植物组织培养复习题
植物组织培养复习题（习题）
一、名词解释
愈伤组织：在培养基上由培养物产生的无序生长且没有一定结构的薄壁细胞团。
外植体：在组织培养中，由植物体上取下来进行离体培养的那部分组织或器官.
脱分化：由高度分化的植物器官，组织或细胞经过离体培养，产生愈伤组织的过程。
半连续培养：利用培养罐进行大量细胞培养的一种方式。
无性系变异：由任何形式的细胞培养所产生的植株所表现出来的差异。
胚状体：在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。
看护培养：用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织培养细胞的一种方法。
无融合生殖：由配囊中卵细胞以外的其他细胞发育成的单倍体植株。
种质：亲代通过生殖细胞活体细胞直接传递给子代并决定固有生物性状的遗传物质。
悬浮培养：将游离的植物单细胞或小细胞团，按一定的细胞密度在受到不断拉动或摇动的液体培养基中进行培养的一种方式。
早熟萌发：在培养后迅速萌发为幼苗，不继续进行胚状生长，超过正常发育阶段。
选择压：在2个相对性状之间，一个性状被选择而生存下来的优势。
细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞具有全部的遗传信息，在一定条件下，均具有分化，发育成完整植株的潜在能力。
条件培养基：在培养集中加入高密度的细胞进行培养，经过一段时间后，这些细胞向培养基中分泌一些促进细胞生长的活性物质，使培养基条件化，使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。
离体授粉：将未授粉的胚珠，子房或柱头从母体上分离下来，进行无菌培养，并通过一定的方式授给无菌花粉，使其在试管内实现受精的技术。
同步化培养：培养基中大多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段。
植板率：(每个平板上形成的细胞团数/ 每个平板上接种的细胞总数) * 100%、
继代培养：对来自于外植体所增殖的培养物通过更换新鲜培养基及不断切割分离进行的连续多代的培养。
无性系：由任何形式的细胞培养所产生的植株。
细胞融合：在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。
二、填空题
1、根据外植体的的种类不同，组织培养可以分为组织培养、细胞培养、器官培养、原生质培养和胚胎培养五种类型。根据培养基的物理性状，组织培养可以分为固体培养基和液体培养基两种类型。
2、对高温高压条件下易降解变质的物质，在灭菌时应采用过滤灭菌方法。
3、植物组织培养过程中，细胞分裂素与生长素比值（CTK/IAA）高低决定了器官的分化类型，其比值高有利于芽，比值低有利于根，而两者相等时则促进愈伤组织形成。
4、在细胞悬浮培养过程中，细胞的生长周期呈“S”型曲线，可分为五个阶段，分别是延滞期、对数生长期、直线生长期、缓慢期和静止期。
5、酒精和升汞是两种常用的外植体表面消毒剂，它们的使用浓度分别为70-75%和0.1-1%；消毒时间的范围分别为0.2-2min和2-15min。
6、单细胞培养的方法有平板培养法、看护培养法、微室培养法和条件培养基培养法等四种方法。
7、在细胞悬浮培养时，实现培养细胞同步化的方法有饥饿法和抑制法。
8、实现细胞全能性的条件是组织或器官解离和给予所需的营养物质。
9、常用于诱导愈伤组织的植物激素是2，4-D。
10、用来做茎尖脱毒的外植体大小一般为0.1～0.25mm。
11、在冷冻保存中，对植物材料伤害最小的防护剂一般是二甲基亚砜（DMSO)。
12、支撑植物组织培养作为一门技术的两个重要模式是培养基模式和激素调控模式。
13、无病毒植株的鉴定方法主要有直接测定法、指示植物法、抗血清鉴定法、核酸分析法和电镜显微检测法等
14、用于细胞活力的测定方法有TTC、FDA和伊凡蓝染色法。
15、通过离体培养可获得单倍体植株的材料有花粉和未受精胚珠。
16、用来做茎尖脱毒的外植体大小一般为小于0.3mm。
17、植物离体快速繁殖的方式中，遗传性状稳定的有器官型、短枝发生型。
18、典型的人工种子由体细胞胚、人工胚乳和人工种皮构成。
19、原生质体的分离纯化过程中要添加渗透压稳定剂和原生质膜稳定剂提高原生质产量和活力，属于质膜稳定剂的有葡聚糖硫酸钾、CaCl2。
20、根据不同植物的生长发育特点，快速繁殖的途径有短株发生型、器官发生型、胚胎发生型和原球茎发生型。
21、组织培养中碳源的主要作用是合成有机物和维持合适的渗透压。
22、目前用于细胞融合的方法主要有自发融合和诱导融合两种。
23、原生质体的纯化方法有沉降法、悬浮法和界面法。
24、悬浮培养中细胞生长的测定方法：细胞计数、细胞密实体积（PCV）及细胞总体积、细胞鲜重和干重、细胞有丝分裂的指数。
25、振荡培养的目的：改善液体培养基中培养材料的通气状况。
26、单倍体育种的主要有优点是：缩短育种年限、后代不出现性状分离。
27、常用于诱导胡萝卜胚性愈伤组织的植物激素是生长素，胚状体的形成则是在细胞分裂素的促进下。
28、在组织培养的发展史上，1958年Steward报道了胡萝卜细胞悬浮培养；1978年Melchers报道了马铃薯和番茄的融合培养；1960年Cooking报道了诱导鸡红细胞与酵母细胞融合培养。
29、在胚乳培养中，由裸子植物胚乳发育成的植株为单倍体；被子植物胚乳发育成的植株为三倍体。
30、组织培养中的突变可分为体细胞无性系变异和加选择压（化学物质）诱导产生的变异。
三、单选题
1、常用于诱导愈伤组织的植物激素是（B ）。
A 6-BA
B 2，4-D
C IBA
D ZT
2、在用物理方法诱导原生质体融合时，下列哪种方法不在此列（C ）。
A 电刺激
B 显微操作
C 多聚化合物
D 振荡
3、用来做茎尖脱毒的外植体大小一般为（A ）
A 0.2～0.3mm
B 0.5mm
C 0.5～1mm
D 10mm
4、用酶解法分离原生质的离析液中，下列哪种物质具有抑制核糖核酸酶的作用（D ）。
A 葡聚糖硫酸钾
B CaCl2
C 甘露醇
D MgSO4
5、在冷冻保存中，对植物材料伤害最小的防护剂一般是（A ）。
A 二甲基亚砜
B 氯化钙
C 甘露醇
D 脯氨酸
四、简答题（论述题）
1、植物离体快速繁殖的途径有哪些？
答：1.无菌母株的制备 2.继代芽的增殖 3.芽苗生根培养 4.再生根的锻炼和移栽
2、脱除植物病毒的方法有哪些？为什么茎尖分生组织培养能够除去植物病毒？
答：1.茎尖培养脱毒 2.热处理脱毒 3.愈伤组织脱毒 4.微体嫁接脱毒 5.珠心培养脱毒 6.化学疗法
3、糖在幼胚培养中的生理作用？
答：（1）调节培养基的渗透压（2）作为碳源和能源（3）防止幼胚早期发育
4、单细胞分离的方法有哪些？各有什么优缺点？
答：机械法；酶解法；由培养的愈伤组织中分离单细胞
机械法：优点：1.细胞不受酶的伤害 2.不发生质器分离；
缺点：1.材料要求是薄壁细胞，组织排列松散 2.产量低
酶解法：优点：能得到比较均匀一致的海绵组织或栅栏组织细胞
缺点：在分离细胞时，必须对酶液给予渗透压保护，防止细胞的账裂。
5、通过机械法和酶解法比较原生质体分离优缺点。
机械法：优点：可避免酶制剂对原生质的某些破坏作用。
缺点：获得的原生质少，产生的原生质的细胞类型限制，一般取材局限于具有液泡化程度较大的细胞或长形的细胞组织。
酶解法：优点：可以获得大量的原生质体，适用于几乎所有植物和器官，双子叶植物叶肉细胞比单子叶更易分离。缺点：酶制剂含有核酸酶，蛋白酶，过氧化物酶及酚类物质，会影响原生质体的活力。
6、简述细胞培养的应用。
一、天然化合物的生产与特化：(1)植物次生代谢物的产生、(2)进行特化的生物转化反应、(3)细胞的工厂化生产二：突变体选择：（1）直接选择法、（2）间接选择法、（3）诱导多倍体
7、简述实现悬浮培养细胞同步化的两种主要方法：
（1）饥饿法（2）抑制法
8、单倍体育种优点是什么？
（1）良好的遗传研究材料
（2）加速育苗进程
（3）提高选育效率
（4）突变体选育，单倍体植株基因表达不受遮蔽，可以充分展示基因型所决定的表现型
（5）遗传转化受体，确保外源基因的稳定遗传，大大提高遗传转化率
（6）利用单倍体育种时，栽培品种进行纯化对基因型混杂品种进行纯化。
9、原生质体培养的意义。
（1）比较容易摄取外来的遗传物质，研究植物原生质体培养和再生植株技术，有可能采取细胞遗传工程的方法培育出新品种。
（2）便于进行细胞融合，形成杂交细胞，可广泛的重组植物界优良遗传性状，创造新品种。
（3）原生质体可以作为遗传理论研究的材料。
10、细胞培养的工业应用有哪些方面：
（1）高产细胞株的选择（2）种子的培养（3）大规模培养
11、在原生质体分离与纯化过程中，影响原生质体活力和数量的因素有哪些？
(1)光：一般在黑暗静止条件下进行。
(2)温度：酶解温度25-30，兼顾原生质稳定性及酶活性
(3)时间：几小时或几十小时，太长时间影响原生质活力，一般少于24小时
(4)细胞壁降解酶的种类和组合
(5)渗透压的稳定性种类
(6)原生质膜稳定剂
(7)PH影响
12、简述离体授粉的主要方式？
（1）离体柱头授粉（2）离体子房授粉（3）离体胚珠授粉
13、简述试管苗移栽不易成活的原因？
（1）根系结构不完善，不生根，根与芽的输导不相通（愈伤组织），再生根的吸收功能差；
（2）叶部结构不完善，缺少角质层和蜡质层，保水性差，缺少叶表皮毛，保湿，反光性差，气孔开度大，关闭能力差，叶片中的栅栏组织发育不完善，结合能力低。
14、种质保存的意义有哪些？
①所占空间少，节省人力、物力和土地；
②有利于国际间的种质交流及濒危物种抢救和快繁；
③需要时，可以用离体培养方法很快大量繁殖；
④避免自然灾害引起的种质丢失。
15、概述花粉培养在育种上的应用？
（1）单倍体育种;
（2）对于二倍体植物加倍变成四倍体或倍数更高的多倍体，可以改善原来植物的某些经济性状;
（3）对异花授粉作物（如玉米）的单倍体植株进行加倍，可迅速获得自交系，免去了烦琐的人工自交过程，节省大量的时间和人力；
（4）排除显隐性基因干扰，有利于进行突变体选择
16、植物子房内授粉的意义是什么？
在离体条件下，将无菌花粉直接引入子房中，使花粉粒在子房中萌发，完成受精，并获得具有生活力的种子的发育，可以克服柱头或花柱授粉不亲和性障碍。
17、茎尖脱毒的理论依据是什么？
（1）茎尖由分生组织构成，无维管束胞间连丝也不发达，病毒很难进入；
（2）分生组织不断进行活跃的分裂增殖，需要消耗大量能量。代谢旺盛，能抑制病毒复制；
（3）茎尖和根尖中内源激素浓度在很高的水平，抑制病毒复制
18、概述胚乳培养的意义？
（1）三倍体幼苗和植株的获得: 对于以种子生产为目的的植物是无益的；但有时无籽果实及以营养体生产为目的的植物则具有重要经济价值。如苹果、香蕉、桑树、西瓜、甜菜、茶及某些花卉的三倍体经济性状更优越。
（2）胚乳植株染色体的不稳定性，为染色体工程的研究提供有效的途径。（染色体不稳定的原因和变化规律）
（3）为研究淀粉、蛋白质和脂肪等产物的生物合成及其代谢，提供了良好的实验系统。
19、植物细胞规模化培养与次生产物生产前景如何？为什么？
利用植物细胞培养生产代谢产物具有十分广阔的前景。目前植物细胞培养生产的化合物很多，包括糖类、酚类、脂类、蛋白质、核酸以及帖类和生物碱等初生和次生代谢产物，植物细胞培养的应用主要包括以下3个方面：
（1）有用物质（次生代谢产物）的生产；
（2）植物无性系的快速繁殖和遗传突变体的筛选；
（3）植物细胞遗传、生理、生化和病毒方面的深入研究。通过植物细胞培养生产药用成分取得了很大的进展，目前已经研究过的植物有400多种，能够生产超过600多种的成分，其中有相当大部分具有药用价值，如紫草细胞培养生产紫草宁、人参细胞培养生产人参皂苷以及黄连细胞培养生产黄连素等。
20、试述离体受精的类型及其意义。
类型：胚珠授粉，子房授粉，柱头授粉。
意义：克服远缘杂交过程中的受精前障碍，获得可育性种子。
21、论述植物快速繁殖的过程。
（1）无菌母株的制备：初代培养，选取性状优良，稳定，生长健壮，无病虫害植株上的外植体，经适当存放灭菌处理后，接种在培养基上，诱导其产生芽和愈伤组织。
（2）继代芽的增殖：无菌母株再次切割进行继代培养，芽分化增殖成丛芽，加快繁殖速度
（3）芽苗生根培养：诱导无根苗生根的方法：
a.试管内生根：将无菌小枝条转入生根培养基中进行培养;
b.试管外生根：有些植物可以将离体条件下形成的枝条，在基部切口处，用生根粉和滑石粉混合的IBA涂抹，然后种植到温室或田间，这样可大大降低成本。
（4）再生根的锻炼与移栽
A.将小苗根系周围的培养基冲洗干净，以避免有害生物的污染
B筛选适宜的移栽基质，选较好保水性和通气性的
C选择使用营养钵，苗床及遮阳网，以调控光，温度，湿度等
D移栽前后培养条件发生改变
22、论述脱除植物病毒的方法及其原理。
（1）热处理脱毒；原理：
1.某些病毒受热后不稳定，高温使这些病毒失去活性，可以部分地或完全的被钝化
2.病毒进入植物细胞后，随植物细胞的DNA一起复制，热处理钝化病毒的活性后，病毒在植物体内增殖减缓或增殖停止，而失去侵染的能力
3.高温下，一方面不能生成或生成病毒很少，另一方面对病毒的破坏作用加重，病毒颗粒生成和破坏的平衡程度受到破坏，使感染植株的病毒含量不断降低，经过一段时间，病毒自行消失，而达到脱毒的目的。
（2）愈伤组织脱毒；原理：
1.细胞的增殖速度快于病毒复制的速度
2.细胞产生变异，获得对病毒感染的抗性，最终表现出脱毒现象。
（3）微体嫁接脱毒；
（4）珠心胚培养脱毒；原理：
珠心组织与维管束没有联系，所以可以培养珠心组织，得到无病毒植株。
（5）化学疗法；原理：
化学药剂对病毒的杀伤力。
（6）茎尖培养脱毒；原理：
茎尖几乎不含病毒，采用旺盛分裂的茎尖组织培养，就有可能去除病毒。
注：具体答案参照各自教材
植物组织培养练习题
1. 植物组织培养：指要人工控制的条件下，将植物体的任何部分，或器官、或组织、或细胞，
进行离体培养，使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件，即营养条件和环境条件；
植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。
2. 愈伤组织培养：将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存在，而使其细胞
脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再生植株。
3. 外植体：植物组织培养中的各种接种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质
体等。
4. 脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。
5、接种：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞，转放到无菌培养基上的全部操作过程。
6、褐变：外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类
物质，这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色，而且还会抑制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐而死亡的现象。
二填空
植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。
2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。
3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。
4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。
5的表面灭菌和接种，培养；试管苗的驯化、移栽与初期管理。
6实验室、摄影室等分室，另加驯化室、温室和大棚。
7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。
8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。
9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。
11、液体培养是将培养物方在液体培养基中培养，又称为液体震荡培养。
三、
1、简述培养基的配制、分装、包扎和灭菌。
答：
（1）确定培养基的配方。（2）贮备液（或母液）的配制与保存配一些浓溶液，用时稀释，这种浓溶液叫贮备液或母液。按药品种类和性质分别配制，单项、单独保存或几种混合保存。一般应按配方顺序依次称量，分别溶解在少量蒸馏水中，最后再依次加到一起，并定容到规定体积。贮备液配好后贴上标签，保存在冰箱中。
（3）配制培养基
●先在洁净的不锈钢锅理放入约750ml蒸馏水，加入所需要的琼脂和糖，最好能在水浴锅理将琼脂溶化，如直接加热应不停地搅拌，防止在锅底烧焦或沸腾溢出。
●按需要加入相应量的母液。
●按需要加入相应量的植物激素和其它物质。加蒸馏水定容，●充分混合好后，用1NKOH（或NaOH）调整PH值到所需值。（4）分装：按容器的大小和培养要求，趁热将适量培养基分注到三角瓶或试管中，并即刻用封口膜封住瓶口。
（5）灭菌：压力108kPa，温度121度，时间15—30分钟。2、什么叫接种？简述无菌操作注意事项。答：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞，转放到无菌培养基上的全部操作过程叫接种。无菌操作注意事项好下：
（1）进无菌室之前，操作人员需着经灭菌的白色工作服，戴口罩。操作人员双手必顺进行灭菌。植物组织培养室的核心是无菌室（又叫接种室），怎样进行无菌室的灭菌？
答：
（1）常规灭菌法
●用70%酒精（或0.1%新洁尔灭）朝天花板、四周墙壁方向喷洒；
●待整个室喷洒完毕后依次用70%酒精将台子揩一遍；
●用湿拖把（70%酒精打湿），把地板拖一次；
●然后将无菌室的门关闭，开紫外灯，照射5~30分钟；
●0.5~2小时后进入室内操作，待工作完毕后，将室门打开换气。以后每用一次灭菌一次。
（2）无菌室发现霉斑（墙上）时的灭菌
●用70%酒精擦一遍（里里外外）；
●用新配70%酒精重复再擦一遍；
●甲醛蒸：方法是每立方米空间用2ml甲醛（福尔马林）加0.2克高锰酸钾的比例，蒸房间24小时（门窗密闭），然后开启房门，放走甲醛气体。
●常规灭菌法再灭菌一次。待用。
4、什么叫污染？污染的原因有哪些？简述预防污染的措施？
污染是指在组培过程中，由于真菌、细菌等微生物的浸染，在培养器内滋生大量的菌斑，使培养材料不能正常生长和发育的现象。污染原因有以下几种：
●培养基及各种使用器具消毒不彻底；
●外植体灭菌时不彻底，在菌残存在细胞组织中；
●操作时人为因素带入；●环境不清洁；
●超净工作区域污染。
预防污染的措施：做好器具灭菌、外植体灭菌，做好无菌操作技术，搞好组培室环境条件，正确使用和维护好超净工作台。
5、简述培养物的玻璃化现象及其预防措施。
答：玻璃化是试管苗的一种生量失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。结果是瓶内的小苗过渡生长，但有用的苗很少。各种不同植物，玻璃化的发生频率各不相同。大量的试验表明：玻璃幕化苗是在芽分化启动后的生长过程中，由碳水化合物、氮代谢和水分状态等发生生理性异常所引起，它由多种因素影响和控制，产生玻璃化的主要原因有：激素浓度、温度、湿度、培养基的硬度、光照时间和培养成分。针对以上原因，可以通过降低培养基的水位；减少培养基中含氮化合物的用量；增加光照强度；调整培养温度；降低培养基中细胞分例素的用量；提高培养基的硬度等措施，来减少玻璃化现象的发生。
6、简述外植体的褐变及其预防措施。
褐变是指在组培过程中，由培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。它的发生是由外植体中的酚类化合物与多酚氧化酶作用被氧化形成褐色的醌类化合物，醌类化合物在酪氨酸酶的作用下，与外植体组织中的蛋白质发生聚合，进一步引起其他酶系数失活，导致组织代谢紊乱，生长受阻，最终逐渐死亡。引起褐变的原因包括外植体本身、培养基及培养条件等方面的影响。减轻褐化现象的途径有以下：
●外植体和培养材料进行20—40天的遮光培养或暗培养；
●选择适宜的培养基，调整激素用量；
●控制温度和光照，在不影响正常生长和分化的前提下，尽量降低温度，减少光照；
●冬春季节选择年龄适宜的外植体材料进行组培，并加大接种数量；
●在培养基中加入抗氧化剂和其他抑制剂，如抗坏血酸、硫代硫酸钠、有机酸、半光氨酸及其盐酸盐、亚硫酸氢钠、氨基酸等，可以有效地抑制褐化；
●加快继代传瓶的速度，添加活性炭等吸附剂（0.5%—2.5%），是生产上常用的有效方法。
四、请设计一个组织培养室，说明规模、面积、作用、目的、各室作用，并绘出平面图。
专题3 植物的组织培养技术测试题
一．单选题
1．植物细胞表现出全能性的必要条件是（）
A.给予适宜的营养和外部条件
B.导入其它细胞的基因
C.脱离母体后，给予适宜的营养和外部条件
D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内
2．以下成为组织培养条件的是( )
①C02 ②有机物③生长素④细胞分裂素⑤水⑥矿质元素
A. ①③⑤⑥
B. ②③⑤⑥
C. ②③④⑤⑥
D. ①②⑤⑥
3．无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键, 以下说法正确的是( )
①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差, 对无菌操作的要求非常严格
②对培养基及器械用高压蒸汽灭菌③对培养材料进行表面灭菌时一方面要考虑药剂的
消毒效果, 另一方面还要考虑植物材料的耐受能力④不同药剂、不同植物材料甚至不
同器官要区别对待⑤对培养材料可用高压蒸汽灭菌⑥如果不小心导致污染, 将
可能造成培养工作的前功尽弃
A. ①②③④⑤
B. ①②③④
C. ①②③④⑥
D. ①②③④⑤⑥
4．愈伤组织分化过程中, 当培养基中细胞分裂素/ 生长素的比值较低时, 诱导分化的器
官是( )
A. 根
B. 芽
C. 叶
D. 胚性细胞团
5．当先使用细胞分裂素, 后使用生长素时, 实验结果是( ) 。
A. 有利于细胞分裂, 但细胞不分化
B. 细胞既分裂又分化
C. 分化频率提高
D. 有利于细胞分化, 但不分裂
6.在植物组织培养中，切取胡萝卜的外植体时一般选择（）
A．具有木质部的部分B．具有韧皮部的部分
C．具有形成层的部分D．具有髓的部分
7．菊花的组织培养一般选择（）
A．开过花的老枝B．正在开花的枝条
C．未开花植株的茎上部新萌生的侧枝D．任何枝条均可
8．动物细胞培养与植物组织培养的重要区别是（）
A．培养基不同
B．动物细胞不需要在无菌条件下进行
C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株
9．细胞具有全能性的原因是（）
生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能
生物体的每一个细胞都具有全能性
生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因
D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的
10.在月季花药培养成单倍体植株的过程中，应选择哪个时期最易成活（）
A．单核期前的花药B．单核期后的花药C．单核期花药D．双核期
11.影响花药培养的主要因素是
A．材料的选择与培养基的组成B．亲本植株的生理状况
C．选择合适的花粉发育时期D．材料的低温处理与接种密度
12．粗糙脉孢菌的单倍体细胞中具有7条染色体。两个不同类型的粗糙脉孢菌A和a融
合后成为二倍体，随即发生典型的减数分裂，紧接着又进行一次有丝分裂。此过程最
终形成的子细胞数及每个子细胞中的染色体数分别为（）
A．8个、7条B．8个、14条C．4个、7条D．4个、14条
13．某高等植物体细胞内假设有6条染色体，它们是AaBbDd，那么，一个花粉管中的两个精子中的染色体是（）A．ABD和abd B．AbD和abd C．AaB和Bbd D．Abd和Abd
14．如果某种植物的基因型为AABb，这两对基因分别位于两对同源染色体上，去雄后授
以aabb植株的花粉，其胚乳可能的基因型是（）
A．AAaBBb、AAabbb、AAaBbb B．AABB、AABb
C．AAaBBb、AAabbb D．AaaBbb、Aaabbb
15．一个豆荚中种子的数目，从理论上讲取决于（）
A．花中雌蕊的数目B．雌蕊中柱头的数目
C．子房中受精胚珠的数目D．胚囊中胚的数
二.多选题
16．(2003年高考江苏卷)要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，需要( )
A．具有完整细胞核的细胞B．离体状态
C．导入外源基因D．一定的营养物质和激素
17.（2004年高考广东、广西卷）下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是（）
A．叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞
B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织
C．融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜
D．叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性
18．MS培养基和微生物培养基相比有哪些不同? ( )
A.MS培养基不含有机物
B. 微生物培养基以有机物为主
C.MS培养基不含微量元素
D.MS培养基需提供大量无机营养
三.非选择题
19．下图是被子植物的受精过程
写出图中数字所代表的结构的名称：
①②③④
⑤⑥
（2）草履虫进行生殖；蘑菇进行
生殖，酵母菌和水螅常常进行生殖。
（3）下列图解表示水稻（2n=24）胚珠中胚囊的
发育过程，试根据图回答：
薄壁细胞直接发育减数分裂
珠心孢原细胞（2n）
三次有丝分裂
①水稻种子的种皮遗传物质应为n，其中遗传物质应与相同。
②水稻胚珠中的胚囊应共有染色体条，其中卵细胞中含染色体条；若水稻授粉受精后发育成胚和胚乳，则胚细胞中含有染色体条，胚乳细胞中含染色体条。
③7细胞或8核中的7细胞其中就包括了一个卵细胞和两个极核，若水稻的基因型为AaBb，则胚囊母细胞基因型为。
④如果水稻卵细胞基因型应为Ab，则极核的基因型为，其原因是
。
（4）番茄的染色体数目是24，一个番茄细胞发生减数分裂，形成的细胞中有三个退化消失。剩下一个细胞迅速发生了三次有丝分裂，你会找到多少个细胞核？这些核含有多少个染色体（）§2
A．4个核，各有12个染色体B．4个核，各有24个染色体
C．8个核，各有24个染色体D．8个核，各有12个染色体
（5）玉米的体细胞含有20条染色体。在正常情况下，它的卵细胞、一个极核、胚细胞、胚乳细胞、珠被细胞和子房壁细胞所含染色体数目依次应为（）§2
A．10、10、20、20、20、20 B．10、10、30、30、20、20
C．10、10、20、30、20、20 D．10、20、20、30、20、20
20．阅读下列材料，分析后简要回答问题：
写出以下过程或结构的名称：
A ；
B ；
C ；
D 。
材料2中在获得杂种细胞的容器中还有其他什么细胞？
（3）A过程是否需要光照？；再分化是否需要光照？。
（4）名贵花卉进行离体培养时不应采用该株的（）
A．茎尖B.子房壁C.花粉粒D.叶片
21.（1）植物的胚状体是繁殖的产物。培育胚状体利用了这一项生物技术。
（2）包埋胚状体的胶质可看作种子的哪部分？
（3）由人工种子萌发出的植株是否可育？说明理由。。
22．
参考答案：
1-15：CCCAB CCACC AADCC
16-18：ABD AD BD
19. （1）花粉管子房壁珠被受精极核受精卵珠孔
（2）分裂孢子出芽
（3）2 母方96 12 24 36 AaBb Ab 卵细胞和极核是由单核胚囊经三次有丝分裂而来
（4）D（5）C
20.(1)脱分化;愈伤组织;原生质体a;原生质体b
(2)细胞a、
一、选择题
3．植物体细胞杂交的结果是（ C ）
A.产生杂种植株 B．产生杂种细胞 C．原生质体融合 D．形成愈伤组织
4．科学家把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合，培育出的驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的达到驱蚊且对人体无害的效果。下列关于驱蚊草培育的叙述中，错误的是（ C ） A．驱蚊草的培育属于细胞工程育种，其优点是能克服
远源杂交不亲和的障碍
B．驱蚊草培育过程要用到纤维素酶果胶酶、PEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法 C．驱蚊草培育过程是植物体细胞杂交，不同于植物组织培养无愈伤组织和试管苗形成 D．驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离 5．（2005，上海）将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（ D ） A、具有完整细胞核的细胞 B、一定的营养物质和植物激素 C、离体状态 D、导入指定基因
6．植物体细胞杂交的目的中错误的是（ A ）A.把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上 B.获得杂种植株 C.克服远源杂交不亲和的障碍 D.实现原生质体的融合
7．植物组织培养的用途中不正确的是（ D ）A.快速繁殖 B.生产新品种 C．生产生物碱 D．生产白细胞介素－2
8．A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如右图所示（仅显示细胞核），将A、B两种植物细胞去掉细胞壁后，诱导二者的原生质体融合，形成单核的杂种细胞，若经过组织培养后得到了
杂种植株，则该杂种植株是（） A．二倍体；基因型是DdYyRr B．三倍体；基因型是DdYyRr C．四倍体；基因型是DdYyRr D．四倍体；基因型是DDddYYyyRRrr
9．以下关于原生质的叙述，正确的是（ C ）A、原生质泛指细胞内的基质 B、原生质就是细胞质
C、一个动物细胞就是一团原生质
D、细胞膜、细胞核和细胞壁是原生质
10．不能人工诱导原生质体融合的方法是（ D ） A.振动 B.电刺激 C.PEG试剂 D．重压
11．植物细胞表现出全能性的必要条件是（ C ） A.给予适宜的营养和外界条件 B.导入其他植物细胞的基因
C.脱离母体后给予适宜营养和外界条件
D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内
12．细胞具有全能性的原因是（ C ） A.生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能
B.生物体的每一个细胞都具有全能性
C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因
D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的
13．植物组织培养过程中的脱分化是指（C ） A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B．未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C．植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程
14.下列植物细胞全能性最高的是（B ） A.形成层细胞 B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞
15．植物组织培养过程的顺序是（ A ）①离体的植物器官、组织或细胞②根、芽③愈伤组织④脱分化⑤再分化⑥植物体A．①④③⑤②⑥ B．①④③②⑤⑥ C．①⑤④③②⑥ D．⑥①④③⑤②
16．下列有关细胞工程的叙述不正确的是（C ） A. 在细胞整体水平上定向改变遗传物质 B．在细胞器水平上定向改变遗传物质C．在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物
质 D．在细胞整体水平上获得细胞产品
17．下列细胞全能性最高的是（C ） A．植物的卵细胞 B．植物的精子细胞
C．被子植物的受精卵 D．被子植物的的叶肉细胞
18．植物体细胞融合完成的标志是（ A ）
A、产生新的细胞壁
B、细胞膜发生融合
C、细胞膜发生融合
D、细胞膜发生融合
19.植物体细胞杂交的目的是（ D ）
A.用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的原生质体
B.以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合
C.用植物组织培养法培养融合的原生质体得到杂种植株
D.通过以上三者来完成
20.下列提法正确的是：（ D ） A、原生质专指细胞质 B、人体内的水都属于原生质 C、细胞核不是原生质 D、一个动物细胞就是一团原生质 21．（多选）有关原生质体的下列叙述中，正确的是 ( A B ) A．组
成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸B．原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的原生质 C．被脱掉细胞壁的植物裸露细胞是原生质体 D．原生质体只能用于植物细胞工程
《绪论》复习题及参考答案
一、填空：
★1、根据培养的材料，植物组织培养分：愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养、悬浮培养等类型。
2、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。
3、1902年， Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说，1934年，White出版了《植物组织培养手册》
从而使植物组织培养为一门新兴学科。
二、名词解释：
★1、植物组织培养(plant tissue culture)：是指通过无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。由于培养材料已脱离了母体，又称为植物离体培养（ Plant culture in vitro）。 2、脱分化
（dedifferentiation）：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。 3、再分化（redifferentiation）：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官，这一过程称为植物细胞的再分化。★4、外植体(explant)：由活体（in vivo)植物体上切取下来的，用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞或原生质体等★5、愈伤组织(callus)：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则的薄壁细胞，多在植物体切面上产生。
三、问答题：
1、简述植物组织培养的理论依据？
植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说，即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。
★2、植物组织培养有哪些特点？（1）培养条件可以人为控制（2）生长周期短，繁殖率高：（3）管理方便，利于工厂化生产和自动化控制：★3、植物组织培养的分类？
（1）根据培养对象不同：组织培养、器官培养、
胚胎培养、细胞培养、原生质体培养等；（2）根据培养物培养过程：初代培养、继代培养；（3）根据培养基的物理状态：固体培养、液体培养。
★4、植物组织培养主要应用于哪些方面？（1）快速繁殖运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株；
（2）种苗脱毒针对病毒对农作物造成的严重危害，通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗；（3）培育和创制新品种利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种；（4）大量生产次生代谢物质通过植物细胞培养获得的生物碱、维生素、色素、抗生素以及抗肿瘤药物不下50多个大类，其中已有30多种次生物质的含量在人工培养时已达到或超过亲本植物的水平。植物细胞次生物质的研制与生产硕果累累，后来居上。
（5）植物种质资源的离体保存植物组织培养结合超低温保存技术，可以给植物种质保存带来一次大的飞跃。因为保存一个细胞就相当于保存一粒种子，但所占的空间仅为原来的几万分之一，而且在-193度的液氮中可以长时间保存，不像种子那样需要年年更新或经常更新。
1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。 2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成耒分化的愈伤组织的现象称为 n tv 3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的；升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。 4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法，当把二者结合起來脱毒效 果最好 5.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。 6.White培养基________ 浓度低，适合生根培养。 7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态，并形成_________ 的现象称为“ 脱分化”。 8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进 ________ 的生长，这时 _________ 占主导地位；比值高促进_________ 的生长，这时 _________ 占主导地位。 9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。 1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。 2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。 3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养菇渗透压 4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o 5、在离体叶培养中，6?BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成 6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮，茎和芽的分化主要有4个途径：方?接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。 7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。 8、花药培养前的预处理:低温冷藏是最常用的方法。 1、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和丿、'、/「用阶段。 2、培养基最常用的碳源是蔗糖,使用浓度在1%?5%常用 _3_%o 3、培养基的种类按其态相不同分为固体培养基与液体培养基，其火菌方法一般采用壷热消毒灭菌方法。 4、 pll的大小会影响琼脂的凝固能力，一般当pll大于6.0时，，培养基将会 ___________ ,低于5.0时，琼脂不能很好地凝同。 5、一般情况下，生长索/细胞分裂素的比值高，有利于根的形成和愈伤组织的形成:比值低有利于芽的形成。
植物组织培养练习题 1.植物组织培养：指要人工控制的条件下，将植物体的任何部分，或器官、或组织、或细胞， 进行离体培养，使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件，即营养条件和环境条件； 植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。 2.愈伤组织培养：将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存在，而使其细胞 脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再生植株。 3.外植体：植物组织培养中的各种接种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质 体等。 4.脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。 5、接种：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞，转放到无菌培养基上的 全部操作过程。 6、褐变：外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类 物质，这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色，而且还会抑制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐而死亡的现象。 二填空 植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。 2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。 3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。 4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。 5、一般组织培养的几道工序如下：培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌；无菌操作——材料的表面灭菌和接种，培养；试管苗的驯化、移栽与初期管理。 6、在进行植物组织培养室设计时，其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室、摄影室等分室，另加驯化室、温室和大棚。 7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。 8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。
高中生物植物的组织培养技术知识点总结高中生物植物的组织培养技术基础知识点 1、植物组织培养过程： (1)原理：植物细胞具有全能性。 (2)过程： 2、用途： (1)微型繁殖 微型繁殖就是用于快速繁殖优良品神的植物组织培养 技术，也叫快速繁殖技术。繁殖过程中的分裂方式是有丝分裂，亲、子代细胞内DNA不变，所以能够保证亲、子代遗传特性不变。 (2)作物脱毒 作物脱毒是利用茎尖、根尖等无毒组织，进行微型繁殖，所获幼苗是无毒的。 (3)人工种子：通过组织培养技术，可把植物组织的细 胞培养成在形态及生理上与天然种子胚相似的胚状体，也叫作体细胞胚。这种体细胞胚有于叶、根、茎分生组织的结构。科学家把体细胞胚包埋在胶囊内形成球状结构，使其具备种子机能。所以，人工种子是一种人工制造的代替天然种子的颗粒体，可以直接播种于田间。 ①制作方法：人工种子是利用植物组织培养获得胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等，然后包上人丁种皮就形成了人工种
子，如图： ②优点：可使在自然条件下不结实或种子昂贵的植物得以繁殖;保持亲本的优良性状，因该过程为无性繁殖;节约粮食，减少种子的使用;可以控制添加一些物质，如除草剂、农药、促进生长的激素、有益菌等。周期短，易储存和运输，不受气候和地域的限制。 (4)细胞产物的工厂化生产：从人工培养的愈伤组织细胞中提取某种成分，如紫草素、香料等。 高中生物植物的组织培养技术重要知识点 1、植物细胞的全能性 (1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 (2)原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。 (3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。 2、作物新品种培育 (1)单倍体育种： ①过程：植株(AaBb)通过减数分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四种类型);对花粉进行花药离体培养(技术是植物组织培养);得到单倍体植株;对其幼苗时期进行秋水仙素处理;得到了正常的纯合二倍体植株(AABB、Aabb、aaBB、aabb四种类型)。
植物组织培养复习题（习题） 一、名词解释 愈伤组织：在培养基上由培养物产生的无序生长且没有一定结构的薄壁细胞团。 外植体：在组织培养中，由植物体上取下来进行离体培养的那部分组织或器官. 脱分化：由高度分化的植物器官，组织或细胞经过离体培养，产生愈伤组织的过程。 半连续培养：利用培养罐进行大量细胞培养的一种方式。 无性系变异：由任何形式的细胞培养所产生的植株所表现出来的差异。 胚状体：在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。 看护培养：用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织培养细胞的一种方法。 无融合生殖：由配囊中卵细胞以外的其他细胞发育成的单倍体植株。 种质：亲代通过生殖细胞活体细胞直接传递给子代并决定固有生物性状的遗传物质。 悬浮培养：将游离的植物单细胞或小细胞团，按一定的细胞密度在受到不断拉动或摇动的液体培养基中进行培养的一种方式。 早熟萌发：在培养后迅速萌发为幼苗，不继续进行胚状生长，超过正常发育阶段。 选择压：在2个相对性状之间，一个性状被选择而生存下来的优势。 细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞具有全部的遗传信息，在一定条件下，均具有分化，发育成完整植株的潜在能力。 条件培养基：在培养集中加入高密度的细胞进行培养，经过一段时间后，这些细胞向培养基中分泌一些促进细胞生长的活性物质，使培养基条件化，使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。 离体授粉：将未授粉的胚珠，子房或柱头从母体上分离下来，进行无菌培养，并通过一定的方式授给无菌花粉，使其在试管实现受精的技术。 同步化培养：培养基多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段。 植板率：(每个平板上形成的细胞团数/ 每个平板上接种的细胞总数) * 100%、 继代培养：对来自于外植体所增殖的培养物通过更换新鲜培养基及不断切割分离进行的连续多代的培养。 无性系：由任何形式的细胞培养所产生的植株。 细胞融合：在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。 二、填空题 1、根据外植体的的种类不同，组织培养可以分为组织培养、细胞培养、器官培养、原生质培养和胚胎培养五种类型。根据培养基的物理性状，组织培养可以分为固体培养基和液体培养基两种类型。 2、对高温高压条件下易降解变质的物质，在灭菌时应采用过滤灭菌方法。 . .
植物组织培养综合测试题 一、填空题（每空0.5分） 1. 植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型. 2. 在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的_______其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂. 3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物_______的理论概念；1943年White提出植物细胞“_________”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。 4. 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_________℃. 5. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。
6. 1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__________培养基，其特点是__________浓度较高，且为较稳定的__________。 7. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进__________的生长，这时__________占主导地位；比值高促进__________的生长，这时__________占主导地位. 8. 植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养. 9. 组织培养的特点是：_______、_______、_______. 10. 1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得_________，这促进了花药和花粉培养的研究。 11. 在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌. 12. 6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值__________促进根的生长，这时__________占主导地位；比值__________促进芽的生长，这时__________占主导地位。 13. 在组织培养中，非洲菊是靠__________的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以 __________的方式进行快繁的。
植物的组织培养技术 【学习目标】 1、指导植物组织培养技术的基本原理和基本技术。 2、掌握植物培养过程中使用的无菌技术（重点）。 3、掌握植物知识培养的基本过程及操作。 4、说出被子植物花粉发育的过程及花药例题培养产生花粉植株的两种途径。 5、说出花药离体培养的因素，学习话要例题培养的基本技术。 【要点梳理】 要点一、植物组织培养的基础知识【高清课堂：植物的组织培养技术 高清未发布 课题1：基础知识】 1、植物组织培养的基本过程： 离体的植物器官、组织或细胞，在培养了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化（去分化）。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。再分化形成的试管苗移栽到地里，可以发育成完整的植物体。植物组织培养的过程可以简要归纳为： 离体的植物器官、组织或细胞（外植体）???→脱分化愈伤组织???→再分化根、芽—→植物体。 2、植物组织培养的理论基础：细胞的全能性 要点诠释： 细胞的全能性与植物组织培养间的关系 ①细胞的全能性是植物组织培养的理论基础。 植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。植物细胞只有脱离了植物体，在一定的外部因素作用下，经过细胞分裂形成愈伤组织，才能表现出全能性，由愈伤组织发育、分化出新的植物体。 ②高度分化的植物细胞仍具有全能性的原因是所有体细胞均来自受精卵的有丝分裂，均有和受精卵相同的一整套遗传信息。 ③植物体的组织、器官的形成，是基因选择性表达的结果，其细胞的全能性受到限制，在离体状态下，其全能性才容易得以表达，表达的过程须经过脱分化和再分化。 ④容易进行营养繁殖的植物细胞，其全能性容易表达，易进行植物组织培养。 要点二、影响植物组织培养的因素 1、无机营养 （1）大量元素：除碳（C ）、氢（H ）、氧（O ）外，还有氮（N ）、磷（P ）、钾（K ）、钙（Ca ）、镁（Mg ）、硫（S ）等元素。 （2）微量元素：包括铁（Fe ）、铜（Cu ）、钼（Mo ）、锌（Zn ）、锰（Mn ）、钴（Co ）、硼（B ）和碘（I ）等。 2、有机营养 （1）维生素类：植物组织培养中经常使用维生素C 、维生素B 1（盐酸硫胺素）、维生素B 6（盐酸吡哆醇）、维生素H （生物素）、叶酸和烟酸等，一般使用浓度为0.1～10 mol ／L 。 （2）氨基酸：有甘氨酸、丝氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、水解酪蛋白（CH ）和水解乳蛋白（LH ）等，是重要的有机氮源。 （3）有机添加物：是一些成分比较复杂，大多含氨基酸、激素、酶等的复杂化合物，它们对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用。 3、植物生长调节物质 植物生长调节物质是培养基中的关键物质，对植物组织培养起着重要、明显的调节作用。植物生长调节物质包括生长素、细胞分裂素及赤霉素等。
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植物组织培养试题库 一、名词 外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子 等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。 热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病 植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。 平板培养法：是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培 养基底上的培养方法。 消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。 玻璃化现象：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水
渍状，这种现象称为玻璃化。 脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在 表现阴性反应的苗木。 灭菌：是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，
即把所有生命的物质全部杀死。 褐变：是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化
成棕褐色的醌类物质，有时使整个培养基变褐，从而抑制其他酶的活性，影响 材料的培养。 微尖嫁接：指在人工培养基上培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技 术。主要程序：无菌砧木培养—茎尖准备—嫁接—嫁接苗培养—移栽。 植物细胞全能性：一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会 有一整套发育成一个完整植株的遗传基础，在适当的条件下可以通过分裂、分化 再生成一个完整的植株。 人工种子：将组织培养产生的体细胞胚或不定牙包裹在能提供养分的胶囊里，再 在胶囊的外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜，形成一种类似自然 种子的结构。 试管苗驯化：植物组织培养中获得的小植株，长期生长在试管或三角瓶内，体表 几乎没有保护组织，生长势弱，适应性差，要露地移栽成活，完成由“异养”到 “自养”的转变，需要一个逐渐适应的驯化过程。 器官培养：植物的根、茎、叶、花器（包括花药、子房）和幼小果实的无菌培 养。 微体嫁接：指将 0.1-0.2mm 的茎尖作为接穗，嫁接到由试管中培养出来的无菌 实生砧木上，继续进行试管培养，愈合成为完整的的植株。 快速繁殖(微繁殖): 用组织培养的方法,使植物的部分器官,组织迅速扩大培养, 并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法. 脱分化:将已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体的抑制性影响下解脱出来, 恢复细胞的分裂活性.一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化. 原生质体融合(体细胞杂交):就是使分离下来的不同亲本的原生质体,在离体条 件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合,像性细胞受精作用那样互相融合 成一体的现象. 愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体,接种到无菌的培养基上,进行愈伤组 织诱导,生长和发育的一门技术
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1 1.细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。 2.分化：指细胞、组织、器官或整株植物从分生组织或幼小状态发育为成熟状态的过程，并在生理、形态上发生的变化。其最大的特征是失去分裂能力。 3.脱分化：植物离休的器官、组织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程，使其回复到胚性细胞的状态。其特征是已失去分裂能力的细胞重新获得了分裂能力。 4.再分化：指由脱分化的细胞再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整的植株的过程。 5.试管苗：指在无菌离体条件下，对植物组织、细胞、器官进行组培所获得的的再生植株。 6.根芽激素理论：根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。 7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。 8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。 9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。 10.无菌操作：亦称接种。指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。 11.植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官(如叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。
农业生物技术第二章植物组织培养试卷 班级___________ 姓名___________ 得分______________ 一、单项选择题（60） 1．植物组织培养是（） A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织B．愈伤组织培育成植株 C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体 D．愈伤组织形成高度液泡化组织 2．由于培养物脱离母株在试管内培养,故将植物组织培养又叫（） C．器官培养 D．离体培养 A.初代培养 B.继代培养 3．细胞形态和功能发生永久性变化过程称为（） A.分生 B.分化 C．脱分化 D．再分化 4．对外植体进行的第一次培养称为（） A.初次培养 B.器官培养 C．初代培养 D．继代培养 5．在人工培养基上通过诱导外植体而形成的一团无序的薄壁细胞团叫（） A.分生组织 B.保护组织 C．同化组织 D．愈伤组织 6．大量生产实践证明,通过（）可以有效地去除植物体内的病毒,获得无毒种苗. A.茎段培养技术 B.茎尖脱毒技术 C．组织快繁技术 D．转基因技术 7．植物体因受伤或生理上分离而失掉组织或器官后,恢复或复制失去的部分,形成新的完整植株的能力,称为（） A.植物细胞全能性 B.植物的极性现象 C．植物的再生功能 D．细胞的分化 8．下列关于细胞全能性叙述正确的是（） A.每个生物体内的所有细胞具有相同的功能 B.生物体内任何一个细胞可完成该生物体全部功能 C．生物体每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D．生物体每个细胞都经过产生、分裂、生长、衰老、死亡的全过程 9．构成胚的所有细胞几乎都保持着未分化的状态和旺盛的分裂能力，称为（） A.脱分化细胞 B.成熟细胞 C．胚性细胞 D．再分化细胞 10．愈伤组织表面和内部形成很多胚状体，称为（） B.胚泡C．体细胞胚D．合子胚 A.胚囊 11．植物再生功能的产生是由于植物受伤组织产生了（） A.细胞分裂素 B.赤霉素 C．创伤激素 D．生长素 12．草莓茎尖在4℃黑暗条件下，可以保持生活力达（）年之久 A.4 B.5 C．6 D．8 13．脱毒培养指的是（） A.种苗消毒后的培养 B.种苗及土壤消毒后的培养 D．无毒茎尖的培养技术 C．外植体消毒后的培养
第一章 1、植物组织培养：是指在离体条件下，利用人工培养基对植物的器官、组织、细胞、原 生质体等进行培养，使其长成完整植株 2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的 无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。 3、愈伤组织：指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 4、应用 一、农业上的应用 1. 种苗快速繁殖(rapid propagation) 2.无病毒苗(virus free)的培养 3.在育种上的应用(breeding) （1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显； （2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）； （3）保存种质 （4）创造变异 二、在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。用于基因工程技术创造植物新种质。用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。 三、利用组织培养材料作为植物生物反应器 第二章 1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植 株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育方式 改变的过程。 3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构 和功能而恢复分生状态，形成无组织结构细胞团或愈伤组织 的过程。 4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能力，形成具有特定结构和功 能的细胞、组织、器官甚至植株的过程。 5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施 一、污染及防治： 1、真菌污染后，如果已形成孢子，则必须经高压灭菌后扔掉。但若是细菌污染，只 要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使用。 2、用抗生素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常生长。 二、褐变及防止 （1）选择合适的外植体 （2）合适的培养条件 （3）使用抗氧化剂 （4）连续转移 三、玻璃化问题及其防止
植物组织培养期末复习资料 一、名词解释 1.植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基， 对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。又称为植物离体培养、微型培养、试管培养。 2.愈伤组织：是指外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细胞和已分化的 细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。 3.细胞全能性：指植物的每一个具有完整细胞核的活细胞，具有该植株的全部 遗传信息，在一定条件下发育成完整植株的潜在能力。 4.胚状体：指在植物组织培养过程中，由细胞诱导分化形成的胚状结构，其功 能类似于合子胚，可进一步再生成一个完整植株。 5.器官离体培养：是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养 的技术。 6.胚胎培养：指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完 整植株的技术。 7.花药培养：是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养， 以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。 8.花粉培养：是将花粉从花药中分离出来进行离体培养的过程。 9.细胞培养：是指对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞（或小细胞团）进 行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术。 10.原生质体培养：在人工控制条件下，将原生质体进行培养，使其形成完整植 株的技术 11.原生质体融合：也称体细胞杂交，指通过物理化学方法使原生质体融合，经 培养获得具有双亲全部或部分遗传物质的后代的方法 12.植板率：已形成细胞团的百分数（即每100个铺在平板上的细胞中有多少个 能长出细胞团） 13.脱分化〔dedifferentiation〕:指在离体培养条件下，已分化的细胞、组织 和器官在人工诱导条件下，失去原来的结构和功能而恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。（掌握） 14.再分化（redifferentiation):指在离体培养条件下，经脱分化的组织或细胞 在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型，形成完整植株的过程。 （掌握） 15.初代培养：指外植体来源于母本植株的最初培养 16.继代培养：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中，这种反复多次的 移植培养称为继代培养。 17.胚状体发生（embryoid）：指在组织培养中，由一个非合子细胞(体细胞)，经 胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成具有双极性的胚状结构。 18.污染：植物组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现 象 19.玻璃化：试管植物的玻璃化是指试管苗外观形态呈半透明、水渍状的生长异 常现象，一旦形成玻璃苗，植株的增值系数即明显下降，既不能再用于后续的生根或继代增殖培养，移栽也难以成活。
器官培养：即离体器官的培养。植株培养：对完整植株材料的培养。 组织或愈伤组织培养:是对植物体的各部分组织进行培养或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形成植株. 细胞培养:是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养. 原生质体培养:是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。 初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程植物组织培养：是指通过无菌操作分离植物体的一部分（外植体），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。 愈伤组织：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体切面上产生。 外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。 植物细胞全能型：任何具有完成细胞核的植物细胞，能拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。 再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。胚状体：在离体过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。 褐变现象：指在接种后，其表面开始褐变，有事甚至会使整个培养基褐变的现象。 继代培养材料的玻璃化：当植物材料不断的进行离体繁殖时，有些培养物的嫩芽，叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常成为玻璃化。 人工种子：通过植物组织培养的方法获得的具有正常发育能力的材料，外被有特定的物质，在适宜的条件下可以发芽成苗的植株幼体。 植板密度：形成的细胞团数/植板的细胞总数×100% 对称融合：双方原生质体均带有核基因组和细胞质基因组的全部遗传信息。 非对称融合：指一方亲本的全部原生质与另一方亲本的部分核物质及细胞质物质重组产生不对称杂种。 继代培养：是初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程。目的：繁殖出相当数量的无菌苗，最后达到边繁殖边生根的目的。 细胞悬浮培养：将游离的植物细胞按一定的细胞密度悬浮在液体培养基中进行培养的方法。根据培养基的类型分为: 固体培养（琼脂、卡拉胶等固化），半液半固体培养(固液双层)，液体培养（震荡、旋转或静置培养）。 液体培养的优点：不使用凝固剂，节约生产成本，营养吸收充分；操作过程简化。 组织培养按培养对象可分为：植株培养，器官培养，组织培养，细胞培养，原生质体培养。 植物组织培养一般过程:初代培养，继代培养，生根培养，驯化移栽。 植物组织培养的特点：培养条件可以人为控制，生长周期短，繁殖率高，管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。 组织培养技术在农业生产上的应用主要体现于以下几个方面：快速繁殖优良苗木；获得脱毒苗；育种上应用；工厂化育苗。 1902年，德国著名的植物生理学家和植物学家哈伯兰特提出了高等植物细胞全能性。1958年，美国植物学家斯图尔德等人，用胡萝卜根韧皮部的细胞进行培养，得到了完整植株，证明了细胞全能性。 怀特于1943年发表了《植物组织培养手册》专著，使植物组织培养开始成为一门新兴的学科。 腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一，这一比例高时，产生芽，这一比例低时，则形成根，相等则不分化。 标准的组培实验室包括：1、洗涤室，器具的洗涤，干燥和消毒，2、配置室，进行药品的保存，配置，消毒，分装等，3、灭菌室，培养基及使用器具的消毒与灭菌，4、接种室，进行材料的接种，内置超净工作
植物组织培养复习题 植物组织培养复习题（习题） 一、名词解释 愈伤组织：在培养基上由培养物产生的无序生长且没有一定结构的薄壁细胞团。 外植体：在组织培养中，由植物体上取下来进行离体培养的那部分组织或器官 脱分化：由高度分化的植物器官，组织或细胞经过离体培养，产生愈伤组织的过程。 半连续培养：利用培养罐进行大量细胞培养的一种方式。 无性系变异：由任何形式的细胞培养所产生的植株所表现出来的差异。 胚状体：在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。 看护培养：用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织培养细胞的一种方法。 无融合生殖：由配囊中卵细胞以外的其他细胞发育成的单倍体植株。 种质：亲代通过生殖细胞活体细胞直接传递给子代并决定固有生物性状的遗传物质。 悬浮培养：将游离的植物单细胞或小细胞团，按一定的细胞密度在受到不断拉动或摇动的液体培养基中进行培养的一种方式。 早熟萌发：在培养后迅速萌发为幼苗，不继续进行胚状生长，超过正常发育阶段。 选择压：在2个相对性状之间，一个性状被选择而生存下来的优势。 细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞具有全部的遗传信息，在一定条件下，均具有分化，发育成完整植株的潜在能力。 条件培养基：在培养集中加入高密度的细胞进行培养，经过一段时间后，这些细胞向培养基中分泌一些促进细胞生长的活性物质，使培养基条件化，使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。 离体授粉：将未授粉的胚珠，子房或柱头从母体上分离下来，进行无菌培养，并通过一定的方式授给菌花粉，使其在试管内实现受精的技术。 同步化培养：培养基中大多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段。
植物组织培养技术 考试复习题 一、填空题 1、组织培养的理论依据是：植物细胞的全能性。 2、根据培养的外植体材料不同，可将植物组织培养分为以下几种类型：愈伤组织培养、器官培养、胚培养、 细胞培养、原生质体培养、遗传转化。 3、植物组织培养实验室一般划分为洗涤室、培养基配置室、缓冲室、无菌接种室、培养室、观察室、驯化室等分室，其中植物组织培养实验室对无菌条件要求最严格的区域是无菌接种室。 4、培养基成分主要包水分、无机盐类、有机营养成、植物生长调节物质、天然物质、 pH 、凝固剂。 5、目前应用最广泛的组培基本培养基是 MS培养基。 6、培养基最常用的碳源是糖类物质，使用浓度在1%-5% 常用 3%。 7、培养基中加入活性炭的目的：减少外植体的褐变。 8、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向，其比值高则有利于根的形成；其比值低则有利于芽的形成。 9、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为"__脱分化__" 10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行(高压蒸汽 )灭菌，而要进行过滤方法灭菌。 11、确定花粉发育时期最简捷有效的方法是压片镜检法。
12、液体培养基和固体培养基最主要的区别是：固体培养基中添加了琼脂粉，而液体培养基一般不添加。 13、细胞悬浮培养的方法有分批培养和连续培养。 14、外植体灭菌常用的消毒剂是酒精，使用浓度一般为 70—75％。 15、具有防止褐变作用的维生素是抗坏血酸（维生素c）。 16、常用防止褐变的试剂有有机酸、硫代硫酸钠。 17、组培中按照污染的对象分，常见的污染类型有细菌性污染、真菌性污染。 18、在使用超净工作台进行无菌操作前，应先将借种器械放进超净工作台，并打开紫外线灯和风机组工作进行消毒20分钟左右。 19、配制培养基调节pH值时常用氢氧化钠溶液和稀盐酸溶液。 20、某溶液在使用前已配制成100倍的母液，在使用时，若需要配制1/2 L的培养基，则需要吸取母液的量是 5ml 。 21、原球茎是兰科植物特有的一种快繁方式。 22、组织培养植株的再生途径有两条，分别是：器官发生途径和胚胎发生途径。 23、一般进行外植体培养时，须诱导形成新的分生组织，即形成愈伤组织。 24、在使用完移液枪后，应注意调回至该移液枪最大量程。 25、植物组织培养快速繁殖技术的基本过程包括材料的初代培养、继代培养、生根培养、驯化培养。
组培复习材料 一、名词解释 1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。 2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。 3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。 4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。 5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。 6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。 7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。—— 8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。） 二、简答题 1、MS培养基特点。 答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。目前应用最广泛。 2、植物组培生产特点。 答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点； ②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；
(1) 什么是植物组织培养? 植物组织培养是在无菌条件下，将植物体的任何一部分，如植物器官、组织、细胞以及原生质体等，培养在人工配制的培养基上，并给予合适的培养条件（包括营养、激素、温度、光照、湿度），使之发育成完整植株的过程。 （广义）又叫离体培养：指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 （狭义）组织培养：指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。 (2) 什么是"外植体"? 从植物体上分离下来的用于离体培养的材料称为外植体。 (3) 按照外植体的不同，植物组织培养可以分成几类? 可以分成5类 1、植株培养 2、器官培养（胚，花药，子房，根、茎和叶） 3、组织培养（各种组织、愈伤组织） 4、原生质体培养 5、细胞培养（愈伤组织分离或花粉单细胞或很小的细胞团) (4) 植物组织培养有哪些特点? ①培养条件可以人为控制 ②生长周期短，繁殖率高 ③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 (5) 你认为植物组织培养技术在当前的农业生产上有什么价值?为什么? （一）快速繁殖种苗 用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用，包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。快繁技术不受季节等条件的限制，生长周期短，而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。 （二）无病毒苗的培养 植物在生长过程中几乎都要遭受到病毒病不同程度的危害，有的种类甚至同时受到数种病毒病的危害，尤其是很多园艺植物靠无性方法来增殖，若蒙受病毒病，代代相传，越染越重，甚至会造成极严重的后果。 （三）在育种上的应用 植物组织培养技术为育种提供了许多手段和方法，使育种工作在新的条件下更有效的进行 （四）人工种子 人工种子，是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗颗粒体。 （五）工厂化育苗 是指以植物组织培养为基础，将外植体接种在人工配制的培养基上，通过控制环
试卷编号NO： 高等函授教育《植物组织培养》试题 学号：姓名： 一名词解释：（10*2分=20分） 1、植物细胞组织培养 2、细胞全能性 3、脱分化 4、外植体 5、试管苗驯化 6、间接不定芽发生 7、双极性 8、微体嫁接 9、人工种子 10、体细胞无性系变异 二填空：（30*1分=30分） 1、目前植物组织培养应用最广泛的方面是 和。 2、由脱分化的细胞再分化出完整植株有两种途径，一种叫做，另一种叫做。 3、培养用具的常用灭菌方法有、、 。 4、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行，而要进行。 5、一般来说，黑暗条件下有利于的增殖，而往往需要一定的光照。 6、植物离体授粉技术通常包括、、 三个方面。 7、一般液体培养的继代时间较短，继代一次；而固体培
养继代时间可以长些，继代一次。 8、外植体器官发生的三种途径包括、、。 9、从再生植株倍性来看，小孢子培养通常产生植株，胚 培养通常产生植株，通常产生三倍体植株。 10、脱毒苗鉴定与检测的主要方法有、、 、。 11、在生长素中，对于许多作物花粉的启动、分裂、形成愈伤组织和胚状体起着决定性作用，但是对却有抑制作用。 12、用平板培养法培养单细胞或原生质体时，常用 来衡量细胞培养效果。 13、用药剂处理是诱导染色体加倍的传统方法。 三计算题（1*10分=10分） 某培养基的配方是MS＋BA 2.0mg/L＋NAA 0.5mg/L＋2.5%蔗糖＋0.7％琼脂粉。MS母液的浓度分别是：大量元素２０倍，微量元素500倍，铁盐100倍，有机物５０倍；BA母液浓度1.0 mg/ml ，NAA母液浓度0.1mg/ml。要配制400ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml？分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克？（要求写出计算步骤）四简答题（5*5分=25分） 1、造成组织培养过程中发生污染的原因有哪些？如何有效控制污染？ 2、简述外植体消毒的一般步骤。
名词解释 1.外植体：由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官。 2.愈伤组织：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞（细胞排列疏松、 无规则）。 3. 植物细胞的脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 4. 植物细胞的再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 5. 试管苗的玻璃化 植物组培玻璃化苗的1、叶和嫩梢呈水晶透明或半透明水渍状； 2、整株矮化肿胀、失绿； 3、叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎； 4、叶表缺少角质层蜡质，没有功能性气孔，不具栅栏组织，仅有海 绵组织。 玻璃化现象的预防措施： 1、适当控制培养基中无机盐浓度 2、适当控制培养基中蔗糖和琼脂浓度 3、适当降低细胞分裂素和赤霉素浓度 4、增加自然光照，控制光照时间 5、改善培养皿的气体交换状况 6、控制好温度 7、在培养基中添加其他物质 6.胚性感受态：体胚发生的相对容易程度。 7.人工种子又称合成种子或体细胞种子。任何一种繁殖体，无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的，只要能够发育成完整的植株，均可称人工种子。 8.微室培养法：即将细胞培养在很少量的培养基中。 9.看护培养法：指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，并使其生长和增殖的方法。 10.植板效率：已形成细胞团的百分数，即每100个铺在平板上的细胞中有多少个长出细胞团。 11.试管外生根：将生根诱导与驯化培养结合在一起. 试管内生根：茎芽生根诱导有2条途径，其中一途径为试管内生根，在试管内诱导枝条生根叫试管内生根 12.植物离体保存：将离体培养的植物细胞、组织、器官或试管苗，保存于人工环境下，一般需要在低温或超低温条件下进行，以抑制其生长，达到长期保存的目的。 13．超低温保存：低温从4℃往下推，－80℃（干冰温度），－196℃以下的低温称为超低温。 问答题 1. 母液：为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量，将培养基中的各种成分按质量的特定倍数称量配制成的浓缩液。 2.植物激素 ⑴生长素类 生长素主要促进细胞分裂的生长，促进细胞脱分化，有利于诱导愈伤组织的产生，生长素与细胞分裂素同时使用有协调作用，在离体培养分化调节中，生长素促进根的形成抑制芽的形成，液体培养中利于体细胞胚胎发生。常用IAA、IBA、NAA、2,4-D。 ⑵细胞分裂素类：促进细胞分裂和扩大，调解器官分化，延缓组织衰老，增强蛋白质合成，能改善其它激素作用，离体培养中，促进不定芽的发生，与生长素协调作用可有效控制培养物的生长与分化。常用6-BA、ZT、KT、2iP。 ⑶赤霉素类：促进细胞伸长生长、诱导花芽形成、打破种子休眠以及诱导单性结实等生理功能。有20多种，目前主要是赤霉酸GA3。离体培养下，还与生长素协调作用对形成层分化有影响，刺激体细胞胚进一步发育成植株。 （4）脱落酸：对某些植物体细胞胚发生的特异基因表达起调控作用，激活相关基因的表达，大量合成贮藏蛋白、晚期胚胎丰富蛋白和少量胚胎发生特异性蛋白。通常低浓度促进体细胞胚发生，高浓度抑制体细胞胚的发生。 3.芽的增殖途径 （一）通过愈伤组织 利用植物细胞在培养中无限增殖的可能性以及它们的全能性，可以对若干种植物类型进行快速繁殖。由这些植物的器官或组织诱导形成的愈伤组织，通过器官发生或体细胞胚胎发生都可以分化出植株。 （二）不定芽形成：产生不定芽的器官：根（福禄考属植物、苹果的某些无性系、悬钩子属植物）、鳞茎（风信子—基部受伤以后）、叶（秋海棠、天竺葵等）。通过培养基中适当配比激素的影响，就是那些在正常情况下不能进行营养繁殖的植物，如芸苔属