基因工程实验小结
基因工程实验同以前的实验有所不同，它有很明显的特点。首先是微量操作，所有的实验药品和试剂都是在1.5ml和0.5ml的离心管中进行，转移、加样都是使用移液器进行操作。其次是反应条件要求比较严格。冰浴是实验的关键操作步骤，对于DNA等具有生物活性的物质均需冰浴低温保证其不失活；实验中所用试剂均需较高的纯度，实验中的痕量污染、空气污染等都会影响实验结果，尤其是PCR反应，它对DNA浓度和纯度均有严格的要求。另外，此次的实验是综合实验，每个基础实验联系在一起才有意义，每个实验的结果好坏直接影响下一个实验的结果。而且有些实验的结果并不能直接观察，需要在下一个实验中体现证实。实验所用部分仪器也是以前从未接触过的，如电泳仪，PCR扩增仪，高速冷冻离心机，恒温摇床等。
此次实验主要完成的实验有：大肠杆菌DNA提取，PCR扩增，质粒的连接，感受态细胞制备与转化和α-互补筛选细菌克隆。其中前一个实验的结果均为下一个实验的材料，前两个实验通过琼脂糖凝胶电泳鉴定产物，后三个实验通过特定平板培养的菌落形态鉴定实验结果。由于实验起初对各种仪器和操作不熟悉，导致DNA的SDS法分离纯化结果不佳，PCR 产物凝胶成像不是很清楚，经过进一步的分析和操作熟悉，后面的实验结果均良好。由于影响实验结果的因素很多，所以实验中必须每一步都应仔细认真完成。
通过此次实验，完成了基因工程中的基本操作，使我们在学习完《基因工程》理论知识后对抽象的概念、仪器、步骤等有了具体的认识，加深了记忆和理解。
课堂教学总结报告 一个学期的实习生活悄然而逝，经过半年时间的锻炼，我在教学技能、沟通能力、班级管理等能力上都有显著的提高，现就把教学技能上的提高作以总结。 一、教学技能 1、导入技能 在之前学校的学习中，有过专门的导入练习，但在这次实习初期的一段时间里，我发现导入效果并不是像预期的那么好。在听了几个老师的课之后发现远离学生生活是我的毛病，所以我就在了解学生的基础上合理的设计课堂导入，达到了提起学生兴趣的效果。 2、讲授技能 这是在这次实习中提高最多的一项技能，之前只是在学校模拟讲过十多分钟的课，但在实习中，我担任了七年级四个班的全部生物课，在其他老师的指导下，逐渐形成了自己的讲课风格。 我的讲课风格就是生动幽默，借用很多生动形象的例子讲解课本内容，既达到了让学生很好学习只是的目的，又使得课堂气氛十分轻松。在讲到“排泄”这一章中，向学生们介绍肾脏的结构，我就在课上给学生们讲了一段赵本山的小品，逗得学生哈哈大笑，他们也牢牢记住了肾脏的结构 3、提问技能 实习刚开始时，在课堂上的提问时不时的会使用“对不对？”“好不好？”“是不是？”等封闭性问题，经过一定时间的练习逐渐改进
成“怎么样？”“为什么”等能够激发学生思维的问题。 4、互动技能 经过一段的课堂时间之后，我一改以前的一节课猛灌的教课方式，转变为课堂讨论等让学生主动探索的教学方式，课堂气氛活跃，学生乐于学习。 例如，在讲到《营养物质的作用》这一节时，我就提前布置好任务，让学生编写以各营养物质为角色的课堂剧。当上课时，学生们积极表演，生动形象，学生们在一片笑声中学到了个营养物质的作用，并且记忆十分深刻。 5、调控技能 由于社会的一些不良影响，学生在课堂上的注意力容易受外界影响，而且会出现一定的突发事件，结束了刚开始实习的手足无措后，逐渐在实践中找到了处理突发事件的方法，并且掌握了一些管理课堂的方法，课堂秩序越来越有序。 比如在四班的一堂生物课上，突然有两个学生发生了激烈的口角，我并没有慌张，而是很镇定地停止了课堂教学，对他们俩进行了严肃的批评，让他俩认识到自己的错误，并对他俩进行了思想教育，最终，在全班同学的一片掌声中二人相互道歉，重归于好。 6、反思技能 在这半年的实习中，养成了每次上完课回顾自己在课堂上的得与失的习惯。课后和老师们交流课上的一些经验，课下找学生问询他们在课堂上的感受，以这些方式找出自己的闪光点和失误之处，对于自
一、大肠杆菌质粒DNA的提取 质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术，但提取方法有很多种，以下介绍一种最常用的方法：碱裂解法。此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下： 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养 基。 2、37℃振荡培养过夜。 3、取1.5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3 min，弃上清液。 4、加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/L EDTA pH8.0，25mM/L Tris-H Cl pH8.0)充分混合。 5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH，1％ SDS)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 。 6、加入0.15m1预冷溶液III(5 mol/L KAc，p H4.8)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 。 7、以10，000rpm离心20min，取上清液于另 一新Ep管 8、加入等体积的异戊醇，混匀后于?0℃静置1 0min。 9、再以10，000rpm离心20min，弃上清。 10、用70％乙醇0．5ml洗涤一次，抽干所有 液体。 11、待沉淀干燥后，溶于0．05mlTE缓冲液中 二、质粒DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物，应选用电泳纯的，琼脂糖此级产品筛除了抑制物和核酸酶，而且用溴化乙锭染色后荧光背景最小。 (1)琼脂糖凝胶电泳装置
由于琼脂糖凝胶电泳既要求不高，而适应性又强，在过去15年里已成功地设计了形形色色及大大小小的电泳槽。对这些装置的选择主要是依据个人的喜恶。使用最普遍的装置是Walt er Schaffner发明的水平板凝胶。 水平板凝胶通常在一块可安放于电泳槽平台的玻璃板或塑料盘上灌制。在有些装置中，则可将凝胶直接铺在平台上。凝胶恰好浸在缓冲液液面下进行电泳。凝胶的电阻几乎与缓冲液的电阻相同，所以有相当一部分的电流将通过凝胶的全长。 （2）琼脂糖凝胶的制备 琼脂糖凝胶的制备是将琼脂糖在所需缓冲液中熔化成清澈、透明的溶液。然后将熔化液倒入胶模中，令其固化。凝固后，琼脂糖形成一种固体基质，其密度取决于琼脂糖的浓度。通贯凝胶的电场接通后，在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移。 （3）琼脂糖凝胶的染色 电泳完毕，将琼脂糖凝胶转移入含EB的染液中，染色10分钟，取出紫外灯下观察。 三、质粒DNA热激法转化大肠杆菌 感受态的细胞可以摄入外部溶液中的DNA，而常态的细胞却不能，所以要转化质粒DNA进入大肠杆菌必须首先制备感受态的大肠杆菌细胞。 1、取1%大肠杆菌E.coli接种于含2ml LB培 养基的试管中，37℃振荡培养过夜 2、取0.1ml过夜培养物转种于含10ml LB培 养基的三角瓶中，37℃振荡培养3h至OD600=0. 3 3、然后把培养物倒入1.5ml离心管中，冰浴1 0min。 4、在4℃下以4000rpm离心5min，去上清液 5、把菌体悬浮于15m1冰冷的0.1M CaCl2溶液 中，置冰上30min 6、然后再在4℃下以4000rpm离心10min，去 上清液
课堂教学改进学期小结 教师是课堂教学的组织者、操作者，实施素质教育，提高学生整体素质，必须开展创新教育。提高学生的创新能力，教师首先确立创新意识，切入口在于课堂教学。本学期课堂教学改进总结如下： 一．改变教学观念，以素质教育为出发点，确立创新意识。 本学期我做了以下努力。 1．加强学习，不断充电，以适应教育改革发展的需要．学习理论，确立创新意识；学习业务，博采他山石，琢为自家玉。 2．加强研修，不断创新。认真遵循教学规律，精心设计教案，钻研教材，积累教育理论，提高综合素质，这样才能提高学生素养。充分发挥创新精神，教育质量的不断提高。 3．努力促进课堂纪律，提高严管防范教育意识。对于电子商务职业教育的学生，纪律的好坏一定程度影响学生接受教学和素质培养的好坏，因此十分注重课堂管理，任务驱动，注意转移等纪律调控的应用。 二．改进课堂教学，提高课堂效果，是提高学生创新能力的关键。 1．教学方法多样化。 优化教学方法，培养学生学习兴趣，是提高学生创造能力的途径之一。课堂教学是教师的教与学生的学进行的双边活动，课堂教学的本质就是师生思维的共同活动过程，是培养学生思维能力的一个全过程。从当前课堂教学来看，学生思维活动还不够充分，有阻于学生创造能力的开发。 我在课堂教学中，既发挥网络条件实践操作优势，因材施教，又根据学生差异，因人施教。在教学过程中，做到：①.采用启发式。启发式教学，打破原有的填鸭式的教学，有利于提高学生发散性思维，是创新教育的基础。②多用探讨式。“探讨”顾名思义就是探究和讨论。通过探究讨论，帮助学生探究结论的推导过程，使学生学得方法、掌握规律，使学生不但要知其然，而且更要知其所以然。探讨式教学是教学的又一次飞跃。它是实施创新教育的有效方法之一。③.精心设计质疑。这是开发学生创造性思维的最有效途径。④.讲要精，练要实。要给学生留下一个创新的空间和时间。要做到教学过程既达到教育目标，又不加重学生负担，又有利于开发学生智力，提高创新能力之效。④分层教育。本学期为照顾部分学生参加职业等级鉴定考试，设立了电子商务初级个别专门辅导和小组实践，分层任务方式。效果良好。 2．教学手段现代化。 充分利用计算机网络环境，以新颖性、醒目性、变化性、奇特性等特点，引人入胜，通过文字、声音、图象等多种表现形式，唤起学生的好奇心，引起学生的注意、关心和探究，更有效地消除单调感、枯燥感、疲劳感和对学习的厌倦情绪。使学生对知识的掌握更加透彻，有助于激发学生的学习兴趣，提高学生的求知欲。 总之，改进课堂教学，有利于学生自信心的建立和学习动机的形成，有助于学生迁移能力的形成；有利于培养学生探索创新精神。是提高学生素质和创新能力的关键所在。
基因工程原理复习题思考题 5、简单叙述同尾酶和同裂酶的差别。 同尾酶：来源不同，识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端，连接后不能被相关的酶同时切割。 同裂酶：识别序列相同，切割位点有些相同，有些不同。分完全同裂酶和不完全同裂酶（PS：完全同裂酶：识别位点和切点完全相同。 不完全同裂酶：识别位点相同，但切点不同。） 6、连接酶主要有哪些类型？有何异同点？影响连接酶连接效果的因素主要有哪些？ 类型：DNA连接酶和RNA连接酶 异同点： 相同点：都能以DNA为模板，从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。 不同点：DNA聚合酶识别脱氧核糖核苷酸，在DNA复制中起作用；而RNA聚合酶聚合的是核糖核苷酸，在转录中起作用。 7、试分析提高平端DNA连接效率的可能方法。（传说中的网上答案） 1、低温下长时间的连接效率比室温下短时间连接的好。 2、在体系中加一点切载体的酶，只要连接后原来的酶切位点消失。这样可避免载体自连，应该可以大大提高平端连接的效率。 3、足够多的载体和插入片段是最重要的。 4、平端的连接对于离子浓度很敏感 5、尽可能缩小连接反应的体积 6、建议放在四度冰箱连接两天效率更高比14度好 8、基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些？ 1）大肠杆菌DNA聚合酶 2）Klenow fragment 3）T7 DNA聚合酶 4）T4 DNA聚合酶 5）修饰过的T7 DNA聚合酶 6）逆转录酶 7）Taq DNA聚合酶 第四章基因克隆的载体系统 1、作为基因工程载体，其应具备哪些条件？ 具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性（可转移性）； 具有合适的筛选标记； 具有较高的外源DNA的载装能力； 具有多克隆位点（MCS）； 具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点。 3、载体的类型主要有哪些？在基因工程操作中如何选择载体？ 基因工程中常用的载体(vector)主要包括质粒(plasmid)、噬菌体(phage)和病毒(virus)三大类。这些载体均需经人工构建，除去致病基因，并赋予一些新的功能，如有利于进行筛选的标志基因、单一的限制酶切点等。 4、质粒转化原理，影响转化率的因素有哪些？
教学课堂小结的自我评价 教学课堂小结的自我评价 课堂小结，有助于帮助学生把握课堂重点，储存知识，提高学习效益，课堂小结也是实施自我评价的最好时机。对此，应合理安排课堂教学时间，留出一定时间根据课堂教学目标、重难点来创设情境，让学生实施自我评价，以起到巩固知识技能和鼓舞学生学习信心的作用。小结时，请有创见的学生带作业上台讲讲设计思路，讲述中，充分肯定自己的优点，同时尽量找出不理想的地方。其他学生也可给予肯定或补充，从而使学生之间相互鼓励，树立信心，看到努力的方向；或由小组选出最好的作品，向全班展示讲评，从而产生竞争意识；或将全班大部分作业依次挂在讲台前，大家集体评议作业。总之，不论采用什么样的方法进行小结，都要让学生在教师指导下，积极参与，多作自我评价。 教学过程是一个特殊的认识过程，在这个过程中，学生是学习的主体，这是从古至今教学活动的基本规律，随着素质教育的进一步推进，在教育事业日益蓬勃发展的今天，我们更应该尊重并理解这条规律。美术教学应从学科本身的特点和小学生的心理特征出发，坚持面向全体，以人为本，并根据学生学习知识的需要，努力为学生设置适宜的学习场景，按照重感受、重创造、重想象、重表现、重实践、重发展的原则展开，进一步强化学生的主体意识，从而更有效地实现美术教学目的和任务。
第二篇：教学课堂小结时的自我评价 课堂小结，有助于帮助学生把握课堂重点，储存知识，提高学习效益，课堂小结也是实施自我评价的最好时机。对此，应合理安排课堂教学时间，留出一定时间根据课堂教学目标、重难点来创设情境，让学生实施自我评价，以起到巩固知识技能和鼓舞学生学习信心的作用。小结时，请有创见的学生带作业上台讲讲设计思路，讲述中，充分肯定自己的优点，同时尽量找出不理想的地方。其他学生也可给予肯定或补充，从而使学生之间相互鼓励，树立信心，看到努力的方向；或由小组选出最好的作品，向全班展示讲评，从而产生竞争意识；或将全班大部分作业依次挂在讲台前，大家集体评议作业。总之，不论采用什么样的方法进行小结，都要让学生在教师指导下，积极参与，多作自我评价。 教学过程是一个特殊的认识过程，在这个过程中，学生是学习的主体，这是从古至今教学活动的基本规律，随着素质教育的进一步推进，在教育事业日益蓬勃发展的今天，我们更应该尊重并理解这条规律。美术教学应从学科本身的特点和小学生的心理特征出发，坚持面向全体，以人为本，并根据学生学习知识的需要，努力为学生设置适宜的学习场景，按照重感受、重创造、重想象、重表现、重实践、重发展的原则展开，进一步强化学生的主体意识，从而更有效地实现美术教学目的和任务。 第三篇：课堂教学评价小结
基因工程实验报告 、
小麦GAPDH截短体的重组与表达 摘要：本实验通过基因工程（genetic engineering）手段对小麦总RNA进行提取、PCR扩增及与质粒载体的重组构建的操作，并将重组质粒以氯化钙法导入大肠杆菌感受态细胞，诱导目的基因表达，并在蛋白水平进行Western检测。通过本对实验的实践，我们对基因工程技术将会有一个比较全面的认识和了解。 关键字：小麦基因；载体；感受态 前言 基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术。为在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达，从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。 （一）实验过程
1.实验部分流程：
2．小麦总RNA提取（Trizol法） 2.1 材料 小麦幼苗 2.2 试剂配制及器具处理 ① 0.1％的DEPC H2O（DEPC：焦碳酸二乙酯） ②器具处理：试剂瓶、量筒、研钵、大小枪头和1.5ml和0.2ml 的EP管等用纱布包裹，在 0.1％的DEPC H2O中浸泡过夜（37℃），高压灭菌，80℃烘干备用。剪刀、镊子和药匙等160℃烘烤6h以上。 ③无RNA酶灭菌水（DEPC H2O）：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃×2h）装蒸馏水，然后加入 0.1%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高压灭菌。 ④Trizol ⑤ 75%乙醇：用新打开的无水乙醇和DEPC处理过的水配制75%乙醇（用高温灭菌器皿配制），然后装入高温烘烤的玻璃瓶中，存放于低温冰箱。 ⑥氯仿(最好用新的)。 ⑦异丙醇(最好用新的)。 2.3 操作步骤： ①先在研钵中加入液氮，再将小麦叶片剪成小段在液氮中磨成粉末，用液氮预冷的药匙取50～100mg组织粉末加入已盛有1ml的Trizol液的EP管中（注意研磨粉末总体积不能超过所用Trizol体积的10%），充分混合均匀。 ②室温放置5min，然后加入200μL的氯仿，盖紧EP管并剧烈摇荡15秒钟。 ③ 12000rpm离心10min，取上层水相于一新的EP管中（千万不要将中间的沉淀层和下层液混入，否则重新离心分离），加入500μL异丙醇，温和颠倒混匀。室温放置10min，12000rpm 离心10min。 ④小心地弃去上清液，加入1ml的75%乙醇，涡旋混匀，4℃下12000rpm离心5min。 ⑤重复步骤④。 ⑥弃去上清液（尽量将残余液体除去），室温或真空干燥5～10min（注意不要干燥过分，否则会降低RNA的溶解度）。用30μL DEPC处理过的水将RNA溶解，必要时可55℃～60℃水浴10min。RNA可进行mRNA分离，或贮存于70%乙醇并保存于-70℃。 3. RT-PCR扩增目的基因cDNA 3.1 试剂 ① RNA模板 ②Olig（dT）18 ③反转录缓冲液 ④dNTP ⑤ M-MULV反转录酶 ⑥ RNA抑制剂（RNasin） ⑦Premix EX Taq DNA聚合酶 ⑧ PCR特异引物 3.2操作步骤： 3.2.1 RNA的反转录 采用Thermo Scientific（Fermentas）RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit Total RNA 6μL（需加入RNA约1μg） OligodT primer 1μL H2O（nuclease-free）5μL 12μL 65℃ 5min，补加下列试剂： 5× Reaction buffer 4μL RibolockRNase Inhibitor 1μL 10mM dNTP Mix 2μL RevertAid M-MuLV Reverse Transcriptase 1μL 20μL 42℃ 60min 70℃，5min，﹣20℃保存
语文课堂教学改进小结5篇 本学期，我依据开学初所制定的课堂改进计划，以注重日常积累，加强语文实践；注重个性评价，引导学生积极思考，掌握学习方法为目标，不断改进教学方法，提高课堂效能，培养学生良好的学习习惯，切实提高学生的语文学习能力与水平，取得了一定的效果。 一、合理运用媒体，引导学生读懂文本 语文教学是有情感，有生命的，语文课改倡导学生直接与文本对话，本课语言优美，意境也很美，但没有故事情节，学生很难产生阅读兴趣，更别说产生情感体验。因此在教学中，我试图通过媒体，帮助学生完成对课文的体验，共同去感受美，表达美。 比如在学习重点段落第三小节（家乡的桥造型千姿百态）时，我用媒体打出整段课文，并把第一句用红色的字体凸显出来。让学生读这一小节时，我读第一句，学生接着读下文。读完后，我问学生，知道老师为什么这样做吗？聪明的学生在红色字体的提示下，马上找到了答案：第一句是总起句。这样学生对这一小节的写作结构就了然于心了。 在这一节中，有一句作者的感受“撑条小船穿梭其中，那光景，会让你怀疑进了月亮婆婆的家呢！”为了让学生理解这句话，理解“光景”的意思，我用媒体出示了月光下，
单拱桥倒映水中的画面，让学生用“我看见了。”练习说话。学生被眼前的美丽画面感染了，有的说：“我看见天上有一弯明月，水中桥洞和它的倒影也构成了一个又大又圆的月亮，在水面上闪着银光”；有的说：“我看见月光洒满大地，好像月亮婆婆给大地披上了一层银色的薄纱。”于是，学生们理解了这句话，最主要的是，他们也学会了用自己的话描述月夜美景了。 二、立足课堂，加强朗读训练 朗读是语文教学中不可缺少的环节，它不仅是一种能力，更是一种行之有效的教学手段。“读”是语文阅读教学的核心和灵魂，是培养学生综合性语文能力的客观要求和最重要的途径。忽视了“读”或“读”不到位，学生语感的培养和听说读写技能的训练便成了无源之水。因此，阅读教学要以读为本，读中感悟，读中积累，培养语感。我善用导语来调动学生情感，激发学生浓厚的兴趣，使学生积极主动地参与朗读。 其次，我能恰当运用媒体来激发情感。在教学中，我恰当地运用多媒体课件、图片、录像等教学手段，有意识地创设优美的情境，来诱发学生的朗读激情，使他们由不情愿朗读到渴望朗读，由被动观望到主动参与，从而热爱朗读。朗读的方式多种多样，我在指导学生朗读时力求做到读有变化，
课堂教学小结 优点： 1、充分利用多媒体教学,课件设计新颖, 利用动画导课自然,生动,快速有效,形象直观. 2、创设良好地语言环境，激发学生学习地情趣.学生地表演调动了课堂气氛，课堂结构严谨，有层次，调动了学生地积极性.能让学生用表演地形式来学习新课，真正做到了情景教学.通过学生表演，组织教学，学生学习地积极性较高. 3、课堂训练有系统，重点突出，落实到位，课堂容量大． 4、充分调动了学生地参与性与主动性，提高了课堂效率．分组和分层 作. 情境 充. 使用英语，加强课堂用语训练.多以师生互动来演示句型.多给学生一些鼓励地语言，在给学生指令时语言应再简洁一些，明确一些. 5、课堂上激烈地竞争让优秀学生大出风头.但机会面前，人人平等.老师应该有意识地多鼓励后进学生参与课堂，并能让他们感受到老师地关注. 6、增加大声阅读训练，口语练习不够充分，注重过程管理.在学生练习对话地过程中,教师不要随便打断学生地话,他们说完了,及时纠正效果更好 7、注意培养学生学习英语地素养，听说读写地能力应该得到充分地锻炼和加强.教师地要求应该是高标准地，有利于学生地成长. 8、未能及时纠正学生地错误，反馈校正不够及时.
单纯从课堂教学地环节来看，虽然也出现了不少地问题，有许多值得仔细考虑和改进地地方，但实事求是地讲，有一点是可以肯定地.我们地老师个人素质方面是没有多大问题地，基本功和个人能力都比较好.也说明只要我们能够努力，针对教学和学生存在地问题加以改进和提高，就能够做好教学工作，提高教育教学质量，提高英语教学成绩.现在据我分析，学生层面存在地比较集中地问题是学习兴趣、学习习惯、知识地落实方面存在问题.学习兴趣地培养，很关键.现在地问题不是学生学不好，而是学生根本不乐意学.所以会出现大面积两极分化地问题.学生学习英语没有动力.学地很死.学习习惯方面，学生听说读地方面很欠缺，没有养成良好地听说读地习惯，写得也不认真.而导致成绩不理想地直接原因就是知识落实不够.学习主动性没有，没有养成良好地学习习 哪些 题. 把培养学习兴趣贯穿于整个教学过程中.教师应注意做好两个方面地工作：一是教案地设计要符合学生地实际情况，周密地考虑到自己所讲地知识将会在学生地头脑中得到怎样地理解，并根据这一特点来确定教法，力争达到教与学地统一.例如，怎样引出新知识、新句型，怎样用同学们熟悉地生活现象去解释一个概念，怎样创造情景，怎样归纳学过地知识等，都要切合学生地实际，才能引起他们地兴趣.二是控制课堂上学生地注意力.我认为，中学外语教学地成败在很大程度上取决于教师是否能在课堂上保持一种生动活泼地教学气氛.只有生动，才能吸引学生地注意力；只有活泼，才符合学生地心理特点，使他们感受到学习地乐趣.一切方法，只要有利于激发学生地兴趣，有利于培养良好地学习
——凯1.简述本学期从基因组DNA提取到重组质粒鉴定的实验流程？（实验题目的总结） 答：①基因组DNA的提取；②PCR扩增目的基因；③凝胶电泳分离纯化PCR扩增的DNA片段以及DNA的体外连接；④重组质粒的转化及转化子的筛选；⑤重组质粒的抽提；⑥重组质粒的酶切鉴定。 2.如何正确使用微量移液器？（自己写的） 答：①选取合适量程的移液器；②根据取液量设定量程；③安装（吸液）枪头；④按至第一档，将枪头垂直伸入液面下适当位置吸液；⑤按至第二档将液体打入容器；⑥弃掉枪头；⑦将量程调至最大，放回原处。 3.在琼脂糖凝胶电泳点样时，DNA通常和什么试剂混匀，其主要成分和作用是什么？ 答：loading Buffer。主要成分为溴酚蓝，二甲苯青和甘油。 溴酚蓝和二甲苯青起指示作用；甘油加大样品密度，从而沉降于点样孔中，以免浮出。 4.简述制作1%的琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。（题目有歧义） 答：①取0.5g琼脂粉置于锥形瓶，量取50ml 1×TBE溶液于瓶中，微波炉加热至琼脂溶解； ②将移胶板放入胶室中，选取合适梳子垂直安插在移胶板上方，待琼脂降温至55℃下后，缓慢导入该胶室里；③量取合适量1×TBE溶液导入洗净的电泳槽，并正确插好电泳线；④等凝胶凝固后，将梳子垂直拔出；⑤点样；⑥轻放移胶板至电泳槽的合适位置；⑦打开电泳仪的开关，调好参数，开始电泳；⑧一定时间后，停止电泳，取出凝胶板，然后经BE染色放入成像系统显色、观察。 5.琼脂糖凝胶电泳中DNA分子迁移率受哪些因素的影响？（实验书P75） 答：①样品DNA的大小和构象；②琼脂糖浓度；③电泳电场；④温度；⑤缓冲液；⑥嵌入染料的存在与否； 6.在使用苯酚进行DNA抽提时应注意什么？（实验书P31） 答：注意不要吸取中间的变性蛋白质层。 7.在基因组DNA提取过程中常用酚、氯仿、异戊醇试剂，它们各有什么作用？ 答：酚——是蛋白质变性，抑制DNA酶的降解作用；氯仿——除去脂类，同时加速有机相与水相的分层；异戊醇——降低表面张力，从而减少气泡的产生。 8.提取DNA实验中，通常可选用哪些试剂沉淀DNA？ 答：冷的无水乙醇，冷的异丙醇，终浓度为0.1～0.25mol/L 的NaCl 9.简述在DNA提取实验中个试剂的作用（SDS，EDTA，酚/氯仿/异戊醇、无水乙醇，70%乙醇）。 答：SDS——破坏细胞膜，解聚核蛋白；EDTA——整合金属离子，抑制DNase活性；酚/氯仿/异戊醇——见第7题；无水乙醇——沉淀DNA；70%乙醇——洗涤DNA沉淀。 10.简述PCR扩增技术的原理及各种试剂的作用（Mg2+，dNTP，引物，DNA，缓冲液，Taq
基因工程实验报告
————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期： 2
基因工程实验报告 、
小麦GAPDH截短体的重组与表达 摘要：本实验通过基因工程（genetic engineering）手段对小麦总RNA进行提取、PCR扩增及与质粒载体的重组构建的操作，并将重组质粒以氯化钙法导入大肠杆菌感受态细胞，诱导目的基因表达，并在蛋白水平进行Western检测。通过本对实验的实践，我们对基因工程技术将会有一个比较全面的认识和了解。 关键字：小麦基因；载体；感受态 前言 基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术。为在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达，从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。 （一）实验过程
1.实验部分流程： 片段胶 小麦幼苗小麦总RNA RT-PCR扩增小麦pGEX-4T-1 表达载体 表达菌株 目的蛋白 目的蛋白 Western
2．小麦总RNA提取（Trizol法） 2.1 材料 小麦幼苗 2.2 试剂配制及器具处理 ① 0.1％的DEPC H2O（DEPC：焦碳酸二乙酯） ②器具处理：试剂瓶、量筒、研钵、大小枪头和1.5ml和0.2ml 的EP管等用纱布包裹，在 0.1％的DEPC H2O中浸泡过夜（37℃），高压灭菌，80℃烘干备用。剪刀、镊子和药匙等160℃烘烤6h以上。 ③无RNA酶灭菌水（DEPC H2O）：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃×2h）装蒸馏水，然后加入 0.1%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高压灭菌。 ④Trizol ⑤ 75%乙醇：用新打开的无水乙醇和DEPC处理过的水配制75%乙醇（用高温灭菌器皿配制），然后装入高温烘烤的玻璃瓶中，存放于低温冰箱。 ⑥氯仿(最好用新的)。 ⑦异丙醇(最好用新的)。 2.3 操作步骤： ①先在研钵中加入液氮，再将小麦叶片剪成小段在液氮中磨成粉末，用液氮预冷的药匙取50～100mg组织粉末加入已盛有1ml的Trizol液的EP管中（注意研磨粉末总体积不能超过所用Trizol体积的10%），充分混合均匀。 ②室温放置5min，然后加入200μL的氯仿，盖紧EP管并剧烈摇荡15秒钟。 ③ 12000rpm离心10min，取上层水相于一新的EP管中（千万不要将中间的沉淀层和下层液混入，否则重新离心分离），加入500μL异丙醇，温和颠倒混匀。室温放置10min，12000rpm 离心10min。 ④小心地弃去上清液，加入1ml的75%乙醇，涡旋混匀，4℃下12000rpm离心5min。 ⑤重复步骤④。 ⑥弃去上清液（尽量将残余液体除去），室温或真空干燥5～10min（注意不要干燥过分，否则会降低RNA的溶解度）。用30μL DEPC处理过的水将RNA溶解，必要时可55℃～60℃水浴10min。RNA可进行mRNA分离，或贮存于70%乙醇并保存于-70℃。 3. RT-PCR扩增目的基因cDNA 3.1 试剂 ① RNA模板 ②Olig（dT）18 ③反转录缓冲液 ④dNTP ⑤ M-MULV反转录酶 ⑥ RNA抑制剂（RNasin） ⑦Premix EX Taq DNA聚合酶 ⑧ PCR特异引物 3.2操作步骤： 3.2.1 RNA的反转录 采用Thermo Scientific（Fermentas）RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit Total RNA 6μL（需加入RNA约1μg） OligodT primer 1μL H2O（nuclease-free）5μL 12μL 65℃ 5min，补加下列试剂： 5× Reaction buffer4μL RibolockRNase Inhibitor 1μL 10mM dNTP Mix 2μL RevertAid M-MuLV Reverse Transcriptase 1μL 20μL 42℃ 60min 70℃，5min，﹣20℃保存
语文课堂改进小结_语文课堂小结怎么写 第一篇：语文课堂改进小结 改进措施：一、要加强诵读的指导和督促。由于相当长的时间以来，大家都不够重视诵读，致使诵读能力成为学生的弱项，诵读的知识对于学生也几乎是一片空白。因此，极有必要加强对诵读的指导。对诵读的指导应从督促学生讲普通话开始，这是训练诵读语感的最有效途径。接下去，要结合诵读实践，传授给学生一定的朗读知识，使其有迹可循，不至于漫无目的，无所适从。在课前要布置诵读预习作业，课堂上要检查，检查后要有中肯的评价、具体的指导，应适当地给予鼓励，增强学生的自信心。课后还要布置诵读作业，不仅读课文，还得读课外的美文，鼓励学生对文质兼美的文章熟读成诵。同时给足时间让学生练，加上有效的指导和督促，便能逐步提高学生的诵读水平。 一旦学生领悟到诵读的妙处，便会沉醉其中，欲罢而不能了。读得多、读得好了，语感便具备了，语言材料也充实了，再辅以语言知识的点拨，何愁语文学不好呢？ 三、如何加强预习，我以为有如下方法：1读通课文。预习中经常提出：认真读读课文，想想课文讲了什么?学生初读课文时，要指导他们注意随手画出文中的生字词，把课文读通顺，而后整体感知，才能初步理解课文内容。 2.带着问题读书。学起于思，思源于疑。指导学带着问题读书，能启迪思维，帮助学生理解课文内容。带着问题，学生边读边思，问题解决了，课文内容也就理解了。 3.精妙处多读。文章写得精彩的段落、章节，可以让学生反复朗读、品味。比如老舍先生的
《草原》一文，第一段讲作者初次见到的草原景色。文笔优美，意境开阔。预习中提出：预习课文，想想老舍先生笔下的草原是怎样的景象。预习时，这一段可让学生反复朗读，想像草原的美景图，直至成诵。 4.总结评价。课堂上，对于在预习过程中阅读表现积极、声情并茂者，教师要不吝赞美之词，及时表扬、鼓励，使学生体验到成功的快乐，调动其读书的积极性，使预习更好地服务于课堂。 5围绕预习重点精心设计训练，不少课文在预习中涉及到了文章的重难点，提出了理解课文的关键性问题，包含着语言文字训练的内容。围绕预习重点，确定语言文字训练点，精心设计训练，把预习重点贯穿于课堂教学，使学生的理解能力与语言训练相结合，有利于突破教学重难点，从而顺利地完成教学任务，获得良好的整体效益。从学生实际出发，重视预习中出现的个体差异。6 预习中常有画出不理解的词语、句子理解自己不懂的地方这一类要求。对于学生个体而言，所谓不理解是千差万别的。因此，在预习时，如何帮助学生找到自己不理解的地方，培养质疑的能力，是个很重要的工作。开始指导这类预习时，工作要细致。如画出不理解的词语，让学生知道先从生字新词中想想有无不理解不明白的，如果认为明白了，就要说说词语意思，想想是否下面角不明白的画出来； 其次可读课后练习中要求掌握的词语，从中找出不理解的词语； 还可以听听同学提出什么不理解的词语，想想想自己是否明白，用这样的方法去找到不理解的词语。对于句子和课文，也要边读边用课后 课堂改进收获概述: 语文课堂改进总结本学期，我依据开学初所制定的课堂改进计划，以注重日常积累，加强语文实践； 注重个性评价,引导学生积极思考，掌握学习方法为目标，不断改进教学方法，提高课堂效
基因工程原理练习题及其答案 一、填空题 1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。 3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。 4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。 5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。 7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。 9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。 10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。 11．EDTA是____________离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。 14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。 16．基因工程中有3种主要类型的载体：_______________、_____________、______________。 17．就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 18．一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测 不出质粒，这种现象叫。 19．pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于，它的四环素抗性基因来自于，它的氨苄青霉素抗性基因来自于。 20．Y AC的最大容载能力是，BAC载体的最大容载能力是。 21．pSCl01是一种复制的质粒。 22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和两种质粒改造而来。它的复制子来自，Amp 抗性基因则是来自。 23．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是；二是。 24．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是 和。 25．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来自，最大的克隆片段达到kb。 26．野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1) (2) (3) 。 27．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是，而来自噬菌体的主要结构是。 28．λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基 因组的的范围内。 29．在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是 。 30．用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc， 其目的是。 31．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) (3) (4) 。 32．Clark发现用Taq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出 碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的。 33．在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在 。 34．乙醇沉淀DNA的原理是。 35．假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件：
课堂教学经验小结 课堂教学不仅是一门科学，也是一门艺术。形成地理课堂教学艺术特色的因素很多，其中最主要且容易观察、训练的是教学活动方式的变化，即变化技能。变化技能是教学过程中信息传递。师生相互作用和各种教学媒体、教学方法，学生训练的转换方式。所谓变化是变化对学生的刺激，引起学生兴趣，是把无意注意过度到有意注意的有效方式。变化具有可以传递信息；吸引对学生某一课题的兴趣，呼唤热情。它能课堂教学充满生机，是形成教师教学风格的主要因素。我国教育工作者常用“文似看山不喜平”来形容教学的变化。国外教育工作者也有“变化是兴趣之母”的说法，从这些经验之谈中，可以看出变化在教学中的重要作用。变化技能大致可分为：教态的变化、信息传输通道及教学媒体的变化，师生相互作用的变化。 一、教态的变化 教态的变化是教师讲话的声音，教学中运用的手势、眼神、身体运动等变化。这些变化是教师教学热情及感染力的具体体现。教态变化的使用不需其它工具可以实现，因此是最基本、最常用的变化技能。 1、声音的变化：声音的变化是指教师讲话的语调、音量、节奏和速度的变化。课堂教学中，音量过低，不能刺激听觉的产生。更刺激不了学生神经系统的兴奋。学生会处于一种抑制状态。甚至会打起瞌睡来。反之，音量过大，又会使神经兴奋过度，产生疲劳感。讲话速度过快，学生没有思考的余地，在脑海中不能形成深刻的印象，学生
不会达到“身无彩凤双飞翼，心有灵犀一点通”的境界。过慢，造成疲沓气氛，使神经兴奋不起来，尤其是对青少年更不相宜。因此教师通过声音的变化。使教师的讲解富有戏剧性或重点突出。声音的变化可用来暗示不听讲或影响其他学生听讲的学生安静下来。在讲解或叙述中适当加大音量，放慢速度配合体态语来起到强化重点的作用。如“青藏地区自然环境的主要特征是高寒”在讲解中把‘高’‘寒’加大音量放慢速度，效果极好，在一次检测中学生对青藏地区自然环境的主要特征一题得分率100%。 2、目光的变化 眼睛是心灵的窗户，她随时可用于人与人之间的感情交流，并可用来表达多种感情，人的洗、怒、哀、乐均能从眼神的变化中表现出来。因此，地理教师在课堂上应充分利用目光的变化与学生增加感情上的交流。可以通过目光的变化对那些课堂上注意力集中，思维活跃回答问题积极踊跃的学生表示赞许，表扬和鼓励。也可对那些听课不认真、交头接耳或做小动作的学生暗示批评。教师期待的目光对学生来讲是一种莫大的鼓舞，在地理课堂教学中，经常由于学生紧张，胆小或不相信自己的能力而不敢开口。这时如果教师把目光变化为亲切期待的目光对其进行鼓励、询问和提示，学生很有可能会因为受到鼓励变的放松、大胆，并对自己充满信心。同时教师还可以利用学生眼神的变化获得信息反馈。实践表明：当学生兴奋时，对事物就感兴趣或领会了教师意图，理解了教师所讲的内容时，瞳孔变大；反之变小。这时教师要调教学方案。
1.简述本学期从基因组DNA提取到重组质粒鉴定的实验流程？ 答：①基因组DNA的提取；②PCR扩增目的基因；③凝胶电泳分离纯化PCR扩增的DNA片段以及DNA的体外连接；④重组质粒的转化及转化子的筛选；⑤重组质粒的抽提；⑥重组质粒的酶切鉴定。 2.如何正确使用微量移液器？ 答：①选取合适量程的移液器；②根据取液量设定量程；③安装（吸液）枪头；④按至第一档，将枪头垂直伸入液面下适当位置吸液；⑤按至第二档将液体打入容器；⑥弃掉枪头；⑦将量程调至最大，放回原处。 3.在琼脂糖凝胶电泳点样时，DNA通常和什么试剂混匀，其主要成分和作用是什么？ 答：loading Buffer。主要成分为溴酚蓝，二甲苯青和甘油。 溴酚蓝和二甲苯青起指示作用；甘油加大样品密度，从而沉降于点样孔中，以免浮出。 4.简述制作1%的琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。 答：①取0.5g琼脂糖置于锥形瓶，量取50ml 1×TBE溶液于瓶中，微波炉加热至琼脂糖溶解；②将移胶板放入胶室中，选取合适梳子垂直安插在移胶板上方，待琼脂降温至55℃下后，缓慢导入该胶室里；③量取合适量1×TBE溶液导入洗净的电泳槽，并正确插好电泳线； ④等凝胶凝固后，将梳子垂直拔出；⑤点样；⑥轻放移胶板至电泳槽的合适位置；⑦打开电泳仪的开关，调好参数，开始电泳；⑧一定时间后，停止电泳，取出凝胶板，然后经BE染色放入成像系统显色、观察。 5.琼脂糖凝胶电泳中DNA分子迁移率受哪些因素的影响？（实验书P75） 答：①样品DNA的大小和构象；②琼脂糖浓度；③电泳电场；④温度；⑤缓冲液；⑥嵌入染料的存在与否； 6.在使用苯酚进行DNA抽提时应注意什么？（实验书P31） 答：注意不要吸取中间的变性蛋白质层。 7.在基因组DNA提取过程中常用酚、氯仿、异戊醇试剂，它们各有什么作用？ 答：酚——是蛋白质变性，抑制DNA酶的降解作用；氯仿——除去脂类，同时加速有机相与水相的分层；异戊醇——降低表面张力，从而减少气泡的产生。 8.提取DNA实验中，通常可选用哪些试剂沉淀DNA？ 答：冷的无水乙醇、冷的异丙醇、终浓度为0.1～0.25mol/L 的NaCl 9.简述在DNA提取实验中个试剂的作用（SDS，EDTA，酚/氯仿/异戊醇、无水乙醇，70%乙醇）。 答：SDS——破坏细胞膜，解聚核蛋白；EDTA——整合金属离子，抑制DNase活性；酚/氯仿/异戊醇——见第7题；无水乙醇——沉淀DNA；70%乙醇——洗涤DNA沉淀。 10.简述PCR扩增技术的原理及各种试剂的作用（Mg2+，dNTP，引物，DNA，缓冲液，Taq DNA聚合酶）。 答:(1)利用半保留复制的原理，以待扩增的DNA为模板，通过一系列酶在体外引物介导下，
基因工程综合实验报告 A型产气荚膜梭菌α毒素基因克隆及表达 班级生物工程081班 姓名盖雪 学号08771029 指导教师高凤山 实验时间2011.10.10-10.14 成绩
一、实验原理 二、主要试剂 DNA Ligation Kit Ver.2.0; Eco RI、Bam HI限制性内切酶；含15%甘油的 0.1mol/L CaCl2，20-30mL。无菌;0.1mol/L CaCl2 , 20-30mL ；50%甘油（无菌，保存菌种用，50mL）4×25mL LB液体培养基(现配现用)，卡那霉素（Kan）100mg/mL配2mL（过滤），X-gal 二甲基甲酰胺配成20mg/mL 配2mL; IPTG 24mg/mL, 配2mL（需过滤）;蛋白Marker; 0.5M EDTA,pH8.0; 溴化乙锭溶液(EB) （贮存浓度：10mg/mL，使用浓度0.5μg／mL）
三、仪器设备 紫外成像系统，高速冷冻离心机，恒温震荡培养箱，高压灭菌锅，冰箱，水浴锅，微波炉，电炉子，试管架，tube 架，试管，瓶塞，锥形瓶，胶板，电泳槽（包括琼脂糖凝胶和SDS-PAGE），电泳仪，培养皿，移液枪，枪头（各种规格），玻璃涂棒，记号笔，标签纸，卫生纸，水漂（水浴用），试纸，称量纸，一次性手套，酒精灯，火柴，药勺，搅拌子，量筒，烧杯，镊子，tip, tube(1.5mL, 2mL) 五、实验步骤 (一)准备工作 LB培养基配制；LB固体培养基配置；接菌（制备感受态用） 1）LB固体配制 配制固体培养基100mL 加入蒸馏水100mL溶解，用2mol/L NaOH调pH值至7.4，121℃灭菌20min。 灭菌结束后，待温度降至80℃以下时，方能取出，在超净台上，当培养基凉至50-60℃时，迅速加入Kan 30μL（若氨苄，加100ul），摇匀，倒板(4个)。凝固后放入4℃冰箱。 2）LB液体配制 配制100mL液体LB培养基 加入蒸馏水100mL溶解，用2mol/L NaOH调pH值至7.4。 然后分装，每管5mL，每人分装2管，一共12管；另外分装30mL LB与三角瓶中，余下的LB在原三角瓶中与试管等一起高压，121℃，20min。高压后，将剩余三角瓶中的LB分装至1.5mL tube中，每管800μL LB (共10个)。在时间允许的情况下，将高压后的LB试管加入卡那，每管1.5μL。 总结：需要灭菌的东西-液体培养基（试管、30mL三角瓶及剩余液体LB的三角瓶）-固体培养基、离心管（至少30个）、各种规格的枪头。 3）接菌 下午，接种BL21感受态于1管5mL培养基中，37℃震荡培养。 （二）感受态细胞制备、转化、重组菌接种 1）感受态细胞的制备 1.从大肠杆菌DE3平板上挑取一个单菌落接种于5mL LB液体培养基的试管