观察你的培养瓶。 注释： 我们已用CF－1品系的鼠制备了成纤维细胞。 培养基成分： 88％DMEM 10％FBS 1％NEAA 1% 双抗 对于新建立的细胞系，要对样本进行支原体检测。 小鼠胚胎成纤维细胞的消化/传代 1、移去MEF培养基 2、用5ml不含钙镁离子的PBS洗涤细胞（以去除胰蛋白酶的抑制物）。 3、每个培养瓶里加入1.5ml的胰蛋白酶/EDTA（0.05%的胰蛋白酶），消化5min。
小鼠胚胎干细胞培养实验具体步骤及方法 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存在的情况下扩增（第4步）并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃，5％CO2，100％湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化，也可以采用低浓度的RA进行诱导。 具体步骤 一、ES培养基 在LIF存在的条件下维持细胞培养。 二、EB培养基 使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。 1. 分散纯化细胞（参见上面的细胞传代部分）。 2. 纯化2小时后将细胞转入含有ES培养基的50 ml Falcon管中，计数细胞取适量体积放入15 ml管中离心3分钟。 3. 用2mlEB培养基重悬细胞，吹打至少10次制成单细胞悬液
4. 一个15 cm的细菌培养皿接种4～5x106个细胞（1个完全融合的组织培养皿通常足以接种4个同样规格的细菌培养皿）。 5. 2天后更换培养基，将胚状体转入锥形管中放置3～5分钟使细胞沉降。弃去上清，将细胞重悬于新鲜培养基并接种在新的细菌培养皿中。 6. 用EB培养基培养的第4天将细胞转入没有包被的组织培养皿中（这即是细胞的移植步骤）。1个组织培养皿之中放置1个细菌培养皿，在进行第3步之前一天将胚状体黏附在同样规格的培养板上。 7. 形成胚状体需要4天时间。在EB培养基中再培养1天使胚状体粘附在组织培养皿的表面。这一天被认为是第2步和第3步的分界。 三、ITSFn培养基 在最少量培养基中选择神经前体细胞 1. 胚状体接种在组织培养皿一天后将培养基换成ITSFn培养基。 2. 并非所有胚状体在这一时期都已经发生粘附，因此在移除培养基时要小心谨慎以使大部分胚状体留在培养皿内。
不同类型缺氧小鼠观察 2013-3-25 ］［实验原理］ 1.乏氧性缺氧 2.血液性缺氧 3.组织中毒性缺氧
［实验目的］ 1.学习各型缺氧动物模型复制的方法，了解缺氧的分类。 2.观察不同类型缺氧中机体的变化。 3.掌握各类型缺氧的概念、发生机制及特点。2013-3-25 ［实验动物］ ■力、白鼠4只 2013-3-25
［实验材料］ ‘器材—鼠缺氧瓶（250 ml带塞锥形瓶或广口 瓶）、一氧化碳发生装置一套、刻度吸管（2ml. 5ml）, nnl注射器二具、酒精灯、6号针头二颗、手术剪、组织镶、眼科镶各一把。 2.试剂和药品钠石灰（NaOHCaO）.甲酸、浓 硫酸.氢氧化钠、亚硝酸钠溶液 2013-3-25 土［观察指标］ 1. 动物一般状态.活动情形等 2.呼吸频率（次/10s）.深度 3.皮肤（口唇）、血液颜色 4.存活时间 、正常对照组 1.取正常小鼠一只，观察动物的的各项指标。 2?处死动物后立即从眶静脉取血2滴于装有7ml蒸倔水的试管内混匀' 观察其颜色。打开胸腹腔，观察其内脏颜色，并与其他类型的缺氧小鼠比较。 2013-3-25
［实验步骤］ 2013-3-25 匕、乏氧性缺氧 （1）取钠石灰少许（约5g）及小白鼠一只放入缺氧瓶内。观察动物的一般情况、呼吸、皮肤与口唇颜色，然后塞紧瓶塞，记录时间。以后每3min重复观 察上述指标一次（如有其它变化则随时记录），直到动物快死亡时从眶静脉取血2滴于装有7ml蒸傳水的试管内混匀,观察其颜色。 （2）取出动物尸体，做好记号，待以后解剖。
、血液性缺氧 1. 一氧化碳中毎性缺氧 (1)取小白鼠丄只放人广口瓶中，观察动物的一般情 况、呼吸、 肤与口唇颜色。 (2)将广口瓶通过橡皮管与一氧化碳发生装置相连，用刻应吸管吸取甲酸3ml放人试管丙；酸2ml,塞紧迖膏。用酒精灯微微笳热试速CO的产生(术苛迸热以至液体沸腾，导动物过快死亡)。 观察箕禺脏颜色，并与其施类型此赫小咸比较。 2013-3-25 2.亚硝酸盐中毒性缺氧 (1)取小白鼠丄只，观察动物的一般情况、呼吸、皮肤与口唇颜 色。 观察上述指标?待动物 (2)由腹腔注入丄％亚硝酸钠溶液1.0ml r 快死亡时立即从眶静脉取血2滴于装有 7ml蒸憎水的试管内混匀，观察其颜色。打开胸腹腔, 观察其内脏颜色，并与其他类型的缺氧小鼠比较。 2013-3-25
实验小鼠得种类 A、近交系（inbreｄstraiｎ)： 1）BAＬB／c小鼠 形成了许多亚系，如BALB／ｃAnN，BＡＬB/cJ，BALB／ｃCd。BALB/c小鼠基因型为Aa＊**c。毛色为白色。其乳腺癌发病率低，但对致癌因子敏感.乳腺肿瘤发生率约为10﹪～2０﹪。有一定数量得卵巢、肾上腺与肺部肿瘤、白血病得发生。肺癌发病率雌性26﹪，雄性29﹪。白血病发病率雌性12﹪,雄性10﹪。血压与其她近交系小鼠相比为最高，有自发高血压症。老年小鼠心脏有某些病变,雌雄小鼠常有动脉硬化。几乎全部２0月龄得雄性小鼠均有淀粉样变。对鼠伤寒沙门氏菌Ｃ`5敏感，对麻疹病毒中度敏感,易患慢性肺炎,对放射线极度敏感。富于网状内皮细胞得器官(如肝、脾）与体重相比，所占比值很大.常用于单克隆抗体与免疫学研究。BAＬB/c小鼠生产性能好,繁殖期长，一般无相互侵袭习性,比较容易群养。平均寿命：有得记载雄鼠为509天，雌鼠为561天；有得记载雄鼠为6４8天,雌鼠为816天。平均体重２５2日龄雄鼠为３０g,雌鼠为28g。 C5７BL小鼠基因型为aa＊**C。毛色为黑色。Ｃ５7BL小鼠对Graffi白血病因子较敏感。对麻疹病毒敏感。乳腺肿瘤发生率低.网状组织肿瘤自发率,雌鼠少于10﹪，雄鼠为４﹪。较老得动物中有垂体腺瘤发生.老年性肾硬化症常见.有些亚系有遗传性得脑积水。C57BL小鼠对化学致癌物诱导作用敏感性低，但全身经放射线照射后,淋巴瘤发生率达9０﹪～１０0﹪。腰椎六个，有许多骨骼方面得变异.亚系C５７BＬ/Hｅ与C57BＬ/An,与其她得C57ＢL 与C5８不同,它们有元素Ｃe得高效肝分解酶。C57BL小鼠适于穴居,非地面生活得小鼠,对逃避侵袭得反应性不敏感.于无特殊病原体(ＳPF）环境中,在用代乳鼠喂养条件下得平均寿命，雌鼠为580天，雄鼠为64５天. ２）Ｃ3Ｈ/He小鼠 C３H小鼠就是Ｓtrong于1920年用Bagg白化雌鼠与DBA雄鼠杂交后经连续全同胞近交而育成。C、CBＡ、CH1与C１2１等品系亦出于本杂交组合.１9３０年自Stroｎg处转到Andervｏnt（Ａn）处。经近交繁殖至35代时，于1９41年到Hｅston（Ｈｅ)处，成为C3H ／He。到197５年时，繁殖达1３5代.目前C３H/He小鼠已在各地大量使用,形成了许多亚系，如C3Ｈ/HｅＮ，C3H/ＨeJ等。Ｃ3H／He小鼠基因型为ＡA*＊＊c。毛色为白色。其１4月龄小鼠自发肝癌发病率达85﹪。自发乳腺肿瘤发病率：繁殖雌鼠平均达90﹪(３１8日龄雌鼠为１０0﹪，23４日龄繁殖雌鼠为67﹪)，272日龄繁殖雄鼠为84﹪.补体活性高。168日龄平均体重：雌鼠为32ｇ,雄鼠为34g。 B、封闭群（clｏsedcｏｌonｙ）,又称远交群(outbreｄstｏｃk) 1）KＭ小鼠： 即昆明小鼠,一直就是我国生产量、使用量最大得远交群小鼠，被广泛应用药理学、毒理学等领域得研究,以及药品、生物制品得生产与检定。192６年美国Rockfeller研究所从瑞士引入白化小鼠培育成Swiｓs小鼠.19４4年3月17日卫生部北京生物制品研究所汤飞凡从印度Hoffkｉne研究所引进Sｗiss小鼠，饲养在中国昆明中央防疫处.由于该小鼠起初引入地就是昆明，故称之为昆明小鼠,这就就是昆明小鼠品系名称得由来。KM小鼠基因库大,基因杂合率高，目前国内已从KM小鼠远交群中先后培育出不少近交系小鼠.ＫM小鼠被毛白色,54日龄性成熟，雄鼠体重3１g，平均日增重0、55g，雌鼠平均日增重０、37g.平均窝仔数7、25只。断乳存活率82、１５﹪，胎间隔30、９天。肿瘤自发率较高,占淘汰鼠得2２﹪，且从生产第一胎就开始出现。经5０多年得选育,现在KＭ小鼠肿瘤自发率极低。不同地饲养得昆明小鼠封闭群得生长发育与繁殖性能存在一定差异。但其共同特点就是抗病力与适应力很强,繁殖率与成活率高.
实验小鼠得种类 A、近交系(ｉｎbredstraｉｎ): 1)ＢALB／ｃ小鼠 形成了许多亚系,如BALB/ｃAnN,ＢALB/cＪ,ＢAＬＢ/cＣd、BALＢ/ｃ小鼠基因型为Aa*＊＊c、毛色为白色。其乳腺癌发病率低,但对致癌因子敏感。乳腺肿瘤发生率约为10﹪~20﹪。有一定数量得卵巢、肾上腺与肺部肿瘤、白血病得发生、肺癌发病率雌性26﹪,雄性29﹪、白血病发病率雌性12﹪,雄性１0﹪。血压与其她近交系小鼠相比为最高,有自发高血压症。老年小鼠心脏有某些病变,雌雄小鼠常有动脉硬化。几乎全部20月龄得雄性小鼠均有淀粉样变。对鼠伤寒沙门氏菌C`5敏感,对麻疹病毒中度敏感,易患慢性肺炎,对放射线极度敏感。富于网状内皮细胞得器官(如肝、脾)与体重相比,所占比值很大。常用于单克隆抗体与免疫学研究。BＡLB/c小鼠生产性能好,繁殖期长,一般无相互侵袭习性,比较容易群养。平均寿命:有得记载雄鼠为5０9天,雌鼠为５６1天;有得记载雄鼠为6４8天,雌鼠为８1６天。平均体重２52日龄雄鼠为30g,雌鼠为2８g。 C57ＢL小鼠基因型为aa**＊C、毛色为黑色。Ｃ57BL小鼠对Ｇrａｆfi白血病因子较敏感。对麻疹病毒敏感。乳腺肿瘤发生率低。网状组织肿瘤自发率,雌鼠少于10﹪,雄鼠为4﹪。较老得动物中有垂体腺瘤发生。老年性肾硬化症常见。有些亚系有遗传性得脑积水。C５7BL 小鼠对化学致癌物诱导作用敏感性低,但全身经放射线照射后,淋巴瘤发生率达９０﹪～1０0﹪。腰椎六个,有许多骨骼方面得变异、亚系C5７BL／He与C５7ＢL/Ａn,与其她得C57BL 与Ｃ58不同,它们有元素Ce得高效肝分解酶、C57BＬ小鼠适于穴居,非地面生活得小鼠,对逃避侵袭得反应性不敏感、于无特殊病原体(SPF)环境中,在用代乳鼠喂养条件下得平均寿命,雌鼠为580天,雄鼠为6４5天。 2)C３H/He小鼠 Ｃ３Ｈ小鼠就是Stroｎg于１９20年用Bagg白化雌鼠与DBＡ雄鼠杂交后经连续全同胞近交而育成。C、CＢＡ、CＨ１与C１２1等品系亦出于本杂交组合、1930年自Strong处转到Andervont(An)处。经近交繁殖至35代时,于1９41年到Ｈｅston(He)处,成为Ｃ3H/He。到1９７５年时,繁殖达135代、目前C3Ｈ/He小鼠已在各地大量使用,形成了许多亚系,如C3H/HeN,C３Ｈ/HeＪ等、Ｃ３H/He小鼠基因型为ＡA＊＊＊c。毛色为白色。其14月龄小鼠自发肝癌发病率达85﹪。自发乳腺肿瘤发病率:繁殖雌鼠平均达90﹪(3１8日龄雌鼠为100﹪,234日龄繁殖雌鼠为6７﹪),2７2日龄繁殖雄鼠为84﹪。补体活性高。168日龄平均体重:雌鼠为32g,雄鼠为34g。 B、封闭群(cloｓedｃolｏｎｙ),又称远交群(oｕｔbredｓtock) １)KM小鼠: 即昆明小鼠,一直就是我国生产量、使用量最大得远交群小鼠,被广泛应用药理学、毒理学等领域得研究,以及药品、生物制品得生产与检定。1９26年美国Rocｋfellｅr研究所从瑞士引入白化小鼠培育成Sｗiｓs小鼠、１9４4年３月17日卫生部北京生物制品研究所汤飞凡从印度Hoffkiｎe研究所引进Ｓwisｓ小鼠,饲养在中国昆明中央防疫处。由于该小鼠起初引入地就是昆明,故称之为昆明小鼠,这就就是昆明小鼠品系名称得由来。KＭ小鼠基因库大,基因杂合率高,目前国内已从ＫM小鼠远交群中先后培育出不少近交系小鼠。KM小鼠被毛白色,54日龄性成熟,雄鼠体重3１g,平均日增重0.5５g,雌鼠平均日增重0。3７ｇ。平均窝仔数７.25只。断乳存活率８2、15﹪,胎间隔30.9天、肿瘤自发率较高,占淘汰鼠得2２﹪,且从生产第一胎就开始出现。经50多年得选育,现在KＭ小鼠肿瘤自发率极低。不同地饲养得昆明小鼠封闭群得生长发育与繁殖性能存在一定差异。但其共同特点就是抗病力与适应力很强,繁殖率与成活率高、
第18卷 第1期2001年3月实验动物科学与管理 LABORATORY ANIMAL SCIENCE AND ADMINSTRATION Vol .18 No .1Mar .2001 小鼠胚胎移植技术方法比较 管 彤,王凤山,王 静,王晓军,于国德,杨梦礼 (天津市劳动卫生职业病研究所,天津 300204) 摘要:以近交系小鼠C 57BL 6J 、BDF 1小鼠作为供体胚小鼠,封闭群昆明种小鼠作为代母,对实验小鼠胚胎移植的三种方法,即:对小鼠受精卵(或2个细胞期胚)经由代母输卵管口移植、经由代母输卵管壁移植及对小鼠进行子宫移植(8细胞期胚)的方法了进行实验研究,并对各方法适于使用的动物对象、实验要求、产仔率、优势与不足等做了进一步的探讨,为今后的实验动物与动物实验提供参考依据。关键词:近交系小鼠;输卵管口(壁);移植;子宫移植 中图分类号:S865.13 文献标识码:A 文章编号:1006-6179(2001)01-0029-03 收稿日期:2000-07-07 第一作者简介:管彤(1968-),女,助理研究员,主要从事野生小鼠资源开发及实验小鼠胚胎毒理学研究。 自五十年代以来人类建立了受精卵和早期胚胎的采集技术之后,很快就完成了早期胚向代母体内 输卵管及子宫移植的胚胎移植技术的开发和研究[1] 。小鼠的胚胎移植技术对于实验动物学研究及生命科学研究具有重要价值。人类由小鼠进行发育生物学研究,包括胚胎的发生、发育、突变基因的研究、转基因动物的研究、基因打靶技术及小鼠胚胎冷冻种子库技术等涉及胚胎体外操作的各种研究,均需要进行胚胎移植入代母体内来完成。按照胚胎发 生的阶段不同,移植部位也不同[2] 。1～2个细胞期胚胎进行输卵管口移植,8细胞期至桑椹期胚进行 子宫移植。1992年,日本学者Nakagata [3] 又报道了经由输卵管壁进行输卵管移植的技术,以解决移植中一些代母品系输卵管口较小、较短的问题。 本文主要是将此三种移植方法引入,使之在本实验室成为常规后,将其应用于实验小鼠并进行了方法上的比较,重点比较了方法上的难易程度、产仔率、方法选择的前提因素。 1 材料与方法 1.1 实验动物 实验动物作为参比对照的成年近交系C 57BL 6J 小鼠、B DF 1小鼠(♀C 57BL 6J ×♂DBA 2)和作为代母的昆明种封闭群小鼠。 1.2 试剂 PMSG (pregnant mare serum gonadotropin )、HC G (human chorionic gonadotropin )、胚胎移植用Injection Medium 培养液、M 2培养基等。1.3 假孕代母的准备 1.3.1 昆明种雄性小鼠的结扎 为输卵管移植及子宫移植用代母(昆明种封闭群小鼠)交配用的雄性昆明种小鼠进行输精管结扎手术,以便制备假孕代母。进行输精管结扎手术的雄性昆明种小鼠应提前三周施行手术,术后备用。1.3.2 制备假孕代母 胚胎移植前一日(子宫移植,前三日)将已施行输精管结扎手术术后三周的昆明种雄性小鼠以1∶2与其雌性小鼠进行同笼交配,次日检查阴道栓有无,以阴道栓形成者作为移植用代母。1.4 卵的采集 1.4.1 超排卵 [4] 取出生后8～10周的C 57BL 6J 及B DF 1雌性小鼠进行PMSG 处理(腹腔注射,5IU 只),48h 后进行HC G 超排卵处理,方法、剂量相同,HC G 处理14～17h 后可进行受精卵的采集(子宫移植,为HC G 处理后第三日)。 1.4.2 交配 取已注射PMS 、HCG 后的C 57BL 6J 、B DF 1雌性小鼠与其相应的C 57B L 6J 、BDF 1雌性小鼠进行同笼
鼠类中主要常用实验品种介绍——小鼠 信息来源：本站原创更新时间：2004-12-21 0:53:00 小鼠在各种实验研究中用量最大，用途最多。 来源 小鼠（mouse），学名：mus musculus,在生物分类学上属脊椎动物门、哺乳动物纲、啮齿目、鼠科、鼷鼠属、小家鼠种。 小鼠品种之一：ICR小鼠 生活习性 生长发育：小鼠在哺乳动物中体型最小，新生仔鼠1.5g左右，45天体重达18g以上。小鼠体重的增长与品系的来源、饲养营养水平、健康状况、环境条件等有密切关系。几个不同品系小鼠的正常生长发育曲线见图 活动规律：小鼠性情温顺，易于捕捉，胆小怕惊，对外来刺激敏感，喜居光线暗淡的环境。习惯于昼伏夜动，其进食、交配、分娩多发生在夜间。一昼夜活动高峰有两次，一次在傍晚后1~2小时内，另一次为黎明前。 采食特性：小鼠门齿生长较快，需常啃咬坚硬食物，有随时采食习惯。 繁殖特性：小鼠成熟早，繁殖力强，寿命1~3年。新生仔鼠周身无毛，通体肉红，两眼不睁，两耳粘贴在皮肤上。一周开始爬行，12天睁眼，雌鼠35~50日龄性成熟，配种一般适宜在65~90日龄，妊娠期19~21天，每胎产仔8~12只。可根据阴道栓的有无来判断小鼠是否发生了交配。 群居特性：小鼠为群居动物，群养时雌雄要分开，雄鼠群体间好斗，群体处于优势者保留胡须，而处于劣势者则掉毛，胡须被拔光。这一现象与因寄生虫性或真菌性皮炎所致的掉毛相区分。 温湿度要求：小鼠对温湿很敏感，一般温度以18~22℃，相对湿度以50﹪~60﹪最佳。 常用品系 近交系（inbred strain）:
BALB/c小鼠形成了许多亚系，如BALB/cAnN, BALB/cJ，BALB/cCd。BALB/c 小鼠基因型为Aabbcc。毛色为白色。其乳腺癌发病率低，但对致癌因子敏感。乳腺肿瘤发生率约为10﹪~20﹪。有一定数量的卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病的发生。肺癌发病率雌性26﹪，雄性29﹪。白血病发病率雌性12﹪，雄性10﹪。血压与其他近交系小鼠相比为最高，有自发高血压症。老年小鼠心脏有某些病变，雌雄小鼠常有动脉硬化。几乎全部20月龄的雄性小鼠均有淀粉样变。对鼠伤寒沙门氏菌C`5敏感，对麻疹病毒中度敏感，易患慢性肺炎，对放射线极度敏感。富于网状内皮细胞的器官（如肝、脾）与体重相比，所占比值很大。常用于单克隆抗体和免疫学研究。 BALB/c小鼠生产性能好，繁殖期长，一般无相互侵袭习性，比较容易群养。平均寿命：有的记载雄鼠为509天，雌鼠为561天；有的记载雄鼠为648天，雌鼠为816天。平均体重252日龄雄鼠为30 g，雌鼠为28g。 C57BL小鼠基因型为aaBBCC。毛色为黑色。C57BL小鼠对Graffi 白血病因子较敏感。对麻疹病毒敏感。乳腺肿瘤发生率低。网状组织肿瘤自发率，雌鼠少于10﹪，雄鼠为4﹪。较老的动物中有垂体腺瘤发生。老年性肾硬化症常见。有些亚系有遗传性的脑积水。C57BL小鼠对化学致癌物诱导作用敏感性低，但全身经放射线照射后，淋巴瘤发生率达90﹪~100﹪。腰椎六个，有许多骨骼方面的变异。亚系C57BL/He和C57BL/An，与其他的C57BL和C58不同，它们有元素Ce 的高效肝分解酶。C57BL小鼠适于穴居，非地面生活的小鼠，对逃避侵袭的反应性不敏感。于无特殊病原体（SPF）环境中，在用代乳鼠喂养条件下的平均寿命，雌鼠为580天，雄鼠为645天。 C3H/He小鼠：C3H小鼠是Strong于1920年用Bagg白化雌鼠与DBA雄鼠杂交后经连续全同胞近交而育成。C、CBA、CH1和C121等品系亦出于本杂交组合。1930年自Strong处转到Andervont（An）处。经近交繁殖至35代时，于1941年到Heston（He）处，成为C3H/He。到1975年时，繁殖达135+代。目前 C3H/He 小鼠已在各地大量使用，形成了许多亚系，如C3H/HeN，C3H/HeJ等。C3H/He小鼠基因型为AABBcc。毛色为白色。其14月龄小鼠自发肝癌发病率达85﹪。自发乳腺肿瘤发病率：繁殖雌鼠平均达90﹪（318日龄雌鼠为100﹪，234日龄繁殖雌鼠为67﹪），272日龄繁殖雄鼠为84﹪。补体活性高。168日龄平均体重：雌鼠为32 g，雄鼠为34g。 封闭群（closed colony），又称远交群（outbred stock）： KM小鼠：即昆明小鼠，一直是我国生产量、使用量最大的远交群小鼠，被广泛应用药理学、毒理学等领域的研究，以及药品、生物制品的生产与检定。1926年美国Rockfeller研究所从瑞士引入白化小鼠培育成Swiss小鼠。1944年3月