蓝莓的组织培养与快速繁殖技术研究
摘要：利用蓝莓的茎段或茎尖为材料，在MS和MPS培养基上添加相应组合比例的激素，快速繁殖蓝莓植株体。同时探索蓝莓离体繁殖影响因素，筛选蓝莓离体所需最佳启动、增殖和生根的培养基及培养条件。
1立题依据
1.1研究的目的
筛选出适宜蓝莓外植体的培养条件等影响因素。进一步探索不同的激素对蓝莓外植体组织培养、所育苗质量的影响及生根情况，探索最适合蓝莓外植体组织培养的激素组合及比例。总结其组培培养的应用技术，为今后蓝莓的育种工作及基因工程技术奠定基础。
1.2研究的意义
蓝莓果实皮薄、风味酸甜可口,具有独特的保健功能。蓝莓果实中含有较多的花色素苷、黄酮等生理活性成分,能有效防止脑神经衰老、糖尿病等疾病的发生,增强心脏功能,而且在明目及抗癌等方面也具有独特功效。联合国粮农组织将其列为人类五大健康食品。蓝莓作为一种具有良好保健功效的水果,是21世纪具有良好发展前景的果树品种之一。蓝莓所含的花青甙类色素具有色泽艳丽、加工稳定性高的特性,是迄今已被利用的最佳天然色素之一,被广泛用于药物或高级美容用品的生产。在美国,蓝莓被誉为“21世纪功能性保健浆果”、“水果中的皇后”和“世界第三代水果”。蓝莓鲜果和加工品在欧洲等经济发达国家市场上深得销售者喜爱，虽然价格昂贵但仍供不应求。一些专家学者开展了对其组织培养体系的研究，以期产业化快速培育蓝莓种苗。
因此研究其高效繁殖有重要的价值及意义。
2国内外研究进展
目前，我国种植的蓝莓在生产上通常采用组织培养和扦插相结合的育苗扩繁方法。应用组培方法扩繁速度快，适宜于优良品种的快速扩繁。吉林农业大学于1983年率先在我国开展了蓝莓引种栽培工作，到1997年，从美国、加拿大、芬
兰、德国引入抗寒、丰产的蓝莓优良品种70余个，其中包括兔眼蓝莓、高丛蓝莓、半高丛蓝莓、矮丛蓝莓、红豆越橘和蔓越橘六大类型。1989年，蓝莓组培育苗获得成功，采用组培脱毒技术对所选优良品种快速扩繁，并解决了蓝莓组织培养工厂化育苗扩繁技术后，在长白山建立了5个蓝莓引种栽培基地。1995年，初步选出4个适宜长白山区栽培的蓝莓优良品种，并开始推广种植。在兔眼蓝莓研究上，南京植物研究所于1988年从美国引入12个优良品种，并在南京和栗水两地试栽成功。1999年，日本环球贸易公司与吉林农业大学李亚东教授达成合作协议，由日方投入资金，中方投入技术，在山东青岛组织蓝莓产业化生产，开创了我国蓝莓产业开发与跨国公司合作的先河，至2005年，山东青岛蓝莓基地于2001年定植的苗木进入丰产期。与此同时，李亚东教授通过自建和技术支持等方式在辽宁、吉林相继建立了以公司为主体的蓝莓产业生产基地。在南方，南京植物研究所贺善安、於虹等教授通过技术支持，先后在浙江、贵州等地建立了上万亩兔眼蓝莓生产基地。
吉林农业大学、浙江省农业科学院园艺研究所等单位，在成功建立蓝莓组培快繁技术的基础上，正在建立蓝莓扦插和种子繁殖技术体系。硬枝扦插主要适合于高丛蓝莓和矮丛蓝莓，而绿枝扦插主要适合于兔眼蓝莓、矮丛蓝莓和高丛蓝莓中硬枝扦插生根困难的品种。总体来看，国内组培育苗技术及扦插技术已经比较成熟，但缺少自主培育的品种，多为引进品种。
北美地区的美国和加拿大是蓝莓技术研究最早、技术力量最强的国家。到目前为止，美国全国有30多个大学和科研院所进行蓝莓研究，研究内容主要集中在优良品种选育、丰产栽培技术、安全生产技术和果实采后处理与加工技术等方面。美国在品种选育研究上已先行一步，选育出了适宜美国南北各州、各种气候条件的优良品种100多个。继美国之后，加拿大、欧洲的波兰和德国、南美洲的智利和阿根廷、澳大利亚、日本、前苏联等20多个国家先后开展了蓝莓的引种、育种及种植工作。东欧的波兰华沙农业大学和波兰科学院果树研究所是欧洲境内从事蓝莓研究的主要科研单位，他们根据波兰的气候条件，以提高抗寒能力和果实品质为目标，从20世纪60年代开始，进行蓝莓的杂交育种和品种选育工作，选育出了果实大、品质佳、抗寒力强的优良品种。
美国关于蓝莓离体繁殖已有大量报道。我国学者在组织培养蓝莓研究中表
明，宜选用蓝莓的茎段或茎尖为外植体，最佳培养基为改良WPM。组织培养兔眼蓝莓较好的激素组合是6-BA5.0mg/L+ZT1.0mg/L+NAA0.2mg/L或6-BA5.0mg/L+ZT2.0mg/L+NAA0.3mg/L。组织培养高丛蓝莓和矮丛蓝莓，在改良WPM培养基中加ZT0.5~2.0mg/L可显著促进外植体增殖。据研究证明，蓝莓在试管内生根慢、生根率低，故采用试管外生根,方法是将试管苗幼枝基部培养基洗净,用1000,2000,3000mg/LBA溶液速蘸(1s)处理,扦插于腐熟的苔藓基质上,扣小拱棚置温室内,冬季棚温控制在15~25℃,夏季不越过28℃,20d即可生根。
其他外植体培养中，Hrlsko D等研究者1993年从蓝莓的实生苗上获取子叶和上胚轴作为外植体诱导不定芽获得成功，把蓝莓的根作为外植体诱导植株再生尚在研究探索阶段。Chem ik 等人进行上胚轴诱导不定芽试验，研究表明以真叶器官诱导偶尔获得不定芽。Sidorovich 等对种子和胚诱导不定芽尚未成功。相比之下，众多研究者以蓝莓叶片诱导不定芽获得成功的几率较多大。利用高丛蓝莓和兔眼蓝莓的叶片诱导出不定芽均有获得成功的报道。矮丛蓝莓以子叶或胚可诱导生成愈伤组织进而长出不定芽。当以老叶为外植体进行诱导不定芽时，萌动率高于用幼叶时。在以叶片为外植体研究过程中Sharon以无菌苗的叶片诱导增殖时，在WPM培养基中添加10-15mol/mL 2ip，经4周培养后，获得70％一100％叶片不定芽的再生。Rowland于1994 年探讨了蓝莓叶片再生体系中激素浓度的配比对再生的影响，结果表明添加20mol/mL ZT的处理是加人15mol /mL 2ip的处理不定芽分化率6倍之多。孙阳以改良WPM为基本培养基研究不同浓度的玉米素(ZT)对3个蓝莓品种叶片离体再生分化率及生根速度的影响，结果表明。ZT 浓度在0.15 mg/L时对蓝莓叶片离体再生效果最佳,IBA对蓝莓叶片离体再生能力影响较小。最适宜叶片诱导再生培养基配方为改良WPM+ZT0.15mg/L+IBA 0．01m g/L,最高叶片分化率为61％.蓝莓叶片培养的适宜方法:取继代培养35 d左右的组培苗,将叶片剪掉叶梗和叶尖，剪成1cm的方块接种于改良W PM 培养基上，先在黑暗条件下培养1～2 周,然后移至光下培养2周进行继代培养。
3研究方法
3.1 已有条件
蓝莓植株体材料，灭菌、培养等所需设施。
3.2 准备采用方法
实验采用的培养基是在MS和WPS基础上改良的WPM培养基分别加入不同质量浓度的6-BA和NAA，制成改良的WPM培养基。从中选择最适合幼芽诱导分化、增殖生根的培养基。培养基pH4.0～5.0在121℃、131kpa的条件下灭菌20min。培养温度(24±2)，光照10～12h/d，光照强度为1200~1600lx。
3.3 技术路线
蓝莓外植体选择外植体灭菌
接种
激素配比及浓度调节初步培养基配置及灭菌初代培养
接种
激素+继代培养基配置继代培养
接种
激素+生根培养基配置生根培养
4设计方案
4.1外植体的选择
有试验证明:带叶柄的叶片出芽率更高，此外，蓝莓的外植体材料还可以选择剪去茎段两端多余部分后的中间部分。所以，选长势旺盛的幼嫩枝条，除去所有叶片，切取除顶芽外的第3~10节茎段作外植体。
4.2外植体的灭菌
切取3cm 带顶芽的幼嫩茎段去叶片留叶柄，用清水洗干净，75%酒精浸泡30s，0.1 升汞溶液消毒7~8min,无菌水冲洗4～5 次,用滤纸吸去水分，将茎段切成1～2 个腋芽的小段。
4.3 初代培养
外植体的初代培养所用基本培养基：WPM +蔗糖+琼脂+激素,其中蔗糖浓度为2 % ~ 3 % ,琼脂为0.60 % ~ 0.65 %, 各种激素浓度范围6- BA 0. 5~ 5. 0 mg/L, NAA0 . 05~ 0. 30mg/L等。综合培养条件为pH值5.0,121℃高温灭菌20min,培养温
度(25℃),空气相对湿度为60%左右,光照强度1500lx, 11 h/d。
4.4继代培养
将丛生芽切割2cm左右茎段，每瓶接种4~5节，转入继代增殖培养基中继代增殖培养，3个月后观察实验情况，再进行继代增殖培养。
4.5生根培养
在继代增殖培养基中生长的苗，一部分用以继续增殖，另外转入生根培养基进行生根培养。取2cm长的新梢接种到生根培养基上,接种后首先黑暗处理20天，然后转到光照下培养，30～40天可以移栽。生根培养基1/2WPM + NAA0.15 mg/ L。
5预计研究成果
5.1 预计工作量本次实验预计所需时间半年，具体安排如下：
5.1.1 第一个月，利用大约一周时间，查找相关资料及确定最终实施流程；第二周，准备初步实验所需器材，采集新鲜蓝莓植株体的叶子，要求带叶柄，先进行少许的灭菌及初步探索接种，为后续大量实验时总结经验及教训；在后续时间中，观察初代培养基上的生长情况，进行大量实验准备实验：外植体的筛选及灭菌，培养基的配置、激素的配比及浓度调节等；
5.1.2 第二、三个月，根据第一个月探索的情况，按流程进行实验。初代培养基配置及激素的调节，灭菌及接种，初代培养基上的外植体一周后可能开始萌发，愈伤组织诱导形成芽，6～8 周后长成所预计的新梢。
5.1.3 将初代培养基上的新生枝转接到继代增殖培养基上，二至三个月可能离体茎段发生的不定芽增殖、分化，一般每 3 个月继代一次。再转接到生根培养基上培养，二个月后不等将会生根。
5.2 预期结果
经过几个月的实验，能够在瓶内生根培养基上观察到由蓝莓外植体快速繁殖出的蓝莓植株。
根据查阅文献，以蓝莓幼嫩的茎段为外植体,其启动培养基和增殖培养基最佳配方均为MW + NAA0. 05 mg /L+6-BA 0.5 mg /L,适合生根的培养基为1/2MW +NAA 0.15 mg/L。
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蓝莓组织培养方案 1、植物介绍： 1）供试材料来源： 选取长势旺盛的幼嫩枝条，去除多余的叶片，切取除顶芽外的第3节~第10节作为外植体。提供的材料希望老师可以从组培室提供。 2）技术路线： 外植体处理→接种→增殖培养→生根培养→移栽 2方法步骤： 1）外植体的剪取与消毒程序的筛选： 切取除顶芽外的第3节~第10节作为外植体段去叶片留叶柄→流水冲洗30min→75%酒精浸泡30s→0.1%升汞溶液消毒 3~7min→无菌水冲洗4~5次→用滤纸吸去水分→将茎段切成带有1~2个腋芽的小段 2)初代培养基的筛选： 选用MS为最基本的培养基，根据需要的不同，添加激素6-BA、
NAA、ZT。 3)增殖培养基的筛选： 以MS为基本培养基，按激素6-BA、NAA、ZT含量的不同， 诱导增殖培养基设4系列处理（培养基1~4号），生根培养 基设2系列处理（培养基5~6号），培养基配方表如下： 表中培养基蔗糖含量：分化和继代培养基为30g/L，pH值5.6~5.8， 在115MPa气压下灭菌20min。 4)生根培养基的筛选 不同的培养基进行生根的优势也不一样，根据大量的材料表明1/4 MS中的小苗生根均明显优于全量的MS培养基，所以用激素以IBA 0.5mg/L效果最好，生根情况好且所需天数也最短。最适培养基应
该为1/4 MS+IBA 0.5mg/L 5)试管苗移栽试验： 当苗根长到1~1.5cm时，打开瓶盖，取出小苗，洗净培养基。用多灵菌500~800倍浸泡30min左右，然后栽入0.1%高锰酸钾消毒过的苗床上。苗床基质分5个处理，分别为沙：草炭土=1:1、沙：蛭石=1：1、纯沙、纯蛭石、腐苔藓。（根据资料查找以腐苔藓为基质最好，成活率达80%以上，草炭土和沙半量也可达50%的成活率。）
扦插技术 扦插是营养体繁殖的主要方法之一，有繁殖速度快、方法简单、操作容易等优点，扦插多用于双子叶植物，有些单子叶植物也可以进行扦插繁殖，如百合科天冬属植物、鸭跖草种植物等。 一、扦插繁殖的机理 扦插繁殖用的插条、叶片、地下茎和根段能发芽，长叶、生根是由于植物的生活器官具有再生能力，而且构成植物器官的生活细胞都具有发育成一株完整植株的潜能。当植物的部分器官脱离母体时，只要条件适合，其再生能力和细胞的全能性就会发生作用，分化出新的根、茎，叶，而且总是在植物形态学下端生根。但不同植物的离体器官的生根部位不同，有些植物从下部切口的形成层先产生愈伤组织，再由愈伤组织形成根，如桂花、银杏、红豆杉等；有些植物直接由离体器官插入基质中的皮部先产生根，插条下部的切口形成的愈伤组织也形成不定根，这类植物扦插较易成活，如杨属植物、柳属植物、连翘类、迎春类植物等。并不是所有植物的营养器官都能形成新的植株，不同植物的再生能力不同，有些很容易生根，如栀子花、夹竹桃、小叶黄杨、大叶黄杨和金钟花等；有些很难生根，如玉兰类、泡桐和松属植物等。除此之外，母树的年龄，枝条的生长部位、生长状况等都影响插条生根。再者植物能否生根与环境条件、扦插季节、管理等都有很大关系，条件适合，插条易于生根；条件不适合，插条不能生根，甚至死亡。 二、扦插类型及基质的选择 扦插基质对插条生根影响很大，根据扦插基质不同可分为壤插(基质扦插)、水插和喷雾扦插(气插)。壤插又称基质扦插，是应用最广的扦插方式，其扦插基质主要有珍珠岩、泥炭、蛭石、沙等材料，有些园艺企业使用炉渣。有的直接扦插于土壤中,对有些植物是适宜的。在国外，泥炭、珍珠岩和黄沙是主要的扦插基质，根据不同植物对基质湿度和酸碱度的要求按不同比例配制扦插基质，酸性植物如杜鹃、山茶等植物用泥炭的比例大，珍珠岩的比例适当减少，否则珍珠岩的比例可大一些。泥炭可以保持水份，同时，泥炭中含有大量的腐质酸，可促进植物生根。要选择半腐质化、较粗糙的泥炭再配上粗沙和大颗粒的珍珠岩为好，配制的基质有利于通气和排水，也有利于根系的形成。水插即用水作为扦插基质，将插条基部约1-2厘米插入水中。水必须保持清洁，且需经常更换，水插产生的不定根要脆，当它长到2-3厘米时就可移栽或上盆，常用于水插的植物有栀子、桃叶珊瑚等。喷露扦插(气插)也称无机质扦插。适用于皮部生根类型的植物，方法是本质化或半木质化的枝条固定十插条目定架上，定时向插条喷雾。能加速生根和提高生根率．但在高温高湿条件下易于感病发霉.
蓝莓（Vaccinium corymbosum）属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。 本试验以蓝莓半木质化茎段为外植体，并通过瓶外生根技术，建立起植株再生体系。 1 材料与方法 1.1 外植体材料及培养条件 1.1.1 外植体选择 高灌蓝莓半木质化茎段。 1.1.2 外植体预处理及灭菌 剪取蓝莓半木质化枝条，立即去掉上部叶片带回室内，剪成带有一个叶芽2-3厘米长茎段，在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒2-3分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5-8分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剪去茎段两端约 0.5-1厘米，立即接种到初代培养基中。 1.1.3 培养条件 诱导培养基：改良WPM + ZT 1.0mg/L 增殖培养基：改良WPM + IAA 0.1mg/L + ZT 2.0mg/L 复壮培养基：改良WPM + IBA 0.1mg/L WPM具体改良为：以硝酸钙 684mg/L、硝酸钾 190mg/L、EDTA铁钠 73.4mg/L和盐酸硫胺素0.1mg/L代替原WPM培养基中的硫酸钾、氯化钙、硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠。 以上培养基均加蔗糖3%，琼脂0.7%，pH值5.2。 培养温度为25℃，光照强度为2000lx，光照时长为12-16时/天。
2 结果与分析 2.1 初代诱导培养 将处理好的外植体立即接种到诱导培养基中，5-6天叶芽开始萌动，10天开始展叶，20天腋芽长到1厘米长，30天腋芽长到1.5-2.5厘米长。 2.2 继代增殖培养 将初代培养长出的茎剪成1.5-2厘米长茎段转接到增殖培养基中。30-35天增殖5-7倍，增殖苗生长健壮。 2.3 复壮培养 将继代苗剪成1-1.5厘米茎段，转接到壮苗培养基，复壮培养30-40天，复壮苗高5-6厘米且粗壮。 2.4 瓶外生根培养
文章编号:1002-1728(2003)03-0021-03 我国蓝莓(越桔)栽培研究现状及发展措施 Ξ 修英涛,常凤英,姜 河,杨伟力,候利军 (沈阳农业科技开发院,辽宁沈阳 110161) 中图分类号:Q949.772.3文献标识码:B 蓝莓(Blueberry )又名越桔,属于杜鹃花科越桔属(V accinium )植物,灌木小浆果果树,广泛分布于北半球,从北极到热带高山地区均有分布。其果可生食,亦可加工果汁、果酒、果酱等,从其加工果汁的果渣中,可以提取越桔红,是优良的天然食品红色素。蓝梅具有较高经济 价值和广阔开发前景[1、29] 。蓝莓果实含有防止脑神经衰老、增强心脏功能、明目及抗癌等独特功效物质,因此被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一[17]。近年来,美国、加拿大、日本、智利和欧洲的很多国家都把蓝莓视为保健与功能食品,倍受人们青睐,国际市场售价昂贵,供不应求[2]。蓝莓的栽培驯化工作1900年始于美国,到目前为止,已选育出适合各地气候条件的优良品种100余个,总栽培面积近20000hm 2,年产量达20万t ,形成了缅因州、佛罗里达州、新泽西州、明尼苏达州等十余个主要产区。继美国之后,荷兰、加拿大、德国、波兰、澳大利亚、新西兰、日本等国竞相引种栽培,根据自己国家的气候特点和资源优势开展了具有本国特色的蓝莓研究和栽培工作,并相继进入商业性栽培[3]。尽管中国也有越桔属植物分布,但对其研究很少。随着人们生活水平的提高,蓝莓、树莓、沙棘、酸枣等以风味独特,营养保健作用日益受到人们的关注,被列入世界第三代水果的行 列[10、11]。自20世纪80年代后,我国科学工作者对我国 野生蓝莓资源的现状及开发利用状况进行了调查,分析了蓝莓的营养成分,并对野生蓝莓进行了初步的加工利 用研究[4、5、6、7、8、9、12、29]。我国蓝莓栽培起步较晚,自1983 年后,有关单位先后从国外引进100个左右蓝莓品种,并进行一些栽培研究工作,筛选出了一些适合我国南方、北方气候条件栽培的品种,并进行了有关育苗、栽培环境与栽培管理方面的研究。 1 栽培品种与育苗技术 111 栽培品种 我国东北山区有着丰富的越桔属资源,其中以笃斯越桔(V .ulginosum )和红豆越桔(V .vitis 2idaea )面积校大、储量较多,集中分布于大小兴安岭、长白山。大兴安岭产量可占全国的90%,丰年产量可达数十万吨[5]。大兴安岭素以高寒著称,被认为是水果栽培的禁地,而野生越桔却生长繁茂。因此要加强对这一地区野生越桔资源保护和开发利用,同时要引进推广适于这一高寒环境的 优质高产栽培品种进行商业化栽培。我国有许多适于蓝 莓栽培的生态区,仅长白山就有近百万亩的强酸沼泽地,稍加改造即可进行商业化栽培。但大面积开发,需要与各地环境相适应的优良品种和大量优质苗木[13]。野生蓝莓品种果实小,产量低,口味差,难以适应商业化栽培需要,因此,自20世纪80年代初以来,吉林农业大学、南京植物研究所、山东省果树研究所等单位先后从美国、加拿大、波兰、芬兰、德国等国家引进蓝莓品种100个左右,并进行了栽培筛选与育苗研究。根据树体特征、果实特点及区域分布分为四类。 矮丛蓝莓:树体矮小,一般高30～50cm ,抗旱能力较强,且有极强抗寒能力,极适宜于东北高寒山区大面积商业化栽培,果实较小,适于做加工原料。代表品种有美登(Biomidom )、斯卫克(Brunswick )、坤蓝(Cumber 2 land )[14、16、27] 。 半高丛蓝莓:一般树高50～100cm ,果实比矮丛蓝莓大,比高丛蓝莓小,抗寒力强,一般可抗-35℃低温,适于北方寒冷地区栽培。代表品种有北陆(Northland )、北村(Northcountry )、北蓝(Northblue )、圣云(St.cloud )[14,16]。 高丛蓝莓:株高2～3m ,果实较大,品质佳,鲜食口感好,可以作鲜果市场销售主栽品种。分为南高丛蓝莓和北高丛蓝莓两类。南高丛蓝莓喜湿润、温暖气候条件,适于我国黄河以南地区发展;北高丛蓝莓喜冷凉气候,抗寒力较强,有些品种可抵抗-30℃低温,适于我国北方沿海湿润地区及寒地发展。代表品种有艾文蓝(Avonblue )、蓝丰(Bluecrop )、爱国者(Patroit )、泽西(Jersey )、艾朗 (Aron )[17、21、27] 。 兔眼蓝莓:一般株高达7m 以上,生产上控制在3m 以下,寿命长、抗湿热,对土壤条件要求不严,且抗旱。适于我国长江以南地区的丘陵地带栽培。代表品种有巨丰(Dellite )、杰兔(Premier )、粉蓝(Powerblue )[27]。112 育苗技术 蓝莓苗木繁殖方法主要有3种,即硬枝扦插、绿枝扦插和组织培养方法。 硬枝扦插:主要适合于高丛蓝莓和矮丛蓝莓。一般于每年春季(3～4月)剪取1年生的营养枝,扦插条长度以15cm 为宜。上部切口为平切,下部切口为斜切,正好位于芽下,扦插基质为腐苔藓或草碳与河沙(1∶1)的混合基质,枝条插入基质时只留一个顶芽,扦插苗床应支离地 Ξ收稿日期:2002-05-08 辽宁农业科学 2003(3):21～23Liaoning Agricultural Sciences
扦插是植物繁殖的一种重要方法，利用植物的一部分茎、根或叶，扦插在排水良好的壤土、砂土或基质中，长出不定根和不定芽，从而长成完整、独立的新植株，具有生长快、开花早、繁殖数量大及保持植物优良性状等特点。 应用扦插繁殖在植物中主要有枝插和根插两类。枝插又根据插枝的性质不同，分为硬枝扦插（休眠期扦插）和软枝扦插（嫩枝扦插、生长期扦插）。 一、扦插生根的原理 植物的细胞具有全能性，每个细胞都具有相同的遗传物质。在适宜的环境条件下，具有潜在的形成相同植株的能力。同时，植物体具有再生机能，即当植物体的某一部分受伤或被切除而使植物整体受到破坏时，能表现出弥补损伤和恢复协调的功能。 在插枝扦插后的生根过程中，枝插与根插的生根原理是不同的。其中枝插生根是在枝条内的形成层和维管束鞘组织，形成根原始体，从而发育生长出不定根，并形成根系；而根插是在根的皮层薄壁细胞组织中生长不定芽，而后发育成茎叶。 插枝扦插后，通常是在插枝的叶痕以下剪口断面处，先产生愈合组织，而后形成生长点。在适宜的温度和湿度条件下，插枝基部发生大量不定根，地上部萌芽生长，长成新的植株。 按插枝生根的部位来分，有三种生根类型：一是愈合组织生根类型，包括大部分树种；二是皮部生根类型，三是两者兼有类型。 二、扦插成活的条件
扦插后插枝能否生根成活，决定于插枝本身的内在条件和外界环境条件。 1．插枝的内在条件 植物不同种或同一种植物的不同种，扦插成活率不同， 如扦插容易生根的有: 侧柏、杉木、大叶黄杨、夹竹桃、杨、柳、红杉、悬铃木、珊瑚树、榕树、石榴、橡皮树、巴西铁、富贵竹、菊花、大丽花、万寿菊、矮牵牛、香石竹及秋海棠等； 扦插较易生根的有: 山茶、桂花、雪松、火棘、南天竹、龙柏、茉莉、丁香、棕竹、槭及木兰等；扦插难生根的有松、榆树、山毛榉、桃、蜡梅、栎类、香樟、海棠、鹅掌楸、鸡冠花、矢东菊、虞美人、百合、美人蕉及大部分单子叶植物花卉。 植物的不同生育特性，对扦插成活的难易有影响，如灌木比乔木容易生根，匍匐类型比直立类型容易生根；地理分布在高温、多湿地区的树种比低温、干旱地区的树种容易生根；幼龄树上的插枝比老龄树上的扦枝容易生根；根茎上的萌蘗枝比树冠上部的一年生枝容易生根；枝条生长健壮、组织充实、叶芽饱满比营养物质不足的细小枝容易生根等。 此外，扦插用插枝的粗度、长度、生长期、扦插时的留叶量、插枝内部的抑制物质等，对生根与成活率都有一定的影响。 2．外界环境条件
蓝莓组培关键技术汇总 一、愈伤组织的培养 （一）几个概念 1.外植体（explant）：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。 2.分化（differentiation）：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。 3.脱分化（dedifferentiation）:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分化组织状态的过程。 4.再分化（redifferentiation）:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。 5.愈伤组织（callus）:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。 6.胚状体（embroid）:-对应于胚（embryo），在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。胚状体原始细胞特征：原生质浓厚，细胞核较大，处于细胞质中央。 7.人工种子(artificial seed):指将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜条件下发芽出苗的颗粒体。 （二）愈伤组织类型及特征 1.结构致密型：表面光滑有光泽，结构致密，多为淡黄色或白色，易于再生芽 2.结构松散型：多为白色，可以用于悬浮系建立。 3.胚性愈伤组织：具有产生胚状体能力。 （三）愈伤组织的形成：大致经过起绐期、分裂期和形成期，但三个时期没严格界限。 1.起始期指细胞准备进行分裂的时期，当外植体已分化的活细胞在外源植物生长物质的作用下，通过脱分化起动而进入分裂和形成愈伤组织。 2.分裂期表现为外层细胞出现分裂，细胞分裂进入最旺盛时期，细胞体积最小，细胞核和核仁较大，RNA含量最高。 3.形成层的特征是细胞大小趋于稳定,细胞分裂从分裂期的周缘细胞分裂为主转向了内部组织。 （四）愈伤组织中的形态发生：愈伤组织通过再分化形成再生植株的方式主要有： 1.先产生芽后,在茎的基部长根。 2.先长根,再长芽。 3.愈伤组织的不同部位分别形成根和芽。 （五）胚状体特点 1. 有分化明显的生物两端，根端和芽端。 2.单细胞起源。 3.发育程序同合子胚相似，也经过球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚。 4.和周围细胞之间有隔离。 5. 和培养物质没有维管束联系，所以容易从培养物质上剥离。 6.可以在不附加任何激素的培养基上萌发。 （六）胚状体发生途径 1. 直接胚状体发生。 2.间接胚状体发生（愈伤组织分化出胚状体）。 3.从悬浮培养的细胞中诱导。 4.由花粉产生的单倍体胚状体。 5.由原生质体产生胚状体。
国内外植物组织培养技术的差距 姓名：*** 学号：********* 指导教师：*** 专业班级：生物工程2009级1班 完成日期：2012-06-05
摘要 植物组织培养技术是农业生物技术中最早实现产业化并取得显著经济效益和社会效益的领域，在理论研究和生产实践中具有广泛的应用价值。通过对国内外植物组培的发展概况以及技术差距的分析，指出了我国植物组织培养技术的发展现状、目前存在的主要问题和应采取的措施，并对植物组织培养技术的发展作了展望。 关键词：组织培养概况差距展望 Abstract The plant tissue culture technology is agricultural biotechnology as the first realized industrialization and get a remarkable economic and social benefits of the field, in the theoretical research and production practice has wide application value. Through the domestic and international plant tissue and the development situation of the technology gap analysis, and pointed out the plant tissue culture technology's development present situation, the existing problems and the measures should be taken, and the development of plant tissue culture technology are discussed. Key words：Tissue culture situation gap looking
多肉植物是指植物营养器官的某一部分，具有发达的薄壁组织用以贮藏水分，在外形上显得肥厚多汁的一类植物。常见的有仙人掌科的仙人掌、仙人球、昙花、蟹爪兰、金琥；番杏科的生石花、肉锥花；百合科的康平寿、玉露、卧牛；大戟科的虎刺梅、彩春锋；景天科的石莲花、长寿花、虹之玉；龙舌兰科的金边龙舌兰、虎尾兰；菊科的翡翠珠等。 肉植物耐干旱，净化空气，具有外观小巧玲珑，植株肥厚多汁，造型特异等特点，是近年来逐渐流行的一类观赏植物。组织培养技术，对保存多肉植物优良的种质资源、繁殖名优珍稀品种、快速繁殖出口需要和园林绿化需要的优良品种。 传统多肉植物可依靠分株、扦插繁殖，分株繁殖如芦荟、仙人球、虎尾兰；扦插繁殖如蟹爪兰、长寿花、落地生根，仙人掌则是分株和扦插繁殖都可以。值得一提的事，生石花在生长中有一个脱皮、分裂的过程。通常在冬末春初，植株中缝逐渐开裂，在开裂处有一个或两三个新的植株逐渐长大，而原有的植株逐渐枯萎，为新株所取代。这个由新植株替代老植株的过程，就是脱皮生长和分裂繁殖过程。 外植体的选择 取优良母株新萌发的幼嫩侧芽、幼嫩枝条；一些没有侧芽的珍稀名贵品种的母株则可等待植株开花期间取其较充实的花梗作为外植体。夏季休眠期，多肉植物外植体在培养基中对激素常反应迟钝，生长静止，不易培养成功。 1.????????? 消毒灭菌 2.1选择合适的培养基的，配置好、调节适当的激素浓度。 2.2制作好的培养基须立即放入高压灭菌锅灭菌，备用。， 2.3外植体材料的消毒：切取多肉植物幼嫩的侧芽或花梗→肥皂水或洗洁精洗涤→在自来水下冲洗→超净工作台中用 75%酒精浸泡数秒→ 0.1%升汞处理 10～30min，→无菌水冲洗 6 遍，→消毒滤纸吸干水分 3.接种 无菌条件下操作→手术刀切取所需的培养材料→无菌操作植入初代诱导培养基中培养。 3.培养
蓝莓组织培养与快速繁育技术分析 发表时间：2019-06-21T16:40:22.097Z 来源：《工程管理前沿》2019年第06期作者：孙丰 [导读] 采用改进的MW培养基+适量植物激素的组合成功概率最高；生根阶段采用半营养MW培养基+NAA的组合，生根状况最佳。 大兴安岭地区农林科学院 165000 【摘要】本文以栽种于四川的蓝莓无性繁殖品系为外植体来源、对比试验为手法，测试了一系列培养基配方、植物激素种类与用量对蓝莓组织培养的影响，并最终得出结论：在蓝莓的启动与分化培养阶段，采用改进的MW培养基+适量植物激素的组合成功概率最高；生根阶段采用半营养MW培养基+NAA的组合，生根状况最佳。 【关键词】蓝莓；组织培养；对比实验 蓝莓(Blueberry)又名越橘, 属于杜鹃花科乌饭属 (Vaccinum)多年生落叶或常绿果树, 呈灌木状生长。因为果实外表呈深蓝色，故而得名。蓝莓原产于北美，但是实际上在北半球均有分布。我国的蓝莓多生长在华东、华中及东北地区，多为海拔在400至1400米的丘陵或山地地区。其果实为蓝色近圆形浆果，单果重0.5~2.5克，最大可达3.5~5.0克。蓝莓果实具有酸甜适中、香气宜人、果核极小等优点，既可作为水果生食，又可以作为加工果汁、果酒、果干的原料。蓝莓的营养相当丰富，每百克蓝莓鲜果中含有约550毫克蛋白质、500毫克左右脂肪、大约14克碳水化合物；而维生素含量也普遍高于其他水果。蓝莓对气候、土壤的要求很低，适应能力极强，而且病虫害很少，故种植过程中一般无需考虑施用农药。同时，蓝莓果实中含有大量花青素、鞣酸等物质，对于人体细胞抗氧化、减缓衰老有很好的保健作用，故被誉为“水果之王”。本文对蓝莓茎段组织培养技术作了详细的探讨，现展示如下。 1、材料与方法 1.1蓝莓品系 本次实验采用的是日本佐贺县上场营农中心引进的南、北高丛杂交无性后代种苗中，适应四川生长环境最佳的18A、18B、18C三个品系。 1.2无菌材料的制取 将外植体表面用洗衣粉洗净，置于流水下冲洗30min，然后于超净工作台上用70%乙醇进行表面灭菌。1min后采用0.1%氯化亚汞溶液继续浸泡10min，浸泡完毕后用无菌水冲洗5次。冲洗完毕的外植体在解剖镜下去掉芽鳞，再用0.1%氯化亚汞溶液消毒4min，无菌水冲洗5次，最后将枝条切成0.5~1.0cm长的、带腋芽的茎段即可。 1.3实验方法 本次实验采取的培养基是在MS培养基和WPS培养基基础上改良的MW培养基，分别加入不同浓度的BA和NAA制成。本文的目的之一便是从上述不同植物激素配比的培养基中选出最适合蓝莓组织培养的配比。培养基制成之后，调节pH至4.0~5.0，在121摄氏度、131kPa的条件下灭菌20min。植株培养温度（24±2）摄氏度，每日光照16个小时，亮度控制在（1600±200）lx。 2结果与分析 2.1培养基与外植体形式对初始分化的影响 本节分别取MS、WPS、MW三种培养基与休眠芽、嫩芽两种外植体形式进行了六组实验。实验结果证明，使用MW培养基作培养环境、嫩芽为外植体的组合具有最高的生长分化率（~86%），而且采用新抽嫩茎作为外植体的消毒过程十分简便、污染率低，是最佳的培养基与外植体方案。 2.2激素的种类对蓝莓芽组织培养的影响 以改良的MW培养基为基础，加入不同类型、不同浓度的植物激素以及其组合（其中第一组试验是对照组，不额外添加任何植物激素），对蓝莓芽分化情况作对比。具体搭配如下表： B组合中只添加了低浓度的生长素NAA，未添加细胞分裂素，导致只有个别南亚完成了分化，没有形成植株；C组合只添加了细胞分裂素BA，未添加生长素，也只有少量的个体完成了分化，形成的苗数量很少。D组合只添加少量细胞分裂素KT，结果和C组类似。而结合使用了细胞分裂素与生长素的E、F组合，其分化生长的状况明显更好。所以，在培养基中同时加入适量的细胞分裂素和生长素，对植株的生长分化有明显的促进作用。 2.3激素的浓度对蓝莓芽组织培养的影响 本节将蓝莓嫩芽培养瓶分为12个批次，平均分配给2个对照组：甲组6个批次全部添加浓度为0.05的NAA，然后向其中添加不等量的BA，浓度分别为0/0.1/0.3/0.5/0.8/1.0 ；乙组6个批次的处理方式与甲组类似，所有培养瓶中均添加浓度为0.5的BA，然后按照
世界蓝莓生产现状和我国蓝莓发展趋势 李亚东教授(吉林农业大学浆果研究所) 蓝莓又称越橘，为杜鹃花科越橘属植物，是具有较高经济价值和广阔开发前景的新兴果树树种。果实为蓝色，果实大小因种类不同而异，一般单果重为0.5-2.5g，其果实果肉细腻，种子极小，甜酸适口，有清爽宜人的香气。同时，蓝莓具有较高的保健作用和药用价值，在国内外极受欢迎，并已被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。 蓝莓的种类、品种很多，近几年通过农业科技工作者的努力，现已选育出适合寒带、温带、亚热带等不同气候条件下栽培的种类和优良品种，在很多地区已经推广种植，并取得了很好的经济价值。蓝莓管理技术简便，见果年限短，经济效益大，一般栽后l-2年即可结果，3年进入盛果期，植株寿命长。 一、栽培历史 蓝莓的栽培历史不到一个世纪，最早始于美国。1906年，F.V.coville首先开始了野生选种工作，1937年将选出的15个品种，进行商业性栽培。到上世纪80年代，已选育出适应各地气候条件的优良品种100多个，形成了缅因州、佐治亚州、佛罗里达州、新泽西州、密执安州、明尼苏达州、俄勒冈州主要经济产区，总面积1.9万hm2，产量20万t。目前，蓝莓已成为美国主栽果树树种。到2003年，北美地区栽培面积达到96.9hm2，总产量超过40万t。继美国之后，世界各国竞相引种栽培。各国根据自己的气候特点和资源优势开展了具有本国特色的蓝莓研究和栽培工作。荷兰、加拿大、德国、奥地利、丹麦、意大利、
芬兰、英国、波兰、罗马尼亚、澳大利亚、保加利亚、新西兰和日本等国相继进入商业性栽培。据统计，全球已有30多个国家和地区开始蓝莓产业化栽培，总面积目前达到12万hm2，但仍处于市场供不应求状态。 我国蓝莓栽培起步较晚，但发展速度较快。上世纪80年代初期，吉林省和黑龙江省采集野生资源加工果酒、饮料。吉林省安图县山珍酒厂生产的蓝莓酒曾获农业部银质奖，其产品在市场上很畅销。但由于依靠野果原料供应不稳及果酒市场的衰退，未能形成一个稳定的产业。在采集野生资源基础上，一些林业部门曾作过野生笃斯越橘的家植驯化栽培，但由于产量及产值低，栽培效益差，生产上也难于推广。针对这一问题，吉林农业大学于1983年率先在我国开展了蓝莓引种栽培工作，到1997年，从美国、加拿大、芬兰、德国引入抗寒、丰产的蓝莓优良品种70余个，其中包括高丛蓝莓、半高丛蓝莓、矮丛蓝莓等六大类型。1989年，解决了蓝莓组织培养工厂化育苗技术，扩繁后，在长白山建立了5个蓝莓引种栽培基地。1995年，初步选出适宜长白山区栽培的蓝莓优良品种4个，并开始向生产推广。对一些基本的栽培技术和育苗、土壤管理等也作了研究。1999年，吉林农业大学与日本的环球贸易公司合作，率先在我国开展了蓝莓的产业化生产栽培工作。2000年开始，相继在辽宁、山东、黑龙江、北京、江苏、浙江、四川等地引种试栽。2004年在吉林、辽宁和山东省发展300hm2，总产量300t，产品80%出口日本。到2006年为止，国内种植已经遍布全国各个省市，总面积已近千公顷。 二、经济意义 (一)营养价值及医学价值
偶尔就能听到关于多肉植物组培的各种传言，组培苗是什么一回事？组培苗到底好不好？为什么有那么多组培苗?如何鉴别组培苗？等等关于多肉植物组培苗的那点事，你都可以在面这篇文章里看到（文字较多，耐心观看），lansemeiyan 什么是组培苗？ 组织培养技术，指代的是利用植物体的某个部分，通过无性营养繁殖来获得新苗（克隆苗）的过程，又叫植物克隆。从广义上来说，利用多肉植物的侧芽、叶插、根插、砍头进行繁殖，都属于组织培养范畴。组培这个概念，很多人一开始可能都误解了。 那么导致市场动荡的“组织培养”到底是指代什么呢？确切的说应该是“离体快速繁殖”，即组织培养技术的一个分支——离体快速繁殖，简称“快繁”。这门技术是从叶插、根插技术演变来的，我们用土壤做叶插和根插，“快繁”则是用人工合成的基质来做，这种人工基质看上去很像果冻，而容器也由花盆变更为玻璃瓶。这就是后来大家在电视上看到的植物组织培养工厂。 为什么在玻璃瓶里的培养基可以实现快速繁殖呢？原因在于优越的外环境和植物激素的作用。快繁实验室的温度、光照和湿度都是恒定的，“培养基”里含有足够的营养和强大的植物激素。这些激素可以按照人为意愿调整植物的生长状态，让它出根还是让它出芽（但这也取决与操作者的学术水平和经验，能够从容操作激素的人在国内是有限的）。 我们平时做叶插和砍头的时候，也会取巧的使用一些激素，其实往叶插和砍头株上滴加激素的行为和“快速繁殖”的性质和道理是一样的，所获得苗也是完全一样的。很多人并没有意识到这点，而觉得不同繁殖方式获得的苗性状会不同，其实差异只在于营养富集度，就是苗的饱满度而已，叶插的总是比砍头的弱一些，
性状呈现晚一些，这是所在部位的内源激素和营养导致的，但是基因组完全一致，不会出现性状漂移。只有嵌合性性状，比如斑锦，才可能在叶插和砍头之间存在“概率学”上的差异。 回头再说大众眼中的“组织培养”（实际上是离体快速繁殖），由于人为操控植物激素的动态变化，使得离体的植物组织可以按照人的意愿出芽，一个两个无数个，因为植物的无性繁殖被认为是无限的，所以在组织培养的“快速繁殖”模式中可以无限的扩增该品种种苗，这也是“危害”市场最致命的地方。不过，必须指出的是，组培苗的无限繁殖也是有成本的，不是像刘谦的魔术一样天上掉下来的，很多人认为组培无成本或低成本，一文不值等等言论，其实都是不了解组培。 如果想获得上万株的种苗，必须有专门的组织培养实验室或工厂，这个运行成本相当巨大，可以说一般的生产商是做不到的。迄今为止，大型的组培工厂都是ZF出资建立的，换句话说大多数搞组培苗生产的人，成本是国家掏腰包的。真正自己掏钱搞组培工厂，是玩不起的。 组培技术早在70年代就出现在欧美，广泛用于种苗繁育和小体型植物的生产。温度、光照、湿度、水、肥等的人工合成、调控技术的成熟，特别是高效植物补光灯的出现推动了组培快速发展。原来只能单层平面日光棚内养植的植物，现在可以在室内人造光环境中，使用多层立体组合栽培方式进行植物的繁育和生产。 “组织培养”（离体快速繁殖）到底好不好呢？ 快繁苗，由于几乎完全是激素调控获得的，这就导致一个问题，操控激素的人是否理解植物的特性、是否熟悉激素的理论和植物生理、是否有足够的经验来
花卉苗木扦插繁殖技术 一、扦插繁殖的的概念、意义 扦插繁殖是用植物营养器官的一部分（如枝、芽、根、叶等）作为插穗、插在土、沙或其它基质中，使其生根发芽、成为完整独立的新植株。这是繁殖观赏灌木、多年生缩根草本、落叶及常绿阔叶及针叶树种的一种最重要的方法。花卉在温室生产中繁殖时也广泛地采用扦插法。 扦插繁殖可以经济利用繁殖材料，可进行大量育苗和多季育苗（如菊花、香石竹1平方米可扦插繁育400—600苗），既经济又简单，不存在嫁接繁殖中砧木影响接穗的的问题；可以保持母体的优良性状：而且成苗迅速根系比实生苗理想；开始结实时间比实生苗早：对不结实的或结实稀少的名贵园林树种是一种切实可行的繁殖方法。如紫薇的播种苗花色混杂，只能靠扦插繁殖保持母本优良性状。如某些月季、葡萄品种、重瓣黄刺玫、不结实或结实很少或不产生有效种子。亦只能用扦插繁殖。扦插繁殖目前不仅在生产上广泛应用，而且在实践中不断积累了许多经验，采用了许多先进技术，解决了许多繁殖困难树种的繁殖问题，对加速花卉苗木的育苗工作起了很大的作用。 二、扦插生根的机理 在扦插育苗时，插条基部切断面上的受伤细胞由于原生质的分解而产生一种创伤激素，并且被内层未受伤的细胞所吸收，使健全细胞的细胞膜木栓化，而将死伤细胞同健全细胞隔离开来。在切口处的创伤激
素和插穗上部由叶、芽转移来的生长激素以及其他生根诱导物质的作用下，切口内层的健全细胞与切断面相平行的分裂，于是形成形成愈伤组织。这种愈伤组织在形成层和筛管部位特别发达，对切口可起一定保护作用。由于植物激素的不断增加，更促进了愈伤组织的细胞分裂，愈伤组织薄壁细胞逐渐开始分化，形成愈伤组织木质部。它先同插穗中水分和养分的通道输导组织连通，再同愈伤组织木质部的外侧相连，而发展成为根原始体，最后长出根来。 三、扦插生根类型 1．潜伏不定根原基生根型离体枝条在脱离母体之前，即已经形成了不定根原基，只要给予适当条件，根原基即可萌发为不定根。如沙地柏、杨树类等。从生理解剖上讲，凡是具有根原基的植物，绝大多数为易生根类型。 2．皮部生根型也是一种易生根类型。有的在1—2周内不定根就可以从皮孔内生出，这些不定根可以暂时维持离体枝，叶的水分代谢，保证离体的存活。待基部不定根形成后，上部的皮部根可逐渐衰退，消失，如一些品种的月季、玫瑰、扶芳藤、地锦等。3．侧芽、潜伏芽基部分生组织生根型这种生根型几乎普遍存在于各种植物中。芽的基部分生组织非常活跃，再生能力强，容易形成根原始体。生产上调整插穗时，下剪口都要选择在侧芽的基部（节间下部）就是缘自于此。 4．愈伤组织生根型离体扦插后，为了生存下来，首先要保护好伤口，形成愈伤组织。在适宜的生根条件下进一步分化，形成根
农高会组培生产汇总 本次农高会参展组培苗的企业有21家。主要有陕西（12家）、山东（7家）、天津（1家）、宁夏（1家）。其中苹果组培有8家、樱桃7家、草莓2家、猕猴桃1家、蓝莓1家、花卉1家、十月光辉1家、马铃薯1家。 一、组培苗企业 （一）陕西 1.陕西华圣现代农业集团种苗 （1）品种：苹果砧木B9、T337 （2）瓶苗长势（分化）：T337分化2-3,一瓶4株，愈伤组织大、瓶底愈伤发黑、叶片大但顶尖叶片干枯、茎干粗壮，拔高不明显（如图）。 （3）穴盘苗：穴盘50孔，深度8cm左右；基质：草炭 长势：苗子整齐一致，叶片大，高度8cm。 （4）年产量：20万株（压条繁殖为主） （5）组培苗单价：根据等级不同，价格不一样，2-5元/株。
（6）技术沟通：未见到组培技术人员 2.海升现代农业有限公司 （1）品种：苹果砧木T337、樱桃、草莓 （2）瓶苗长势（分化）：樱桃分化3,，愈伤组织小、苗子健壮，拔高明显（如图）。 （3）穴盘苗：穴盘：樱桃：50孔，草莓：32孔，穴盘无纹隙，基质：珍珠岩+草炭 长势：樱桃：须根多，盘根紧致，叶片大、绿，高度20cm，长势好（如图）。 草莓：叶片大，叶色正常，苗子长势旺。 樱桃草莓 （4）年产量：未说
（5）组培苗单价：樱桃16元/株，苹果砧木不卖 （6）技术沟通：未见到组培技术人员 3.陕西果业（新世界）种苗集团有限公司 （1）品种：苹果砧木T337、M26、樱桃吉塞拉6号（12号）、猕猴桃、花椒（根据订单） （2）瓶苗长势（分化）：苹果分化2，每瓶15株，愈伤组织小、苗子健壮，高（如图）。 猕猴桃：分化3，叶片绿，苗子粗壮，但拔高不明显（如图）。 T337 猕猴桃 生根：M26根系10条左右，根长2-3cm，苗子茎干粗壮，拔高不明显，25-30天可驯化（如图）。
C H I N ESE H O R TI C U LTU R E A B STR A C TS 辽宁丹东地区蓝莓塑料大棚栽培技术 邓贵义1马维广1姜红甲1邢世东1王政2隋智3 (1.辽宁省丹东农业科学院，辽宁凤城118109；2.辽宁省凤城市果树站，辽宁凤城118100； 3.辽宁省凤城市林业局，辽宁凤城118100) 摘要：总结辽宁丹东地区蓝莓塑料大棚栽培技术，主要包括品种选择、大棚建造、定植、管理等技术措施，指出塑料大棚栽培蓝莓棚向一般为东西向(东西延长)，栽培方式主要为平栽；棚型设计参照的合理轴线公式为：Y＝4fX L-2(L-X)。 关键词：蓝莓；塑料大棚；栽培技术 蓝莓的栽植在辽宁始于上个世纪90年代，而丹东蓝莓的发展则始于2005年。2005年丹东农业科学院开始研究蓝莓的栽培，研究包括蓝莓的硬枝扦插繁殖、露地栽培、塑料大棚栽培及日光温室栽培。经多年的调查、研究，基本摸清丹东地区塑料大棚栽培技术。 1品种选择 塑料大棚栽培品种主要是‘北陆(Northland)’、‘伯克利(Berkeley)’、‘圣云(St.Cloud)’。‘北陆’为中早熟品种，树势生长健壮，树冠中度开张，抗寒且极丰产。果个中大、圆形、蓝色，质地中硬，成熟期较为集中，风味佳；‘伯克利’为中熟品种。树势生长健壮，树冠开张，丰产。果穗疏散，果个极大、淡蓝色，质硬，具有清淡芳香味，风味佳；‘圣云’为中熟品种。树势生长健壮、直立，抗寒，果个大、蓝色，肉质硬，鲜食口感好，适宜鲜果销售。2建造大棚 2.1棚向地选择 在草莓、蔬菜生产中一般建造塑料大棚提倡南北向(南北延长)，其原因是南北向大棚光照分布均匀，便于通风，而东西向(东西延长)的大棚透光率要比南北向好，但光照分布不均。不过塑料大棚栽培蓝莓棚向最好是选东西向，蓝莓塑料大棚栽培能否安全越冬，棚向是关键。选则东西向就是利用光照分布不均这一特点，由于光照分布不均，在寒冷的冬天以塑料大棚的脊(最高处)为界，脊的南坡在日出后棚膜下面的冰霜融化，而脊的北坡在日出后棚膜下面的冰霜不融化，使大棚内在冬季容易产生雾气、棚内湿度增加并有一层水膜保护蓝莓枝条。棚内昼夜温度变幅小、比较恒定，枝条表面蒸发量小，避免蓝莓在越冬中抽条。而南北向大棚光照分布均匀，棚内不容易产生雾气、湿度小，昼夜温度变幅较大、比较不稳定，枝条表面蒸发量相对大。因此，容易产生抽条，冻害发生频繁。一般12月下旬～1月下旬不论哪个棚向的棚内温度都恒定，棚布内面均有冰霜。棚内蓝莓冻害的频繁发生期一般在1月下旬～2月下旬。1月末以后随着气温逐步回升，东西向棚的脊的南坡在日出后棚膜下面的冰霜融化，而脊的北坡在日出后棚膜下面的冰霜不融化，使大棚内在冬季容易产生雾气、棚内湿度增加并有一层水膜保护蓝莓枝条。棚内昼夜温度变幅小、比较恒定，枝条表面蒸发量小，避免蓝莓在越冬中抽条。 总之，塑料大棚栽培蓝莓能否安全越冬，棚内有较稳定的温度、湿度是关键，大棚的棚向、高低是其保证。 2.2棚型设计 棚型以流线型落地拱为好，压膜线容易压紧，抗风力强。棚面的构型越接近合理轴线，抗压能力越强。设计钢架无柱大棚可参照的合理轴线公式为：Y＝4fXL-2(L-X)，其中：Y为弧线点高；f为矢高；L为跨度；X为水平距离。 例如，设计一栋跨度8m，矢高2.2m的钢架无柱大棚，首先画一条8m长的直线，从0～8m，每1m设1点，即X 1 ＝1m、X2＝2m、X3＝3m、X4＝4m、X5＝5m、X6＝6m、X7＝7m，利用公式:Y i＝4fX L-2 (L-X i)求出0～7m各点的高度，即Y1＝0.96m、Y2＝1.65m、Y3＝2.1m、Y4＝2.2m、Y5＝2.1m、Y6＝1.65m、Y7＝0.96m，因Y1、Y7点太低不利于作业，一般取Y1、Y22点 之和的平均数，即Y 1 、Y7点均为1.3m，把各点的高度连接起来即为棚面(见附图)。 3定植 塑料大棚栽培蓝莓一般要平栽，起垄或高畦栽培容易发生抽条。其原因在于：(1)揭掉棚膜后，生长季的降雨导 第一作者简介：邓贵义（１９６３－），男，副研究员；从事果树 研究。 项目来源：丹东市科技攻关课题“蓝莓品种定向及配套技术研究 （０５１１２）”。 附图钢架无柱大棚设计示意158
第2章植物组织培养技术 第二节植物组织培养概述 一、授课章节 第二节植物组织培养概述。 二、学时安排 2学时。 三、教学目标 1．掌握植物组织培养的含义。 2．了解植物组织培养的类型划分。 3．理解植物组织培养的应用原理。 4．掌握植物组织培养的特点和应用。 四、教学重点、难点分析 重点： 植物组织培养的含义、特点和应用。 难点： 植物组织培养的应用原理。 五、教具 电化教学设备，植物组织培养试管苗。 六、教学方法 讲授法，多媒体课件。 七、教学过程 Ⅰ.导入 前面我们学习了有关植物育种的一些知识，今天，请看我给同学们看一样东西(教师拿出试管苗)，问同学们这是什么呢？这就是我们要学的植物组织培养。 II.新课
一、植物组织培养的含义 植物组织培养是指在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体培养在人工培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整植株的过程。由于培养物脱离母株在试管内培养，故又称离体培养、试管培养。 二、植物组织培养的类型 植物组织培养由于分类依据不同可划分为不同的类型。 三、植物组织培养的应用原理 （一）植物细胞全能性 植物细胞全能性，是指植物体上每个具有完整细胞核的植物细胞，都具有该植物体的全部遗传信息和产生完整植株的能力。植物的体细胞一旦脱离所在器官或组织的束缚成为离体状态时，在一定的营养、激素和外界条件作用下，就可能表现出全能性，而生长发育成为完整的植株。
（二）细胞的分化和形态建成 （三）植物的再生功能 四、植物组织培养的特点 （一）研究材料来源单一，无性系遗传信息相同 （二）试验经济，管理方便，工作效率高 （三）培养条件人为控制，可周年连续进行试验或生产 （四）生长快，周期短，繁殖率高 五、植物组织培养的应用 （一）优良品种的快速繁殖 （二）脱毒及脱毒苗的再繁育 （三）植物新品种的培育 （四）种质资源的保存和交换 （五）有用次生代谢产物的生产 III.作业 1.简述植物组织培养的概念和培养类型。 2.植物组织培养技术有哪些特点？ 3.植物组织培养在生产上有哪些方面的应用？ 4.通过学习，你对植物组织培养技术是怎样理解的？ 第二节植物组织培养厂房的设计与构建一、授课章节 第二节植物组织培养厂房的设计与构建。 二、学时安排 2学时。
实训六药用植物的扦插繁殖技术（金银花） 一、实训目的要求 1.了解药用植物扦插繁殖的理论基础。 2.掌握药用植物枝插、叶插及根插的繁殖技术。 二、实训材料用品 （一）实验材料 根插材料：地下跟，选择一年生充实饱满的根，不宜选择不易发芽的老根和新生根。 枝插材料：植株的半成熟的枝条。 叶插材料：植株生长健壮、充分成熟的叶片。 （二）仪器与用品 枝剪、刀片、育苗盘、移植铲、标签、遮阳网、塑料薄膜。 （三）试剂 萘乙酸、酒精、石蜡 三、实训内容方法 （一）营养土的消毒盒装盘 可选择轻质壤土、江沙、苔藓等作栽培基质。用高压锅进行湿热灭菌 1.5小时，用福尔马林熏蒸或紫外灯对育苗盘进行。将基质平铺于育苗盘上，约10cm 厚，打透底水备用。 （二）生长调节剂溶液的配制 1.500ppm萘乙酸粉剂将1g萘乙酸混于2000g滑石粉中备用。 2.500ppm萘乙酸溶液 1g萘乙酸先溶于少量95%乙醇后，再加水稀释至所需浓度。（三）插穗的剪切 剪插穗的枝剪在每剪一个新插穗前用70%左右的酒精消毒处理。 1.根插穗的剪切 2.枝插穗的修剪 3.叶插穗的修剪 （四）插穗的扦插
将根插法和枝插法及片叶插法的插条各分成6组，每组15枝插穗，分别为：不处理的对照组、上切面不处理及下切面沾500ppm萘乙酸粉剂处理组、上切面不处理及下切面沾500ppm萘乙酸溶剂处理组、上切面封蜡及下切面不处理组、上切面封蜡及下切面沾500ppm萘乙酸粉剂处理组、上切面封蜡及下切面沾500ppm萘乙酸溶液处理组。将处理好的各组插穗分别扦插于铺好扦插基质的育苗盘中，挂好标签，标签上写明扦插时间、扦插方式、处理方式。 将全叶插的插穗分成2组，每组15枝插穗，分别为：不处理的对照组、表面喷洒500ppm萘乙酸溶液的处理组。将处理好的叶片平放于铺好扦插基质的育苗盘中，使叶片背部的叶脉紧贴扦插基质，并在叶脉处用消过毒的小刀划开小切口。之后同样挂好标签，标签上写明扦插时间、扦插方式、处理方式。 （四）插穗苗的管理 （五）插穗苗成活率的调查 插穗半个月后调查插穗的成活率。 各处理的成活率可以按照以下公式计算。 扦插苗成活率=（扦插苗成活株数/扦插苗总株数）x100% 四、实训作业思考 1.书写扦插观察日志。 2.列举三种日常所见的自然营养繁殖实例。 3.人工营养繁殖的意义。