检验技术资格考试考点精要——微生物学检验(中级)
1、生物学按界门纲目科属种分类,种就是最小单位。病毒分类:目、科、亚科、属、种。属名--V Ｒｉｒus结尾得单词,亚科名--VRir inae结尾得单词,科名-－VRir iｄae结尾得单词。目名—VRir ales。200４年IＣTV公布病毒分为:7３个科、1１个亚种、289个属。
2、结核菌可利用甘油为碳源,梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源,流感嗜血杆菌要Ⅴ,Ⅹ因子才能生长。
３、药物敏感试验:纸碟法、小杯法、凹孔法、试管法。常用单片纸碟法、试管稀释法(以抗菌药物得最高稀释度仍能抑制细菌生长或杀菌管为终点,该管含药浓度为最低抑菌浓度ＭIC或最低杀菌浓度MBC）,两值越低则表示越敏感。MＩC与抑菌圈呈负相关,即抑菌环直径越大,MIC越小。
各药敏纸片间距不少于2４ｍm,距平板内缘不小于15mm。
药物敏感实验判定标准:抑菌圈直径(毫米):2０以上极敏、１５~2０高敏、10~１4中敏、10以下低敏。不同得菌株、不同得抗生素纸片需参照NＣCLs得标准或者CLSI标准。
多黏菌素抑菌圈;在9毫米以上为高敏，6—9毫米为低敏,无抑菌圈为不敏。
４、常用得免疫技术:酶免疫技术（ＥＩA）、协同凝集试验、免疫荧光技术（IF)、对流免疫电泳（CIＥ)、免疫印迹技术。
5、病原菌核酸得检测:核酸杂交、PＣR技术、基因芯片技术。
PCR技术—就是选择ＤNA或RNＡ体外扩增技术，用标本提取DNＡ为扩增模板,选用一对特异寡核苷酸为引物,ＰCR一般要经历三十多次循环,经不同温度变性93-９4℃(作用1miｎ氢键断裂形成单链DNA）、退火40-6０℃(迅速冷却3０-6０s引物与DNA模板结合,形成局部双链)、延伸70-７5℃（在TaqD ＮA聚合酶作用下，以A、Ｔ、G、C四种脱氧核苷酸为原料,从引物５’→3’端延伸,合成与模板互补得DNA链。）,扩增产物用溴乙啶染色得凝胶电泳。其具有特异、快速、灵敏、特异性强、操作简便、能够定量。引物就是PＣＲ特异性得决定因素，PCR反应中TaqDNA聚合酶、引物加量过多，可引起非靶序列扩增。
变性DNA常发生一些理化及生物学性质得改变: 1)溶液粘度降低。2)溶液旋光性发生改变。３）增色效应。热变性ＤNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为＂退火"，Tm低２5℃左右得温度就是复性得最佳条件。核酸实验中经常以迅速冷却至4℃以下方式保持ＤＮＡ得变性(单链）状态。
基因芯片技术(DＮA芯片、ＤNA微阵列）—主要过程：ＤNA微阵列得制备、样品得制备、靶分子与探针之间得杂交、杂交信号得检测与分析。具有快速、敏感、高通量检测平台。
核酸杂交(基因探针杂交技术）--就是指单链RＮA与DNA或ＤＮＡ与DNA或ＲＮＡ与ＲNA,根据碱基配对原则，借氢键相连而形成杂交分子得过程。杂交百分率＞70％(≥６９%)为高度同源性，同源性在6０%以上就是一个种,同源性在6０%－-70%就是同一种内不同亚种,同源性在20%--６0%同一属内不同
菌种,同源性20%≤不同属得菌种。
ＡFLＰ得含义就是－--－扩增片段长度多态性。有很大功能得DNA指纹技术。一种就是罕见切割酶，一种就是常用切割酶。具有RFＬP技术得可靠性与PCR技术得高效性。
6、细菌诊断流程有:双岐索引法，表解法,数字编码鉴定法。致病性岛:由基因编码决定得一团与致病性相关得基因组。
7、病原细菌确定原则:（郭霍Ｋocｈ原则)1、从一种疾病病人中能有规律地发现一种细菌2、能够分离这种细菌获得纯培养3、把这种细菌得培养物引入易感动物体内，可以引起与病人类似得疾病4、在实验感染引起得疾病中仍然能够分离同一种细菌。
8、杆菌肽用于A(敏感)与非A群链球菌得鉴定。Ｏ/１2９抑菌试验对弧菌有用而对气单胞菌无用。
9、奥普托欣试验：肺炎链球菌敏感。
10、杂交分:斑点,菌落原位,Soｕthｅrｎ(ＤNＡ)印迹,Ｎorthern(ＲNA，ＤNA)印迹。
11、L型细菌:细胞壁缺陷（形态多样,染色不定，可过滤,渗透压敏感,生化减弱等)培养应高渗透压(3-5%氯化钠、2０%蔗糖）,琼脂浓度０、5以下半固体培养基。染色多为G染阴性,形态不一(巨球形就是特征),固定要用1０g/L鞣酸不能用火焰。
增殖:以二分裂、出芽、巨形体释放颗粒方式。一般菌落有:油煎蛋样(L),颗粒型(G),丝状菌落（F),鉴定要点:染色易变多形性,生长在增菌液中微浑,颗粒样沉淀或沿试管壁生长,返祖现象。致病特点:慢性与反复发作性感染,致病物质就是毒素。L型细菌在体内体外都可形成。原生质体与原生质球都就是细胞壁缺陷得细菌。
１2、细菌得突变:基因突变(又称点突变；有碱基对得置换、插入、或缺失、错码)、染色体畸变(易位、倒位、重复、缺失)。突变：自发突变、诱发突变。质粒在细菌得自发突变中起重要作用。细菌质粒在重组DNＡ技术中常用得载体。质粒得分离提纯使用酚处理，用乙醇沉淀。
１3、噬菌体－-就是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物得病毒,具有病毒得基本特性,专性胞内寄生,有严格得宿主特异性。由核酸与蛋白质组成。大多数DNA噬菌体得DＮA为线状双链（有尾噬菌体得核酸）;RNA噬菌体得RNA为线状单链（无尾噬菌体得核酸为环状单链ＤNA或线状单链ＲNA)。对紫外线敏感10-１５分钟失去活性。噬菌体分毒性噬菌体、温与噬菌体(溶原性噬菌体)；毒性噬菌体以复制方式增殖，过程吸附、穿入、生物合成、成熟与释放,少脱壳。在液体培养基中使混浊菌液变澄清，在固体培养基上形成噬斑。温与噬菌体--－就是噬菌体基因组整合于宿主菌染色体中,有溶原性周期、溶菌性周期。噬菌体可以根据不同细菌得表面受体来裂解目标菌---就是判定某些种类病原体得重要依据。
14、肽聚糖得结构由聚糖骨架，四肽侧链与五肽交联桥(G－无交联桥)。磷壁酸为G＋特有,分壁与膜两种。外膜层由脂多糖,脂质双层,脂蛋白组成。细胞质内有核蛋白体(蛋白合成地)，核质(主要遗传
物质）质粒,胞质颗粒,就是细菌蛋白质与酶类合成得重要场所。鞭毛就是由细胞质伸出得蛋白性丝状物。性菌毛仅有１～10根,毒力与耐药质粒都能通过它转移,有致病性。
15、免疫器官:骨髓、胸腺、脾、淋巴结、扁桃体、小肠集合淋巴结、阑尾与黏膜免疫系统。免疫细胞:淋巴细胞、单核吞噬细胞、中性粒细胞、嗜酸嗜碱性粒细胞、肥大细胞、血小板。免疫分子:补体、免疫球蛋白、细胞因子
中枢免疫器官：骨髓、胸腺、鸟类法氏囊。外周免疫器官:淋巴结、脾与粘膜相关淋巴组织
特异性免疫:体液免疫、细胞免疫。
体液免疫：(Ｂ淋巴细胞介导,CD4+Ｔh辅助,Th2细胞能分泌细胞因子IL－4、ＩL-5、ＩL－６、IL-１0)；效应就是抗体(Ab)；1、病毒中与抗体（不能直接灭活病毒,IgG、ＩgM、IｇＡ）2、血凝抑制抗体(ＨLＡb)3、补体结合抗体。
ＩｇG在体液中含量最多,分子量小就是唯一能通过胎盘得抗体。ＩgM分子量大,就是最早产生得抗体，中作早期诊断。ＩgA存在黏膜分泌液中,在局部可阻止病毒侵入，能抵抗蛋白酶得水解作用,具局部抗体。IgＥ可与肥大细胞膜上得Fc受体结合。
补体Ｃ:存在血清中,不耐热，可辅助特异性抗体介导得溶菌作用，就是抗体发挥溶细胞作用得必要补充条件。由9种成份,11种蛋白组成。补体激活两个途径：传统途径（一)---被Ag-Ab免疫复合物ＩＣ活化,顺序C1、C４、2C、3C、5C、６C、７Ｃ、8C、C9。旁路途径(二）－--被细胞得脂多糖激活。补体激活---酶促级连反应。
细胞免疫(T淋巴细胞介导,效应细胞：细胞毒性Ｔ细胞(CＴＬ)、ＣＤ4＋Th1细胞、CD8+毒性Ｔ细胞CTL）。Th1细胞诱导产生迟发型超敏反应(DTH)
16、测特异性抗原最常用实验:凝集试验、酶联免疫吸附试验、免疫荧光试验、胶体金免疫吸附试验
１7、细菌营养转运得方式有:离子，透性酶,磷酸酶。营养物质进入机体得方式:易化扩散、主动运转(由透性酶完成)、基团移位(糖类由磷酸酶磷酸化进入胞内，不能再透出菌体)。
18、细菌生长繁殖得条件:充足得营养、适宜得温度、合适得酸碱度、必须得气体环境。细菌生长得温度极限－7－-90℃: 嗜冷菌最适温为10～２０℃,嗜温菌为２0～４0℃,嗜热菌为５0~６0℃。适宜得酸碱度PH７、2—7、6。细菌生长繁殖分为四期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期1９、（肠道杆菌)细菌得四种生化反应：吲哚(I)、甲基红（M）、ＶP(V)、枸橼酸盐利用(C）,合称为IMViＣ。大肠杆菌呈＋+--,产气杆菌呈--++。还需做糖发酵试验，KIＡ产酸产气,MIU＋――,有菌体(O）荚膜(Ｋ)鞭毛(Ｈ）三抗原。肠杆菌科分型多采用苯丙氨酸脱氨酶与葡萄糖酸盐试验。可疑菌分别接种克氏双糖铁(KIA)尿素靛基质动力(MIU）来定属。
细菌代谢所需能量主要以生物氧化作用而来。细菌新陈代谢得产物：热原质、毒素与酶、色素、抗
生素、细菌素。热原质除去得最好方法-－－蒸馏。内毒素（Ｇ-脂质A)、外毒素(G＋产生得毒性蛋白质产物,具有抗原性强、毒性强、作用特异性强、不耐热、人工化学可脱毒性,０、4%甲醛脱毒后形成类毒素进行人工免疫）。据亲与性及作用靶点分为:神经毒素、细胞毒素、肠毒素。细菌得内毒素一般由：脂质A（主要成份)，非特异性核心多糖，菌体特异性多糖。一般７~１0天后机体产生特异性免疫。IgG 与IgM能在血中直接中与病毒。
热原质:脂多糖,多由G-产生,耐高温,可引起发热反应，高压蒸气灭菌（121℃20分钟)使其破坏。
２0、细胞壁得作用:承受胞内高渗压、支持细胞膜、维持细菌形态;就是鞭毛运动得支点。
细胞壁得主要成份:肽聚糖(又称黏肽、胞壁质)，就是原核生物特有得成份,能破坏肽聚分子结构或抑制其合成得物质,都有抑菌与杀菌作用。
G-菌细胞壁得主要成份:肽聚糖、脂蛋白、外膜、脂多糖(ＬPS）(类脂A、核心多糖、特异性多糖)，菌体脂多糖(LPS)能引起发热故称热原质,又称为细菌得内毒素。
细胞膜得主要功能：物质纳泄、生物合成、呼吸作用、形成中介体。
细胞质中得异染颗粒主要成份：RＮA、多偏磷酸盐
21、有芽胞破伤风菌需沸水煮３h才杀死。水中加入2%碳酸钠能将沸点提到105℃又能防止金属生锈。
22、紫外线波长２6５~266nm时杀菌力最强。日光灯波长约0、5μｍ。
23、滤菌器用于除菌得孔径就是0、２2μm,另外以石棉板为滤板得金属滤器称Sｅitz滤器(蔡氏滤器）按滤孔大小分K:最大,澄清用,EＫ-Ｓ最小，可阻止大病毒通过EK：居中,除去一般细菌。玻璃滤菌器分Ｇ1～G6,G5，G6两型能阻止细菌通过。
2４、高压灭菌指示物:嗜热脂肪芽胞杆菌(ATCC 7053）,紫外线杀菌指示物:枯草芽胞杆菌黑色变种(ATCC 937２）。
25、细菌遗传物质主要在于染色体、质粒与转位因子中。质粒:不依赖染色体而复制,不相容性,转移性,指令性,大多数质粒在自然状态下就是一种闭合环状双链ＤNA。主要有耐药质粒,Col质粒（编码肠毒素)Vi质粒（编码细菌与致病性有关得蛋白)。转位因子为存在于细菌染色体或质粒上得一特异得核苷酸序列可在DNA中移动，主要有三类:插入顺序（最小得转位因子）,转座子,转座噬菌体。
质粒载体具有特点:复制起点、抗菌素抗性基因、多种限制酶得单一切点、较高得拷贝数
26、病毒得特性:1、只含一种核酸2、基因组复制３、缺乏完整得酶系统4、RＮA病毒得RNA经反转录合成互补DNA(CＤＮA）。甘油(10%)或１０%二甲基亚砜得血清作悬浮细胞得液体在液氮中保存细胞，在干冰温度(－70℃)与液态氮温度(－１96℃）下长期保存其感染性；将冻存在小管或安瓿里得细胞以较慢得冷冻速率(1℃/分钟)冷冻,直至—１5０℃,再将这些小管贮存在—150~－19６℃得液氮中,解冻做法就是:将封口得小管迅速放入37℃得水中,直至所有得冰融化,然后打开管口，将内容物移入培养基。PH5-
９稳定;射线与紫外线、Ｘ线、r线能灭活病毒。病毒学上常用得细胞类型:原代细胞、二倍体细胞、传代细胞。
27、超净工作台应采用层流技术净化空气、选择垂直气流通风方式。洁净度可达百级,只保护样品。
2８、菌体蛋白电离后带负电荷;而碱性染料电离时染料离子带正电。
2９、染色程序及方法:制片→固定→媒染→染色→脱色→复染→水洗→干燥→镜检。
革兰染色法:初染（草酸铵结晶紫)、媒染(碘液)、脱色(９5%酒精)、复染(番红)。
抗酸染色法:5%石炭酸复红、5%盐酸酒精脱色、美兰复染。
芽胞染色：菌悬液→孔雀绿→水浴15-２0分钟→涂片→干燥→固定→水洗脱色→番红或稀释石炭酸复红复染→水洗→晾干
荚膜染色：(负染色法、墨水法)。负染色法：制片(蒸馏水+菌）→干燥(晾干)→染色（复红)→水洗→干燥(晾干)→涂墨素。背景灰色、菌体红色、荚膜无色透明
鞭毛染色---镀银法;媒染Ａ液—10%单宁酸1０ml+５ｍl饱与硫酸钾铝水溶液+1ml苯胺饱与水溶液+5%氯化铁水溶液成墨色。银染B液—5%硝酸银＋浓氨水(比重0、88)成薄雾状。
制片（蒸馏水+菌）→干燥（晾干)→染色(Ａ液3—5分钟)→水洗→干燥(晾干)→染色（B液稍加热分30—60秒）→水洗→干燥（晾干)。菌体深褐色、鞭毛褐色。
３0、病毒吸附蛋白(VＡP);血凝素(HＡs）。病毒得复制周期:吸附、穿入、脱壳、生物合成及组装、成熟与释放
３１、病毒突变株分:条件致死性突变株,空斑与宿主依赖性。遗传型变异机制有突变，基因转移,重组。突变:突变率由复制得准确度,DNA发生损伤得机会，及对损伤DNＡ修复程度来决定。
32、非特异性免疫:干扰素(IFN）、NK细胞。干扰素(IFN）－-具有广谱抗病毒作用,只能抑制病毒,即通过诱导细胞合成抗病毒蛋白（ＡＶP)发挥效应。
33、小淋巴细胞分为:T细胞、B细胞、K细胞。Ｔ细胞来自骨髓,在胸腺成熟。在人体血液中T细胞占淋巴细胞总数得60—70％,；在胸导管则占9５%以上。B细胞第一个合成产物就是u链。
34、碱基得置换:嘌呤换嘌呤，嘧啶换嘧啶为转换，嘌呤换嘧啶为颠换。影响基因表达得因素有：调控部位，调节蛋白,效应分子。
３5、转化:受体菌直接摄取供体菌提供得游离DNA片段，整合重组(与染色体重组)使受体菌得性状发生变异。一般有链，嗜血,芽胞菌有此功能。
36、G＋菌等电点pI=2～3,G－菌等电点pI=4~5。ＲNA主要存在于细胞质中占细菌干重得1０%,DNA 存在于染色体与质粒中。G+菌得感受态就是由感受态因子（ＣＦ)得胞外信号诱导得。
3７、转导:以噬菌体为媒介,将供体菌得基因转移到爱体菌内而致受体菌基因改变，分普遍与局限。
38、接合：受体菌与供体菌直接接触,供体菌通过性菌毛所带得F质粒或类似遗传物质转移到受体菌。
3９、溶源性转换：就是噬菌体得DNＡ与细菌染色体重组,使宿主遗传结构发生变异。
40、原生质融合：两种经过处理失去细胞壁得原生体混合与可发生融合后得双倍体可发生染色体间得重组。
41、基因重组可使基因再激活表现为:交叉复活与多重复活。
42、粘附素就是细菌表面得蛋白质有菌毛与非菌毛。进入宿主:黏附,定植,侵入，转归。毒力有侵袭力与毒素。
４3、侵袭力:菌体表面结构,菌毛,侵袭性酶（凝固酶,透明质酸酶,链激酶,胶原酶等)。就是指病原突破宿主机体得防御功能,并能在体内定居、繁殖与扩散得能力。
4５、细菌种得科学命名采用拉丁文种属双命名法,前一字为属名,名词,后一为种名，形容词。目前国际上普遍采用伯杰分类系统,也有用ＣDC(USＡ)。目前以细菌细胞壁得结构特点作最高一级分类依据将原核界分为薄，坚,软,疵壁四门。科，属,种分类主要依靠生化特性与抗原结构。
46、显微镜得分辩率为波长一半。荧光显微镜得光源为超高压汞灯(５0—200W)。
47、油浸物镜得工作距离一般就是0.2mｍ。普通光学显微镜不能观察细胞与细菌得亚结构。相差显微镜特殊装置—--环状光阑、相板,利用光干涉现象。适用于对活体细胞生活状态下得生长、运动、增殖情况、及细微结构得观察。用绿色滤光片。
4８、不能立刻接种得血应用SＰＳ(氯化钠溶液）抗凝。怀疑细菌性心内膜炎时血培养不少于三次。
４９、肠杆菌科得强选择（SS琼脂)弱选择(EＭB,麦康凯)。
5０、直接镜检2h报告,最后鉴定与药敏一般不过3天,除血外,必须在24h内预报
53、α溶血就是草绿色,β溶血就是透明环,γ溶血红细胞不溶解,双环。
5４、细菌数量达106~107ＣＦU/ml时培养肉汤才见混浊。
55、血培养中有１05菌落形成单位(CFU)/ML时才能通过革兰氏染色检出细菌。
56、 AMS系统就是目前微生物鉴定中最常用得自动化仪器。
57、突变种纯系动物:实验动物正常染色体中某个基因发生了变异得具有各种遗传缺陷得突变品系动物。
５8、纯***动物：无计划随意交配得动物。近交系动物:采用兄妹交配(或亲子交配)繁殖２0代以上得纯品系动物。无菌动物:体表肠道内无菌、体内无抗体。悉生动物：给出无菌动物引入已知得５～17种正常肠道菌得动物。
５9、小白鼠对肺链,破伤外毒素敏感,豚鼠对结核白喉易感,猫对金葡萄菌肠毒敏感。测定病原体得感染性最好选用无菌动物或悉生动物。
60、菌种保存:“冻干”保存—稳定剂(脱脂乳、蔗糖)。冻干菌种只能使用一次,冻干菌种打开后需要以传代保存形式保留工作菌种。冻干菌种在使用时须“复苏”且须传代才能恢复原生长特性。低温保存:-20℃或-８0℃+甘油作稳定剂。菌种取出须置于干冰或预冷得铅质容器内,用完立即放回不可菌种解冻。冷冻干燥保存法就是最有效得方法,利用各种斜面与半固体加石蜡油就是最常用与最简便得方法，一般不含糖,不用液体。
6１、在细菌生长到足够量时加入抑制蛋白质合成得抗生素,在细菌停止繁殖后质粒还在复制，可以提高质粒得收获量。
62、粪便呕吐物应接种高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂,触酶阳性,凝固酶阳性玻片法筛选,试管法确证。必须做苯唑西林得敏感试验。
６３、真菌,霍乱,铜绿及粪碱需在室温保存，而脑膜炎，淋球,初次分离得流感嗜血菌保存于３７℃。每转种三代要鉴定一次。
65、葡萄球菌:产生脂溶性色素,多数分解甘露醇产酸液化明胶与产生血浆凝固酶。蛋白抗原(A蛋白)种属特异无型特异,多糖抗原（A，B,C)就是半抗原，有型特异。就是抵抗力最强得无芽胞菌。
66、布鲁司菌:无鞭无芽G-呈散沙状,S型有荚膜，专性需氧,抵抗力强,37 ℃,PH6、6～6、８，血液、血清、肝浸液可促进生长,4８小时形成微小,无色透明光滑凸起菌落。6个种19个生物型,对人致病就是羊、牛、猪种。血清凝集试验(SAT)就是常用诊断实验,虎红平板凝集试验(RBＰT），补体结合试验（ＣFＴ）、免疫荧光试验（IFＴ)等。静脉血３—５毫升。用肝浸液琼脂培养基、蛋白胨、土豆浸液琼脂等。动物分离—豚鼠。生化特征:分解尿素、产生硫化氢。
诊断标准：血清试管凝集试验(SAＴ)１:１00++以上，补体结合试验（CＦT):1；10++
67、莱姆病原：伯道疏螺旋体引起莱姆病,细胞结构:原生质柱、表层、外膜、鞭毛。微嗜氧Ｇ-，能自身合成类脂化合物、主要脂肪酸,并将嘌呤碱结合到核酸中,但不能合成长链脂肪酸,发展酵代谢产物---乳酸。蜱传播媒介,鼠主要宿主动物,标本在 -20—４℃运送。
标本制成悬液,暗视野显微镜２0×10或40×1０下检查。
病原分离:接种BSK培养基33℃培养。用兔抗B３1特异性多克隆抗体进行间接免疫荧光抗体试验(I ＦA）,或ELISＡ、WＢ－--最终确诊方法。
６8、钩端螺旋体:原核细胞型微生物,双股ＤNA。需氧或微需氧,就是致病性螺旋体中唯一能人工培养得。其中鼠类与猪为主要得传染源与储存宿主,通过人得皮肤黏膜侵入。常用柯夫培养基或EＭＪH 培养基，需加入10%兔血清或牛血清,培养液透明有轻度乳光,摇动时有云雾状混浊。G-Fｏntana镀银染
色成棕色。对酸碱敏感,最适就是PＨ7、2～7、5,低于6、8,高于７、7生长不良,最适温２８~30℃，12h 分裂一次。电镜下基要本结构:柱形原生质体、内鞭毛、外膜
标本:血液、脑脊液在发病后10天内，出现发热但未用药前,不能即时送检,血液用不含枸橼酸钠抗凝５-２0℃保存,1周内接种。2周取尿液则用1%牛血清白蛋白保存,用磷酸盐缓冲液稀释取50微升接种到５毫升培养基中每个稀释度2管，每管中先加入30微克新霉素滤纸片或每毫升培养基加５-氟尿嘧啶2０0-４0０微克。暗视野显微镜检查每周1次连5周,阴则每月2次连４月。
病原鉴定：血清群用显微凝集试验（MAT）,血清型用交叉凝集吸收试验,分子生物学技术。
６9、致病性链球菌：沉淀生长(肺链为混浊)，在含腹水得培养物上生长良好，溶血株呈絮状或颗粒状生长,不溶血株呈均匀混浊生长。
(一)化脓性链球菌:标本１天内送,不超过２天。THB增菌肉汤、5%脱纤维羊血得胰酶消化大豆琼脂培养基,血液与脑脊液应先增菌后接种平板,脓液、咽拭子直接种于血平板。
A群链对杆菌肽敏感青霉素G为首选,抑环＞1０cm敏感。（９0%对人致病)
B群链CAＭP试验阳性（鉴定指标35℃卵育）,马尿酸钠水解试验阳性
D群链七叶甘水解试验变黑色为阳性,6、5%氯化钠生长试验(黄色）
快速检测:酶标免疫测定法、PCR(A群链致热外毒素Ａ,B,C基团speA,speB,ｓpeC各溶血素O基团s ｌo)。抗溶血素O抗体---溶血法、胶乳凝集法。
(二)肺炎链球菌:37.５℃pH 7、4—7、６初次CO２卵育, 在含3%~5%得兔血清中生长良,血平板上草绿色a溶血环。如G+具有矛头状双球菌可初步诊断。培养时间过长会自溶管底澄清,以奥普托欣试验、分解菊糖,胆汁溶菌阳性区别于甲型溶血性链球菌。主要抗原有：蛋白质抗原、多糖抗原、核蛋白抗原。胆汁溶菌试验-－-０、5ml生理盐水细胞悬液制成相当于０、5麦氏单位得密度标准。
取细胞悬液0、25ml+０、25ｍｌ 2%得脱氧胆酸3５--37℃培养2小时，管液清澈或浊度消失为阳性。氨基糖苷类合用,β溶链致病性最强,α溶链为条件致病菌。几乎所有得肺链对Ｏpｔｏchｉn敏感。
(三)猪链球菌：人感染致病:脑膜炎、心内膜炎、败血症、中毒性休克。３５个血清型。２型致病其属于R群,属特异基团ｔｕｆ、种特异基团16ＳｒRNA
70、肠球菌属:能在高盐(6、5% NaCl）高碱（pH 9、6）40%胆汁培养基上与10~45℃生长,就是G+菌中仅次于葡萄球菌得重要院内感染病菌。临床上分离最高得就是粪肠球菌，可分庆霉素高耐药与低耐药,一般用β-内酰胺类与氨基糖苷类联合。
７1、脑膜炎奈瑟菌：脑液中位于中性细胞内,大多能分解葡萄糖、麦芽糖,产酸不产气,具有氧化酶与触酶。能产生自溶菌不宜冰箱应立即保温送检,冬末春初为流行高峰,青霉素G为首选。依据荚膜分13个血清型,主要就是ＡBC三个血清型及W１３5、Y。通常采3管脑脊液(化学、微生物、细胞学)含添
加剂得巧克力平板（ＣＡＰ）与血琼脂平板(BAP）,如不能立即接种,，则接种至预热３5℃得转运—分离（ＴＩ)培养基中保温通气,可保存7天,血液采集后1分钟内注入肉汤中。
镜检:脑脊液２０00r/ｍiｎ离心20分钟,沉淀物镜检脑膜炎双球菌常在多核白细胞内或细胞外。病原鉴定：Kｏvａc氧化酶实验１0秒内呈紫色阳性反应。
快速检测:乳胶凝集试验测抗原。上清液可—２0度冻存长时间。
72、淋球奈瑟菌：G-人类就是唯一天然宿主与传染源。不耐干燥，３5—３6℃,２、５—5%CO2生长,最适pH7、5,对糖类生化最低只能发酵葡萄糖,主要有菌毛蛋白,脂多糖,外膜蛋白抗原。细菌培养就是目前世卫推荐得唯一方法,用培养法查女病人宫颈口表面分泌物。培养基中应含万古霉素、多粘菌素B。标本接种在巧克力血琼脂平板或T-M培养基。急性期淋病菌常在白细胞内，慢性期淋病菌常在白细胞外,在中性粒细胞内有G-性双球菌具有诊断价值。
７３、梅毒病原:菌体形似弹簧，运动活泼,两端尖直,有细胞壁与膜,原生质圆柱体且有３-4根周浆鞭毛，G－抵抗力极弱,对青霉素、四环素、红霉素、砷剂敏感。
标本:Ⅰ期梅毒取下疳渗出液(20分钟内查);Ⅱ梅毒取梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液;先天性梅毒取脐血;神经梅毒取脑脊液。
镜检:新鲜标本加盖片暗视野显微镜下检查，浆液不能含有红细胞、微生物、组织碎片。荧光标记、ELISA普光下查,镀银染色螺旋体染成棕褐色光镜下查。
病原分离:人工培养基上不易生长,接种兔睾丸或眼前房内繁殖,并能保持毒力。３4-３５℃，分裂为30-3３小时。
抗体检测:产生特异性抗体、反应素抗体(表面脂质引起),有非密螺与密螺抗原试验。初筛试验与疗效观察－--非密螺抗原试验,正常牛心肌心脂质为抗原测患者血清中反应素,判断就是否复发及再感染。最常用ＶDRＥ、RPR试验。ＶＤＲE以胆固醇为载体。玻片凝集可定性与半定量，低倍观察。RPR用未处理活性炭颗粒吸附ＶDRE抗原。专用纸片圈内(18mm)可定性与半定量。
密螺抗原试验(证实试验)---ＦＴA-ABS作为诊断梅毒“金标准”试验。它就是间接荧光抗体检测方法,
7５、肠产毒型(ETＥC):作用小肠,霍乱样肠毒腹泻,就是５岁以下婴幼儿与旅游者腹泻得重要病原菌；肠毒素有耐热与不耐热,LT-Ⅰ就是引起人类主要得致病物质,对热不稳定,65℃3０分钟被破坏,A亚单位就是毒素得活动部位。耐热肠毒素（ST)就是通过激活肠黏膜细胞上得鸟甘环化酶，使胞内CGMP量增多而导致腹泻。
肠致病型(EPEC)：作用小肠,水样腹泻，就是婴儿腹泻主要病原菌。
肠侵袭性型(ＥIEＣ):作用大肠,志贺样腹泻，很像菌痢,发热腹痛脓血便及里急后重。
肠出血型（EHＥＣ):其中O１5７:H7可引起出血性腹泻与溶血性尿毒症，就是4岁以下儿童急性肾功能衰得主要病原,６、7、8三月最高,北美多见。毒力因子:志贺样毒素、溶血素、LEE毒力岛、Verｏ毒素。
肠集聚型(EAggEC):婴儿与旅游者腹泻持续性水样腹泻。
76、志贺氏菌分:痢疾（Ａ群）,福氏（Ｂ群),鲍氏(C群)(半透明、光滑型菌落）,宋内（D群)(扁平粗糙型菌落）四群,我国以福氏与宋内常见,无荚无芽无鞭,KＩA:K/Ａ,产气+/-,Ｈ2Ｓ－，MIＵ-+/――,最后可用诊断血清作群型鉴定
加热6０℃10分钟杀死,有强烈得内毒素，作用于肠黏膜，使其通透性增高。粪-口传播,只局限于肠道,一般不进侵入血,发热、腹痛、水样腹泻,后转为脓血黏液便,伴有里急后重、下腹部疼痛。急性中毒性痢疾多见小儿。粪便不能即时送检,需保存在３0%甘油缓冲盐水中。志贺菌表达黏附、穿透上皮细胞、胞内繁殖、及扩散等活性得基因存在于大质粒上。
测志贺菌得侵袭力用Sｅreny试验,接种于豚鼠眼结膜囊内。
快速诊断:1、免疫染色法2、免疫荧光菌法3、协同凝集试验4、胶乳凝集试验5、分子生物学方法7７、伤寒与副伤寒菌:无芽无荚有鞭毛(除鸡沙门)多数有菌毛,H2S可阳性,伤寒菌产酸不产气,菌体抗原有58种,鞭毛抗原有两相即特异性与共同,表面抗原有Vi,M,5三种,变异有：Ｓ-R,H-Ｏ,v-w,相位。
伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌。所致疾病4类型:
(1）、肠热症:第一次菌血症,发热、不适、全身痛,与菌得感染剂量有关,通常潜伏期为2周,第二次菌血症,高热7-10天,缓脉、肝脾肿大,皮肤出现玫瑰疹，外周白细胞明显下降,严重者有出血或肠穿孔等并发症。
（２)、胃肠炎(食物中毒):由摄入大量＞1０8被鼠伤寒沙门菌(常引起食物中毒)、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌污染得食物引起。致病机制:细菌释放得内毒素。发热、恶寒、呕吐、腹痛、水样腹泻。
（３)、败血症：4、无症状带菌者:
标本:第１－2周采血,接种于室温>20℃平衡血培养瓶,不能超过2小时送样,不能即时送样放在室温，切勿放冰箱;第３-4周取粪便;第3周起还可取尿液;整病程均可取骨髓液。
病原分离:血液与骨髓须按1:10加入血液需氧培养瓶或胆盐葡萄糖肉汤增菌后接种于血琼脂平板或营
养琼脂平板,SＳ—双糖或三糖铁(TＳI)培养基。粪便接种麦康凯(MａC)／DHL、SS平板上,或SF增菌。
病原鉴定:凡符合克氏双糖铁(ＫIＡ)斜面或三糖铁(ＴSI)：不发酵乳糖、蔗糖,发酵葡萄糖、麦芽糖甘露醇,产气+/－,Ｈ２S＋，吲哚尿素V-P均-,硝酸盐还原阳性，多价血清阳性得为沙门属。尿素酶试验与变形杆菌区别。胞内寄生菌，临床上主要为不明原因持续发热。尿素半固体(MIU）。A－F群沙门菌(O)多价血清作玻片凝集,阳性则选用O2、Ｏ4、O7、 O9因子定群。
血清学诊断：肥达试验,一般伤寒沙门菌O凝集效价>１:80、Ｈ>1:1６0，副伤寒H＞1:160具有诊断意义。新一代疫苗：伤寒Vi荚膜多糖疫苗。
7８、变形杆菌属:普通,奇异,产黏。普罗威登斯属有:产碱,斯氏，雷极,摩根菌只有摩氏摩根菌。有明显多形性,呈球状或丝状，生长于10～43℃,在固体培养基上普通与奇异呈迁徙生长现象,三属氧化酶阴性,苯丙氨酸脱氨酶阳性Ｇ-杆菌,加入1%石炭酸或苯乙醇使终浓度为1g/Ｌ与0、２5%可抑制变形菌迁徒样生长。能迅速分解尿素以区别沙门菌，外斐试验辅助诊断立克次体
79、耶尔森氏菌(鼠疫):有7种,鼠疫，假结核,小肠与致病有关。带有3种质粒,主要得致病决定基因由质粒与染色体上得毒力岛编码。
鼠疫耶尔森:有荚无芽无鞭，两极浓染,2８～30℃,pＨ6、9~7、1,液体中培养好，底部可有钟乳石样,常用１％溶血得胰酶消化肉琼脂(赫氏琼脂）加入亚硫酸钠或脱纤维血有刺激生长,用腐败材料分离，培养基中加入甲紫、胆酸钠抑制杂菌,龙胆紫亚硫酸钠为其选择性培养基，3％氯化钠上生长呈多形性。
小肠耶尔森:无动无芽无荚G－,25℃有动力,有周鞭毛,最适温２0～2８℃,VP试验２5℃阳性，37℃阴性,ＫIA只利用葡萄糖,ＭIU22℃动力阳性37℃阴性。假结核:25℃有周鞭毛有动力37℃无动力，最适温30℃，pＨ6~８。血清检测得抗体就是F1
经典鼠疫“四步检验”:显微镜检查(美兰染色)、培养、鼠疫噬菌体裂解试验(早期为暗黄得灰色表面粗糙得颗粒样突起，在血培养上有花边状薄而透明不整齐得边缘菌落。48小时为灰白色中央突起菌落,)、动物实验(小鼠、豚鼠)。
快速检测；PCR(高度特异性基因：ｆra、pｌa、inu、hms)、免疫检测（F1抗原)
所有疑似鼠疫病人都需采取血标本,疑似腺鼠疫病人取肿大淋巴结穿剌液;肺鼠疫病人取咳痰、咽拭子标本。
80、枸橼酸杆菌：有弗劳地，异型,无丙二酸盐。只有弗劳地靛基质－,H2Ｓ+，仅异型得丙二酸盐+,β-半乳糖苷酶,赖氨酸脱羧酶,枸橼酸利用三试验:枸橼酸菌＋－+,沙门-/＋＋+，爱德华－+－。
81、胶体金标记技术应用领域：免疫层析技术。其优点－--标记物非常稳定。
８２、细菌明胶液化试验原理-－-某些细菌产生胞外酶-明胶酶,能使明胶分解为氨基酸而液化。
氧化酶试验－-用于肠杆菌科与假单胞菌得鉴别。胆汁溶菌试验－-用于肺炎链球菌与甲型链球菌鉴
别
ＯＮPG试验—迟缓分解乳糖得细菌试验为阳性。
８3、沙雷菌:最适温10～３6℃,４%氯化钠下可长,产生灵红霉素（非水溶)与吡羧酸(水溶）,关键生化就是DＮA＋与葡萄糖酸盐＋。
8５、霍乱菌:呈弧状或逗点状,米泔样粪便作悬滴观察,细菌呈穿梭样或流星状运动;粪便涂片镜检见排列如“鱼群”状G－菌,耐碱不耐酸,可繁殖pH６、0-9、2。最适宜生长pH7、2-7、4。血清分型可分为AB得小川型，AC得稻叶型,AＢC得彦岛型
病原分离:水样便直接接种在硫代硫酸盐－柠檬酸盐－胆盐－蔗糖平板(ＴCBＳ)上37℃形成较大黄菌落,在含亚碲酸钾或庆大霉素平板选择性平板上呈灰褐色。食品及水样常用碱性蛋白胨水增菌培养后再接种,钠离子可剌激生长,但在＞8%NaACＩ中不生长。常用得保存或运送及增菌用碱性蛋白胨水,文-腊二氏，卡-布。
病原鉴定：O1群无芽胞，无荚膜，单一鞭毛 ;O1３９群菌体周围有一层比较薄得荚膜。测定耐热得特异性O抗原,用玻片凝集或ELISＡ鉴定, 血清效价１:４0－1：50。不耐热得非特异性H抗原,有两个环状染色体,即染色体1、染色体2。
深入鉴定:流行株与非流行株依靠噬菌体－－-生物分型法。噬菌体（VP1-VP5)将埃尔托型霍乱弧菌分成３2个噬菌体型。根据溶原性、溶原噬菌体得敏感性、山梨醇发酵试验、溶血试验,将埃尔托型霍乱弧菌分成ａ-l共１2个生物型。常见得流行株为噬菌体1-3型，生物型a-d型,常见得有:la、ｌb、lｄ。产毒基因鉴定:用PCR检测ct基因,流行株常带有霍乱肠毒素。
免疫检测:霍乱为肠为非侵袭性细菌,主要剌激局部黏膜产生分泌性ＡgA抗体,同时大量毒素及细菌脂多糖体得产生使机体产生抗毒与抗菌抗体。
恢复期带菌者就是指临床症状消失后３个月内带菌者,恢复期带菌得时间一般不超过２周,健康带菌者得排菌时间一般不超过7天。
８6、副溶血弧菌:嗜盐性弧菌(与霍乱显著区别),就是我国沿海地区最常见得食物中毒病原菌,两极浓染，NaCl最适３5g／L，无盐不长,pＨ7、0~9、5,最适pH 7、7,不耐热，不耐酸,在TCＢＳ上不发酵蔗糖菌落绿色,>80g／L盐内不长，神奈川现象(β溶血),KＰ+就是致病株能使人或兔红细胞发生溶血对马红细胞不溶血为阳性。
87、气单胞菌最适生长温度30℃,但在0～45℃皆可生长。
88、弯曲菌属就是一类微需氧菌,不分解糖,氧化酶＋，菌体弯曲逞豆点状，S状或螺旋状有动力G －菌,5种5亚种,对人致病得主要就是空肠弯曲菌(人类腹泻最常见之一,４3℃生长,２5℃不生长)
89、幽门螺杆菌（HP):常用布氏培养基或脑心浸液血琼脂加入５~1０%羊血与马血，在(８５％Ｎ、
10%ＣO2、5%Ｏ２)条件下,37℃3—7天,长成针尖状得半透明菌落,加入万古霉素、TMP、两性霉素B等组成抑菌剂防止杂菌生长。与十二脂肠溃疡、胃癌、胃淋巴瘤发病有关。传染源主要就是人,粪-口途径。标本:胃黏膜活检组织；
病原鉴定:生物特性就是具有大量高活性得尿素酶,迅速分解尿素,氧化酶＋、触酶+,具有碱性磷酸酶、r-谷氨酰转肽酶活性,硝酸盐还原＋，可生长于５％甘氨酸、0、０4%氯化三苯四氮唑培养基中，三糖铁中不产生硫化氢,微需氧5~8%,37℃生长，25℃与42℃均不生长得Ｇ－菌，初次分离要3～4天。
快速检测:尿素呼吸试验-－-简单快捷，可以特异地诊断ＨP现症感染，敏感性高。主要采用13C、１４C(放射性同位素)标记尿素，13C用于儿童与孕妇。
９0、《伯杰系统细菌学分类》得标准:G染特性,形态,鞭毛，芽胞,荚膜，代谢产物。
９1、有芽胞得厌氧菌：只有梭菌属包括83个种。厌氧菌每克粪中高达1012个,标本绝不能被正常菌污染，应尽量避免接触空气。最理想得标本就是组织,送到实验室后20~30miｎ内处理完不超过2ｈ。应接种固体与液体两种培养基,应使用预还原培养基,液体培养基应煮沸10mｉn以驱氧并立即冷却。每份标本至少接种三个血平板,置于有氧,无氧,５%~10%CO2环境中培养。厌氧手套箱培养法就是迄今最佳厌氧培养仪器之一。
92、厌氧状态得指示剂有:美蓝与刃天青,无氧时白色,有氧时美蓝蓝色,刃天青粉红色。紫外线下出现荧光也就是厌氧菌参考之一,卡那霉素用于梭杆菌与类杆菌得区分,甲硝唑用于厌氧菌与非厌氧菌得区别。气液相色谱已成为鉴定厌氧菌及其分类比较可靠得方法。
93、破伤风杆菌:鼓槌状,早期培养Ｇ＋,4８h后特别就是芽胞形成后G－,得O与H抗原,主要症状为骨骼肌痉挛,不发酵糖类，能液化明胶产H2Ｓ。产生两种外毒素：破伤风溶血素、破伤风痉挛毒素
94、产气荚膜梭菌:G＋,2０~５0℃均能生长,最适为45℃,双层溶血,可分解糖类产酸产气，出现汹涌发酵现象,分5型,主要就是Ａ型,外毒素以A毒素为主，本质就是卵磷脂酶(α毒素),在蛋黄琼脂平板上菌落周围出现乳白色浑浊圈。所致疾病为气性坏疽,有捻发感，青霉素为首选，万古为次选。
95、肉毒梭菌:G+,芽胞胶囊于次极端呈汤匙状或网球拍状，严格厌氧,8型，以A,Ｂ多见,毒素不耐热,1miｎ煮沸即死。
96、无芽胞厌氧菌就是一大类正常菌群,引起感染就是内源性感染。
97、白喉棒状杆菌:为放线菌,G＋,无荚无芽无鞭无毛,奈瑟(Neisser)染色成黄褐色,一端或两端染成蓝色或深蓝色颗粒即异染颗粒,阿培特(Alｂerｔ)染色菌体呈蓝绿色，异染颗粒成蓝黑色。
分离培养:棉拭子取咽喉部、鼻腔、皮肤病变部位，血平板,吕氏血清斜面（生长迅速，乳白色，S 型,形态典型),哥伦比亚血培养基及亚碲酸钾血琼脂（48小时以上,菌落黑色，筛选鉴别)。白喉毒素就是一种毒性强、抗原性强得蛋白质,B-棒状杆菌噬菌体毒素基因(tｏx+)编码得蛋白质,PＣＲ扩增tox+
基因辅助诊断不能确诊。免疫沉淀试验(ＥleＫ平板试验)检测产生白喉外毒素,就是诊断白喉得关键试验。细菌一般不侵入血，但外毒素可入血引起毒血症,不能立即送检时应浸于无菌生理盐水或15%甘油盐水中。出现各种心肌炎,软腭麻痹就是白喉晚期死亡得主要原因。（白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风类毒素得混合疫苗DＰT)
98、百日咳鲍特菌:专性需氧,常用包-姜培养基(含青霉素Ｇ)细小S银灰色不透明珍珠状菌落,在加血培养基上,周围有狨毛状狭窄溶血环,液体培养基中混浊生长。菌落常S-Ｒ相变异,Ⅰ相S型,Ⅱ、Ⅲ相过渡型,Ⅳ相R型。有百日咳毒素,丝状血细胞凝聚素与腺嘌呤环化毒素。细菌不进入血流。临床分为3个期:1、卡她期2、痉咳期３、恢复期。依据菌落性状及凝集试验确诊。抗原有PＴ、FHA,主要用ＥＬISＡ方法。可获持久免疫力
咳碟法:包－姜培养基（含青霉素Ｇ)置10ｃm使飞沫直射于培养基上,3７℃2-3天
鼻咽拭子法:如不能及时接种可放入0、3毫升PH7、2—7、4得１%蛋白胨生理盐水中2小时内检９9、TBE-Tris硼酸缓冲液,长时间电泳选用。MIC-最小抑菌浓度
1０1.决定细菌得形态因素:培养基得成份、ＰH、培养时间、温度。直接观察细菌得超微结构：超薄切片技术、电子显微镜。
１0２、芽胞:在8０℃水中迅速死亡，在100℃水中能耐受２小时以上,在70%乙醇中能存活2０年。高压蒸气灭菌杀死细菌牙芽胞最有效。荚膜得重要功能:抗吞噬。就是构成细菌毒力得因素之一。
卫生毒理学
1.外源化学物在体内得生物转运:吸收、分布、代谢、排泄四阶段。
化学毒物在体内得代谢分为两相:Ⅰ反应---氧化、还原、水解;Ⅱ反应--－与体内源性物质结合亚慢性毒性试验目得:最大无作用剂量、最大耐受剂量估测阈剂量。(选用两种种属及啮齿类、非啮齿类，初断乳动物)
慢性毒性试验目得:最小有作用剂量、阈剂量、最大未观察到有害作用剂量(选用两种种属及啮齿类、非啮齿类,初断乳动物）
危害性评价组成：认定、描述、接触评定、特征分析
毒理学试验项目:第一阶段:急性毒性试验。第二阶段:遗传毒性试验。第三阶段:亚慢性毒性试验。第四阶段：慢性毒性试验与致癌试验
GB 1９４8９—200４《实验室生物安全通用要求》分级:危害等级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。
生物安全防护水平(BSL－１、２、3、4)。
生物安全柜一级:可保护工作人员与环境。生物安全柜二级:分A1、A2、B1、B2可保护工作人员、环境、样品。生物安全柜三级:
2.普通光学显微镜：最高分辨率0、2ｕm,不能观察细菌得亚结构
3.暗视野显微镜:分辨率0、02-0、04um,载玻片厚度1．０mｍ、盖玻片０.１7 mm
４.荧光显微镜:
5.滴定管精度为0、２—0、1ml,微量滴定管精度为0、00５mｌ。微量吸管5—１００0ul。培养皿分：5、7、5、９、1０ｃm
蛋白质、核酸提取及相关设备
一、蛋白质分离纯化--－-实验室常用盐析法（硫酸铵）。
核酸纯化----酚、氯仿抽提
制备细胞外膜蛋白----超声波细胞粉碎机。
大多数限制内切酶使用温度3７℃，保存温度就是-20℃。
二、层析
凝胶过滤法(分子筛层析法)-－-主要用于蛋白或核酸分离。介质:葡聚糖。过滤中先洗脱得就是大分子物质,后小分子物质。原理：纤维素或凝胶介质带电荷不同。
三、检测仪
１、分光光度计及检测物质
２、紫外透射仪:暗室紫外线下瞧DNA条带。
3、测序仪:蛋白测序仪-－-测定氨基酸排列顺序
DNA测序仪---测核苷酸排列顺序。物质就是;质粒、噬菌体、ＰCR产物
4、扩增仪:能做PCR称DNA扩增数
5、酶标仪:
四、快速斑点免疫金渗滤法（滴金免疫法):属于常用得胶体金技术。方法就是---以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂与标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应,全程可于数分钟内完成，阳性在膜上呈红色斑点。基本原理就是间接法或夹心法
免疫胶体金技术用于检测:抗原、半抗原、抗体
ＡＴCC就是指美国典型培养物保藏中心。
MＰS---单核-吞噬细胞系统,又称巨噬细胞系统。
玻片凝集反应---2-３分钟瞧结果；试管凝集反应---18—24小时瞧结果;沉淀反应---72小时瞧结果;补体结合试验（CFＴ)-－－3０分钟瞧结果
过滤式微生物采样器根据过滤材料不同有：薄膜过滤器、玻璃纤维过滤器、凝胶过滤器、谷氨酸碱过滤器。
病毒得分子生物学鉴定:病毒核酸与蛋白质测定。蛋白质使用-－免疫测定技术、电泳技术、质谱技术；核酸使用—探针技术、杂交技术、聚合酶链反应技术
构建基因组文库,初始DNA长度须在90ｋb以上。纯化得ｍＲNA在７0%得乙醇中可保存1年以上。绝大多数Ⅱ类限制酶识别长度为4或６个核苷酸。
为获得条带清晰得DＮＡ电流图谱DNA用量为0、５—1、0ug、
在酶切图谱制作过程中,分离鉴定与纯化DNA片段得标准方法--－聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAＧE)、琼脂糖凝胶电泳。
普通水平电泳制备染色体DNA酶切图谱时,DＮＡ电泳迁移率得对数与凝胶浓度成线性关系,分离＜０、5kb DＮＡ片段所需胶浓度就是１、2%-1、5%,分离＞1０kb DNA片段所需胶浓度就是0、3%-0、７%,在低电压时,线状DＮA片段得迁移率与所加电压成正比,电压增加,琼脂糖凝胶得有效分离范围将缩小。要使＞2kb DNA片段得分辩率达到最大，所加电压不得超过5V/cm。
细菌得培养技术
一、培养基:1、营养物质:蛋白胨、肉浸汁与牛肉膏、糖醇类、血液、动物血清与鸡蛋、无机盐类、生长因子。
二、水分。
三、凝固物:琼脂、明胶、卵蛋白及血清
琼脂：成份为多糖,赋形物。固培养基２—3％,半固培养基0、2—０、5%
明胶:主含蛋白质,24℃以上溶解,2０℃以下凝固
四、抑制剂:五、指示剂:酚红、溴甲酚紫、中性红、甲基红、溴香草酚蓝、中国蓝、酸性复红等酸碱指示剂；美蓝氧化还原指示剂。
一般培养基高压121℃,１、０5㎏30分钟。含糖培养基高压灭菌0、56㎏15分钟。
培养螺旋体常用培养基---Korｔhof,温度2８℃,含有1０%兔血清。
MＰＮ法---稀释培养测数法。适宜测定土壤中微生物中得特定生理群。
活菌计数最准确得方法－--倾注平板计数法。最快得细菌计数方法---显微镜直接计数法。
空斑形成数--－PFＵ
我国最早实验室生物安全卫生行业标准就是:微生物实验室生物安全通用守则。200３年8月1日实行。
我国第一部实验室生物安全国家标准就是：《实验室生物安全通用要求》。200４年1０月1日执行。
WHO制定得生物安全指南:《实验室生物安全手册》2004年１１月出版第3版。
细菌得生化反应试验
糖醇类代谢试验:糖发酵试验、甲基红试验、V-P试验、葡萄糖氧化/发酵试验（Ｏ/F试验)、七叶苷水解试验、B-半乳糖苷渗透酶试验。
糖发酵试验原理:多糖→单糖→丙酮酸→酸性产物（或产酸产气)→PＨ下降→指示剂呈酸性变色。
蛋白质类代谢试验:靛基质试验、硫化氢试验、苯丙氨脱氨试验、尿素酶试验
双糖:葡萄糖、乳糖;三糖:葡萄糖、乳糖、蔗糖;
双糖高层斜面发酵管:葡萄糖／乳糖=1：10
三糖铁与双糖铁区别:蔗糖。糖类发酵就是鉴定细菌最常用得生化反应。需氧芽胞菌除炭疽外均有鞭毛。
TI-Ag得特点: 非胸腺依靠性抗原，不需T细胞辅助即可刺激机体产生抗体。少数Ag属此类。如细菌多糖、聚合鞭毛蛋白等。共同特点:ＴI－Ag刺激机体产生得Aｂ仅就是免疫球蛋白M,不引起回忆应答,不引起细胞免疫。
鉴定肠杆菌科基本条件；发酵葡萄糖、氧化酶阴性、还原硝酸盐。
核酸检验基本技术
转录--－-在生物体内,ＤNＡ指导得RNA合成过程。合成ＲNA时DNA双链要解旋，解旋部位称为启动子。大肠菌得RNA聚合酶有5个亚基,其o亚基有启动子作用。
反转录病毒基因组一般不具感染性。
２.变态反应(超敏反应)-----－就是指机体对某些抗原初次应答后,再次接受相同抗原刺激时,发生得一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主得特异性免疫应答。
在合成DNA时限制性核酸内切酶不就是合成DNA得必要条件。DNＡ多聚酶只能结合在一长段DNA单链得一小段局部双链结构上,才能顺利开始ＤNA合成。DＮA在合成中单核苷酸分子必须顺序以共价链连接在已形成核酸链３’末端得羟基上。在合成发生错误时，DNA多聚酶会切除错误核苷酸,于此处加上正确得核苷酸。与人工合成DNA区别。
大肠杆菌DNＡ损伤修复时填补缺口最重要得酶--－DNＡ聚合酶Ⅰ。复制最主要得DＮＡ聚合酶---DNA聚合酶Ⅲ,该酶得核心聚合酶中，具有３’-－5’外切酶活性得亚基就是e亚基。大肠杆菌DＮＡ聚合酶Ⅰ得Ｋｌenow片段没有5’--３’外切酶活性。逆转录酶得RNＡasｅＨ活性就是一般ＤNＡ聚合酶所不具备得。在体内DNA复制必须有RＮＡ引物。
合成中ｔRNA搬运氨基酸作用、rＲＮA构成核糖体骨架、mRNA直接决定蛋白质结构。
Ⅰ型变态反应:即速发型,又称过敏反应。特点:过敏原进入机体后,诱导B细胞产生ＩｇE抗体。由ＩgE介导,肥大细胞与嗜碱粒细胞等效应细胞以释放生物活性介质得方式参与反应;发生快,消退亦快;
Ⅱ型变态反应:细胞毒型／细胞溶解型,抗体(多属IgG、少数为ＩgＭ、IｇA）首先同细胞本身抗原成分或吸附于膜表面成分相结合,然后通过四种不同得途径杀伤靶细胞
Ⅲ型变态反应:即免疫复合物型,又称血管炎型超敏反应。特点:游离抗原与相应抗体结合形成免疫复合物(IC）,若IC不能被及时清除,即可在局部沉积,通过激活补体,并在血小板、中性粒细胞及其她细胞参与下，引发一系列连锁反应而致组织损伤。
Ⅳ型变态反应:即迟发型(细胞介导型),Ⅳ型就是由特异性致敏效应T细胞释放得LＦ介导得。
分泌型IgA（ＳIgＡ)分布于呼吸道、消化道、泌尿生殖道黏膜表面。就是机体黏膜防御感染得重要因素。
免疫原性含义:剌激机体免疫系统,有诱生抗体与致敏淋巴细胞得能力。产生抗体得细胞就是B细胞,本质就是免疫球蛋白(Ig)。免疫球蛋白(Iｇ)得分类主要依据—重链恒定部份ＣH得结构特点。
T细胞就是:细胞毒性T细胞。浆细胞来源于活化B细胞。特异性Ｂ细胞经过抗原识别、活化、增殖、分化成为浆细胞。
可以保持蛋白质活性得蛋白质沉淀方法就是:硫酸铵、聚乙二醇、免疫沉淀法。
可用于检测致泻大肠埃希菌肠毒素得方法:酶联免疫吸附试验检测LT与ST、双向琼脂扩散试验检测LＴ、乳鼠灌胃试验检测ST、
琼脂糖凝胶电泳缓冲液通常用：1*TAＥ或0、５*TBE,溴化乙锭就是诱变剂。
鉴别宋内志贺菌与其她志贺菌得生化反应就是:鸟氨酸试验。
卡介苗简称为:BCG
钩瑞螺旋体可以引起肺部感染
Verｏ细胞毒素就是O1５７：H7大肠杆菌得最主要致病物质
耐热直接溶血素属于副溶血弧菌得主要致病物质
Ag与Ab结合得部位就是:ＶH+ＶL
Ag决定基就是: 决定Ag特异性最小化学基团
ＨIV造成免疫系统得多种功能发生缺陷得主要原因就是：T4淋巴细胞耗竭
ＥBV除引起人类皮肤与黏膜得疱疹样病变外，还与下列人类鼻咽癌疾病密切相关
核衣壳就是病毒粒子得主要结构,核衣壳就是由衣壳与核酸成分组成得
做补体结合试验前血清加热灭活以破坏它所含有得补体,通常羊血清用58℃温度灭活
我国于1981年开始用地鼠肾细胞疫苗,近几年又开始应用更为先进得狂犬病疫苗,这种疫苗就是:Ｖerｏ细胞狂犬病疫苗
当进行抗球蛋白试验查不完Ａb时,其中一个重要试剂就是第二Ａｂ,在抗球蛋白试验中第二抗体就是--－-双价抗体
在CFT反应中有5种成份:Ag、被检血清、补体、溶血素与SＲＢC,CFT反应中补体得作用就是: 非特异性结合。在CFT反应中为了查Ag，常常降低反应温度,称为冷CFT，冷ＣＦT反应温度
通常就是:4℃
目前已知得可以在临床上造成出血热得病毒如下:
布尼亚病毒科：流行性血热、克里米亚刚果出血热
黄病毒科:登革出血热
丝状病毒科:艾博拉出血热。病毒在胞浆内繁殖,芽生释放。急性期标本接种于Ｖero细胞培养或藤鼠腹腔
与小儿顽固性腹泻有关得就是:肠集聚粘附性大肠埃希氏菌
引起旅游者腹泻得最主要得就是:肠产毒性大肠埃希氏菌
钩体病得主要传染源就是：鼠类动物。发病一周内取血液,第二周以后取尿,有脑膜炎型症状者取脑脊液进行检查。
病毒检验基本技术
1.组织培养用玻璃器皿:硫酸、重铬酸钾液浸泡。
2.人工综合组织培养营养液:氨基酸、糖类、无机盐、维生素、辅助生长因子。MEM、RＰMI １６４０
３.细胞培养液分生长液、维持液，两者区别在血清含量不同。EDTＡ、胰蛋白酶分散作用。
４.细胞病变(CPＥ)、二甲亚砜（DMSO)细胞保护剂、
5.半数致死量(ＬD５0)--导致半数动物死亡得细菌感染量。就是评价化学毒物急性毒性大小最重要得参数。（大小鼠、雌雄各半,初成年,受试后14天内总死亡数)
最小全数致死量(MLD)-－引起全部动物死亡得最小感染剂量。半数感染量(ID５0）－-导致半数组织培养细胞发生感染得细菌数量或毒素剂量。TCID50—半数细胞培养物感染量。
一、致死剂量LD：(1）绝对致死剂量LD1０0 (2)最小致死剂量LD0１（3)最大耐受剂量LD0
二、效应、反应、剂量—效应、剂量—反应、关系曲线
６.超过滤法:用不同孔径得火棉胶滤膜过滤病毒悬液。
7.中与抗体抗病毒机制：改变病毒表面得构型,阻止病毒吸咐、穿入易感细胞进行繁殖。
8.迟发感染得特点:又称慢发病毒感染。潜伏期很长可达数月、数年或数十年之久。一旦症状出现,多为亚急性、进行性，并造成死亡。
包涵体----病毒在增殖过程中使寄主细胞内形成一种蛋白质性质得病变结构,在光学显微镜下可见,多为圆形、卵圆形或不定形。
9．引起脑膜炎得肠道病毒：肠道病毒70型、肠道病毒7１型、柯萨奇Ａ组16型、脊髓灰质炎病毒。
1０、C6／36就是白蚊伊蚊细胞:分离登革热、乙脑病毒。
11、蓄积系数经值：＜1高度、１—３明显、３—5中度、>5轻度。
12、协同作用--－一种物质得存在能促进其她物质效应得作用。
13、病毒病得常规实验室诊断指----病毒得分离与鉴定、形态学检查、免疫学鉴定、分子生物学鉴定。
14、空斑试验-－-用于测定病毒得感染力。
１５、Ｖｅｒsen－---又称ＥDTA
16、病毒得形态学检查方法－－-电子显微镜(EM)、光学显微镜、超速离心法、超过滤法、X射线晶体衍射法。
１7、Alｓｅvｅr液－－-就是一种红细胞保存液,含有抗凝剂柠檬酸钠与细胞需要得养分葡萄糖。p
临床微生物学与检验测试题及答案——细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1.血清学诊断 2.培养基 3.基础培养基 4.选择培养基 5.鉴别培养基 6.菌落 二、填空题 1.实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、、有直接关系。 2.辅助诊断风湿热的抗“O”实验属于。 3.血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的和.第二次抗体效价比第一 次时方有诊断意义。 4.对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有、和。 5.进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于培养基或培养基。 6.细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有、和三大类。 7.属于直接凝集反应的血清学试验有和。 三、单项选择题 1.目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述不正确的是 A.减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B.减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C.减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D.减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA，故适用于免疫缺陷或低下的患者 E.减毒活疫苗一般只需接种一次即能达到免疫效果，而灭活疫苗需接种多次 2.白百破三联疫苗的组成是
A.百日咳类毒素，白喉类毒素，破伤风类毒素 B.百日咳死疫苗，白喉类毒素，破伤风类毒素 C.百日咳死疫苗，白喉死疫苗，破伤风类毒素 D.百日咳活疫苗，白喉活疫苗，破伤风死疫苗 E.百日咳活疫苗，白喉死疫苗，破伤风死疫苗 3.使用时要注意防止Ⅰ型超敏反应的免疫制剂是 A.丙种球蛋白 B.胎盘球蛋白 C.抗毒素 D.白细胞介素 E.干扰素 4.关于胎盘球蛋白的叙述，错误的是 A.由健康产妇的胎盘和婴儿脐带中提取制备 B.一般含IgM C.一般不会引起超敏反应 D.主要用于麻疹，甲型肝炎和脊髓灰质炎等病毒性疾病的紧急预防 E.免疫效果不如高效价的特异性免疫球蛋白 5.伤寒病人发病第一周内，分离病原菌应采取的标本是 A.血液 B.尿液 C.粪便 D.呕吐物 E.脑脊液 6.咽喉假膜标本涂片染色后，镜检出有异染颗粒的棒状杆菌，其临床意义在于诊断 A.结核病 B.军团病 C.白喉
绪论 1.微生物：一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。 2.列文虎克（显微镜，微生物的先驱）巴斯德（微生物学）科赫（细菌学） 3.什么是微生物？习惯上它包括那几大类群？ 答：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。它是一些个体微小结构简单的低等生物。包括①原核类的细菌（真细菌和古细菌）、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体；②真核类的真菌（酵母菌、霉菌和蕈菌）、原生动物和显微藻类；③属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒和朊病毒）。 4.为什么说微生物的“体积小、面积大”是决定其他四个共性的关键？ 答：“体积小、面积大”是最基本的，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余4个共性。 第一章原核生物的形态、构造和功能 1.细菌：是一类细胞极短（直径约0.5微米，长度约0.5-5微米），结构简单，胞壁坚韧，多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。 2.试图示肽聚糖单体的模式构造，并指出G+细菌与G-细菌在肽聚糖成分和结构上的差别？ 答：主要区别为；①四肽尾的第3个氨基酸不是L-lys，而是被一种只有在原核微生物细胞壁上的特殊氨基酸——内消旋二氨基庚二酸（m-DAP）所代替；②没有特殊的肽桥，其前后两个单体间的连接仅通过甲四肽尾的第4个氨基酸（D-Ala）的羧基与乙四肽尾的第3个氨基酸（m-DAP）的氨基直接相连，因而只形成较为疏稀、机械强度较差的肽聚糖网套。 3.试述革兰氏染色的机制。 答：革兰氏染色的机制为：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色
《微生物检验技术》期末考试试题(A 卷) 一、名词解释(每小题3分，共15分) 1、菌落 2、正常菌群 3、消毒 4、噬菌体 5、最小抑菌浓度（MIC ） 二、填空题（每空1分，共25分） 1．细菌的特殊结构 有 、 、 、 。 2.细菌生长繁殖的条件是 、 、 和气体。 3．病原菌的致病作用与 、 及 有密切关系。 4.诊断血清是用 免疫家兔等动物后取其 而制成的。一般置于 保存，使用时应避免 ， 降低效价。
5．K—B法中抑菌圈直径的大小与药物的最低抑菌浓度呈关系，即抑菌圈愈大，MIC值、细菌对药物的敏感程度。 6．、和可作为甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌的鉴别试验。 7．淋病奈瑟菌主要以方式传播，引起。 8.细菌对待测药物的敏感程度可分为、、 三级。 三、选择题(每小题1.5分，共30分)： 1、属于非细胞型微生物的是（） A、真菌 B、细菌 C、放线菌 D、病毒 E、螺旋体 2、革兰染色所用染液的顺序是（） A、稀释复红—碘液—95％乙醇—结晶紫 B、稀释复红—95％乙醇—碘液—结晶紫 C、结晶紫—碘液—95％乙醇—稀释复红 D、结晶紫—95％乙醇—碘液—稀释复红 E、稀释复红—结晶紫—碘液—95％乙醇 3、靛基质试验又称（） A、甲基红试验 B、尿素分解试验 C、硫化氢生成试验 D、吲哚试验 E、糖发酵试验 4、对人体无害的细菌代谢物是（）
A、热原质 B维生素 C、外毒素 D、内毒素 E、侵袭性酶 5、正常人体不存在细菌的部位是（） A、体表 B、口腔 C、大肠 D、尿道口 E、血液 6、实验室对接种针（环）、试管口的灭菌方法是（） A干烤法 B、流通蒸汽法 C、烧灼 D、焚烧 E、煮沸法 7、卡介苗是由何种变异而产生的（） A、形态变异 B、结构变异 C、毒力变异 D、耐药变异 E、酶活性变异 8、病原菌侵入血流并在其中大量繁殖，产生毒性代谢产物，引起严 重的全身症状，称为（） A、毒血症 B、菌血症 C、败血症 D、脓毒血症 E、 病毒血症 9、哪种动物不是微生物学检验中常用的实验动物（） A、小白鼠 B、豚鼠 C、裸鼠 D、家兔 E、马 10、下列哪项不是金黄色葡萄球菌的特点（） A、凝固酶试验阳性 B、产生溶血素 C、分解 甘露醇 D、产生耐热核酸酶 E、胆汁溶菌试验阳性 11、在普通琼脂平板上生长的化脓性细菌是（） A、金黄色葡萄球菌 B、乙型链球菌 C、肺炎
检验技术资格考试考点精要——微生物学检验（中级） 1. 生物学按界门纲目科属种分类，种是最小单位。病毒分类：目、科、亚科、属、种。属名--VRir us 结尾的单词,亚科名--VRir inae结尾的单词,科名--VRir idae结尾的单词。目名—VRir ales。2004年ICTV 公布病毒分为：73个科、11个亚种、289个属。 2. 结核菌可利用甘油为碳源，梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源，流感嗜血杆菌要Ⅴ，Ⅹ因子才能生长。 3. 药物敏感试验：纸碟法、小杯法、凹孔法、试管法。常用单片纸碟法、试管稀释法（以抗菌药物的最高稀释度仍能抑制细菌生长或杀菌管为终点，该管含药浓度为最低抑菌浓度MIC或最低杀菌浓度MBC），两值越低则表示越敏感。MIC与抑菌圈呈负相关，即抑菌环直径越大，MIC越小。 各药敏纸片间距不少于24mm，距平板内缘不小于15mm。 药物敏感实验判定标准：抑菌圈直径（毫米）：20以上极敏、15~20高敏、10~14中敏、10以下低敏。不同的菌株、不同的抗生素纸片需参照NCCLs的标准或者CLSI标准。 多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上为高敏，6—9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。 4.常用的免疫技术：酶免疫技术（EIA）、协同凝集试验、免疫荧光技术（IF）、对流免疫电泳（CIE）、免疫印迹技术。 5.病原菌核酸的检测：核酸杂交、PCR技术、基因芯片技术。 PCR技术—是选择DNA或RNA体外扩增技术，用标本提取DNA为扩增模板，选用一对特异寡核苷酸为引物，PCR一般要经历三十多次循环，经不同温度变性93-94℃（作用1min氢键断裂形成单链DNA）、退火40-60℃（迅速冷却30-60s引物与DNA模板结合，形成局部双链）、延伸70-75℃（在TaqDNA聚合酶作用下，以A、T、G、C四种脱氧核苷酸为原料，从引物5’→3’端延伸，合成与模板互补的DNA链。），扩增产物用溴乙啶染色的凝胶电泳。其具有特异、快速、灵敏、特异性强、操作简便、能够定量。引物是PCR特异性的决定因素，PCR反应中TaqDNA聚合酶、引物加量过多，可引起非靶序列扩增。 变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变： 1）溶液粘度降低。2）溶液旋光性发生改变。3）增色效应。热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为" 退火"，Tm低25℃左右的温度是复性的最佳条件。核酸实验中经常以迅速冷却至4℃以下方式保持DNA的变性(单链)状态。 基因芯片技术（DNA芯片、DNA微阵列）—主要过程：DNA微阵列的制备、样品的制备、靶分子和探针之间的杂交、杂交信号的检测与分析。具有快速、敏感、高通量检测平台。 核酸杂交（基因探针杂交技术）--是指单链RNA和DNA或DNA和DNA或RNA和RNA，根据碱基配对原则，借氢键相连而形成杂交分子的过程。杂交百分率＞70%（≥69%）为高度同源性，同源性在60%以上是一个种，同源性在60%--70%是同一种内不同亚种，同源性在20%--60%同一属内不同菌种，同源性
2018微生物检验技术副高考试回忆 考试内容：细菌都是常见菌，考的比较细，生化与致病要熟悉。病毒只考了乙肝，支、衣、立、厌氧菌、真菌基本没考。总共99道题，单选25题，多选20题，共用题干与案例没数，案例11个选8个做。希望给大家以后复习提供帮助。 1 常用结核快速分子生物学检测方法A PCR B抗酸染色C 培养 2 快速？诊断技术A—PCR B ---PCR C 基因芯片 3 对产酶细菌用 A 哌酮B 噻肟C 头孢吡肟 4 PRSP耐药原因 5 带溶菌酶的噬菌体尾部叫：尾鞘 6 葡萄球菌致病类型 7 腐生葡萄球菌生化多选 8 引起自身免疫性抗体多选：A 化脓链B 肺链C 9 2型变态反应原理，3型变态反应原理 10 肺链与牛链区别多选 11 杆菌肽+，PYR+：化脓链 12 菌落形态48－72针尖样菌落，溶血：：A 非液化莫拉E 卡他莫拉选一 13 专贺样腹泻：EIEC 14 怀疑伤寒，血培养阴性，已用抗生素，再做什么检查A血培养B肥达氏C 骨髓培养 15 志贺菌，血清B凝集，2a 2b A 痢疾B 福氏C鲍氏D宋氏 16 案例：培养粘液型菌落，G－，OX－：肺克 17 案例：生长迁延状细菌：变形 18 产酶监测质控株两例：25922 19 嗜麦牙生化多选 20希望微生物检测自动化有什么优点：A B C D E快速，检测与药敏能够在2－4小时内出结果 21 共用题干：军团1分型依据2引起疾病 22 感染菌株，卫星现象：流感嗜血 23 案例牛养殖户，感染：布鲁检查方法 24 气，邻单胞菌鉴别：0/129 25 被猫狗抓伤感染：多杀巴斯德 26 案例米泔样大便：1感染菌：霍乱2分群3常见型：小川AB 稻叶AC 彦岛ABC 27 案例拔芽后一周感染 28 案例肺部感染，脓痰， 29 HB80，尿RBC+，下列不要做的检查多选：A血沉B中段尿常规，细菌培养 C 30 由不是活细胞培养的最小生物 31 念珠菌引起的表浅感染 32 共用题型：乙肝表面抗体阳性可以免疫以下哪种肝炎 乙肝感染主要途径 33 案例知道哪些部位有哪些细菌寄居 34 案例尿路感染：大肠，使用抗生素两天后正常，还要如何处理：选了用药2周。
1.微生物microorganism：是存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的微小生物。 2.微生物学microbiology：是生物学的一个分支，是研究微生物的类型、分部、形态结构、生命活动及其规律、遗传、进化，以及人类、动物、植物等相互关系的一门科学。 3.医学微生物学medical microbiology：主要是研究与医学和疾病有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性，以及特异性诊断和防治措施的学科，目的是控制和消灭微生物引起的感染性疾病，以保证和提高人类的健康水平。 4.细菌L型bacterial L form：细菌在体内外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚糖直接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。 5.?原生质体protoplast：细菌变成为L型后，细胞壁完全缺失，细菌仅被一层细胞膜包裹。 6.原生质球spheroplast：源于革兰阴性菌的L型。 7.中介体mesosome：细菌细胞膜可内陷形成一种特有的结构，是部分胞膜折叠形成的泡囊状、管状或薄层状结构，在电子显微镜下方能看到。 8.?质粒plasmid：是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，是小的双股闭合环状DNA分子，可独立于染色体存在并复制，也可整合到染色体上。 9.芽孢：很多革兰阳性菌在一定条件下可在菌体内部形成具有多层膜包裹的原型或卵圆形的小体，是细菌代谢处于相对静止状态、维持生存、具有特殊抵抗力的休眠结构。 10.热原质pyrogen：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热的的物质。 11.?噬菌体bacteriophage or phage：是感染细菌、真菌、放线菌和螺旋体等微生物的病毒，只能在活的宿主菌内复制，噬菌体的DNA不仅随着它的感染可在宿主菌之间及宿主菌与噬菌体之间传播，而且还能赋予宿主菌某些生物学性状。 12.?毒性噬菌体virulent phase：为感染宿主后，能在宿主菌细胞内独立复制增殖，产生许多子代噬菌体并最终裂解细菌的噬菌体。 13.溶源性细菌lysogenic：染色体上有前噬菌体的细菌。 14.溶原性噬菌体lysogenic phase：为感染宿主菌后，将其基因组整合到宿主菌染色体上或像质粒存在于细胞之中，随细菌的DNA复制而复制，并随细菌的分裂而传代的噬菌体。15.转座子transposon，Tn：是一类在细菌的染色体、质粒或噬菌体之间自行移动的遗传成分，是细菌基因组中一段特异的具有转位特性的独立DNA序列。 16.突变mutation：是细菌遗传物质的结构发生突然而稳定的改变，导致的变异可传于后代。 17.?转化transformation：是供体菌游离的DNA片段直接进入受体菌，使受体菌获得新的性状。 18.?接合conjugation：是细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（质粒）从供体菌转移给受体菌。 19.?转导transduction：是以温和噬菌体为载体，将供体菌的遗传物质转移到受体菌中，使后者获得新的性状。 20.?溶原性转换lysogenic conversion：是侵入细菌的噬菌体在溶原期可以前噬菌体形式在
第一章：绪论微生物的概念：它是一大群形体微小、结构简单、一般肉眼看不见或看不清楚的微小低等生物的总称。微生物的特点：1、分布广泛。2、种类繁多，数量大。3、繁殖速度快，代谢能力强。4.易培养、易变异。 微生物的主要类群:1原核细胞型微生物。2、真核细胞型微生物。3、非细胞型微生物。 第二章：微生物发展历程巴斯德和科赫对微生物学发展的奠基作用：巴斯德：近代微生物学的奠基人。1、彻底否定了“自然发生说”，建立疾病病源学说。2、提出了以微生物带些活动为基础的发酵本质新理论，即每一种发酵作用都是由一种微生物引起的。3、发明了“巴氏消毒法”(在60℃~65℃作短时间加热处理，杀死有害微生物)，解决了家蚕软化问题。4、发现引起传染病的微生物在特殊的培养之下可以减轻毒力，制成防病的疫苗。科赫：细菌学奠基人。1、创立微生物学基本操作技术。2、首创显微摄影。3、发现和证实了结核病等传染病的病原体。 第三章：原核微生物细菌大小相差大，常用微米(μm)度量。细菌有杆状、球状和螺旋状三种基本形态。细菌的细胞结构：一般结构指共有的结构、如细胞壁细胞膜细胞质和核区等。特殊结构指某一些细菌才有的结构、如芽孢鞭毛荚膜菌毛和性菌毛等。细胞壁是位于细胞表面最外层的坚韧，略具弹性的结构，主要由肽聚糖等成分组成。革兰氏染色：草酸铵结晶紫初染，碘液媒染，95%乙醇脱色，沙黄等红色染料复染。凡是不能被乙醇脱色，呈蓝紫色的细菌称为革兰氏阳性菌（G+）,凡是经乙醇脱色，呈复染剂颜色称革兰氏阴性菌（G—）。共同成分：——肽聚糖。细胞膜的功能：①控制细胞内外物质运输②维持细胞内正常渗透压屏障③是合成细胞壁各种组分的场所④是进行氧化磷酸化和光合磷酸化的产能基地⑤鞭毛的着生点，并供能。质粒：除细菌染色体DNA 外，在细胞质中核区以外还存在着一种能自由复制的遗传成分。通常是由一共价闭合环状DNA分子组成。芽孢：某些细菌（多为杆菌）在生长后期或一定条件下，细胞质包裹细胞核经高度浓缩脱水形成的一种抗逆性很强的球形椭圆形圆柱形的休眠体。细菌的繁殖：最简单的分裂生殖，即不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接横裂为两个子体的方式。细菌菌落共同特性：湿润、比较光滑、比较透明、比较黏稠、容易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央颜色一致等。放线菌：多核、丝状生成的革兰氏细菌。蓝细菌：形态差异大，有球状、杆状、丝状。固氮作用：蓝细菌的营养最简单，不需要维生素，以硝酸盐或者氨作为氮源，普遍能进行固氮作用。 第四章：真核微生物酵母菌细胞结构：细胞壁：三层、化学成分(葡萄糖30%~34%、甘露聚糖30%、脂类8.5%~13.5%、蛋白质6%~8%等。酵母菌的繁殖：只进行无性繁殖的酵母菌称为假酵母，具有有性繁殖的称为真酵母。无性繁殖：芽殖—芽裂—裂殖。霉菌:是一些丝状真菌（大型真菌除外）的统称。霉菌的形态结构：霉菌菌体均有分支或者不分支的菌丝构成。霉菌的菌丝有两类：无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。霉菌的繁殖：1：无性孢子繁殖：⑴厚垣孢子⑵节孢子⑶分生孢子⑷孢囊孢子。2有性孢子繁殖：⑴卵孢子⑵接合孢子⑶子囊孢子。 第五章：病毒病毒与其他生物的区别：形体极其微小、化学组成简单，主要有核酸和蛋白质、遗传物质为核酸、无细胞结构、没有个体生长和二分裂现象、几乎可以感染所有细胞。烈性噬菌体：由一步生长曲线计算噬菌体裂解量=平稳期平均噬菌斑数/潜伏期平均噬菌斑数。温和噬菌体与溶源性：溶源细菌的特点①可稳定遗传②可自发裂解③溶源转变④具有免疫性。亚病毒：①类病毒②拟病毒③朊病毒 第六章：微生物的营养和培养基微生物获取营养的方式⑴单纯扩散⑵促进扩散⑶主动运输⑷基团转位。培养基的选用和设计原则：原则:目的明确,营养协调,经济节约物理化学条件适宜。步骤:称量,熔化,调PH,过滤,分装,加塞,包扎,灭菌,冷却,无菌检查。培养基种类: 一,按成分的不同分：天然培养基,合成培养基,半合成培养基。二,按培养基的物理状态分：固体培养基,液体培养基,半固体培养基。三,按培养基用途：基础培养基,选择培养基，加富培养基,鉴别培养基。天然培养基（牛肉膏蛋白胨）牛肉膏5.0g 蛋白胨10.0g NaCl 5.0g H2O1000ml pH 7.2~7.4。 第七章：微生物的代谢生物氧化的过程：物质在生物体内经过一系列连续的氧化还原反应，逐步分解并释放能量的过程。生物氧化的类型：有氧呼吸、无氧呼吸和发酵。微生物的代谢：生物体内葡萄糖被降解成丙酮酸的途径：EMP（糖酵解途径）HMP（磷酸戊糖途径）ED（2-酮-3-脱氧-6-磷酸-葡萄糖酸（KDPG）裂解途径） 第八章：微生物的生长细菌生长繁殖曲线：1.延迟期、2.对数生长期、3.稳定期、4.衰亡期。 第九章：微生物控制与菌种保藏 1.灭菌：指杀死或清除杂菌和生产菌、病原菌和非病原菌在内的所有微生物方法，其结果是无菌2.消毒：仅杀死物体表面或内部对生物体有害的病原菌，而对被消毒对象无害的措施 3.防腐或抑菌：能够防止或抑制微生物生长，但不能杀死微生物群体的方法。常用的消毒方法：1.煮沸消毒法。2.巴斯德消毒法。3.利用消毒剂处理。常用灭菌方法：1.加热灭菌。2.过滤灭菌。3.辐射灭菌。菌种保存和原理方法：1.斜面低温保藏法。2.液体石蜡保藏法。3.蒸馏水保藏法。4.载体保藏法。5.寄主保藏法。6.冷冻干燥保藏法。液氮超低温保藏法。 第十章：微生物遗传与变异所谓遗传，是指亲代生物将自身的一整套遗传信息传递给子代从而使亲代生物特性从子代中得以延续。1. 遗传型：指某一生物个体所携带的遗传信息总和。2.表型：指某一生物的一切外部特性和内部特性的总和。3.遗传性变异：指生物体的基因结构发生改变，如基因突变或基因转移与重组等。4.表型改变：又称饰变，指生物体受环境因素的影响产生的性状改变现象，但其基因结构不改变。 十二章：微生物的生态微生物生态学是研究微生物及其生存环境间相互作用规律的科学。微生物与其他生物的相互关系：互生、共生、拮抗、寄生。微生物在碳素循环中的作用：固氮作用、氨化作用、硝化作用、反硝化作用。 第一章：绪论微生物的概念：它是一大群形体微小、结构简单、一般肉眼看不见或看不清楚的微小低等生物的总称。微生物的特点：1、分布广泛。2、种类繁多，数量大。3、繁殖速度快，代谢能力强。4.易培养、易变异。 微生物的主要类群:1原核细胞型微生物。2、真核细胞型微生物。3、非细胞型微生物。 第二章：微生物发展历程巴斯德和科赫对微生物学发展的奠基作用：巴斯德：近代微生物学的奠基人。1、彻底否定了“自然发生说”，建立疾病病源学说。2、提出了以微生物带些活动为基础的发酵本质新理论，即每一种发酵作用都是由一种微生物引起的。3、发明了“巴氏消毒法”(在60℃~65℃作短时间加热处理，杀死有害微生物)，解决了家蚕软化问题。4、发现引起传染病的微生物在特殊的培养之下可以减轻毒力，制成防病的疫苗。科赫：细菌学奠基人。1、创立微生物学基本操作技术。2、首创显微摄影。3、发现和证实了结核病等传染病的病原体。 第三章：原核微生物细菌大小相差大，常用微米(μm)度量。细菌有杆状、球状和螺旋状三种基本形态。细菌的细胞结构：一般结构指共有的结构、如细胞壁细胞膜细胞质和核区等。特殊结构指某一些细菌才有的结构、如芽孢鞭毛荚膜菌毛和性菌毛等。细胞壁是位于细胞表面最外层的坚韧，略具弹性的结构，主要由肽聚糖等成分组成。革兰氏染色：草酸铵结晶紫初染，碘液媒染，95%乙醇脱色，沙黄等红色染料复染。凡是不能被乙醇脱色，呈蓝紫色的细菌称为革兰氏阳性菌（G+）,凡是经乙醇脱色，呈复染剂颜色称革兰氏阴性菌（G—）。共同成分：——肽聚糖。细胞膜的功能：①控制细胞内外物质运输②维持细胞内正常渗透压屏障③是合成细胞壁各种组分的场所④是进行氧化磷酸化和光合磷酸化的产能基地⑤鞭毛的着生点，并供能。质粒：除细菌染色体DNA 外，在细胞质中核区以外还存在着一种能自由复制的遗传成分。通常是由一共价闭合环状DNA分子组成。芽孢：某些细菌（多为杆菌）在生长后期或一定条件下，细胞质包裹细胞核经高度浓缩脱水形成的一种抗逆性很强的球形椭圆形圆柱形的休眠体。细菌的繁殖：最简单的分裂生殖，即不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接横裂为两个子体的方式。细菌菌落共同特性：湿润、比较光滑、比较透明、比较黏稠、容易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央颜色一致等。放线菌：多核、丝状生成的革兰氏细菌。蓝细菌：形态差异大，有球状、杆状、丝状。固氮作用：蓝细菌的营养最简单，不需要维生素，以硝酸盐或者氨作为氮源，普遍能进行固氮作用。 第四章：真核微生物酵母菌细胞结构：细胞壁：三层、化学成分(葡萄糖30%~34%、甘露聚糖30%、脂类8.5%~13.5%、蛋白质6%~8%等。酵母菌的繁殖：只进行无性繁殖的酵母菌称为假酵母，具有有性繁殖的称为真酵母。无性繁殖：芽殖—芽裂—裂殖。霉菌:是一些丝状真菌（大型真菌除外）的统称。霉菌的形态结构：霉菌菌体均有分支或者不分支的菌丝构成。霉菌的菌丝有两类：无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。霉菌的繁殖：1：无性孢子繁殖：⑴厚垣孢子⑵节孢子⑶分生孢子⑷孢囊孢子。2有性孢子繁殖：⑴卵孢子⑵接合孢子⑶子囊孢子。 第五章：病毒病毒与其他生物的区别：形体极其微小、化学组成简单，主要有核酸和蛋白质、遗传物质为核酸、无细胞结构、没有个体生长和二分裂现象、几乎可以感染所有细胞。烈性噬菌体：由一步生长曲线计算噬菌体裂解量=平稳期平均噬菌斑数/潜伏期平均噬菌斑数。温和噬菌体与溶源性：溶源细菌的特点①可稳定遗传②可自发裂解③溶源转变④具有免疫性。亚病毒：①类病毒②拟病毒③朊病毒 第六章：微生物的营养和培养基微生物获取营养的方式⑴单纯扩散⑵促进扩散⑶主动运输⑷基团转位。培养基的选用和设计原则：原则:目的明确,营养协调,经济节约物理化学条件适宜。步骤:称量,熔化,调PH,过滤,分装,加塞,包扎,灭菌,冷却,无菌检查。培养基种类: 一,按成分的不同分：天然培养基,合成培养基,半合成培养基。二,按培养基的物理状态分：固体培养基,液体培养基,半固体培养基。三,按培养基用途：基础培养基,选择培养基，加富培养基,鉴别培养基。天然培养基（牛肉膏蛋白胨）牛肉膏5.0g 蛋白胨10.0g NaCl 5.0g H2O1000ml pH 7.2~7.4。 第七章：微生物的代谢生物氧化的过程：物质在生物体内经过一系列连续的氧化还原反应，逐步分解并释放能量的过程。生物氧化的类型：有氧呼吸、无氧呼吸和发酵。微生物的代谢：生物体内葡萄糖被降解成丙酮酸的途径：EMP（糖酵解途径）HMP（磷酸戊糖途径）ED（2-酮-3-脱氧-6-磷酸-葡萄糖酸（KDPG）裂解途径） 第八章：微生物的生长细菌生长繁殖曲线：1.延迟期、2.对数生长期、3.稳定期、4.衰亡期。 第九章：微生物控制与菌种保藏 1.灭菌：指杀死或清除杂菌和生产菌、病原菌和非病原菌在内的所有微生物方法，其结果是无菌2.消毒：仅杀死物体表面或内部对生物体有害的病原菌，而对被消毒对象无害的措施 3.防腐或抑菌：能够防止或抑制微生物生长，但不能杀死微生物群体的方法。常用的消毒方法：1.煮沸消毒法。2.巴斯德消毒法。3.利用消毒剂处理。常用灭菌方法：1.加热灭菌。2.过滤灭菌。3.辐射灭菌。菌种保存和原理方法：1.斜面低温保藏法。2.液体石蜡保藏法。3.蒸馏水保藏法。4.载体保藏法。5.寄主保藏法。6.冷冻干燥保藏法。液氮超低温保藏法。 第十章：微生物遗传与变异所谓遗传，是指亲代生物将自身的一整套遗传信息传递给子代从而使亲代生物特性从子代中得以延续。1. 遗传型：指某一生物个体所携带的遗传信息总和。2.表型：指某一生物的一切外部特性和内部特性的总和。3.遗传性变异：指生物体的基因结构发生改变，如基因突变或基因转移与重组等。4.表型改变：又称饰变，指生物体受环境因素的影响产生的性状改变现象，但其基因结构不改变。 十二章：微生物的生态微生物生态学是研究微生物及其生存环境间相互作用规律的科学。微生物与其他生物的相互关系：互生、共生、拮抗、寄生。微生物在碳素循环中的作用：固氮作用、氨化作用、硝化作用、反硝化作用。
临床微生物学检验技术试题及答案A1题型 1、人类ABO血型抗原包括 A、A抗原 B、B抗原 C、O抗原 D、AB抗原 E、A抗原和B抗原 答案：E 2、ABO血型物质在人体中可引起哪几种Ab产生 A、抗B抗体 B、抗AB抗体 C、抗A抗体 D、抗O抗体 E、抗A和抗B抗体 答案：E 3、免疫耐受就是 A、非特异性无反应性 B、特异性无反应性 C、机体无反应性 D、免疫抑制性 E、对任何抗原都不反应 答案：B 4、迟发型皮肤过敏反应与下列哪种物质有关 A、IgE B、IgA C、活化B细胞 D、活化T细胞 E、活化NK细胞
答案：D 5、佐剂作用是 A、将Ag送入机体各部位 B、将Ag固定在局部 C、增强Ag免疫原性 D、赋予Ag免疫原性 E、增强机体对Ag的免疫应答 答案：E 6、下列哪种物质既有非特异性免疫也参与特异性免疫反应 A、IgG B、干扰素 C、IgA D、前列腺素 E、补体 答案：E 7、TDH 细胞是 A、产生Ab细胞 B、天然杀伤细胞 C、细胞毒细胞 D、迟发变态反应T细胞 E、依Ab杀伤T细胞 答案：D 8、关于霍乱弧菌是否侵入上皮细胞，下列说法正确的是 A、不侵入 B、侵入 C、在特定条件下侵入 D、具有侵袭基因的霍乱弧菌侵入 E、侵入后局限于上皮细胞内 答案：A 9、葡萄球菌能产生多种溶血素，其中最主要的是
A、α、β溶血素 B、α、γ溶血素 C、β、γ溶血素 D、δ、ε溶血素 E、α、γ溶血素 答案：A 10、与其他肺部感染病原菌相比较，铜绿假单胞菌的毒力特点是 A、产生外毒素 B、具有内毒素 C、产生溶血素 D、产生绿脓素 E、具有菌毛 答案：D 11、有荚膜的流感嗜血杆菌含有荚膜多糖抗原称作： A、V抗原 B、M抗原 C、A抗原 D、X抗原 E、S抗原 答案：B 12、下列关于铜绿假单胞菌叙述中，正确的是 A、革兰氏阳性球菌 B、革兰氏阳性杆菌 C、无芽孢 D、具有荚膜 E、无鞭毛 答案：C 13、下列何种微生物具有荚膜结构 A、军团菌 B、支原体
(完整word版)微生物学期末考试试题 亲爱的读者： 本文内容由我和我的同事精心收集整理后编辑发布到文库，发布之前我们对文中内容进行详细的校对，但难免会有错误的地方，如果有错误的地方请您评论区留言，我们予以纠正，如果本文档对您有帮助，请您下载收藏以便随时调用。下面是本文详细内容。 最后最您生活愉快 ~O(∩_∩)O ~ 试题A总22页第1页
微生物学教程试卷A 一、名词解释（每小题4分，共5小题20分） 1.无菌技术在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染，自身也不污染操作环境的技术称为无菌技术。 2.菌落固体培养基中，单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团是菌落 3.平板是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式，是冷却凝固后固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面称作平板。 4.发酵发酵是指在无氧条件下，底物脱氢后产生的还原力[H]不经过呼吸链传递而直接交给某一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。 5.培养基人工配制的、适合微生物生长、繁殖和产生代谢产物用的混合营养基质。 二、填空题（每空0.5分，共6小题12分） 旋形 试题A总22页第2页
4.根据营养物质在机体中生理功能的不同，可以将它们分 无机盐，生长因子，水 三、选择题（每小题1分，共10小题10分） 1. 产生假根是（）的形态特征。 A.根霉 B.酵母菌 C.青霉 D.曲 霉 2.革兰氏阳性菌细胞壁特有成分是（）。 A.蛋白质 B.肽聚糖 C.脂多糖 D.磷壁酸 3.微生物从糖酵解途径获得（）ATP分子。 总22页第3页
1-专业知识 1.血钾的参考值是：3.5~5.5mmol/L 2.红细胞绝对增加的疾病：真性红细胞增多病 3.以肾小球损害为主的疾病是：急性肾小球肾炎 4.乳糜尿多见于：丝虫病 5.下列选项中，CK-MB所占的比例最多的是：心肌 6.肝癌的诊断标志物组合最有意义的是：AFP AFU 7.具有收缩子宫，促进集合管对水重吸收作用的是：丙酮 8.鉴别发酵军与非发酵菌的关键性试验为：葡萄糖氧化-发酵试验 9.免疫增殖病最新分类方法依据为：增殖细胞形态 10.尿HCG检查不能协助诊断：乳腺癌 11.临床上需要进行血药浓度监测的是：青霉素 12.漏出液总蛋白与血清总蛋白的比值一般小于0.5. 13.免疫放射分析的英文缩写是：IRMA 14.下列不是检验免疫学检测对象的是：体液中各种酶活性 15.从病原微生物侵入开始出现临床症状为止的时期称为：潜伏期 16.关于辣根过氧化物酶（HRP）叙述正确的是:由主酶（酶蛋白）和辅基（亚铁血红素）结合而成的一种卟啉蛋白质 17.肝脏功能受损后下列何项血清酶学指标下降：PCHE 假性胆碱脂酶 18.用于糖尿病肾病的早期诊断和监测的首选项目：尿微蛋白排泄率 19.血糖低于多少为低血糖：<2.8mmol/L 20.除了胰腺炎外：最易引起血AMY升高的疾病是：腮腺炎 21.属于细菌产生的侵袭性酶是：透明质酸酶 22.嗜碱性粒细胞计数升高常见于：慢性粒细胞白血病 23.筛查新生儿原发性甲状腺机能下降的指标：TSH 24.红细胞病理性升高见于：冷水刺激 25.关于人工主动免疫的叙述，正确的是：用减毒活疫（菌）苗，死疫（菌）苗等接种易感人群 26.不属于红细胞异常内容物的是：Auer小体 27.精密度无法直接测定，经常以不精密度表示量为：标准差 28.具有运载VA作用的是：视黄醇结合蛋白 29.室内质控图中控制限为：+-2S，表示95.45%的质控结果在此范围内 30.免疫组织化学染色，为最大限度保存抗原的免疫活性，不宜使用的固定剂是：含重金属的固定剂 31.关于中性粒细胞生理性变化的描述，不正确的是：婴儿期中性粒细胞为主（是淋巴） 32.尿中可出现本周蛋白的疾病是：巨球蛋白血症 33.慢性淋巴细胞白血病的特点不包括：多见于老年人 34.传播莱姆病的主要媒介：硬蜱 35.A群链球菌感染首选哪种抗生素：青霉素 36.HLA-I类分子存在于：绝大数有核细胞和血小板表面 37.免疫缺陷病特点，不正确的是：原发性免疫缺陷病可针对病因治疗，效果好！ 38.能引起机体产生抗磷脂抗体的靶抗原是血浆中：磷脂结合蛋白 39.AML-M2常见染色体畸变是t（8，21） 40.测量结果中系统误差与随机误差综合表示测量结果与真值的一直程度：准确度
临床微生物学与检验测试题及答案一一细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1. 血清学诊断 o 拉圭苴 2. 培养基 3. 基础培养基 4. 选择培养基 5. 鉴别培养基 6. 菌落 二、填空题 1. 实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、____________________ 、____________________ 有直接关系。 2. 辅助诊断风湿热的抗“ O'实验属于_____________________ 。 3. 血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的____________________ 和 __________________ .第二次抗体效价比第一 次____________________ 时方有诊断意义。 4. 对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有____________________ 、 ___________________ 和___________________ 。 5. 进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于____________________ 培养基或 _____________________ 培养基。 6. 细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有____________________ 、 _____________________ 和______________________ 三大类。 7. 属于直接凝集反应的血清学试验有 _____________________ 和______________________ 三、单项选择题 1. 目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述 不正确的是 A. 减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B. 减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C. 减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D. 减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA ,故适用于免疫缺陷或低下的患者
微生物学 绪论 1、微生物（名解）：是存在于自然界的一大群体型微小，结构简单肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍，数千倍，甚至数万倍才能观察道德微小生物。 2、巴斯德创用加温处理法即巴氏消毒法。郭霍创用琼脂固体培养基并提出郭霍法则。 3、细菌的测量一般以微米作为单位。按其外形主要有球菌、杆菌、螺旋菌。 4、G﹢菌的肽聚糖仅由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥三部分组成。 ﹢- 6、细菌的特殊结构包括：荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢。 7、影响细菌生长的环境因素 答：1.营养物质充足的营养物质可以为细菌的新城代谢及生长繁殖提供必要的原料和充足的能量。2.氢离子浓度每个细菌都有一个可生长的PH范围，以及最适宜的PH。3.温度各种细菌对温度的要求不一。藉此分为嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌。病原菌适应人体环境称为嗜温菌。4.气体根据对氧分子需要与否可分为：专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌。5.渗透压一般培养基的盐浓度和渗透压对大多数细菌是安全的。少数细菌如嗜盐菌需要在高浓度的NACI环境中才能生长良好。 8.生长曲线：以培养时间为横坐标，培养物中活菌数的对数为纵坐标，可以绘制出一条生长曲线。 9.根据生长曲线，细菌的生长繁殖分为四个期：迟缓期分裂迟缓，繁殖极少。一般为1-4小时。对数期生长迅速，活菌数以恒定的几何数增长，生长曲线图上细菌数的对数呈直线上升。研究细菌的生物学性状（形态染色、生化反应，药物敏感试验等）应该选用该期细菌。一般细菌对数期在培养后的8-18小时。稳定期依稀细菌的芽孢，外毒素，和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。衰亡期稳定期后细菌繁殖越来越慢，死亡数越来越多，并超过活菌数。 10.细菌的生化反应用于鉴别细菌。吲哚（I）甲基红（M）VP(V) 枸橼酸盐利用（C）四种试验常用于鉴定肠道杆菌，合称IMVIC实验。 11.细菌合成代谢产物及其医学意义：1.热原质是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质，产生热原质的细菌大多是G﹢热原质即其细胞壁的脂多糖。2.毒素与侵袭性酶。细菌在生长繁殖过程中释放外毒素，菌体死亡游离出内毒素。某些细菌能产生侵袭性酶，能损伤机体组织。3.色素细菌的色素有两类水溶性和脂溶性。4.抗生素某些微生物代谢过程中能产生一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质就叫抗生素。5.细菌素某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质称细菌素。6.维生素某些细菌能够合成某些维生素。例如：大肠埃希菌合成B族维生素和K族维生素。 12.灭菌杀灭物体上所有微生物的方法，包括细菌，芽孢，病毒，霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。 13.消毒：杀死物体上或者环境中的病原微生物、并不一定能杀死细菌芽孢或非病原微生物的方法。 14.高压蒸汽灭菌法：在103.4KPA蒸汽压下，温度达到121.3℃，维持15-20分钟，可杀灭包括细菌芽孢在内的所有微生物。 15.滤菌器：滤过除菌法是用物理的方法阻留的方法除去液体或空气中的细菌，真菌，以达到无菌的目的，但不能除去病毒和支原体。液体除菌所有的器具是滤菌器，滤过法主要用于一些不耐高温的血清，毒素，抗生素的除菌。 16.乙醇或异丙醇可迅速杀死细菌繁殖体，结核分枝杆菌等一般用于皮肤的消毒和侵泡体温计。 17.白喉毒素的产生机制：是因∑-棒状杆菌噬菌体感染白喉棒状杆菌后，由于噬菌体DNA携带编码白喉毒素的基因，使无毒的白喉棒状杆菌获得了产生毒素的能力。 18.正常菌群：正常人的体表和同外界相同的口腔，鼻咽腔，肠道，泌尿生殖道等腔道粘膜都寄居者不同种类和数量的微生物。当人体免疫力正常时，这些微生物对宿主无害，有些对人还有利，是为正常微生物群，统称正常菌群。 19.正常菌群对宿主的生理学作用：1.生物拮抗。2.营养作用。3.免疫作用。4.抗衰老作用。
微生物检验职称考试基础知识模拟试题(一) A1题型 1、脊髓灰质炎病毒主要经过下列哪一个途径传播 A、呼吸道途径 B、血液途径 C、破损皮肤 D、粪-口途径 E、性传播 正确答案D 2、脊髓灰质炎病毒主要侵犯下列哪一个部位 A、脊髓前角运动神经原 B、脊髓上部 C、脊髓下部 D、大脑 E、小脑 正确答案A 3、医院获得性肺炎中，以下列何种微生物引起的肺炎多见 A、流感嗜血杆菌 B、铜绿假单胞菌 C、肺炎链球菌 D、军团菌 E、肺炎支原体 正确答案B 4、伯氏疏螺旋体的主要传播媒介是 A、蜱 B、蚊 C、虱 D、鼠 E、猪 正确答案A 5、回归热螺旋体的主要传播媒介是 A、蜱 B、蚊 C、虱 D、鼠 E、猪 正确答案C 6、杜通氏螺旋体的主要传播媒介是 A、蜱 B、蚊 C、虱 D、鼠
E、猪 正确答案A 7、志贺菌属中，下列哪一项不正确 A、在普通琼脂平板上生长形成中等大小、半透明的光滑型菌落 B、K抗原为型特异型抗原 C、O抗原为群特异性抗原 D、分解葡萄糖，产酸不产气 E、分解乳糖，产酸产气 正确答案E 8、下列细菌中，不属于肠杆菌科 A、伤寒沙门氏菌 B、空肠弯曲菌 C、奇异变形杆菌 D、痢疾志贺氏菌 E、枸橼酸杆菌 正确答案B 9、宋氏志贺氏菌有两个变异相，急性患者分离的菌株一般是 A、Ⅰ相 B、Ⅱ相 C、Ⅰ相或Ⅱ相 D、Ⅰ相和Ⅱ相 E、以上都不对 正确答案A 10、有关细菌培养基的描述，哪项是不正确的 A、按物理状态可分为液体、固体和半固体三类 B、SS培养基属于鉴别培养基 C、血琼脂平板属于营养培养基 D、蛋白胨水为常用的基础培养基 E、庖肉培养基属于厌氧培养基 正确答案B 11、肠道杆菌中，重要的荚膜或包膜抗原是 A、O抗原 B、H抗原 C、伤寒的Vi抗原 D、以上都是 E、以上都不是 正确答案C 12、新从病人分离的肠道杆菌菌落是 A、R型 B、S型 C、R或S型 D、R和S型 E、以上都不对 正确答案B
江苏省卫生高级专业技术资格专业实践能力考核-微生物检验技术(技)应试总结 考了两年成绩分别是57和58，换专业了。 网上买的题根本没用 2013年副高考试总结（大方向） 《预防医学微生物学及检验技术》附录中有常用培养基 流行病学看什么书？ 流行病学考了一些不是非常难的题，能回忆出来5题，多选占3题。流行病学定义，免疫接种的流行病学效果评价指标，灾区信息来源，不良习惯，二级预防。还有病死率是否考过不能确定了。 流行病学是预防医学的带头学科，所以根据大纲，只看流行病学就可以了。流行病学人卫版的7版目前看还可以。 统计学 回忆出来两题。参考范围，抽样（离散，样本采样与整体） 免疫学 关于B细胞的说法正确的是 微生物学实验室管理 安全分级，PCR实验室空间划分 真菌学一点也没考 2013副高考试试题回忆 单选题 1.第一题是血培养正确的是 做厌氧培养，同时做需氧和厌氧，用***肉汤和***肉汤做需氧培养 2.流行病学的（研究对象？） 疾病，病人，人群，选了一个较长的选项，记不清内容了 3.统计学的参考范围是几个SD，选了2SD 4.霍乱的强选择培养基：4号琼脂 5.哪个型的大肠杆菌可志贺毒素，溶血性**，选了EHTC 6.B细胞的说法：负责细胞免疫，PWM刺激等 7.免疫接种的流行病学效果评价指标，抗体产生？疾病发生率? 多选题 1.灾区还是疫区信息来源 常设机构、灾区救助者、媒体、空中 2.能致泻的是 一堆E*TC，都选了。 3.衣原体与病毒不同点 二分裂，磷壁酸，严格细胞内寄生 4.医院污水不合格判定指标
粪大肠杆菌数？、大肠杆菌群数，大肠杆菌群值，蛔虫卵，余氯 5.关于BSL分级哪项正确 不感染人的用1级，埃博拉可不可以用3级，***需要三级以上，沙门不能用二级 6.志贺菌的致病因素有哪些 鞭毛，膜蛋白，侵袭力，分泌志贺毒素 7.亚病毒包括 DNA病毒，RNA病毒，类病毒，朊病毒，选了类病毒和朊病毒 病毒分为真病毒（Euvirus，简称病毒）和亚病毒（Subvirus，包括类病毒、拟病毒、朊病毒）真病毒：至少含有核酸和蛋白质两种组分。 8.病毒潜伏期 不能检测到病毒核酸，不能分离培养到病毒，无临床症状，能检测到SIgA，不能检测到抗体 9.影响健康的不良习惯 嗜酒，嗜赌，抽烟，不遵医，还有一个选项记不得了 10.属于二级预防的是 筛查，孕前检查，体检（？），康复治疗 11.统计学关于抽样还是离散，离散越大越小各代表什么，还有一个 12.PCR污染的消除（可能是案例分析中的多选） 光消除，AT含量大于300bp，UNG法 13.PCR实验室布局（不确定是否案例分析） 标本接收区，污染区，半污染区，扩增区，产物分析区， 案例分析 1、咳嗽，无痰，X片有树状阴影？轻微上感，肺炎待定。呼吸道病原有哪些？最后判定军 团，需要做哪些检验：马尿酸，靛基质，硫化氢等5678项。老年患者高血压，糖尿病史，可能是这一题。 2、II型猪链球菌，猪死了，杀的人得病，此题没敢选 3、关于森林脑炎的，蜱咬伤史，同种病毒？检测项目，处理方法，抗毒素？ 4、怀疑甲肝，检验项目，查血，尿，肝功能，B超，是否嗜肝，粪口传播，检验 5、SARS检验方法，4天检验项目，14天检验什么，取什么样品做检验，分型方法选项扩 增VP3，扩增非编码区，扩增编码区 6、手足口，病原有哪些？采样？咽拭子、粪便、血清，检验方法选项：RT-PCR，RT荧光 定量，抗体 7、破伤风，检测方法，治疗手段护理 8、婴儿腹泻，诺如病毒，属于杯状病毒， 9、一种出疹，留疤痕，黏膜斑（Koplik斑）是麻疹 记不清不能归类 军团菌**样品接种于？ 隔离治疗携带者？ 呼吸道合胞病毒 案例分析中：白细胞正常范围要知道，区别细菌与病毒感染 腺病毒可能有题，记不清了 有一题是检出甲型链球菌（α溶血），分类为几种具体的链球菌，选项是关于支持还是不支持链球菌是病原，选了“不支持，因为链球菌是正常的菌群”，还有不支持选项是“采样部位非无菌”，“没有优势菌”，支持的选项：“都是链球菌”等