瘤胃微生物定量方法的研究进展 郭同军1,2,王加启1,王建平1,霍小凯1,2,卜登攀1,魏宏阳1,周凌云1,刘开朗1 (1.中国农业科学研究院北京畜牧研究所动物营养学国家重点实验室,北京 100193;2新疆农业大学,乌鲁木齐 830052) 摘要:当前人们对瘤胃中微生物的认识只有10%～20%,不断改进研究技术和手段,才能大大推动瘤胃微生态领域的研究。作者阐述了瘤胃微生物传统定量方法(滚管计数法和最大或然数法)和分子生物学定量方法,如探针杂交技术、荧光原位杂交、D GGE、定量PCR和流式细胞计量术(flow cytometry)等的应用状况及其各自的优缺点。 关键词:瘤胃微生物;滚管计数法;最大或然数法;Real2Time PCR;流式细胞计量术 中图分类号:Q93.3 文献标识码:A 文章编号:167127236(2009)0420019206 反刍动物在长期的自然进化过程中获得了独特的瘤胃发酵系统。瘤胃内有大量的微生物,目前为止,所知细菌达200种以上,活菌数为1011个/mL,原虫超过25个属,其数量为104～106个/mL,真菌含有5个属(Miron等,2001)。由众多的细菌、真菌和原虫组成的微生态系统中,不仅每种微生物与底物的作用机理不同,各种微生物之间的关系更是复杂(冯仰廉,2004)。传统定量方法如滚管法(Hun2 gate,1969)和最大似然法(Dehority等,1989)只能培养瘤胃微生物中的一小部分,这使得瘤胃微生物的多样性被严重低估(Amann等,1995)。20世纪80年代,基于16S/18S rRNA/rDNA的分子生物学定量方法的兴起,可以提供微生物核酸分子方面的特征,评价不同生态系统中微生物的遗传多样性和 收稿日期:2008211226 作者简介:郭同军(1981-),男,甘肃人,硕士生,研究方向:瘤胃微生物工程。 通信作者:王加启(1967-),男,安徽人,研究员,博士生导师,从事反刍动物营养和牛奶质量改良研究。E2mail: wang2jia2qi@https://www.doczj.com/doc/e53160214.html,;010********* 基金项目:“十一五”国家奶业科技支撑计划(2006BAD04A14和2006BAD04A10)。系统发育关系(Tajima等,1999),而且还能对瘤胃微生物进行计数(Sdiva等,2004),由于研究方法的不断改进,使得人们不断的发现许多新的瘤胃微生物品种(K oike等,2003;Shin等,2004)。认识瘤胃微生物的功能、活动规律和建立准确、快速、高效的瘤胃微生物定性及定量评价方法,是瘤胃微生态研究必然的趋势。作者主要就当前瘤胃微生物定量方法的研究进展做了详细阐述。 1 定量研究方法在瘤胃微生物研究中的应用及评价 1.1 传统定量方法 采用Hungate发展起来的厌氧培养技术,以及采用模拟瘤胃环境而设计的培养基,对瘤胃微生物进行分离、纯培养、计数、形态鉴定、生理生化特性的鉴别、分类等。瘤胃细菌与真菌的数量用显微镜直接计数,常采用滚管法计数,以及最大或然数计数法(mo st p robable number,MPN) (Dehority等,1989)。 1.1.1 稀释平板记数法 稀释平板记数法又称活菌记数法,是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一特征设计的记数方法。瘤胃液中细菌或真菌的活菌记数常采用亨氏滚管计数法(roll2t ube tech2 nique)(Hungate,1969)。亨氏滚管计数法可以获 Abstract:The advances on nutrient requirements,feedstuff evaluation and formulation techniques of broiler are reviewed in this paper.It showed that feeding phases decision is more scientific f rom three to four phases;nutrient requirement specifica2 tions is presenting diversified trend of development,which are referred to be combined with the broiler breeds,environment, production goal and the evaluation systems of the feedstuff itself etc;secondly,formulation optimization technology itself is rel2 ative invariable,but if the coefficients matrix of formulation model is integrated f rom the standard deviation of the nutrients of used feedstuff,it will evidently enhance the true probability for goal nutrients to reach.The third,performance prediction a2 bout broiler is improved when diets are formulated on the basis of standardized ileal amino acid digestibility.The results and thought can provide the scientific basis for developing the new generation expert system of broiler feeding and nutrition. K ey w ords:broiler;nutrient requirements;formulation technology;standardized ileal digestibility
牛瘤胃积食 瘤胃积食是由于前胃收缩力减弱，采食大量难以消化的饲料、饲草，或平时不喂的新鲜粗饲料，致使瘤胃扩张，容积增大，内容物停滞和阻塞，瘤胃运动和消化机能障碍，形成脱水和毒血症。 一、病因 主要是过食大量青草、苜蓿、新麦秸，马铃薯秧等饲料；或因饥饿采食了大量谷草、稻草、豆秸等难以消化的饲料；或因大量采食大麦、玉米、大豆等谷物，又饮大量水，使饲料膨胀而致病。户养牛运动不足，神经反应性降低。突然变换可口的饲料，采食过多；产后失调及过度疲劳，使前胃消化功能减退，发生瘤胃积食。 此外，饲养管理不当，受各种不利因素的影响，如精神恐惧不安，中毒与感染，妊娠后期运动不足，分娩应激反应也可发生瘤胃积食。还可继发于前胃弛缓、创伤性网胃腹膜炎、瓣胃阻塞、皱胃变位、皱胃阻塞等疾病。 二、症状 瘤胃积食病情发展迅速，通常在过量采食后数小时内发病常并发瘤胃酸中毒。 病的初期，病牛神情不安，回头顾腹。 食欲、反刍消失，嗳气、流涎，呼吸促迫。 腹部膨胀，触诊瘤胃，内容物黏硬坚实，用拳按压，遗留压痕。腹部膨胀以下腹部明显。 腹部听诊，瘤胃蠕动音减弱或消失。肠音微弱或沉寂，便秘，粪便硬呈饼状，间或发生下痢。 直肠检查，瘤胃扩张，容积增大后移，充满黏硬内容物。有的病例，内容物松软呈粥状，但瘤胃显著扩张。 全身症状，病至晚期，病情急剧恶化，肚腹胀满，瘤胃积液，呼吸促迫而困难，脉搏疾速达120次/分钟以上，呼吸60次/分钟以上，结膜发绀，眼球下陷，
全身衰弱，卧地不起，发生脱水与自体中毒，呈现昏迷和循环虚脱。 三、防治 依据过食发病，瘤胃内容物充满而黏硬或坚实，腹围增大，呼吸促迫且具有腹痛表现，容易确诊。 本病的治疗原则，增强前胃运动机能，促进瘤胃内容物的运转，消积化滞，防止脱水与自体中毒及对症治疗。 首先禁食1～2天，不禁止饮水，并进行瘤胃按摩，每次5～l0min，每隔30min 一次。或先灌服大量温水，再按摩，效果更好，也可用酵母粉500～1000g，一天分两次内服，具有消食化积作用。 清肠消导可用硫酸镁或硫酸钠500～800g，鱼石脂80g，75%酒精100～150ml，常水6000～10000ml，一次内服。应用泻剂后，用新斯的明0.1g，皮下注射，兴奋前胃神经，促进瘤胃内容物运转与排出。 病因疗法可用10%氯化钠溶液500ml，静脉注射；或先用1%温食盐水洗涤瘤胃，再用促反刍液，最好是用10%氯化钠溶液500ml，5%氯化钙溶液250ml，20%安钠咖注射液20ml，静脉注射。改善中枢神经系统调节机能，增强心脏活动，促进血液循环和胃肠蠕动，解除自体中毒现象。晚期病例，除了反复洗涤瘤胃外，宜用5%葡萄糖生理盐水2000～3000ml，20%安钠咖注射液l0ml，Vc 1g，5%碳酸氢钠500ml，氢化可的松100ml，安乃近100ml静脉注射。强心补液，保护肝功能，促进新陈代谢，防止脱水。 在病程中，为了抑制乳酸的产生，应及时用青霉素或土霉素内服，间隔12h，再投药一次，继发瘤胃臌胀时，应及时穿刺放气，以缓和病情。 在药物治疗无效时，即应进行瘤胃切开术，取出内容物，并用1%温食盐水洗涤，必要时，接种健康牛瘤胃液。加强饲养和护理，促进康复过程。 中兽医疗法 加味大承气汤：大黄、厚朴、枳实、桔梗、陈皮各60～80g，炒神曲、麦芽、山楂各100 g，芒硝200g，玉片30g，车前子40g，莱菔子80g，共为末，开水冲调，候温灌服，一日一剂，连服3剂。
奶牛饲料营养组成及常用饲料简介 张学峰 吉林农业大学动物科技学院 吉农博瑞科技研发中心 前言 一、奶牛需要的营养物质 养殖奶牛是以收取牛奶为目的的，但是奶牛生产牛奶是建立在满足自身需求之后再来满足牛奶的生产。即所谓的“营养需要=维持+生产”。所以饲料的营养物质首先要保障奶牛自身的需要，在此基础之上再谈产奶需要。另外，犊牛的好坏直接影响到其日后的产奶情况，所以，在母牛妊娠期间就要对胎牛的发育给与足够的营养供给，保证生产出健壮的犊牛，为产奶打好基础。所以奶牛的营养需求包含了自身的营养需求、胎牛的营养需求和产奶的营养需求三个主要部分。 奶牛需要营养物质用来维持自身新陈代谢、体组织构成、犊牛发育和产奶需求，从营养物质分类上来说都可以归结到概略养分分析方案中的六大营养物质中。此外，一些非营养物质作为重要的生理生化调节物质，可称其为“活性物质”也需要获得足够的补充。 二、奶牛瘤胃生理及对养分的改变 由于奶牛的生理结构与猪鸡等单胃动物有着本质上的区别，胃部4个分区的特殊构造，使得奶牛的营养物质来源要复杂得多。 正常的奶牛胃由瘤胃、网胃、瓣胃和皱胃（真胃）构成。其中网胃的主要功能如同筛子，随着饲料吃进去的重物，如钉子和铁丝，都存在其中。瓣胃主要功能在阻留食物中的粗糙部分﹐继续加以磨细﹐并输送较稀部分入皱胃﹐同时吸收大量水分和酸。功能类似单胃动物的胃，与前胃不同的是，该胃附有消化腺体，可分泌消化酶，具有真正意义上的消化，因此被称为真胃，同时也被称为“腺胃”。但对于反刍动物而言瘤胃的功能是最重要的。 瘤胃如同一个大的有吸收功能的皮囊，其中的瘤胃液中含有大量的微生物，正是这些微生物的存在和对饲料纤维物质的降解发酵，才使得反刍动物能够大量的利用粗饲料作为营养物质的来源。同时瘤胃中的微生物在发酵过程中，会对饲料中的绝大部分营养物质进行降解，并重新合成微生物所需的相应养分，这就会改变饲料的品质，所以奶牛饲料不是直接满足的奶牛的需求，而是在瘤胃内通过微生物的发酵作用，让微生物提供的代谢产物最大程度满足奶牛的营养需求。如果瘤胃的内环境、微生物区系或者瘤胃的吸收功能受到影响，都会影响到瘤胃的发酵和吸收效果，对饲料的利用和转化就会随之改变，由于饲喂制度和饲料原料的变化，维持瘤胃功能的稳定性是十分重要的，这就需要利用一些调节剂来改善瘤胃的功
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/e53160214.html, 奶牛瘤胃积食的病因、临床特征和防治措施作者：李德文 来源：《现代畜牧科技》2018年第08期 摘要：奶牛瘤胃积食是指瘤胃中积存大量食物，导致瘤胃明显扩张，影响消化，尤其是食入过多精料或突然更换草料等都能够引发该病。该病是奶牛临床上一种常见疾病，通常比较容易在冬季发生。病牛主要特征是瘤胃停滞，明显脱水，机体虚弱，最终卧地不起，容易死亡，损害养殖户的经济效益，应加以防治。 关键词：奶牛；瘤胃积食；病因分析；临床症状；剖检变化；西药治疗；饲养管理 中图分类号：S858. 23 文献标识码：B 文章编号：2095-9737（2018）08-0122-01 1 病因分析 原发性瘤胃积食通常是由于饲养管理不当而引起，如奶牛日常饲喂大量草料，或突然更换饲草种类，都能够引起发病。另外，某些奶牛饲喂适口性差的饲料，突然改为饲喂适口性好的品质优良草料或多汁饲草等，都会在短时间内引起瘤胃积食。此外，如果奶牛缺乏饮水，运动不足，会促使机体更容易发生瘤胃积食。继发性瘤胃积食，主要是奶牛患有胃病而引起。例如，奶牛饲养过程中发生瓣胃阻塞、前胃弛缓、瘤胃阻塞以及创伤性网胃炎等，如果没有及时进行诊治，也没有加强护理，导致治愈效果较差，都可能会造成瘤胃内容物停滞，从而引发该病。 2 临床症状 发病初期，病牛表现出精神萎靡，举止不安，伴有腹痛，经常回头望腹，瘤胃收缩先是增强，之后逐渐减弱或完全消失；食欲废绝，停止反刍，拱背，频繁起卧，且往往伴有呻吟声，有时会出现呕吐或作呕；腹部逐渐膨胀，瘤胃背囊存在一层气体，通过穿刺会有少量气体排出，同时会排出混杂泡沫的液体，并散发腐败酸臭味，听诊腹部，发现肠音减小或完全消失；发生便秘，排出干硬的饼状粪便，部分出现下痢；通过直肠检查发现瘤胃扩张，含有大量黏硬的内容物，部分尽管含有糊状的内容物，但瘤胃依旧会明显扩张；体温往往降低，一般为36. 5～38.5℃；心率加快，并会随着酸中毒以及循环衰竭的日渐加重而不断加快；呼吸快且浅， 一般可达到60～90次/min。症状严重时，走动不稳，如同醉酒状，视力减弱，眼睑的保护性反射迟钝或完全消失，停止排尿。发病晚期，症状急剧恶化，病牛体表温度不均，全身战栗，耳鼻、角根、四肢冰凉，眼球下陷，结膜发绀，食欲废绝，停止排粪，往往卧地不起，并发生明显脱水和自体中毒，出现循环虚脱。慢性发病奶牛，症状会持续反复，时坏时好，食欲不
奶牛瘤胃积食的26个治疗方案 ?奶牛瘤胃积食的治疗 0 个回复 - 193 次查看 瘤胃积食是指瘤胃内容物过多，瘤胃体积过度增大，造成瘤胃运动机能紊乱的疾病。临床症状多表现为瘤胃饱满，左肷窝平坦，触诊瘤胃内容物硬度加强，病畜有轻度腹痛、弓背、踢腹、粪便减少甚至停止。 病例一：牛号9 ... 2011-6-2 18:50 - 畜牧联盟005 - 牛病诊所 ?肉牛瘤胃积食继发前胃弛缓 0 个回复 - 192 次查看 发病情况该牛已发病4天，由于第一天偷食精料15余斤，第二天便出现不吃不喝，不反刍，胀肚，拉的粪便干燥发黑，精神不好，体温稍高。请当地的兽医人员治疗3天，用了安乃近、青霉素、庆大霉素、维生素B1等，还灌 ... 2011-6-2 18:51 - 畜牧联盟005 - 牛病诊所 ?牛瘤胃碱中毒 0 个回复 - 162 次查看 【概述】瘤胃碱中毒是由于饲养失误导致瘤胃内异常发酵产生大量的氨，使瘤胃内微生物群失调的消化机能障碍性疾病。当病势恶化，伴有瘤胃内微生物群中的大肠杆菌和大肠变形杆菌等急剧大量增殖，并使瘤胃内容物腐败过程 ... 2011-6-2 18:52 - 畜牧联盟002 - 牛病诊所 ?牛瘤胃积食 0 个回复 - 146 次查看 牛瘤胃积食也叫急性瘤胃扩张。 (一) 病因 1.过多采食容易膨胀的饲料，如豆类、谷物等。 2．采食大量未经铡断的半干革命不湿的甘薯秧、花生秧、豆秸等。 3．突然更换饲料，特别是由粗饲料 ...
2011-6-2 18:53 - 畜牧联盟004 - 牛病诊所 ?牛瘤胃碱中毒 0 个回复 - 29 次查看 【概述】瘤胃碱中毒是由于饲养失误导致瘤胃内异常发酵产生大量的氨，使瘤胃内微生物群失调的消化机能障碍性疾病。当病势恶化，伴有瘤胃内微生物群中的大肠杆菌和大肠变形杆菌等急剧大量增殖，并使瘤胃内容物腐败过程 ... 2011-6-2 18:52 - 畜牧联盟001 - 牛病诊所 ?用烟叶小苏打治疗牛瘤胃膨气 0 个回复 - 182 次查看 治疗牛瘤胃膨气2005年6月18日晨，沙湾县金沟河镇二道湾村李某家的牛口流白沫，倒地不起。一、症 状该病牛为黑白花公牛，二岁半，体重280千克左右，体膘中等。经检查病牛左腹部膨 ... 2011-6-2 18:51 - 畜牧联盟007 - 牛病诊所 ?牛的常见病瘤胃积食 0 个回复 - 77 次查看 因牛、羊采食过量谷类、玉米等精料积滞于胃内，致使瘤胃体积增大、胃壁扩张而引起的疾病。一般发生在舍饲牛中。【症状】 (1) 患牛精神沉郁，不食或少食，反刍减少或停止，因腹痛而用后 ... 2011-6-2 18:50 - 畜牧联盟005 - 牛病诊所 ?奶牛瘤胃酸中毒的防治 0 个回复 - 148 次查看 奶牛瘤胃酸中毒主要是精饲料喂量过多，精粗饲料比例不当所造成的普通病，临床以1胎～3胎、临产牛、产后三天内的奶牛多见，一年四季均可发生。以下是该病的防治办法，供参考：诊断要点本病发病急，病程短，常无 ... 2011-6-2 18:52 - 畜牧联盟005 - 牛病诊所
微生物药物研究进展与发展趋势 摘要：微生物药物作为广泛使用的临床药物具有重要的地位。尤其是在抗感染、抗肿瘤、降血脂和抗器官移植排异方面具有不可替代的作用。自1929年青霉素被发现后20世纪4年代以来，已有上百种抗生素先后用于临床的细菌感染治疗、肿瘤化疗、降血脂以及器官移植康排异反应。总体上，由于微生物药物特别是抗生素的广泛应用使人类的寿命延长了15年。广义的微生物药物即由微生物发酵获得的药物现约占全球医药生产总值的50%。 1功能基因组学研究为创新微生物药物提供更多的药物靶标。 随着人类基因组学和微生物学要就的深入，近期将有5000个功能基因或蛋白被认为是潜在的药物靶标，是20世纪末已经确定的药物靶点的10倍以上，这为微生物新药的筛选与发展奠定了更广阔的基础。具不完全统计，截止2009年，世界范围内已有2500种以上的病毒，582种细菌，100多种的真菌的基因组完成测序。与此同时，蛋白基因组学研究正在兴起，2002-2005年我国科学家领衔的“人类肝脏蛋白组学计划”，鉴定和发现了一大批有重要功能的蛋白质，构建了大规模的蛋白中数据库，系统测定了一部分人类重大疾病相关的蛋白质结构，全面系统的解析出108个独立蛋白质三维结构，发现了一批潜在的药物作用靶标，制备了国际上最大规模的蛋白质单克隆抗体库。 作为病原微生物来讲，功能基因组研究成果为微生物必须基因和治病基因的确定提供了前提。对于一般的病毒来讲，其整个基因组可
以编码10个左右的蛋白基因，其中有4~6个功能蛋白可作为药物靶标，如再加上特定的病毒的细胞辅助蛋白，可有10个以上的药物靶标。真菌的基因组在2、5-81、5mb，作为真核生物，其许多蛋白质是保守的，在生物的进化当中被保留下来，另一些蛋白在进化中被遗弃了，并代之以新的蛋白基因。通过与人类功能基因的比较，找出真菌必需的和与人类有差异的基因与蛋白，对医疗上重要真菌基因组的分析有可能抗真菌药物靶标。 2高通量药物筛选在微生物药物早期发现的应用，加速了苗头化合物的获得。 从土壤微生物中筛选抗生素，是现代规模化药物筛选的开端，随着高通量技术的发展，利用微生物发酵产物粗提品的药物筛选，由于重复性较差，活性成分纯化的难度大，限制了创新微生物药物筛选的速度和成功率，也是大的药物公司更倾向于利用组合化学制备的大规模化合物库的高通量药物筛选。虽然筛选效率大大提高，但得势不得利，其获得新的化学实体的数量并没有显著提高，而且随着新药标准的提高，新的化学实体反而成下降趋势。因此，天然药物作为创新药物的筛选资源再度受到重视。而微生物次级代谢产物的相对于动植物次级代谢产物来讲，具有更易开发利用，不不破坏生态环境，可通过发酵大量获得和易于采用生物技术等优点。高通量微生物药物筛选模型已达150种，年筛选量已由“十五”期间的20万样次，发展到“十一五”期间的100万样次。就微生物药物的筛选规模和水平来讲，我国的创新微生物药物筛选已达到国际先进水平。
1. 奶牛饲料按照粗纤维和蛋白含量一般可分为两类：粗饲料、精饲料。 2. 粗饲料——是指牧草或含有高纤维即大于30%中性洗涤纤维的豆科植物的茎叶部分，是奶牛日粮中不可缺少的成分。 3. 饲喂奶牛精料时分为多次添加的好处是可改善瘤胃微生物区系的生存环境。 4. 给奶牛日粮中添加棉籽的目的是提高日粮的能量浓度。 5. 日粮——奶牛一天采食所有饲料的总和。 6. NDF——中性洗涤纤维，是植物细胞壁成分，主要影响粗饲料进食量。 7. ADF——酸性洗涤纤维，是植物不可消化细胞壁成分，主要影响粗饲料消化率。 8. 有效纤维——也称有效中性洗涤纤维，是指日粮干物质的中性洗涤纤维中颗粒长度大于1.2毫米粗饲料的部分。 9. 对于长段粗饲料，100%都是有效中性洗涤纤维；低于25毫米的粗饲料含有50%有效中性洗涤纤维；相对精饲料和碎的粗饲料含有25%有效中性洗涤纤维。 10. 当粗饲料颗粒小于1.2毫米时，其流出瘤胃速度与液体相同，不能提供任何有效纤维。 11. 优质粗饲料的NDF含量小于45%，如苜蓿、玉米青贮；劣质粗饲料NDF含量大于60%如禾本科牧草、禾谷类秸杆青贮。 12. 当日粮粗纤维的NDF大于33%、ADF大于20%时，表明可消化利用的有效纤维过少，不能消化利用的纤维素过多，会造成奶牛采食量不足。 13. 为维护奶牛瘤胃的正常功能和保持牛奶中的乳脂率水平，日粮干物质中应含19-21%的ADF量。 14. 为使奶牛的瘤胃功能得到正常发挥，当日粮含有50%的粗饲料时，其平均颗粒长度应为6毫米左右，粗饲料中颗粒长度25-35毫米的量应占总日粮的5-10%。 15. 奶牛采食了过量的粉碎低质粗饲料可能引起真胃阻塞。 16. 奶牛饲料中如果混入铁钉、铁丝等异物时，易造成奶牛患创伤性网胃炎。 17. 预防奶牛瘤胃酸中毒的措施有哪些？ 答：①应限制奶牛谷物类采食量；②优质粗饲料比例不应低于总日粮干物质的45%；③粗饲料不要切割过细；④日粮中加入一些缓冲液，如：碳酸氢钠。 18. 为了满足泌乳母牛对于蛋白质的需要量，精饲料混合物中应含多少比例的蛋白质？ 答：主要取决于日粮中粗饲料的类型，对于含蛋白高的粗饲料如豆科植物，精饲料混合物所含的粗蛋白范围为12-18%；如果是蛋白含量低的牧草或是低品质的粗饲料，精饲料混合物中的粗蛋白含量应上升到18-23%。 19. 对于成年母牛来说，tmr日粮水分含量超过50%就会影响其干物质进食量。 20.tmr日粮需要分群饲养，一般可将牧场奶牛分为几个群？ 二、奶牛生理与消化代谢 1. 奶牛的胃有四个：瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃。 2. 奶牛是反刍动物，它能利用非蛋白氮合成氨基酸和蛋白质，从纤维中获取能量。 3. 奶牛经小肠吸收的氨基酸中大约有60%来自细菌蛋白，40%是未经瘤胃降解的饲料蛋白。 4. 奶牛乳腺吸收的大部分氨基酸用于合成牛奶中的乳蛋白。 5. 我国奶牛饲养标准中传统的粗蛋白质已更改为小肠蛋白质体系。 6. 小肠蛋白质的来源有：瘤胃饲料非降解蛋白质和瘤胃微生物蛋白质 7. 纤维饲料对于奶牛的重要性有哪些？ 答：①能够维持反刍和唾液的生成；②是奶牛获取能量的主要来源；③能够维持瘤胃中性环境。 8. 日粮中纤维的缺乏通常引起乳脂含量低和消化紊乱的原因是什么？ 答：因为非纤维性物质消化较快并较完全，因而能产生更多的挥发性脂肪酸，使瘤胃的酸性
学号：TS09028 反刍动物瘤胃微生物及其作用 （动物消化道微生物考试论文） 耿文诚 微生物是动物消化道内不可缺少的重要组成成分。初生幼畜的消化道是无菌的，数小时后随着吮乳、采食等过程，在消化道内即出现了微生物，其中如大肠杆菌（Escherichia coli）便从此在动物肠道内与寄主共处终生。 1 反刍动物消化的主要特征 反刍动物是哺乳动物中比较特别的一个类群，他们的日粮主要由植物材料组成。反刍动物即使在不进食时也频繁地咀嚼，这一咀嚼活动称为“反刍”。反刍是反刍动物从植物细胞壁（即纤维）中获得能量过程的一个步骤。反刍减小了纤维颗粒的尺寸，暴露出糖以供微生物发酵；另外，唾液中缓冲物质（碳酸盐和磷酸盐）中和了微生物发酵产生的酸，以便维持一个有利于纤维降解和瘤胃微生物生长的中性偏酸的环境。 与单胃动物不同，反刍动物的胃由4部分组成，即网胃、瘤胃、瓣胃、真胃。瘤胃是反刍动物特有的消化器官，它是反刍动物体内的饲料处理工厂，饲料中约有70～85%可消化物质和50%粗纤维在瘤胃内消化，因此，瘤胃（包括网胃）消化在反刍动物整个消化过程中占有特别重要的地位。瘤胃和网胃是位于反刍动物消化道最前端的2个胃，网胃内含物几乎持续地与瘤胃内含物相混合（每分钟混合1次），这两个胃常又称为网-瘤胃，他们共同具有高密度的微生物群系（细菌、原生动物、真菌）。瓣胃是个具有极大吸收能力的小器官，水和矿物质如钠和磷在瓣胃中吸收，经唾液重回到瘤胃中。由于瘤胃和真胃的消化方式有极大的不同，瓣胃是一个连接瘤胃和真胃的过渡器官。真胃相当于非反刍动物的胃，分泌强酸和许多消化酶。非反刍动物摄取的食物首先在胃中被消化，但是进入反刍动物真胃中的食糜主要由未被发酵的饲料颗粒、一些微生物发酵终产物以及生长在瘤胃中的微生物有机体本身所构成。 反刍动物与非反刍动物另一个重要区别是反刍动物能大量利用纤维或半纤维并消化吸收，而非反刍动物在这方面的能力很有限（盲肠等器官可消化分解部分纤维）。存在于植物细胞壁中的复杂糖（纤维或半纤维）不能被非反刍动物利用，相反，在瘤胃和网胃中生活的微生物群系则可使反刍动物从纤维中获得能量。还有，非蛋白氮不能被非反刍动物利用，但可被瘤胃细菌用以合成蛋白质；瘤胃中合成的细菌蛋白是反刍动物所需氨基酸的主要来源。 2 瘤胃的主要特点
预测微生物学的研究进展 赵光辉1,2,赵改名1,刘 蓉3,王玉芬2,谢 华2,冯 坤1,崔艳飞1,黄现青1,2* (1.河南农业大学食品科学技术学院河南省肉制品加工与质量安全控制重点实验室 肉品加工与质量安全控制工程技术研究中心,河南郑州 450002;2.双汇集团技术中心,河南漯河 462003; 3.河南省电力公司信阳供电公司,河南信阳 464000) 摘 要 简要介绍了预测微生物学模型的2个类型(品质预测模型和安全评估模型),特定腐败菌在微生物预测中的特殊作用,可追溯技术、温度综合函数和生物指示器等新技术在微生物预测中的应用,以及国外的预测模型库和国内的研究现状,展望了预测微生物学未来的发展趋势。 关键词 微生物;预测模型;特定腐败菌;模型库 中图分类号 Q939.9 文献标识码 A 文章编号 1005-7021(2010)04-0076-07 Advance m ent of Predicti ve M icrobiology Z HAO Guang hu i1,2,Z HAO Gai m ing1,LI U Rong3,WANG Yu fen2,XI E H ua2, FENG Kun1,C U I Y an fe i1,HUANG X i a n qi n g1,2 (1.C oll.of F ood S ci.&Technol.,H e nan Ag ric.Un i.,H enan K e y Lab.o f M eat Process.&Qua lit y Safet y C on t., M e a tP rocess.&Qualit y Safet y Cont.Eng i n.Technol.R es.C tr.,Zhengzhou450002;2.Technol.C tr.of Sh i ne w ay G roup;Lu ohe462003; 3.X i nyang P o w er Suppl y C o mpany,H enan Prov i nce P o w er C o mpany,X inyang464000) A bstrac t Tw o types of t he predicti ve m icrob i o l ogy mode,l the special ro l e o f spec ifi c spo ilage m icrobes;t he app lica ti ons o f techno logy,te mperature co m prehensive f uncti on and bio i ndica tor and other new techno l og ies i n predictive m i c robiology w ere traced,t he research prog ress o f the R epre d icti veM od e lL i bra ry abroad and current studies i n hom e coun try w ere briefl y rev i ewed i n this paper;and the deve l op m en t trend of the pred i c ti ve m i c robiology w as also prospected. K eywords pred icti ve m icrob i o logy;predictive m ode;l spec ific spo ilage m i crobe;repred icti ve model li bra ry 20世纪80年代初,Ross等[1]最先提出 微生物预报技术这一概念,从此预测微生物学便应运而生。食品预测微生物学(Food Pred ictive M icro b iology)是一门在微生物学、数学、统计学和应用计算机科学基础上建立起来的新学科。它的发展方向是研究和设计一系列能描述和预测微生物在特定条件下生长和衰亡的模型。它是依据各种食品微生物在不同加工、储藏和流通条件下的特征信息库,通过计算机的配套软件,在不进行微生物检测分析的前提下,判断食品内主要病原菌或腐败微生物死亡、残存和增殖的动态变化,从而对食品安全做出快速评估的预测方法[2 3]。1983年,国外食品微生物学家小组应用直观预测的De l p h i 工艺,用计算机预测了食品货架期,开发了腐败菌生长的数据库,从此揭开了预测微生物学序幕[4]。上世纪八九十年代,由于食品安全问题的严峻形式,预测微生物学的研究对象主要是食品中的病原菌(如单核增生李斯特菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌等),后来,随着食品企业对自身产品品质问题的关注,腐败菌的研究也逐渐发展起来,并且对这些细菌进行建模[5]。近年来美国、英国、澳大利亚、丹麦等国更是致力于微生物预测软件开发,旨在对食品货架期进行有效的预测,并对致病菌进行风险评估[6]。 基金项目:国家科技计划项目(2009G J D00047) 作者简介:赵光辉 男,硕士研究生。研究方向为食品安全与质量控制。E ma i:l z ghw ork@s i na.co m *通讯作者。Te:l0371 ********,E m ai:l hxq8210@126.co m 收稿日期:2010 01 04;修回日期:2010 04 27 76微生物学杂志 2010年7月第30卷第4期 J OU RNAL OF M I CROB I OLOGY July2010V o.l30N o.4
预测微生物学的研究进展 作者姓名：钟强 工作单位：安康学院 摘要 简要介绍了预测微生物学模型的2个类型(品质预测模型和安全评估模型),特定腐败菌在微生物预测中的特殊作用,可追溯技术、温度综合函数和生物指示器等新技术在微生物预测中的应用,以及国外的预测模型库和国内的研究现状,展望了预测微生物学未来的发展趋势。 关键词：[微生物]；[预测模型]；[特定腐败菌]；[模型库]。
Advancement ofPredictive Microbiology Abstract Two types of the predictive microbiology model the special role of specific spoila gemicrobes; the applica-tions of technology, temperature comprehensive function and bio-indicator and other new technologies inpredictivemi-crobiology were raced,the research progressof the Repredictive ModelLibrary abroad and currentstudies in home coun-trywere briefly reviewed in this paper; and the development trend of the predictive micro biology was also prospected. Keywords：[predictive micro biology]; [predictive model];[specific spoila gemicrobe]; [repredictive model library]
瘤胃微生物与瘤胃发酵调控研究进展 一、国内研究进展 1.植物提取物对瘤胃发酵调控的影响 陆燕等(2009)综述了大蒜素及其抑菌机制，以及大蒜素对甲烷产量和瘤胃发酵的影响。认为大蒜中活性物质能调控瘤胃发酵模式，可抑制瘤胃内甲烷生成，降低蛋白降解率，降低氨态氮浓度，保护过瘤胃蛋白。与其他植物提取物相比，添加低浓度的大蒜素对饲料消化率的负面影响较小，具有很大的开发前景。 林波等（2009）综述认为植物提取物中的挥发油、皂苷、生物碱、萜类等化学物质具有抗菌、促生长、提高免疫力和抗氧化等功能。并总结近年来研究发现，植物提取物还可以调控反刍动物瘤胃发酵模式，提高氮存留，减少甲烷排放的功能，因此，植物提取物作为调控反刍动物瘤胃发酵的一种重要添加剂得到了广泛的研究与应用。目前国内外的学者已经在有效植物品种的筛选和植物提取物作用机理、剂量效应等方面的研究取得了较大进展。文中就目前植物提取物对反刍动物瘤胃发酵调控的最新研究进展作一综述，为我国开展植物提取物作为反刍动物瘤胃发酵调控添加剂的研究提供参考。 李世霞(2009)以4只安装永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊羯羊为试验动物，探讨银杏叶提取物对山羊瘤胃发酵参数、纤维降解及各血清指标的影响，旨在寻找一种新的瘤胃发酵调控剂。研究结论如下：①以淀粉、酪蛋白和纤维素粉为底物，探讨银杏叶提取物对山羊瘤胃体外发酵的影响，发酵时间24h，银杏叶提取物可降低pH值、NH3-N浓度、原虫蛋白产量和乙丙比，提高发酵的产气量、乙酸、丙酸、丁酸、TVFA浓度和细菌蛋白产量；②以淀粉、酪蛋白和纤维素粉为底物，探讨银杏叶提取物对山羊瘤胃体外纤维降解的影响，随着银杏叶提取物添加量的增加，纤维素降解率呈上升趋势，添加量为1.2%时，纤维素降解率可达到55.30%；银杏叶提取物可提高滤纸纤维素酶、和木聚糖酶的活性，对木聚糖酶的影响最大；银杏叶提取物可增加产琥珀酸丝状杆菌、白色瘤胃球菌和黄色瘤胃球菌的数量；③通过体内试验得出：瘤胃发酵参数的结论与体外试验一致，本试验所设定的银杏叶提取物的添加范围对山羊各血清指标没有显著影响，此添加范围对山羊机体是安全的、可靠的。 2.外源微生物对瘤胃微生物和瘤胃发酵调控的影响 邓露芳（2009）研究了纳豆枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis natto strain RNLBSN002，BSN2）作为奶牛安全饲用微生物的应用效果，并初步探讨了其发挥益生作用的机理。研究结果认为（1）纳豆枯草芽孢杆菌为典型革兰氏阳性杆状菌，通过对其菌落形态、细胞形态和
奶牛瘤胃积食的诊断及治疗 摘要：笔者在库车县动物保健医院进行接诊二例奶牛瘤胃积食的病例，通过消除积食，兴奋瘤胃，强心，补液，纠正酸中毒等方法进行治疗，取得良好的效果。本文重点论述奶牛瘤胃积食的发病原因、诊断、治疗等方面的体会。 关键词：奶牛；瘤胃积食；治疗瘤胃积食是比较多见的疾病之一，特别是舍饲的奶牛更为常见，主要原因是畜体瘦弱，前胃运动机能减退，以及饲养管理方法不当，突然更换饲料，贪食适口性好的饲料。其次，为了追求奶牛产奶量，日粮中过多增加精饲料及其他工业副产品，如豆腐渣，糖糟，啤酒糟等常造成瘤胃积食。奶牛的瘤胃积食也叫瘤胃滞症，急性瘤胃扩张，中兽医称为宿草不转。是前胃收缩力减弱，采食大量难于消化的饲料或容易膨胀的饲料蓄积于瘤胃中。其临床表现为急性瘤胃扩张，瘤胃容积增大，瘤胃内的内容物后送受阻而停滞和阻塞，瘤胃蠕动和消化机能障碍引起脱水和毒血症。如果得不到及时治疗就会造成瘤胃酸中毒而死亡。，下面本人根据该病牛的病史，症状，诊断、治疗及预后介绍其中最典型的一例病牛情况如下： 一、病例介绍 2015年4月26 日，接诊一头荷尔斯坦牛，5岁，第3 胎， 经畜主介绍：发病前饲喂大量的玉米秸，病牛不吃不喝，， 不反刍，来我院诊治。 二、临床检查
通过临床检查发现该牛体温393C,脉搏86次/min , 呼吸36次/min，，精神沉郁，食欲废绝，努责，眼球凹陷，鼻镜干燥，反复起卧，回头看腹，后蹄踢腹，有腹痛表现，眼结膜潮红，口腔干燥，反刍停止，嗳气停止，肺部听诊呼吸音增强，。不愿运动，腹围增大，左侧瘤胃上部饱满，中下部向外突出，触诊瘤胃时表现疼痛不安，用手按压左侧肷部时瘤胃内容物粘较硬，留压痕，瘤胃蠕动音消失，排出少量黑色粪便。 三、诊断 根据病史，（采食饲喂大量的玉米秸）并结合临床特征如：瘤胃充满，触压坚硬，留压痕和眼结膜潮红等及临床检查可确诊为瘤胃积食。 四、治疗治疗原则是，消除积食，兴奋瘤胃，强心，补液，纠正酸中毒，严重病例要手术。 1.复方氯化钠500ml X 6瓶10%葡萄糖500ml X 4瓶10%浓 盐水500ml X 1瓶5%碳酸氢钠500ml X 1瓶10%安钠咖10ml （一天一次连用两天静脉注射） 2.维生素B1 20 ml （一天两次连用两天肌肉注射）
饲料进入瘤胃后，在微生物作用下，发生一系列复杂的消化和代谢过程，产生挥发性脂肪酸（VFA），饲料的分解产物可用来合成微生物蛋白、糖原和纤维素等，供机体利用。（1）糖类的分解和利用：反刍动物饲料内的糖类物质均能被微生物发酵，其中可溶性糖类的发酵速度最快，淀粉次之，纤维素和半纤维素最慢。反刍动物饲料中的糖类物质主要是纤维素，其中40％—45％在瘤胃内被细菌和纤毛虫分解，其他糖类由不同细菌和纤毛虫发酵。发酵的终产物主要是挥发性脂肪酸（VFA）、CO2和甲烷（CH4）。VFA主要是乙酸、丙酸、丁酸，可以经动物瘤胃壁吸收进入血液，被机体利用，其中乙酸和丁酸是泌乳期反刍动物合成乳脂的主要原料。 瘤胃微生物在发酵糖类的同时，还能把分解产生的单糖和双糖转化成糖原，储存于细胞内。微生物随食糜进入皱胃和小肠后能被消化，糖原可被宿主吸收利用，是反刍动物机体葡萄糖的来源之一。 （2）蛋白质的分解和合成：反刍动物能利用饲料中的蛋白氮和非蛋白氮，合成微生物自身的蛋白质，供宿主利用。 饲料蛋白进入瘤胃后50％—70％被微生物的蛋白酶分解为多肽和蛋白酶。氨基酸经脱氨基酶的进一步分解，生成有机酸、氨和CO2。微生物也可以直接利用氨基酸和多肽合成蛋白质，储存于微生物内，所以瘤胃中游离氨基酸很少。 瘤胃内的微生物还能分解饲料中的非蛋白含氮化合物，如尿素、铵盐、酰胺等，产生氨和CO2。一部分氨作为氮源，可被微生物利用，用来合成菌体蛋白，储存在微生物体内；一部分可被瘤胃壁吸收进入血液，经门静脉运输到肝，经鸟氨酸循环生成尿素。一部分尿素分泌到唾液中，进入瘤胃后被细菌分泌的脲酶分解为CO2和氨。氨被瘤胃壁吸收后，可重新合成尿素，这一过程称尿素再循环。 糖类的分解产物和挥发性脂肪酸可为蛋白质的合成提供碳源，并可提供能量。因此饲料中必须有足够的糖类物质，如给骆驼投喂几乎不含蛋白质的饲料时，其代谢产生的尿素并没有从尿中排除，而是在瘤胃用于蛋白质的合成。微生物随食糜进入皱胃后，微生物蛋白可被宿主利用。 在畜牧生产过程中，常用尿素替代日粮中约30％的蛋白质，尿素在瘤胃内脲酶的作用下迅速分解，产生氨的速度为微生物利用速度的4倍。为了有效利用尿素，必须降低尿素在瘤胃的分解速度，这样不仅可提高尿素的利用率，而且可以避免氨中毒的发生。 （3）维生素的合成：瘤胃中的微生物能够合成B族维生素和维生素K。因此，成年反刍动物的饲料中即使缺少这类维生素，也不会发生上述维生素的缺乏症。如果饲料中缺乏钴，瘤胃的微生物就不能合成足够的维生素B12，也可能发生维生素B12的缺乏症。幼龄反刍动物因其瘤胃发育不完善，微生物区系尚未完全建立，有可能患维生素缺乏症。 （4）脂肪的分解与合成：瘤胃中的微生物能够水解饲料中的脂肪，生成甘油和脂肪酸，其中甘油发酵生成丙酸，少量被转化为琥珀酸和乳酸；不饱和脂肪酸在体内可转化为饱和脂肪酸。因此，反刍动物的体脂中饱和脂肪酸的含量比单胃动物高。 细菌能够合成少量奇数碳的脂肪酸、支链脂肪酸以及脂肪酸的各种反式异构体。饲料中脂肪水平能够影响脂肪酸的合成。瘤胃微生物内的脂肪酸主要以膜磷脂或游离脂肪酸的形式存在。 （5）气体的生成：瘤胃微生物发酵过程中。能产生大量气体。牛一昼夜可产生600-1300L 气体，主要是CO2和CH4，还有少量的N2、O2和H2S。气体的组成随饲料种类和饲喂时间不同而有较大差异。犊牛出生后的几个月，瘤胃中的气体以CH4为主，随着日粮中纤维素的含量增加。CO2的含量逐渐增加，6月龄达到成年牛的水平。正常情况下瘤胃中CO2含量比CH4多，但饥饿和气胀时，CH4的含量明显超过CO2。 CO2主要由糖发酵和氨基酸脱羧产生，小部分由唾液内的HCO3-转化产生。CH4是瘤胃内
微生物解磷机理的研究进展 摘要：磷元素植物生长必需的矿质元素之一，而土壤中可溶性磷的含量比较低。土壤中有大量的微生物存在，其中有一些微生物能够将土壤中的不溶性磷转化成可溶性磷。本文对解磷细菌的种类分布、解磷能力、解磷机制进行了综述。希望通过对解磷机制的了解，可以选择和构建出溶磷效果明显的菌株，更好的服务于农业生产。 关键词：土壤；解磷细菌；解磷机制。 Abstract: Phosphorus is one of the essential mineral elements to plant growth, however, there is fairly less content of soluble phosphorus in soil. There are lots of microbes in soil, some of them could dissolve insoluble phosphorus that could not be utilized by plants and transform them into soluble phosphorus. In the paper the advances in research of phosphorous solubilizing microorganisms （PSMs）were reviewed in aspects of species diversity, distribution, phosphorous-solubilizing ability and phosphorous-solubilizing mechanism. Though the understanding of phosphorous-solubilizing mechanism, we can choose and build a better effect of phosphorous-solubilizing strain and serve the agricultural production better. Key words: soil; phosphorous-solubilizing bacteria; phosphorous-solubilizing mechanism. 磷是植物生长所必需的矿质元素之一，是植物体内核酸及多种酶、辅酶、ATP等重要组成成分，这些物质对于细胞来说是至关重要的。磷在土壤中主要以无机磷化合物和有机磷化合物两种形态存在，其中无机磷的含量约占全磷含量的50%以上，主要以矿物形式存在，所以土壤中可溶性磷的含量很低。为了解决土壤中的缺磷状况，每年我国要施用大量的磷肥，但是当施磷肥以后，在土壤中容易形成难溶性的磷。磷肥的利用率相当的低，当季的利用率只有10%一25%[1]。施人土壤中的磷肥除一小部分被植物吸收外，大约70%转化为Ca—P、Fe—P和Al—P等难溶性化合物而储存在土壤中，难以被植物吸收利用[2-3]。而土壤中的磷肥容易随着地表径流进入水体中，使水体出现磷素的富集氧化现象，对环境造成严重的污染。目前有机磷农药的残留在生活中也是很普遍的，我们急需对这些问题进行解决，不仅要对环境进行治理，更要从源头来进行防治。 如何提高磷素的利用率已成为研究的热点问题之一。很多研究表明从土壤中分离的某些细菌对这些难溶性的磷具有降解作用。然而，多年的实践结果表明，溶磷微生物的实际应用效