支原体培养基
支原体培养基
PPLO Broth，鲱鱼精DNA，酚红，LAB-LEMCOpowder，水 800ml，调ph5.0,115℃灭菌20分钟。冷却后，加马血清200ml。无菌过滤尿素2.5g，精氨酸2.5g，L-半胱氨酸0.1g，万古霉素50mg，多粘菌素25mg。调ph 6.0。（培养基分装到5ml白盖玻璃瓶种，3.6ml/瓶，-20℃保存。）
药敏板包被
1.试验材料
抗生素LIN 14mg，ERY19.5mg，其余均为10mg
2.抗生素母液配制，每瓶加200ml无水乙醇。
其他孔
药敏板质控
1.紫外灯照射至少30min，菌株拿出融化，标记药敏板。
2.加C-孔，每块药敏板对应一瓶培养基，每孔100ul。
3.菌液稀释：摇匀解脲或人型支原体菌株，取4个空瓶，标记10-1至10-4，每瓶加3.6ml生理盐水，摇匀菌液，吸400ul至10-1，依次稀释至10-4,。
4.加药敏板：加入对应浓度菌液至空白培养基，每孔100ul，加样出C-孔的所有孔。
5.加完后，分别滴两滴石蜡油，盖药敏板，放37℃培养箱培养24h，48h，观察结果。
解脲支原体人型支原体菌株活化保存
1.紫外照射30min，培养基提前放37℃培养箱，菌株拿出活化。
2.解脲支原体菌株：吸出5ml加至200ml培养基中摇匀，37℃培养。
3. 人型支原体菌株：吸出7.5ml加至200ml培养基中摇匀，37℃培养。
4.观察颜色发红，开始分装，每支500ul。
Uu菌株保存
400ul菌液加入到200ml培养基中（下午4:30），摇匀，37度，第二天8:30拿出，
观察颜色偏红，分装至1.5mlPE管中，每管500ul，放超低温。
检测解脲支原体菌活力和人型支原体CCU
一.试验材料
解脲支原体菌株，人型支原体菌株，药敏板，培养基，生理盐水
二.步骤
1.紫外30分钟，板子做uu，1个浓度1块，标记
2.Uu：稀释10-1至10-4 4个浓度的菌液（
3.6ml+0.4ml），分别加至对应浓度的空白培养基，摇匀，加药敏板上，滴两滴石蜡油培养。
3.Mh：取10个蓝盖玻璃瓶，每瓶加2.7ml生理盐水，分别标记10-1至10-10,10-1中加300ul菌液，依次稀释。吸100ul分别加至对应浓度的空白培养基3.6ml中，摇匀，37℃培养。
检测解脲支原体菌株CCU
一、试验材料
解脲支原体菌株，生理盐水，解脲人型支原体培养基
二、步骤
紫外30分钟，取10个蓝盖玻璃瓶，分别加2.7ml生理盐水，标记10-1至10-10,10-1中加300ul菌液，依次稀释。吸100ul分别加至对应浓度的空白培养基3.6ml中，摇匀，37℃培养。
万古霉素
即盐酸万古霉素，西药名。为肽类抗生素。用于治疗对甲氧西林耐药的葡萄球菌引起
的感染，对青霉素过敏的患者及不能使用其他抗生素感染患者，如心内膜炎、骨髓炎、败血症或软组织感染等，用于防治血液透析患者发生的葡萄球菌属所致的动、静脉血
分流感染等。
多粘菌素
对绿脓杆菌、大肠杆菌、肺炎克雷白杆菌，以及嗜血杆菌、肠杆菌属、沙门菌、志贺菌、百日咳杆菌、巴斯德菌和弧菌等革兰阴性菌有抗菌作用。
L-半胱氨酸
L-半胱氨酸又称半胱氨酸，是一种人体非必需氨基酸，氨基酸是蛋白质的组成单位，蛋白质是生命的物质基础，大至人类小到微生物，无一不是由蛋白质组成的。Chemicalbook蛋白质是由肽类所组成，肽类的肽链是由氨基酸组成。不同蛋白质是由氨基酸组成不同顺序与长短的肽链所组成。与遗传有关的基因实际上也是不同顺序的氨基酸链。
甲氧苄啶:
抗菌药。用于对其呈现敏感的大肠埃希菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌和某些肠杆菌属和腐生葡萄球菌等细菌所致的急性单纯性下尿路感染初发病例。
支原体培养及药敏阳性什么意思 支原体培养及药敏呈现阳性，这说明感染了支原体，如果是已婚人士，一定要夫妻同治，在转阴以后说明彻底治好，但是要及时复查，避免出现反复发作的情况，治疗选择一些敏感的药物是比较重要的，这样对于治疗的效果会更好，除了治疗以外，平时要加强调养，注重饮食保健，保持充分的休息，在治疗期间不能有性生活。 ★支原体的治疗方法：1：需使用敏感抗生素，足量治疗(一般青霉素类没有作用)。2：必须治疗达到足够的时间。一般7-10天。同时注意，预防二次感染。(保持内裤干净，性伴侣同时治疗，禁忌酒和刺激性食物)。最好能在疾病治愈以后再要小孩。解脲支原体是一种通过性接触传播的疾病。3 四环素类及大环内酯类药物效果较佳，尤其是后者。二种或三种药物联合治疗为最好的方案。希舒美首剂1.0g，后0.5g/日，qd，5天1个疗程+美满霉素首剂200mg，后100mg，7天1个疗程+肤阴洁坐浴，1周后，复查白带培养及肝、肾功能。 4 及早到正规医院治疗，并且遵照医嘱定期复查，才能取得良好的疗效。
★支原体阴道炎的患病途径很多 包括性接触、直接接触、自体感染、医源性感染等。有不少女性检查出支原体感染属于携带者，也有些是自体感染(支原体)会寄生人体。解脲支原体感染主要通过性生活传播，多见于年轻性旺盛时期，尤多见于不洁性交后。当泌尿生殖道发生炎症，粘膜表面受损时解脲支原体易从破损口侵入，引起泌尿生殖道感染。解脲支原体感染后，患者大多无明显症状，因此，很难被患者觉察，也易造成医生漏诊。 解脲支原体可侵犯尿道、宫颈及前庭大腺，引起尿道炎、宫颈炎与前庭大腺炎;上行感染时，可引起子宫内膜炎、盆腔炎、 输卵管炎，尤其输卵管炎多见。解脲支原体感染造成的女性生殖器官病理性改变，是不孕不育的重要原因。 因此，女性一定要洁身自爱，注意养成良好的生活卫生习惯，杜绝支原体感染，发现患上支原体阴道炎后要及时到医院接受正规的治疗。
第六节支原体 支原体是一类目前所知能在无生命培养基中独立生活，自行繁殖的最小微生物。支原体感染的范围非常广泛，包括人，动物，植物，昆虫及组织培养的细胞。人体可分离出十几种支原体，其中一些对人有致病性如：肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体、生殖支原体、及发酵支原体等。能引起生殖泌尿系感染的支原体主要有两种，即解脲支原体和人型支原体。肺炎支原体主要引起呼吸道的感染。 支原体的体外药敏试验最早是在上世纪60年代提出。在过去的40多年中，很多研究采用肉汤稀释法和琼脂为基础的方法报道了支原体的抗菌活性，但一直没有一个公认的、标准的参考方法。在过去的几年，有关支原体体外药敏试验方法学的研究也有一些报道，但仍存在着一些不足。直至2011年CLSI M43指南出现，规范了支原体体外药敏实验的方法（微量肉汤法和琼脂稀释法）、明确了质控菌株及对不同抗生素的MIC范围、建立了临床用于支原体治疗药物的折点。因支原体培养时间较长，临床治疗支原体感染很难依靠培养及药敏的结果，基本上采用经验抗菌药物的治疗，因此支原体体外药敏试验对于临床分离株的耐药性监测以及新药的研发更具意义。 一、药敏的适应征 1.临床分离的支原体通常不需要进行药敏试验，可经验性使用抗菌药物治疗。 2.当临床经验性抗菌药物治疗效果不好时，而可用于支原体感染治疗的药物又非常的有限，需要进行支原体的体外药敏试验。目前，已知可能的耐药包括： 1）人型支原体、脲原体的某些种对四环素类药物的耐药。 2）人型支原体、脲原体的某些种对氟喹诺酮类药物的耐药。 3）肺炎支原体、脲原体某些种对大环内酯类药物的耐药。 4）人型支原体对克林霉素耐药。 这时就要考虑可用于治疗的药物中那些还可以用于耐药菌株的治疗。 3. 从无菌体液或生殖道以外的部位中分离的人型支原体、脲原体应做药敏，尽管人型支原体、脲原体的某些种常常是泌尿生殖道的致病菌。特别是从有播散性感染的患者如：新生儿或免疫低下患者的无菌部位分离的人型支原体、脲原体应进行体外药敏试验。 二、方法学 （一）肉汤稀释法 1. 微量肉汤稀释法 1）方法 在无菌的96孔板上，加入一定量的液体培养基（含有酚红指示剂），将测试的抗生素倍比稀释。加入终浓度为104～105CFU/ml新鲜培养物到不同抗生素浓度孔中。另外设立3个对照孔：阴性对照（只加培养基）；药物对照（肉汤 + 含抗生素肉汤）；阳性对照（肉汤 + 培养物）。加样完毕，在每孔里面滴加3到5滴无菌液体石蜡，防止长时间培养液体挥发影响实验结果准确性。盖上板盖，在适宜的温度和气体环境中培养，阳性对照孔正常生长后读取MIC。
两种ELISA 方法来评估三种不同方式感染肺炎支原体后的 血清学结果 E. Fano , C. Pijoan, S. Dee 勃林格殷格翰动物保健 余平良译 概述和试验目的 尽管分子技术已经应用在M.hyo 的诊断，但是血清学方法在猪群感染方式的确诊方面仍然十分重要（1）。在田间条件下血清学检测的结果差异很大，这反应了在感染压力和感染途径等方面具有某些流行病学的特征。该试验证明了DaKo ELISA 比TWeen 20 ELISA 更加敏感（2,3），本研究的目的是为了比较猪肺炎支原体的三种不同感染方式下流行病学的模式，以及比较两种检测肺炎支原体的ELISA 方法的敏感性。 材料与方法 本研究评估了M.hyo 三种感染方式：气管内接种，直接接触感染，间接接触感染。12头3月龄的肺炎支原体阴性的后备母猪气管内接种10ml （105ccu/ml ）肺炎支原体232株。在同一天12头同龄的阴性猪与接种猪关在一起，让其直接接触感染。第三组12头猪关在离感染猪圈3米远的栏中。第三组猪就做为间接接触感染的猪。为了评估血清学曲线图，本研究把三组猪做了纵向的血清学比较检测。试验感染后的第0, 28, 35, 42, 49, 63, 91, 119 和154天，分别采血用DAKO ELISA 检测M.hyo 的抗体。为了同DAKO ELISA 比较，该试验同时还采用TWeen20 ELISA 对血样进行了检测。 结果与讨论 三种不同感染方式的猪血样检测的结果见表1.。两组接触感染的猪其血清阳转时间迟于接种猪，尤其是间接接触感染组。尽管接种猪和接触感染猪都在同一天开始试验，但是接触感染猪很可能是当接种猪排菌后（一周后）才感染的。即使这样，三种感染方式的结果的差异仍然明显。本研究的结果可以解释田间条件下血清抗体曲线图的差异。如前所述(2,3), Dako ELISA 比Tween 20检测法更加敏感，并且能早一周检测到抗体。这个差异在三组猪的试验中表现出来了（表2,3,4）。 表 1. 三个组的血清学反应. IT ，为气管内接种；DC, 为直接接触感染；IC, 为间接接触感染 感染后的天数 感 染比例 %
第一六九医院药物过敏性试验方法及注意事项 一、预防药物过敏须遵循以下原则： 1.减少药物过敏反应危害的有效办法是在使用前详细询问病人过敏史，药物使用过程中密切观察病人的反应，出现异常反应及早发现，及早处理。 2.过敏性试验本身具有诱发严重过敏反应如呼吸衰竭、休克等的危险，过敏试验过程中应严密观察病人反应，并做好急救准备。 3.过敏性试验结果具有临床参考价值，但存在假阳性或假阴性的情况。过敏试验阴性的病人用药过程中仍需要密切观察，并做好急救准备。 4.如发生过敏性休克，应立即肌内或皮下注射0.1%肾上腺素注射液0.5～1ml（小儿酌减），必要时可数分钟重复注射一次或进行静脉注射。并根据需要进行输液、给氧、滴注肾上腺皮质激素，应用升压药和其他必要的急救措施。 5、三类患者禁做皮试:（1）过去几年曾发生过强烈的过敏反应者,建议不用β-内酰胺类抗菌药。（2）正在使用β受体阻滞剂的患者,因这些药物可促发该患者发生非预期的过敏性休克反应。（3）患有广泛皮疹疾病的患者,因可混淆皮试结果。二、国家药典规定需要皮试的药品 品? ?? ?名? ?? ?? ?? ?备? ???? ?? ?注 1细胞色素C注射液? ?? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(85)
3青霉素钠注射剂? ?? ?? ?? ?? ?2010年版中国药典《临床用药须知》(624) 4青霉素钾注射剂? ?? ?? ?? ?? ?2010年版中国药典《临床用药须知》(628) 5青霉素v钾片剂? ?? ?? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(628) 6普鲁卡因青霉素注射剂? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(629) 7苄星青霉素注射剂? ?? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(630) 8苯唑西林钠注射剂? ?? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(630) 9氯唑西林钠注射剂、胶囊、颗粒2010年版中国药典《临床用药须知》(631) 10氨苄西林钠注射剂、胶囊? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(632) 11阿莫西林片剂、胶囊、注射剂? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(634) 12哌拉西林钠注射剂? ?? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(635) 13磺苄西林钠注射剂? ?? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(637) 14胸腺素注射剂? ?? ?? ?? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(1137) 15白喉抗毒素注射剂? ?? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(1143) 16破伤风抗毒素注射剂? ?? ?? ?? ? 2010年版中国药典《临床用药须知》(1144) 17多价气性坏疽抗毒素注射剂? ? ?? 2010年版中国药典《临床用药须知》(1146)
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１２．Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．６ 中国临床医学 ２ ０１２年１２月 第１９卷 第６期 ·论著· 肺炎支原体的分离鉴定与药敏性研究 刘展１＊ 袁春丽１＊ 李青凤２ 汪水城１ 王本旭２ （１．北京市怀柔区妇幼保健院，北京 １０１４００；２．北京军区疾病预防控制中心，北京 １０００４２ ）摘要 目的：探讨肺炎支原体的临床分离株对临床常用药的敏感性。方法：将临床采集的咽试子标本经过选择性培养基筛选培养，同时进行聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测，确定分离到的支原体为肺炎支原体。将肺炎支原体与不同浓度的临床常用抗生素混合， 观察液体培养基颜色的变化，判断肺炎支原体对药物的敏感性。结果：成功分离到１株肺炎支原体；阿奇霉素、红霉素和头孢呋辛钠浓度分别稀释至３１μｇ／ｍＬ、１２５μｇ／ｍＬ、５００μｇ／ｍＬ时，肺炎支原体抑制；而头孢曲松钠、美洛西林、氨苄青霉素等抗生素对支原体无抑制作用，培养基颜色均由红色变为橙黄色。结论：肺炎支原体临床分离株对阿奇霉素高度敏感， 对红霉素和头孢呋辛钠中度敏感。关键词 肺炎支原体； 分离鉴定； 药敏性中图分类号 Ｒ７２５．６ 文献标识码 Ａ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ Ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ＬＩＵ Ｚｈａｎ１ ＹＵＡＮ Ｃｈｕｎｌｉ１ ＬＩＱｉｎｇｆｅｎｇ２ ＷＡＮＧ Ｓｈｕｉｃｈｅｎｇ１ ＷＡＮＧ Ｂｅｎｘｕ２ １．Ｈｕａｉｒｏｕ Ｍａｔｅｒｎａｌ ａｎｄ Ｃｈｉｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０１４００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｏｍｍａｎｄ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００４２，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｄｒｕｇ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｓａｍｐｌｅｓｏｆ ｔｈｒｏａｔ ｓｗａｂ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ ｉｎ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ，ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＰＣＲ．Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｗｅｒｅｍｉｘｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｑｕａｎｔｉｔｙ ｏｆ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ．Ｉｆ ｏｎｅ ｄｒｕｇ ｃｏｕｌｄ ｋｉｌｌ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ，ｔｈｅ ｃｏｌｏｒ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｄｉａ ｗｏｕｌｄ ｎｏｔ ｃｈａｎｇｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｏｎｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐ ｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｔｙｐｅ ｗａｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ．Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ，ｅｒｙｔｈｒｏ－ｍｙｃｉｎ ａｎｄ ｃｅｆｕｒｏｘｉｍｅ ｓｏｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｄｉｌｕｔｅｄ ｔｏ ３１μｇ／ｍＬ，１２５μｇ／ｍＬ，５００μｇ／ｍＬ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｗｅｒｅｓｕｐｒｅｓｓｅｄ．Ｃｅｆｔｒｉａｘｏｎｅ ｓｏｄｉｕｍ，ｍｅｚｌｏｃｉｌｌｉｎ ａｎｄ ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ ｈａｄ ｎｏ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｒｏａｔ ｓｗａｂ ｓａｍｐｌｅｓ ｉｓ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｅａｓｉｌｙ ｂｙ ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ．Ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎａｎｄ ｃｅｆｕｒｏｘｉｍｅ ｓｏｄｉｕｍ ａｌｓｏ ｈａｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ．Ｋｅｙ Ｗｏｒｄｓ Ｍｙｃｏｐｌｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ； Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ； Ｄｒｕｇ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ＊刘展和袁春丽为共同第１作者 基金项目：北京市首都医学发展科研基金（编号：２００９３２６７）通讯作者 王本旭，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇ ｂｅｎｘｕ２０２８＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ 支原体肺炎是肺炎支原体（ｍｙｃｏｐ ｌａｓｍａ ｐｎｅｕ－ｍｏｎｉａｅ，ＭＰ） 引起的肺炎。支原体肺炎起病缓慢，患者有发热、 阵发性刺激性咳嗽、少量黏液性或黏液脓性痰。支原体肺炎多发于青少年，患病率占肺炎的 １５％～３０％［１］ 。目前临床治疗支原体肺炎的常用药 物包括阿奇霉素、红霉素等［ ２］ 。本研究旨在通过探讨ＭＰ临床分离株对临床常用抗生素的敏感性， 为临床治疗支原体肺炎提供用药依据。 １ 资料与方法 １．１ 材料 乳糖酸阿奇霉素（东北制药集团沈阳第一制药有限公司，０．２５ ｇ ，２５万Ｕ／瓶），头孢呋辛钠（Ｅｓｓｅｔｉ Ｆａｒｍａｃｅｕｔｉｃｉ ｓ．ｒ．ｌ，Ｉｔａｌｙ，０．７５ ｇ ／瓶），头孢曲松钠（上海罗氏制药有限公司，０．５ ｇ ／瓶），青霉素（石家庄制药集团有限公司，１ ｇ ／瓶）；美洛西林（华北制药有限公司，１ ｇ ／瓶）；乳糖酸红霉素（湖南中南科伦药业有限公司，０．２５ ｇ ／瓶）；支原体培养基ＣＭ０４０１、ＣＭ０４０３、ＳＲ００５９和ＳＲ００６０Ｃ（Ｏｘｏｉｄ公司，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇ ｄｏｍ）；核酸分子量标准ＤＬ２０００ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ（大连宝生物工程有限公司）。１．２ 研究方法 １．２．１ 双向培养基制备 １００ ｍＬ蒸馏水中加入３．５５ ｇ ＣＭ０４０１，１２１℃高压灭菌１５ ｍｉｎ，每个１５ｍＬ培养管中加入１ ｍＬ灭菌后的ＣＭ０４０１培养基，自然凝固。取１支ＳＲ００６０Ｃ，加入２０ｍＬ蒸馏水溶解。向每个培养管中加入２ ｍＬ ＳＲ００６０Ｃ，４℃保存备用。 １．２．２ 咽拭子标本选择性培养与鉴定 将咽拭子标本浸入双向培养基中，３７℃培养２周左右。当培养基颜色由红色转变为橙黄色时，将培养液于ＭＰ固体培养（ＣＭ０４０３＋ＳＲ００５９＋琼脂粉）上划板培养，直至镜下看到“ 油煎蛋”样菌落长成为止。挑取菌落于双相培养基中继续培养，观察培养基颜色变化。１．２．３ ＭＰ的ＰＣＲ鉴定方法 支原体核酸提取方 法参照ＤＮｅａｓｙ Ｂｌｏｏｄ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ，Ｃａｔ２ ２６
来自：杨传松,胡雪飞,廖晚珍. 2379例女性患者支原体感染情况与药敏分析[J]. 实验与检验 医学,2010,01:77-78. 2379例女性支原体感染情况与药敏分析 杨传松⒈胡雪飞⒉廖晚珍⒉ 【摘要】目的了解女性生殖道支原体（Mycoplasma）感染（主要为南昌地区）与药物敏感试验情况，为临床治疗提供依据。方法采用支原体试剂盒对2379例疑诊为生殖道感染女性患者的宫颈分泌物进行支原体培养、鉴定及药敏试验。结果2379份标本中，支原体检测阳性1503例，阳性率63.2%，其中解脲支原体（UU）46.0%（1094/2379），UU+ MH（人型支原体）混合感染及MH分别为15.4% (367/2379)、1.8%（42/2379）。药敏结果：支原体对强力霉素（Dox）、交沙霉素（Jos）、美满霉素（Min）的敏感率均在70%以上,另外,UU对克拉霉素（Cla）、四环素（Tet）也较敏感，分别为92.3%、84.7%，但Cla在MH及UU+ MH混合感染时，敏感率较低,仅为2.4%和7.4%；耐药率较高的是环丙沙星（Cip）、壮观霉素（Spe）等。结论本地区女性生殖道支原体感染以UU 为主，其次是UU+ MH混合感染，较敏感的抗菌药为：Dox、Jos、Min，仅UU 感染时还可选用Cla。为减低支原体的耐药率，建议临床根据药敏结果用药。 【关键词】支原体感染药敏非淋球菌尿道炎 支原体（Mycoplasma）是一类无细胞壁、形态上呈高度多形性，能通过除菌滤器，在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞微生物，由于它们能形成有分枝的长丝，故称之为支原体［1］。感染人类的支原体有十余种，女性生殖道以人型支原体(MH)及解脲支原体（UU）最常见。MH感染多引起阴道炎、宫颈炎和输卵管炎，UU多引起非淋球菌性尿道（non-gonococcal urithritis,NGU）。支原体多与宿主共存，不表现感染症状，仅在某些条件下引起机会性感染，且常和其他致病菌共同致病［2］。大量的研究证明UU与自然流产、先天缺陷、死胎和不孕症有关［3］。支原体感染还是一种性传播疾病，近年来其发病率日趋上升且耐药株增多，受到医务工作者的关注。为了解本地区女性生殖道支原体感染与耐药情况，为临床用药提供参考，作者对来我院就诊的2379位女性患者宫颈分泌物做支原体检测，现将结果报告如下： ----------------------------------------------------- 作者单位：1. 南昌大学公共卫生学院2005级医学检验系 2. 南昌大学第一附属医院检验科 作者简介: 杨传松(1984.04.21),男, 南昌大学公共卫生学院2005级医学检验系学生. 通讯作者: 胡雪飞,E-mail:hxf123666@https://www.doczj.com/doc/ed17185947.html, 1资料与方法 1.1一般资料选自2009年1月~6月来我院妇产科门诊及住院的2379例女性 患者，进行宫颈分泌物检测。
480例解脲支原体感染的药敏分析 目的了解女性生殖道解脲支原体（UU）感染的体外耐药情况。方法对480例女性生殖道感染解脲支原体进行药敏分析和耐药性检测。结果14种抗生素药敏试验结果显示耐药率高的前7位抗生素分别是环丙沙星（73%）、壮观霉素（51%）、乙酰螺旋霉素（48%）、氧氟沙星（49%）、红霉素（40%）、阿奇霉素（36%）、罗红霉素（34%），耐药性最低的两种分别是强力霉素（2%）和米诺霉素（4%）。耐6种以上抗生素耐药率为30%。结论以往认为对UU敏感较高的喹诺酮类和大环脂类抗生素目前耐药性均明显升高，临床上应做支原体药敏检测，合理应用抗生素，以降低耐药性的发生。 标签：解脲支原体；药物敏感试验；耐药性 解脲支原体是非淋菌性泌尿生殖道感染的主要病原体，可引起多种妇科感染，急、慢性炎症，并与异位妊娠、不孕、流产等疾病密切相关［1］。临床上因一些UU感染症比较隐匿不易引起医生和患者的重视，致使病情迁延加重。另一方面由于广谱抗生素的滥用使耐药菌株日益增多。为了了解UU耐药现状，对480例阳性作耐药分析。 1资料与方法 1.1一般资料选择2009年1月~2009年12月于笔者所在医院妇科门诊确诊为UU感染且行药敏试验者为研究对象。 1.2标本采集与培养检测以无菌棉拭子插宫颈管约2 cm，旋转停留片刻，取出，置入无菌试管，将分泌物接种于培养基中。支原体培养基及药敏试剂盒购自珠海黑马生物工程有限公司。操作方法按试剂盒说明进行。14种药物敏感试验药物为：红霉素（ERY）、乙酰螺旋霉素（ACO）、交沙霉素（JOS）、四环素（JES）、强力霉素（DOX）、米诺霉素（CLA）、罗红霉素（ROX）、左氧氟沙星（OFL）、阿奇霉素（AZI）、克拉霉素（CLA）、司帕沙星（SPA）、环丙沙星（CIP）、壮观霉素（SPE）。 2结果 14种抗生素耐药率高的前7位分别是环丙沙星（73%）、壮观霉素（51%）、乙酰螺旋霉素（43%）、氧氟沙星（49%）、红霉素（40%）、阿奇霉素（36%）、罗红霉素（34%），耐药性最低的2位分别是强力霉素（2%）和米诺霉素（4%）。余下5种由高至低分别是：克拉霉素（35%）、司帕沙星（21%）、氧氟沙星（23%）、四环素（10%）、交沙霉素（13.7%）。在抗生素类别上喹诺酮类耐药率最高，大环脂类次之。而且，同类抗生素中多重耐药的比率也很高。以喹诺酮类为例，同时两种耐药高达47%。本组病例有1例患者14种抗生素全部耐药，同时对6种以上抗生素耐药率高（比率达30%）。
300例儿童咽拭子肺炎支原体鉴定培养及药敏分析 目的分析致儿童呼吸道感染的肺炎支原体（MP）的鉴定培养和药敏试验结果，为临床合理使用抗生素提供依据。方法采用肺炎支原体鉴定培养试剂盒对300例急性呼吸道感染的患儿咽拭子标本进行肺炎支原体鉴定培养，并对14种抗生素药敏结果进行分析。结果300例咽拭子标本肺炎支原体培养阳性87例，阳性率29%，其中男性患儿阳性率29.78%，女性患儿阳性率28.30%，男、女比较差异无统计学意义（P>0.05）肺炎支原体对强力霉素、美满霉素和敏感率高，对红霉素的耐药率最高。结论MP鉴定培养药敏试剂盒检测肺炎支原体感染操作简便、检出率高并提供药敏结果，对尽快明确诊断和临床合理使用抗生素具有指导作用。 标签：肺炎支原体；儿童；药敏试验 近年来，MP感染发病率不断上升，患者临床表现与病毒性和细菌性呼吸道感染难以鉴别易造成误诊和病情延误，因此对肺炎支原体的培养鉴定以及提供准确药敏结果对于临床诊断和选择性用药具有重要作用。现将本院急性呼吸道感染患儿咽拭子支原体培养及药敏结果分析如下。 1 资料与方法 1.1一般资料2012年3月～2013年10月在四川省人民医院儿科门诊的急性呼吸道感染儿童咽拭子标本300例，年龄分布0～8岁。 1.2方法 1.2.1检测原理药敏试验板上包被有14种抗生素：大环内酯类（红霉素、罗红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、交沙霉素、依托红霉素和乙酰螺旋霉素）；四环素类药物（强力霉素、美满霉素）；氟喹诺酮类（环丙沙星、左旋氧氟沙星、莫西沙星、加替沙星）；林克酰胺类（克林霉素）。若所测的肺炎支原体对包被的抗生素敏感，其酶活性受到抑制，不引起颜色变化。肺炎支原体快速鉴定培养药敏安图试剂由郑州安图绿科生物工程有限公司提供。 1.2.2操作步骤取出及药敏试验板，使其在接种样本前接近室温，旋开培养液瓶盖，用吸咀吸取100ul培养液加入C-对照孔；接种咽拭子（痰拭子或痰液100ul）与剩余的培养液中，加盖摇匀使之混匀；将含样本的培养液加入其余的微孔中，每孔100ul，轻轻震荡药敏试验板：所有微孔滴加1滴试剂盒所附矿油物（使矿物油覆盖液面，否则培养液蒸发，结果不准）；将药敏试验板加盖后，置培养箱中，35℃～37℃培养24～48h观察结果。 1.2.3结果判断培养24～48h培养液有桔红色变成黄色，表示有肺炎支原体生长，用（+）表示；培养液保持桔红色不变，表示没有肺炎支原体生长，用（-）表示；药敏试验板抗生素结果判定：依托红霉素（EST）孔培养液桔红色为敏感
肺炎支原体及其快速培养法 支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型，它既不同于，也不同于病毒，是介于细菌和病毒之间，能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界，与人类、动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多，造成的危害非常广泛。目前证明对人体有致病作用的支原体有肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、生殖支原体等几种，但临床以肺炎支原体最为常见［1］。肺炎支原体主要以飞沫传播，引起儿童、青少年呼吸道感染、咽炎、气管炎、肺炎等。近年肺炎支原体感染病例明显增多并有局部流行的趋势，早期诊断极为重要。 1 肺炎支原体的检测方法 目前，肺炎支原体的实验室检测方法有支原体分离培养、PCR法检测质粒核酸、抗体检测、支原体快速培养法、分子生物学方法等。支原体细胞分离培养可获得肺炎支原体，可以确诊。由于支原体分离培养要求苛刻，一般医院实验室难以推广。此法阳性率低，需时3 周甚至更长时间，对临床快速诊断意义不大。PCR法检测质粒核酸快速、特异、敏感，但需昂贵设备，不易普及，且方法过于敏感，容易受污染。传统的冷凝集法检测肺炎支原体的IgM 抗体，方法简单、易行，但其敏感性和特异性均较差，易受病程影响。ELISA 检测支原体抗体法较为简便、可靠。由于发病初期，机体中尚未产生抗体不能被检出，发病时间较长此法才有意义。而快速培养法正以其简单、快速、经济、无创伤等优点，被越来越多的临床实验室所推广，也被越来越多的患者所接受。 2 肺炎支原体快速培养法 肺炎支原体快速培养法是利用肺炎支原体的代谢产物使培养基液体中的指示剂颜色发生改变来判断其生长，标本中的其他支原体和细菌则被培养基中的青霉素和醋酸陀抑制［2］。此法操作简便、快速、无痛苦。先从冰箱中取出快速培养基，复温，按常规方法采集患者咽拭标本，将标本棉签浸入培养液，沿瓶壁
肺炎支原体培养及药敏检测的临床意义 一、支原体 支原体：又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。 支原体对热的抵抗力与细菌相似。对环境渗透压敏感，渗透压的突变可致细胞破裂。对重金属盐、石炭酸、来苏尔和一些表面活性剂较细菌敏感，但对醋酸铊、结晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌大。对影响壁合成的抗生素如青霉素不敏感，但红霉素、四环素、链霉素及氯霉素等作用于支原体核蛋白体的抗生素，可抑制或影响蛋白质合成，有杀灭支原体的作用。 二、肺炎支原体 肺炎支原体（M.Pneumonia），MP,是支原体的一种，是人类支原体肺炎的病原体。支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主，有时并发支气管肺炎，称为原发性非典型性肺炎。主要经飞沫传染，潜伏期2～3周，发病率以青少年最高。MP感染的临床表现常无特异性，临床的实际工作中，容易与一般病毒性感冒相混淆。在临床上患儿有下列症状：（1）发热呈弛张热或不规则热。刺激性咳嗽非脓性痰，偶带血丝。（2）可有咽痛、头痛、胸痛，全身症状比体征明显。（3）肺部体征不典型而胸片炎症显著，可见云雾状大片阴影。（4）WBC正常或升高。（5）青霉素类、磺胺类抗生素治疗无效，改用或一开始用大环内酯类抗生素有效。（6）实验室MP检验有1项或1项以上阳性具备以上2个条件或以上者可初步诊断为MP感染。更多时候，临床医生为了尽快缓解患儿的症状，需根据患儿的症状、体征和病史做MP感染的诊断性治疗，但应与肺结核相互鉴别。 三、肺炎支原体的诊断方法比较及临床意义 1、PCR法 咽拭子PCR法检测质粒核酸，该法快速、敏感和特异，通过这一技术可从患儿痰中检测MP-DNA。由于此方法相当敏感，易受污染，故实验室操作时应特别小心。统计结果显示，该法的阳性率为67.76%（103/152），高于快速培养法。此法弥补了极微量的和被药物杀死的MP不能通过快速培养法检出的病例。但是此法操作复杂，对设备及标本要求比较高。
支原体培养检验操作程序 一、接收标本：标本与检验单查对正确，标本质量合格。 二、标本处理：接种Uu、Mh培养药敏一体试剂盒：操作前将所需试剂取出置室温30分钟。1、A排第一孔加入培养液100μL作为阴性对照；2、将标本拭子直接放入培养液中充分振荡并在瓶壁挤干拭子，若为男性尿液取离心沉淀物150μL或阳性标本取50μL于培养液中混匀。3、将混有标本的培养液各100μL 加入A排余下及B排各孔中；4、各孔加矿物油覆盖，置于37℃温箱培养。 第24、48小时分别观察记录结果。结果判断原理：培养基含有相应支原体生长所需的蛋白质、马血清、生长因子、底物及酚红指示剂，当有支原体生长时，底物被分解，使PH值升高，培养基由橙黄色变成红色，且清亮为阳性。培养基不变色为阴性。B1孔阳性为解脲支原体阳性；B2孔阳性为人型支原体阳性。药敏孔A排为高浓度，B排为低浓度，变红则耐药，不变红示敏感而不生长。当高浓度与低浓度两孔均不生长(不变色)为该药敏感；高浓度不变色低浓度变红为该药物中介；高浓度与低浓度均变红为该药物耐药。 结果一：第24小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结果判断；第24小时、48小时观察B2孔均不变色，示无人型支原体生长或浓度极低，报告培养出解脲支原体，未培养出人型支原体。 结果二：第24小时B1孔不变色示解脲支原体阴性；第48小时观察B2孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果判断。报告未培养出解脲支原体，培养出人型支原体附药敏结果。 结果三：第24小时B1孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结果判断；第48小时观察B2孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果判断，报告培养出解脲支原体与人型支原体附药敏结果。 结果四：阳性对照孔由橙黄色变成红色示支原体阳性，药敏看结果判断；第24小时、48小时观察B1孔、B2孔均不变色，示无解脲、人型支原体生长或浓度极低，报告培养出非解脲、人型支原体或嘱病人重留标本复查。 结果五：第24、48小时观察B1孔、B2孔均不变色，示无支原体生长或浓度极低，报告未培养出解脲及人型支原体。
关于头孢菌素类药物皮肤过敏试验的规定 为了确保临床使用头孢菌素类药物的安全，避免严重的药物不良反应，根据内卫药相关文件精神，结合本院实际，对临床使用头孢菌素类药物的皮肤过敏试验，请各科室依照《常用试敏药品操作规程表》执行。 一、医护人员在使用药品前应认真详尽询问患者药物过敏史（尤其是询问“特别注意”情况），并明示记载于病历上。 二、皮试对象 所有拟接受头孢菌素类药物治疗前，均应作皮试，如停药一天者，应重作皮试。 特别注意： 1、对有高敏体质的人，在作皮试期间应严密观察； 2、凡青霉素皮试过程中曾发生过敏症状者（胸闷、气促、皮痒、微循环障碍及中枢神经系统症状等）； 3、曾有青霉素皮试阴性，以后在使用过程中却发生过敏反应者。 禁作 ．．头孢菌素皮试 三、皮试液配制 1、头孢菌素皮试必须使用拟投药品为原液 ．．进行配制，不得用其他药品代替。 2、头孢菌素皮试液的浓度为300ug/ml，每次皮内注射0.1ml（30ug） 四、皮肤过敏试验判断标准： 1、阳性：局部晕团和红斑，直径≥1cm或伴伪足； 2、阴性：局部无晕团和红斑，直径≤1cm； 3、观察时间：15分钟，注意受试者有否胸闷、气促、皮痒、发麻、头晕等症状，如有症状，即使直径≤1cm，局部无晕团和红斑，亦作阳性判断。 五、皮试过程中发生严重反应应立即抢救：肌注0.1%肾上腺素注射液0.5~1ml，病情危重者可静脉给药。本品可重复应用，剂量同上，肾上腺皮质激素及血管活性药物可同时酌情给予。气促严重，及早作气管切开。另外，应按我院药物不良反应报告及时填写报告表，记录产品品名、厂家、批号等，并保留原使用药品，药剂科须在观察时间内报告内蒙古自治区药品不良反应监察中心等相关部门。
支原体衣原体培养及药敏试验在临床中的应用 发表时间：2012-03-21T15:21:03.920Z 来源：《中外健康文摘》2012年第3期供稿作者：姜春南刘和琛刘春江吴沁聿[导读] 了解泌尿生殖道支原体衣原体感染及药敏情况，为临床合理用药提供依据。 姜春南刘和琛刘春江吴沁聿（江西省新余新钢中心医院检验科江西新余 338001） 【摘要】目的了解泌尿生殖道支原体衣原体感染及药敏情况，为临床合理用药提供依据。方法采用郑州安图绿科生物工程有限公司生产的支原体试剂盒对610例泌尿生殖道感染患者进行支原体衣原体培养及药物敏感试验。结果在610例泌尿生殖道感染者中，支原体阳性者396例（64.9%），其中解脲支原体（Uu）阳性者265例（66.9%），人型支原体（Mh）阳性者16例（4.0%），Uu合并Mh感染阳性者102例（25.7%）,衣原体感染阳性者13例(3.2%）。药敏结果显示：支原体对强力霉素、美满霉素、交沙霉素的敏感性较好，对红霉素耐药率最高;支原体多重耐药现象严重。结果我院就诊女性患者支原体感染检出率很高，尤其是Uu和Uu+Mh的感染;支原体的耐药情况比较严重，进行病原检测及药敏试验对指导临床治疗，控制疾病的传播和蔓延具有重要的意义，强力霉素、美满霉素、交沙霉素可作为我院治疗支原体的经验用药。结论泌尿生殖道感染以解脲支原体为主，体外药物敏感分析，支原体感染的治疗首选抗生素为美满霉素、强力霉素，同时高度重视其耐药性变化趋势和强调合理使用抗生素。 【关键词】支原体泌尿生殖道药物敏感试验 为了解妇科门诊患者支原体感染及耐药情况,我们对610例就诊患者进行了支原体培养及药敏分析。 1 材料与方法 1.1对象 2010年5月至2011年5月本院妇科、皮肤科、泌尿科就诊患者中，疑是支原体感染患者610例，其中男性45例，女性565例，年龄16岁～62岁。 1.2标本采集 （1）用消毒棉签擦去尿道口及宫颈口多余分泌物，男性用无菌棉拭子取尿道内口2cm～2.5cm处分泌物、前列腺液或中段尿沉渣；女性取宫颈、阴道或阴道后穹隆分泌物，置无菌管立即送检。（2）将棉拭子插入2ml培养液中充分振洗并在瓶壁挤干拭子，取A出弃之，混合均匀。（3）在支原体培养试剂条的培养孔及药敏孔中各加入上述溶液100μl，然后各孔再加入2滴无菌矿物油覆盖，置于37℃恒温培养箱中培养24-48小时。 1.3结果判断 24h后判读Uu结果，培养48h后判读Mh结果。以低浓度高浓度培养基变成酒红色为阳性即耐药，同时观察药敏孔的颜色，如低浓度变为酒红色高浓度不变为中介，低浓度高浓度培养基淡黄色（不变色）为敏感，分别计算不同药敏种类。 1.4试剂 采用郑州安图绿科生物工程有限公司出品的Uu和Mh培养鉴定、药敏试剂盒，药物种类分别为美满霉素、强力霉素、红霉素、罗红霉素、交沙霉素、阿奇霉素、克拉霉素、甲砜霉素、克林霉素、司帕沙星十种。 1.5统计学方法 应用SPSS 10.0统计软件包，药敏试验10种药物的有效率的比较采用χ2检验。 2 结果 在610例泌尿生殖道感染者中，支原体阳性者396例(64.9%)，其中解脲支原体（Uu）阳性者265例（66.9%），人型支原体（Mh)阳性者16例（4.0%），Uu合并Mh感染阳性者115例（29.0%）。 3 10种抗生素对396例阳性支原体的药物敏感的结果 4 支原体对10种抗生素的药敏情况 从表1中可以看出，对药敏感前4位依次为美满霉素、强力霉素、阿奇霉素和交沙霉素。耐药前4位依次为甲砜霉素素、克林霉素、司帕沙星、罗红霉素。 5 讨论 本文对610例泌尿感染患者的检测结果表明，支原体的总阳性率为64.9%，与国内文献报道相近［1］，且以Uu感染为主，Mh、Uu+Mh感染较低，与有关文献报道［2］相符。为有效防治支原体感染，治疗前对泌尿生殖道症状患者或支原体感染样本进行支原体培养、分型及药敏试验，对指导临床选择有效抗生素具有重要意义。本检测结果提示强力霉素、美满霉素、交沙霉素可作为临床首选药物，而甲砜霉素素、克林霉素、司帕沙星、罗红霉素等抗生素不宜作为治疗支原体感染的一线抗生素。Uu+Mh混合感染者与Mh感染者对抗生素的敏感性较单纯Uu感染者低，需要引起临床医师的重视。 参考文献 [1]张文，柏彩英.541例泌尿生殖道支原体感染类型及药敏试验分析.广东医学，2003，24（10）：1083～1084. [2]张冉，吴移谋，向斌,等.喹诺酮类药物诱导人型支原体耐药机理研究.中华检验医学杂志，2000，23(5)：273-275.
及早识别难治性肺炎支原体肺炎的5 个要点 肺炎是全世界儿童因感染导致死亡的主要原因，根据世界卫生组织的数据，2017 年肺炎估计造成约80 万 5 岁以下儿童死亡，占 5 岁以下儿童死亡人数的15%。 为提高公众对肺炎的认识，从2009 年开始，每年的11 月12 日被定为世界肺炎日。 在儿童肺炎中，肺炎支原体（MP）是我们不可忽视的病原体，可占儿童社区获得性肺炎（Community-Acquired Pneumonia，CAP）的10%～30%。 值得注意的是，儿童肺炎支原体肺炎（Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia，MPP）的临床表现和转归的差异很大。 部分患者应用大环内酯类抗生素 1 周或以上，仍表现发热，临床症状和影像学表现继续加重，这类患者定义为难治性肺炎支原体肺炎（Refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia，RMPP）。RMPP 的严重性 若对RMPP 早期判别不足，延误治疗时机，易导致重症肺炎，甚至遗留支气管扩张、肺不张等后遗症。
在临床中，及早识别难治性肺炎支原体肺炎，适时采取措施，可以给患儿带来更好的预后，同时也减少医疗纠纷的可能。 及早诊断RMPP 的要点 症状体征不平衡 有些患儿表现为高热持续不退，发热时间＞1 周，咳嗽症状严重，但听诊肺部啰音不明显，且胸片示肺内炎症不重； 部分患儿则呈现表现为高热消退较快，咳嗽不剧烈或仅轻咳，精神状况良好，但胸片示肺内炎症变重，可见大片实变影，听诊可闻及明显啰音。 化验检查特点 MPP 患儿出现中性粒细胞百分比＞64．6%、PLT 计数＞400×109/L、C 反应蛋白（CRP）＞19.5 mg/L、降钙素原（PCT）＞0.13ng/ml、LDH ＞1474.5IU/L、IL-6 I＞20.65pg/ml、IL-10＞15.25pg/ml 时，应警惕该MPP 可能为RMPP。 肺炎支原体肺炎患儿继发血小板升高（PLT 计数＞400×10^9/L）患儿，在MPP 重症发展早期预测中的价值，体现出较高的敏感性。 而CRP 是可以明确预测大环内酯类抗生素效果的预测指标，CRP 最佳界限值40.7 mg/L（如超过界限值，大环内酯类抗生素治疗效果差）。 影像学检查特点
支原体（UU/MH）药敏测定方法 近来在zyh43所在的医院检验科做支原体检测中，遇到一些问题：用支原体（UU/MH）培养、药敏、定量检测试剂盒测得阳性的病人，用这种试剂盒测定的药敏中敏感的抗生素进行临床治疗，但是经过几个疗程的治疗，没有任何效果，支原体感染仍为阳性，因此对他的药敏检测结果产生怀疑，想用一种方法检测这种试剂盒的药敏是否可靠，但是苦于不知用什么方法进行检测最为科学，因此在这里向各位同仁请教一二，望各位大侠不吝指教，谢谢！！ threengshaw认为有两种可能： 1、体外药物敏感试验与体内药物对病原体的作用不完全一样 2、检查方法及实验试剂问题 综上所述，尽管可能可以用一种标准试剂及方法来与另一种进行对照，但不能说明体外药物敏感试验得出的药物对该病原体一定有效。 人体内的肠道，药敏板的微孔可以模拟得到吗？ 关于药敏的问题，由于支原体和普通细菌不一样，因此，支原体药敏试验的意义就比不上细菌的药敏试验。 即使是国内使用公认效果最好的生物-梅里埃支原体药敏试剂盒，其药敏也只是企业标准。因为到目前为止，还未有一个国际标准。为什么？因为国外对支原体的致病性还不像衣原体、梅毒那样得到广泛的确认，一些国家对支原体根本不检测，如英联邦国家。 只有中国这样的国情，才可以将其爆炒成一个如此严重的STD！ 支原体培养容易，但诊断因支原体感染所引起的NGU就比较复杂，就不是我们平时做的这么简单——单做一个液体培养基变红就可以了！ UU难治，可能并不是药物，也不是方法问题，而是对支原体的认识问题。 1、如果培养基的质量可靠，念珠菌是不会生长的。 2、支原体阳性一定要治疗到其阴性为止吗？ 以下几句摘自《支原体与支原体病》： - UU的致病机制尚不十分清楚；
支原体感染实验室药敏结果分析(一) 【摘要】目的对支原体感染的药敏结果加以分析，为临床治疗支原体感染的抗生素选择提供参考依据。方法采用支原体培养、药敏一体化试剂盒，对718例泌尿生殖道支原体感染患者的9种抗生素的体外药敏试验结果进行统计分析。结果共检出599株解脲支原体（Uu），占总数的83.43%；8株人型支原体（Mh），占总数的1.11%；111株两种支原体混合感染，占总数的15.46%；对Uu敏感率最高的抗生素为美满霉素，其次为强力霉素；混合感染也呈同样趋势。结论美满霉素可作为治疗泌尿生殖道支原体感染的首选抗生素，强力霉素可作为次选抗生素。【关键词】支原体感染；药敏AnalysisofdrugsusceptibilityinMycoplasmainfection 【Abstract】ObjectiveToanalyzethedrugsusceptibilityininfectionbymycoplasmatoprovidebasisforproperselecti onofantibioticsforitstreatment.MethodsMycoplasmacultureanddrugsusceptibilitytestwerecarried outusingonecomplexmycoplasmakit.Thedrugsusceptibilityofmycoplasmato9antibioticswasdeterm inedinsamplesfrom718casesofurogenitaltractinfection.ResultsUuinfectionwasfoundin599cases,M hinfectionin8casesandmixedinfectionin111cases.Mycoplasmahadthehighestsusceptibilitytominoc yclineandclarithromycin.ThedrugresistancerateshowsthesametrendtomixedinfectionofUuandMh. ConclusionMinocyclineisofthefirstchoicefortreatmentofinfectionbyMycoplasma. 【Keywords】Mycoplasmainfection;drugsusceptibilitytesting 支原体是非淋菌性尿道炎（NGU）的主要病原体，引起生殖道感染的主要是解脲支原体（Ureaplasmaurealyficum,Uu)和人型支原体（Mycoplasmahominis,Mh)。Uu可引起非淋菌性尿道炎、尿道前列腺炎、附睾炎、肾盂肾炎、盆腔炎、产后热、反复自发流产、羊膜炎等；Mh可引起盆腔感染、肾盂肾炎、流产后发热、产后热及前列腺炎等多种疾病。非淋病性尿道（宫颈）炎（NGU）是常见的性传播疾病，随着其感染的增加已引起医学界的广泛重视，该病确诊及判愈的“金标准”是支原体的分离培养。由于感染人数众多，抗生素的广泛应用及治疗的不规范，其耐药性也在不断增强，因此，将分离培养的支原体及时做药物敏感性测定，指导合理用药是NGU防治工作中极为重要的手段。为探讨本地区支原体感染药物敏感情况，指导临床用药，笔者采用支原体药敏试剂盒对718例疑似NGU患者进行了支原体培养鉴定及药敏试验，现将结果报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料临床资料来自本院2003年9月～2005年9月性病门诊，疑为非淋病性泌尿生殖道炎症并支原体培养阳性的718例门诊就诊者，均有不洁性交史，伴有泌尿生殖道炎症。男365例，女353例。年龄31岁379例；31～40岁263例；41～50岁63例；>50岁13例。标本为男性尿道、前列腺分泌物和女性宫颈分泌物，全部检测支原体和药敏测定。 1.2标本采集标本采集前，患者应停止使用全身及局部抗生素1周以上。男性患者禁排尿2h 以上，用一次性无菌棉拭子由前尿道2～4cm处取分泌物；女性患者先清洁宫颈口分泌物，用一次性无菌棉拭子在宫颈管内1～2cm处取分泌物，拭子应在宫颈（或尿道）内旋转并至少停留20s以上，取出时不触及阴道壁。及时将标本接种到培养基。 1.3试剂Uu、Mh培养及药敏试剂盒购自珠海丽珠试剂有限公司。药敏试验药物分别为强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素、罗红霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星。所有试剂均在有效期内使用。 1.4培养方法标本采集后立刻送检，并尽快置于液体培养基中。在靠近液面上方的瓶壁挤压旋转试子数次，使试子中的样本渗入培养液中，取50μl加入反应板各孔中（除对照孔），各孔滴加1～2滴无菌液体石蜡，盖上反应板，置37℃恒温培养箱孵育24～48h各观察1次，并做好记录，严格按照说明书标准判读结果。