用Excel制作修改标准曲线的方法
1.在表格中输入数据以后，选定横坐标后右键设置单元格格式，选中“数值”，调整小数点位数为2，点击“确定”；纵坐标方法一样，设为三位数
2.选择数据区域，点击上方“插入”按钮，从下拉菜单中选择“图表”，即出现如下对话框，选择“XY散点图”，点击“下一步”
3.在“标题”输入图表名称、X轴和Y轴名称
4.在“网格线”中不选任何选项
不显示图例，点击“完成”，“”消失
5.在坐标轴空白处右键设置“绘图区格式”，图案设置为“无”，得到第二个无背景的坐标图
6.把鼠标放在标准曲线的一个点上（原始数据所对应的），按鼠标右键，选择“添加趋势线”，在“类型”中选择“线性”，得到如下坐标图
7.在“选项”中选择“设置截距=0”、“显示公式”及“显
示R2值”，按“确定”。得到
调整的位置
8.将上方的“铁标准曲线”移动到下方；将“吸光度值A”、“铁标准曲线”字样移动到适合的位置。
9.右键横或纵坐标，在“坐标轴格式”的“字体”中调节“铁标准曲线”、“吸光度值A”、“铁标准曲线”到合适大小，“确定”
10.调节整个图表大小，使直线与横纵坐标的夹角约为45°
11.加箭头：右键点击空白处，点击“插入”，选择“形状”中的“线条”：箭头，在横纵坐标的尾端画上箭头
12.右击画好的箭头，在“设置对象格式”中调整箭头的颜色与线条、大小，使之与横在左边的一致。注：此箭头可移动，故小心调整，使之与横纵坐标完美嵌合
标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量 一、标准曲线 一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。 二、蛋白质含量测定方法 1、凯氏定氮法 2、双缩脲法 3、Folin-酚试剂法 4、紫外吸收法 5、考马斯亮蓝法 三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作 （一）、试剂： 1、考马斯亮蓝试剂： 考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H 3PO 4 ， 加蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝 G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H 3PO 4 。 2、标准蛋白质溶液： 纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。 （二）、器材： 1、722S型分光光度计使用及原理 2、移液管使用 （三）、标准曲线制作： 1、 2、以A 595nm 为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug、30 ug、
40 ug、50 ug、60 ug），在坐标轴上绘制标准曲线。 1）、利用标准曲线查出回归方程。 2）、用公式计算回归方程。 3）、或用origin作图，测出回归线性方程。即A 595nm =a×X( )+6 一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。 4）、绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。 （四）、蛋白质含量的测定： 样品即所测蛋白质含量样品（含量应处理在所测围），依照操作步骤1操作， 测出样品的A 595nm ，然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。 一般被测样品的A 595nm 值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A 595nm 值太大， 可以稀释后再测A 595nm 值，然后再计算。（五）、注意事项： 1、玻璃仪器要洗涤干净。 2、取量要准确。 3、玻璃仪器要干燥，避免温度变化。 4、对照：用被测物质以外的物质作空白对照。
标准曲线绘制 在分析化学实验中， 常见标准曲线法进行定量分析，一般情况下的标准工 作曲线是一条直线。 标准曲线的横坐标（X）表示能够精确测量的变量（如标准溶液的浓度）,称为 普通变量，纵坐标（Y）表示仪器的响应值（也称测量值，如吸光度、电极电位 等）, 称为随机变量。当X取值为X1, X2,……Xn时，仪器测得的丫值分别为丫1, 丫2,……Yn。将这些测量点Xi, Yi描绘在坐标系中,用直尺绘出一条表示X 与丫之间的直线线性关系，这就是常见的标准曲线法。用作绘制标准曲线的标准物质，它的含量范围应包括试祥中被测物质的含量，标长准曲线不能任意延。用作绘制标准曲线的绘图纸的横坐标和纵坐标的标度以及实验点的大小均不能太 大或太小，应能近似地反映测量的精度。 由于误差不能完全避免，实验点完全落在工作曲线的的情况是极少的，特别是在误差较大时，实验点比较分散，它们一般并不在同一条直线上，这样凭直觉很难判断怎样才能使所连接的直线对于所有实验点来说误差是最小的，当前较好的方法是对实验点（数据）进行回归分析。 研究随机现象中变量之间相关关系的数理统计方法称为回归分析，当自变 量只有一个或X与丫在坐标图上的变化轨迹近似一直线时，称为一元线性回归。 甦2.6.1 —元线性回归方程的求法 确定回归直线的原则是使它与所有测量数据的误差的平方和达到极小值 设回归直线方法为 9 (2 - 15)
式中a表示截距，b表示斜率 9 (2 - 15)
假设Xi和Yi （i=1,2,3, ……,n）是变量X和Y的一组测量数据。对于每一个Xi值,在直线（卩“+^ ）上都有一个确定的旳“从X】值。但哲值与X 轴上Xi处的实际测定值Yi是不相等的, 与Yi之差为： 筈厂& +返AY’F-碍（2—佝 上式表示与直线（）的偏离程度，即直线的误差程度。如果全部n个测定引起的总偏差用￡（节厂印'表示,则偏差平方和s为 (2 - 17) 在所有直线中，偏差平方和s最小的一条直线就是回归直线，即这条直线 的斜率b和截距a应使s值达到最小，这种要使所有数据的偏差平方和达到最小 的求回归直线法称为最小二乘法。 根据数学分析的极值原理,要使s达到最小,对式（2 —17）中的a、b分别 求偏微分后得到 (2 —18) (2 —19) 是所有变量Xi和Yi的平均值。由于计算离均差较麻烦，可将式（2 — 18）变换为 n是测量的次数，也就是坐标图中实验点的数目。 (2 —20)
用Excel绘制级配曲线图步骤 1、建立图表：在图表向导中选择XY散点图，点击下一步，点击数据区域中红色箭 头选择任意数据区域；点击下一步，选择标题，输入图表标题（筛分级配曲线图）、数值X轴（筛孔尺寸mm）、数值Y轴（通过率%）；选择网格线，选择数值X 轴，选择主要网格线，点击下一步，点击完成。 2、修改坐标轴：双击X轴数字，设置筛孔尺寸。选择刻度，将最小值设为0、最 大值设为级配类型最大粒径对应的泰勒曲线值（如AC-25，最大粒径为31.5mm，对应的泰勒曲线值为y=100.45lgdi=4.723）；选择字体，设置需要的字体大小，点击确定。双击Y轴数字，将最小值设为0、最大值设为100、主要刻度单位设为10、次要刻度单位设为0，选择字体，设置需要的字体大小，点击确定。 3、设置筛孔尺寸系列：在图表区点击鼠标右键，选择数据源，选择系列，选择添 加，选择X值输入筛孔尺寸对应的泰勒曲线值[如筛孔26.5mm(将孔径作为系列名称输入更方便)为4.370,4.370[）,选择Y值输入0,100。再选择添加输入其它筛孔尺寸。选择确定。双击系列，设置系列格式。选择图案，设置系列线格式，选择数据标志，点击确定。双击数据标志，将数字修改为对应的筛孔尺寸。
4、输入级配范围和级配中值线：在图表区点击鼠标右键，选择数据源，选择系列， 选择添加，选择X值输入筛孔尺寸对应的泰勒曲线值（4.723，4.370，3.762……）, 选择Y值输入级配上下限和中值。点击确定。 5、输入设计级配线：在图表区点击鼠标右键，选择数据源，选择系列，选择添加， 选择X值输入筛孔尺寸对应的泰勒曲线值（4.723，4.370，3.762……）,选择Y 值点击红色箭头选择任意设计级配区域。
标准曲线的作法
标准曲线的作法 (1)标准液浓度的选择：在制备标准曲线时，标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能变异最低与最高值，一般可选择5种浓度。浓度差距最好是成 倍增加或等级增加，并应与被测液同样条件下显色测定。 (2)标准液的测定：在比色时，读取光密度至少读2-3次，求其平均值，以 减少仪器不稳定而产生的误差。 (3)标准曲线图的绘制：一般常用的是光密度一浓度标准曲线。 ①用普通方格纸作图。图纸最好是正方形(长：宽=l：1)或长方形(长：宽=3 ： 2)，以横轴为浓度，纵轴为光密度，一般浓度的全距占用了多少格，光密度的全距也应占用相同的格数。 在适当范围内配制各种不同浓度的标准液，求其光密度，绘制标准曲线， 以浓度位置向上延长，光密度位置向右延长、交点即为此座标标点。然后，将 各座标点和原点联成一条线，若符合Lambert-Beer氏定律，则系通过原点的 直线。 ②若各点不在一直线，则可通过原点，尽可能使直线通过更多点，使不在 直线上的点尽量均匀地分布在直线的两边。 ③标准曲线绘制完毕以后，应在座标纸上注明实验项目的名称，所使用比 色计的型号和仪器编号、滤光片号码或单色光波长以及绘制的日期、室温。 ④绘制标准曲线：一般应作二次或三次以上的平行测定，重复性良好曲线 方可应用。 ⑤绘制好的标准曲线只能供以后在相同条件下操作测定相同物质时使用。 当更换仪器、移动仪器位置、调换试剂及室温有明显改变时，标准曲线需重新 绘制。 ⑥标准曲线横坐标的标度：从标准液的含量换算成待测液的浓度。 1.5 原子吸收光谱分析的定量方法 原子吸收光谱分析是一种动态分析方法，用校准曲线进行定量。常用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和浓度直读法。如为多通道仪器，可用内标法定量。在这些方法中，标准曲线法是最基本的定量方法。 1.5.1 标准曲线法 前面已经指出，原子吸收光谱和原子荧光光
折线图 折线图是用来表示某种现象在时间序列上的动态，或者某种现象随另一种现象而变化的情况，可以大致反映两者之间的数学函数关系。 由于折线图表现的是数据的动态或变化趋势，因此先必须明确表达资料的目的，尽可能的做到把主要概念表达出来。 如果要了解种群的消长规律时，一般采用单位时间的消长曲线，以时间单位为x轴，种群数量为y轴。 如果要了解种群的增长规律时，就必须把逐个单位时间的数据依次累加起来作为y轴的数据，这样的折线图称为增长曲线图。 例如诱蛾灯下每天的发蛾量可以做成消长曲线图。消长曲线可以清楚的看出每一个世代的发生型，如前峰型、中峰型、双峰型等，但不能够确切的了解任一单位时间的发蛾量在整个种群中的进度。只有把每个单位时间的发蛾量依次累加起来，才能表达出发蛾的增长规律。
实例 用下表数据，作三化螟发蛾消长曲线。 调查日期 6/246/266/286/307/27/47/67/87/10（月/日） 发蛾量(头)862066820690701209318459780782505625
1 输入数据 启动Microsoft Excel 2003，在工作表里按上表的形式输入数据。然后将数据整理为如下图所示。 操作步骤： 定义为“文本”数据类型 定义为“数值”数据类型 定义为“数值”数据类型
2 使用图表向导 在主菜“插入”中选中“图表”命令，或者直接点击工具栏里的快捷按钮启动图表向导
⑴选择图表类型 选中折线图选中这个子类 点击“下一步”
⑵设置图表数据源 选中系列产生在行 在数据区域栏输入表达式： =Sheet1!$A$3:$J$5 或者用鼠标在“Sheet1”工作表中框选 A3:J5 点击“系列”卡片按钮，进入数据源编 辑
引用用Excel函数画曲线的方法1．用Excel函数画曲线图的一般方法 因为Excel有强大的计算功能，而且有数据填充柄这个有力的工具，所以，绘制曲线还是十分方便的。用Excel画曲线的最大优点是不失真。大体步骤是 这样的： ⑴用“开始”→“程序”→“Microsoft office”→”Excel”,以进入Excel窗口。再考虑画曲线，为此： ⑵在A1 和A2单元格输入自变量的两个最低取值，并用填充柄把其它取值自动填入； ⑶在B列输入与A列自变量对应的数据或计算结果。有三种方法输入： 第一种方法是手工逐项输入的方法，这种方法适合无确定数字规律的数据：例如日产量或月销售量等； 第二种方法是手工输入计算公式法：这种方法适合在Excel的函数中没有 列入粘贴函数的情况，例如，计算Y=3X^2时，没有现成的函数可用，就必须自己键入公式后，再进行计算； 第三种方法是利用Excel 中的函数的方法，因为在Excel中提供了大量的 内部预定义的公式，包括常用函数、数学和三角函数、统计函数、财务函数、 文本函数等等。 怎样用手工输入计算公式和怎样利用Excel的函数直接得出计算结果，下 面将分别以例题的形式予以说明； ⑷开始画曲线：同时选择A列和B列的数据→“插入”→“图表”→这时出现如下图所示的图表向导:
选“XY散点图”→在“子图表类型”中选择如图所选择的曲线形式→再点击下面的…按下不放可查看示例?钮，以查看曲线的形状→“下一步”→选“系列产生在列”→“下一步”→“标题”（输入本图表的名称）→“坐标”（是否默认或取消图中的X轴和Y轴数据）→“网络线”（决定是否要网格线）→“下一步”后，图形就完成了； ⑸自定义绘图区格式：因为在Excel工作表上的曲线底色是灰色的，线条的类型（如连线、点线等）也不一定满足需要，为此，可右击这个图，选“绘图区格式”→“自定义”→“样式”（选择线条样式）→“颜色”（如果是准备将这个曲线用在Word上，应该选择白色）→“粗细”（选择线条的粗细）。 ⑹把这个图形复制到Word中进行必要的裁剪； ⑺把经过裁剪过的图形复制到Word画图程序的画板上，进行补画直线或坐标，或修补或写字，“保存”后，曲线图就完成了。 2.举例 下面针对三种不同的情况举三个例子说明如下： 例1. 下图是今年高考试题的一个曲线图，已知抛物线公式是Y=2X^2 ，请画出其曲线图。 因为不能直接利用Excel给出的函数，所以，其曲线数据应该用自己输入公式的方法计算出来，画图步骤如下：
标准样品的准备 由于你做的是基因表达分析，样品的准备就比较简单了，因为你要知道都是相对的数值（你的对照样品和实验样品中基因表达的比值），这样就不需要知道精确的拷贝数，所以标准品也就无须知道精确的拷贝数，只需知道稀释的倍数就可以了。 你实验中的标准品可以是来源比较丰富的细胞或组织的RNA转录得到的cDNA。将这种cDNA进行梯度的稀释，可以是稀释10倍，100，1000，10000等倍（具体到你的实验要根据具体的情况来调整稀释倍数。最好能作一个预实验来看看什么样的稀释倍数比较适合你的这种基因的扩增）。而对于各个稀释倍数我们要对它的拷贝数进行赋值，这个值当然不是标准品中真实含有的基因数量（在基因表达分析中也不需要），而是我们根据稀释倍数给每一个稀释度人为赋予的拷贝数，这只是为了方便实验最终结果的计算而已。比如我们把前面稀释十倍的样品赋值为10000个拷贝，100倍的赋值为1000个拷贝依次类推把10000倍的赋为10等。要注意，赋值的数目的倍数差异和你稀释的倍数是一样的，比如前面是10稀释，后面赋值也是10倍变化。 如何做标准曲线 在定量实验中标准品是要和你的未知样品一起进行定量实验的，这样在实验结束，无论是标准品还是未知样品都将跑出曲线，获得Ct值。那么我们先可以把未知样品放到一边，对于标准品来说，我们既获得了Ct值，还知道他们的拷贝数（虽然这个拷贝数是我们自己赋予的）。这样我们可以通过标准品的Ct值和拷贝数做一条标准曲线（以拷贝数为横坐标，而Ct值为纵坐标）。一旦作出了标准曲线，而未知样品的Ct值我们知道（通过实验求得的），这时候就在标准曲线上进行定位，就可以得到未知样品的拷贝数了。 事实上，操作起来没有那么复杂，你只需要告诉软件你的哪个孔是标准品，哪个是未知样品，以及标准品的拷贝数等必要信息，软件会自动帮你把标准曲线和未知样品的拷贝数计算出来。 举例来说如何进行设置 先进入软件，在板设置中选择所放样品的位置，并标上unknow或standard等信息。 选择要使用的荧光染料。
正态分布函数的语法是NORMDIST(x，mean，standard_dev，cumulative)cumulative为一逻辑值，如果为0则是密度函数，如果为1则是累积分布函数。如果画正态分布图，则为0。 例如均值10%，标准值为20%的正态分布，先在A1中敲入一个变量，假定－50，选中A列，点编辑－填充－序列，选择列，等差序列，步长值10，终止值70。然后在B1中敲入NORMDIST（A1，10，20，0），返回值为0.000222，选中B1，当鼠标在右下角变成黑十字时，下拉至B13，选中A1B13区域，点击工具栏上的图表向导－散点图，选中第一排第二个图，点下一步，默认设置，下一步，标题自己写，网格线中的勾去掉，图例中的勾去掉，点下一步，完成。图就初步完成了。下面是微调把鼠标在图的坐标轴上点右键，选坐标轴格式，在刻度中填入你想要的最小值，最大值，主要刻度单位（x轴上的数值间隔），y轴交叉于（y为0时，x多少）等等。确定后，正态分布图就大功告成了。 PS：标准正态分布的语法为NORMSDIST(z)， 正态分布 （一）NORMDIST函数的数学基础 利用Excel计算正态分布，可以使用函数。 格式如下：变量，均值，标准差，累积， 其中： 变量：为分布要计算的值； 均值：分布的均值； 标准差：分布的标准差； 累积：若1，则为分布函数；若0，则为概率密度函数。 当均值为0，标准差为1时，正态分布函数即为标准正态分布函数 。 例3已知考试成绩服从正态分布，，，求考试成绩低于500分的概率。 解在Excel中单击任意单元格，输入公式： “500，600，100，1 ”，
得到的结果为0.158655，即，表示成绩低于500分者占总人数的15.8655%。 例4假设参加某次考试的考生共有2000人，考试科目为5门，现已知考生总分的算术平均值为360，标准差为40分，试估计总分在400分以上的学生人数。假设5门成绩总分近似服从正态分布。 解设表示学生成绩的总分，根据题意，，。 第一步，求。 在Excel中单击任意单元格，输入公式： “ ”， 得到的结果为0.1587，即，表示成绩高于400分者占总人数的15.87%。 第二步，求总分在400分以上的学生人数，为（人）。 （二）正态分布函数的上侧分位数 利用Excel计算正态分布的上侧分位数，可以使用函数。 格式如下：概率，均值，标准差。 例5已知概率，均值，标准差，求函数的值。 解设，根据题意有，求的值。 在Excel中单击任意单元格，输入公式： “ ”，得到的结果为400，即
HPLC标准曲线的制作 你可以随便弄一个浓度进一针样品看一看你这个样品的吸收度如何，再根据你样品的吸收度配置适当的底浓度样品逐个稀释这样可以连检测线定量限一起做了，一举3得(最后将你得到的峰面积根据你的进样浓度做一个线性回归就行啦，线性好的话R的平方一般接近于1 。 请问下各位在上样的时候是进同浓度的不同体积的样液绘制标准曲线好还 是先配好不同浓度的样液再以相同体积进样好呢, 这2个有什么区别吗, 请你看看分析化学书，有关精密度和线性的关系就知道了，实在不行，可以查看2005版药典一部附录新药质量标准的技术要求项下。自己看看就知道了。 我觉得进不同浓度相同体积好.因为你进样体积不同.在同样的方法下,系统的 各项参数可能会发生变化.而且你要通过进样体积的变化来控制浓度范围,这样也不大可行.一般我们进样的体积是5到20微升.而这个狭小的范围我们能调控的浓度线性范围非常窄.而通过事先调配不同浓度的话,就简单可行,而且浓度范围可以任意去控制.在实际操作中,老师也一直是教我们通过控制不同浓度来制作标准曲线的.以上只是个人的粗浅看法,欢迎高手们前来批评指正!!!!!!!!!! 前面几个站友说得都很好。我简单再补充一点自己的看法。 一般而言，还是不同浓度进相同体积做标曲是最规范的做法，而且可以有效避免人为误差。比如说，你的一个浓度配错了，如果以这个浓度为基准进不同的体积，会导致你最后的结果会整体偏大或偏小。所以要特别注意。 但实际工作中，如果你们的产品做得比较成熟了，而且做实验的经验比较丰富，大家为了省事还是多采用配一个浓度进不同的体积。 以进样量做标准曲线和以不同浓度进样相同体积做标准曲线差别不大。
标准曲线制作考马斯亮蓝法测蛋白质含量
标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量 一、标准曲线 一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。 二、蛋白质含量测定方法 1、凯氏定氮法 2、双缩脲法 3、Folin-酚试剂法 4、紫外吸收法 5、考马斯亮蓝法 三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作 （一）、试剂： 1、考马斯亮蓝试剂： 考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。 2、标准蛋白质溶液： 纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。 （二）、器材： 1、722S型分光光度计使用及原理（）。 2、移液管使用（）。 （三）、标准曲线制作： 1、 试管编号0 1 2 3 4 5 6 100ug/ml标准蛋白（ml）0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.15mol/L NaCl （ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 考马斯亮蓝试剂（ml） 5 5 5 5 5 5 5 摇匀，1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色 A595nm 2、以A595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug、30 ug、
药品的配制（磷酸缓冲液的配制） 一、药品的配制步骤 （一）、实验准备： 1、准备所需的药品和玻璃仪器。 2、洗涤。（怎样洗涤算干净？） （二）、计算： 1、百分比浓度计算： 1)、G/V比 例如配1% NaCl，称1g NaCl溶于100ml 水。 2）、V/V比： 例如配75%乙醇100ml，75%×100%=100%×X, X=75ml。取75ml无水乙醇，加25ml蒸馏水。 乙醇：乙醚：丙酮=2：1：2配500ml，各取200 ml，100 ml，200 ml混合。3）G/V比：用的较少，如计算灰分中某种元素如Fe的含量。 2、摩尔浓度计算：注：药品的分子量一般在标签中注明。 1）、0.1M或0.1mol/L NaCl配100ml。 M=质量/体积（L）称取NaCl0.1×0.1×40=0.4g 摩尔数=G（g）/摩尔质量2）、0.1mMNaCl配100ml mM=毫摩尔数/体积（L）称取NaCl0.1×0.1×40=0.4g 毫摩尔数=G（mg）/摩尔质量 3）、0.1uNaCl配100ml mM=微摩尔数/体积（L）称取NaCl0.1×0.1×40=0.4mg 微摩尔数=G（ug）/摩尔质量称取NaCl0.1×0.1×40=0.4ug 3、混合溶液配制的计算： 如配3uMEDTA，2.25mM NBT以及60uM 溶液100ml，用50mM磷酸缓冲液配制。 注意：1、分别标定体积计算 2、分别配制再混合，但总体积不能为100ml
ELISA标准曲线制作方法 一般而言，我们拟合ELISA标准曲线选用比较经典的Curve Expert 1.3或者Curve Expert 1.4软件。现在我们以Curve Expert 1.4为例，对ELISA标准曲线绘制方法进行详述。 Generally speaking, the standard fitting curve of ELISA is based on the classic software of Curve Expert 1.3 or Curve Expert 1.4. Now we will use the Curve Expert 1.4 to illustrate how to construct the ELISA standard curve. 1.点击Curve Expert 1.4，打开应用程序，截图界面如下： Click Curve Expert 1.4, and then open the application programs. You will see the following screen shot.
2.在X轴输入标准品的OD值，Y轴输入相应的标准品的浓度，截图界面如下： Input the value of OD on the X-axis against the concentration of samples on the Y-axis. The following screen shot will appear like this.
3.单击上图界面中的图标，出现如下界面 Click the icon showed on the above screen shot and you will see the following picture. 4.单击上图界面中的ALL OFF 按钮，出现如下界面 Click the ‘All Off’ button , you can see the following screen shot.
灵活运用EXCEL绘制沉降观测曲线图 康政虹李世涌（河海大学土木工程学院南京 210098） 早在1985年，Microsoft Excel一经问世，就被公认为是世界上功能最强大、技术最先进、使用最方便的电子表格软件之一。她不仅是一种功能齐全的电子表格处理软件，也是一种操作简便的制图工具。它可以根据表格中枯燥的数据迅速便捷地生成各种直观、生动的图表。 在路基沉降及路堤稳定的观测工作中，为掌握路基沉降规律和趋势、控制和安排施工进度，就必须按要求进行长期沉降及稳定观测，随之即来的便是大量的观测数据。如何利用Excel强大的数据表格和图表功能，对观测资料进行处理，提高成果的精确度及美观性，工程技术人员为此进行了不倦的探索。本人在沉降观测数据资料整理中使用Excel时深深体会到它的方便快捷，在此想谈谈用Excel绘制沉降观测中XX测点的时间～荷载～沉降量关系曲线图时的一点小技巧。除了编程之外，若各位行家还有更好的方法，请不吝赐教。 按委托单位的要求，沉降观测报告中必须包括部分测点的时间～荷载～沉降量关系曲线图，而且为了形象直观，填土荷载要画成台阶状。为达到此目的，笔者曾做了许多尝试，发现通过编程固然可行，但运用Excel本身强大的数据处理功能，稍稍把数据作一点调整，也能达到同样的效果。 下面以某一测点为例简要说明绘制方法，该测点桩号（测点号）为K28+920中（H017），填土情况及观测数据如下表所示： 表1
单纯从上表中的数据是没办法画出所需的曲线图的，填土高度要呈台阶状就意味着对于同一个日期，势必要有两次填土高度与之对应。基于此认识，我们只需将以上数据稍作改进：把前一层填土的高度延续到下一层填土成型的时间。当然，我们完全可以按照要求的不同而调整数据，使之尽可能与实际吻合。 为了图形的美观，不妨将填土高度的单位以分米(dm)计，新的观测数据如下表所示： 表2
标准曲线绘制 在分析化学实验中，常用标准曲线法进行定量分析，通常情况下的标准工作曲线是一条直线。 标准曲线的横坐标(X)表示可以精确测量的变量(如标准溶液的浓度)，称为普通变量，纵坐标(Y)表示仪器的响应值(也称测量值，如吸光度、电极电位等)，称为随机变量。当X取值为X1, X2,…… Xn时，仪器测得的Y值分别为Y1, Y2, …… Yn。将这些测量点Xi, Yi描绘在坐标系中，用直尺绘出一条表示X与Y 之间的直线线性关系，这就是常用的标准曲线法。用作绘制标准曲线的标准物质，它的含量范围应包括试祥中被测物质的含量，标准曲线不能任意延长。用作绘制标准曲线的绘图纸的横坐标和纵坐标的标度以及实验点的大小均不能太大或太小，应能近似地反映测量的精度。 由于误差不能完全避免，实验点完全落在工作曲线的的情况是极少的，尤其是在误差较大时，实验点比较分散，它们通常并不在同一条直线上，这样凭直觉很难判断怎样才能使所连接的直线对于所有实验点来说误差是最小的，目前较好的方法是对实验点(数据)进行回归分析。 研究随机现象中变量之间相关关系的数理统计方法称为回归分析，当自变量只有一个或X与Y在坐标图上的变化轨迹近似一直线时，称为一元线性回归。 2.6.1一元线性回归方程的求法 确定回归直线的原则是使它与所有测量数据的误差的平方和达到极小值，设回归直线方法为 (2－15) 式中a表示截距，b表示斜率。 假设Xi和Yi (i=1,2,3,……,n)是变量X和Y的一组测量数据。对于每一个Xi值，在直线() 上都有一个确定的值。但值与X轴上Xi处的实际测定值Yi是不相等的，与Yi之差 为： (2－16) 上式表示与直线()的偏离程度，即直线的误差程度。如果全部n个测定引起的总偏 差用表示，则偏差平方和s为 (2－17)
标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘 制 生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制 采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅 一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录 ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组 00000000
二、各采集样本汇总图 样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L 样本2测定得待测血清ALT活力单位为 97U/L 样本3测定得待测血清ALT活力单位为 135U/L 样本4测定得待测血清ALT活力单位为 70U/L 样本5测定得待测血清ALT活力单位为 148U/L 样本6测定得待测血清ALT活力单位为
45U/L 样本7测定得待测血清ALT活力单位为 98U/L 四、采集数据处理结果分析 1．数据总结 样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常 150是非正常 297是非正常 3135是非正常 470是非正常 5148是非正常 645是非正常 798是非正常 平均值92均为“是”均为“非正常” 2.针对数据处理结果的分析 采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。 3.针对源数据的分析
采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。 4.经分析，总结可能的误差来源如下 配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。 加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。如何用EXCEL绘制标准曲线 Excel是Microsoft offices系统的重要组成，它是界于WORD字处理软件与ACCESS数据库软件之间的电子表格工具，功能十分强大，特别适合于日常工作使用。使用得好，完全比目前所有的检验科办公系统优秀。 现就先介绍一下如何使用Excel绘
E X C E L绘制级配曲线图 Document serial number【NL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108】
一、用Excel绘制级配曲线图步骤 建立图表：在图表向导中选择XY散点图，点击下一步，点击数据区域中红色箭头选择任意数据区域；点击下一步，选择标题，输入图表标题（筛分级配曲线图）、数值X轴（筛孔尺寸mm）、数值Y轴（通过率%）；选择网格线，选择数值X轴，选择主要网格线，点击下一步，点击完成。1、修改坐标轴：双击X轴数字，设置筛孔尺寸。选择刻度，将最小值设为0、最大值设为级 配类型最大粒径对应的泰勒曲线值（如AC-25，最大粒径为31.5mm，对应的泰勒曲线值为y=100.45lgdi=4.723）；选择字体，设置需要的字体大小，点击确定。双击Y轴数字，将最小值设为0、最大值设为100、主要刻度单位设为10、次要刻度单位设为0，选择字体，设置需要的字体大小，点击确定。 2、设置筛孔尺寸系列：在图表区点击鼠标右键，选择数据源，选择系列，选择添加，选择X 值输入筛孔尺寸对应的泰勒曲线值[如筛孔26.5mm(将孔径作为系列名称输入更方便)为 4.370,4.370[）,选择Y值输入0,100。再选择添加输入其它筛孔尺寸。选择确定。双击系 列，设置系列格式。选择图案，设置系列线格式，选择数据标志，点击确定。双击数据标志，将数字修改为对应的筛孔尺寸。
3、输入级配范围和级配中值线：在图表区点击鼠标右键，选择数据源，选择系列，选择添 加，选择X值输入筛孔尺寸对应的泰勒曲线值（4.723，4.370，3.762……）,选择Y值输入级配上下限和中值。点击确定。 4、输入设计级配线：在图表区点击鼠标右键，选择数据源，选择系列，选择添加，选择X值 输入筛孔尺寸对应的泰勒曲线值（4.723，4.370，3.762……）,选择Y值点击红色箭头选择任意设计级配区域。
1 葡萄糖测定 （1）1mg/mL 葡萄糖标准液 小烧杯取分析纯葡萄糖置于烘干箱中烘干至，于分析天平中准确称取80℃烘至恒重的分析纯 葡萄糖10mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到10mL 容量瓶中，用蒸馏水定 容至10mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。 （2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂 将6.3g DNS （分析天平中称取于小烧杯）和262mL 2M NaOH 溶液（大量筒称取250ml+ 小量筒称取12ml），加到500mL（量杯量取）含有185g 酒石酸钾钠的热水溶液中（在微波 炉中加热1min溶解），再加5g 结晶酚和5g 亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。 1．制作葡萄糖标准曲线 取7 支10mL 具塞刻度试管编号，按表1分别加入浓度为1mg/mL 的葡萄糖标准液、蒸馏水 和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，配成不同葡萄糖含量的反应液。 1mg/ml葡萄糖标准溶液蒸馏水 DNS 葡萄糖含量光密度值 管号（ml）（ml）（ml）（mg/ml）（OD540） 0 0 1 0.75 0 1 0.1 0.9 0.75 0.01 2 0.2 0.8 0.75 0.02 3 0.3 0.7 0.75 0.03 4 0.4 0.6 0.7 5 0.04 5 0.5 0.5 0.75 0.05 6 0.6 0.4 0.75 0.06 将各管摇匀，取试管架置于水浴锅中，在沸水浴中准确加热5min，取出，冷却至室温，用蒸馏水定容至10mL，加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色（分光光度计预热20分钟）。调波长540nm，用0 号管调零点，测出1~6号管的光密度值。以光密度值为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。 发酵取样：1ml 样品+0.75mlDNS 沸水浴5min,冷却后，定容到10ml. 540nm测定 2 酒精度测定 称取优级纯无水乙醇0.1000g （取小烧杯置于分析天平中，去皮，以微量移液枪小心添 加至0.1000g）于100ml 容量瓶中（蒸馏水洗涤小烧杯导入容量瓶）, 加水至刻度。此溶液 每毫升相当于1.0mg 乙醇。 5 %重铬酸钾溶液: 称取5g 重铬酸钾(AR) 溶于50ml 水中, 加10ml 浓硫酸（用20ml量 筒量取，边加边用玻璃棒搅拌）, 放冷, 取100ml容量瓶，加水至100ml。 试剂均为分析纯, 水为蒸馏水。 分别取乙醇标准溶液（1mg/mL）0, 0.2，0.4，0.6, 0.8, 1.0mL于带刻度的10mL试管中，分别加入重铬酸钾1.0ml，用蒸馏水补足至5.0ml，在100 ℃水浴中加热10min (加塞防止乙 醇挥发), 取出用流水冷却5min ,充分反应，测吸光度。
标准曲线制作操作步骤 一、单点法 1、打开要制作标准曲线的色谱图 点击左侧工具栏的图标， 出现下图 点击“下一步”，出现下图，在下图左侧选中要做标准曲线的色谱峰， 然后点击“下一步”，出现下图，在“定量方法”栏选择“外标法”；“校准级别”选择“1”；“零点”选择“强制通过” 然后点击“下一步”，出现下图， 然后点击“下一步”，出现下图，在浓度栏中输入样品浓度 然后点击“完成” 点击左侧工具栏的图标，出现如下图
点击“是”，出现如下图 在“文件名”中输入名称，本次以“咖啡因”命名，点击“保存”，出现如下图 点击“确定”，然后点击左侧工具栏的图标，出现如下图 双击数据栏里，刚刚保存的文件“咖啡因” 出现如下图 把该图中，“数据文件”下面的数据“00.1cd”“02.1cd”，点击鼠标右键 删除，然后点击图中左下角的 图标，出现如下图 在左侧数据栏中，鼠标左键点住起初要制作标准曲线的色谱图，把该数据
拖到上图中“数据文件级别：”下面，然后松开鼠标左键，出现如下图点击确定，出现如下图 该标准曲线的方法就建立好了。 打开要分析的色谱图，鼠标左键点住左侧的刚刚建立的标准曲线方法“咖啡因”，把它拖到右侧的色谱图中， 出现如下图 点击“确定”，结果出现在下图右下角的“结果”栏中 未知样的定量完成。 二、外标法 1、打开要制作标准曲线的色谱图 2、 点击左侧工具栏的图标， 出现下图
点击“下一步”，出现下图，在下图左侧选中要做标准曲线的色谱峰， 然后点击“下一步”，出现下图，在“定量方法”栏选择“外标法”；“校准级别”选择“5”；“零点”选择“未强制” 然后点击“下一步”，出现下图， 然后点击“下一步”，出现下图，在浓度栏中依次输入样品浓度 然后点击“完成” 点击左侧工具栏的图标，出现如下图 点击“是”，出现如下图 在“文件名”中输入名称，本次以“咖啡因”命名，点击“保存”，出现如下图 点击“确定”，然后点击左侧工具栏的图标，出现如下图 双击数据栏里，刚刚保存的文件“咖啡因” 出现如下图 删除上图中“数据文件级别下的数据” 然后点击
标准曲线的作法 (1)标准液浓度的选择：在制备标准曲线时，标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能变异最低与最高值，一般可选择5种浓度。浓度差距最好是成倍增加或等级增加，并应与被测液同样条件下显色测定。 (2)标准液的测定：在比色时，读取光密度至少读2-3次，求其平均值，以减少仪器不稳定而产生的误差。 (3)标准曲线图的绘制：一般常用的是光密度一浓度标准曲线。 ①用普通方格纸作图。图纸最好是正方形(长：宽=l：1)或长方形(长：宽=3 ： 2)，以横轴为浓度，纵轴为光密度，一般浓度的全距占用了多少格，光密度的全距也应占用相同的格数。 在适当范围内配制各种不同浓度的标准液，求其光密度，绘制标准曲线，以浓度位置向上延长，光密度位置向右延长、交点即为此座标标点。然后，将各座标点和原点联成一条线，若符合Lambert-Beer氏定律，则系通过原点的直线。 ②若各点不在一直线，则可通过原点，尽可能使直线通过更多点，使不在直线上的点尽量均匀地分布在直线的两边。 ③标准曲线绘制完毕以后，应在座标纸上注明实验项目的名称，所使用比色计的型号和仪器编号、滤光片号码或单色光波长以及绘制的日期、室温。 ④绘制标准曲线：一般应作二次或三次以上的平行测定，重复性良好曲线方可应用。 ⑤绘制好的标准曲线只能供以后在相同条件下操作测定相同物质时使用。当更换仪器、移动仪器位置、调换试剂及室温有明显改变时，标准曲线需重新绘制。 ⑥标准曲线横坐标的标度：从标准液的含量换算成待测液的浓度。 1.5 原子吸收光谱分析的定量方法 原子吸收光谱分析是一种动态分析方法，用校准曲线进行定量。常用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和浓度直读法。如为多通道仪器，可用内标法定量。在这些方法中，标准曲线法是最基本的定量方法。 1.5.1 标准曲线法 前面已经指出，原子吸收光谱和原子荧光光谱分析是一种相对测定方法，不能由分析信号的大小直接获得被测元素的含量，需通过一个关系式将分析信号与被测元素的含量关联起来。校正曲线就是用来分析信号（即吸光度）转换为被测元素的含量（或浓度）的“转换器”，此转换过程成为校正。之所以要进行校正，是因为同一元素含量在不同的试验条件下所得到的分析信号是不同的。校准曲线的制作方法是，用标准物质配制标准系列溶液，在标准条件下，测定各标准样品的吸光度值Ai，以吸光度值Ai（i＝1，2，3，4，5）对被测元素含量ci（i＝1，2，3，4，5）绘制校准曲线A＝f（c）。在同样条件下，测定样品的吸光度值Ax，根据被测元素的吸光度值Ax从校准曲线求得其含量Ci。校准曲线如图1－4所示。 校准曲线的质量直接影响校准效果和样品测定结果的准确度。正确地制作一条高质量校准曲线是非常重要的，为此需要：（1）合理的设计校准曲线；（2）分析信号的准确测定；（3）正确绘制校准曲线。 首先，从数理统计的观点出发合理设计校准曲线。根据一组实验点绘制校准曲线所遵循的原则是最小二乘原理，即要让实验点随机地分布在校正曲线的周围，并有尽可能多的实验点落在标准曲线上，使得由这些实验点绘制的标准曲线的标准偏差最小。从校准曲线的置信范围考虑，当实验点数目，<4时，置信系数较大且变化速率较快，置信范围较宽，由校正
Excel应用实例：轻松画出复杂的函数曲线 目标：教您轻松画好一条复杂的函数曲线。 实例：给出了一个函数式所对应的曲线的例子。 难点分析： 一些教师会遇到画函数曲线的问题吧!如果想快速准确地绘制一条函数曲线，可以借助EXCEL的图表功能，它能使您画的曲线既标准又漂亮。您一定会问，是不是很难学呀？其实一点儿也不难，不信您就跟我试一试。 以绘制y=|lg（6+x^3）|的曲线为例，其方法如下： 1) 自变量的输入 在某张空白的工作表中，先输入函数的自变量：在A列的A1格输入“X=”，表明这是自变量。 再在A列的A2及以后的格内逐次从小到大输入自变量的各个值；实际输入的时候，通常应用等差数列输入法，先输入前二个值，定出自变量中数与数之间的步长，然后选中A2和A3两个单元格，使这二项
变成一个带黑色边框的矩形，再用鼠标指向这黑色矩形的右下角的小方块“■”，当光标变成“＋”字型后，按住鼠标拖动光标到适当的位置，就完成自变量的输入。 2) 输入函数式 在B列的B1格输入函数式的一般书面表达形式，y=|lg（6+x^3）|。 在B2格输入“=ABS（LOG10（6+A2^3））”，B2格内马上得出了计算的结果。这时，再选中B2格，让光标指向B2矩形右下角的“■”，当光标变成“＋”时按住光标沿B列拖动到适当的位置即完成函数值的计算。 3) 绘制曲线
点击工具栏上的“图表向导”按钮，选择“X，Y散点图”，然后在出现的“X，Y散点图”类型中选择“无数据点平滑线散点图”。此时可察看即将绘制的函数图像，发现并不是我们所要的函数曲线。 单击“下一步”按钮，选中“数据产生在列”项，给出数据区域。 单击“下一步”按钮。
用EXCEL制作标准曲线 首先，将数据整理好输入Excel，并选取完成的数据区，并点击图表向导，点击图表向导后会运行图表向导，先在图表类型中选“XY散点图”，并选了图表类型的“散点图”（第一个没有连线的）。点击“下一步”，出现界面。如是输入是横向列表的就不用更改，如果是纵向列表就改选“列”。如果发现图不理想，就要仔细察看是否数据区选择有问题，如果有误，可以点击“系列”来更改。如果是X值错了就点击它文本框右边的小图标，出现界面后，在表上选取正确的数据区域。然后点击“下一步”出现图表选项界面，相应调整选项，以满足自己想要的效果。点击“下一步”，一张带标准值的完整散点图就已经完成。完成了散点图后需要根据数据进行回归分析，计算回归方程，绘制出标准曲线。其实这很简单，先点击图上的标准值点，然后按右键，点击“添加趋势线”。由于是线性关系，所以在类型中选“线性”，点击“确定”，标准曲线就回归并画好了。计算回归后的方程：点击趋势线（也就是我们说的标准曲线）然后按右键，选趋势线格式，在显示公式和显示R平方值（直线相关系数）前点一下，勾上。再点确定。这样公式和相关系数都出来了。 用Excel电子表格中的TREND函数，将标准品的吸光度值与对应浓度进行直线拟合，然后由被测物的吸光度值返回线性回归拟合线，查询被测物的浓度，方法简便，可消除视觉差，提高实验的准确性。 方法：打开Excel电子表格，在A1∶Ai区域由低浓度依次输入标准品的浓度值；在B1∶Bi区域输入经比色(或比浊)后得到的标准
品相应A值：存盘以备查询结果。点击工具栏中的函数钮(fx)，选取“统计”项中的TREND函数；点击“确定”，即出现TREND函数输入框。在known-y′s框中输入“A1∶Ai”，在known-x′s中输入“B1∶Bi”；在new-x′s中，输入被测物的A值，其相应的浓度值立即出现在“计算结果”处。随着计算机的普及，Excel电子表格亦被广泛应用于实验室，因此，用Excel电子表格制作标准曲线及查询测定结果准确、实用。）