《基因工程原理与技术》试题答案及评分标准
一、名词解释（本大题共5小题，每题2分，总计10分）
基因工程：是利用重组技术，在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对各种生物的核酸（基因）进行改造和重新组合，然后导入微生物或真核细胞内进行无性繁殖，使重组基因在细胞内表达，产生出人类需要的基因产物，或者改造、创造新的生物类型。限制性内切酶的Star活性：限制性内切酶的识别和酶切活性一般在一定的温度、离子强度、pH等条件下才表现最佳切割能力和位点的专一性。如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称为星号（*）活性。
T-DNA：是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA。该DNA片段上的基因与肿瘤的形成有关。
受体细胞：又称为宿主细胞或寄主细胞等，从试验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从试验目的讲是有应用价值和理论研究价值的细胞
克隆基因的表达：克隆基因的表达为人工修饰的外源基因导入宿主细胞中，在其中进行转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质的过程。
二、填空题（本大题共7小题，每空1分，总计20分）
1.属名的第一个字母；种名的前两个字母；株名
2.碱性磷酸酶；5’端的磷酸基团
3. 0?C、42?C
4. 复制起始位点、克隆位点、选择标记
5.northern 杂交或RT-PCR 、翻译、蛋白质
6. 细胞质、周质、细胞外
7. T-DNA区、vir区、Con区、,ori区
三、简答题（本大题共6小题，总计42分）
1.在序列5'-CGAACA TA TGGAGT-3'中含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序
列，该序列可能是什么? 并说明其原因？（6分）
答：回文序列是（3分）：5'-CA TA TG-3（3分），
2. 一个理想的载体应具备那些条件？（8分）
（1）能自我复制并能带动插入的外源基因一起复制（1分）；（2）具有合适的限制性内切酶位点。在载体上单一的限制性内切酶位点越多越好，这样可以将不同限制性内切酶切割后的外源DN A片段方便地插入载体（2分）；（3）具有合适的筛选标记。如抗药性基因等（1分）；（4）在细胞内拷贝数要多。这样才能使外源基因得以扩增（1分）；（5）载体的相对分子质量要小。这样可以容纳较大的外源DNA插入片段。载体的相对分子质量太大将影响重组体或载体本身的转化效率（1分）；（6）在细胞内稳定性高。这样可以保证重组体稳定传代而不易丢失（1分）；（7）具安全性（1分）。
3. 转化、转染、转导的异同？（6分）
Transformation (转化)：细菌接纳外源DNA而引入新的基因标记。（2分）Transduction (转导)：指噬菌体将细菌基因从一种细菌中转移到另一种细菌中。一个携带自身以及宿主基因的噬菌体称为转导噬菌体。也可指逆转录病毒获得和转移真核基因。（2
分）
Transfection (转染)：接受加入的DNA从而获得新的基因标记。（2分）
4. 某一质粒载体具有Tet r和Kan r的表型，在Kan抗性基因内有一Bgl I的切点。现用Bgl I切割该载体进行基因克隆，问：(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素? (2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型? (3)如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?（6分）
（1）Tet r（2分）; （2）Tet r and Kan s（２分）；（3）在含有Tet和Kan中不能生长的重组子，却能在仅含有Tet的生长的为理想的重组子（２分）。
5. 外源DNA与载体的连接方式有哪几种？列举两种筛选重组子的方法。（8分）
连接方式有（6分）：1）. 载体自身环化连接，2）载体之间互相连接
，3）插入片段互相连接，4）一个载体与几个插入片段重组，5）几个载体与一个插入片段重组，6）一个载体与1个插入片段重组
筛选方式（2分）：蓝白斑筛选法，抗生素筛选法。或营养标记、电泳检测、测序检测等等。
6. 以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因，并使之在大肠杆中表达，通常遇到的问题是什么？（8分）
要使动物中编码激素的基因在大肠杆菌中表达，通常遇到的问题有：
1）、必须利用原核细胞的表达调控原件。如细菌的RNA聚合酶不能识别真核生物的启动子。（2分）
2）、大多数真核基因有内含子，这些内含子在转录后从前体mRNA中被切除而形成成熟mRNA。细菌细胞没有这样的机制来去除内含子。（2分）
3）、没有翻译后的加工和修饰系统。（2分）
4）、产生的真核生物的蛋白质产物可以被细菌的蛋白酶所识别和降解。（2分）
四、判断题（本大题共7小题，每题2分，总计14分）
1、质粒的构型中，线性L型是最简单的构型，因而，电泳时，泳动的速度最快。(×)
2、甲基化酶和DNA连接酶均需要引物。(×)
3、转化子就是重组子。(× )
4、重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和过氧化物酶。(×)
5、载体自主复制是基因工程扩增基因的依据。(√)
6、只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达。(× )
7、启动子与克隆基因间的距离对基因表达有影响。(√)
五、综合题（本大题共1题，总计13分）
（1）限制酶（1分）、大肠杆菌等微生物（1分）、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割（1分）
（2）限制性内切（1分）、DNA（1分）、分别与运载体结合（1分）、转化（1分）、复制（1分）、带有目的基因的DNA片段（1分）
（3）提取目的基因（1分）、目的基因与运载体结合（1分）、将目的基因导入受体细胞（1分）、转化受体细胞的大量繁殖（1分）、目的基因的检测和表达（1分）。
无菌技术操作评分标准 特别备注
无菌技术操作 一、无菌持物钳(镊)使用法 （一）目的 取用或者传递无菌敷料、器械等 1、无菌持物钳(镊)不能夹取未灭菌的物品，也不能夹取油纱布(条 2、取远处物品时，应当连同容器一起移互物品旁进行操作；
3、无菌钳(镊)使用时不能低于腰部； 4、打开包后的干持物筒、持物钳使用的有效期《4小时； 5、不可直接从盖孔中取、放无菌持物镊(钳)； 6、避免无菌持物镊(销)在空气中暴露过 二、无菌容器使用法 (一)目的 保持已经灭菌的物品处于无菌状态。 (二)注意事项 1、使用无菌容器时，不可污染容器盖内面、容器边缘及内面； 2、无菌容器寸丁开后，须记录开启的日期、时间，有效使用期为24小时； 3、取、放无菌物品后，立即将无菌容器盖好，避免容器内无菌物品在空气中暴露过久； 4、手持无菌容器时，应托住容器底部，手指不可触及容器边缘及内面。— 三、铺无菌盘法
(一)目的 将无菌巾铺在清洁干燥的治疗盘内，形成无菌区，以供实施治疗时放置无菌物品使用。 (二)注意事项 1、操作前必须规范洗手； 2、操作区域须清洁干燥，无菌巾避免潮湿， 3、手及非无菌物品不可触及无苗面； 符合无菌技术操作原则； 4、注明铺无菌盘的日期、时间，无菌盘使用的有效期为4小时，已开启过的无菌治疗包 小时内有效； 5、灭菌化学指示物未变色或包布潮湿、破损、 四、戴无菌手套 (一)目的 灭菌时间过期时不可使用。 1、执行无菌技术操作或者接触无菌物品时须戴无菌手套；
2、进行严格的医疗护理操作时确保无菌效果，保护患者和医务人员免受感染． (二)注意事项 1、戴手套时须注意未戴手套的手不可触及手套的外面，戴手套的手不可触及未戴手套的手或另一手套的里面； 2、戴手套后如发现有破洞，应立即更换； 3、脱手套时，应翻转脱下． 4、注意修剪指甲以防刺破手套，手套的大小要合适。 5、戴手套后双手要始终保持在腰部或操作台面以上视线范围内的水平。 皮内注射技术操作评分标准
制度名称 技术板块人员绩效考核 编号 执行部门 制作 审核 批准 技术人员绩效考核方案 目的 1、 为加强和提高本部门的绩效和公司绩效，增强公司活力，改善员工的工作表现，提高员工的满意度和成 就感，最终实现公司 的经营目标，特制订本方案。 2、 依据本方案实施的绩效考核结果将作为员工工薪调整、人员晋升、降级、辞退、培训等依据。 二、适应范围 本方案适应于技术人员。 考核周期 月度考核。对当月工作表现进行考核，考核时间为下个季度的 1 — 5日，遇节假日顺延。 年度考核。考核期限为本年度一月至十二月，考核时间为下一年度 1月的5—15日。 考核内容及指示说明 技术人员考核分为：业绩考核和行为考核两个部分，（考核项目和目标要求由上级根据每月的工作情 况不定 安排）如下表： 考核期间: 年 月 1、 2、 四
5 项目成本 日常工作 服务质量 加权合计 10% 控制 10% 5% 考核项目 自主工作 能力 项目成本掌控 情况 日常交办工作 完成情况 客户及销售 工作能力 专业技能 业绩及知识的 指标掌握 100% 本岗位胜 任度 执行力 A.成本控制合理，公司资源利用合理 并适当节约开支的；（10分+5分） B.成本控制未超出概预算；（10 分） C.成本超支，有正当原因的；（5 分） D.成本控制不当，超出预算成本； （0分） A.主动完成交办工作; B.被动完成交办工作; C.交办工作完成较差, 资源协助的；（2分） D.无法完成交办工作; （10 分） （5 分） 需要额外 （0 分） 投诉一次扣一分，甲方客户表扬的 加5分； 权重 10% 5% 5% 5% 评分标准 50% 得分 50% A.无需督促，主动完成工作并积极服务客户；（10 分） B.需要督促，被动工作，可以服务客户，需要上级协调资 源；（5分） C.工作被动，马虎，没有监督不工作，不提供资源不工作 的；（0分） A.熟练掌握专业技能及知识，具有相应专业认证证书 的（5分） B.基本掌握专业技能及知识；（3分） C.有相关专业基础，可以被培训的；（1分） A.具有本岗位或相关岗位工作经验三年，能完成本岗位工 作；（5分） B.具有相关岗位工作经验，基本完成岗位工作；（3 分） C.具有相关岗位工作经验，无法完成本岗位工作；（0分） A.能够完成既定目标，并能主动解决难题； B.可以完成既定目标，需要主管或他人协助; C.执行能力欠缺，需要帮助才可完成任务； （5 分） （3 分） （1 分）
护理技术操作考核评分标准目录 第一项一般洗手操作考核评分标准 (1) 第二项无菌技术操作考核评分标准 (2) 第三项生命体征监测技术操作考核评分标准 (3) 第四项口腔护理技术操作考核评分标准 (4) 第五项鼻饲技术操作考核评分标准 (5) 第六项女病人导尿技术操作考核评分标准 (6) 第七项胃肠减压技术操作考核评分标准 (7) 第八项大量不保留灌肠技术操作考核评分标准 (8) 第九项鼻塞（鼻导管）吸氧技术操作考核评分标准 (9) 第十项换药技术操作考核评分标准 (10) 第十一项雾化吸入技术操作考核评分标准 (11) 第十二项血糖监测技术操作考核评分标准 (12) 第十三项口服给药技术操作考核评分标准 (13) 第十四项密闭式输液技术操作评分标准 (14) 第十五项密闭式静脉输血技术操作考核评分标准 (15) 第十六项静脉留置针技术考核评分标准 (16) 第十七项静脉采集血标本技术操作考核评分标准 (17) 第十八项静脉注射技术操作考核评分标准 (18) 第十九项经外周插管的中心静脉导管（PICC）护理技术操作考核评分标准 19 第二十项动脉血标本的采集技术操作考核评分标准 (20) 第二十一项肌内注射技术操作考核评分标准 (21) 第二十二项皮内注射技术操作考核评分标准 (22) 第二十三项皮下注射技术操作考核评分标准 (23) 第二十四项酒精拭浴降温技术操作考核评分标准 (24) 第二十五项心肺复苏技术操作考核评分标准 (25) 第二十六项经鼻/口腔吸痰法技术操作考核评分标准 (26) 第二十七项气管切开（呼吸机）病人吸痰技术操作考核评分标准 (27) 第二十八项心电监测技术操作考核评分标准 (28) 第二十九项血氧饱和度监测技术操作考核评分标准 (29) 第三十项输液泵／微量输注泵的使用技术考核评分标准 (30) 第三十一项除颤技术操作考核评分标准 (31)
Chapter I Introduction 1)什么是基因？基因有哪些主要特点？ 基因是一段可以编码具有某种生物学功能物质的核苷酸序列。 ①不同基因具有相同的物质基础.②基因是可以切割的。③基因是可以转移的。④多肽与基因之间存在 对应关系。⑤遗传密码是通用的。⑥基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。 2)翻译并解释下列名词 genetic engineering遗传工程 gene engineering基因工程：通过基因操作，将目的基因或DNA片段与合适的载体连接转入目标生物获得新的遗传性状的操作。 gene manipulation基因操作：对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。 recombinant DNA technique重组DNA技术 gene cloning基因克隆：是指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程，其目的在于获得大量的基因拷贝，在技术上主要包括载体构建、大肠杆菌遗传转化、重组子筛选和扩大繁殖等环节。 molecular cloning分子克隆 3)什么是基因工程？简述基因工程的基本过程？p2 p4 4)简述基因工程研究的主要内容？p5 5)简述基因工程诞生理论基础p2和技术准备有哪些p3？ 6)基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同？为什么？ 否，密码子简并性 7)举例说明基因工程技术在医学、农业、工业等领域的应用。 医学:人胰岛素和疫苗 农业:抗虫BT农药 工业:工程酿酒酵母
Chapter ⅡThe tools of trade 1)什么是限制性核酸内切酶？简述其主要类型和特点？ 是一种核酸水解酶，主要从细菌中分离得到。类型特点p11 2)II型核酸内切酶的基本特点有哪些p12-14？简述影响核酸内切酶活性的因素有哪些 p14？ 3)解释限制酶的信号活性？抑制星号活性的方法有哪些？ 4)什么是DNA连接酶p15？有哪几类p16？有何不同p16？ 5)什么叫同尾酶、同裂酶p12？在基因工程中有何应用价值？ 同裂酶：识别位点、切割位点均相同，来源不同。在载体构建方面往往可以取得巧妙的应用。应用较多的同裂酶比如Sma1和Xma1，它们均识别CCCGGG，但前者切后产生钝末 同尾酶：来源各异，识别序列各不相同，但切割后产生相同的粘性末端。由同尾酶(isocaudomer)产生的DNA片段，是能够通过其粘性末端之间的互补作用彼此连接起来的。 6)什么是DNA聚合酶？根据DNA聚合酶使用的模板不同，可将其分为哪两类？各有什么活 性？p17-18 聚合酶：在引物和模板的存在下，把脱氧核苷酸连续地加到双链DNA分子引物链的3‘-OH 末端，催化核苷酸的聚合作用。 ①依赖于DNA的DNA聚合酶 ②依赖于RNA的DNA聚合酶 7)Taq DNA聚合酶：是一种从水生嗜热菌中分离得到的一种耐热的dna聚合酶，具有5-3聚 合酶活性和3-5外切酶活性，在分子中主要用于PCR。 逆转录酶：RNA指导的DNA聚合酶， 8)Klenow片段的特性和用途有哪些？举例说明。p17 9)名词解释：S1核酸酶、核酸外切酶、磷酸化酶激酶、 甲基化酶
基因工程原理练习题及其答案 一、填空题 1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。 3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。 4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。 5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。 7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。 9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。 10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。 11．EDTA是____________离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。 14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。 16．基因工程中有3种主要类型的载体：_______________、_____________、______________。 17．就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 18．一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测 不出质粒，这种现象叫。 19．pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于，它的四环素抗性基因来自于，它的氨苄青霉素抗性基因来自于。 20．Y AC的最大容载能力是，BAC载体的最大容载能力是。 21．pSCl01是一种复制的质粒。 22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和两种质粒改造而来。它的复制子来自，Amp 抗性基因则是来自。 23．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是；二是。 24．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是 和。 25．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来自，最大的克隆片段达到kb。 26．野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1) (2) (3) 。 27．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是，而来自噬菌体的主要结构是。 28．λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基 因组的的范围内。 29．在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是 。 30．用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc， 其目的是。 31．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) (3) (4) 。 32．Clark发现用Taq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出 碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的。 33．在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在 。 34．乙醇沉淀DNA的原理是。 35．假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件：
专业技术人员年度考核评分表（教学为主型填写） （年度） 注：教学为主型，指聘任在专业技术岗位上的教育教学综合部门中的专职教学人员。此类又根据工作性质和内容的不同，分为三组：A组（一二三五系的专职教学人员），B组（四系的专职教学人员），C组（思政部、人文社科部、基础部的专职教学人员）。
专业技术人员年度考核评分表（科研为主型填写） （年度） 注：1．科研为主型，指聘任在专业技术岗位上的信息安全研究所人员。 2．标“*”项目为必要观测项目，其他为参考观测项目。
专业技术人员年度考核评分表（管理为主型填写） 教育教学综合部门的管理为主型专技人员□（年度） 姓名部门职级 观测项目得分是否达标观测项目得分是否达标 师德师风*课外教学/ 课堂教学*教研教改/ 科学研究*思政教育/ 部门建设*社会服务/总分 信息安全研究所的管理为主型专技人员□（年度） 姓名部门职级 观测项目得分是否达标观测项目得分是否达标 师德师风*课外教学/ 科学研究*教研教改/ 部门建设*思政教育/ 课堂教学社会服务/总分 姓名部门职级 达标方式说明是否达标考核要求和标准 除考核管理工作外，每年科学研究分值须达到 20分以上；或每年撰写与工作相关有一定专业 水平的报告、总结或方案等，其中高级职称的总 计一般不少于2万字，中级职称的总计一般不少 于1万字，初级职称的总计一般不少于0.5万字。 注：1．管理为主型，指聘任在专业技术岗位上的各部门领导班子成员，以及聘任在专业技术岗位上的党政教业务管理部门（除信息安全研究所外）人员。 2．标“*”项目为必要观测项目，其他为参考观测项目。 精心整理，仅供参考编辑文案使用，请按实际需求再行修改编辑 2020年2月17日
九病区护理操作流程图与评分标准 一、备用床 （一）备用床流程图 ↓ 移开床旁桌20cm，椅放于床尾 ↓ 湿扫床褥→头尾掉换翻转床褥，卷放于床尾椅上→翻转床垫→铺好床褥↓ 对齐中线→展开大单→先床头后床尾再中间铺好近侧大单→转至对侧同 法铺好 ↓ 被套放于床头展开铺于床上→打开开口→“S”形放入棉被→角线吻合铺 平套好→系带 ↓ 棉被两侧与床沿平齐向内折，床尾塞入床垫下 ↓ 套好枕套→角、线吻合→开口背门→放置床头棉被上。 ↓
（二）备用床考核评分标准 操作所用时间7min 成绩 评分标准： ①本操作以100分计算，80分达标。 ②一般情况下，扣分以2分为单位，即凡有错误或出现漏掉某程序并影响下一程序时、动作没有达到轻稳、操作未节力、清洁物品落地、操作过程中用手触摸头面部、辅助动作等，每次扣2分。但严重违反操作规程，如没有翻转褥垫、棉被
二、暂空床 （一）暂空床流程图 ↓ 移开床旁桌20cm，椅放于床尾 ↓ 湿扫床褥→头尾掉换翻转床褥，卷放于床尾椅上→翻转床垫→铺好床褥↓ 对齐中线→展开大单→先床头后床尾再中间铺好近侧大单→必要时铺橡胶单及中单，橡胶单上缘距床头45~50cm，中单完全覆盖橡胶单→ 转至对侧同法铺好 ↓ 被套放于床头展开反铺 ．．于床上→棉被对齐被套封口处放好并展开→从床头卷向床尾翻出铺平→系带 ↓ 棉被两侧与床沿平齐向内折，床尾塞入床垫下，再四折于床尾↓ 套好枕套→角、线吻合→开口背门→放置床头大单上。 ↓
（二）暂空床考核评分标准 姓名操作所用时间8min 成绩 ①本操作以100分计算，80分达标。 ②一般情况下，扣分以2分为单位，即凡有错误或出现漏掉某程序并影响下一程序时、动作没有达到轻稳、操作未节力、清洁物品落地、操作过程中用手触摸头面部、辅助动作等，每次扣2分。但严重违反操作规程，如没有翻转褥垫、棉被里外不平等，则按不达标处理。 ③超时者每超过1分钟扣2分。
《医用基因工程》复习思考题 第一章基因和基因组及基因工程的概念 一、名词概念 ①移动基因(插入序列；转位子)；②断裂基因；③RNA剪辑； ④内含子(间隔序列)与表达子；⑤重叠基因；⑥重复序列；⑦假基因；⑧启动子与终止子；⑨起始位点、终止位点。 二、讨论题 1.什么叫基因?何谓基因的新概念?基因的主要功能是什么? 2.一种基因一种酶的提法妥否？ 3.基因密码子三联体间是否存在着逗号？ 4.基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同？为什么？ 5.何谓转位子和转位作用?转位的后果如何? 6.基因中最小的突变单位和重组单位是什么？ 7.基因工程应包括哪些内容？何谓基因工程的四大里程碑和三大技术发明? 8.真核细胞基因组中常有内含子存在，能否在原核细胞获得表达？能，为什么？不能，为什么？ 第二章基因工程中常用的工具酶 1.什么是限制性核酸内切酶？ 2.什么是R/M现象？如何解释？ 3.II型核酸内切酶的基本特点有哪些？ 4.影响II型核酸内切酶活性的因素有哪些？如何克服和避免这
些不利因素？ 5.DNA连接酶有哪两类？有何不同？ 6.甲基化酶有哪两类？有何应用价值？ 7.什么叫同尾酶、同裂酶？在基因工程中有何应用价值？ 8.平末端连接的方法有哪些？(图示) 9.Klenow酶的特性和用途有哪些？举例说明。 10.反转录酶的特性有哪些？有何应用价值？ 11.列举碱性磷酸酶BAP/CAP的应用之一。 12.列举末端核苷酸序列转移酶的应用之一。 13.质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？ 14.基因片段与载体的平末端连接的方法有哪些？ 15.用寡核苷酸和衔接物DNA的短片段连接时为使基因内部的切点保护，常用何种办法解决？ 第三章基因克隆载体 1.基因工程常用的载体有哪5种？其共同特性如何？ 2.什么是质粒？质粒分哪几种？有哪两种复制类型，质粒的分子生物学特性有哪些？ 3.质粒存在的三种形式是什么？ 4.分离质粒的基本步骤有哪些？ 5.分离纯化质粒的方法有哪几种？简述CsCl密度梯度(浮密度)分离法、碱变性法的原理，如何选择合适的分离方法？ 6.作为理想质粒载体的基本条件有哪些？ 7.什么叫插入失活，举例说明之。 8.构建pBR322质粒载体的亲本质粒有哪些？ 9.什么叫插入型和替换型噬菌体载体?插入型和替换型入噬菌体
精品文档 《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准 一、名词解释（本大题共5小题，每题2分，总计10分） 限制性内切酶的Star活性：限制性内切酶的识别和酶切活性一般在一定的温度、离子强度、pH 等条件下才表现最佳切割能力和位点的专一性。如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称为星号（*）活性。 受体细胞：又称为宿主细胞或寄主细胞等，从试验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从试验目的讲是有应用价值和理论研究价值的细胞 T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA 该DNA片段上的基因与肿瘤的形成有关。 克隆基因的表达：指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过 程。典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质的过程。 a -互补：3 -半乳糖苷酶（B -gal）是大肠杆菌lacZ基因的产物，当培养基中的一种色素元（X-gal ）被3 -gal切割后，即产生兰色。大肠杆菌的3一半乳糖苷酶由1021个氨基酸构成，只有在四聚体状态下才有活性。大肠杆菌lacZ基因由于a区域缺失，只能编码一种在氨基端截短的多肽，形成无活性的不完全酶，称为a受体；如果载体的lacZ 基因在相反方向缺失，产生在羧基端截短的多肽，这种部分3 -半乳乳糖苷酶也无活性。 但是这种蛋白质可作为a供体。受体一旦接受了供体（在体内或体外），即可恢复3 -半乳糖苷酶的活性，这种现象称为a互补. 由载体产生的a供体能够与寄主细胞产生 的无活性的a受体互作形成一种八聚体，从而恢复3 -半乳糖苷酶的活性。如果培养基 中含有X-gal的诱导物IPTG时，凡是包含有3 -半乳糖苷酶活性的细胞将转变为蓝色，反之不含有这种酶活性的细胞将保持白色。 、填空题（本大题共7小题，每空1分，总计20 分） 1、质粒按自我转移的能力可分为—接合型—质粒和—非接合型—质粒；按复制类型可分为松 弛性质粒和严紧型质粒。 2、为了防止DNA的自身环化，可用碱性磷酸酶除去双链DNA 5'—端的磷酸基团 。 3、人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为_0匸—时吸附DNA在温度为_42乜__ 时摄人 DNA 4、仅克隆基因（DNA片段）用途而言，最简单的质粒载体也必需包括三个组成部分： 复制区：含有复制起点__、选择标记：主要是抗性基因 ________ 、__克隆位点：便于外源_ DNA的插入_。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 5、Southern blotting 杂交能够检测外源基因是否整合进受体细胞基因组；外源基 因的转录表达需要通过—northern_杂交或_ RT-PCR_来揭示；而外源基因_____ 翻 译—水平的表达则需通过免疫学检测或Western杂交才能揭示，其使用的探针是 —蛋白质____ 。 6、外源蛋白在大肠杆菌中的表达部位有—细胞质_、_ —周质_、一细胞外 _。 7、Vir区基因的激活信号有三类，它们是—酚类化合物_、_中性糖和酸性糖_、— _ pH 值_。 简答题（本大题共7 小题，总计50 分） 1欢迎下载
目录 一、手卫生 (3) 二、无菌技术 (5) 三、生命体征监测技术 (6) 四、口腔护理技术 (11) 五、鼻饲技术 (12) 六、导尿技术及护理 (13) 七、胃肠减压技术 (15) 八、灌肠技术……………………………………………………………………….. 九、氧气吸入技术…………………………………………………………………... 十、换药技术 十一、雾化吸入疗法 十二、血糖监测 十三、口服给药法 十四、密闭式输液技术 十五、密闭式静脉输血技术 十六、静脉留置针技术 十七、静脉采血技术 十八、静脉注射法 十九、经外周插管的中心静脉导管（PICC）护理技术 二十、动脉血标本的采集方法 二十一、肌内注射技术
二十二、皮内注射技术 二十三、皮下注射技术 二十四、物理降温法 二十五、心肺复苏基本生命支持法 二十六、经鼻/口腔吸痰法 二十七、经气管插管/气管切开吸痰法二十八、心电监测技术 二十九、血氧饱和度检测技术 三十、输液泵/微量输注泵的使用技术三十一、除颤技术 三十二、轴线翻身法 三十三、患者搬运法 三十四、患者约束法 三十五、痰标本采集法 三十六、咽拭子标本采集法 三十七、洗胃技术 三十八、“T”冠引流护理 三十九、造口护理技术 四十、膀胱冲洗的护理 四十一、脑室引流的护理 四十二、胸腔闭式引流的护理 四十三、产时会阴消毒技术 四十四、早产儿暖箱的应用
四十五、光照疗法 四十六、新生儿脐部护理技术 四十七、听诊胎心音技术 四十八、患者入/出院护理 四十九、患者跌倒的预防 五十、压疮的预防及护理 护理技术操作考核评分标准
护理技术操作考核评分标准
基因工程复习题 题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。 第一章绪论 1.名词解释： 基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。 遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。狭义：基因工程。 克隆：无性(繁殖)系或纯系。指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。 2．什么是基因克隆及基本要点? 3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。 A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用； C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。 4.基因工程研究的主要内容是什么？ 基础研究： 基因工程克隆载体的研究 基因工程受体系统的研究 目的基因的研究 基因工程工具酶的研究 基因工程新技术的研究 应用研究：
基因工程药物研究 转基因动植物的研究 在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究 第二章基因克隆的工具酶 1.名词解释： 限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。 回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。 同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。 同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列 黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。 平末端：DNA片段的末端是平齐的。 限制性核酸内切酶的酶活性单位（U）：在酶的最适反应条件下，在50μl容积中，60分钟内完全切割1g DNA所需的酶量为1个酶活性单位（unit 或U） 限制性核酸内切酶的星活性：指限制性内切酶在非标准条件下，对与识别序列相似的其它序列也进行切割反应，导致出现非特异性的DNA片段的现象。 连杆（linker）：化学合成的8～12个核苷酸组成的寡核苷酸片段。以中线为轴两边对称，其上有一种或几种限制性核酸内切酶的识别序列，酶切后可产生一定的粘性末端，便于与具有相同粘性末端的另一DNA片段连接。 衔接头（adaptor）：化学合成的寡核苷酸，含有一种以上的限制性核酸内切酶识别序列。其一端或两端具有一种或两种内切酶切割产生的黏性末端。 底物位点优势效应：酶对同一个DNA底物上的不同酶切位点的切割速率不同。 激酶：对核酸末端羟基进行磷酸化的酶。 2.说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 用属名第一个字母和种名的头两个字母组成的3个字母斜体的略语表示寄主菌的物种名以
专业技术人员考核办法 考核是专业技术队伍建设的一项基础性工作，是专业技术职务任职资格评聘的主要依据，是深化人事制度改革的重要内容。为激励广大专业技术人员开拓进取，勇于创新，根据国家有关规定，结合集团公司实际，制定本实施意见。 一、考核目的 积极引入竞争，实行专业技术职务聘任制，提高专业技术人员素质，充分调动专业技术人员工作的积极性、主动性和创造性。 二、考核对象 考核对象为集团公司在岗的工程类各级专业技术人员。 三、考核组织 专业技术人员考核工作由集团公司考核领导小组统一负责，根据工作需要可设专业技术人员考核组，负责专业技术人员考核的具体工作。 四、考核内容 考核工作以专业技术岗位职责为依据，坚持德才兼备的原则，按照德、能、勤、绩四项内容进行全面考核，重点考核专业技术能力、水平和工作实绩。 德：指政治表现，思想作风，职业道德，团结协作和奉献精神等； 能：指学术技术水平，技术创新能力、履行岗位职责和解决实际问题能力等； 勤：敬业精神，事业心，责任感等； 绩：指工作效率、质量和贡献等。 五、考核方法 坚持定性与定量相结合的考核原则，把专业获奖、业绩政绩、发表论文等作为评分条件的重要指标，保证考核结果的准确性，逐步建立科学的考核评价体系。 六、考核程序 （1）本人述职。专业技术人员对照岗位职责，实事求是地写出下少于1500字的学习、思想、业务工作总结。拟晋高级专业技术职务人员还必须接受考核组的提问。 （2）民主测评。考核组要在一定范围内进行民主测评。 （3）征求意见。考核组要深人基层、了解情况、广泛征求各方面意见，特别是同行专家意见。 （4）汇总评议。考核组依据民主测评情况和有关意见并进行评仪，写出评语，确定评分结果。 （5）情况反馈。将考核结果反馈给被考核人，根据考核结果，提出改进意见，指
技术员岗位职责及岗位考核标准 篇一：项目技术员岗位职责考核细则 项目技术员岗位职责考核细则 同煤集团宏远公司李树平项目部-------技术员标准考核细则 同煤集团宏远公司李树平项目部-------技术员标准考核细则 项目技术员岗位职责考核细则 同煤集团宏远公司李树平项目部-------技术员标准考核细则 同煤集团宏远公司李树平项目部-------技术员标准考核细则 项目技术员岗位职责考核细则 同煤集团宏远公司李树平项目部-------技术员标准考核细则 篇二：岗位工作标准、权限、职责-技术员 技术员 工作职责： 1、根据生产任务，编制生产计划，了解生产计划的完成情况，累计原始资料，制订生 产任务，分析总结。 2、经常检查现场安全生产操作规程的执行情况。 3、及时上报事故经过，分析事故原因；严格执行信息上报制度。 4、熟悉掌握锅炉设备的机械性能，并对锅炉的检验、维修编制检修标准，提出整修意见。 5、指导、监督本车间职工进行技术、安全业务学习。 6、负责管理车间机械设备的技术资料，并对设备的使用进行指导。 7、协助车间行政领导管理车间。 权限： 1、有权对工区的各项生产任务完成情况进行检查、监督。 2、有权对车间所有工种的安全、技术业务学习情况进行检查、考试。 3、有权对各工种安全作业卡死制度、操作规程的执行情况进行检查、考核。 4、有权制止职工的违章违纪行为。 具体要求： 1、定期组织职工学习安全作业卡死制度及操作规程。 2、按时完成车间生产任务的编制、总结。 3、定期对车间所属机械设备进行检查，并完善机械设备台帐。 4、按时完成中心、车间布置的生产、技术任务。 达到标准： 1、锅炉设备技术运行状态安全、可靠、经济。 2、机械设备台帐齐全、准确，并保持有延续性。 3、对职工技术、业务学习能给予指导及帮助。
第一章医院和住院环境 一、选择题 （一）A1型题 1、不适宜患者休养的环境是 A、保持安静，避免噪声 B、床上用物保持清洁平整 C、手术室室温保持在22 – 24 0C D、定时开窗通风，每次30 min E、墙壁可用红颜色调节情绪 2、对口头医嘱的描述正确的是 A、护士向医生复述一遍即可执行 B、抢救完毕，请医生及时补写医嘱与处方 C、任何时候均可执行口头医嘱 D、任何时候均不可执行口头医嘱 E、医生提出口头医嘱应立即执行 3、急诊观察室留观时间一般为 A、1 - 3天 B、 3 - 7天 C、7 – 14 天 D、14 - 21天 E、21 - 30 天 4、一般病室冬季温度保持在 A、12 – 16 0C B、16 – 18 0C C、18 – 22 0C D、22 – 24 0C E、24 - 26 0C 5、一般病室相对湿度保持在 A、30 % - 40 % B、40 % - 50 % C、40 % - 60 % D、50 % - 60 % E、50 % - 70 % 6、产房室温宜保持在 A、1 - 16 0C B、16 - 18 0C C、18 - 22 0C D、22 – 24 0C E、24 – 26 0C 7、床间距不应少于 A、0.5m B、1m C、1.5m D、2m E、2.5m 8、铺备用床的目的是 A、保持病室整洁，准备接收新患者 B、迎接新患者 C、供暂时离床的患者使用 D、保证患者安全、舒适、预防并发症 E、避免被褥被血或呕吐物污染 9、麻醉护理盘的无菌盘内所放物品不包括 A、吸痰导管 B、开口器 C、压舌板 D、输氧导管 E、手电筒 10、病床单位的设备不包括 A、床旁桌 B、床褥 C、屏风 D、床垫 E、床旁椅 11、铺床时移开床旁桌离床约 A、10 cm B、15 cm C、20 cm D、25 cm E、30 cm 12、铺床时移床旁椅至床尾正中，距床尾约 A、10 cm B、15 cm C、20 cm D、25 cm E、30 cm 13、备用床盖被上端距床头 A、5 cm B、10 cm C、15 cm D、20 cm E、与床头平齐 14、对枕头的描述不正确的是 A、枕头四角要充实 B、备用床的枕头平放于床头盖被上 C、备用床的枕头开口背门 D、麻醉床的枕头平放于床头盖上 E、暂空床的枕头开口背门 15、铺麻醉床中部橡胶单，其上端距床头
机加产品事业部技术人员绩效考核办法 1、目的 为了建立和完善我事业部技术人员绩效考核体系和激励与约束机制，对技术人员进行客观、公正的评价，并通过此评价合理的进行价值分配，以此来提高广大技术人员工作积极性，特制定本办法。 2、适用范围 本办法适用于机加产品事业部全体技术研发人员及技术施工组成员。 3、考核内容 考核共分两部分：一是月度绩效考核，考核成绩与月效益工资和技术岗位晋级挂钩；二是事业部技术创新项目绩效考核，考核成绩与部门项目津贴和技术岗位晋级挂钩。考核内容有：工作业绩；工作能力；工作态度 4、月度绩效考核办法（百分制考核） 4.1、考核人员：技术人员考核由事业部技术主管负责制，技术主管考核后报事业部负责人批准后发放。 4.2、月度考核办法 4.2.1工作业绩考核（权重80%） 工作业绩考核包括：即时工作任务单、日常安排的无单任务和出差量化 4.2.1.1完成工作的任务指标（分值20分，分优秀20分、良好15分、一般10分） 技术研发人员如无特殊（全考核期休假、严重不服从安排，给生产经营活动造成重大影响）状况的发生，能完成职责内的各项工作，完成工作的任务指标保底分值为10分，其余分数根据接受即时任务单、上级交办的工作及自主性工作完成的总量多少排序后按优秀、良好、一般考核。
技术施工组人员根据接受任务实动工时考核，实动工时大于等于200H得分20分；实动工时大于等于150H得分15分；实动工时大于等于100H得分10分；实动工时小于100H得分5分 4.2.1.2完成工作的质量指标（分值40分） 对完成工作任务指标得分大于等于保底分值的，进行工作质量指标考评。对工作中未出现重大质量事故（如设计产品未满足客户要求、造成批量零件报废、给公司造成较大经济损失、产品质量遭到顾客投诉的），技术人员工作的质量指标考核保底分值按完成工作的任务指标中的优秀、良好、一般分别对应为35分、32分、29分。其余分数按：能出色、准确、无任何差错完成任务加5分；工作质量尚好，但还可以加强加4分；工作疏忽，偶有小差错加3分；工作质量不佳，常出差错（但未造成损失）不加分。 4.2.1.3完成工作的效率指标（分值20分） 对完成工作任务指标得分大于等于保底分值的，进行工作效率指标考评。对无特殊（严重超期，对生产经营造活动造成一定影响）情况发生的，效率指标保底分值按任务指标中的优秀、良好、一般对应为15分、13分、11分。其余分数按：能积极、主动按期完成任务的加5分；在督促下偶而不能按期完成（延期3天以内，且未对生产造成影响）加3分；延期3~5天，且对生产造成影响的加1分；延期5天以上，且对生产造成影响的不加分。 4.2.2工作能力考核（权重10%） 4.2.2.1具有一定的专业技能，足以应付本职工作的10分； 4.2.2.2专业技能一般，但对完成任务尚无障碍的7分； 4.2.2.3专业技能稍感不足，完成任务需请教他人的5分； 4.2.2.4对工作必须技能不熟悉，日常工作难以完成的5分以下。
口腔护理技术操作评分标准 科室姓名考试日期监考人得分 项目分 值 技术操作流程与标准 评分 得分备注 A B C D 操作 前准备15 1.着装整洁，洗手，戴口罩。 2.准备用物：治疗盘、治疗碗（2个）、弯血管钳、 镊子、压舌板、吸水管、纱布、治疗巾、弯盘、棉 签、液体石蜡油、1％龙胆紫、手电筒、开口器（必 要时）。 3.用物准备3分钟。 5 8 2 4 6 1 3 4 2 2 评估 5 1.了解口腔情况及有无义齿等。 2.了解患者病情及合作程度 3 2 2 1 1 操 作流程70 1.备齐用物，携至患者床旁，核对床号、姓名。 2.向患者解释操作目的及方法，取得合作。 3.安全与舒适：病人体位舒适，病房环境整洁安全。 4.协助患者头偏向护士侧，铺治疗巾于患者颌下及 枕上，弯盘置于患者口角旁。 5.观察口腔有无充血、溃疡，协助清醒患者用温水 漱口。 6.擦净口唇，用压舌板轻轻撑开左侧颊部，用血管 钳夹棉球擦洗上下齿左外侧面，由内向门齿纵向擦 拭。 7.同法擦洗右外侧面。 8.嘱患者张开上下齿，擦洗牙左上内侧面、左上咬 合面、左下内侧面、左下咬合面，擦洗左侧颊部。 9.同法擦洗另一侧，擦洗舌面及硬腭部（每个棉球 只擦一面，棉球以不滴水为宜）。 10.擦洗完毕，帮助患者用吸水管漱口（昏迷患者严 禁漱口），撤去弯盘，擦口唇周围，撤去治疗巾。 11.用手电筒检查口腔，有口腔粘膜溃疡时，遵医嘱 给适当药物，口唇干裂涂石蜡油。 12.协助患者取舒适卧位，整理床单位。 13.交代注意事项。 14.整理用物，洗手。 3 5 5 5 3 6 6 6 7 6 5 3 5 5 2 4 4 4 2 5 5 5 5 5 4 2 4 4 1 3 3 3 1 4 4 4 3 4 3 1 3 3 2 2 2 3 3 3 1 3 2 2 2 评价15 1.动作轻柔，准确、节力、操作熟练。 2.患者口腔清洁、无异味，患者舒适。 3.与患者交流有效。 4.每超时1分钟扣2分。 5 5 5 4 4 4 3 3 3 2 2 2
技术人员等级考核办法 08年第二版 部门编制：技术系统系统总监审核： 总经理批准：批准日期：
目录 1目的 为鼓励优秀专业人才安心本职工作，而不是因为报酬去谋求并不擅长的管理职位；培养一支专研技术、不断提高自身技术技能的骨干队伍；提倡拥有较高技能水平的员工对企业更为全面的理解，在企业中形成员工高度参与的管理风格；有效保留和激励技术人员；特制定本方案。 2技术人员职称（内部职称）等级分布 2．1参照公司工资等级标准，对技术职称进行综合的职位评价，将技术人员按技术职称等级进行工资等级划分。并与《公司工资等级标准》中的工资等级进行对应。 2．2通过考核与晋升晋级等方式来划分各等级的档位工资，详见《技术人员工资等级标准》。 2．3《技术人员工资等级标准》中技术人员职称等级的福利待遇与《公司工资等级标准》中的等级相对应，享受同等福利待遇。 如下表：
3技术人员职称（内部职称）等级评价方法 3．1 技术人员初始等级评价由部门经理参照岗位工资标准，对技术人员进行综合素质考评、专业技能素质考评、结合上年度工作完成情况（KPI），评定员工职称（公司内部职称）及工资等级。报技术总监审核并报集团总经理批准。形成现有员工初始内部职称及工资等级。 3．2技术人员每半年度进行一次考核，其年度考核成绩作为员工职称（公司内部职称）及工资等级调整的依据。 员工年度考核成绩=（员工上半年考核评分+员工下半年考核评分）/2 3．3技术人员的考核主要分为4大部分：即员工KPI考评、专业技能素质考评、综合素质考评与技术总监面谈考评。另外对取得国家/行业职称资格的技术人员实行加分制。 各部分考评分满分为100分，其占员工考核成绩的权重比例如下表所示： 例：如果一个员工的各部分考核成绩如下表： 则：该员工的考核成绩总分为：80分*30%+90分*50%+80分*10%+90分*10%+2分=88分 3．3．4中级工程师/中级设计师以上职称（七级以上）的技术人员在进行以上考核方案的基础上，另增加2项考评： 3．3．4．1撰写专业论文并答辩通过； 3．3．4．2正式晋级前要进行1-2次的专业授课；晋级后每年进行1-2次的专业授课。 3．4考核成绩的应用 3．4．1技术人员年度考核成绩决定技术人员的职称（公司内部职称）及工资等级的调整。若技术人员年度考核成绩达到晋级标准，按照《技术人员工资等级标准》进行相应调整；若技术人员年度考核成绩在降级标准以下，则下调职称（公司内部职称）及工资等级。 3．4．2技术人员考核成绩与职称（公司内部职称）及工资等级调整的关系如下表所示。但若考核成绩出现以下情况，则按照如下方式进行处理： 3．4．2．1专业技能素质考评考试不及格时，必须进行补考，补考不及格的工资降级。 3．4．2．2考核成绩总分后三名的员工，取消晋级资格。 3．4．2．3考核成绩总分最后一名的，实行末尾淘汰。
心肺复苏、胸外心脏非同步直流电除颤技术操作： 操作步骤： 报告，我是参加成人生命支持的XX号选手，请指示 1、两臂伸直，环视四周，口述周围环境安全 2、术者跪于模拟人右侧与肩同宽（头侧膝部外缘与患者肩头平齐），拍打患者左右肩并在双耳呼唤“小姐，你怎么啦！小姐，你怎么啦！（计时）口述意识丧失，助手准备除颤仪和简易呼吸器及面罩; 3、开放气道：口述口腔无异物，清理口腔（有动作，头不必侧）左手立掌压额，右手拇、食、中指在下颏中点向选手一侧旁边1—2CM处抬下颏，（使患者头后仰至下颌骨延线与地面垂直）；一听二看三感觉判断有无呼吸（5—10秒）口述无呼吸请通气；助手跪于患者头部，立即适用简易呼吸器，面罩通气二次，要看到胸部起伏； 4、一听二看三感觉触摸颈A（食指、中指从下颏中点滑至甲状软骨后旁边1—2CM胸锁乳头肌与喉结中间凹陷处检查，即延喉结向选手一侧滑行1—2CM按压，手法要作出来）5—10秒，口述无脉搏；口述一组；胸外心脏按压，按压时观察面部反应；按到25次时数出声（频率100—110次/分保证按压与松开时间比为1:1）直至五组以通气2次结束。计时结束（占70%）（从拍双肩
至最后二次人工呼吸结束，150-160秒得5分，161-165秒得4分，166-170秒得3分，超过170秒不得分；少于150秒，则每5秒扣1分，135秒以下不得分） 5、复检一听二看三感觉触摸颈A（5-10秒）口述“无呼吸， 无脉搏，开机至监护位”。将电极板放在患者左侧乳头腋中线，另一个电极板放在放在右侧锁骨中线第二肋间，口述室颤，需紧急电除颤；擦拭患者胸部皮肤（从上往下擦三下）开始计时： 6、助手一手给纱布一手给电极板涂导电胶，由术者均匀分 布两块电极板上，板面朝外，将电极板放在正确位置，口述再次确认室颤，选择能量200J（助手按键）；口述充电（助手按键）口述旁人请离开（观察自己、观察助手、观察周围人，大声说“请旁人离开“）除颤仪显示充电完成，电极板贴紧胸壁，适当加压，观察心电波型，仍为室颤，双手拇指同时按压电极板两个按钮进行放电。口述除颤结束，关机。助手给纱布，术者擦干电极板，放回原位。擦干胸壁皮肤（左一下，右一下）（从擦干胸部皮肤开始至除颤放放电完毕时间不超过20秒，21-25秒扣2分，26-30秒扣4分，31-35秒扣6分，大于35秒零分） 口述继续心肺复苏2分钟后，复检，病人心跳呼吸恢复，复苏成功。报告考官，操作完毕。 7、