生物工程下游技术实验—
“超氧化物歧化酶SOD的分离纯化技术”
姓名：学号：
指导老师：柯德森；同组者：；时间:
摘要：通过对绿豆种子的研磨破碎获得SOD粗酶，经过硫酸铵分级分离、
透析除盐和浓缩等过程，除去粗酶液中的杂质及干扰蛋白，采用葡聚糖（Sephadex G-100）凝胶层析得到纯化的SOD酶。跟踪提纯过程活性的分布，并评价提取过程各步骤的效率。实验结果证实随着不断的分离提纯，总活力不断减小，比活力不断上升，总纯化倍数为1.03，活性得率为8.92%。
一、前言
超氧化物歧化酶(superoxide dsdismutase，SOD)是需氧化物中以超氧阴离子为底物的一种酶，广泛存在于各种生物中。SOD不仅在生物体内对抗氧化、解毒起重要作用，也有延缓机体衰老、抗肿瘤及抗免疫性疾病等功能，因而受到极大关注。
SOD属于金属酶，其理化性质不仅取决于蛋白质部分，而且还取决于结合到活性部位的金属离子。按照结合的不同金属离子，生物体中SOD有Cu、Zn-SOD、Mn-SOD和Fe—sOD三种，但近几年发现低等生物中尚存在含Ni的SOD。在已发现的酶中，超氧化物歧化酶(SOD)是需氧生物和耐氧生物的体内清除超氧化物自由基的酶超氧自由基在体内的过多积累将可能引发脂质过氧化损伤DNA，使脱水酶失活，使线粒体中的NADH脱氢酶NADH氧化酶磷酸腺苻酶(ATPase)失活，从而易引起生物体发疾病或衰老。
自从1968年McCord与Fridovich发现SOD及其催化超氧化物自由基歧化为O2与H2O以来，SOD一直以來被认为是生物体内最重要的抗氧化酶。根据近10年的研究报告表明，SOD具有清除超氧化物自由基，防止其对机体直接或间接的损伤；使O2成为细胞内自由基的排污漕；调节机体内O 的水平；调节机体内NO水和催化反应产物H2O2等作用。现在在日常生产应用中，多以动物血液中提取SOD。但是动物血液中的疾病很多，价格也比较昂贵。从植物中提取SOD就可以相应的解决上述问题，类似绿豆芽这种植物，其成本低廉，且SOD 的含量丰富，又无污染，将其大量应用于生产有着很好的发展前景。
本实验以绿豆为原料提取SOD，通过各步的分离提纯，应测得酶总活力逐渐减小，比活逐渐升高.通过本实验掌握物质分离纯化的实验设计过程，以及硫酸
铵分离、透析除盐、浓缩和葡聚糖凝胶层析等物质分离技术。
二、实验材料与方法：
<一>材料:绿豆种子,市售新鲜绿豆种子浸泡蒸馏水24小时备用。
<二>试剂:葡聚糖（sephadexG-100或G150）, NaCl（AP）, 磷酸氢二钠（AP）, 磷酸二氢钠（AP）, 三羟甲基氨基甲烷（Tris）, 盐酸（浓盐酸），硫酸铵（AP）, PEG6000, 考马斯蓝G250 , 磷酸，乙醇（AP），牛血清蛋白BSA , 连苯三酚(焦性没食子酸), 甲硫氨酸( methionine) , NBT（氮兰四唑Nitroblue Tetrazdinna）, 核黄素 , EDTA(钠盐) , 超氧化物歧化酶（sigma公司）,
<三>仪器:
离心机
WFZ-UV2000 型紫外分光光度计
201×7（717）强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂
匀浆机、各型号烧杯、试管、量筒、带毛塞试管、漏斗、移液枪、
移液管、玻璃棒等
<四>实验方法和步骤：
1．材料处理和取样
1）．25g绿豆,洗涤，蒸馏水浸泡过夜，加入250 ml pH7 0.05 mol/L pb液，匀浆机匀浆，二层纱布过滤，离心（3000 rpm）得清液，取少量样为样①，进行SOD活性测量，计算材料中SOD总活性单位及比活性单位（units/mg Pr）2）．实验流程：
1.称量25g 绿豆+250ml pH7 0.05 mol/L pb液，匀浆，两层纱布过滤，离心
（3000rpm）15Min 取清液，取少量样为样①，测量SOD活性、蛋白质含量测量，计算SOD总活性单位及活性单位。
2.所得清液测量总体积，缓慢40％饱和（NH4）2SO4 至浓度为19.4g/100ml，4℃
冰箱静置分层。
3.离心（3000rpm）取清液，取少量为样②，测量SOD活性、蛋白质含量测
量，计算SOD总活性单位及活性单位。
4.步骤3中的清液缓慢加入硫酸铵至75%饱和度（8.7g/100ml）（过程充分搅拌），
5℃至分层，离心（3000rpm）取沉淀，取样③，计算SOD总活性单位及活性单位。
5.装入透析袋中，于蒸馏水中5℃透析过夜。
6.透析后溶液用滤纸过滤得清液，重新装入透析袋中用PEG浓缩。
7.装柱：1）排气泡加蒸馏水15％体积水
2）100mL G100 一次装完
3）静置10min 打开出液口排过量洗脱剂
4）保留离胶面2－3cm 接洗脱瓶平衡30min 理想流速△注意①胶面始终保持水层②洗脱瓶：pH7, 0.02MPb
8. 层析过程
①样品：浓缩液离心过滤体积31mL
取样④
②上样：5％上样量2－3mol
③洗脱:1mL/min,3mL/支，共收100－120mL
*测（1）A280值
（2）SOD活性（粗略）20支管每支3mL
（3）搜集活性峰并测酶活性
2．植物超氧化物歧化酶（SOD）活性测量
1）连苯三酚法测定SOD活性：
溶液配制：
1，连苯三酚：630 mg------→100 ml 10 mmol/L HCl (0.085 ml 36%的浓HCl ，用蒸馏水配成100 ml)。共配500ml.
2，pH 8.30 50 mmol/L Tric-HCl：
A) 0.1 mol/L Tris: 12.114g-----1000 ml (储备液)
B) 0.1 mol/L HCL: 浓盐酸稀释得到（8.5 ml 36%的浓HCl ，用蒸馏水配成1000
ml）(储备液)
0.05mol/L pH 8.3: 500ml A+199ml B-------定容到1000ml..
操作：25?C，3 ml 50 mmol/L pH8.30 的Tric-HCL 缓冲液，加入10 μl 50 mmol/L 连苯三酚（具体加入量应每次测量前校正，加入的原则是使下面的A325变化控制在0.07 ／min左右），迅速摇匀，倒入光径1 cm的比色杯(应该用石英杯)中，每３０秒测一次Ａ３２５值，自氧化速率的变化（?Ａ）控制在0.07 ／min左右，加入酶液后再测连苯三酚自氧化速率的变化（?Ａ’），酶量的加入控制在使加样后的?Ａ’在0.035/min左右。（以上?Ａ?Ａ’的变化值不需特别严格，?Ａ只要控制在0.1以下0.04以上，?Ａ’变化在?Ａ的约一半左右即可）
3．考马斯蓝G-250测蛋白的方法：
实验器材:
分光光度计,试管及试管架,比色皿,移液管;移液枪
实验材料与试剂:
●考马斯亮蓝G-250 (0.01%, W/V): 100mg 考马斯亮蓝G250溶于50ml 95%的
乙醇中,加入100ml 85% 的磷酸,将溶液用水定容到1000 ml,过滤得清液于棕色瓶中备用.
●标准蛋白质溶液:牛血清蛋白(BSA)用蒸馏水配成0.1mg/ml
●待测样品液:S1,S2 (3颗绿豆—10ml水---研磨---离心2500rpm得清液),S3,S4
为原液稀释10倍（S1S2S3S4均为样品体积，S3和S4不一定做，在未知样品蛋白含量时可先设计一个浓度梯度以保证测量值在标准曲线的线性范围内）
操作方法:
1.牛血清蛋白标准曲线的制作:
按下表加入试剂,混匀静置2分钟,以1号管为空白调零点,测下各管的A595
取未知浓度的蛋白质(通过适当稀释使其浓度控制在测量有有效范围内),加到试管内,再加入G250染色液3ml混匀,测其595nm下的吸光度,对照标准曲线求出蛋白质含量,计算其浓度.（表示为mgPr/g材料）
4．比活力、得率及纯化倍数计算：
SOD的比活力为=总活力（units）/总蛋白量（mg）
SOD总得率为：
总得率=最后样品活率/样1活率*100%
纯化倍数=比活2/比活1
三、结果与讨论：
<一> SOD活性及蛋白质测定结果：
1．蛋白质含量测定：
表1. 牛血清制作蛋白质标准曲线（蛋白质含量/ ug）
蛋白质含量/ug 0 10 20 30 40 50 60 70 OD值0 0.174 0.269 0.342 0.429 0.548 0.690 0.767
图1. 牛血清制作蛋白质标准曲线（蛋白质含量/ ug）
<二 >硫酸铵分级分离、透析除盐和浓缩过程
表2. 连苯三酚自氧化速率(A325)
表3. 连苯三酚测样品SOD 活性(A325)
连苯三酚/ul
酶/ul △A ’
样① 10 100 0.031 样② 12 80 0.036 样③ 15 110 0.039 样④ 10 40 0.038
表4. 考马斯蓝G-250测样品蛋白含量(A595)：
样品体积/ul OD 平均值（nm ）
样① 30 0.347 样② 50 0.681 样③ 60 0.839
样④ 50 0.868
根据蛋白质标准曲线求出蛋白质含量： 样① 29.651ug 样② 61.160 ug 样③ 76.066 ug 样④ 78.802ug
<三 >葡聚糖凝胶层析分离纯化SOD 实验结果
表4. 葡聚糖G100凝胶层析洗脱曲线（以A280吸收作为蛋白质含量的相对值） 试管号 （1） （2） （3） （4） （5） 吸光值(nm) 0.079 1.145 0.591 0.184 0.082
试管号 (6) (7) (8) (9) (10) 吸光值(nm) 0.055 0.049 0.049 0.048 0.048
连苯三酚/ul △A 样① 10 0.070 样② 12 0.071 样③ 15 0.075 样④ 10 0.073
图2. 葡聚糖Sephadex G100凝胶层析分蛋白质洗脱曲线
经连苯三酚粗测，（3）号管颜色最浅，而根据蛋白质洗脱曲线看出（3）号管位于蛋白质含量峰上，所以选取（3）号管作为目的试管收集SOD ，测量其准确SOD 活力和蛋白含量，计算SOD 比活力。
连苯三酚自氧化速率:连苯三酚=12ul; △A=0.075
表6. 连苯三酚测样品⑤SOD 活性(A325)
考马斯蓝G-250测样品蛋白含量: 样品体积=50ul OD 平均值=0.366nm 则根据蛋白质标准曲线求出蛋白质含量=31.443ug
计算得：
1.比活力的计算
加入酶量相当的酶活力单位(unit)=（△A-△A ’）/△A*2
试管号 连苯三酚/ul 样品/ul △A ’ ① 10 150 0.038 ② 10 150 0.042 ③ 10 150 0.045 ④ 10 150 0.042 ⑤ 10 150 0.046 ⑥ 10 150 0.051 ⑦ 10 150 0.041 ⑧ 10 150 0.045 ⑨ 10 150 0.049 ⑩ 10 150 0.050
样① (0.070-0.031)/0.07*2=1.11
样② (0.071-0.036)/0.071*2=0.99
样③ (0.075-0.039)/0.075*2=0.96
样④ (0.073-0.038)/0.073*2=0.96
试管（3） (0.075-0.038)/0.075*2=0.99
提取液的总活力(unit)=加入酶量相当的酶活力单位*（反应液总体积/取样液体
积）*稀释倍数
样① 1.11*（200/0.100）=2220
样② 0.99*（170/0.080）=2103.75
样③ 0.96*（150/0.110）=1309.1
样④ 0.96*（50/0.040）=1200
试管（3） 0.99*（20/0.100）=198
总蛋白量（mg）=（反应液总体积/取样液体积）*取样液蛋白含量
样①（200/0.030）*0.029651=197.67
样②（170/0.050）*0.061160=207.94
样③（150/0.060）*0.076066=190.165
样④（50/0.050）*0.078802=78.802
试管（3）（20/0.050）*0.031443=12.58
SOD的比活力为=总活力（units）/总蛋白量（mg）
样① 2220/197.67=11.23
样② 2103.75/207.94=10.12
样③ 1309.1/190.165=6.88
样④ 1200/78.802=15.23
试管（3）198/12.58=15.73
2.得率的计算
得率=本次总活力/上次总活力*100%
（1）2103.75/2220*100%=94.76%
（2）1309.1/2103.75*100%=62.23%
（3）1200/1309.1*100%=91.67%
（4）198/1200*100%=16.5%
SOD总得率=最后样品活力/样1活力*100%
=198/2220*100%
=8.92%
3.纯化倍数的计算
纯化倍数=比活2/比活1
（1） 10.12/11.23=0.90
（2） 6.88/10.12=0.67
（3） 15.23/6.88=2.21
（4） 15.73/15.23=1.03
图3.各纯化步骤中SOD总酶活变化趋势
图4.各纯化步骤中SOD总蛋白含量变化趋势
图5. 各纯化步骤中SOD比活变化趋势
1.可以看出，在25g绿豆中随着不断的分离提纯，总活力不断减小，比活力先下降后上升，最后总纯化倍数为1.03，活性得率为8.92%，达到预期效果。
2. 为什么要从植物中提取SOD？
初步验证阶段。国外SOD主要应用于医疗、保健方面，有以动物血液及内脏为原料制取SOD的报导，但存在着成本高、含有致热因子等缺陷，因此，适用范围极为有限。尤其是近年来受“疯牛病”的影响，许多国家和地区抵制以动物血液及内脏为原料制取的超氧化物歧化酶，使得超氧化物歧化酶在国际市场上极为紧缺。
从植物，特别是人们日常经常食用的蔬菜、瓜果、野生植物及粮食中提取SOD，使用安全性非常高，避免了可能发生的交叉感染。利用全新的生物技术从植物中提取SOD，具有明显的社会和经济效益，市场前景广阔。从植物中提取SOD的主要工艺流程为:植物→打浆→超滤分离→有机溶剂去杂→柱层析精制→超滤浓缩→冷冻干燥→产品
3.用Tric-HCl而不用磷酸缓冲液的原因
因为反应物连苯三酚在酸性条件下稳定，在碱性条件下能自氧化。而SOD 活力的测定是依靠SOD抑制连苯三酚的自氧化实现的。磷酸缓冲液pH大约为7点多，无法提供连苯三酚自氧化需要的碱性环境。
4.邻苯三酚加入量对测量的影响
邻苯三酚的浓度是决定其自氧化速率高低的一个主要因素，浓度越高，自氧化速度越快，相同单位的SOD对邻苯三酚自氧化的抑制程度就越小，从而使得测量结果越低。
所以为使结果具有可重复性，必须严格控制测定液中邻苯三酚的终浓度保持相同。
五、参考文献：
[1]Beauchamp, J. and I. Fridovich (1971) Superoxidedismutase; improved
assays and an assay applicable toacrylamide gels. Analytical
Biochemistry, 44, 276-287.
[2]柯德森主编.生物工程下游技术手册.科学出版社出版.2010
[3]刘国诠主编.生物工程下游技术.北京:化学化工出版社.2004
[4]袁勤生.超氧化物歧化酶的分析测定(J).中国医药工业杂志,1989
[5]黄政弘,陈惠婷,瑞泽.三种SOD活性测法之比较.大叶学报.1999
[6]翟颐华，等，韭菜细胞溶质超氧化物歧化酶的纯化和性质〔J〕.武汉植物学研究，1998，16(l):18—22.
选择题 1、机械搅拌通风发酵罐扱常用的搅拌叶轮型式是：B A.平奖叶式 B.圆盘涡轮式 C.螺旋浆式 D.刮板式 2、发酵罐的公称体积是指：C A.上下封头体积和罐筒身（圆柱）体积之和。 B.上封头体积和罐筒身（圆柱）体积之和。 C.下封头体积和罐筒身（圆柱）体积之和。 D.罐筒身（圆柱）体积。 3、机械搅拌发酵罐中最下面一档搅拌器离罐底距离一般C A.小于一个搅拌器直径的高度 B.大于一个小于两个搅拌器直径的高度 C.等于一个搅拌器直径的高度 D.等于两个 4、下列因素均可提高氧的传质速率，但与提高&.&无关的是：C A.提高通风量 B.提高搅拌转速 C.提高罐压 D.捉高高径比 5、通用式机械搅拌发酵罐中挡板的作用是A A.改变液流方叫，巾轴叫流改变为径向流 B.增加发酵罐罐壁的机械强度 C.改变液流方向，由径向流改变为轴向流 D.在没备维修时供维修人员攀登，起安全防护作用 6、在相同转速和桨叶直径等情况下比较，输出功率最大的搅拌器的叶型是B A.螺旋奖叶 B.涡轮平叶 C.涡轮弯叶 1）.涡轮箭叶 7、对于相同材料、尺寸和体积的发酵罐来说，其罐壁的厚度设计应该是：C
A.受内压的厚度大于受外压的厚度 B.受内压的厚度等于受外压的厚度 C.受内压的厚度小于受外压的厚度 I）.与受内压和外压无关 8、对于气升环流式反应器：C A.导流筒区的混合较还隙区好和溶氧较还隙区差 B.导流筒区的混合较还隙区差和溶氧较还隙区好 C.导流筒区的混合和溶氧均较还隙区好 D.导流筒区的混合和溶氧均较还隙区差 9、在设计啤酒发酵罐时，当发酵罐的工作压力为2kg/cm2时，则设计压力为B A. 2 kg/cm2 B. 2. 2 kg/cm2 C. 2. 5 kg/cm2 D. 3 kg/cm2 10、同样容积的啤酒发酵罐造价最便宜的是B A.锥形罐 B.联合罐 C?朝日罐 D.塔式罐 11、在塔式啤酒连续发酵中，酵母生长主要在八 A.底部稳定区域 B.小稳定区 C.搅动区 I).静止区 12、圆筒锥底啤洒发酵罐中发酵液的对流主要依靠：D A.搅拌 B.空气 C.温度变化 D.CO， 13、与啤酒发酵醪进行热交换时，圆筒锥底啤酒发酵罐的夹套内不宜采用的冷媒是：C A.乙二醇 B.乙醇 C.冷冻水 D.M
超氧化物歧化酶 超氧化物歧化酶，别名肝蛋白、奥谷蛋白，简称：SOD。SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。超氧化物歧化酶是1938年Marn等人首次从牛红血球中分离得到超氧化物歧化酶开始算起，人们对SOD的研究己有七十多年的历史。1969年McCord等重新发现这种蛋白，并且发现了它们的生物活性，弄清了它催化过氧阴离子发生歧化反应的性质，所以正式将其命名为超氧化物歧化酶。 SOD（超氧化物歧化酶）是国际上公认的具有人体垃圾“清道夫”、“抗衰王”、“美容骄子”之称，是对抗“百病之源”活性氧自由基最有力的物质，是近半个世纪以来社会科学界、医学界、生物界最举世瞩目的价值发现，它的研究与发展代表着生物医药的高科技技术发展的前沿，在科技成果及学术领域占据重要的国际地位。SOD（超氧化物歧化酶）被国家列入生物医药“国家十一五规划”重点项目。2011年是“国家十二五规划”的第一年，SOD行业将再次跻身国家当前优先发展的高科技产业化项目，标志着中国健康产业链SOD新兴行业的崛起, 使全人类迈入健康经济时代。利用超氧化物歧化酶（SOD）产业化建设，一方面可架构生物医药、保健食品、日用美容化妆品、化工化学、农业五大版块经济支柱的绿色产业链循环经济圈发展。另一方面打造SOD科技应用成果转化的孵化器平台引领生化医药美容化妆品食品等行业的新型健康原料的应用，有利于促进再生资源利用，产生巨大的社会效益和经济效益。 一、反应机理 超氧化物岐化酶,它催化如下的反应： 2O2-+2H+→H2O2+O2 O2-称为超氧阴离子自由基，是生物体多种生理反应中自然生成的中间产物。它是活性氧的一种，具有极强的氧化能力，是生物氧毒害的重要因素之一。 SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子，它通过上述反应可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢。尽管过氧化氢仍是对机体有害的活性氧，但体内的过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）会立即将其分解为完全无害的水。这样，三种酶便组成了一个完整的防氧化链条。 SOD属于金属蛋白酶，按照结合金属离子种类不同，该酶有以下三种：含铜与锌超氧化物歧化酶（Cu-ZnSOD ）、含锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD ）和含铁超氧化物歧化酶（Fe-SOD ）。三种SOD都催化超氧化物阴离子自由基，将之歧化为过氧化氢与氧气。 目前，人们认为自由基（也称游离基）与绝大部分疾病以及人体的衰老有关。所谓的自由基就是当机体进行代谢时，能夺去氧的一个电子，这样这个氧原子就变成自由基。自由基很不稳定，它要在身体组织细胞的分子中再夺取电子来使自己配对，当细胞分子推陈出新动一个电子后，它也变成自由基，又要去抢夺细胞膜或或细胞核分子中的电子，这样又称会产生新的自由基。如，超氧化物阴离子自由基、羟自由基、氢自由基和甲基自由基，等等。在细胞由于自由基非常活泼，化学反应性极强，参与一系列的连锁反应，能引起细胞生物膜上的脂质过氧化，破坏了膜的结构和功能。它能引起蛋白质变性和交联，使体内的许多酶及激素失去生物活性，机体的免疫能力、神经反射能力、运动能力等系统活力降低，同时还能破坏核酸结构和导致整个机体代谢失常等，最终使机体发生病变。因此，自
工程项目管理论文参考文献 的著录格式是否规范反映作者经验和治学态度，以下是搜集整理的工程项目管理论文参考文献，供大家阅读查看。 参考文献一： [1]江军学.推行电子招标投标的思考--在《电子招标投标办法》框架下的行业电子招标投标[J].建筑市场与招标投标.2014(01) [2]汪才华.招标投标制度中存在的深层次问题法律思考之三[J].招标与投标.2013(05) [3]朱平儿.我国招标投标制度下存在的一些问题和展望[J].建筑市场与招标投 标.2013(06) [4]汪才华.招标投标制度中存在的深层次问题法律思考之二[J].招标与投标.2013(04) [5]汪才华.招标投标制度中存在的深层次问题法律思考之一[J].招标与投标.2013(03) [6]刘鹏.江西水利工程招标投标将全面实行行贿犯罪档案查询制度[J].中国水 利.2013(17) [7]陈天昊.从《招标投标法实施条例》的颁布看政府采购救济制度的完善--以法国经验为借鉴[J].西部法学评论.2012(06) [8]谢丽荟.菲迪克条款的应用[J].交通世界(运输.车辆).2012(12) [9]姜磊.EPC总承包应该考虑的几个问题--菲迪克(FIDIC)合同条款中几个重要解读与分析[J].科技致富向导.2012(23) [10]徐烽.我国工程承发包中的交易费用与工程造价分析[J].合作经济与科技.2012(15) [11]张海义.菲迪克价格条款的原理及应用[J].科技视界.2012(21) [12]朱建元.中国电子化招标投标制度建设[J].建筑市场与招标投标.2012(02) [13]肖方.浅谈建筑工程项目招投标中的问题及对策[J].建筑设计管理.2011(09) [14]李俊华.实施建设行业上中下游联动管理推进招投标两大目标的有机结合--东莞建设工程招标投标制度创新的实践与思考[J].建筑市场与招标投标.2011(02) [15]王秋芳.对当前建筑市场招投标评标方法的探讨[J].建设监理.2010(03)
一?填空题（16分） 1.桥梁用水泥混凝土的主要力学指标是（）；路面混凝土的主耍力学指标是（）。 2?新拌混凝土工作性的含义包括（）、（）、（）、（）。 3?试验室配合比设计中，应采用三组不同w/c进行水泥混凝土强度检验。一组为计算\v/c, 其余两组应较计算w/c增减（）。 4?口前沥青混合料高温稳定性的试验方法主要有（）、（）。 5.我国现行规范采用（）、（）、（）指标表征沥青混合料的耐久性。 6.马歇尔模数是（）与（）的比值，该值可以间接的反映沥青混合料的（）能力。 7.无机结合料灰剂量的确定与路面结构层位和（）有关。 答案：1.抗压强度、抗折强度 2.流动性、可塑性、稳定性、易密性 3.0.5 4.车辙试验、马歇尔试验 5.空隙率、饱和度、残留稳定度 6?稳定度、流值、7.强度标准 二?名词解释（32分） 1?混凝土抗压强度标准值 2.砂率 3.水泥混凝土基准配合比 4.油石比 5.稳定度 6.沥青饱和度 7.动稳定度 8.偏差系数
答案: 1.混凝土抗压强度标准值：按照标准的方法制作和养护的边长为150価立方 体试件，在28天龄期，用标准试验方法测定的抗压强度总体分布中的一个值，强度低于该值的百分率不超过5%,即具有95%保证率的抗压强度。 2?砂率：水泥混凝土混合料屮砂的质量占砂石总质量Z比，以百分率表示。 3?水泥混凝土基准配合比：在初步配合比的基础上，对新拌混凝土的工作性加以试验验证，并经过反复调整得到的配合比。 4?油石比：沥青混合料中沥青质量与矿料质量的比例，以百分数表示。 5?稳定度：沥青混合料进行马歇尔试验时所能承受的最大荷载，以kn计。 6.沥青饱和度：压实沥青混合料试件内沥青部分的体积占矿料骨架以外的空 隙部分的百分率。 7?动稳定度：沥青混合料进行车辙试验时，变形进入稳定期后每产生lnrni 轮辙试验轮行走的次数，以次/価计。 8?偏差系数：一组数据的标准差与平均值的比值。 三?设计计算题(52分) 1.试设计某桥下部基础用混凝土的配合比。 ［设计资料］(1)已知混凝土设计强度为c20,无历史统计资料，o=5?0mpa。坍落度为 10?30mmo (2)组成材料水泥:32.5普通水泥,密度P c=3. 0 g/cm3； 砂:中砂,表观密度P s=2. 60g/cm3； 碎石：最大粒径为40mm,表观密度P z g=2.70g/cm3； 水：口來水。 ［设计要求］ (1)算初步配合比； (2)经试拌坍落度为10mm,采取措施为：增加5%水泥浆，工作性满足要求。问基准配合比
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广告学文科本科583 591 网络与新媒体文科本科585 593 历史学文科本科579 585 地理科学文科本科582 587 自然地理与资源环境文科本科578 582 人文地理与城乡规划文科本科579 587 地理信息科学文科本科577 579 心理学文科本科576 578 应用心理学文科本科579 586 工程管理文科本科581 588 房地产开发与管理文科本科577 580 工商管理文科本科582 592 市场营销文科本科579 586 会计学文科本科587 593 人力资源管理文科本科582 590 公共事业管理文科本科579 594 行政管理文科本科577 580 物流管理文科本科579 594 电子商务文科本科580 589 旅游管理类文科本科580 588 旅游管理文科本科578 586 会展经济与管理文科本科579 584 经济学理科本科598 607 金融学理科本科607 611 金融工程理科本科601 605 国际经济与贸易理科本科600 606 法学理科本科593 606 社会工作理科本科587 594
项目二超氧化物歧化酶的生产 超氧化物歧化酶（英语：Superoxide dismutase，简称SOD）是一种能够催化超氧化物通过歧化反应转化为氧气和过氧化氢的酶。它广泛存在于各类动物、植物、微生物中，是一种重要的抗氧化剂，保护暴露于氧气中的细胞。 SOD的概况： 1.超氧化物歧化酶（SOD）的概念： 超氧化物歧化酶是一种广泛存在于动物、植物、微生物中的金属酶，是生物体内抗氧化酶系中主要成员之一。 2.SOD的分类 按其结合的金属离子（即金属辅基的成分）可分为： （1）Fe-SOD（2）Mn-SOD（是SOD酶分子内所含金属离子Mn2+） （3）Cu-Zn-SOD（铜．锌超氧化物） 3.SOD的生产： 仪器、试剂和材料： -研钵，石英砂，烧杯（50mL），玻璃棒，pH计，冷冻离心机，离心管 -新鲜蒜瓣 -0.05mol/L磷酸缓冲溶液（pH7.8），氯仿-乙醇混合液（氯仿-无水乙醇3：5），丙酮（用前预冷至-10℃）。 操作步骤： 整个操作过程在0到5℃条件下进行。 （1）SOD酶的提取称取5g大蒜蒜瓣，加入石英研磨破碎细胞后，加入0.05mol/L的磷酸缓冲液（Ph7.8）15ml，继续研磨20min，使SOD酶充分溶解到缓冲液中，然后6000r/min冷冻离心15min，弃沉淀，取上清液。 （2）去除杂蛋白上清液中加入0.25倍体积的氯仿-乙醇混合液搅拌15min，6000r/min离心15min，弃去沉淀，得到的上清液即为粗酶液。 （3）SOD酶的沉淀分离粗酶液中加入等体积的冷丙酮，搅拌15min，6000/min离心15min，得到SOD酶沉淀。 （4）将沉淀溶入pH7.8，0.05mol/L的磷酸缓冲液5mL中，然后6000r/min离心15min，放弃沉淀，取上清液，用凝胶sephacylS-200进行纯化，然后超滤浓缩。 （5）用紫外分光光度计测定浓液的蛋白含量 （6）将浓缩冷冻干燥后即得成品。 4.SOD酶的检验： 原理：连苯三酚在碱性条件下，能迅速自氧化，释放出氧气，生成带色的中间产物。在自氧化过程的初始阶段，黄色中间产物的积累在滞后30~45s后就与时间成线性关系。中间产物在420nm处有强烈的光吸收，在有SOD存在时由于它能催化生成氧气与过氧化氢，从而阻止了中间物的积累，通过计算就可以求出SOD的活力。 所需溶液的配制： （1）pH值为8.30的50mol/LK2HPO4-KH2PO4缓冲溶液：25℃下96.5mL 1mol/L的LK2HPO4与3.5mL 1mol/L的KH2PO4混合后，用水稀释至2000mL。 （2）0.05mol/L连苯三酚溶液：称取3.15g连苯三酚用0.01mol/L盐酸溶液溶解并定容至500mL。酶活性的测定： （1）连苯三酚自氧化速率的测定
超氧化物歧化酶的现状研究进展(一) 关键词：超氧化物歧化酶;生理功能;特性;应用摘要:超氧化物歧化酶是生物体内清除超氧阴离子自由基的一种重要酶，具有重要的生理功能，在医药、食品、化妆品中有广泛的应用前景。现从分类、分布、结构、性质、催化机理、制备、应用等方面探讨了超氧化物歧化酶的基础研究进展。 关键词:超氧化物歧化酶;生理功能;特性;应用Advanceincurrentresearchofsuperoxidedismutase. Abstract:SuperoxideDismutase（SOD）isanimportantenzymeinorganism，whichcanremovesuperoxidefreeradical.Itiswide-lyusedinclinicaltreatment，food，andcosmeticindustryforitsimportantphysiologicfunction.Thisreviewpresentsabasicreseachoutline ofSOD，includingclassification，distribution，structure，property，thecatalysemechanism，preparationandapplication. Keywords:Superoxidedismutase;Physiologicfunction;Property;Application 1938年Mann和Keilin〔1〕首次从牛红细胞中分离出一种蓝色的含铜蛋白质（Hemocuprein），1969年Mccord及Fridovich〔2〕发现该蛋白有催化O2，发生歧化反应的功能，故将此酶命名为超氧化物歧化酶（SuperoxideDismutase，SOD，EC1.15.1.1）。该酶是体内一种重要的氧自由基清除剂，能够平衡机体的氧自由基，从而避免当体内超氧阴离子自由基浓度过高时引起的不良反应，同时SOD是一种很有用途的药用酶。有关SOD的研究受到国内外学者的广泛关注，涉及到化学、生物、医药、日用化工、食品诸领域，是一个热门研究课题。通过多年努力，在SOD的基础研究方面取得了巨大成果。目前，SOD临床应用主要集中在抗炎症方面（以类风湿以及放射治疗后引起的炎症病人为主），此外对某些自身免疫性疾病（如红斑狼疮、皮肌炎）、肺气肿、抗癌和氧中毒等都有一定疗效;在食品工业主要用作食品添加剂和重要的功能性基料;在其它方面也有相关应用。现就有关SOD的基础研究进展及应用方面作以简述。 1SOD的种类与分布 SOD是一类清除自由基的蛋白酶，对需氧生物的生存起着重要的作用，是生物体防御氧毒性的关键。迄今为止，科学家已从细菌、真菌、原生动物、藻类、昆虫、鱼类、植物和哺乳动物等生物体内都分离得到了SOD。基于金属辅基不同，这些SOD至少可以分为Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD三种类型〔3〕。 表1不同种类型的SOD分布（略） 一般来说，Fe-SOD是被认为存在于较原始的生物类群中的一种SOD类型;Mn-SOD是在Fe-SOD 基础上进化而来的一种蛋白类型，由于任何来源的Mn-SOD和Fe-SOD的一级结构同源性都很高，均不同于Cu/Zn-SOD的序列，可见它们来自同一个祖先;Cu/Zn-SOD分布最广，是一种真核生物酶，广泛存在于动物的血、肝和菠菜叶、刺梨等生物体中。 除以上三种SOD外，Sa-OukKang等人最近又从链霉菌Streptomycesspp.和S.coelicotor中发现了两种新的SOD，一种是含镍酶即Ni-SOD，另一种是含铁和锌的酶即Fe/ZnSOD，它们均为四聚体，表观分子量分别是13KD和22KD，它们之间没有免疫交叉反应〔4～6〕。 2SOD的催化机理 超氧化物歧化酶作用的底物是超氧阴离子自由基（O·-2），它既带一个负电荷，又只有一个未成对的电子。在不同条件下，O·-2既可作还原剂变成O2，又可作氧化剂变成H2O2，H2O2又在过氧氢酶（Catalase，CAT）的作用下，生成H2O和O2，由此可见，有毒性的O·-2在H2O2又在过氧氢酶（Catalase，CAT）的作用下，生成H2O和O2，由此可见，有毒性的O·-2在SOD和CAT共同作用下，变成了无毒的H2O和O2。其作用机理如下:SOD+O·-2SOD-+O2SOD-+O·-2+2H+SOD+H2O22O·-2+2H+SODO2+H2O2H2O2CATH2O+O2
2020年广东广州大学工程管理硕士(MEM)招 生简章 广州大学于2000年合并组建，有着90多年的办学传统。是广东省高水平大学重点学科建设项目高校、“冲一流”重点学科建设高校，广州市高水平大学建设高校。 学校学科门类齐全、综合性强，拥有8个一级学科博士授权点和博士专业学位授权点，3个博士后科研流动站，31个一级学科硕士授权点，19个硕士专业学位授权点。坚持开放办学，聚焦服务粤港澳大湾区建设和“一带一路”倡议，加快国际化办学进程，与31个国家和地区的200所大学、科研院所建立了合作关系。 广州大学工商管理学院 Values：立德明理、精工兴商 Vision：打造数字化时代有责任的创新型管理学院 Mission：培养数字化时代有责任的管理 Characteristics：服务广州创新与发展、服务粤港澳大湾区高质量发展有责任的管理学院 广州大学工商管理学院组建成立于2013年，前身可追溯到上世纪八十年代的管理系。经过近40年的发展，已经建立了本科-硕士-博士人才培养体系。学院秉承“立德明理，精工兴商”的价值追求，拥有工商管理一级学科博士点和硕士点、工商管理(MBA)、工程管理硕士(MEM)专业硕士学位点。拥有众创空间1个、精品资
源课程1门、省级特色专业及重点专业各1个、省级综合改革试点专业2个、省级人才培养模式创新实验区2个、省级教学团队4个、省级大学生实践教学基地3个、省级实验教学示范中心1个。 学院师资力量雄厚，拥有专职教师100人，其中教授23人，博导21人，具有海外知名大学博士学位及海外经历的教师达70余人。 学院与中国建设银行、中金公司、中国移动、阿里巴巴、京东、唯品会、碧桂园、万科、恒大、中国邮政、立白集团、南方电网、广铁集团、哈工大数据集团、清华斯维尔、顺丰集团、嘉诚国际物流等100余家知名企业建立了密切的合作关系。 学院正通过高水平师资队伍建设、人才培养模式创新、科学研究国际合作、社会服务等改革措施，以培养数字化时代有责任的创新型高级管理人才为使命，紧密结合国家、粤港澳大湾区建设与发展对管理人才培养的需求，按照国际精英商学院(AACSB)的标准，朝着“国内一流，国际知名”管理学院的建设目标迈进。 MEM教育 办学定位 立足广州，面向粤港澳大湾区，辐射全国及“一带一路”沿线国家，面向房地产开发、工程建设、城市管理、物流服务等行业，培养德才兼备、家国情怀、视野开阔、能力发展性强、具有团队精神和社会责任感的高素质创新型高级管理人才，满足企业开拓国内国际市场、促进地方社会经济高质量发展的需要。 培养目标 培养具备正确思想政治和社会责任观念的适应现代工程管理
广州大学2013-2014 学年第二学期考试卷 课程基础工程考试形式（闭卷，考试） 学号 一、填空题（每空2分，共20分）： 1. 是指建筑物最底下的构件或部分结构，其功能是将上部结构所承担的荷载传递到支撑它们的岩土层上。 2. 持力层以下，若存在承载力明显低于持力层的土层，称为。 3. 地基变形引起基础沉降可以分为、沉降差、倾斜和局部倾斜四类。 4. 指天然地基在地基处理过程中部分土体得到增强，或被置换，或在天然地基中设置加筋材料，加固区是由基体和增强体两部分组成的人工地基。 5.地基处理的法就是在拟建造建筑物的地基上，预先施加荷载（一般为堆土、堆土等），使地基产生相应的压缩固结，然后将这些荷载卸除再进行建筑物的施工。 6. 是一种很重要的地区性特殊土类，其应是土中粘粒成分主要由亲水性款矿物组成，同时具有显著的吸水膨胀和失水收缩两种变形特性的粘性土。 7.一般在地震过程中，当波到达时，地表面的振动最为强烈。 8.需要进行处理的地基土主要包括等（注：至少填入4种）。 9.基础与地基共同作用除了满足静力平衡条件外，还必须满足条件。 10.摩擦桩是指。
二、分析论述题：（共3道，每题10分，共30分）： 1.减轻建筑物不均匀沉降的结构措施有哪些？ 2.淤泥和淤泥质土的特点是什么？ 3.如何用等值梁法计算支点力、桩墙插入坑底深度？（需配图示意） 三、某柱下方形底面钢筋混凝土独立基础，底面埋深1.5m，上部结构传至基础上的竖向荷载标准值为480kN，无偏心作用。地层条件为：地表至地表下1.5m范围内为填土，重度17kN/m3；地表下1.5m以下为粘土，重度18.5 kN/m3，f ak=130kPa（承载力修正系 数η b =0.0 ，η d =1.0）。试设计基础底面尺寸（即? ?? = ?b l）。（本题10分） 四、某建筑物墙厚370mm，墙下采用钢筋混凝土条形基础，基础埋深1.5m，基础宽2m，上部结构传至基础上的竖向荷载标准值为：F k=200kN，M k=16kN.m。试计算基础横向配筋的弯矩设计值（假设按计算配筋）（注：基本组合分项系数取1.35）。（本题10分）
问答题 1、画出机械搅拌式生物反应器的结构简图,标出各部件的名称,并分别阐述其作用。 a)主要部件：1.罐体，盛发酵液，发酵场所；2.搅拌器：混合液体和传质；3.挡板： 防治液面中央形成漩涡流动，增强其湍动和溶氧传质；4.轴封：防止染菌和泄露； 5.空气分布器：分布空气； 6.消泡装置：防止发酵液随气泡外溢 7.夹套：冷却 图见p23 2、根据气液传质理论，提出机械搅拌通风发酵罐增加氧传递速率的措施。★ 答：由OTR=K l a(C＊-C)可知增大K l a或增大(C＊-C)来增加氧传递速率 增大(C＊-C)的方法：1.提高罐压2.富集氧气 由K l a=K(Pg/V L)^0.4Vs n^0.5可知增大K l a的方法：1.提高转速或增大搅拌叶轮直径，从而提高搅拌功率Pg；2.提高通气量；3.提高发酵罐的高径比，对提高溶氧速率和降低单位溶解氧功耗均有利，所以在设计时，应尽可能选择较大的高径比。 3、气升式发酵罐的工作原理。 工作原理：把无菌空气通过喷嘴或喷孔射进发酵液中，通过气液混合物的湍流作用而使空气泡分割细碎，同时由于形成的气液混合物密度降低，故向上运动，而含气率小的发酵液则下沉，形成循环流动，实现混合与溶氧传质 4、机械搅拌自吸式的工作原理。 工作原理：自吸式机械搅拌发酵罐的主要构件是吸气搅拌叶轮及导轮，简称转子及定子，当转子转动时，其框内液体被甩出而形成真空而吸入空气。通过导向叶轮而使气液均匀分布甩出，并使空气在循环的发酵液中分裂成细微的气泡，在湍流状态下混合、湍动和扩散 5、判断下图为何种生物反应器并标明图中6的名称，以及请简述该生物反应器工作原理。
文氏管自吸式发酵罐见p48 1-排管2-罐体3-换热夹套4-循环泵5-压力表6-文氏管 工作原理：用泵使发酵液通过文氏管吸气装置，由于液体在文氏管的收缩段中流速增加，形成真空而将空气吸入，并使气泡分散，与液体均匀混合，实现溶氧传质 6、下图为一啤酒发酵生产系统，请指出图中1、3、5各为何设备，并简述该生产工艺的特点。 1-薄板换热器3-酵母离心机5-朝日罐 特点：1.三种设备互相组合，解决了前、后发酵温度控制和酵母浓度的控制问题，加速了啤酒的成熟。 2.使用酵母离心机分离发酵液的酵母，可以解决酵母沉淀慢的缺点 3.利用凝聚性弱的酵母进行发酵，增加酵母与发酵液接触时间，促进发酵液中乙醛和双乙酰的还原，减少其含量。
超氧化物酶（SOD）的生产 SOD（超氧化物歧化酶）是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, EC1.15.1.1, SOD）是1938 年Marn等人首次从牛红血球中分离得到超氧化物歧化酶开始算起，人们对SOD 的研究己有七十多年的历史。1969年McCord等重新发现这种蛋白，并且发现了它们的生物活性，弄清了它催化过氧阴离子发生歧化反应的性质，所以正式将其命名为超氧化物歧化酶。 它催化如下的反应：202+2H+→H2O2+O2 O2-称为超氧阴离子自由基，是生物体多种生理反应中自然生成的中间产物。它是活性氧的一种，具有极强的氧化能力，是生物氧毒害的重要因素之一。SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子，它通过上述反应可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢。尽管过氧化氢仍是对机体有害的活性氧，但体内6性极强的过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)会立即将其分解为完全无害 的水。这样，三种酶便组成了一个完整的防氧链条。 一、实验目的 a．掌握有机溶剂沉淀法的原理和基本操作。 b．掌握SOD酶提取分离的一般步骤。 二、实验原理 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是一种具有抗氧化、抗衰老、抗辐射和消炎作用的药用酶。它可催化超氧负离子(O2-)进行歧化反应，生成氧和过氧化氢。大蒜蒜瓣和悬浮培养的大蒜细胞中含有较丰富的SOD，通过组织或细胞破碎后，可用pH7.8的磷酸缓冲溶液提取出来。由于SOD不溶于丙酮，可用丙酮将其沉淀析出。 有机溶剂沉淀的原理是有机溶剂能降低水溶液的介电常数，使蛋白质分子之间的静电引力增大。同时，有机溶剂的亲水性比溶质分子的亲水性强，它会抢夺本来与亲水溶质结合的自由水，破坏其表面的水化膜，导致溶质分子之间的相互作用增大而发生聚集，从而沉淀析出。 三、实验器材 研钵，石英纱，烧杯(50ml)，玻璃棒，pH计，冷冻离心机，离心管。 四、试剂和材料 新鲜蒜瓣，0.05mol/L磷酸缓冲溶液(pH7.8)，氯仿－乙醇混合液(氯仿：无水乙醇＝3:5)，丙酮(用前预冷至－10℃)。
广州大学外事工作(港澳台工作)管理的规定 为了适应学校对外学术交流与合作的发展，根据中央和省、市有关文件精神，结合我校实际情况，现就我校外事工作及港澳台工作管理中的若干问题作如下规定，请各单位遵照执行。 一、关于与外国使（领）馆和官方、半官方机构及敏感民间团体交往的规定 1、外国使（领）馆等机构及其官员要求到校参观访问，单独或联合在校内、校外举办演出、展览、报告会、研讨会、座谈会、调查研究或进行其他活动（包括礼仪庆典或租借校内各种场所、器材），邀请部门事前均须向国际交流与合作处提交书面申请，由国际交流与合作处统一向上级报告。未经同意，不得擅自对外表态或接待。 2、未经国际交流与合作处及上级主管部门同意，不得擅自向外国使（领）馆及其代表机构收取或借阅书刊、视听资料、宣传资料，也不得擅自邀请外国使（领）馆人员来访，出席重大礼仪庆典、联谊、联合举办活动等。 3、外国使（领）馆官员或其家属要求到校任职、兼职或学习，均须报国际交流与合作处批准后方可接收。 4、外国使（领）馆等机构邀请我校人员出席各类庆祝活动、招待会、演讲会、研讨会、座谈会或到他们的公寓座客，须事前向国际交流与合作处报告。经批准出席上述活动的人员，一定要注意内外有别，严守国家秘密，维护国家和民族的尊严；如果对方要求填写各类
调查表格或提供社会调查资料时，需慎重处理或婉言拒绝。 5、各单位不得擅自直接向外国使（领）馆出具各类正式证明文件或介绍信（此类证明文件一般应经主管部门审核后由学校或公证机关出具）。未经报批同意，不得向其提供非公开发表材料，也不得提供印刷、出版、借阅等服务。 6、港、澳、台地区事宜参照上述规定执行。 二、关于邀请或接待外国、港、澳、台记者采访的规定 国家规定，外国、港、澳、台记者到国内采访，必须事前办妥有关手续，并凭我国有关机关签发的有效采访证才能进行采访活动。校党委宣传部、国际交流与合作处归口主管港、澳、台记者及外国记者来校采访，统战部和保卫处予以协助。各单位如遇此类事情，应主动请示学校归口管理的部门，对未经许可的任何采访形式均应婉言谢绝。 三、关于因公出国，赴港、澳、台的审批的规定 1、在符合国家及省、市规定的条件下，学校鼓励教职工积极开展对外学术交流与合作活动，以促进教学、科研水平的提高。在同等条件下，优先考虑学术带头人、重点培训教师、中青年学术骨干及留学返校教师的出访申请。已办理离退休手续的人员原则上不作为公派人员派出。 2、上级有关文件规定，因公（含短期合作研究、讲学、进修、交流或参加国际会议等）出国及赴港、澳、台人员的申报审批权在学校。学校国际交流与合作处受理各类因公临时出访申报手续。国
基础工程复习提纲 题型：概念解释20、分析论述题40、计算题40 1.概述： 地基与基础 2.浅基础： 沉降量、沉降差局部倾斜、倾斜；持力层、软弱下卧层； 基础埋置深度确定；地基承载力确定； 条形基础、柱下独立基础中心荷载作用下及偏心荷载（注意弯矩、水平力在计算中的处理）作用下基础底面尺寸的确定、软弱下卧层验算 3.连续基础 简述文克勒地基模型；补偿基础概念；上部结构、基础、地基共同工作的概念。 4.桩 端承型桩、摩擦型桩、挤土桩、 什么是负摩阻力、中性点？在哪些情况下会产生桩侧负摩阻力？工程中如何处理？ 群桩效应；承台在群桩基础中的作用。 掌握单桩竖向承载力特征值、桩数、布桩及承台尺寸设计，桩顶荷载、桩顶净反力的计算 5.地基处理 各种地基处理方法的机理及其适用土层条件； 换土垫层的设计（同软弱下卧层验算）； 降水预压和真空预压不会引起土体破坏的原因； 堆载预压则可能由于速度太快而造成地基破坏的原因； 6.基坑 了解重力式挡墙的设计原理 熟练悬臂式板桩墙支护的设计计算 对于单支点支护结构，试分析随着入土深度的增加，板桩墙上的土压力分布的变化规律及其对应的计算方法； 7特殊土 特殊土、自重湿陷性黄土、非自重湿陷性黄土、膨胀土的膨胀力； 膨胀土的物理力学性质及其作为地基时会引起的危害； 8.动力基础 砂土液化等概念
广州大学2010-2011 学年第 2 学期考试卷 课程基础工程考试形式（闭卷，考试） 一、概念解释（共20分，每小题5分） 1.浅基础 通常把埋置深度不大（小于或相当于基础底面宽度，一般认为小于5m）的基础称为浅基础。 2.摩擦型桩基础 摩擦型桩是指桩顶竖向荷载由桩侧阻力和桩端阻力共同承担，但桩侧阻力分担荷载较多的桩；由摩擦型桩组成的基础称为摩擦型桩桩基础。 3.温克尔地基模型 温克尔土耳其模型由捷克工程师E. 温克尔（）于1867提出，其假设地基任意一点所受的压力强度p 与该点的地基沉降量s成正比即，式中比例系数k为基床反力系数（或简称基床系数），其单位为3。 4.上部结构、基础、地基的共同作用 是指上部结构、基础与地基相互接触组成一个相互作用的完整体系，三者连接部位应同时满足静力平衡、变形协调与位移连续条件，其相互作用与三者之间的相对刚度有关，基础的挠曲特征、基底反力及截面内力分布是三者共同作用的结果。 二、简答题（共20分，每小题10分） 1.桩基础设计的主要内容？（按设计步骤写出） （1）必要的资料准备：如建筑物的类型及其规模、岩土工程勘察报告、施工机具和技术条件等； （2）选定桩型、截面和桩长的选择并确定单桩竖向及水平承载力； （3）桩平面布置：指桩数确定及平面上的布置； （4）承载力验算：单桩承载力验算、桩基软弱下卧层承载力验算、桩基沉降验算、桩基负摩阻力验算等 （5）承台设计：包括承台尺寸、厚度和构造设计，应满足抗冲切、抗弯、抗剪、抗裂等要求； （6）桩身结构设计及桩的质量检验； （7）绘制施工图。 2.地基与基础的震害有那些？ 地基的震害主要有：饱和砂土和粉土的振动液化、地震滑坡和地裂、土的震陷等；由此造成地基强度不足 三、某基坑深8m，基坑采用排桩+单道内支撑的结构形式支护，设计资料如图所示。试用等值梁法计算： 1.墙前土压力分布与墙后土压力分布（需绘图示意）；（墙前墙后分别采用郎肯被动土压力和郎肯主动土压力计算模式）（5分） 2.沿墙走向每米墙长范围所受到的支撑力大小（5分）。（共10分） kPa
超氧化物歧化酶的功能与应用 安徽工程大学生化院食品101 张云学号：3100401114 摘要：超氧化物歧化酶Orgotein (Superoxide Dismutase, SOD)，别名肝蛋白、奥谷蛋白，简称：SOD。它是一种新型酶制剂。它在生物界的分布极广，几乎从动物到植物，甚至从人到单细胞生物，都有它的存在。SOD被视为生命科技中最具神奇魔力的酶、人体内的垃圾清道夫。SOD是氧自由基的自然天敌，是机体内氧自由基的头号杀手，是生命健康之本。耐高温SOD是国家“十五”、“十一五”863计划重大课题项目。 关键字：SOD 原理人体作用耐高温SOD 应用 SOD是Super Oxide Dismutase 缩写，中文名称超氧化物歧化酶，是生物体内重要的抗氧化酶，广泛分布于各种生物体内，如动物，植物，微生物等。SOD具有特殊的生理活性，是生物体内清除自由基的首要物质。SOD在生物体内的水平高低意味着衰老与死亡的直观指标；现已证实，由氧自由基引发的疾病多达60多种。它可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞，复原因自由基造成的对细胞伤害。由于现代生活压力，环境污染，各种辐射和超量运动都会造成氧自由基大量形成；因此，生物抗氧化机制中SOD 的地位越来越重要！ SOD类型：超氧化物歧化酶按其所含金属辅基不同可分为三种，第一种是含铜（Cu）锌（Zn）金属辅基的称（Cu.Zn—SOD），最为常见的一种酶，呈绿色，主要存在于机体细胞浆中；第二种是是含锰（Mn）金属辅基的称（Mn—SOD），呈紫色，存在于真核细胞的线粒体和原核细胞内；第三种是含铁（Fe）金属辅基的称（Fe—SOD），呈黄褐色，存在于原核细胞中。 1.1催化反应原理 超氧化物岐化酶（SuperoxideDismutase），简称SOD，ECl.15.1.1，它催化如下的反应：2O2-+2H+→H2O2+O2 O2-称为超氧阴离子自由基，是生物体多种生理反应中自然生成的中间产物。它是活性氧的一种，具有极强的氧化能力，是生物氧毒害的重要因素之一。 SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子，它通过上述反应可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢。尽管过氧化氢仍是对机体有害的活性氧，但体内的过氧化氢酶（CA T）和过氧化物酶（POD）会立即将其分解为完全无害的水。这样，三种酶便组成了一个完整的防氧化链条。 功效认定超氧物歧化酶(Superoxide Dismutase简称SOD)是一种新型酶制剂,它在生物界的分布极广,几乎从人到细胞,从动物到植物,都有它的存在。原多从牛血中提取，1997年欧盟禁止使用动物中提取的SOD。 1.2功效认定 SOD是超氧化物歧化酶(superoxidedismutase)的英文缩写,是一种含有金属元素的活性蛋白酶,是目前生物学、医学和生命科学领域中世界级的高、尖、精课题。超氧化物歧化酶（SOD）目前世界范围内的开发，大都从动物血里提取，不但代价昂贵，而且动物性SOD 的排他性、不易常温保存、艾滋病等血液病毒的交叉感染及其它潜在危险，所以国际卫生组织呼吁：立刻停止动物性SOD的使用。SOD是中国卫生部批准的具有抗衰老、免疫调节、调节血脂、抗辐射、美容功能的物质之一，法定编号为ECl.15.1.1；CAS[905489]1。 世界各国对“超氧化物歧化酶”的作用认定：
广州大学2017—2018 学年第一学期考试卷 课程软件工程导论考试形式（闭卷，考试） 一、单选题（每小题1分，共25分，答案写在下表中） 1.软件工程方法的提出起源于软件危机，而其目的应该是最终解决软件的（D）问题 A.产生危机 B.质量保证 C.开发效率 D.生产工程化 2.瀑布模型将软件生命周期归纳为3个时期，即计划期、开发期和运行期。下列（D ）不属于开发期内的工作。 A.总体设计 B.详细设计 C.程序设计
D.维护 3.结构化方法将软件生命周期分为计划、开发和运行3个时期，下列任务中（B）属于计划时期的任务。 A.需求分析 B.问题定义 C.总体设计 D.编码 4.可行性研究要进行一次（C）需求分析。 A.详细的 B.全面的 C.简化的、压缩的 D.彻底的 5.经济可行性研究的范围包括（C）。 A.资源有效性 B.管理制度 C.效益分析 D.开发风险 6.可行性分析是在系统开发的早期所做的一项重要的论证工作，它是决定该系统是否开发的决策依据，因必须给出（B）的回答。 A.确定 B.行或不行 C.正确 D.无二义 7.产生软件维护的副作用，是指（C ）。 A.开发时的错误 B.隐含的错误 C.因修改软件而造成的错误 D.运行时错误操作 8.软件需求分析阶段的工作，可以分为4个方面：需求获取、需求分析、编写需求规格说明书以及（B）。 A.用户 B.需求评审 C.总结 D.都不对
9.软件开发的结构化分析方法，常用的描述软件工程需求的工具是（C） A.业务流程图、处理说明 B.软件流程图、模块说明 C.数据流程图、数据字典 D.系统流程图、程序编码 10.数据流图用于抽象描述一个软件的逻辑模型，数据流图由以写特定的图符构成。下列图符名标识的图符不属于数据流图合法图符的是（A） A.控制流 B.加工 C.数据存储 D.数据流 11.软件开发的结构生命周期法的基本假定是认为软件需求能做到（C） A.严格定义 B.初步定义 C.早期冻结 D.动态改变 软件需求经过分析阶段后，通过软件需求说明书表示出来，后面的开发工作以此为基础进行，即假定软件需求确定后一般不再改变，即“早期冻结”。 12.在结构化方法中，软件功能分解属于软件开发中的（C）阶段 A.详细设计 B.需求分析 C.总体设计 D.编程调试 13.概要设计的结果是提供一份（A） A.模块说明书 B.框图 C.程序 D.数据流图 14.耦合是软件各个模块间连接的一种度量。一组模块都访问同一数据结构应属于（B）方式 A.内容耦合 B.公共耦合 C.控制耦合 D.数据耦合 解释：耦合分为以下几种，按照耦合度由高到低排列是：
（1）项目融资过程中有哪些主要参与者，各自的作用。（书本P18） 1.项目的直接主办人 2.项目的实际投资者——真正的借款人 （1）给项目公司提供一定的股本资金。（2）提供信用支持。 3. 贷款银行—项目融资债务资金来源的主要提供者 4. 项目产品的购买者或项目设施的使用者——参与者之一 作用：提供信用保证 5.项目建设的工程公司或承包公司 （1）资金情况（2）工程技术能力（3）以往经营历史记录 6. 项目设备、能源及原材料供应者 可以：延期付款、长期优惠价格、低息出口信贷 7.项目融资顾问 可聘请：投资银行、财务公司、商业银行中融资部门 8.法律和税务顾问 起草法律文件和把关 检查项目安排是否合法 9.有关政府机构 作用：微观—土地、基础设施、能源、特许权、降低风险、担保 宏观—良好投资环境 （2）一般项目风险的分担原则，各类风险的规避措施。（书本P207）
（3）怎样理解“完工风险”是项目融资中的核心风险？（4）怎样理解“商业完工标准”在项目融资中的重要性？
（5）BOT项目在应用中一般会有什么问题存在？（书本P151） 1.可能增加融资的机会成本 2.可能导致大量税收的流失 3.可能造成设施的掠夺性经营 4. 风险分摊的不对称性问题 （6）“无论提货与否均需付款”及“提货与付款”这两种协议有什么异同？“无论提货与否均需付款”协议是长期的、无条件的供销协议。 “提货与付款合同”协议是指买方在取得货物后，买方才支付某一最低数量的产品或劳务的金额给卖方。 共同点：两个协议是在法律上体现的是项目买方与卖方之间的商业合同关系，实质上是由项目买方对项目融资提供的一种担保。 异同点：“无论提货与否均需付款”协议是不管是否提货都是需要付款的，而“提货与付款合同”是只需在买方取得货物后，才支付金额给卖方。 （7）完工担保、资金缺额担保可以起到什么作用。（课本217页） 完工担保的作用： A、是项目融资结构中最主要的担保条件。 B、项目完工担保人对贷款银行承担着全面追索的经济责任。 资金缺额担保的作用： A、保证项目正常运行必需的最低现金流量。 B、投资者违约时，保护银行利益。 （8）特许权协议的作用。(来自PPT) 是BOT项目的最高法律文件，是整个项目得以融资、建设和经营的基础和核心，是主合同，决定了项目的基本结构。