第一部分微生物的利用实验1 大肠杆菌的培养和分离
1获得纯净培养物的关键是( )
A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B．接种纯种细菌
C．适宜环境条件下培养
D．防止外来杂菌的入侵
2本实验分离大肠杆菌所采用的方法是( )
A．涂布分离法B．稀释分离法
C．竞争分离法 D．划线分离法
3大肠杆菌与下列哪一组微生物的细胞结构相似( )
A．病毒、酵母菌 B．硝化细菌、噬菌体
C．放线菌、细菌 D．乳酸菌、霉菌
4大肠杆菌的培养和分离所用的培养基从物理性质上分别属于( )
A．液体培养基、固体培养基
B．固体培养基、液体培养基
C．液体培养基、液体培养基
D．固体培养基、固体培养基
5LB培养基的物质组成是( )
A．葡萄糖、蛋白质、NaCl、水
B．蛋白质、NaCl、水
C．蛋白胨、NaCl、水、酵母提取物
D．葡萄糖、NaCl、水、酵母提取物
6下列划线分离的图解中，正确的是( )
7平板冷凝后要将平板倒置，其意义是( )
A．利于大肠杆菌的接种
B．防止杂菌污染
C．利于培养基的冷却
D．防止皿盖上的冷却水倒流入培养基
8经划线分离的大肠杆菌，经37 ℃恒温箱中培养12～24 h后，观察到怎样的结果，则表明菌已被分离了( )
A．在划线的每一区域均出现了菌落
B．在每一区域的中部有菌群生长
C．在划线的末端出现不连续的单个菌落
D．在划线的起点出现连续的多个菌落
9一个细菌经一段时间的培养，若出现了64个细菌，则初略推算该菌培养的时间为( )
A．20 min B．1280 min
C．100 min D．5 min
10下列操作错误的是( )
A．用酒精擦拭双手
B．用氯气消毒水源
C．实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭
11将大肠杆菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，经过一定时间的培养，就能够得到( )
A．菌丝 B．无一定形态的群体
C．单个细菌 D．菌落
12对无菌操作转接培养物的叙述，正确的是… ()
①接种环在火焰上灼烧灭菌②在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞③打开棉塞的试管口通过火焰④将已冷却的接种环伸入菌液，蘸取一环菌液转移到一装有无菌培养基的试管中⑤将试管口塞上棉塞⑥接种环进行消毒
A．①②④⑤⑥ B．①②③④⑤
C．①②③④⑤⑥ D．①②③④
13大肠杆菌属于下列哪一种类型的菌( )
A．严格厌氧型 B．严格需氧型 C．自养型 D．兼性厌氧型
14某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请完成以下问题：
(1)对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，其中制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料中：提供能源的主要物质是________；琼脂的作用是________，它不提供营养。
(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，故制备培养基时各成分要有合适的________。
(3)将配制好的培养基分装到试管中，培养基体积约占试管长度的________。加棉塞后把若干个试管捆为一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧，放入________中灭菌。
(4)从一支试管向另一支试管接种时应注意，接种环要在酒精灯________(“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环________后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近。
15某兴趣小组进行研究性学习，探究“影响细菌生长繁殖的因素”。在培养细菌的过程中，发现了某种细菌(记作R)的周围其他细菌的生长繁殖受到抑制。他们把R细菌接种到专门的培养基上进行培养，一段时间后，他们除去R细菌，用该培养基再培养其他细菌，结果其他细菌仍然不能在这个培养基上生长和繁殖。
(1)从生态学的角度分析，R细菌与周围细菌之间的关系是________。
(2)于是，某同学假设了“造成R细菌的周围其他细菌不能生长和繁殖”的可能原因，你认为最可能的原因是________。
A．R细菌占据了其他细菌的生存空间
B．R细菌吞噬了其他细菌
C．R细菌产生了不利于其他细菌生存的物质
D．R细菌更容易吸收培养基中的物质
(3)参照上述题目中给出的有关材料，请你设计一个实验对第(2)题所作的选择进行验证，简述你的实验步骤及结论：
①方法步骤：
第一步：_____________________________________________________________。
第二步：_____________________________________________________________。
第三步：_____________________________________________________________。
第四步：_____________________________________________________________。
②结果：_____________________________________________________________。
③结论：_____________________________________________________________。
参考答案
1答案：D 解析：纯净培养物是单一、纯种菌的菌落。因此，确保无其他杂菌的入侵是关键，故选D。
2答案：D 解析：分离细菌的方法多种多样。本实验中分离大肠杆菌用了划线分离法。
3答案：C 解析：病毒(如：噬菌体)无细胞结构，酵母菌、霉菌属真核生物，放线菌、细菌(如：硝化细菌、大肠杆菌)是由原核细胞构成的。
4答案：A 解析：培养基从物理性质上可分为固体、半固体和液体培养基。每种培养基用途各不相同。大肠杆菌的分离和培养分别用固体和液体培养基。
5答案：C 解析：LB培养基必须满足五大营养成分，即碳源、氮源、水、无机盐以及生长因子。C选项中全齐。而A中缺生长因子，B中缺生长因子，D中缺氮源。
6答案：C 解析：划线分离的划线有许多要求。A的划线方法不对，而B错在划线2的起点，D项错在4与1交叉了。
7答案：D 解析：倒置平板是为了防止皿盖上的水冷却后倒流入培养基中，带来杂菌污染的可能。
8答案：C 解析：在划线的末端由于菌数减少，细菌分离，其末端出现不连续的单个菌落，至此，表明菌已被成功分离了。
9答案：C 解析：细菌以二分裂方式繁殖，约20 min分裂1次，若1个细菌分裂得到64个细菌，则说明其已分裂了5次，则共培养了约20×5＝100 min。
10答案：D 解析：消毒与灭菌在概念上是不同的。但人们在日常生活中常会混淆。D 的操作错在器皿应该灭菌，而不是用酒精擦拭消毒。
11答案：D 解析：细菌经繁殖和生长可得到菌落。
12答案：C 解析：这是对无菌操作过程中其中一个环节的考查。这一转接培养物的正确顺序是C。
13答案：D 解析：大肠杆菌不能自己将无机物合成有机物，其异化方式却既可需氧又可厌氧，即兼性厌氧型。
14解析：(1)配制固体牛肉膏蛋白胨培养基，其中的牛肉膏成分复杂，为生命活动提供能源，也能提供氮源和生长因子；(2)考查配制培养基的基本要求——营养要协调，一方面各种营养成分的种类要适合微生物的生长需求，另一方面各种营养成分的比例要适合微生物的生长需求。(3)考查培养基分装和灭菌的方法。(4)考查接种的方法，接种环要在酒精灯外焰灭菌，因为外焰的温度高于内焰。灭菌后的接种环必须冷却后再接种，温度过高会杀死菌种。
答案：(1)牛肉膏凝固剂
(2)比例
(3)1/3 高压蒸汽灭菌锅
(4)外冷却
15解析：(1)根据题目所给信息可得到两者的关系是竞争。(2)因为某种细菌的周围其他细菌受到抑制，那就不可能是D，否则自己也难存活。也不可能为A和B，因为除去R细菌，其他细菌也不能生长和繁殖。(3)由(2)中可知变量为有无R细菌。设计实验中要特别注意菌种的选择，对照原则，唯一变量原则以及微生物的接种技术。
答案：(1)竞争(2)C
(3)①第一步：取两个培养皿，按相同营养成分配制甲、乙两个培养基
第二步：甲培养基上接种R细菌，培养一段时间后除去R细菌，乙培养基上不接种R 细菌，作对照
第三步：两个培养基分别接种相同的其他细菌
第四步：在相同的条件下，让甲、乙两个培养基上的细菌生长、繁殖
②甲培养基上细菌的生长受到抑制，不能繁殖。乙培养基上细菌能正常生长繁殖
③R细菌产生了不利于其他细菌生长和繁殖的物质
一、名词解释 1细菌乙醇发酵与酵母菌乙醇发酵 酵母菌乙醇发酵，在厌氧和偏酸（pH3.5-4.5）的条件下，通过糖酵解（EMP）途径将葡萄糖降解为2分子丙酮酸，丙酮酸再在丙酮酸脱羧酶作用下生成乙醛，乙醛在乙醇脱氢酶的作用下还原成乙醇，1分子葡萄糖产生2分子乙醇、2分子二氧化碳和净产生2分子ATP。 细菌乙醇发酵，细菌即可利用EMP途径也可利用ED途径进行乙醇发酵，经ED途径发酵产生乙醇的过程与酵母菌通过EMP途径生产乙醇不同，故称细菌乙醇发酵。1分子葡萄糖经ED途径进行乙醇发酵，生成2分子乙醇和2分子二氧化碳，净产生1分子ATP。 2菌落与菌苔 菌落，生长在固体培养基上，通常来源于一个细胞、肉眼可见的微生物细胞群体叫做菌落。菌苔，当菌体培养基表面密集生长时，多个菌落相互连接成一片，称菌苔。 3原生质体与原生质球 原生质体指人工条件下用溶菌酶除尽原有的细胞壁，或用青霉素抑制细胞壁的合成后，所剩下的仅由细胞膜包裹着的细胞，一般由革兰氏阳性细菌形成。 原生质球指用同样的方法处理，仍有部分细胞壁物质未除去所剩下的部分，一般由革兰氏阴性细菌所形成。 4温和噬菌体与烈性噬菌体 温和噬菌体，有些噬菌体感染细菌后并不增殖，也不裂解细菌，这种噬菌体称为温和噬菌体烈性噬菌体，能在寄主细菌细胞内增殖，产生大量噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体称为烈性噬菌体。 5选择性培养基与鉴别培养基 选择性培养基，是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对某种化合物的敏感性不同而设计的一类培养基。利用这种培养基可以将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。 鉴别培养基，是根据微生物的代谢特点在普通培养基中加入某种试剂或化学药品，通过培养后的显色反应区别不同微生物的培养基。 6连续培养与分批培养 连续培养，在培养容器中不断补充新鲜营养物质，并不断地以同样速度排除培养物，使培养系统中细菌数量和营养状态保持恒定，这就是连续培养法 分批培养，将少量单细胞纯培养物接种到恒定容器新鲜培养基中，在适宜条件下培养，定时取样测定细菌数量。培养基一次加入，不补充，不更换。 7恒化培养法与恒浊培养法 恒化培养法，通过控制某种限制性营养物质的浓度调节微生物的生长速度及其细胞密度，使装置内营养物质浓度恒定的培养方法 恒浊培养法，根据培养液细胞密度调节培养液流入的速度，使装置内细胞密度保持恒定的培养方法 8随机培养法与同步培养法 同步培养法，使被研究的微生物群体处于相同生长阶段的培养方法 随机培养法，在一般培养中，微生物各个体细胞处于不同的生长阶段的培养方法 9碱基转换与颠换 碱基转换，DNA链中嘌呤被另外一个嘌呤，或嘧啶被另一个嘧啶所置换，叫做转换 颠换，DNA链中嘌呤被另外一个嘧啶，或者嘧啶被另外一个嘌呤所置换，叫做颠换。 10 转化与转导 转化，是受体菌直接吸收来自供体菌的DNA片段，通过交换将其整合到自己的基因组中，
第一章绪论 一、名词解释 1、微生物 2、微生物学 二、填空题 1、微生物学的先驱者是____，微生物学的奠基人是_____，细菌学的奠基人是_____ 。 2、微生物都是些个体微小、构造简单的低等生物，包括属于原核类的细菌(____和古生菌)、放线菌、蓝细菌、____、立克次氏体、____；属于真核类的真菌（____、____和蕈菌）、原生藻类和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和____（____、拟病毒和____）。 3、微生物由于其体形都极其微小，因而导致了一系列与之密切相关的五个重要共性，即体积小，____；____，____；生长旺，繁殖快；____，____；____，____。 4、微生物的种类多主要体现在________、生理代谢类型的多样性、代谢产物的多样性、________、________等五个方面。 5、微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、________、________和分类进化等生命活动基本规律，并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学。 6、按是否具有细胞结构，微生物可分为________型微生物和________型微生物。 7、细胞型微生物根据其细胞结构特征又可分为________微生物和________微生物。 8、按照Carl Woese 的三界论，微生物可分为________、________和________。 9、原核微生物主要包括________、________、________、________、________、________和________。 10、微生物的主要特点有：________、________、________、________和________。 三、选择题 1、适合所有微生物的特殊特征是( )。 A.它们是多细胞的 B.细胞有明显的核 C.只有用显微镜才能观察到 D.可进行光合作用 2、第一位观察到微生物的科学家是( )。 A. Robert Hooke B. Louis Pasteur C. Joseph Lister D. James T.Watson 3、细菌学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 4、Louis Pasteur对微生物学的贡献在于他( )。 A. 发现了病毒 B. 提出了自然发生说理论 C. 抨击了进化论 D. 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性 5、Louis Pasteur采用曲颈瓶试验来( )。 A. 驳斥自然发生说 B. 证明微生物致病 C. 认识到微生物的化学结构 D. 提出细菌和原生动物分类系统 6、微生物学中铭记Robert Koch是由于( )。 A. 证实病原菌学说 B. 在实验室中成功地培养了病毒 C. 发展了广泛采纳的分类系统 D. 提出了原核生物术语 7、微生物学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 四、是非题
重庆大学研究生专业实验教学 实验报告书 实验课程名称： 实验指导教师： 学院： 专业及类别： 学号： 姓名： 实验日期： 成绩： 重庆大学研究生院制
一、实验目的 1、了解分离与纯化微生物的基本原理及方法； 2、了解倒平板配制土豆培养基的方法与平板划线分离的基本操作技术；； 3、学习平板菌落计数的基本原理和方法，并掌握其基本技能； 4、初步观察来自土壤中的几类微生物的菌落形态特征，并能判断菌的类型。 二、实验原理 1、培养基的种类 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴别、保存各种微生物或积累代谢产物。一般的培养基应包含适合微生物生长的6大营养素即水分、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子。培养基的种类很多，根据培养成分的不同可分为天然培养基、合成培养基与半合成培养基；根据物理状态的不同又可分为液体培养基和固体培养基。微生物的分离、纯化、记数等方面的研究常常使用的就是固体培养基。本实验就是使用的固体培养基。 已配制好的培养基必须立即灭菌，如来不及灭菌，应暂存冰箱，以防止其中微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养基酸碱度所带来不利影响。 培养基的原材料来源十分广泛，本实验采用的原材料为土豆。 2、接种方法与无菌接种 将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。接种的关键是要严格的进行无菌操作。微生物的接种方法很多，划线接种、三点接种、穿刺接种、混浇接种与涂布接种是几种常用的接种方法。 划线接种是最常用的接种方法，即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可以达到接种的目的。常用的接种工具为接种环、针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。
登陆QQ邮箱，对比重点是否有出路 1、败血症：病原菌侵入血流，并在其中生长繁殖，同时，产生毒素，引起严重中毒症状。 2、病原微生物：对人类和动物、植物具有致病性的微生物称病原微生物。 3、潜伏感染：宿主与致病菌在相互作用过程中暂时处于平衡状态，病菌潜伏在病灶内或某些特殊组织中，一般不出现在血液、分泌物或排泄物中，一旦机体抵抗力下降，潜伏致病菌大量繁殖，即可使疾病复发。 4、菌群失调：是指在原微生境或其他有菌微生境内正常微生物群发生的定量和定性的异常变化。这种变化主要是量的变化，故也称比例失调。 5、消毒：杀灭物体上的病原微生物，但不一定能杀死芽胞的方法 6、无菌操作：防止微生物进入人体或其他物体的操作方法。 7、条件致病微生物：某些微生物在正常情况下不致病，但在正常菌群当其菌群失调、定位转移、宿主转换或宿主抵抗力的严重降低时，可引起疾病，称条件致病菌。 8、显性感染：当机体抗感染的免疫力较弱，或侵入的致病菌数 量较多、毒力较强，以致机体的组织细胞受到不同程度的损害，生理功能也发生改变，并出现一系列的临床症状和体症。 9、菌落：单个细菌经培养后分裂繁殖成的一堆肉眼可见的细菌集团 10、毒血症：致病菌侵入宿主体内后，只在机体局部生长繁殖，病菌不进入 血循环，但其产生的外毒素入血。外毒素经血到达易感的组织和细胞，引起特殊的毒性症状。 11、半数感染量：表示在规定时间内，通过指定感染途径，使一定体重或年龄的某种动物半数感染所需最小细菌数或毒素量。 12、灭菌：杀灭物体上所有微生物，包括病原微生物、非病原微生物和芽胞的方法。 13、微生物：自然界中一些个体微小、结构简单、肉眼直接看不到 的微小生物。 14、CPE：即致细胞病变效应，是指病毒感染引起的、光学显微镜下可见的受感染组织细胞的形态学改变。 15、侵袭力：是指致病菌突破机体的防御功能，在体内定居、繁殖和扩散的能力。 与细菌的表面结构和产生的胞外酶有关 16、肥达试验：系用已知的伤寒杆菌O、H抗原和甲、乙型副伤寒杆菌的H抗原，与不同稀释度的待检血清作定量凝集试验，根据抗体的含量和动态变化以辅助临床诊断伤寒、副伤寒的一种血清学试验。 17、菌群失调症：是指在原微生境或其他有菌微生境内正常微生物群发生的定量和定性的异常变化。这种变化主要是量的变化，故也称比例失调。 18、结核菌素试验：属于迟发型超敏反应，用结核菌素试剂做皮肤试验，感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者一般都出现阳性反应 19、慢发病毒感染：病毒或致病因子感染后，经过很长的潜伏期，有的可达数年或数十年之久，以后出现慢性进行性疾病，直至死亡。如HIV的艾滋病和麻疹病毒的亚急性脑。。 20、溶原性转换：是指当噬菌体感染细菌时，宿主菌染色体中获得了噬菌体的DNA片段，使其成为溶原状态时而使细菌获得新的性状。 1、简述破伤风梭菌的致病机制及防治原则。 感染条件：伤口需形成厌氧微环境，伤口窄而深（如刺伤），伴有泥土或异物感染;大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血；同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染。
一、概念题： 病毒：没有细胞结构，专性寄生在活的宿主体内，大小在0.2 微米以下的超微小微生物。 原核微生物：指核质和细胞质之间不存在明显核膜，其染色体由单一核酸组成的一类微生物。（原核微生物的核很原始，发育不全，只有DNA链高度折叠形成的一个核区，没有核膜，核质裸露，与细胞质没有明显界限，叫拟核或似核。 原核微生物没有细胞器，只有由细胞质膜内陷形成的不规则的泡沫体系，如间体核光合作用层片及其他内折。也不进 行有丝分裂。） 真核微生物：细胞核发育完全具有核仁核膜 , 能进行有丝分裂 , 细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等细胞器的微小生 物 , 都称为真核微生物。（真核微生物由发育完好的细胞核，核内由核仁核染色质。由核膜将细胞核和细胞质分开，使两 者由明显的界限。有高度分化的细胞器，如线粒体、中心体、高尔基体、内质网、溶酶体和叶绿体等。进行有丝分裂。） 原生动物：最原始、最低等、结构最简单的单细胞动物。 光能自养：指利用光能将大气中的二氧化碳和土壤中的水合成有机物的营养类型。 光能异养：指以二氧化碳作为主要碳源或唯一碳源，利用有机物作为供氢体，利用光能将二氧化碳还原成细胞物质营 养类型。 化能自养：通过氧化无机物释放出的能量还原二氧化碳成为细胞有机物的营养类型。 化能异养：指用有机物分解时释放的能量，将有机物分解的中间产物合成新的有机物的营养类型。 芽孢某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形或椭圆形的抗透性休眠体 等电点：在某一 PH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时的溶 液的 PH值称为该氨基酸的等电点。 好氧呼吸 :有外在最终电子受体O2存在时，对底物（能源）的氧化过程。 无氧呼吸：又称厌氧呼吸，是一类电子传递体系末端的受氢体为外源无机氧化物的生物氧化。 质粒:在原核微生物中除染色体外，还含有另一种较小的，携带少量遗传基因的环状DNA 分子，称为质粒，也叫染色 体外的 DNA。他们在细胞分裂过程中能复制，将遗传性状传给后代。 自净容量 :指在水体正常生物循环中能够净化有机污染物的最大数值。 二、简述题： 1）细菌的一般结构 细菌是单细胞的。所有的细菌均有如下结构：细胞壁、细胞质膜、细胞质及其内含物、细胞核质。 2）细菌细胞壁的生理功能 a、保护原生质体免受渗透压引起破裂的作用； b、维持细菌形态（可用溶菌酶处理不同的细菌细胞壁后，菌体均呈现圆形得到证明）； c 、细胞壁是多孔结构的分子筛，阻挡某些分子进入和保留蛋白质在间质（革兰氏阴性菌细胞壁和细胞质之间的区域）； d 、细胞壁为鞭毛提供支点，使鞭毛运动。 3）酶的活性中心 酶的活性中心是指酶的活性部位，酶蛋白分子中直接与底物结合，并与酶的催化作用直接有关的部位 4）真菌的种类 酵母菌，霉菌，以及各种伞菌。 5）酵母菌的一般特征 个体一般以单细胞状态存在；多数以出芽方式繁殖，也有的可进行裂殖或产子囊孢子；能发酵糖类而产能；细胞壁常 含有甘露聚糖；喜在含糖较高、酸性的水生环境中生长。 6）在病毒中，蛋白质的功能 蛋白质的功能：保护病毒使其免受环境因素的影响。决定病毒感染的特异性，使病毒与敏感细胞表面特定部位有特异 亲和力，病毒可牢固的附着在敏感细胞上。病毒蛋白质还有致病性、毒力和抗原性。动物病毒有的含DNA，有的含 RNA。植物病毒大多数含RNA，少数含 DNA。噬菌体大多数含DNA，少数含 RNA。病毒核酸的功能是：决定病毒遗传、变异和 对敏感宿主细胞的感染力。
微生物学教程-周德庆第三版-期末复习资料
1.曲颈瓶实验巴斯德否认了自然发生学说 2.微生物发展的五个时期：史前期（朦胧阶段）；初创期（形态描述阶段），列文虎克---微生物的先驱者；奠基期（生理水平研究阶段），巴斯德---微生物学奠基人（显微镜的发现），科赫--细菌学奠基人；发展期（生化水平研究阶段）布赫纳---生物化学奠基人；成熟期(分子生物学水平研究阶段) 3.巴斯德的成果：①彻底否定了自然发生说②证实发酵由微生物引起③发明了狂犬病毒减毒疫④苗制备方法⑤发明巴氏消毒法 4.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？①.体积小，面积大；②.吸收多，转化快；③.生长旺，繁殖快；④.适应强，易变异；⑤.分布广，种类多。其中，体积小面积大最基本，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余 4 个共性 5.细菌的三个形态杆菌，球菌，螺旋菌 6.细菌的一般构造：细胞壁，细胞膜，细胞质，核区。特殊构造：鞭毛，菌毛，性菌毛，糖被（微荚膜，荚膜），芽孢 7.细菌的细胞壁的功能：①固定细胞外形和提高机械强度，保护细胞免受外力的损伤；②为细胞生长、分裂和鞭毛运动所必需；③阻拦酶蛋白或抗生素等有害物质进入细胞；④赋予细菌特有的抗原性和致病性(如内毒素)，并与细菌对抗生素和噬菌体的敏感性密切相关。 8.肽聚糖由肽和聚糖，肽聚糖单体构成，①、四肽尾，由四个氨基酸分子按L 型与D型交替方式连接而成，接在N-乙酰胞壁酸上。②、双糖单位：N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸通过β-1,4糖苷键连接，溶菌酶水解此键。③、肽桥：甘氨酸五肽，肽桥变化甚多，由此形成了“肽聚糖的多样性”） 9.磷壁酸是革兰氏阳性菌的特有成分，（主要成分是甘油磷酸或核糖醇磷酸），是噬菌体的特异性吸附受体； 10.外膜是革兰氏阴性菌的特有结构（位于壁的最外层，成分：脂多糖LPS（类脂A：是革兰氏阴性菌致病物质内毒素的物质基础，是许多噬菌体在细胞表面的吸附受体；核心多糖；O-特异侧链）；磷脂和若干外膜蛋 11.假肽聚糖的β-1,3-糖苷键被水解。 12.缺壁细胞：实验室中形成：自发缺壁突变：L型细菌 人工方法去壁：彻底除尽（原生质体） 部分去除（球状体） 自然界长期进化中形成：支原体 13.试述革兰氏染色的机制 程序染液 G+ G- 初染结晶紫紫色紫色 媒染碘液蓝紫色蓝紫色 脱色乙醇95% 蓝紫色无色 水洗 H2O 蓝紫色无色 复染番红蓝紫色红色 14.PHB：聚羟基丁酸酯，细胞内含物之一，具有贮藏能量，碳源及降低细胞内渗透压作用。 15.鞭毛分为L环，P环，S-M环，C环。 16.何谓“拴菌”试验？他的创新思维在何处？
微生物实验报告 一环境中的微生物的检测和分离纯化 实验目的： 1 学习并掌握无菌操作技术原理和方法 2 学习用稀释涂布法分离微生物 3 认识微生物存在的普遍性，体会无菌操作的原理 实验材料： 1 土样溶液，无菌生理盐水 2 取液器(1000μL一支，100μL一支)，培养箱，培养皿(12个)，无菌有帽试管，三角瓶，无菌涂棒，接种环，1000μL无菌吸头若干，记号笔，酒精灯，火柴，试管架 实验步骤： A 培养基的制备(已提前制备好) B 周围环境中的微生物的检测，在牛肉膏蛋白胨培养基平板上作如下实验 1 取三个平板，用100μL的取液器分别吸取100μL的河水、豆浆、豆奶，均匀加在三个培养基上，并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次，时间约1-2分钟，使细菌均匀分布)。 2 再取三个平板，三个同学分别用手指(未洗过)在培养基上涂抹几秒钟，一个同学对应一个平板。 3 再取一个平板，其中一个同学将手用肥皂洗过后，再在培养基上涂抹。 4 再取一个平板，打开皿盖，一个同学对着培养基咳嗽，使口腔中的气流和飞沫落到培养基上。 5 再取一个平板，打开皿盖，在空气中放置10min左右，关上皿盖。 6 将上述9个平板放置在35℃的培养箱中培养24h。 C 土壤中分离微生物 1 采土样，制备土壤稀释液(已准备好) 2 取三个平板，每个培养基上用取液器添加100μL的土壤稀释液，并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次，时间约1-2分钟，使细菌均匀分布)。 3 将平板依旧放在35℃的培养箱中培养24h。 D 菌落计数 培养24h后，取出培养平板，算出每个平板上的菌落数量。其中，土样中的微生物含量可用以下式子计算 土壤中的细菌含量(个/g土壤)=菌落平均数×10×稀释倍数 实验结果及数据： 实验结果如附图。
2020届微生物学期末考试经典题目 题库整理 判断题 1.内毒素是G-菌的外壁物质。( √ ) 2.抗生素的抗微生物效果一般低于消毒剂和防腐剂。( × ) 3.血球计数板可以检测酵母培养液中所有酵母细胞个数，而平板倾注法只能测定活细胞个 数。( √ ) 4.在细菌生长曲线中，稳定期的细胞数目处于稳定，是因为此期细胞不再增殖。( × ) 5.做固体培养基常加2%琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是1%。( × ) 6.稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的 稀释度进行计数。( × ) 7.细菌中紫外线引起的突变是由于相邻鸟嘌呤分子彼此结合而形成二聚体的突变。( × ) 8.大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物，唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生 物。( × ) 9.自发突变是指那些实验室中由于加入诱变剂所发生的突变。( × ) 10.内生菌根的真菌可进入根的皮层间隙和细胞内部，在根外较少，不形成菌套。( √ ) 11.英国科学家罗伯特?虎克在观察标本中观察到了一段线状的细菌。( × ) 12.所有的微生物都能利用氨态氮作为氮源。( × ) 13.发酵是微生物以无机物作为最终的电子受体的生物氧化过程。( × ) 14.蓝细菌是好氧细菌，通过糖酵解过程，利用光能产生它们的糖类。( × ) 15.固氮酶只有在严格厌氧条件下才有活性，所以固氮菌均为厌氧菌。( × ) 16.Hfr菌株与F-菌株接合后会使F-菌株转性变为F+菌株。( × ) 17.Parastism是指一种微生物生活在另一生物体表面或体内并对后者产生危害作用的现象。 ( × ) 18.大肠杆菌存在与否常作为判断水源是否被粪便污染的一个重要指标。在鉴定该菌时V.P (V oges Proskauer)实验和M.R (Methyl Red)实验结果应该是，前者为阳性，后者为阴性。 ( × ) 19.在培养根瘤菌时常加1/200000的结晶紫抑制G+细菌的生长。( √ ) 20.所有的原核微生物都具有鞭毛。( × ) 21.真菌中除环状质粒外还有线状质粒存在。( √ ) 22.在没有高压蒸汽灭菌设备情况下，不可能进行培养基质的彻底灭菌。( × ) 23.烟草花叶病毒的2130个壳粒反向缠绕成杆状病毒粒子。( × ) 24.促进扩散是微生物吸收营养物质的主要机制，通过特异性载体蛋白可将营养物质进行逆 浓度梯度运行。( × )
XX大学XX系微生物试卷A 命卷人：一、填空题（每空1分，共6小题25分） 1细菌基本形态可以分为、和。 2.霉菌菌丝有两类，一类是，如和，另一类是，例如。 3.在某些原核生物细胞壁外，会着生一些特殊的附属物，包括、、、等。 4.根据营养物质在机体中生理功能的不同，可以将它们分为、、、、______5大类。 5.微生物的系统命名采用法，即加。 6.病毒粒子衣壳对称体制包括：、和。 7.霉菌的菌丝体分为两类，它们分别是_______和________。 二、选择题（每小题1分，共25小题25分） 1. 产生假根是（）的形态特征。 A.根霉 B.酵母菌 C.青霉 D.曲霉 2.革兰氏阳性菌细胞壁特有成分是（）。 A.蛋白质 B.肽聚糖 C.脂多糖 D.磷壁酸 3.微生物从糖酵解途径获得（）ATP分子。 A.2个 B.4个 C.36个 D.38个 4.处于对数生长期的细菌其特点是（）。 A.生长缓慢 B.生长迅速 C.大多数死亡 D.繁殖代时长 5.深层穿刺接种细菌到试管半固体培养基中（）。 A.可以观察细菌是否能运动 B.除去代谢废物的一个机会 C.增加氧气 D.增加钾和钠离子的数目 6.加压蒸汽灭菌锅灭菌参数是（）。 A.100℃,30min B. 180℃,10min C. 121℃,20～30min D. 160℃,60min 7.霉菌适宜生长的pH范围为（）。 A.＜4.0 B.4.0-6.0 C.6.5-8.0 D.8.0 8.str R是（）的一种菌株。 A.丙氨酸营养缺陷型菌株 B. 抗链霉素突变株 C.异亮氨酸营养缺陷型菌株 D. 抗庆大霉素突变株 9.微生物是生产以下食品时的一个重要因素，除了（）之外。 A.酸菜 B. 朝鲜泡菜 C.纯牛奶 D.酸奶 10.苏云金孢杆菌作为（）广泛用于现代生物学中。 A.乳酸菌 B.干酪和干酪产品的生产者 C.水系统的净化者 D. 生物杀虫剂 11.通常链霉菌可通过以下方式进行繁殖 A. 出芽繁殖; B. 分生孢子; C. 孢囊孢子; D. 芽孢子 12.自然界中分离到的细菌, 形态各种各样, 其中种类最多的是: A. 球菌; B. 螺旋菌; C. 放线菌; D. 杆菌 13.细菌的细胞核是: A 裸露的DNA 分子; B DNA 与组蛋白结合的无核膜包围的染色体.
1.细菌特殊构造包括、、、等。（本题2分） 2.溶源性细胞在正常情况下有大约10 -5 细胞会发生现象，这是由于少数溶源细胞中的变成了的缘故。（本题分） 3.营养物质可以通过、、和四种方式进入细胞。（本题2分） 4.控制有害微生物措施中杀灭的方法有和，常用和方法，抑制的方法有和。（本题3分） 5.证明遗传物质的基础是核酸的三个著名的实验为、、。（本题分） 6.微生物基因重组的方式包括、_____、_____和。（本题2分） 1.纯培养是其中（）的培养物。 A.只有一种微生物 B.只有细菌生长所需的一种营养物 C.除主要微生物外只有一种微生物 D.没有代谢废物 2.实验室常用的培养细菌的培养基是（）。 $ A. 马铃薯培养基 B. 牛肉膏蛋白胨培养基 C.高氏一号培养基 D.麦芽汁培养基 3.己糖单磷酸支路和ED途径是进行（）替换的一个机制。 A.微生物中DNA合成 B.光合生物中的光合作用 C.某些种类微生物中的能量代谢 D.化学渗透作用 4.微生物代谢中，硝酸盐和硫酸盐可作为电子受体是在（）。 A.无酶时 B.无ATP时 C. 有细胞色素时 D. 无氧时 5.由于控制微生物的目的，灭菌一词指的是（）。 A.除去病原微生物 B.降低微生物的数量 ? C.消灭所有的生物 D.只消灭体表的微生物 6.紫外线辐射主要作用于微生物的（）。 A. 核酸 B.酶类 C. 糖类 D.细胞壁 7.青霉素族的抗生素主要用于抗（）。 A.病毒 B.真菌 C.革兰氏阴性菌 D.革兰氏阳性菌 8.所有下述特征皆适合质粒，除了（）之外。 A.它们是自我复制的DNA环 B.它们有10～50个基因 C.它们是细菌存活所必需的成分 D.它们是接合所必需的成分 9.接合时F因子进入受体细胞，受体细胞（）。 A.经历裂解 B.快速繁殖 C.变成供体细胞 D.发育出线粒体 — 10.研究不同微生物群落及其环境之间的关系的是（）。 A.微生物进化 B.微生物生态学 C.微生物生理学 D.微生物生物化学 四、判断题（每小题1分，共10小题10分）
微生物实验报告模板 淀粉与微生物篇一：实验十分离产淀粉酶的微生物 第十次实验分离产淀粉酶微生物 学院：生命科学学院 专业：生物科学类 年级：20XX级 姓名： 学号：1007040085 20XX年XX月XX日 实验十分离产淀粉酶的微生物 一、实验目的 1、熟悉常用微生物培养基（牛肉膏蛋白胨培养基）的配制方法。 2、学习各种无菌操作技术，并用此技术进行为微生物稀释分离、划线分离接种。 3、用平板划线法和稀释涂布平板发分离微生物。 4、认识为微生物存在的普遍性，体会无菌操作的重要性。 5、掌握分离产淀粉酶微生物的试验方法和步骤，了解产淀粉酶的微生物种类及形态。 二、实验原理 土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现有重要应用潜力的微生物的主要菌源。不同土样中各类微生物数量不同，一般土壤中细菌数量最多，其次为放线菌和霉菌。一般
在较干燥，偏碱性、有机质丰富的土壤中放线苗数量较多；酵母菌在一般土壤中的数量较少，而在水果表皮、葡萄园、果园土中数量多些。本次实验从土壤中分离产淀粉酶的微生物，应该取那些富含产淀粉酶的微生物的土样。从复杂的微生物群体中获得只含有一种或某一类型微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的方法有 1、简单单细胞挑取法 2、平板分离法和稀释涂布平板法 此次实验采取的是平板分离法和稀释涂布平板法结合，该方法操作简单，普遍用于微生物的分离与纯化。其原理包括： 1)稀释后的细胞悬液图不在平板上可以分离得单个菌株 2)在适合于待分离微生物的生长条件（如营养、酸碱度、温度与氧等）下培养微生物，或加入某种抑制剂造成只利于待分离微生物的生长，而抑制其他微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。 3)微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过挑取单菌落而获得纯培养。获得单菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等方法完成。 以淀粉作为惟一碳源的培养基培养未分离细菌，能产淀粉酶的细菌能生长，且菌落周围出现透明圈（淀粉不透明，被消化后变透明），则产淀粉酶微生物被分离出来。本实验
江南大学微生物习题 Revised final draft November 26, 2020
名词解释 1997 1原生质体2芽孢3菌落4诱导酶5生长因素6回复突变7诱导8拮抗9血清学反应10巴斯德效应? 1998 1芽孢2菌落3质粒4回复突变5生长因子6诱导酶7拮抗8巴斯德效应9光复活作用10活性污泥? 1999? 1原生质体2菌落3质粒4芽孢5诱导酶6生长因子7巴斯德效应8营养缺陷型9B O D10血清学反应? 2000? 1温和性噬菌体2巴斯德效应3艾姆斯试验（Amestest）4ELISA?5PCR? 2001? 1类毒素2暗修复作用3巴斯德效应4诱导酶? 2002? 1转化2半抗原3活性污泥4回复突变5P C R 填空1997? 1微生物生长的特点是：_____
2微生物的学名是由_和_所组成3细菌革兰氏染色的主要原理是_。影响染色的主要因素是_和_，革兰氏染色后为红色的是_ 4酵母菌是_，其无性繁殖方式是_和_，有性繁殖是_ 5霉菌产生的无性孢子有___ 6噬菌体的特点是___，其生长繁殖过程包括_____五个步骤。7培养基按用途可分为_____ 8根据生长和O2的关系，大多数酵母属于_，大多数霉菌属于_ 9影响微生物生长的延滞期长短的因素有___等10光复活作用是指____四种情况11染色体畸变是指____四种情况12大肠杆菌是指_食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是_ 13影响微生物的抗热性的因素是_____ 14B O D是指_ 15在空气中能较长时间的微生物类群是__特点是_ 16培养时，培养皿倒置是为了_和_ 17平板菌落计数法结果表达中常用的“c l u”的意思是_ 1998?
从土壤中分离纯化培养微生物并作初步观察鉴定 【摘要】利用分离纯化微生物的基本操作技术对土壤中的微生物进行分离与纯化，根据细菌在选择培养基的存活情况，确定该菌种的固氮解磷解钾属性。 【关键词】细菌芽孢杆菌培养基、选择培养基的配制高压蒸汽灭菌 前言： 在自然条件下，微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。群落是不同种类微物的混和体。为了生产和科研的需要，人们往往需要从自然界混杂的微生物群体中分离出具有特殊功能的纯种微生物；或重新分离被其他微生物污染或因自发突变而丧失原有优良性状的菌株；或通过诱变及遗传改造后选出优良性状的突变株及重组株。这种获得单一菌株纯培养的方法称为微生物的分离纯化技术。 分离纯化技术主要由采集样品、富集培养、纯种分离和性能测定等几个基本环节组成。 实验目的： 1、学习从土壤中分离、纯化微生物的原理与方法。 2、学习、掌握微生物的鉴定方法。 3、对提取的土样进行微生物选择培养、分离、纯化，根据菌落的存活状况来判断未知 菌的属性。 实验原理： 菌种来源:选择无机磷农药含量较高的土壤,有机磷农药化工厂 旁边的土壤和排污口区的污水. 培养基的选取：五组选择培养基，分别以辛硫磷、甲胺磷、敌敌畏、草甘膦及五种有机磷农药混合为微生物生长的唯一氮源磷源。 分离纯化微生物：稀释倒平板法、涂布平板法、稀释摇管法、平板划线分离法。 此次实验采取的是平板分离法，该方法操作简便，普遍用于微生物的分离与纯化，其基本原理主要包括两个方面：（一）选择适合于待分离微生物的生长条件或加入某种抑制剂造成只利于待分离微生物生长，而抑制其它微生物生长的环境，从而淘汰大部
分不需要的微生物。（二）微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体，因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。获得单菌落的方法可通过稀释涂布平板法或平板划线法等技术来完成。 微生物的观察可以用显微镜观察其细胞形态，也可以用肉眼观察其菌落形态。前者是微生物的显微镜观察技术，后者是微生物的肉眼观察技术。 1. 实验器材、试剂与实验方法： 1.1器材： 试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、线绳、纱布、培养皿、自动立式压力蒸汽灭菌器、烘箱、玻璃珠、移液枪、枪头、称量纸、药匙、试管架、接种环、酒精灯、超净工作台, 粉碎机，接种环，移液枪配枪头。 1.2试剂： 牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、1mol/L NaOH、1mol/LHCl、NaCl、95%乙醇、75%酒精，草甘膦，甲甘磷，敌敌畏，辛硫磷。 1.3土样、样品： 取自二十三冶草莓园的土壤，建设北路的大棚蔬菜菜地土壤，化工厂污水口。 1.4 实验方法 1.4.1配制培养基： (一）配制牛肉膏蛋白胨琼脂培养基200ml(用2个100ml三角瓶和2支试管分装）牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普遍的细菌基础培养基。 配方如下：牛肉膏 0.6g 蛋白胨 2g NaCl 1g 琼脂 3~4g 水 200ml pH 7.4-7.6 1、称药品按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏和蛋白 胨可分别放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶解后倒入大烧杯。蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。 2、加热溶解在烧杯中加入少于所需的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用 玻璃棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入已溶解的药品中，再加热融化，在此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补充所失水分。 3、调pH 用pH试纸或酸碱度计检测培养基的pH值，若pH偏酸，可滴加1mol/L NaoH， 边加边搅拌，并随时检测，直至达到所需pH范围。若偏碱，则用１mol/l HCL进行调节。 pH调节通常放在加琼脂之前。注意pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的
医学微生物学考模拟考试试卷二 一、名词解释（每题3分，共15分） 1. Sterilization: 2. Lysogenic phage / Temperate phage: 3. Weil-Felix reaction： 4. Envelope: 5. Interferon(IFN): 二、填空（每空0.5分，共15分） 1. 细菌的生长方式是繁殖，繁殖速度为每代，繁殖过程包括、、、，的细菌最典型。 2. 金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌生物学性状的主要区别点为：①，②， ③，④，⑤，⑥。 3. 幽门螺杆菌呈或，营养要求较高，需在微需氧条件下才能生长，即、 和，形成菌落。幽门螺杆菌生化反应不活泼，不分解，但、、。幽门螺杆菌的致病与、毒素有关，在慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡患者的胃粘膜检出率较高。 4. 大肠杆菌有O、H、K三种抗原，O抗原是脂多糖最外层的，刺激机体后主要产生类抗体；H抗原位于细菌的上，刺激机体后主要产生类抗体；K抗原位于O抗原外层，与细菌的有关。 三、最佳选择题（每题1分，共30分） 1、下列描述中，不属于所有微生物的共同特点是：（） A：体积微小；B：结构简单；C：种类繁多；D：可无致病性；E：严格活细胞内生长繁殖。 2、与细菌耐药性有关的遗传物质是：（） A：普通菌毛；B：性菌毛；C：细菌染色体；D：质粒；E：毒性噬菌体。 3、条件致病菌的条件是：（） A：正常菌群耐药性改变；B：正常菌群遗传性状改变；C：肠蠕动减慢使细菌增多； D：长期使用广谱抗生素；E：各种原因造成的免疫功能亢进。 4、下列生物制品，何种易引起Ⅰ型超敏反应：（） A：丙种球蛋白；B：胎盘球蛋白；C：抗毒素；D：白细胞介素；E：干扰素。 5、下列各组中均属专性厌氧菌的是：（） A：破伤风杆菌、肉毒杆菌、结核杆菌；B：产气荚膜杆菌、乳酸杆菌、流感嗜血杆菌； C：产气荚膜杆菌、肉毒杆菌、脆弱类杆菌；D：破伤风杆菌、炭疽杆菌；变形杆菌； E：肉毒杆菌、破伤风杆菌、白喉杆菌。
实验一、微生物得简单染色思考题 1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么? 答:油镜在使用时必须在载玻片与物镜之间滴加镜头油。油镜使用过程中要注意两点：(１）、使用后镜头得清洁：镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度，用完油镜必须进行“三擦”(观察完毕,上悬镜筒,先用擦镜纸擦去镜头上得油,然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯（或者乙醇乙醚溶液)擦去残留得油,最后用擦镜纸擦去残留得二甲苯，后将镜体全部复原）。 (2)、、观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜,最后用油镜。当目视接目镜时,特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器,以免压碎玻片或损伤镜面. 2、使用油镜时,为什么必须用镜头油？ 答：在使用普通显微镜时，当光线由反光镜通过玻片与镜头之间得空气时，由于空气与玻片得密度不同,使光线受到曲折,发生散射，降低了视野得照明度。若中间得介质就是一层油（其折射率与玻片得相近）,则几乎不发生折射,增加了视野得进光量，从而使物象更加清晰。3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不就是直接用高倍镜或油镜观察？ 答：低倍镜视野比较大，能瞧到得范围大，容易找到观察得目标,然后在用放大倍数高得高倍镜或油镜有目得得观察。 实验二、革兰氏染色 (１）为什么必须用培养2４ｈ以内得菌体进行革兰氏染色？ 答：24h以内得菌体处于活跃生长期，菌体细胞壁具有典型特征，而处于老龄得革兰氏阳性细菌壁结构开始发生变化，染色时会被染成红色而造成假阴性 （2）要得到正确得革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步就是关键步骤?为什么? 答：应注意如下几点： 其一,选用活跃生长期菌种染色,老龄得革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性； 其二，涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性; 其三,脱色就是革兰氏染色就是否成功得关键，脱色不够造成假阳性,脱色过度造成假阴性（3）当您对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？ 答：当要确证未知菌得革兰氏反应时,可用已知菌进行混合涂片,使二者染色条件保持一致,如果已知菌得结果与预期相符，则证明操作操作正确，结果可靠。 实验三、微生物得显微镜直接计数法 1、在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点? 答:1）优点:直观、快速、操作简单。 2）缺点: 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌得计数; 需要相对高得细菌浓度； 个体小得细菌在显微镜下难以观察； 实验四、微生物大小得测定 1、在不改变目镜与目镜测微尺，而改用不同放大倍数得物镜来测定同一细菌得大小时,其测定结果就是否相同?为什么？ 答:相同；目镜测微尺就是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分得刻度，有把５毫米刻成为50等分或把10毫米长度刻成100等分.测量时,将其放在接目镜中得隔板上来测量经显微镜放大后得细胞物象。由于在不改变目镜与目镜测微尺，而改用不同放大倍数得物镜来测定同一细菌得大小时，物象得放大倍数与每小格目镜测微尺所代表得长度在变化比例上就是同步得，
试题编号：418 试题名称：微生物学 注意：答题一律答在答题纸上，答在草稿纸或试卷上一律无效 一、概念阐述（每小题3分，共30分） 溶源性转变无菌技术营养缺陷型土壤微生物区系分析 基因工程发酵 Ames test 接合孢子硝化作用周质空间 二、正确答案选择（每小题3分，共30分） （认真阅读下列各题，将正确答案代号填入空格内） 1．某些细菌可以通过产生来抵抗干燥、高温等不良环境的影响。 A．荚膜 B.伴孢晶体 C.芽孢 D.原生质体 下列是四个微生物学的经典实验，其中能用来证明突变的自发性。 A、普遍性转导 B、波动性实验 C、病毒重组实验 D、Ames实验 3．在下列微生物中__________能进行产氧的光合作用。 A. 枯草杆菌 B、螺旋藻 C、紫硫细菌 D、螺旋体 4．酵母菌的细胞壁的主要成分是_________。 A. 几丁质和纤维素 B、葡聚糖和脂多糖 C、葡聚糖和甘露聚糖 D、肽聚糖和甘露聚糖 5．链霉素能够，因而阻止细菌正常生长。 A、抑制细胞壁的合成 B、抑制蛋白质的合成 C、抑制细胞膜的功能 D、抑制核酸的合成 6．细菌H抗原的化学成分主要是。 A、蛋白质 B、核酸 C、多糖类 D、PHB 7．根据菌体生长对氧气的需求，酿酒酵母属于。 A．兼性厌氧B．专性厌氧C．专性好氧D．耐氧菌 8．古细菌概念的提出依据是1977年Woese对核苷酸顺序同源性的测定分析。 A．23SrRNA B. 18SrRNA C. mRNA D. 16SrRNA 9．反转录病毒的核酸类型属于。 A. +RNA B.±RNA C.+DNA D.-RNA. 10．在大肠杆菌基因图谱测定的供体菌属于菌株。 A．F +B．F-C．F’D．Hfr 11．下列方法中测定样品中微生物活菌数量的方法是。 A．比浊法B．MPN法C．测含氮量法D．称干重法 12．我国卫生部规定的饮用水的卫生标准中规定大肠杆菌数量不应超过A．100个/升B．3个/升C．100个/毫升D．3个/毫升 13．下列物质中可以作为细菌的碳素储藏物。 A．肽聚糖B．聚-羟基丁酸C．淀粉D．异染颗粒 14．水源污染程度的表示方法很多，下列表示方法中与微生物代谢有关的
从土壤中分离纯培养微生物并作初步观察鉴定 实验报告 生物科学与技术系 09食品（2）班 姓名：xxx 学号：xxx
从土壤中分离纯培养微生物并作初步观察鉴定 【摘要】利用分离纯化微生物的基本操作技术对土壤中的微生物进行分离与纯化，根据菌落形态观察及一系列的生理生化试验的结果，对照种属特征初步鉴定分离纯化的微生物所属的类群。 【关键词】细菌放线菌霉菌划线分离培养基的配制高压蒸汽灭菌 前言： 在自然条件下，微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。群落是不同种类微物的混和体。为了生产和科研的需要，人们往往需要从自然界混杂的微生物群体中分离出 具有特殊功能的纯种微生物；或重新分离被其他微生物污染或因自发突变而丧失原 有优良性状的菌株；或通过诱变及遗传改造后选出优良性状的突变株及重组株。这种获得单一菌株纯培养的方法称为微生物的分离纯化技术。纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细胞或孢子都是由一个细胞分裂、繁殖而产生的后代。 分离纯化技术主要由采集样品、富集培养、纯种分离和性能测定等几个基本环节组成。 实验目的： 1、学习从土壤中分离、纯化微生物的原理与方法。 2、学习、掌握微生物的鉴定方法。 3、对提取的土样进行微生物分离、纯化培养，根据菌落的形态特征判断未知菌的类别。实验原理： 从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。通过如下几种方法可以分离纯化微生物：稀释倒平板法(pour plate method)、涂布平板法(spread plate method)、稀释摇管法(dilution shake culture method)、平板划线分离法（stesak plate method）。 此次实验采取的是平板分离法，该方法操作简便，普遍用于微生物的分离与纯化，其基本原理主要包括两个方面：（一）选择适合于待分离微生物的生长条件或加入某种抑制剂造成只利于待分离微生物生长，而抑制其它微生物生长的环境，从而淘汰大部分不需要的微生物。（二）微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细
1下列说法不正确的是（ B ）+ A）微生物是个体最小的生物 B）微生物都是原核生物 C）微生物种类很多 D）微生物学是研究微生物形态、生理、遗传变异、生态分布、分类及其与人类关系的科学 2根据微生物的细胞结构、组成等特点可将其分为（ B ）+ A）真核细胞型、原核细胞型 B）真核细胞型、原核细胞型、非细胞结构型 C）原核细胞型、非细胞结构型 D）真核细胞型、非细胞结构型 3每个个体只有一种核酸类型的微生物是（ D ）++ A）支原体 B）衣原体 C）立克次体 D）病毒 4下列对原核型微生物结构描述中，正确的一项是（D ）+ A）有细胞壁但是不含肽聚糖
B）有细胞膜且含有胆固醇 C）有线粒体、质网、溶酶体等 D）无核膜，核质为裸露环状DNA 5下列有关物质进出细胞方式的叙述错误的是？（C）++ A）主动运输一定需要消耗能量 B）促进扩散一定需要载体 C）促进扩散一定需要能量 D）单纯扩散一定是顺浓度梯度进行的 6靛基质试验主要是测定细菌分解蛋白胨中的（D ）。++ A）胱氨酸 B）鸟氨酸 C）赖氨酸 D）色氨酸 知识点2：（细菌的生长繁殖和生态）难易度:简单认知度：理解7下列哪项不是微生物种群间的相互关系（C ）。++ A）互生 B）共生 C）竞争
D）拮抗 8以下有关毒力质粒说法，不正确的是（A ）+ A）毒力质粒是编码性菌毛的质粒 B）毒力质粒也就是Vi质粒 C）致病性大肠杆菌的K质粒属于毒力质粒 D）毒力质粒是编码细菌各种毒力因子的质粒 9介导细菌间接合的物质是（ D ）+ A）鞭毛 B）核糖体 C）普通菌毛 D）性菌毛 10细菌分类的基本单位是（D ）+ A）型 B）目 C）属 D）种 11按细菌对氧气的需求进行分类的依据属于（ C ）+ A）形态特征