第十三章核酸
一、选择题
⒈关于核苷酸的叙述，下列哪个为错误的？（）
A、细胞中游离的核苷酸均为5’-核苷酸；
B、核苷酸中的糖苷键均为C-N糖苷键；
C、核苷酸
中的糖苷键均为β-糖苷键；D、核苷酸是含碱基的磷酸酯；E、碱基与糖环平面垂直
⒉对DNA双螺旋结构的描述，下列哪个为错误的？（）
A、两条链反向平行旋转；
B、嘌呤与嘧啶碱基互补配对；
C、维持双螺旋结构稳定的主要力是
氢键；D、DNA双螺旋结构具有多态性；E、碱基堆积形成分子中心的疏水区
⒊对DNA超螺旋的叙述，下列哪个为错误的？（）
A、在外加张力作用下，双螺旋DNA形成超螺旋；
B、双螺旋DNA处于拧紧状态时形成正超螺
旋；C、细胞所有天然存在的DNA超螺旋均是正超螺旋；D、超螺旋DNA结构紧密有利于组装成染色体；E、负超螺旋比正超螺旋容易解链
⒋关于tRNA的生理功能和结构，下列哪个为错误的？（）
A、转运氨基酸，参与蛋白质的合成；
B、tRNA Tyr及tRNA Pro可以作为RNA反转录的引物；
C、
氨酰tRNA可调节某些氨基酸合成酶的活性；D、5’端为pG….或pA….结构；E、tRNA三级结构为倒L型
⒌关于核酸变性的描述，下列哪个为错误的？（）
A、紫外吸收值增加；
B、分子黏度变小；
C、共价键断裂，分子变成无规则线团；
D、比旋光减
小；E、浮力密度升高
⒍关于RNA分子，下列哪个为错误的？（）
A、都是单链线形分子；
B、单链回折可形成发夹结构；
C、分子中双螺旋区占RNA分子的50%；
D、在70℃以上时出现增色效应；
E、RNA的Tm值较DNA低
⒎胰核糖核酸酶水解RNA，产物是（）
A、3’-嘧啶核苷酸；
B、5’-嘧啶核苷酸；
C、3’-嘧啶核苷酸和以3’-嘧啶核苷酸结尾的寡聚
核苷酸；D、5’-嘧啶核苷酸和以5’-嘧啶核苷酸结尾的寡聚核苷酸；E、3’-嘧啶核苷酸和5’-嘧啶核苷酸；
⒏双链DNA热变性后（）
A、黏度下降；
B、沉淀系数下降；
C、浮力密度下降；
D、紫外吸收下降；
E、都不对
⒐胸腺嘧啶除了作为DNA的主要组分外，还经常出现在下列哪种RNA分子中（）
A、mRNA；
B、tRNA；
C、rRNA；
D、hnRNA；
E、snRNA
⒑RNA经NaOH水解，其产物是（）
A、5’-核苷酸；
B、2’-核苷酸；
C、3’-核苷酸；
D、2’-核苷酸和3’-核苷酸的混合物；
E、
2’-核苷酸、3’-核苷酸的混合物和5’-核苷酸；
⒒对DNA片段作物理图谱分析，需要用（）
A、核酸外切酶；
B、DNAaseI；
C、DNA连接酶；
D、DNA聚合酶I；
E、限制性外切酶
二、判断是非
⒈若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpApC，则另一条链的碱基顺序为pGpApCpCpTpG。
⒉若种属A的DNA Tm值低于种属B，则种属A的DNA比种属B含有更多的A-T碱基对。
⒊原核生物和真核生物的染色体均为DNA与组蛋白的复合体。
⒋核酸的紫外吸收与其pH无关。
⒌生物体内存在的游离核苷酸多为5’-核苷酸。
⒍Z型DNA与B型DNA可以互变。
⒎生物体内天然存在的DNA分子多为负超螺旋。
⒏mRNA为生物体内种类最多、含量最丰富的RNA。
⒐tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。
⒑真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3’-OH。
⒒目前为止发现的修饰核苷酸大多存在于tRNA。
⒓对于提纯的DNA样品，测得OD260/OD280＜1.8，则说明样品中含有RNA。
⒔两个核酸样品A和B，如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280，则A的纯度大于B的纯度。⒕核苷酸分子中的核糖为吡喃型结构。
⒖真核生物mRNA均含有polyA结构和帽子结构，原核mRNA则无。
⒗RNA分子可以热变性，并具有增色效应。
⒈20而没有的
⒉DNA总是与配对。
⒊核苷与核苷之
⒋
⒌
⒋双链其熔解温度愈；
DNA，熔解温度越，所以应保存在较浓度的盐溶液中，通常为mol/L
⒌双链DNA热变性后，或在pH2以下，或pH12以上时，其OD260，同样条件下，单链DNA
的OD260。
⒍变性DNA的复性与许多因素有关，包括、、、、等。
⒎双链DNA螺旋距为3.4nm，每匝螺旋的碱基数为10，这是DNA的结构；RNA分子的
双螺旋区以及RNA-DNA杂交双链具有与型DNA相似的结构，外型较为；d （CGCGCG）寡聚体的结构时发现它为螺旋，称为形DNA，外形较为。
⒏常用二苯胺法测定含量，用苔黑酚法测含量。
⒐维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素为，其次大量存在于DNA分子中的弱作用力
如、和也起一定作用。
⒑测定DNA一级结构的方法主要有Sanger提出的法和Gilbert M提出的法。
⒒DNA测序的解决得益于两种新技术的帮助：和。
⒓Oligo(dT)-纤维素可以用来分离纯化真核生物的。
⒔真核生物mRNA帽子结构的简写形式为。
⒕tRNA分子各部分的功能：氨基酸壁是、DHU环是、反密码环是、TΨC 环是。
⒖提取RNA的关键步骤是。
⒗用琼脂糖凝胶电泳分离超螺旋DNA、线性DNA及开环DNA，其迁移率速度最大的是，最小。
四、名词解释
⒈增色效应；⒉分子杂交；⒊碱基互补；⒋DNA一级结构；⒌限制性内切酶；⒍核酸变
性和复性；⒎DNA双螺旋结构；⒏DNA组成的Chargaff规则；⒐DNA超螺旋；⒑Sanger 测序；⒒PCR；
五、问答题
⒈根据给定的条件回答相应的问题：
⑴T7噬菌体DNA，其双螺旋链的相对分子质量为2.5×107，计算DNA链的长度（核苷酸对的平
均相对分子质量为650）；
⑵相对分子质量为130×106的病毒DNA分子，每微米的质量是多少？
⑶编码92个核苷酸的tRNA的基因有多少？
⑷编码细胞色素C（104个氨基酸）的基因有多长？（不考虑起始和终止序列）
⑸编码相对分子质量为9.6万的蛋白质的mRNA，相对分子质量为多少？
⑹λ噬菌体DNA长17μm，一突变体DNA长15μm，问该突变体缺失了多少碱基对？
⒉核酸的种类和生物功能是什么？
⒊试述下列因素如何影响DNA的复性过程：⑴阳离子存在；⑵低于Tm的温度；⑶高浓度的
DNA链。
⒋PCR反应的原理和内容？
⒌简述Sanger测序和自动测序的原理？
6. 简述Southern杂交，Northern杂交和western杂交的含义和检测目的。
第一章核酸的结构和功能 一、选择题 1、热变性的DNA分子在适当条件下可以复性，条件之一是（B）。 A、骤然冷却 B、缓慢冷却 C、浓缩 D、加入浓的无机盐 2、在适宜条件下，核酸分子两条链通过杂交作用可自行形成双螺旋，取决于（D）。 A、DNA的Tm值 B、序列的重复程度 C、核酸链的长短 D、碱基序列的互补 3、核酸中核苷酸之间的连接方式是（C）。 A、2’，5’—磷酸二酯键 B、氢键 C、3’，5’—磷酸二酯键 D、糖苷键 4、tRNA的分子结构特征是（A）。 A、有反密码环和3’—端有—CCA序列 B、有反密码环和5’—端有—CCA序列 C、有密码环 D、5’—端有—CCA序列 5、下列关于DNA分子中的碱基组成的定量关系（D）是不正确的。 A、C+A=G+T B、C=G C、A=T D、C+G=A+T 6、下面关于Watson-Crick DNA双螺旋结构模型的叙述中（A）是正确的。 A、两条单链的走向是反平行的 B、碱基A和G配对 C、碱基之间共价结合 D、磷酸戊糖主链位于双螺旋内侧 7、具5’－CpGpGpTpAp-3’顺序的单链DNA能与下列（C）RNA杂交。 A、5’-GpCpCpAp-3’ B、5’-GpCpCpApUp-3’ C、5’-UpApCpCpGp-3’ D、5’-TpApCpCpGp-3’ 8、RNA和DNA彻底水解后的产物（C）。 A、核糖相同，部分碱基不同 B、碱基相同，核糖不同 C、碱基不同，核糖不同 D、碱基不同，核糖相同 9、下列关于mRNA描述，（A）是错误的。 A、原核细胞的mRNA在翻译开始前需加“PolyA”尾巴。 B、真核细胞mRNA在 3’端有特殊的“尾巴”结构 C、真核细胞mRNA在5’端有特殊的“帽子”结构 D、原核细胞mRNA在5’端有特殊的“帽子”结构 10、tRNA的三级结构是（B）。 A、三叶草叶形结构 B、倒L形结构 C、双螺旋结构 D、发夹结构 11、维系DNA双螺旋稳定的最主要的力是（C）。 A、氢键 B、离子键 C、碱基堆积力 D范德华力 12、下列关于DNA的双螺旋二级结构稳定的因素中（A）是不正确的。 A、3'，5'－磷酸二酯键 C、碱基堆积力 B、互补碱基对之间的氢键 D、磷酸基团上的负电荷与介质中的阳离子之间形成的离子键
第十三章核酸的生物合成 一、单项选择题 １、关于DNA合成，叙述正确的是 A.DNA的生物合成即DNA的半保留复制 B.必须以DNA为模板 C.必须由依赖DNA的DNA聚合酶催化 D.DNA合成是不连续复制 E.DNA合成包括DNA的半保留复制、损伤DNA的修复与逆转录 ２、证明DNA复制为半保留复制的细菌培养试验，其结果为： A.15N-DNA带增加 B.14N-DNA带减少 C.一度出现15N-DNA与14N-DNA的中间带 D.出现中间带，且随细菌繁殖，比例减少 E.出现中间带，且随细菌繁殖，比例增加 ３、关于DNA复制的叙述，下列哪项是错误的？ A.为半保留复制 B.为不对称复制 C.为半不连续复制 D.新合成链的方向均为5′→3′ E.需要引物 ４、 DNA复制过程中的解链酶是 A.DnaA蛋白 B. DnaB蛋白 C. DnaC蛋白 D. DnaG蛋白 E. SSB蛋白５、关于拓扑异构酶，以下叙述正确的是 A.具有连接酶活性 B.拓扑异构酶1催化反应需ATP C.拓扑异构酶II催化反应不需ATP D.拓扑异构酶II能切断双链DNA中的一股链 E.拓扑异构酶1能切断双链DNA中的两股链 ６、原核生物复制过程中，催化新链延长的聚合酶主要是 A.DNA聚合酶Ⅰ B. DNA聚合酶II C.DNA聚合酶III D. DNA聚合酶Ⅰ和III E. DNA聚合酶II和III ７、以下是关于原核生物DNA聚合酶的叙述，正确的是 A.DNA-pol I活性最高，在DNA复制中起重要作用 B.DNA-pol II活性最高，在DNA复制中起重要作用 C.DNA-pol III是主要的DNA复制酶且具3′→5′核酸外切酶作用 D.DNA-pol III催化填补空隙的DNA聚合反应 E.DNA-pol II活性高，在DNA复制中起重要作用，并具5′→3′核酸外切酶作用 ８、真核生物DNA聚合酶具有引物酶活性的是 A.DNA聚合酶α B. DNA聚合酶β C. DNA聚合酶γ D. DNA聚合酶δ E. DNA聚合酶ε ９、 DNA上某段碱基序列为5′-ACTAGCTCAT-3′，其相对应的转录产物碱基序列是A. TACTCGATCA B. ATGAGCTAGT C. AUGAGCUAGU D. ATGAGCTAGU E. UACUCGAUCA
第十章核酸的生物合成 已知DNA是生物遗传的主要物质基础，是遗传信息的载体。但它是怎样把信息传递给子代并进行表达的？已证明DNA可进行自我复制，即在细胞分裂时，—个DNA分子可复制成两个与原来完全相同的DNA分子，并分配在两个分裂的子细胞中，这是把遗传信息传给子代的方式。在后代的生长发育过程中，遗传信息自DNA转录——即把其分子中某些片段的信息转抄在RNA分子中，此种RNA称为信使RNA （mRNA），它们再指导合成特异的蛋白质（翻译），并由这些蛋白质表现出生命活动的特征，执行各种生命功能。这种转录和翻译，即为遗传信息的表达过程。 第一节DNA的生物合成 DNA是由其组成单元脱氧核苷三磷酸聚合起来的生物大分子。活体内合成的新的DNA必须维持亲代细胞内原有的DNA分子结构，这样才得以保持遗传性状不变。现已知无论是高等生物或低等生物，体内DNA的合成都是以原有的DNA为模板“浇铸”而成，因此它们的结构和功能都能保持和亲本一模一样，所以DNA的合成也往往称为DNA复制。 —、DNA的复制方式 原核生物每个细胞只含有一个染色体；真核生物每个细胞则含有多个染色体。在细胞增殖周期的一定阶段，整个染色体组都将发生精确的复制，随后以染色体为单位把复制的基因组分配到两个子代细胞中去。染色体DNA的复制与细胞分裂之间存在密切的相互联系，一旦复制完成，即可发动细胞分裂；细胞分裂结束后，又可开始新的一轮DNA复制。 1. 半保留复制 DNA由互补的两条多核苷酸链组成。一条链上的核苷酸排列顺序决定了另一条链的核苷酸排列顺序。由此可见，DNA分子的每一条链都含有合成它互补链所必需的全部信息。1953年，Wotson和Crick在提出DNA双螺旋结构模型时即推测，DNA复制时两条互补链分开，然后在每条链上按碱基配对的方式合成新的互补链，以组成新的DNA分子。这样新形成的两DNA分子与原来的DNA分子的碱基顺序完全一样。每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种复制方式称为半保留复制。 二、复制的起点和方向 DNA的复制开始于染色体上固定的起始点。超始点是含有100～200个碱基对的一段DNA。先是DNA 的两条链在起始点分开形成叉子样的“复制叉”，随着复制叉的移动完成DNA的复制过程。细胞内存在着能识别起始点的特种蛋白质。 DNA复制可以朝一个方向，也可以朝两个方向进行。 三、与DNA复制有关的酶和蛋白质 DNA的复制是一个十分复杂的过程，但能精确高速地进行，极少出现错误（错误机率10－8～10－9），这是许多酶和蛋白质共同作用的结果。 （一）DNA聚合酶 1．大肠杆菌DNA聚合酶 DNA复制过程中最基本的酶促反应是四种脱氧核苷酸的聚合反应。1956年Kornberg等首先从大肠杆菌提取液中分离出催化此反应的酶。他们将大肠杆菌提取液与32p标记α—磷酸根的四种脱氧核苷三磷酸（dA TP，dTTP，dGTP，dCTP）的混合物一同温育，发现32P掺入到延伸的DNA链的核苷酸残基之间的3＇，5＇—磷酸二酯键中去。催化这个反应的酶称为DNA聚合酶，其后从不同的生物中都找到了这种酶。 2. 真核生物DNA聚合酶 在发现大肠杆菌DNA聚合酶后不久，从小牛胸腺中也分离到了DNA聚合酶。其后，曾对各种真核生物，包括动物、植物和微生物，广泛研究了它们细胞中的DNA聚合酶。现已知，在真核生物中存在四种
第十三章遗传病的诊断 遗传疾病的诊断是一项复杂的工作，几乎涉及各个临床学科。它既有与其他疾病相同的诊断方法，也有其特殊的诊断方法。遗传疾病诊断除了一般临床诊断方法外，还需要用一些遗传学特殊方法。主要内容包括病史采集、症状与体征、家系分析、染色体检查、生化检查、基因诊断等。遗传学诊断方法既可对已出现症状的患者进行诊断，也可对症状前和出生前的患者的进行诊断。 本章详细介绍了各种遗传疾病的诊断方法和技术，并对现症患者的诊断技术、症状前的诊断技术、产前诊断技术进行了详细说明；本章还重点介绍了基因诊断学的发展、策略、常用技术、应用、问题和展望等问题。 一、基本纲要 1．了解遗传病诊断的常规临床诊断方法。 2．了解系谱分析方法和注意事项。 3．了解遗传病生化学诊断的基本方法。 4．掌握细胞遗传学诊断的基本方法和技术。 5．掌握基因诊断的基本原理和主要方法。 6．掌握现症患者诊断、症状前诊断、产前诊断的基本方法。 7．了解基因诊断技术的应用。 二、习题 （一）选择题（A 型选择题） 1．家系调查的最主要目的是。 A．了解发病人数 B．了解疾病的遗传方式 C．了解医治效果
D．收集病例 E．便于与病人联系 2．不能进行染色体检查的材料有。 A．外周血 B．排泄物 C．绒毛膜 D．肿瘤 E．皮肤3．生化检查主要是指针对的检查。 A．病原体 B．DNA C．RNA D．微量元素 E．蛋白质和酶4．症状前诊断的最佳方法是。 A．基因检查 B．生化检查 C．体征检查 D．影像检查 E．家系调查5．羊膜穿刺的最佳时间在孕期周时。 A．2 B．4 C．10 D．16 E．30 6．绒毛取样法的缺点是。 A．取材困难 B．需孕期时间长 C．流产风险高 D．绒毛不能培养 E．周期长 7．基因诊断与其他诊断比较，最主要的特点在于。 A．费用低 B．周期短 C．取材方便 D．针对基因结构 E．针对病变细胞 8．当时，可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断 A．基因片断缺失 B．基因片断插入 C．基因结构变化未知 D．表达异常 E．点突变 9．核酸杂交的基本原理是。 A．变性与复性 B．DNA复制 C．转录 D．翻译 E．RNA剪切 10．PCR特异性主要取决于。 A．循环次数 B．模板量 C．DNA聚合酶活性 D．引物的特异性 E．操作技术 11．PCR最主要的优点在于。 A．周期短 B．灵敏度高 C．费用低 D．准确性高 E．操作方便 12．通过PCR-RFLP分析，某常染色体隐性遗传病的分子诊断结果如下：父亲（正常）
核苷酸代谢与遗传性疾病 ●摘要： 核苷酸是遗传物质核酸的基本结构单位，它具有多种生物学功用，如作为核酸合成的原料;.构成能量物质，如A TP、GTP、CTP等;参与代谢和生理调节，如cAMP是体内重要第二信使物质，参与信号转导;.组成辅酶，如腺苷是多种辅酶的组成成分;组成活性中间代谢物，核苷酸是多种活性中间代谢物的载体如UDP葡萄糖，CDP-甘油二酯，SAM等。鉴于核苷酸有如此重要的生理意义，因此它在代谢过程中的异常情况往往造成严重的后果，近年来不断发现由于核苷酸代谢而造成的一系列遗传性疾病。本文将以核苷酸的基本代谢情况为基础，分别从嘌呤和嘧啶代谢异常的典型疾病出发探讨有关核苷酸代谢与遗传性疾病。 ●关键词： 核苷酸代谢嘌呤代谢遗传病嘧啶代谢遗传病 ●核苷酸 核苷酸是核酸的基本结构单位，分为脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸。而核苷酸则由碱基、戊糖和磷酸三种成分连接而成。构成核苷酸的碱基有五种，分别属于嘌呤和嘧啶。戊糖作为核苷酸的另一重要成分，脱氧核糖核苷酸中的戊糖是β-D-2-脱氧核糖，核糖核苷酸中的戊糖是β-D-核糖。核苷酸在体内分布广泛，细胞中主要以5‘-核苷酸形式存在。核苷酸具有多种生物学功用：1.作为核酸合成的原料;2.构成能量物质，如A TP、GTP、CTP等;3.参与代谢和生理调节，如cAMP是体内重要第二信使物质，参与信号转导;4.组成辅酶，如腺苷是多种辅酶的组成成分;5.组成活性中间代谢物，核苷酸是多种活性中间代谢物的载体如UDP 葡萄糖，CDP-甘油二酯，SAM等。 ●核苷酸的代谢 核苷酸的合成代谢 一、嘌呤核糖核苷酸的合成 （一）从头合成途径 1.IMP的合成：其磷酸核糖部分由PRPP提供，由5-磷酸核糖与A TP在磷酸核糖焦磷酸激酶催化下生成。IMP的合成有10步，分两个阶段，先生成咪唑环，再生成次黄嘌呤。首先由谷氨酰胺的氨基取代焦磷酸，再连接甘氨酸、甲川基，甘氨酸的羰基生成氨基后环化，生成5-氨基咪唑核苷酸。然后羧化，得到天冬氨酸的氨基，甲酰化，最后脱水闭环，生成IMP。 2. AMP的合成：IMP与天冬氨酸生成腺苷酸琥珀酸，由腺苷酸琥珀酸合成酶催化，GTP提供能量。腺苷酸琥珀酸裂解酶催化分解生成AMP和延胡索酸。 3.GMP的合成：IMP先由次黄嘌呤核苷酸脱氢酶氧化生成黄嘌呤，再由谷氨酰胺提供氨基，生成GMP。 （二）补救途径： 1. 碱基与核糖-1-磷酸在特异的核苷磷酸化酶催化下生成核苷，再由其核苷磷酸激酶生成核苷酸。 2.嘌呤与PRPP在磷酸核糖转移酶催化下生成核苷酸。 （三）调控 从头合成途径受AMP和GMP的反馈抑制，第一步转酰胺酶受二者抑制，分枝后的第一步只受自身抑制。
第二章核酸的结构与功能 一、名词解释 1．核酸 2．核苷 3．核苷酸 4．稀有碱基 5．碱基对 6．DNA的一级结构 7．核酸的变性 8．Tm值 9．DNA的复性 10．核酸的杂交 二、填空题 11．核酸可分为 ____和____两大类，其中____主要存在于____中，而____主要存在于____。 12．核酸完全水解生成的产物有____、____和____，其中糖基有____、____，碱基有____和____两大类。13．生物体内的嘌呤碱主要有____和____，嘧啶碱主要有____、____和____。某些RNA分子中还含有微量的其它碱基，称为____。 14．DNA和RNA分子在物质组成上有所不同，主要表现在____和____的不同，DNA分子中存在的是____和____，RNA分子中存在的是____和____。 15．RNA的基本组成单位是____、____、____、____，DNA的基本组成单位是____、____、____、____，它们通过____键相互连接形成多核苷酸链。 16．DNA的二级结构是____结构，其中碱基组成的共同特点是（若按摩尔数计算）____、____、____。17．测知某一DNA样品中，A=0.53mol、C=0.25mol、那么T= ____mol，G= ____mol。 18．嘌呤环上的第____位氮原子与戊糖的第____位碳原子相连形成____键，通过这种键相连而成的化合物叫____。 19．嘧啶环上的第____位氮原子与戊糖的第____位碳原子相连形成____键，通过这种键相连而成的化合物叫____。 20．体内有两个主要的环核苷酸是____、____，它们的主要生理功用是____。 21．写出下列核苷酸符号的中文名称：ATP____、dCDP____。 22．DNA分子中，两条链通过碱基间的____相连，碱基间的配对原则是____对____、____对____。23．DNA二级结构的重要特点是形成____结构，此结构属于____螺旋，此结构内部是由____通过____相连维持，其纵向结构的维系力是____。 24．因为核酸分子中含有____和____碱基，而这两类物质又均含有____结构，故使核酸对____波长的紫外线有吸收作用。 25．DNA双螺旋直径为____nｍ，双螺旋每隔____nｍ转一圈，约相当于____个碱基对。戊糖和磷酸基位于双螺旋____侧、碱基位于____侧。 26、核酸双螺旋结构中具有严格的碱基配对关系，在DNA分子中A对____、在RNA分子中A对____、它们之间均可形成____个氢键，在DNA和RNA分子中G始终与____配对、它们之间可形成____个氢键。27．DNA的Tm值的大小与其分子中所含的____的种类、数量及比例有关，也与分子的____有关。若含的A-T配对较多其值则____、含的G-C配对较多其值则____，分子越长其Tm值也越____。 28．Tm值是DNA的变性温度，如果DNA是不均一的，其Tm值范围____，如果DNA是均一的其Tm值范围____。 29．组成核酸的元素有____、____、____、____、____等，其中____的含量比较稳定，约占核酸总量的____，可通过测定____的含量来计算样品中核酸的含量。 30．DNA双螺旋结构的维系力主要有____和____。 31．一般来说DNA分子中G、C含量高分子较稳定，同时比重也较____、解链温度也____。 32．DNA变性后，其钢性_____、粘度____、紫外吸收峰____。 33．DNA分子中两条多核苷酸链所含的碱基____和____间有三个氢键，____和____之间仅有两个氢键。34．RNA主要有三类，既____、____和____、它们的生物功能分别是____、____和____。 35．RNA的二级结构大多数是以单股____的形式存在，但也可局部盘曲形成____结构，典型的tRNA二级结构是____型结构。 36．在生物细胞中主要有三种RNA，其中含量最多的是____、种类最多的是____、含有稀有碱基最多的是____。
第十三、十四章 核酸的生物合成 练习题参考答案 一、名词解释 1．半保留复制：以亲代双链DNA 的每一条链为模板，按照碱基配对的原则，合成出两 个含有相同核苷酸序列的子代DNA 分子的过程。在新合成的DNA 分子中，一条链来自亲代DNA ，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制。 2．转录：指在DNA 指导下的RNA 的合成。转录是在DNA 模板指导下，按照碱基互补 配对的原则，由RNA 聚合酶催化完成的。 3．逆转录：Temin 和Baltimore 各自发现在RNA 肿瘤病毒中含有RNA 指导的DNA 聚合 酶，才证明发生逆向转录，即以RNA 为模板合成DNA 。 4．冈崎片段：1968年日本人冈崎发现以DNA5/→3/模板合成新链时，先形成一些1000 核苷酸左右的DNA 短片段，然后由连接酶连接形成完整的子链。这些在DNA 复制过程中形成的DNA 短片段称为冈崎片段。 5．前导链与后随链： DNA 复制进行时，一条链的合成方向与复制叉移动方向一致，其 合成是连续的，称为前导链或领头链；另一条链的合成方向与复制叉移动方向相反，其合成是不连续的，称为后随链或后滞链。 6．半不连续复制：DNA 复制时，前导链连续合成，后随链不连续合成，这种合成方式 称为半不连续复制。 7．不对称转录：转录时是以双链DNA 的一条链为模板，并可在DNA 的任一条链上进行， 这称为不对称转录。 8．模板链与编码链：转录中充当模板的单链称为模板链；另一条与之互补的DNA 链称 为编码链。 9．基因：是指染色体中携带有遗传信息的DNA 功能片段。 10．内含子与外显子：在真核生物中，编码大多数蛋白质的基因为不连续基因或称隔裂 基因，基因中非编码序列，称为内含子；而编码序列，称为外显子。 11． cDNA ：以mRNA 为模板，经逆转录合成的DNA 链，称为cDNA 。 二、填空题答案 1．前导链（领头链）；连续的；随从链；不连续的；5′；RNA ；5′ →3′ 2．转录；RNA 聚合；逆转录；逆转录 3．σββα'2；'2ββα；σ 4．模板链；此模板链的互补链。 5．hnRNA 6．dNTP ；NTP 7． 外显子；内含子 8． 5′ →3′聚合酶；3′→5′外切；5′ →3′外切 9．冈崎片段；5′→3′ 10．连续 相同 不连续 相反 11．RNA 引物；DNA 聚合酶Ⅲ ； DNA 聚合酶Ⅰ；DNA 连接酶 12．同一RNA 聚合酶；3；RNA 聚合酶Ⅰ；RNA 聚合酶Ⅱ；RNA 聚合酶Ⅲ 13．隔裂基因；外显子；内含子；外显子；内含子 三、单项选择题 1．（A ）DNA 半保留复制需要来自亲代的每一条标记链作模板合成互补链，以保持与亲 代相同的完整结构。因此，在无标记溶液中进行第一轮复制将产生两个半标记分子。第二轮复制将产生两个半标记分子和两个不带标记的双链DNA 分子。
第十章核苷酸代谢 一、A型选择题 1．从头合成嘌呤核苷酸，首先合成出来的是 A．PRPP B．GMP C．XMP D．AMP E．IMP 2．下列哪种物质不是嘌呤核苷酸从头合成的直接原料 A．甘氨酸B．天冬氨酸C．谷氨酸D．CO2 E．一碳单位3．嘧啶环中的两个氮原子来自 A．谷氨酰胺和氨B．谷氨酰胺和天冬酰胺C．谷氨酰胺和谷氨酸D．谷氨酰胺和氨甲酰磷酸E．天冬氨酸和氨甲酰磷酸 4．下列关于氨基甲酰磷酸的叙述哪项是正确的 A．主要用来合成谷氨酰胺B．用于尿酸的合成 C．合成胆固醇D．为嘧啶核苷酸合成的中间产物E．为嘌呤核苷酸合成的中间产物 5．提供嘌呤环N-3和N-9的化合物是 A．天冬氨酸B．丝氨酸C．丙氨酸D．甘氨酸E．谷氨酰胺6．嘧啶合成所需的氨基甲酰磷酸的氨源来自 A．NH3 B．天冬氨酸C．天冬酰胺D．谷氨酸E．谷氨酰胺7．临床上常用哪种药物治疗痛风症 A．消胆胺B．5-氟尿嘧啶C．6-巯基嘌呤D．氨甲蝶呤E．别嘌呤醇8．5-FU的抗癌作用机制为 A．合成错误的DNA，抑制癌细胞生长 B．抑制尿嘧啶的合成，从而减少RNA的生物合成 C．抑制胞嘧啶的合成，从而抑制DNA的生物合成 D．抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶的活性，从而抑制DNA的生物合成 E．抑制二氢叶酸还原酶的活性，从而抑制了TMP的合成 9．下列关于嘌呤核苷酸从头合成的叙述哪些是正确的 A．嘌呤环的氮原子均来自氨基酸的α-氨基 B．合成过程中不会产生自由嘌呤碱 C．氨基甲酰磷酸为嘌呤环提供氨甲酰基 D．由IMP合成AMP和GMP均由A TP供能 E．次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶催化IMP转变成GMP 10．体内进行嘌呤核苷酸从头合成最主要的组织是 A．胸腺B．小肠粘膜C．肝D．脾E．骨髓11．能在体内分解产生β-氨基异丁酸的核苷酸是 A．CMP B．AMP C．TMP D．UMP E．IMP 12．关于天冬氨酸氨基甲酰基转移酶的下列说法，哪一种是错误的 A．GTP是其反馈抑制剂B．是嘧啶核苷酸从头合成的调节酶C．是由多个亚基组成D．是变构酶 E．服从米-曼氏方程 13．嘧啶核苷酸合成中，生成氨基甲酰磷酸的部位是 A．线粒体B．微粒体C．胞浆D．溶酶体E．细胞核
第十三章核酸的降解和核苷酸代谢 一、名词解释 1. 核苷酸的从头合成途径：利用磷酸核糖、氨基酸、一碳单位和二氧化碳等简单物质经过 酶促反应合成核苷酸的过程。 2．核苷酸合成的补救途径：利用体内游离的碱基或核苷，合成核苷酸的过程。 3. 核酸酶：作用于核酸分子中的磷酸二酯键的酶，分解产物为寡核苷酸或核苷酸，分为核 酸外切酶和核酸内切酶。 4. 限制性核酸内切酶：指能在特异顺序部位切断双链DNA的酶。 二、填空题 1．叶酸的结构类似物氨基蝶呤等可抑制二氢叶酸还原酶活性。 2．人及猿类体内嘌呤代谢最终产物为尿酸。 3．胸腺嘧啶分解的最终产物为β-氨基异丁酸、NH3、CO2。 4．胞嘧啶和尿嘧啶分解的最终产物为β-丙氨酸、NH3、CO2。5．嘌呤环合成的原料有天冬氨酸、CO2、Gly、Gln和甲酸盐等。 6．嘧啶核苷酸从头合成的原料有Gln、Asp、PRPP和CO2。 7．对某些碱基顺序有专一性的核酸内切酶称为限制性核酸内切酶。 8．生物体中活性蛋氨酸是S-腺苷蛋氨酸，它是活泼甲基的供应者。 三、选择题 1．dTMP合成的直接前体是（A） (A) dUMP (B) TMP (C) TDP (D) dUDP 2．嘌呤环中第4位和第5位碳原子来自下列哪种化合物？（A） (A) 甘氨酸 (B) 天冬氨酸 (C) 丙氨酸 (D) 谷氨酸 3．嘌呤核苷酸的嘌呤核上第1位N原子来自（C） (A) Gly (B) Gln (C) Asp (D) 甲酸 4．下列那对物质是合成嘌呤环和嘧啶环都必需的（ A） (A) Gln/Asp B．Gln/Gly C．Gln/Pro D．Gly/Asp 5．催化5-磷酸核糖与ATP生成PRPP这一反应的酶是（B） (A) 磷酸核糖激酶 (B) 磷酸核糖焦磷酸激酶 (C) 磷酸核糖酶 (D) ATP激酶 四、写出下列物质的结构式： 1. 氨甲酰磷酸 2. 5－磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP） 五、写出下列英文名称的中文名称 1. AMP:三磷酸腺苷酸 2. CTP:三磷酸胞苷酸 3. FH4 :四氢叶酸 4. PRPP: 5-磷酸核糖焦磷酸； 5. IMP：次黄嘌呤核苷酸 六、简答题： 1. 简述嘧啶核苷酸分子中各原子的来源及合成特点。 （1）各原子的来源：N1、C4、C5、C6-天冬氨酸；C2-二氧化碳；N3-氨；核糖-磷酸戊糖途径的5′磷酸核糖。 （2）合成特点：氨甲酰磷酸 + 天冬氨酸→乳清酸 乳清酸 + PRPP →乳清酸核苷-5′-磷酸→尿苷酸 2. 食物中的核酸在体内如何降解？有哪些重要的酶参加？ 答：核酸→单核苷酸→核苷→嘌呤（或嘧啶）+核糖（或脱氧核糖）
（二）填空题 1．DNA复制是定点双向进行的，股的合成是，并且合成方向和复制叉移动方向相同；股的合成是的，合成方向与复制叉移动的方向相反。每个冈崎片段是借助于连在它的末端上的一小段而合成的；所有冈崎片段链的增长都是按方向进行。2．DNA连接酶催化的连接反应需要能量，大肠杆菌由供能，动物细胞由供能。 3．大肠杆菌RNA聚合酶全酶由组成；核心酶的组成是。参与识别起始信号的是因子。 4．基因有两条链，作为模板指导转录的那条链称链。 5．以RNA为模板合成DNA称，由酶催化。 6．DNA或UpGpCpA分别经0.3NKOHR、NaseT1和牛胰RNaseI处理所得结果： DNA: 0.3NKOH：；RNaseT1：；RNase I： ; UpGpCpA：0.3NKOH：；RNaseT1：；RNase I ：。 7．基因突变形式分为：，，和四类。 8．亚硝酸是一个非常有效的诱变剂，因为它可直接作用于DNA，使碱基中基氧化成基，造成碱基对的。 9．所有冈崎片段的延伸都是按方向进行的。 10．前导链的合成是的，其合成方向与复制叉移动方向；随后链的合成是的，其合成方向与复制叉移动方向。 11．引物酶与转录中的RNA聚合酶之间的差别在于它对不敏感，并可以作为底物。12．DNA聚合酶I的催化功能有、、、和。 13．DNA回旋酶又叫，它的功能是。 14．细菌的环状DNA通常在一个开始复制，而真核生物染色体中的线形DNA可以在起始复制。 15．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的活性使之具有功能，极大地提高了DNA复制的保真度。16．大肠杆菌中已发现种DNA聚合酶，其中负责DNA复制，负责DNA损伤修复。17．DNA切除修复需要的酶有、、和。 18．在DNA复制中，可防止单链模板重新缔合和核酸酶的攻击。 19．DNA合成时，先由引物酶合成，再由在其3′ 端合成DNA链，然后由切除引物并填补空隙，最后由连接成完整的链。 20．原核细胞中各种RNA是催化生成的，而真核细胞核基因的转录分别由种RNA聚合酶催化，其中rRNA基因由转录，hnRNA基因由转录，各类小分子量RAN则是的产物。 21．一个转录单位一般应包括序列、序列和顺序。 22．真核细胞中编码蛋白质的基因多为。编码的序列还保留在成熟mRNA中的是，编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是。在基因中被
八、核苷酸代谢 1、人体内嘌呤核苷酸从头合成最活跃的组织是： A. 脑 B. 肝 C. 骨髓 D. 胸腺 E. 小肠粘膜 2、人体内嘌呤分解的终产物是: A. 尿素 B. 肌酸 C. 尿酸 D. 肌酸酐 E.CO2和NH3 3、嘌呤核苷酸从头合成首先生成的核苷酸是： A. GMP B. IMP C. AMP D. ATP E. GTP 4、哺乳动物体内直接催化尿酸生成的酶是： A. 核苷酸酶 B. 腺苷酸脱氨酶 C.尿酸氧化酶 D. 黄嘌呤氧化酶 E. 鸟嘌呤脱氨酶 5、最直接联系糖代谢与核苷酸合成的物质是： A. 葡萄糖 B. 葡糖-6-磷酸 C. 葡糖-1-磷酸 D. 核糖-5-磷酸 E.葡糖1,6-二磷酸 6、次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶参与的反应是： A. 嘧啶核苷酸从头合成 B.嘌呤核苷酸从头合成 C.嘧啶核苷酸补救合成 D.嘌呤核苷酸补救合成 E.嘌呤核苷酸分解代谢 7、哪种物质不是嘌呤核苷酸从头合成的直接原料： A. CO2 B. 谷氨酸 C. 甘氨酸 D. 天冬氨酸 E. 一碳单位 8、谷氨酰胺-PRPP氨基转移酶催化的反应是： A.从甘氨酸合成嘧啶环 B.从核糖-5-磷酸生成磷酸核糖焦磷酸 C.从磷酸核糖焦磷酸生成磷酸核糖胺 D.从次黄嘌呤核苷酸生成腺嘌呤核苷酸 E. 从次黄嘌呤核苷酸生成鸟嘌呤核苷酸 9、谷氨酰胺中的酰胺基为核苷酸合成提供的元素是： A. 腺嘌呤上的氨基 B. 嘌呤环上的两个氮原子 C. 嘧啶环上的两个氮原子 D. 尿嘧啶核苷酸上的两个氮原子 E. 胸腺嘧啶核苷酸上的两个氮原子 10、嘌呤核苷酸从头合成的正性调节分子是 A．二磷酸腺昔B.5"一磷酸核糖 C. 腺嘌呤核苷酸 D. 鸟嘌呤核苷酸E．次黄嘌呤核苷酸 11、下列氨基酸中参与体内嘧啶核苷酸合成的是： A. 甘氨酸 B. 谷氨酸 C. 精氨酸 D.天冬氨酸 E.天冬酰胺 12、下列途径中与核酸合成关系最为密切的是： A. 糖酵解 B. 糖异生 C. 尿素循环 D.磷酸戊糖途径 E.柠檬酸循环 13、下列不受甲氨蝶呤抑制的生物化学过程是： A.DNA复制 B.蛋白质合成 C. 嘧啶碱合成 D. 嘌呤碱合成 E. 四氢叶酸合成 14.阿糖胞苷干扰核苷酸代谢的机制是：
一、是非题 1．滚筒式复制是环状DNA，一种特殊的单向复制方式。 2．所有核酸的复制过程中，新链的形成都必须遵循碱基配对的原则。 3．双链DNA经过一次复制形成的子DNA分子中，有些不含亲代核苷酸链。 4．原核细胞的每一个染色体只有一个复制起点，而真核细胞的每一个染色体就有许多个复制起点。 5．在细胞中，DNA链延长的速度随细胞的培养条件而改变。 6．在细胞生长周期的G1期是双倍体，而在G2期是三倍体。 7．所有核酸合成时，新链的延长方向都是从5′→3′。 8．抑制RNA合成酶的抑制剂不影响DNA的合成。 9．在E．coli细胞和真核细胞中都是由DNA聚合酶Ⅰ切除RNA引物。 10．缺失DNA聚合酶Ⅱ的E．coli突变株，可以正常地进行染色体复制和DNA修复合成； 11．在真核细胞中，三种主要RNA的合成都是由一种RNA聚合酶催化。 12．真核细胞中mRNA 5′端都有一个长约200核苷酸组成的PolyA结构。 13．真核细胞中mRNA的前体为hnmRNA。 14．无论是在原核或真核细胞中，大多数mRNA都是多顺反子的转录产物。 15．一段人工合成的多聚尿苷酸可自发形成双螺旋。 二、填空题 1．mRNA前体的加工一般要经过、在5′端和在3′端三个步骤。2．识别同一断裂序列的限制性内切酶称为、识别相似断裂序列并产生能通过碱基互补相互缔合粘性末端的限制性内切酶称为。 3．逆转录酶是催化以为模板，合成的一类酶，产物是。4．欲标记DNA双链5′端，需要酶催化，利用作底物。5．通过与DNA分子中G－C顺序结合，阻止RNA聚合酶催化的RNA链延伸的抗生素是。 6．核糖体的亚基上含有与mRNA结合的位点。 7．RNA聚合酶复合物中的。因子具有作用。 8．DNA双链中编码链的一段核着酸顺序是pCpTpGpGpApC，转录的mRNA顺序应该是。 9．每个冈崎片段是借助连在它端的一小段引物，每个冈崎片段的增长都是由端向端延伸。 10．寡聚核苷酸片段UpGpCpApUpGpCp经0.3摩尔的KOH水解产物是，经RnaseT1作用产物是，经RNase A 产物是。 11．DNA复制时，前导链的合成是的，复制方向与复制叉移动的方向，后随链的合成是的，复制方向与复制叉移动的方向。 12．在真核细胞的DNA切除修复过程中，受损伤的碱基可由和切除，并由和共同作用将缺失的碱基补上。 13．在实验室使用的大多数诱变剂都是属于诱变，而大多数致癌物质都是属于诱变。 14．14．在线粒体中的环状基因组是通过合成方式复制。滚筒式复制的特点是由。 15．DNA复制和RNA的合成都需要酶，在DNA复制中该酶的作用
第13章 RNA加工 基本概念和定义 RNA加工(RNA processing)描述了新合成的RNA分子在结构和化学组成方面的成熟过程。这些修饰过程发生在转录过程中(共转录修饰,cotranscriptional modification)和转录后(转录后修饰,posttranscriptional)；RNA加工对RNA的功能极其重要，同时RNA加工代表了基因调控的一类机制。RNA加工反应分成10类，见表13.1。 从DNA模板复制的RNA分子称为转录本(transcript)。在转录过程中产生的RNA是新生转录本(nascent transcript)，当转录完成后的RNA为初级转录本(primary transcript)——它是被转录DNA的一个精确拷贝。经过一些修饰后的RNA为成熟转录本(mature transcript)，不再与DNA完全一样。 并不是所有的RNA都要经过修饰：细菌mRNA很少加工(实际上往往在转录完成之前蛋白合成就开始了)，真核生物的5SrRNA转录完成后就有成熟的末端。完全加工和有功能RNA 分子的前体称为前体RNA(pro-RNA)。真核生物的前体mRNA又称为核内不均一RNA (heterogeneous nuclear RNA，hnRNA)。它不同于其他形式的核内RNA，其分子大小变化很大，反映了基因大小的差异和部分加工的分子的存在。 在真核生物核内，转录和RNA加工不是在核中自由发生的，而是在核基质中固定的位置进行。特定的mRNA加工因子(特别是剪接体和多腺苷酸化酶)与延伸复合物中RNA聚合酶Ⅱ的C末端作用，所以转录和加工是相关联的。mRNA加工复合物在核基质中的定位可能有利于产物的输出。在核内和细胞质中RNA和蛋白质相结合，形成核糖核蛋白颗粒。 表13.1 RNA加工反应的分类 加工反应举例 剪切使rRNA和tRNA从多顺反子转录本中释放 真核生物mRNA转录的终止 内切降解加工rRNA和tRNA产生成熟末端 核苷酸转移转移CCA到某些tRNA的3’末端 碱基化学修饰 mRNA和rRNA中偶发的甲基化 tRNA和snRNA中的普遍碱基修饰 核苷酸切除和替换tRNA鸟嘌呤的过度修饰产生二氢尿嘧啶(Q)和假尿嘧啶(W) 加帽在真核生物mRNA 5’末端加上7—甲基鸟嘌呤 多腺苷酸化在大多数真核生物和少数细菌mRNA 3’末端加上多腺苷酸尾巴 剪接去除大多数内含子(经常是顺式，偶尔反式) 剪接(连接)去除tRNA内含子 编辑通过碱基修饰改变mRNA所携带信息，在编码区中插人或缺失碱基13.1非翻译RNA的加工 13.1.1 tRNA剪切和成熟 有些tRNA基因是被单独转录的，另一些则作为多顺反子的一部分转录，如在大肠杆菌中，一些tRNA与rRNA基因在共同的操纵子中一起转录。根据其来源不同，前体tRNA可能要经过七种不同的加工反应。多顺反子tRNA或tRNA和rRNA混合转录本中，单个的tRNA通过在成熟的5’端(经常是鸟嘌呤)切除而释放。在大肠杆菌中，这个功能由核糖核酸酶P完成。
第九章核酸的生物合成 一、知识要点 在细胞分裂过程中通过DNA的复制把遗传信息由亲代传递给子代，在子代的个体发育过程中遗传信息由DNA传递到RNA，最后翻译成特异的蛋白质；在RNA病毒中RNA具有自我复制的能力，并同时作为mRNA，指导病毒蛋白质的生物合成；在致癌RNA病毒中，RNA还以逆转录的方式将遗传信息传递给DNA分子。这种遗传信息的流向称为中心法则。 复制是指以原来DNA分子为模板，合成出相同DNA分子的过程；转录是在DNA（或RNA）分子上合成出与其核苷酸顺序相对应的RNA（或DNA）的过程；翻译是在以rRNA 和蛋白质组成的核糖核蛋白体上，以mRNA为模板，根据每三个相邻核苷酸决定一种氨基酸的三联体密码规则，由tRNA运送氨基酸，合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质肽链的过程。 （一） DNA的生物合成 在DNA复制时，亲代DNA的双螺旋先行解旋和分开，然后以每条链为模板，按照碱基配对原则，在这两条链上各形成一条互补链，这样从亲代DNA的分子可以精确地复制成2个子代DNA分子。每个子代DNA分子中，有一条链是从亲代DNA来的，另一条则是新形成的，这叫做半保留复制。通过14N和15N标记大肠杆菌实验证实了半保留复制。 1．复制的起始点与方向 DNA分子复制时，在亲代分子一个特定区域内双链打开，随之以两股链为模板复制生成两个子代DNA双链分子。开始时复制起始点呈现一叉形（或Y形），称之为复制叉。DNA 复制要从DNA分子的特定部位开始，此特定部位称为复制起始点（origin of replication），可以用ori表示。在原核生物中复制起始点常位于染色体的一个特定部位，即只有一个起始点。真核生物的染色体是在几个特定部位上进行DNA复制的，有几个复制起始点的。酵母基因组与真核生物基因组相同，具有多个复制起始点。 复制的方向可以有三种不同的机制。其一是从两个起始点开始，各以相反的单一方向生长出一条新链，形成两个复制叉。其二是从一个起始点开始，以同一方向生长出两条链，形成一个复制叉。其三是从一个起始点开始，沿两个相反的方向各生长出两条链，形成两个复制叉。 2．DNA聚合反应有关的酶及相关蛋白因子 DNA的合成是以四种三磷酸脱氧核糖核苷为底物的聚合反应，该过程除了需要酶的催化之外，还需要适量的DNA为模板，RNA（或DNA）为引物和镁离子的参与。催化这个反应的酶也有多种：DNA聚合酶、RNA引物合成酶（即引发酶）、DNA连接酶、拓扑异构酶、解螺旋酶及多种蛋白质因子参与。 3．DNA的复制过程 DNA的复制按一定的规律进行，双螺旋的DNA是边解开边合成新链的。复制从特定位点开始，可以单向或双向进行，但是以双向复制为主。由于DNA双链的合成延伸均为5′→3′的方向，因此复制是以半不连续的方式进行，即其中一条链相对地连续合成，称之为领头链，另一条链的合成是不连续的，称为随后链。在DNA复制叉上进行的基本活动包括双链的解开；RNA引物的合成；DNA链的延长；切除RNA引物，填补缺口，连接相邻的DNA片段。 （二）逆向转录 在逆转录酶作用下，以RNA为模板，按照RNA中的核苷酸顺序合成DNA，这与通常转录过程中遗传信息流从DNA到RNA的方向相反，故称为逆向转录。逆转录酶需要以RNA （或DNA）为模板，以四种dNTP为原料，要求短链RNA（或DNA）作为引物，此外还需要适当浓度的二价阳离子Mg2+和Mn2+，沿5′→3′方向合成DNA，形成RNA-DNA杂交分子（或DNA双链分子）。逆转录酶是一种多功能酶，它除了具有以RNA为模板的DNA 聚合酶和以DNA为模板的DNA聚合酶活性外还兼有RNaseH、DNA内切酶、DNA拓扑异构酶、DNA解链酶和tRNA结合的活性。
班级学号姓名 12 第十三章DNA生物合成作业及参考答案 通过复制将亲代的遗传信息传到子代，转录和翻译是将遗传物质表达为执行各种生物功能的生物大分子。生物细胞内的DNA复制方式为半保留复制，是遗传信息准确传代的保证。 复制以dNTP为原料，在DNA聚合酶（）催化下生成磷酸二酯键使dNTP逐一聚合生成DNA子链。原核生物有DNA－pol I、II和III三种DNA－pol；真核生物有α、β、γ、δ、ε5种DNA－pol，各有独特的功能。复制还需多种其他酶和多种蛋白质因子，染色体复制能维持应有的长度，复制的终止需要端粒酶延伸端粒DNA。 逆转录是RNA病毒复制方式，逆转录是以RNA为模板合成DNA，需逆转录酶催化。DNA复制过程中出现错误是突变发生的原因，突变除了自发发生的外，还可因各种物理、化学因素而诱发。物理因素诱发突变如常见的嘧啶二聚体。化学诱变剂种类繁多，而且往往与致癌作用有关。细胞内存在各种修复措施，使损伤的DNA得以复原。主要的修复方式有光修复、切除修复、重组修复和SOS修复等。 一、选择题 （单选） 1 DNA在复制中所需的底物是 A．AMP、GMP、CMP、UMP B．ADP、GDP、CDP、TDP C．dAMP、dGMP、dCMP、dUMP D．dADP、dGDP、dCDP、dTDP E．dA TP、dGTP、dCTP、dTTP 2催化DNA半保留复制的酶是 A．DNA指导的DNA聚合酶B．RNA指导的RNA聚合酶C．RNA指导的DNA聚合酶 D．DNA指导的RNA聚合酶E．细胞色素氧化酶 3有关DNA的半保留复制，若将两条链均有同位素标记的DNA分子置于无放射性标记的溶液中复制两代，试问所产生的4个DNA分子的放射性情况如何 A．四个分子均有放射性B．四个分子中，分别有一条链含有放射性 C．两个分子有放射性，两个分子无放射性D．四个分子均无放射性 4 DNA复制时，与核苷酸链5’－dTpApGpAp－3’互补的链是 A．5’—dTpCpTpAp－3’B．5’—dUpCpUpAp－3’C．5’—dGpTpGpAp－3’D．5’—dApTpCpTp－3’E．5’—dGpCpGpAp－3’ 5 关于大肠杆菌DNA聚合酶I下列说法错误的是 A．对复制及修复过程中的空隙进行填补B．有5’→3’核酸外切酶活性 C．有3’→5’核酸外切酶活性D．以dNTP为底物E．有5’→3’核酸内切酶活性 6 DNA连接酶作用是 A．催化DNA两条链间形成磷酸二酯键B．将螺旋解链 C．催化DNA链两段间形成磷酸二酯键D．去除引物，填补空缺E．催化DNA两条链间形成氢键 7下列哪种过程需要RNA引物A．RNA复制B．DNA复制C．RNA转录D．逆转录E．RNA翻译 8 关于DNA聚合酶I，错误的说法是 A．催化合成的方向是5’→3’B．具有修复损伤的能力C．催化冈崎片段的形成 D．具有核酸外切酶活性E．是原核生物细胞内含量最多的DNA聚合酶 9 DNA拓扑异构酶的作用是 A．将DNA双螺旋解链B．合成RNA引物C．稳定分开的双螺旋 D．将复制中不连续的两段链连接起来E．使DNA解链旋转时不致打结 10在DNA复制中，关于RNA引物错误的说法是 A．由引物酶合成B．合成方向5’→3’C．提供3’－OH末端作为合成新DNA链的起点 D．RNA酶将引物水解去除E．提供5’－P末端作为合成新DNA链的起点 11单链DNA结合蛋白的作用是 A．解开双链B．松弛DNA超螺旋C．稳定和保护单链模板D．合成冈崎片段E．合成RNA引物 12关于冈崎片段，下列说法错误的是
第十三章核酸 一、选择题 ⒈关于核苷酸的叙述，下列哪个为错误的？（） A、细胞中游离的核苷酸均为5’-核苷酸； B、核苷酸中的糖苷键均为C-N糖苷键； C、核苷酸 中的糖苷键均为β-糖苷键；D、核苷酸是含碱基的磷酸酯；E、碱基与糖环平面垂直 ⒉对DNA双螺旋结构的描述，下列哪个为错误的？（） A、两条链反向平行旋转； B、嘌呤与嘧啶碱基互补配对； C、维持双螺旋结构稳定的主要力是 氢键；D、DNA双螺旋结构具有多态性；E、碱基堆积形成分子中心的疏水区 ⒊对DNA超螺旋的叙述，下列哪个为错误的？（） A、在外加张力作用下，双螺旋DNA形成超螺旋； B、双螺旋DNA处于拧紧状态时形成正超螺 旋；C、细胞所有天然存在的DNA超螺旋均是正超螺旋；D、超螺旋DNA结构紧密有利于组装成染色体；E、负超螺旋比正超螺旋容易解链 ⒋关于tRNA的生理功能和结构，下列哪个为错误的？（） A、转运氨基酸，参与蛋白质的合成； B、tRNA Tyr及tRNA Pro可以作为RNA反转录的引物； C、 氨酰tRNA可调节某些氨基酸合成酶的活性；D、5’端为pG….或pA….结构；E、tRNA三级结构为倒L型 ⒌关于核酸变性的描述，下列哪个为错误的？（） A、紫外吸收值增加； B、分子黏度变小； C、共价键断裂，分子变成无规则线团； D、比旋光减 小；E、浮力密度升高 ⒍关于RNA分子，下列哪个为错误的？（） A、都是单链线形分子； B、单链回折可形成发夹结构； C、分子中双螺旋区占RNA分子的50%； D、在70℃以上时出现增色效应； E、RNA的Tm值较DNA低 ⒎胰核糖核酸酶水解RNA，产物是（） A、3’-嘧啶核苷酸； B、5’-嘧啶核苷酸； C、3’-嘧啶核苷酸和以3’-嘧啶核苷酸结尾的寡聚 核苷酸；D、5’-嘧啶核苷酸和以5’-嘧啶核苷酸结尾的寡聚核苷酸；E、3’-嘧啶核苷酸和5’-嘧啶核苷酸； ⒏双链DNA热变性后（） A、黏度下降； B、沉淀系数下降； C、浮力密度下降； D、紫外吸收下降； E、都不对 ⒐胸腺嘧啶除了作为DNA的主要组分外，还经常出现在下列哪种RNA分子中（） A、mRNA； B、tRNA； C、rRNA； D、hnRNA； E、snRNA ⒑RNA经NaOH水解，其产物是（） A、5’-核苷酸； B、2’-核苷酸； C、3’-核苷酸； D、2’-核苷酸和3’-核苷酸的混合物； E、 2’-核苷酸、3’-核苷酸的混合物和5’-核苷酸； ⒒对DNA片段作物理图谱分析，需要用（） A、核酸外切酶； B、DNAaseI； C、DNA连接酶； D、DNA聚合酶I； E、限制性外切酶 二、判断是非 ⒈若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpApC，则另一条链的碱基顺序为pGpApCpCpTpG。 ⒉若种属A的DNA Tm值低于种属B，则种属A的DNA比种属B含有更多的A-T碱基对。