Tianjin Med J熏Mar2010熏Vol38No3
足够的氧与营养供应是细胞新陈代谢的基础，也是维持内环境稳态的前提。氧分压的改变会导致一系列疾病如类风湿关节炎（r heumatoid arthritis，RA）病理学上的改变。组织缺氧可引起细胞功能障碍并最终导致细胞死亡。组织适应缺氧的一个具有特征性的信号传递因子是低氧诱导因子-1（h ypoxia-inducible factor-1，HIF-1）。HIF-1作为一种调节细胞氧平衡和低氧反应基因表达的核转录因子，在低氧条件下表达增加。RA关节腔为缺氧微环境。近年研究表明，HIF-1在RA关节滑膜中的表达增加与RA的发生发展密切相关，被认为是其发病中的主要因素，且成为RA的一个潜在治疗靶点[1]。现对HIF-1的生物学功能及其在RA发病机制中的作用综述如下。
1HIF-1概述
1.1HIF-1的结构HIF-1是1992年Semenza在低氧肝癌细胞提取物中发现的一种核转录因子[2]，是由一个α亚基（HIF-1α）和一个β亚基（HIF-1β）组成的异二聚体。两个亚基均属于碱性-螺旋-环-螺旋（basic-h elix-l oop-h elix，bHLH）/PAS蛋白家族的成员，人类HIF-1α基因定位于14号染色体（14q21~24），其cDNA全长3720bp，编码826个氨基酸。HIF-1α氨基端含有bHLH（aa17~71）和PAS域（aa 85~298），这对α和β亚基的聚合是必需的，羧基端有两个反式激活域（transactivation domains，TAD），其中近N端的为NTAD（aa531~575），近C端的为CTAD（aa786~826），前者为激活转录所必需，后者发挥精细调节作用。在PAS与TAD 之间有一氧依赖降解域（oxygen dependent degradation domain，ODDD，aa401~603），包含有NTAD，使HIF-1α在常氧张力下易于降解，在ODD中还包含2个PEST（脯氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸）样基序（aa499~518和581~600），使之更不稳定。HIF-1β也被称为芳香烃受体核转位子（aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator，ARNT）。
apy of metastasizing cutaneous squamous cell carcinoma in a patient with severe recessive dystrophic epidermolysis bullosa[J].Dermatol?ogy,2009,219(1):80-83.
[10]Allegra CJ,Jessup JM,Somerfield MR,et al.American society of clinical oncology provisional clinical opinion:testing for KRAS gene mutations in patients with metastatic colorectal carcinoma to predict response to anti-epidermal growth factor receptor monoclonal anti?body therapy[J].J Clin Oncol,2009,27(12):2091-2096. [11]Wagner JD,Evdokimow DZ,Weisberger E,et al.Sentinel node biop?sy for high-risk nonmelanoma cutaneous malignancy[J].Arch Der?matol,2004,140(1):75-79.
[12]Rokunohe A,Nakano H,Aizu T,et al.Significance of sentinel node biopsy in the management of squamous cell carcinoma arising from recessive dystrophic epidermolysis bullosa[J].J Dermatol,2008,35 (6):336-340.
[13]Arbiser JL,Fan CY,Su X,et al.Involvement of p53and p16tumor suppressor genes in recessive dystrophic epidermolysis bullosa-as?sociated squamous cell carcinoma[J].J Invest Dermatol,2004,123 (4):788-790.
[14]Kivisaari AK,Kallajoki M,Mirtti T,et al.Transformation-specific matrix metalloproteinases(MMP)-7and MMP-13are expressed by tumour cells in epidermolysis bullosa-associated squamous cell car?
cinomas[J].Br J Dermatol,2008,158(4):778-785. [15]Mallipeddi R,Wessagowit V,South AP,et al.Reduced expression of insulin-like growth factor-binding protein-3(IGFBP-3)in Squa?mous cell carcinoma complicating recessive dystrophic epidermoly?sis bullosa[J].J Invest Dermatol,2004,122(5):1302-1309. [16]Waterman EA,Sakai N,Nguyen NT,et al.A laminin-collagen com?plex drives human epidermal carcinogenesis through phosphoinosi?tol-3-kinase activation[J].Cancer Res,2007,67(9):4264-4270.
[17]Martins VL,Vyas JJ,Chen M,et al.Increased invasive behaviour in cutaneous squamous cell carcinoma with loss of basement-mem?brane type VII collagen[J].J Cell Sci,2009,122(Pt11):1788-1799.
[18]Ortiz-Urda S,Garcia J,Green CL,et al.TypeⅦcollagen is re?quired for Ras-driven human epidermal tumorigenesis[J].Science, 2005,307(5716):1773-1776.
[19]Pourreyron C,Cox G,Mao X,et al.Patients with recessive dystroph?ic epidermolysis bullosa develop squamous-cell carcinoma regard?less of typeⅦcollagen expression[J].J Invest Dermatol,2007,127 (10):2438-2444.
（2009-05-21收稿2009-12-22修回）
（本文编辑李淑杰）
低氧诱导因子-1与类风湿关节炎*
王险峰王雯陈森洲△
关键词细胞低氧关节炎,类风湿新生血管化,病理性细胞凋亡糖酵解综述
*广西科学基金资助项目（项目编号：0575106）
作者单位：541004桂林医学院微生物学与免疫学教研室
△审校者
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天津医药2010年3月第38卷第3期
1.2HIF-1的表达与活性调节HIF-1的两个亚基中，β亚基为组成性表达，α亚基的表达严格受到细胞氧浓度调节，
它既是HIF-1的调节亚基又是活性亚基，其蛋白稳定性和转
录活性均受细胞内氧浓度调节，因而HIF-1的生物活性由α
亚基决定。常氧状态下，HIF-1α出现在胞浆中，在脯氨酰羟
化酶（PHD）-1，-2，-3作用下，分子中第402位和564位的
脯氨酸残基被羟基化，羟基化的HIF-1α与可被作为泛素连
接酶E3复合体一部分的肿瘤抑制因子（product of von Hipple-Lindau disease，pVHL）中的β域结合，从而引起泛素化降解。故常氧状态下HIF-1α的半衰期不到10min。可以
说HIF-1α的泛素化是其羟基化后的一系列后续过程，且是
进一步降解的识别信号。PHD的羟基化需要有O2、Fe2+及酮戊二酸等的参与才能实现，因此该过程是氧依赖性的。铁离子螯合剂CoCl2由于结合了羟化反应所需的铁离子，可使HIF-1α在常氧下稳定表达[3]。细胞处于低氧状态时，脯氨酸羟化酶被抑制，使HIF-1α稳定表达并从胞浆转移至胞核，其表达量呈指数级大量增加[4]。同时HIF-1β从胞浆转移到核，两者聚合成HIF-1分子而发挥核转录因子作用。研究表明，氧浓度<6%时，HIF-1α含量呈指数级上升，氧浓度<0.5%时，HIF-1α含量达最高峰。在肿瘤及慢性缺血性疾病的组织中，HIF-1α往往过度表达。其过高表达与恶性肿瘤的发生、浸润、转移及预后等密切相关[5]。体外试验已证实，抑制HIF-1α基因的表达能有效抑制肿瘤的生长[6]。
HIF-1靶基因的启动子或增强子上都含有一个核心序列为5′-G/ACGTG-3′的低氧应答元件（hypoxia response element，HRE），HIF-1通过与HRE结合而诱导靶基因表达，进而调节缺氧组织血管新生和重构、细胞的增殖存活、能量代谢及铁转运等。目前认为低氧环境对HIF-1α表达量的调节并不取决于其mRNA水平，而取决于HIF-1α蛋白翻译后水平，即通过增加HIF-1α蛋白稳定性，抑制其降解来实现。最近，Gong等[7]发现，线粒体中的电子传递链对调节缺氧细胞HIF-1α表达起重要作用。电子传递链复合体Ⅰ、Ⅲ、郁的抑制剂能显著减少多种肿瘤细胞中HIF-1α的含量。同时，HIF-1α不仅由氧浓度调节，多种细胞及生长因子在常氧下也能增强HIF-1α蛋白稳定性及靶基因的表达。这些因子包括白细胞介素1β（IL-1β），肿瘤坏死因子（TNF）α、β，血小板源性生长因子（PDGF）和胰岛素样生长因子（IGF）等，它们均可上调HIF-1α的水平及其靶基因的转录。
2HIF-1与RA
2.1HIF-1在RA滑膜中的表达RA是一种累及多关节、
多系统的慢性自身免疫性疾病，在自身免疫性结缔组织病中
患病率居首位。滑膜炎为其最具特征性的病理改变，表现为
滑膜组织增生、侵蚀性生长，对关节软骨组织造成进行性破
坏，导致关节畸形和功能障碍，其生长性质及病理学行为在
许多方面类似于肿瘤[8]。由于滑膜细胞的这种类肿瘤样增殖和大量炎症细胞的浸润，导致局部毛细血管氧弥散距离增加和耗氧量增加，致RA关节腔缺氧[9]。
2.2HIF-1在RA发病机制中的作用
2.2.1HIF-1促进RA滑膜血管生成RA滑膜炎症组织为一个慢性缺氧、低pH的环境。HIF-1是缺氧状态下血管生成的核心调控因子，通过影响其他生长因子的表达而直接参与血管生成。血管内皮生长因子（VEGF）为血管生成初期关键性的生长因子，是目前已知最强的内皮细胞有丝分裂原，其以可溶形式特异地促进血管内皮细胞分裂，促使血管生成。有关HIF-1α调控血管形成的直接证据，来自对肿瘤内皮细胞敲除HIF-1α基因后，不仅抑制了VEGF的表达和实体瘤血管的生长，同时增殖、趋化、穿透和创伤愈合等功能也都消失，证实了HIF-1α调控血管的功能[10]。Strunk等[11]用多普勒超声检查21例RA患者有疼痛和肿胀症状的手腕关节，发现其中有17例患者关节囊内有增强的滑膜微血管血流；而12例健康对照组患者中仅1例发现有血流增加。证实了RA 中存在着微血管增生。而Haas等[12]观察到RA滑膜新生血管结构紊乱、功能不全导致无法恢复氧稳态，可见血管生成不能改变滑膜的缺氧状态。在RA中阻断血管生成不仅可以阻断营养物质向炎症部位输送，还可使血管退化，甚至逆转疾病。国外最近对310例病程小于6个月的早期RA患者研究发现，血清VEGF水平与患者症状及继发的骨质破坏密切相关[13]。而血管新生阻断剂的应用，可抑制新生血管形成，减少增生滑膜血液供应，为治疗类风湿关节炎提供了新途径[14]。这些都说明了VEGF与RA的发病、新生血管形成及病情进展有着密切联系，而HIF-1通过直接调控VEGF表达，引起RA病变的进一步发展。
2.2.2HIF-1抑制RA滑膜细胞凋亡RA患者滑膜组织特别是侵蚀部位存在形态、大小不一演变的滑膜细胞，其胞核隆凸，富含大的梭形陈旧核。RA滑膜增殖一方面与滑膜细胞和炎症浸润细胞数量增加有关，另一方面还与这些细胞凋亡频率减少有关。滑膜衬里下层成纤维细胞凋亡率为3%，衬里层细胞几乎无凋亡迹象，这些与HIF-1异常活化有关。Mcl-1是一种属于Bcl-2蛋白家族的抗凋亡蛋白，其主要功能是保持线粒体膜稳定性，大多分布在线粒体丰富的细胞。HIF-1可通过增强Mcl-1表达保护滑膜巨噬细胞免遭凋亡。常氧下p53能促进HIF-1α降解并与它竞争结合辅激活因子p300，因此HIF-1的靶基因转录受到抑制，从而促进凋亡发生。但长期较严重的缺氧可诱导突变型p53表达，突变后p53基因丧失启动凋亡的能力，表达的突变型p53蛋白会导致细胞增殖过度、凋亡减少、细胞异常蓄积和向恶性转化[15]。Salvador 等[16]发现p53的异常表达与关节损伤存在相关性，p53在滑膜组织中的表达很可能是RA关节损伤的预兆。由此可见，HIF-1在RA滑膜炎发病中通过多个途径抑制细胞凋亡，促进细胞增殖与存活。
2.2.3HIF-1调控RA中糖酵解的启动RA关节腔为一慢性缺氧微环境，低氧环境下，细胞代谢从三羧酸循环转变为糖酵解。事实上，糖酵解途径相关酶的表达，如葡萄糖载体
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1、3等，均受到HIF-1的调控[17]。同时，其产物乳酸和酮体可引起HIF-1α的蓄积及表达上调，从而形成一系列正反馈反应。肿瘤细胞转移正是利用这一途径获取能源，从而得以在无血管供应部位存活并将肿瘤扩散，炎症时髓细胞功能也依赖于糖酵解取得能量。髓细胞包括粒细胞、单核细胞及巨噬细胞，是免疫系统的重要组成部分，在RA的整个病理过程中占重要地位。鼠和人的中性粒细胞具有HIF-1α，对其在低氧环境下存活是必要的，实验证实，敲除HIF-1α的中性粒细胞在缺氧时不能存活[18]。树突状细胞在免疫反应中起重要作用，敲除HIF-1α可降低树突状细胞中的糖酵解，从而抑制其活性，提示HIF-1α在炎症中促进糖酵解的作用[19]。HIF-1α通过调控糖酵解通路影响髓细胞功能。HIF-1α表达增加使糖酵解作用增强，髓细胞能量供给充足，从而发挥聚集、黏附、游走、浸润和吞噬等作用启动炎症反应并使其作用持续进展。
3研究展望
传统治疗RA的药物主要有非甾体类抗炎药、激素类及缓解病情的抗风湿药。但这些药物的毒性、不良反应均较大，并非理想的治疗RA药物。HIF-1α不单是诱导恶性肿瘤新生血管形成的调控因子，它还和髓系细胞介导的机体炎症反应密切相关。现已证实，一些小分子HIF-1抑制因子可在体内外起到抗肿瘤作用[20]。而HIF-1在RA中通过调控一系列下游靶基因影响滑膜炎的发生、进展，若通过阻断HIF-1的表达，从源头上阻止RA病情进展，有可能达到根治RA的目的。因此，基于抗HIF-1的靶向治疗有望成为RA治疗与预防的重要手段。
参考文献
[1]Gaber T,Dziurla R,TripmacherR,et al.Hypoxia inducible factor (HIF)in rheumatology:low O2!See what HIF can do[J]!Ann Rheum Dis,2005,64(7):971-980.
[2]Semenza GL,Wang GL.A nuclear factor induced by hypoxia via de novo protein synthesis binds to the human erythropoietin gene en?hancer at a site required for transcriptional activation[J].Mol Cell Biol,1992,12(12):5447-5454.
[3]Brucker PU,Izzo NJ,Chu CR.Tonic activation of hypoxia-inducible factor1alpha in avascular articular cartilage and implications for metabolic homeostasis[J].Arthritis Rheum,2005,52(10):3181-3191.
[4]Berra E,Ginouv侉sA,Pouysségur J.The hypoxia-inducible-factor hydroxylases bring fresh air into hypoxia signaling[J].EMBO Rep, 2006,7(1):41-45.
[5]Vaupel P.The role of hypoxia-induced factors in tumor progression [J].Oncologist,2004,9(Suppl5):10-17.
[6]Clottes E.Hypoxia-inducible factor-1:regulation involvement in carcinogenesis and target for anticancer therapy[J].Bull Cancer,
2005,92(2):119-127.
[7]Gong Y,Agani FH.Oligomycin inhibits HIF-1(alpha)expression in hypoxic tumor cells[J].Am J Physiol Cell Physiol,2005,288(5): 1023-1029.
[8]Rudolph EH,Woods JM.Chemokine expression and regulation of angiogenesis in rheumatoid arthritis[J].Curr Pharm Des,2005,11 (5):613-631.
[9]Sivakumar B,Akhavani MA,Winlove CP,et al.Synovial hypoxia as
a cause of tendon rupture in rheumatoid arthritis[J].J Hand Surg [Am],2008,33(1):49-58.
[10]Tang N,Wang L,Esko J,et al.Loss of HIF-1alpha in endothelial cells disrupts a hypoxia-driven VEGF autocrine loop necessary for tumorigenesis[J].Cancer Cell,2004,6(5):485-495. [11]Strunk J,Heinemann E,Neeck G,et al.A new approach to studying angiogenesis in rheumatoid arthritis by means of power Doppler ul?trasonography and measurement of serum vascular endothelial growth factor[J].Rheumatology-(Oxford),2004,43(12):1480-1483.
[12]Haas CS,AminMA,Allen BB,et al.Inhibition of angiogenesis by Interleukin-4gene therapy in rat adjuvant-induced arthritis[J]. Arthritis Rheum,2006,54(8):2402-2414.
[13]Clavel G,Bessis N,Lemeiter D,et al.Angiogenesis markers(VEGF, soluble receptor of VEGF and angiopoietin-1)in very early arthritis and their association with inflammation and joint destruction[J]. Clin Immunol,2007,124(2):158-164.
[14]Veale DJ,Fearon U.Inhibition of angiogenic pathways in rheuma?toid arthritis:potential for therapeutic targeting[J].Best Pract Res Clin Rheumatol,2006,20(5):941-947.
[15]Coles AH,Liang HL,Zhu Z,et al.Deletion of p37Ing1in mice reveals
a p53-Independent role for Ing1in the suppression of cell prolifera?tion,apoptosis,and tumorigenesis[J].Cancer Res,2007,67(5): 2054-2061.
[16]Salvador G,Sanmarti R,Garcia-Peiro A,et al.P53expression in rheumatoid and psoriatic arthritis synovial tissue and association with joint damage[J].Ann Rheum Dis,2005,64(2):183-187. [17]Lee JW,Bae SH,Jeong JW,et al.Hypoxia-inducible factor(HIF-1) alpha:its protein stability and biological functions[J].Exp Mol Med, 2004,36(1):1-12.
[18]Walmsley SR,Print C,Farahi N,et al.Hypoxia-induced neutrophil survival is mediated by HIF-1α-dependent NF-B activity[J].JEM, 2005,201(1):105-115.
[19]Jantsch J,Chakravortty D,Turza N,et al.Hypoxia and hypoxia-in?ducible factor-1alpha modulate lipopolysaccharide-induced den?dritic cell activation and function[J].J Immunol,2008,180(7): 4697-4705.
[20]Powis G,Kirkpatrick L.Hypoxia inducible factor-1αas a cancer drug target[J].Mol Cancer Ther,2004,3(5):647-654.
（2009-09-29收稿2009-11-30修回）
（本文编辑闫娟）
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2018中国类风湿关节炎诊疗指南 2018 年4 月1 日出版的《中华内科杂志》发表了《2018中国类风湿关节炎诊疗指南》，中华医学会风湿病学分会上次更新该指南是2010年。
●推荐意见1：RA的早期诊断对治疗和预后影响重大，临床医师需结合患者的临床表现、 实验室和影像学检查做出诊断（1A）。建议临床医师使用1987年ACR发布的RA分类标准与2010年ACR/EULAR发布的RA分类标准做出诊断（2B） ●推荐意见2：建议临床医师根据RA患者的症状和体征，在条件允许的情况下，恰当选 用X线、超声、CT和磁共振成像（MRI）等影像技术（2B） ●推荐意见3：RA的治疗原则为早期、规范治疗，定期监测与随访（1A）。RA的治疗 目标是达到疾病缓解或低疾病活动度，即达标治疗，最终目的为控制病情、减少致残率，改善患者的生活质量（1B） ●推荐意见4：对RA治疗未达标者，建议每1~3个月对其疾病活动度监测1次（2B）； 对初始治疗和中/高疾病活动者，监测频率为每月1次（2B）；对治疗已达标者，建议其监测频率为每3~6个月1次（2B） ●推荐意见5：RA治疗方案的选择应综合考虑关节疼痛、肿胀数量，ESR、CRP、RF及 抗环瓜氨酸蛋白抗体（ACPA）的数值等实验室指标（1B）。同时要考虑关节外受累情况；此外还应注意监测RA的常见合并症，如心血管疾病、骨质疏松、恶性肿瘤等（1B）●推荐意见6：RA患者一经确诊，应尽早开始传统合成DMARDs治疗。推荐首选甲氨 蝶呤单用（1A）。存在甲氨蝶呤禁忌时，考虑单用来氟米特或柳氮磺吡啶（1B） 欧美15个国家的调查显示，甲氨蝶呤平均使用率达到83%，远高于其他药物，但我国甲氨蝶呤的使用率仅为55.9%。队列研究显示，RA患者诊断第1年内传统合成DMARDs药物的累积使用量越大，关节置换时间越迟；早使用1个月，外科手术的风险相应降低 2%~3%[50]。甲氨蝶呤是RA治疗的锚定药[51]。一般情况下，2/3的RA患者单用甲氨蝶呤，或与其他传统合成DMARDs联用，即可达到治疗目标[21,51]。 ●推荐意见7：单一传统合成DMARDs治疗未达标时，建议联合另一种或两种传统合成 DMARDs进行治疗（2B）；或一种传统合成DMARDs联合一种生物制剂DMARDs 进行治疗（2B）；或一种传统合成DMARDs联合一种靶向合成DMARDs进行治疗（2B）●推荐意见8：中/高疾病活动度的RA患者建议传统合成DMARDs联合糖皮质激素治疗 以快速控制症状（2B）。治疗过程中应密切监测不良反应。不推荐单用或长期大剂量使用糖皮质激素（1A） ●推荐意见9：RA患者在使用生物制剂DMARDs或靶向合成DMARDs治疗达标后， 可考虑对其逐渐减量，减量过程中需严密监测，谨防复发（2C）。在减量过程中，如
类风湿性关节炎_中药方集 时间:2010-05-15 12:49来源:未知作者:中医中药秘主网 : liu 类风湿性关节炎是一种以关节滑膜炎为特征的慢性全身性自身免疫性疾病，其发病与细菌、病毒、遗传及性激素有一定关系。临床以慢性对称性多关节肿痛伴晨僵、晚期关节强直畸形和功能严重受损为特征。其病机为风寒湿热之邪留滞于筋骨关节，久之损伤肝肾阴血所致。 1．乌蛇祛风通络汤治类风湿性关节炎 [配方] 乌梢蛇15克，黄芪、伸筋草、鹳草等、稀莶草各20 克，当归、羌活、独活各30克，防风、细辛各6克。 [制用法] 水煎服。 [功效] 治类风湿性关节炎。 2．苏枝黄芪汤治类风湿性关节炎 [配方] 苏枝节、竹枝节、桂枝节、松枝节、杉枝节各15克，桑枝节20克，黄芪20克，甘草3克，当归18克，白芍16克，川芎6克。 [制用法] 水煎服。 [功效] 治类风湿性关节炎。 3．生苡仁治类风湿性关节炎 [配方] 生苡仁15克，苍术、羌活、独活、威灵仙、云茯苓12 克，防风光煎10克，川乌先煎，炙甘草炙，各6克，麻黄炙3克。 [制用法] 水煎服。 [功效] 治关节疼痛，肿胀，沉重或肌肤麻木，舌苔白腻，脉濡缓为主要症状的湿痹型类风湿性关节炎。 4．两乌散治类风湿性关节炎 [配方] 制草乌、制川乌、薏苡仁各100克，生地黄200克，制乳香、制没药各150克，马钱子50克。 [制用法] 研末水冲服。 [功效] 治类风湿性关节炎，寒型。 5．熟地治寒痹型类风湿性关节炎 [配方] 熟地20克，骨碎补、威灵仙各15克，淫羊藿、补骨脂、山甲炙、牛膝、桂枝、赤白芍、苍术、知母各10克，川断12克，制附片、麻黄炙、松节各6克，防风9克。[制用法] 水煎服。 [功效] 治病程较久，关节变形，强直挛缩，屈伸少利，舌质淡或瘀暗，尺脉弱为主要症状的寒痹型类风湿性关节炎。
四综述四 D O I :10.3760/c m a .j .i s s n .1673-436X.2012.023.019作者单位:646000泸州医学院附属医院呼吸二科通信作者:湛晓勤, E m a i l :1843309130@q q .c o m 低氧诱导因子-1与炎症 鄢洁 湛晓勤 ?摘要? 低氧诱导因子-1(H I F -1)是机体的一种重要转录因子,在机体炎症过程中起着重要作用三它是由α和β亚基构成的异二聚体,其中α亚基受低氧调节,在常氧细胞中易被降解三研究发现,即使在常氧条件下H I F -1也能在炎症中发挥重要作用三本文就近年来H I F -1在炎症方面的研究作一综述三 ?关键词? 低氧诱导因子-1; 炎症介质;炎症H y p o x i a -i n d u c i n g f a c t o r 1a n di n f l a m m a t o r y Y A N J i e ,Z HA N X i a o -q i n .D e p a r t m e n to f N O .2R e s p i r a t o r y M e d i c i n e ,t h eA f f i l i a t e d H o s p i t a l o f L u z h o u M e d i c a lC o l l e g e ,L u z h o u 646000,C h i n a C o r r e s p o n d i n g a u t h o r :Z HA N X i a o -q i n ,E m a i l :1843309130@q q . c o m ?A b s t r a c t ? H y p o x i a - i n d u c i n g f a c t o r1(H I F -1)i sa ne s s e n t i a lt r a n s c r i p t i o nf a c t o r .I t p l a y sa n i m p o r t a n t r o l e i n i n f l a mm a t i o n .H I F -1i s ah e t e r o d i m e r c o n s i s t i n g o fH I F -1αa n d βs u b u n i t s .T h eH I F -1αs u b u n i t i sd i r e c t l y c o n t r o l l e d b y t h eo x y g e nc o n c e n t r a t i o na n di se a s i l y d e g r a d e di n n o r m o x i cc e l l s .R e c e n t l y ,t h e s t u d y f o u n d t h a t e v e n i n n o r m o x i c c o n d i t i o n s ,H I F -1i n i n f l a mm a t i o n p l a y a n i m p o r t a n t r o l e .I n t h i s r e v i e w ,w e s u mm a r i z e d t h e s t u d i e s o fH I F -1i n i n f l a mm a t o r y .?K e y w o r d s ? H y p o x i a - i n d u c i n g f a c t o r 1;I n f l a mm a t o r y m e d i a t o r s ;I n f l a mm a t o r y 炎症是所有具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应,也是人类多种疾病中的一种最常见的病理过程,可发生于机体的任何部位和任何组织,人类的大多数疾病无不与炎症过程有关三低氧诱导因子(h y p o x i a -i n d u c i b l e f a c t o r ,H I F )是一种氧依赖转录激活因子,通过与低氧反应元件结合,从而引发下游基因的转录,其表达和活性受到细胞 氧浓度的调控[1 ]三H I F 家族目前研究发现有3个成员[2] ,分别为H I F -1二H I F -2和H I F -3三每个成员又均由α二β 2个亚基组成,而其中研究最多的为H I F -1三 1 H I F -1的分子结构与调节 H I F -1是S e m e n z a 等在研究红细胞生成素的基因表达时发现的D N A 结合性蛋白,由H I F -1α和 H I F -1β两个亚基组成的异二聚体,都具有芳香烃核转移结构域,其均属于碱性螺旋-环-螺旋蛋白质家族三H I F -1α是氧调节蛋白,主要决定着H I F -1的 活性三H I F -1α由826个氨基酸组成,含有几个重要的结构域,其中氨基酸1~390为结合D N A 所必需,氨基酸1~166介导其与H I F -1β异二聚体化; 氨基酸401~603为依赖的降解结构域(O x y g e n - d e p e n d e n td e g r a d a t i o nd o m a i n ,O D D D ),控制H I F -1在常氧下的降解;H I F -1β是H I F 家族成员的共同亚基,属于结构性表达亚基,含有789个氨基酸三H I F -1作为一种转录因子,H I F -1β在细胞核中持续表达,不受氧浓度调节和影响;H I F -1α低氧时在组织细胞中广泛表达,而在常氧(氧饱和度> 21%)下H I F -1αO D D D 的脯氨酸残基和乙酰化赖氨酸残基经脯氨酰羟化酶羟基化后形成β折叠样构象,通过与泛素E 3连接酶p V H L 蛋白β结构域结合,然后被26s 蛋白酶所降解,其半衰期小于 5m i n [3] 三然而在低氧(氧饱和度<21%)条件下,脯氨酰羟化酶的活性本身会被抑制;而且在低氧状态下线粒体的电子传递链会被抑制,其代谢产物乳酸二丙酮酸堆积,亦会抑制脯氨酰羟化酶,从而抑制 H I F -1α的降解[4] 三 目前已确定的H I F -1的靶基因有100余种[5] ,它在炎症二血管生成与重塑二细胞增殖与细胞凋亡二 能量代谢二酸碱失衡调解等方面均发挥了难以估量的生物学作用三 2 H I F -1与炎症介质 炎症反应虽是多细胞和多因子共同参与的过程,但细胞因子在炎症反应中起了举足轻重的作用三当机体受到各种感染和非感染等因素刺激时,机体 四 3381四国际呼吸杂志2012年12月第32卷第23期 I n t JR e s p i r ,D e c e m b e r 2012,V o l .32,N o .23
低氧诱导因子家族研究进展% 李启芳综述 戴爱国审阅 湖南省老年医院湖南省老年医学研究所 呼吸疾病研究室(长沙9410001) 摘要 低氧能诱导编码促红细胞生成素基因的转录9过程的具体分子机理一直不清o 低氧诱导因子家族的克隆及其调控许多目的基因表达的发现9丰富了我们对机体氧感受的分子机理的认识o 同时低氧诱导因子家族中各因子的表达差异9及其之间的相互调控9低氧诱导因子在低氧条件下的作用机理9对目的基因的调控及相互之间差异的阐明9对理解许多与组织缺氧有关的重要疾病如心血管疾病\中风\慢性阻塞性肺疾病9特别是肿瘤的病理生理过程有重要意义o 关键词 低氧诱导因子; 基因表达调控; 脯氨酸化酶 % 国家自然科学基金资助项目(NO ~30270581) 哺乳动物和人体内细胞存在着一类介导低氧适应性反映的转录因子9能激活许多低氧反应性基因的表达9是在低氧条件下维持氧稳态的关键性物质9称低氧诱导因子o 自1992年发现低氧诱导因子1(h yp Oxi a i nduci bl e f act Or 19H I F -1)以来91997年和1998年又相继发现了H I F -2和H I F -3o 目前认为H I F 在体内可能存在一个家族(H I FS )o 现已知H I FS 家族成员H I F -1\H I F -2和H I F -3具有以下共同特点~ 均属于碱性多肽-螺旋-环-螺旋-(baSi c-heli x-l OO p -heli x 9b HL H )-PAS (p er-ARNT -AHR -S i m )超家族的O 和 亚基组成的不同亚基二聚体转录因子9O 亚基为低氧调控的主要功能亚基(H I F -1O 及H I F -2O 9H I F -3O )和对低氧不敏感的H I F -1 亚基; 缺氧均可诱导H I FS 转录\翻译及活性9其在体内介导生理或病理作用均依赖于通过与目的基因的缺氧应答元件(h yp Oxi a re-S p OnSe el e m entS 9HRE )结合而调节目的基因的表达来实现o l H IF S 的发现及C DNA 克隆 低氧诱导因子-1是Se m enza 等[1] 1992年发现的o 他等将人肝癌He p 3B 细胞用1 低氧处理9细 胞内EPO mRNA 可增加50倍9而且缺氧处理过的细胞9其细胞核提取物也具有促进基因转录的作用9但预先给予蛋白质合成抑制剂能阻断缺氧对基因表达的诱导作用;在非EPO 表达的细胞里也有类似的结果o 以后又观察到该因子对多种低氧反应基因(h yp Oxi a reS p OnSi ve g eneS 9HRG )的转录都有调控 作用9并可能参与对低氧反应的信号转导过程9遂命名为H I F -1o 随之9从He p 3B 细胞c DNA 文库中克隆了H I F -1O 和H I F -1 的全长c DNA 序列\其中人的H I F -1O c DNA 全长为3720b p 9开放阅读框2478b p 9编码826个氨基酸9应用体细胞杂交分析和荧光原位杂交方法证实人H I F -1O 的基因位于第14号染色体(14C 21-4)9小鼠的H I F1O 的c DNA 序列全长3746b p 9开放阅读框2430b p 9编码810个氨基酸9与人的H I F -1O c DNA 序列有90 的同源性9小鼠H I F -1O 基因位于第12号染色体o 人的H I F -1 c DNA 序列和已知的芳香烃受体核转运蛋白(ar y l h y dr Ocar bOn rece p t Or nucl ear tranSl Ocat er-Or 9ARNT )相同o 全长为2604b p 9开放阅读框2367b p 9编码789个氨基酸o 在其基因中有一段长度为45b p 的可变外显子9编码15个氨基酸9因此体内还存在一种774个氨基酸的H I F -1 9小鼠的H I F -1 基因定位于第3号染色体o 随后9Em a [2] 与 Gu [3] 分别发现低氧诱导因子家族的另外两个成员H I F -2O 和H I F -3O 9结果表明~不同种系同一种H I F -O 亚基之间高度同源;但同一种系不同H I F -O 亚基之间同源性较低;而在3种H I F -亚基不同功能区之间其同源性却较高o 人H I F -3O 是位于19号染色体9其c DNA 长约2kb 9编码668个氨基酸的H I F -3O 多肽9在氨基端反式激活区域(N -t er m i-nal tranSacti vati On dO m ai n 9NAD )区域99与H I F -1 O 9H I F -2O 之间一致性分别为58 和52 9但缺乏羧基端反式激活区域(C -t er m i nal tranSacti vati On dO m ai n 9CAD )9H I F -1O 和H I F -2O 均含有NAD 和CAD 两个反式激活区[4]o
类风湿性关节炎是由什么原因引起的？ 类风湿性关节炎的病因是由什么引起的呢？可能很多人都不知道，就对类风湿性关节炎的病因，中安类风湿骨病专科医院专家为大家做以下详细的解读： 一.发病原因 病因尚未完全明确。类风湿性关节炎是一个与环境、细胞、病毒、遗传、性激素及神经精神状态等因素密切相关的疾病。 (一)细菌因素实验研究表明A组链球菌及菌壁有肽聚糖(peptidoglycan)可能为RA发病的一个持续的刺激原，A组链球菌长期存在于体内成为持续的抗原，刺激机体产生抗体，发生免疫病理损伤而致病。支原体所制造的关节炎动物模型与人的RA相似，但不产生人的RA所特有的类风湿因子(RF)。在RA病人的关节液和滑膜组织中从未发现过细菌或菌体抗原物质，提示细菌可能与RA的起病有关，但缺乏直接证据。 (二)病毒因素RA与病毒，特别是EB病毒的关系是国内外学者注意的问题之一。研究表明，EB病毒感染所致的关节炎与RA不同，RA病人对EB病毒比正常人有强烈的反应性。在RA病人血清和滑膜液中出现持续高度的抗EB病毒—胞膜抗原抗体，但到目前为止在RA病人血清中一直未发现EB病毒核抗原或壳体抗原抗体。 (三)遗传因素本病在某些家族中发病率较高，在人群调查中，发现人类白细胞抗原(HLA)-DR4与RF阳性患者有关。HLA研究发现DW4与RA的发病有关，患者中70%HLA-DW4阳性，患者具有该点的易感基因，因此遗传可能在发病中起重要作用。 (四)性激素研究表明RA发病率男女之比为1∶2～4，妊娠期病情减轻，服避孕药的女性发病减少。动物模型显示LEW/n雌鼠对关节炎的敏感性高，雄性发病率低，雄鼠经阉割或用β-雌二醇处理后，其发生关节炎的情况与雌鼠一样，说明性激素在RA发病中起一定作用。 寒冷、潮湿、疲劳、营养不良、创伤、精神因素等，常为本病的诱发因素，但多数患者前常无明显诱因可查。 (二)发病机制 发病机理尚未完全明确，认为RA是一种自身免疫性疾病已被普遍承认。具有HLA-DR4和DW4型抗原者，对外界环境条件、病毒、细菌、神经精神及内分泌因素的刺激具有较高的敏感性，当侵袭机体时，改变了HLA的抗原决定簇，使具有HLA的有核细胞成为免疫抑制的靶子。由于HLA基因产生可携带T细胞抗原受体和免疫相关抗原的特性，当外界刺激因子被巨噬细胞识别时，便产生T
尪痹（类风湿关节炎）中医临床路径 路径说明：本路径适合于西医诊断为类风湿关节炎的患者。 一、尪痹（类风湿关节炎）中医临床路径标准住院流程 （一）适用对象 中医诊断：第一诊断为尪痹（TCD 编码：BNV070）。 西医诊断：第一诊断为类风湿关节炎（ICD-10 编码为：M06.991）。 （二）诊断依据 1 疾病诊断 （1）中医诊断标准：参照中华人民共和国中医药行业标准《中医病证诊断疗效标准》（ZY/T001.1-94）。 （2）西医诊断标准：参照1987 年美国风湿病学会（ARA）修订的类风湿关节炎分类标准和2009 年ACR/EULAR 类风湿关节炎分类标准。 2．证候诊断 参照“国家中医药管理局‘十一五’重点专科协作组尪痹（类风湿关节炎）诊疗方案”。 尪痹（类风湿关节炎）临床常见证候： 风湿痹阻证 寒湿痹阻证 湿热痹阻证 痰瘀痹阻证 气血两虚证 肝肾不足证 （三）治疗方案的选择 参照“国家中医药管理局‘十一五’重点专科协作组尪痹（类风湿关节炎）诊疗方案”及中华中医药学会《中医内科常见病诊疗指南》（ZYYXH/T114-2008）。1．诊断明确，第一诊断为尪痹（类风湿关节炎）。 2．患者适合并接受中医治疗。 （四）标准住院日为≤21 天。 （五）进入路径标准1．第一诊断必须符合尪痹（TCD 编码为：BNV070）和类风湿关节炎（ICD10 编码为：M06.991）的患者。 2. 患者已使用糖皮质激素、免疫抑制剂等药物，维持原剂量，病情稳定后逐渐减量，可进入本路径。 3．当患者同时具有其他疾病，但在住院期间不需特殊处理也不影响第一诊断的临床路径流程实施时，可以进入本路径。 （六）中医证候学观察四诊合参，收集该病种不同证候的主症、次症、舌、脉特点。注意证候的动态变化。 （七）入院检查项目 1．必需的检查项目 （1）血常规、尿常规、便常规 （2）肝功能、肾功能、血糖 （3）ESR、CRP、RF、IgA、IgG、IgM，C3、C4、CH50 （4）AKA、APF、CCP （5）抗核抗体谱
expression in C1q suffcient and deficient mouse models of Alzheimer's disease 〔J 〕.J Neurochem ，2008；106：2080-92.27 Mukherjee P ，Pasinetti GM.The role of complement anaphylatoxin C5a in neurodegeneration ：implications in Alzheimer's disease 〔J 〕.J Neuro-immunol ，2000；105（2）：124-30.28 Nandakumar KS ，Jansson A ，Xu B ，et al .A Recombinant vaccine effec-tively induces C5a-specific neutralizing antibodies and prevents arthritis 〔J 〕.PLoS One ，2010；5（10）：e13511.29 Schnatbaum K ，Locardi E ，Scharn D ，et al .2006.Peptidomimetic C5a receptor antagonists with hydrophobic substitutions at the C-terminus ：increased receptor specificity and in vivo activity 〔J 〕.Bioorg Med Chem Lett ，2006；16（19）：5088-92. 30 Gueler F ，Rong S ，Gwinner W ，et al .Complement 5a receptor inhibition improves renal allograft survival 〔J 〕.J Am Soc Nephrol ，2008；19（12）：2302-12.31 Woodruff TM ，Ager RR ，Tenner AJ ，et al .The role of the complement system and the activation fragment C5a in the central nervous system 〔J 〕.Neuromolecular Med ，2010；12（2）：179-92.32 Woodruff T ，Denny K ，Crane J ，et al .Blockade of C5a receptors reduces astroglial inflammation in a rat SOD1G93A model of amyotrophic lateral sclerosis 〔J 〕.Mol Immunol ，2008；45（16）：4163. 〔2011-06-03收稿2011-07-20修回〕 （编辑安冉冉） 低氧诱导因子－1α与骨质疏松 蔡 婧 郭常辉 （重庆医科大学附属第二医院内分泌科，重庆400010） 〔关键词〕骨质疏松；低氧诱导因子-1α〔中图分类号〕R58 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕1005-9202（2013）03-0741-03；doi ：10.3969/j.issn.1005- 9202.2013.03.120通讯作者：郭常辉（1957-），女，硕士生导师，主任医师，主要从事骨质疏 松、甲状腺相关疾病、糖尿病及相关并发症研究。 第一作者：蔡 婧（1987-），女，在读硕士，主要从事骨质疏松、甲状腺相关疾病、糖尿病及相关并发症的研究。 1992年，Semenza 等〔1〕 首先发现低氧诱导因子（HIF ），它作为组织细胞低氧状态下调节氧稳态的核转录因子，在低氧信号转导过程中起重要作用。HIF 包括三种亚型（HIF-1，HIF-2和HIF-3），哺乳动物对低氧的适应性反应主要表达为HIF-1。HIF-1是由HIF-1α和HIF-1β两个亚基组成的异源二聚体，其活性主要由HIF-1α亚基决定，HIF-1α对氧的依耐性较强，仅在缺氧条件下存在。近年来有研究表明成骨细胞和破骨细胞属于氧感应细胞 〔2〕 ，低氧是参与调控骨改建（重建）/骨转换的因 素之一，由此推测HIF-1α对骨质疏松的发生发展可能起了一定的调控作用。1概 述 1.1 HIF-1α的结构 HIF-1α为氧调节蛋白，是碱性螺旋环螺 旋/PAS （basic Helix LoopHelix-Per /ARNT /AhR /Sim ，bHLH-PAS ）蛋白家族成员之一。人体内HIF-1α基因位于14号染色体（q21-24），含有826个氨基酸。HIF-1α的N 端有bHLH 和PAS 结构域，负责与HIF-1β形成异二聚体，并与DNA 上顺式反应元件结合；HIF-1α的C 端有2个反式激活结构域（TAD ），分别称为TAD-N （aa531-575）和TAD-C （aa786-826），TAD-C 可直接或间接与转录起始复合物反应影响基因转录；在TAD 之间（aa576-785）为抑制结构域（ID ），可抑制常氧条件下的反式激活作用， TAD-N 、TAD-C 和ID 三者共同作用决定了氧调节的稳定性和蛋白的转录活性 〔3〕 。HIF-1α结构中还存在氧依赖的 降解结构域（ODDD ），其结构域中有2段富含脯氨酸（P ）、谷氨酸（E ）、丝氨酸（S ）和苏氨酸（T ）的氨基酸序列。此外，HIF-1α有2个核定位信号（NLS ），分别位于N 端的aa17-33和C 端的aa718-721，低氧时，C 端的NLS 在介导HIF-1α进入细胞核的过程中起着关键作用〔4〕 。 1.2HIF-1α的生物学特性 HIF-1α在人体内多个脏器均有 表达，其生物学活性主要取决于α亚基的蛋白质水平及其活 性 〔1〕 。常氧条件下，当环境氧浓度超过5%时，脯氨酰羟化酶（PHD ）作用于ODDD 中的脯氨酸残基，促进HIF-1α迅速被降解，使其半衰期不足10min 。在缺氧环境下，HIF-1α的降解受到抑制， 半衰期相应延长，完成核转位过程，即在胞质中聚集并转移到细胞核中与HIF-1β结合形成二聚体，再作用于靶基因， 启动其表达 〔5〕 。 目前国内外研究已发现有100多种HIF-1α的靶基因，主要有以下几类：①血管相关性基因：主要有血管内皮细胞生长因子（VEGF ），低氧环境下，HIF-1α作用于VEGF ，使其表达增加，促进血管内皮细胞增殖分化，从而改善组织供血和低氧状态；②葡萄糖及能量代谢相关性基因：包括醛缩酶A 、糖酵解酶-11等，主要在缺氧环境下启动糖酵解途径，维持细胞的生存代谢；③细胞增殖相关性基因：主要有胰岛素样生长因子（IGF ），成纤维细胞生长因子（FGF ）等，通过激活促分裂原活化蛋白激酶（MAPK ）等途径促进细胞增殖。此外HIF-1α还可作用于促红细胞生成素、细胞凋亡蛋白酶等，对细胞生成和凋亡的调控发挥重要作用 〔6〕 。 2HIF-1α与骨代谢 人体内骨骼是拥有丰富血管的组织，其血供占心输出量的 10%左右〔7〕 。在骨发育过程中，骨组织的血管化具有重要的作 用，只有当血管形成，才能在成骨部位出现成骨细胞和破骨细 · 147·蔡婧等低氧诱导因子-1α与骨质疏松第3期
低氧诱导因子-1调控肿瘤代谢的研究进展摘要：低氧诱导因子-1（hypoxia-inducible factor 1，HIF-1）是一种对氧敏感的核转录因子，其表达与肿瘤的生长密切相关，尤其在调控肿瘤细胞能量代谢重编程中发挥着重要的作用，它通过激活编码葡萄糖转运体，糖酵解酶类以及丙酮酸脱氢酶激酶等基因，在低氧条件下实现由氧化磷酸化代谢方式向糖酵解方式的转变，维持了肿瘤细胞内氧化还原的稳态和能量供给。因此，靶向HIF-1及其编码的与代谢相关的酶系将成为肿瘤治疗的新策略。 关键词：低氧诱导因子；代谢重编程；糖酵解；靶向治疗 恶性肿瘤为了满足快速生长的需求，会发生代谢的重编程。在常氧条件下，正常组织细胞摄取葡萄糖进入糖酵解途径生成丙酮酸，经过三羧酸循环由线粒体氧化磷酸化产生三磷酸腺苷（ATP）。在缺氧条件下，丙酮酸在乳酸脱氢酶的作用下生成乳酸产生ATP。而肿瘤细胞无论氧气是否充足都以生成乳酸的糖酵解代谢方式产生能量，这种特殊的代谢方式称为有氧糖酵解[1]。随着肿瘤研究的不断深入，肿瘤细胞调控代谢重编程的重要信号通路及转录因子已初步阐明。本文将重点对低氧诱导因子-1（HIF-1）调控肿瘤细胞代谢重编程的分子机制及靶向HIF-1治疗策略的研究进行综述。 1 HIF-1的调节机制 转录因子HIF-1是由HIF-1α和HIF-1β两个亚基组成的异源二聚体蛋白[2]。在常氧条件下，HIF-1α蛋白的第402位和第564位脯氨酸残基在羟基化酶的作用下发生羟基化，然后被泛素化降解，这个过程需要氧气、α-酮戊二酸和二价铁离子作为底物参与其中[3]。在低氧条件下，羟基化酶的活性被抑制，HIF-1α蛋白迅速积累，并与HIF-1β形成二聚体结合于靶基因的低氧反应元件上，并招募共激活分子P300/CBP，激活靶基因的转录[4]。研究发现HIF-1能调控1000多个靶基因，其中大多数基因都是促进肿瘤细胞存活，包括代谢重编程，血管新生和迁移等相关的基因[5]。 2 HIF-1在恶性肿瘤中的表达 肿瘤细胞的快速生长，造成缺血缺氧的肿瘤微环境，在这种应激压力下，肿瘤细胞通过激活HIF-1α改变能量代谢模式。许多研究已证实，在肝癌、乳腺癌、
类风湿性关节炎 概述 类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis, RA）是一种病因尚未明了的、慢性进行性、反复发作的、全身性的结缔组织疾病，主要侵犯四肢小关节, 早期受累关节疼痛肿胀，晚期关节可出现不同程度的侵蚀性改变及进行性强直(ankylosis)和畸形(deformity)，是一种致残率较高的疾病。 病因及发病机制 本病病因不明，可能与下列因素有关。 1. 自身免疫反应 类风湿因子(Rheumatoid Factor, RF)是一种自身免疫性抗体，尤其是RF-IgG可形成自身免疫复合物，可引起关节滑膜(synovial membrane)及附近组织中的炎性细胞浸润，溶酶体酶的释放，从而导致关节软骨(articular cartilage)、肌腱、韧带及滑膜组织的局部破坏。而70%~80%的患者血清RF阳性。 2. 感染 由于本病有发热、局部淋巴结肿大、受累关节肿胀、白细胞增多等炎症性表现，与感染性炎症相似；50%～80%的RA病人是在反复发作的咽炎、慢性扁桃体炎、中耳炎或其它链球菌感染之后，经过2～4周开始发病的；而且应用抗生素治疗及摘除病灶性扁桃体后，对RA的病程和发病率均有良好的影响，故认为感染病灶可能与本病发病有关，可能是引起发病或激发自身免疫反应启动的因素, 也可能是本病的诱因。
3. 遗传因素 本病病人HLA－DR4抗原检出率明显升高，在某些家族中发病率也较高，故提示发病与遗传有关。 4、内分泌因素： 因为RA多发生于女性，而怀孕期间关节炎症状常减轻，应用肾上腺皮质激素能抑制本病等，故认为内分泌因素和RA似有一定关系。研究发现RA病人存在皮质醇节律率乱，可能与RA的发病有关。 5、发病诱因： 一般说来，各种感染可诱发或加重RA，受凉、潮湿、劳累、精神创伤、营养不良、关节扭伤、跌伤、骨折等，常为本病的诱发因素。 病理 RA呈慢性、进行性、侵袭性经过，其基本病理改变是主要累及关节滑膜(以后可波及到articular cartilage、骨组织、关节韧带和肌腱)，其次为浆膜、心、肺及眼等结缔组织(connective tissue)的广泛性炎症性疾病。在急性期，关节滑膜表现为大
Tianjin Med J熏Mar2010熏Vol38No3 足够的氧与营养供应是细胞新陈代谢的基础，也是维持内环境稳态的前提。氧分压的改变会导致一系列疾病如类风湿关节炎（r heumatoid arthritis，RA）病理学上的改变。组织缺氧可引起细胞功能障碍并最终导致细胞死亡。组织适应缺氧的一个具有特征性的信号传递因子是低氧诱导因子-1（h ypoxia-inducible factor-1，HIF-1）。HIF-1作为一种调节细胞氧平衡和低氧反应基因表达的核转录因子，在低氧条件下表达增加。RA关节腔为缺氧微环境。近年研究表明，HIF-1在RA关节滑膜中的表达增加与RA的发生发展密切相关，被认为是其发病中的主要因素，且成为RA的一个潜在治疗靶点[1]。现对HIF-1的生物学功能及其在RA发病机制中的作用综述如下。 1HIF-1概述 1.1HIF-1的结构HIF-1是1992年Semenza在低氧肝癌细胞提取物中发现的一种核转录因子[2]，是由一个α亚基（HIF-1α）和一个β亚基（HIF-1β）组成的异二聚体。两个亚基均属于碱性-螺旋-环-螺旋（basic-h elix-l oop-h elix，bHLH）/PAS蛋白家族的成员，人类HIF-1α基因定位于14号染色体（14q21~24），其cDNA全长3720bp，编码826个氨基酸。HIF-1α氨基端含有bHLH（aa17~71）和PAS域（aa 85~298），这对α和β亚基的聚合是必需的，羧基端有两个反式激活域（transactivation domains，TAD），其中近N端的为NTAD（aa531~575），近C端的为CTAD（aa786~826），前者为激活转录所必需，后者发挥精细调节作用。在PAS与TAD 之间有一氧依赖降解域（oxygen dependent degradation domain，ODDD，aa401~603），包含有NTAD，使HIF-1α在常氧张力下易于降解，在ODD中还包含2个PEST（脯氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸）样基序（aa499~518和581~600），使之更不稳定。HIF-1β也被称为芳香烃受体核转位子（aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator，ARNT）。 apy of metastasizing cutaneous squamous cell carcinoma in a patient with severe recessive dystrophic epidermolysis bullosa[J].Dermatol?ogy,2009,219(1):80-83. [10]Allegra CJ,Jessup JM,Somerfield MR,et al.American society of clinical oncology provisional clinical opinion:testing for KRAS gene mutations in patients with metastatic colorectal carcinoma to predict response to anti-epidermal growth factor receptor monoclonal anti?body therapy[J].J Clin Oncol,2009,27(12):2091-2096. [11]Wagner JD,Evdokimow DZ,Weisberger E,et al.Sentinel node biop?sy for high-risk nonmelanoma cutaneous malignancy[J].Arch Der?matol,2004,140(1):75-79. [12]Rokunohe A,Nakano H,Aizu T,et al.Significance of sentinel node biopsy in the management of squamous cell carcinoma arising from recessive dystrophic epidermolysis bullosa[J].J Dermatol,2008,35 (6):336-340. [13]Arbiser JL,Fan CY,Su X,et al.Involvement of p53and p16tumor suppressor genes in recessive dystrophic epidermolysis bullosa-as?sociated squamous cell carcinoma[J].J Invest Dermatol,2004,123 (4):788-790. [14]Kivisaari AK,Kallajoki M,Mirtti T,et al.Transformation-specific matrix metalloproteinases(MMP)-7and MMP-13are expressed by tumour cells in epidermolysis bullosa-associated squamous cell car? cinomas[J].Br J Dermatol,2008,158(4):778-785. [15]Mallipeddi R,Wessagowit V,South AP,et al.Reduced expression of insulin-like growth factor-binding protein-3(IGFBP-3)in Squa?mous cell carcinoma complicating recessive dystrophic epidermoly?sis bullosa[J].J Invest Dermatol,2004,122(5):1302-1309. [16]Waterman EA,Sakai N,Nguyen NT,et al.A laminin-collagen com?plex drives human epidermal carcinogenesis through phosphoinosi?tol-3-kinase activation[J].Cancer Res,2007,67(9):4264-4270. [17]Martins VL,Vyas JJ,Chen M,et al.Increased invasive behaviour in cutaneous squamous cell carcinoma with loss of basement-mem?brane type VII collagen[J].J Cell Sci,2009,122(Pt11):1788-1799. [18]Ortiz-Urda S,Garcia J,Green CL,et al.TypeⅦcollagen is re?quired for Ras-driven human epidermal tumorigenesis[J].Science, 2005,307(5716):1773-1776. [19]Pourreyron C,Cox G,Mao X,et al.Patients with recessive dystroph?ic epidermolysis bullosa develop squamous-cell carcinoma regard?less of typeⅦcollagen expression[J].J Invest Dermatol,2007,127 (10):2438-2444. （2009-05-21收稿2009-12-22修回） （本文编辑李淑杰） 低氧诱导因子-1与类风湿关节炎* 王险峰王雯陈森洲△ 关键词细胞低氧关节炎,类风湿新生血管化,病理性细胞凋亡糖酵解综述 *广西科学基金资助项目（项目编号：0575106） 作者单位：541004桂林医学院微生物学与免疫学教研室 △审校者 254
痹（类风湿关节炎）中医临床路径 路径说明：本路径适合于西医诊断为类风湿关节炎的患者。 一、尪痹（类风湿关节炎）中医临床路径标准住院流程 （一）适用对象 中医诊断：第一诊断为尪痹（TCD 编码：BNV070）。西医诊断：第一 。 诊断为类风湿关节炎（ICD-10 编码为：） （二）诊断依据 1 疾病诊断 （1）中医诊断标准：参照中华人民共和国中医药行业标准《中医病证诊断疗效标。 （ZY/） 准》 （2）西医诊断标准：参照1987 年美国风湿病学会（ARA）修订的类风湿关节炎分类标准和2009 年A CR/EULAR 类风湿关节炎分类标准。 2．证候诊断 参照“国家中医药管理局‘十一五’重点专科协作组尪痹（类风湿关节炎）诊疗方案” 。 尪痹（类风湿关节炎）临床常见证候：风 湿痹阻证 寒湿痹阻证 湿热痹阻证 痰瘀痹阻证 气血两虚证 肝肾不足证 （三）治疗方案的选择 参照“国家中医药管理局‘十一五’重点专科协作组尪痹（类风湿关节炎）诊疗方 。 案”及中华中医药学会《中医内科常见病诊疗指南》 （ZYYXH/T114-2008） 。 1．诊断明确，第一诊断为尪痹（类风湿关节炎）
2．患者适合并接受中医治疗。 （四）标准住院日为≤21 天。 （五）进入路径标准 1．第一诊断必须符合尪痹（TCD 编码为：BNV070）和类风湿关节炎（ICD10 编码为： ）的患者。 2. 患者已使用糖皮质激素、免疫抑制剂等药物，维持原剂量，病情稳定后逐渐减量，可进入本路径。 3．当患者同时具有其他疾病，但在住院期间不需特殊处理也不影响第一诊断的临床路径流程实施时，可以进入本路径。 （六）中医证候学观察四诊合参，收集该病种不同证候的主症、次症、舌、脉特点。 注意证候的动态变化。 （七）入院检查项目 1 必需的检查项目 （1）血常规、尿常规、便常规 （2）肝功能、肾功能、血糖 （3）ESR、CRP、RF、IgA、IgG、IgM，C3、C4、CH50 （4）AKA、APF、CCP （5）抗核抗体谱 （6）心电图 （7）双手、胸部X线片 2．可选择的检查项目：根据病情需要而定，如组织非特异性抗核抗体谱、抗中性粒细胞抗体、抗心磷脂抗体、HLA-B27、电解质、肌酶谱、血脂、血尿酸、乙肝五项、抗结核抗体、尿沉渣分析、大便潜血、主要受累关节X线片、心脏彩超、腹部超声、骨密度、CT、MRI、关节超声以及其他合并系统损害的相关检查等。 （八）治疗方案 1．辨证选择口服中药汤剂、中成药
低氧诱导因子HIF-1 （2018年10月） 氧气是人体生命的第一要素，内环境氧浓度的平衡是机体进行正常有氧代谢的必要条件。缺氧对机体和细胞是一种强烈的应激。细胞通过氧感受器和信号转导特异性调节某些编码基因或非编码RNA的表达来参与各种生理和病理过程。 低氧诱导因子（Hypoxia-inducible Factors, HIFs）属于bHLH-PAS（basic helix–loop–helix Per–Arnt–Sim）转录因子超家族成员，由对氧浓度敏感的HIFα亚基和组成型表达的HIFβ亚基（HIF1β）组成异二聚体发挥功能1,2，其中HIFα亚基包括3个亚型-HIF1α、HIF2α和HIF3α，目前研究最深入且功能最突出的是HIF1α3。HIFs活性的调节主要依靠调节HIFα亚基的蛋白稳定性来实现，α亚基的蛋白稳定性被氧气依赖的羟基化严格调控。常氧状态下，HIF1α不能稳定存在，被不断地降 解而维持在微弱的基础水平。脯氨酰羟化酶（Prolyl Hydroxylase Domain, PHD）使得HIF1α亚基402位及564位脯氨酸羟基化，羟基化修饰的HIF1α被包含肿瘤抑制蛋白von Hippel-Lindau （pVHL）的E3泛素连接酶复合物识别，最终通过泛素-蛋白酶体途径被迅速降解4。此外，常氧环境下，FIH1（Factor Inhibiting HIF1）促使HIF1α804位天冬酰胺发生羟基化从而抑制其与P300的结合从而抑制HIF1α转录激活功能5。而乏氧条件下，PHD 及FIH1的羟基化酶活性均受到抑制，HIF1α转位入核与HIF1β结合形成转录复合物与其靶基因启动子区域的低氧反应元件（Hypoxia-responsive Element, HRE）结合，启动下游众多基因的转录表达而参与多种生理病理过程。除受氧浓度水平调节外，HIF1α还受其他多种因素的调控，如反义转录因子a HIF1α对HIF1α基因的转录具有负调控作用6；部分生长因子、炎症因子或某些癌基因也可通过PI3K/AKT和ERK1/2等信号通路参与调控HIF1α蛋白的稳定性7，也有报道多种microRNA参与调控HIF1。解螺旋 https://www.doczj.com/doc/bd3810654.html, 大量研究表明，HIF1α具有促进血管生成、调节内环境、调节昼夜节律8,9、诱导细胞自噬和程序性细胞死亡以及促进间充质干细胞自我更新和分化等生物学功能，且其往往在多种原发或继发性恶性肿瘤组织中的表达水平异常升高，已成为多种疾病临床诊断、靶向治疗和预后评估的一个生物标识和潜在靶点10-12。一方面，HIF-1作为内源性保护分子在缺血缺氧性脑血管病、神经系统退行性疾病、急性心肌梗死等疾病中对神经细胞的存活和心肌细胞的再生具有重要意义13,14。Liu等研究发现，中药水飞蓟素可通过上调HIF-1α和pAkt的表 1