阿拉伯糖的功能
中华人民共和国卫生部2008年批准阿拉伯糖为我国的新资源食品，使用于各类食品。
国际肾脏病学会选定阿拉伯糖为中国中南五省KHDC项目干预食品。
国家食品药品监督管理局批准阿拉伯糖为保健食品，保健功能：减肥、降血糖。
美国食品药品监督局（FDA）批准阿拉伯糖列入食品添加剂目录。
美国内分泌临床协会2003年指南中推荐阿拉伯糖为减肥抗肥胖食品和营养补充剂。
美国医疗协会将其列入用做抗肥胖剂的营养补充剂和调节血糖的非处方药。
日本厚生省把阿拉伯糖列入用于调节血糖的专用特殊保健食品添加剂。
“胖子太多不用药不行了，美纠结13年为减肥药松绑”，美国人为了国民健康，控制糖尿病、肥胖症，找到元凶是白糖过量使用，美国禁止生产销售进口含糖饮料。美国媒体报道，1.14亿人遭到糖尿病折磨，中国面临预算耗尽的风险。加拿大媒体报道，随着糖尿病蔓延，中国面临“灾难”。随着生活水平的提高，人们日常食品饮料含有大量糖类，各种疾病尾随而至。欧洲研究表明，每天喝一罐含糖的苏打饮料会导致糖尿病的风险增加22%。美国研究也表明，饮用含糖饮料与体重增加和糖尿病等情况密切相关。然而糖分是人体身体必不可少的营养，那么，如何才能在保证人体糖分的情况下维持身体健康呢？阿拉伯糖的出现，解决了这一难题。
阿拉伯糖又称为果胶糖，是白色晶体，无气味，相对密度1.625，易溶于水，溶于乙醇，不溶于醚、甲醇和丙酮。阿拉伯糖有类似蔗糖的甜味，但甜度只有其一半左右，是一种无热量的天然合成甜料。阿拉伯糖的生理功能主要有：
1.抑制蔗糖的代谢与吸收。阿拉伯糖最具代表性的生理作用是有选择性地影响小肠中的蔗糖酶，从而抑制蔗糖的吸收。据报道在蔗糖中添加3.5%的阿拉伯糖，就可以抑制60-70%的蔗糖吸收，同时使血糖值少升高约50%。
2.不会引起血糖升高和脂肪生成。阿拉伯糖作为一种低热量的糖，抑制因摄入蔗糖而导致的血糖升高。糖尿病患者可放心食用。
3.保护牙齿。阿拉伯糖不会被蛀牙菌发酵产酸腐蚀牙齿，同时木糖醇的甜味还能促进唾液的分泌，补充唾液中的磷和钙，能够促进牙齿的自然修复。此外阿拉伯糖还能改善口腔环境，减少弱酸对牙齿的腐蚀作用。
4.疏通肠道，促进双歧杆菌的生长，解决便秘烦恼。肠道大量毒素堆积会导致便秘等肠道功能失调，促进衰老和疾病产生。日本研究结果显示:有便秘倾向的女性将添加了3%阿拉伯糖的蔗糖加入红茶等饮品中连续服用，每周的排便次数有明显的增加。据三和淀粉株式会社实验证明，摄入添加5%阿拉伯糖的蔗糖还可以有效促进双歧杆菌的生长。双歧杆菌具有促进人体肠道健康的作用。
5.减肥美容，排毒养颜。美国已经禁止出售含糖饮料，可糖分是人体不可缺少的。此时，这蔗糖中加入阿拉伯糖轻松解决这一难题。未被吸收的蔗糖与阿拉伯糖经肠道微生物代谢、发酵亢进后能迅速增长双歧杆菌等有益菌迅速生长，使体内垃圾、毒素等快速清理，最终以液体或气体的形式排出体外，排毒养颜，健康减肥。
6.血管清道夫、清理血管油脂。阿拉伯糖是一种低热量糖，所增殖得有益菌能促进高密度脂蛋白的形成，从而降低低密度脂蛋白、甘油三脂和胆固醇等血脂，被誉为“血管清道夫”；还能够清除血管内膜上的油脂污垢并修复血管壁，恢复血管弹性，治疗“三高一超”。
阿拉伯糖可以用于糖尿病食品、减肥食品、健康功能食品、蔗糖添加剂、保健食品等。
同时可用于减肥和控制血糖的处方、非处方药品的添加剂或成药的赋形剂。阿拉伯糖还是香精香料的理想中间体、可以作为药物合成的中间体、有机合成体、化学试剂。山东协力生物科技股份有限公司研究表明，日常饮食中添加适量的阿拉伯糖就可以有效控制血糖和抑制脂肪，长期使用还可提高耐糖量。
阿拉伯糖操纵子 操纵子（operon），又称操纵组或操纵元，主要在原核生物及线虫动物门出现，由Jaco b和Monod于1961年所发现。我们可以这样简单的理解，就是在细菌的基因组中，往往相关的基因聚集、串联在一起，形成一个基因簇，他们编码同一代谢途径中的不同酶，共同表达，共同调控，构成表达和调控的基本形式，这种单元就称为操纵子。它是一组关键的核苷酸序列，包括了一个操纵基因，一个启动子，及一个或以上的结构基因的基元，结构基因编码多肽链，其表达受操纵基因的控制，而操纵基因又受调控基因的产物调控因子的控制。 阿拉伯糖（arabinose）是一个可以为代谢提供碳源的五碳糖。在大肠杆菌中阿拉伯糖的降解需要3个基因：araB、araA和araD，它们形成一个基因簇，简写为araBAD，除了这个结构基因araBAD，阿拉伯糖操纵子还包含两个启动子（P BAD、P C）、两个操纵基因（araO2、araO1）、一个CAP结合位点以及一个araI位点（附图）。另外，由调控基因araC编码的调控因子araC蛋白通过两种异构体显示正、负调节因子的功能，Pr是起阻遏作用araC蛋白的构型，可以与操纵基因araO2和araI位点形成阻遏环（DNA回文结构），Pi是起诱导作用ar aC蛋白的构型，其与cAMP-CAP共同作用下起始P BAD调控的结构基因的表达。Ara BAD基因和araC基因的转录是分别在两条链上以相反的方向进行的，araBAD基因簇从启动子P BA 开始向右进行转录，而araC基因则是从P c向左转录。当葡萄糖存在而无阿拉伯糖时，cA D MP-CAP缺乏，araC蛋白为处于Pr构型，araC蛋白与操纵基因araO2以及araI位点结合形成阻遏环，使P BAD启动子处于关闭状态，有效阻遏araBAD的转录。当葡萄糖不存在而有阿拉伯糖时，cAMP-CAP丰富，araC蛋白（Pr构型）与阿拉伯糖相结合改变为Pi构型，ar aC蛋白（Pi构型）分别与操纵基因araO1以及araI位点相结合，阻遏环被破坏。RNA聚合酶在araC蛋白和cAMP-CAP的共同作用下起始P BAD调控的结构基因的表达。当葡萄糖和阿拉伯糖均不存在时，cAMP-CAP丰富，araC蛋白为处于Pr构型，此时尽管有cAMP-CAP 与CAP位点结合，因为没有Pi构型araC蛋白与araI位点结合，从而RNA聚合酶无法结合到P BAD启动子上，转录无法进行。当葡萄糖和阿拉伯糖均存在时，araC基因处于本底转录，产生少量araC蛋白，结合于araO1，使RNA聚合酶不能结合于P C启动子，结果araC基因的转录受阻遏，araC蛋白的缺乏进而无法启动P BAD调控的结构基因的表达。 综上，阿拉伯糖操纵子的调控有三个特点：第一，araC表达受到AraC的自动调控，ar aC基因从P C启动子向左方向转录，当细胞内没有araC蛋白时，由P C启动子起始araC基因转录，随着araC蛋白合成水平的提高，它结合于araO1阻止向左的转录。第二，AraC蛋白既可充当阻遏物，也可作为激活蛋白。第三，AraC蛋白（Pi构型）与cAMP-CAP共同作用可最大限度的诱导阿拉伯糖操纵子的表达。 附：
阿拉伯糖操纵子操纵子（operon），又称操纵组或操纵元，主要在原核生物及线虫动物门出现，由Ja cob和Monod于1961年所发现。我们可以这样简单的理解，就是在细菌的基因组中，往往相关的基因聚集、串联在一起，形成一个基因簇，他们编码同一代谢途径中的不同酶，共同表达，共同调控，构成表达和调控的基本形式，这种单元就称为操纵子。它是一组关键的核苷酸序列，包括了一个操纵基因，一个启动子，及一个或以上的结构基因的基元，结构基因编码多肽链，其表达受操纵基因的控制，而操纵基因又受调控基因的产物调控因子的控制。 阿拉伯糖（arabinose）是一个可以为代谢提供碳源的五碳糖。在大肠杆菌中阿拉伯糖的降解需要3个基因：araB、araA和araD，它们形成一个基因簇，简写为araBAD，除了 这个结构基因araBAD，阿拉伯糖操纵子还包含两个启动子（P BAD 、P C ）、两个操纵基因（ar aO 2、araO 1 ）、一个CAP结合位点以及一个araI位点（附图）。另外，由调控基因araC编 码的调控因子araC蛋白通过两种异构体显示正、负调节因子的功能，Pr是起阻遏作用ar aC蛋白的构型，可以与操纵基因araO 2 和araI位点形成阻遏环（DNA回文结构），Pi是起 诱导作用araC蛋白的构型，其与cAMP-CAP共同作用下起始P BAD 调控的结构基因的表达。A ra BAD 基因和araC基因的转录是分别在两条链上以相反的方向进行的，araBAD基因簇从启动 子P BAD 开始向右进行转录，而araC基因则是从P c 向左转录。当葡萄糖存在而无阿拉伯糖时， cAMP-CAP缺乏，araC蛋白为处于Pr构型，araC蛋白与操纵基因araO 2 以及araI位点结合 形成阻遏环，使P BAD 启动子处于关闭状态，有效阻遏araBAD的转录。当葡萄糖不存在而有阿拉伯糖时，cAMP-CAP丰富，araC蛋白（Pr构型）与阿拉伯糖相结合改变为Pi构型，ar aC蛋白（Pi构型）分别与操纵基因araO1以及araI位点相结合，阻遏环被破坏。RNA聚 合酶在araC蛋白和cAMP-CAP的共同作用下起始P BAD 调控的结构基因的表达。当葡萄糖和阿
茅苍术多糖的含量分析 段国峰1,欧阳臻2,余伯阳3,邬瑞斌1,陈明琪1 (1中国药科大学高等职业学院,江苏镇江 212003;2江苏大学药学院,江苏镇江 212013;3中国药科大学中药学院,江苏南京 210038) 摘要:目的 对茅苍术多糖中单糖组成,各单糖、中性糖、糖醛酸、蛋白质的含量进行分析。方法 茅苍术粗多糖分离纯化后,通过气相色谱、分光光度法等进行分析。结果 粗多糖APW主要含APW1～APW44个组分,各组分均含半乳糖、阿拉伯糖和甘露糖等单糖,APW1～APW4的中性糖含量分别是:60.1%、22.6%、20.1%、16.9%,糖醛酸含量分别是7.7%、9.8%、25.5%、27.6%,蛋白质含量分别是1.9%、1.3%、1.5%、1.7%。结论 茅苍术多糖是一种蛋白杂多糖。 关键词:茅苍术;多糖;中性糖;糖醛酸;蛋白质 中图号:R282.710.3 文献标识码:A 文章编号:1000-5005(2008)04-0251-03 茅苍术为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea (Thunb.)DC.的根茎。性温,味辛、苦,具有燥湿健脾、祛风散寒、明目的功效,主要用于脘腹胀满,泄泻,水肿,脚气痿痹,风湿痹痛,风寒感冒,夜盲等症。主产于江苏、湖北、河南等地。多糖类在自然界生物中广泛存在,具有广谱化学结构和生物功能,越来越受到人们的关注,其免疫、降糖等活性与其所含单糖、糖醛酸、蛋白等成分结构有密切的关系。 K W Y u等[1-3]对湖北产茅苍术的多糖作了研究,结果表明其具有肠免疫活性、抗假丝酵母菌感染等作用,且活性与多糖中阿拉伯半乳糖及糖醛酸性部位相关。 茅苍术原本是茅山苍术的简称,其质量和疗效优异为历代医家推崇和肯定,江苏茅山地区被认为是茅苍术的地道产地。有关茅山苍术的多糖报道文献鲜见。本文对江苏茅山地区茅苍术多糖的进行了分离纯化,对主要纯化多糖APW1～4,通过气相色谱等分析确定茅苍术多糖中各种单糖组成及比例,通过斜率校正系数法测定单糖的含量、糖醛酸含量及蛋白质含量,为进一步研究其化学结构和生物活性提供了基础。1 材料 1.1 药品与试剂 茅苍术采集于江苏句容茅山地区,经江苏大学药学院欧阳臻教授鉴定。纯化多糖的制备:药材无水乙醇脱脂后,残渣水提醇沉,离心收集沉淀,三氯乙酸法[4]脱蛋白,透析,冷冻干燥,即得粗多糖APW。APW经过M olish反应、UV及IR等验证后,分别经DE AE纤维素由0～0.2m ol/L浓度NaCl洗脱、Sephadex G2100色谱柱0.1m ol/L NaCl 溶液洗脱,苯酚-硫酸法检测糖峰,紫外吸收法(280nm)检测蛋白峰。依次得主要纯化多糖APW1～4,各纯化多糖经HPG PC检测为单一对称峰,APW、APW1～4得率分别为3.85%、1.43%、0.04%、0.20%、0.06%。鼠李糖Rha、阿拉伯糖Ara、木糖X yl、甘露糖Man、葡萄糖G lu、半乳糖G al、间羟基联苯、糖醛酸标准品,sigma公司;考马斯亮兰试剂盒,南京建成生物工程研究所;其他试剂均为国产分析纯。 1.2 仪器 G C214B气相色谱仪,日本岛津公司;N2000色谱处理工作站,浙江大学智能研究所;紫外可见分光光度计,上海优尼科公司;电子天平,北京多 收稿日期:2008-03-07;修稿日期:2008-03-30 基金项目:江苏省自然科学基金(BK2004062) 作者简介:段国峰(1968-),男,江苏泰兴人,中国药科大学高等职业学院讲师。 — 1 5 2 — 南京中医药大学学报2008年7月第24卷第4期JOURNAL OF NANJING TC M UNI VERSITY Vol.24No.4July.2008
Ray Kuo 2008 菌种的生理生化分析 1.2 放线菌形态观察。 在高氏一号培养基[4]、蔗糖蔡氏琼脂培养基、葡萄糖－天门冬素琼脂培养基及甘油淀粉谷氨酸盐琼胶培养基[11]上，插片培养菌种，观察其基内菌丝体以及气生菌丝体的颜色。 将培养基融化后，以每皿15－18ml的量倾倒平板，待凝固，将放线菌划线接种在皿中，然后取无菌的盖玻片以45度角插入培养基内，盖玻片插入深约1/3（玻片必须于接种线垂直），每皿可以插2－3片。盖上皿盖，置于28℃培养，菌丝将沿玻片向上生长，定期观察。 [12] 菌株生理生化特性测定 明胶液化 将待检菌种接种于柱型明胶培养基[8]表面（不用穿刺）28℃下培养，分别在5，10，20及30天各观察一次液化情况。观察前将菌种管冷藏20－30分钟，如明胶不液化则仍是固体状态，若呈液体即为液化。明胶的水解是由于菌种所产生的蛋白酶的作用。 牛奶凝固与胨化测定 将牛奶10000rpm离心，去上层油脂成脱脂牛奶。将代测定菌株接种于脱脂牛奶中，28℃下培养，分别在3，6，10，20及30天各观察一次。如牛奶出现凝块，则为凝固。这是由于凝乳酶或发酵乳糖时产酸的作用，依据凝固原因的不同，尚有酸凝和酶凝脂粉。牛奶中的酪蛋白在蛋白酶的作用下被水解，使牛奶变得清亮而透明，此为胨化。凝固速度在开始的3－6天最快。 淀粉水解测定 将待检菌接种于淀粉培养基平板上。28℃培养10天至20天后在培养基表面加入碘液。若有淀粉酶产生，则淀粉变成糊精或糖而被吸收利用，菌落遇碘液不显蓝色，可在培养物周围形成无色透明圈。圈的大小表示淀粉酶产生的强弱。如不产生淀粉酶，则菌落周围遇碘成蓝色。 纤维素水解 将菌种接种于滤纸条上，接种材料最好是孢子（不带培养基）置28℃培养30天后观察。滤纸条分解表明产生了纤维素酶，滤纸条无变化者为阴性。 硫化氢产生实验 将待检菌接种于含柠檬酸铁（即Tresner’s）有机培养基斜面上，置28℃培养10天左右（视菌苔生长成丛为宜）观察结果。如产生褐色则说明有H 2S产生，H 2S与柠檬酸铁结合产生黑色硫化铁。 酪氨酸水解 将待检菌接种到斜面培养基上，适温培养3－7天，观察斜面，若有黑色素即为阳性反应，说明菌种具有酪氨酸酶。 碳源利用试验] 细菌能否利用某些含碳化合物作为唯一碳源，反映细菌是否含有代谢这种含碳化合物的酶，因而可以作为鉴定的依据。 菌种收集后应经离心洗涤制成菌悬液，以避免带入它种碳源，干扰实验结果。基础培养
第八章：蛋白质合成转运和加工 核糖体活性位点_至少五个 E:脱酰tRNA短暂的占据，然后由E位离开核糖体。 P:起始tRNA i met结合于此, 延长成肽后，带肽链的tRNA转到此位 A:普通氨酰tRNA就加入此位 翻译起始因子 起始tRNA特点（翻译时第一个密码子怎样被识别） 核糖体的30s小亚基中的16SrRNA上有一段序列与mRNA中的SD序列互补结合，使下游的AUG序列定位在P位上。 起始tRNA--- tRNAi ①只能识别mRNA上的翻译起始密码子AUG ②只能进入核糖体的肽位P 普通tRNA--- tRNA ①在翻译延长中发挥作用②进入核糖体的A位，再通过A位到达P位 在原核生物中起始tRNA携带甲酰甲硫氨酸(fMet),真核为甲硫氨酸(Met) 起始时mRNA和rRNA的碱基配对 mRNA上的SD序列（AAACAGGAGG）与核糖体的30s小亚基中的16SrRNA（UCCUCC）互补从而使使下游的AUG序列定位在P位上，起始肽链的合成。 肽链合成和延伸（三个反应） （一）进位反应：密码子被识别，起始tRNA结合于P处，普通tRNA结合在A处 （二）转位反应：氨基酸从A转移到P处，涉及肽链的形成
（三）移位反应：tRNA和mRNA相对核糖体的移动 共翻译转运和信号肽：蛋白质合成转运同时发生，转运信号也由mRNA编码，分泌蛋白质，多进入内质网。需要SRP（信号识别蛋白受体介导），与其受体DP形成复合物。信号肽N端有一个带正电的氨基酸，C端有数个极性氨基酸。 翻译后转运和导肽：进入叶绿体和线粒体的蛋白是这种机制。导肽对这两种细胞器中蛋白质的跨膜与识别起重要作用。叶绿体的信号台有两部分，分别决定此蛋白能否进入叶绿体基质和类囊体。 练习 蛋白质的生物合成包括：____ ____ ____ 肽链合成和延伸的三个反应是：____ ____ ____ 原核生物蛋白合成起始tRNA是________，真核是________ 既能识别tRNA,又能识别氨基酸,对两者有高度专一性的酶是____ 关于SD序列，叙述正确的是： A:富含嘧啶B:富含嘌呤C:富含稀有碱基D:与mRNA配对
控糖、润肠、益生 阿拉伯糖的三大功效 唐传生物科技有限公司 内容摘要 L-阿拉伯糖(L-arabinose)是一种五碳天然稀有糖，纯品呈白色结晶、味甜似蔗糖，因在阿拉伯胶首先发现，故名。现多从植物半纤维素中提取，。业已证实，阿糖不仅本身不为人类胃肠道消化吸收，而且还通过强烈抑制小肠蔗糖酶活性而阻止蔗糖的消化吸收。结肠生理细菌可以利用阿糖。有鉴于此，阿糖具有如下三大功能：1. 控制糖的摄入量。在以蔗糖为甜味剂的食品中加入阿糖或服食阿糖后再进食含蔗糖食物，机体能量的摄取显然因蔗糖不吸收而减少。2. 润肠通便。阿糖不消化吸收而致肠内渗透压升高，阻止水电解质吸收而起润肠通便作用。3. 作为益生元调整肠道微生态。 抑制蔗糖消化吸收 蔗糖是一种双糖，由葡萄糖和果糖构成，是人类最主要的食用糖。 小肠粘膜上皮细胞表面含有丰富的蔗糖酶，紧接着胃的十二指肠尤高。蔗糖酶可特异地将蔗糖水解成葡萄糖和果糖。葡萄糖和果糖最终被吸收利用。 阿拉伯糖具有特异性抑制蔗糖酶的作用。因此，在出现阿拉伯糖的情况下，蔗糖的分解吸收将会受阻。最后排入大肠的蔗糖会被肠道细菌利用。 蔗糖是人类的最喜欢甜味，但糖尿病、肥胖等情形并不适合用糖。虽然有各种无糖甜味剂，但没有一种口感能胜过蔗糖。因此，将阿拉伯糖与蔗糖混合使用，将起致既保留蔗糖甜味又避免高糖的风险。 附：三大营养物质消化酶抑制剂 碳水化合物拜糖平（阿卡波糖，Acarbos）抑制淀粉酶活性；阿拉伯糖抑制蔗糖酶活性。 脂肪赛尼可（奥利司他，Orlistat）是长效和强效的特异性胃肠道脂肪酶抑制剂。 蛋白质还没适合口服的蛋白水解酶抑制剂。 润肠通便 泻药分类
便秘是胃肠道的常见症状，其中部分是由于胃肠道的器质性疾病所致而需对因治疗，但很多情况下是肠动力减弱、饮食习惯不良等非明显的病因所致，即所谓的功能性便秘，则需泻药对症外理。此外，泻药还用于结肠镜检查等术前准备。 泻药是一类能增加肠内水分、软化粪便或润滑肠道、促进肠蠕动、加速排便的药物。目前用于市售泻药品种繁多，按治疗原理大致分为四类：1. 接触性泻药，系某些能刺激大肠或小肠分泌和运动的化学物；2. 润滑性泻药，系某些油脂类物质，通过润滑肠壁、软化粪便而发挥泻下作用；3. 容积性泻药，是目前医生处方较多的泻药，其中一类是高渗性泻药，通过在肠腔内的高渗性便粪便稀而量增多；另一类是膨胀性泻药，通过肠腔内膨胀以增加粪便的容积。4. 胃肠动力药，作用于下消化道的胃肠动力药有促进结肠蠕动之效，利于排便。 必须指出，若病因未除如肠动力减弱未恢复、饮食习惯不改善，任何泻药停用后便秘将复发。 一、接触性泻药 接触性泻药，过去曾称为刺激性泻药，它是靠药物本身或其代谢产物与肠粘膜接触后，引起粘膜通透性增加、电解质和水向肠腔渗透，从而使肠内液体增加，引起导泻。此外，药物刺激肠壁神经，使肠道蠕动增加、促使排便。其代表药物有大黄打片等中成药、芘麻油、果导（酚酞）、比沙可定等。刺激性泻药历史悠久、效果确切、价格低廉。主要副作用是肠壁神经毒性，长期使用会因肠壁神经损伤而加重便秘，还会发生结肠黑变病。所以，刺激性泻药只能作为严重便秘的临时性缓解药，不可长期使用。市售所谓“排毒养颜、减肥”中成药多属此类。因此，大肠黑变病过去多发生在老年人身上，如今年轻人中也越来越多见。 蒽醌类中成药是国人在药店自购最多的通便药，名目繁多如大黄苏打片、牛黄解毒丸、复方麻仁丸、芦荟胶囊、润肠通便茶、排毒养颜胶囊等等，其主药多离不开大黄番泻叶、芦荟等含蒽醌苷类的植物药。蒽醌苷在肠内被细菌分解成蒽醌，后者刺激结肠推进性蠕动，用药后6~8小时排便。 芘麻油麻油为大戟科植物蓖麻的成熟种子经加热压榨精制而得的脂肪油。是几乎无色或微带黄色的澄清黏稠液体，有微臭，味淡而微辛。蓖麻油本身并无刺激性，内服到达小肠后经胰脂肪酶分解成蓖麻油酸和甘油，前者在小肠内很快变成蓖麻油酸钠，刺激小肠黏膜，促进小肠蠕动而致泻。未分解的蓖麻油对肠道的润滑作用也有助于粪便的排泻。因此，芘麻油兼备刺激性通便和润滑性通便双重功效。因臭味和服用不方便，加上有大量的替代用药，芘麻油现已很少使用。 由于多数驱虫药尤其是脂溶性驱虫药能溶于油，所以使用驱虫药后不能用蓖麻油等泻药，以免增进吸收而中毒。同时，由于蓖麻油内服后易粘附于肠粘膜表面，影响消化机能。 果导化学名酚酞，内服后在胃内不溶解，到达小肠道后遇碱性肠液才缓慢分解，形成可溶性钠盐，从而刺激结肠壁神经丛，促进蠕动而起缓泻作用，作用性质温和。可溶性钠盐能被小肠吸收，主要从尿中排出，使碱性尿变成红色，一部分也可经胆汁排出，到达肠内后又被重新吸收，这种肠肝循环能延长它在体内作用时间。孕妇慎用，哺乳期妇女禁用。
中国海洋大学2004年生物化学A考研真题 一、名词解释（共20分，每题2分，请写在答题纸上） 1.糖蛋白和蛋白聚糖： 2.结构域： 3.酶工程 4.Bohr效应 5.分子杂交 6.Western blot 7.酶的共价调节 8.底物水平磷酸化作用 9.呼吸控制 10.蛋白质组学 二、填空题（共20分，每空一分，请答在答题纸上） 1.氨基酸混合物进行电泳分离时，当氨基酸pI＞pH（电极缓冲液）时，氨基酸＿＿＿移动；当氨基酸pI ＜pH时，氨基酸＿＿＿移动。 2.糖蛋白中寡糖链的还原端残基与多肽链氨基酸残基以多种形式共价连接，形成的连键称为糖肽键，主要有两种类型，分别为＿＿＿和＿＿＿。 3.氨基酸折叠过程中，常见的超二级结构主要有三种形式，分别为＿＿＿，＿＿＿和ββ。 4.常用二苯胺法测定＿＿＿含量，用苔黑酚法测定＿＿＿含量。 5.细胞溶胶内由葡萄糖酵解产生的NADH将来要进入线粒体进一步氧化，NADH由细胞溶胶进入线粒体基质过程中主要通过＿＿＿和＿＿＿穿梭途径；线粒体基质中的乙酰CoA转运到线粒体外经过＿＿＿＿＿＿穿梭途径；剧烈运动后，肌肉产生的乳酸可通过＿＿＿＿＿＿循环途径变为葡萄糖；肌肉中可利用丙氨酸将氨运送到肝脏，这一运送过程称为＿＿＿＿＿＿循环。 6.脱羧酶多以＿＿＿＿＿作为辅酶，羧化酶多以＿＿＿＿＿＿为辅酶。 7.镰刀型红细胞贫血症是一种先天遗传性的分子病，其病因是由于正常血红蛋白分子中的一个谷氨酸残基被＿＿＿＿＿＿残基所置换。 8.Glu/Asp 的侧链羧基可以作为广义酸碱起催化作用。在这里-COO￣是作为一个＿＿＿＿＿＿起作用；在接近中性pH的条件下，即可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体的氨基酸残基为＿＿＿。 9.转录时RNA聚合酶能识别DNA模板上的特定序列，该部位被称作＿＿＿＿。 10.目前已有充分的证据证明大肠杆菌的转肽酶由其核糖体的23SrRNA承担。 三、判断题（共20分，每题一分，对的划√，错的划x，请答在答题纸上） （）1.含有四个二硫键的胰脏核糖核酸酶，若用巯基乙醇和尿素使其还原和变性，由于化学键遭到破坏和高级结构松散，已经无法恢复其原有功能。 （）2.血红蛋白的α链，β链和肌红蛋白的肽链在三级结构上很相似，所以它们都有结合氧的能力，血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。 （）3.免疫球蛋白由两条轻链和两条重链所组成，抗体与抗原结合只涉及轻链，因为它有可变区域，重链的序列基本上都是恒定的，只起维持结构稳定的作用。
供应或定制下列药物,中间体以及精细化学品 供应或定制下列产品. (1)药物 替尼泊苷(替尼泊甙,足叶噻吩苷),链脲菌素(链脲佐菌素,链佐托星,链佐星),雷莫司汀(雷诺氮芥,雷尼司汀),卡培他滨，三苄糖苷（三苄葡甙）,盐酸氨普立糖,氯苄葡甙（氯苄葡苷），金诺芬（瑞得,醋硫葡金），D-硫代葡糖金,蔗糖八乙酸酯(蔗糖八醋酸酯),2-氟代-2-去氧-D-葡萄糖,1,5-二去氧-1,5-亚胺-D-甘露醇,米格列醇,司普立糖,西托糖苷,依托泊苷,磷酸依托泊苷,葡美辛,D-萄糖胺,4-(beta-D-葡萄糖)-3-甲氧基苯甲醛,D-葡糖醛酸-γ-内酯(葡醛酯,肝泰乐)Glyconiazide,葡甲胺,N-甲基-D-葡糖胺,半乳糖二酸(黏酸),D-半乳糖醇(卫矛醇,半乳糖醇,甜醇),半乳糖黄素,阿卡地新,阿糖胞苷,阿糖胸苷,阿糖尿苷,阿糖腺苷,Tiazofurin,尼可呋糖,N-苯基-2-脱氧-D-葡萄糖胺,氟达拉宾,磷酸氟达拉滨,伏格列波糖,2-氯醛糖,咪唑利宾,烟碱核糖甙,尿苷喃乳糖钠,欧鼠李葡糖甙(葡欧鼠李甙;蒽醌鼠李甙)吉西他滨,葡辛胺,果糖二丙酮氯磺酸酯,Fondaparinux,Idraparinux,Bimosiamose. (2)游离单糖 L-阿拉伯糖(L-(+)-阿拉伯糖),D-阿拉伯糖,D-甘露糖,L-鼠李糖,D-氨基葡萄糖盐酸盐,D-乙酰氨基葡萄糖,D-木糖,D-半乳糖(D-吡喃半乳糖),木糖醇,D-甘露醇,山梨醇,D-阿洛糖,D-阿卓糖,D-葡萄糖醛酸,L-核糖(左旋核糖),戊二醛糖,6-去氧-D-阿洛糖,D-2-氨基半乳糖盐酸盐,N-2-乙酰氨基-D-半乳糖,2-去氧-D-半乳糖(2-脱氧-D-半乳糖),6-脱氧-D-葡萄糖,2-脱氧-D-核糖,1,6-无水-β-D-葡萄糖,2,3,4-O-三乙酰基-1,6-无水-β-D-葡萄糖,D-纤维二糖,水苏糖,海藻糖(α-D-
第六、七章基因表达调控习题（引自网络，略有修订） 一、单项选择题 1.关于基因表达调控的说法错误．．的是 A. 转录起始是调控基因表达的关键 B. 环境因素影响管家基因的表达 C. 在发育分化和适应环境上有重要意义 D. 表现为基因表达的时间特异性和空间特异性 E. 真核生物的基因表达调控较原核生物复杂的多 2.下列哪项属于可调节基因 A. 组蛋白编码基因 B. 5S rRNA编码基因 C. 异柠檬酸脱氢酶编码基因 D. 肌动蛋白编码基因 E. 血红蛋白编码基因 3.与α-酮戊二酸脱氢酶系协调表达的是 A. 肉毒碱脂酰转移酶I B. 柠檬酸合成酶 C. 丙酮酸羧化酶 D. 葡萄糖-6-磷酸酶 E. HMG-CoA合成酶 4.乳糖操纵子中，能结合别位乳糖（诱导剂）的物质是 A. AraC B. cAMP C. 阻遏蛋白 D. 转录因子 E. CAP 5.乳糖操纵子模型是在哪个环节上调节基因表达 A. 复制水平 B. 转录水平 C. 转录后水平 D. 翻译水平 E. 翻译后水平 6.乳糖操纵子的调控方式是 A. CAP的正调控 B. 阻遏蛋白的负调控 C. 正、负调控机制不可能同时发挥作用 D. CAP拮抗阻遏蛋白的转录封闭作用 E. 阻遏作用解除时，仍需CAP加强转录活性 7. 与分解代谢相关的操纵子模型中，存在分解代谢物阻遏现象，参与这一调控的主要作用因子是 A. 阻遏蛋白 B. AraC C. 衰减子 D. cAMP-CAP复合物 E. 诱导剂 8. 原核细胞中，识别基因转录起始点的是 A. 阻遏蛋白 B. 转录激活蛋白 C. 基础转录因子 D. 特异转录因子 E. σ因子 9. 使乳糖操纵子实现高表达的条件是 A. 乳糖存在，葡萄糖缺乏 B. 乳糖缺乏，葡萄糖存在 C. 乳糖和葡萄糖均存在 D. 乳糖存在 E. 葡萄糖存在
近几年的最新研究发现，大分子的甲壳素经进一步脱乙酰及降解后形成的小分子化合物——壳寡糖。壳寡糖溶于水，具有更为特殊的生物功能，生物学功能研究意义重大，其产品开发市场巨大。然而目前有关壳寡糖方面的科普书籍尚缺，许多人对壳寡糖特殊的生物学功能并不了解，此次“保健时报”50期的“壳寡糖系列讲座”连载内容是在国家科技部先后在“九五”、“十五”攻关、“863”科技计划项目及自然科学基金等资助下，经过我们十多年对壳寡糖专门的研究及开发，并参阅国内外近40年（1967-2007年）的2100余篇论文及专利中的最新研究开发进展编写而成，希望能成为一部较全面、通俗、系统的介绍壳寡糖研究开发方面的科普材料，以推动壳寡糖的研究应用开发，促进我国糖工程产业的发展。 生命科学是研究生命现象、生命活动的本质、特征和发生、发展规律，以及各种生物之间和生物与环境之间相互关系的科学。70年代对核酸的研究以基因工程为标志，80年代对蛋白质的研究以蛋白质工程为标志，科学家们在基因工程、蛋白质工程领域所取得的研究成果，为人类揭示生命科学现象提供了重要的理论基础和依据。 蛋白质、核酸和多糖是构成生命的三类大分子，蛋白质和核酸的研究已经成为生命科学中的热点问题。糖生物学之所以落后于蛋白质和基因的研究，在于以前研究人员缺乏研究糖类分子的有效工具，物理和化学分析手段的滞后，以及糖分子本身的复杂性。百余年来科学界对糖的认识几乎没有多大进展，糖类研究成了生命科学中的灰姑娘。近年来，“糖类研究”这个“灰姑娘”终于等来了属于她自己的马车。糖生物学是继基因组学、蛋白质组学研究之后，生命科学的前沿领域。研究成果表明，糖类是生物体内除蛋白质和核酸以外的又一类重要的生物分子，尤其是一类重要的信息分子。 糖与蛋白质、脂类和核酸一样，是组成细胞的重要成份，通过对糖的研究发现，糖不但是细胞能量的主要来源，在细胞的构建、细胞的生物合成和细胞生命活动的调控中，均扮演着重要的角色。对复杂而多变的“糖”的研究堪称生物化学的最新一个研究领域，糖生物学是继基因组学、蛋白质组学研究之后，生命科学的最前沿的领域。糖生物学(glycobiology)这一个名词的提出是在1988年。牛津大学Dwek教授在当年的《生化年评》中撰写了以“糖生物学”为题的综述，这标志了糖生物学这一新的分支学科的诞生。 近年来在糖类研究方面已取得不少进展。研究结果已确证，糖类作为信息分子在受精、发生、发育、分化，神经系统和免疫系统衡态的维持等方面起着重要作用；炎症和自身免疫疾病、老化、癌细胞的异常增殖和转换、病原体感染、植物和病原体相互作用、植物与根瘤菌共生等生理和病理过程都有糖类的介导。在此基础上，新兴的糖生物学正处在蓬勃发展的起点。糖生物学涉及到许多生物学科，如分子生物学、细胞生物学、病理学、免疫学、神经生物学等。糖生物学研究的发展又推动了这些学科的快速前进。 将糖生物学推向生命科学前沿的重大事件发生于1990年。有3家实验室几乎同时发现血管内皮细胞-白血球粘附分子1(ELAM-1)，后来改名为E-选凝素(E-selectin)。这一位于内皮细胞表面的分子能识别白血球表面的四糖Sia-LeX。当组织受到损伤时，白血球和内皮细胞粘附，并沿壁滚动，终而穿过血管壁，进入受损组织，以便杀灭入侵的异物。但是，过多的白血球则引起炎症以及继发的病变。后来又发现了这一家族中的其它成员：P-选凝素和L-选凝素。这一发现首次阐明了炎症过程有糖类和相关的糖结合蛋白参与。更令人吃惊的是，在肺癌和大肠癌细胞的表面也发现了Sia-LeX。进入血液循环系统的癌细胞可能借助了类似于上述的机制穿过血管，进而导致肿瘤的转移。紧接着又出现了以这一基础研究的成果为依据的开发和生产抗炎和抗肿瘤药物的热潮。以糖命名的药厂也应运而生。美国Scripps研究所的华裔科学家王启辉(Chi-Huey Wong)，在这期间首先应用3种不同的糖基转移酶，酶促合成了Sia-LeX。 随着糖生物学基础研究的发展，用于糖生物学研究的方法和基本技术，以及把基础研究所得的成果进一步转化为生产技术等方面的研究也倍受重视，“糖工程学”的兴起也是极为自然的了。 二十一世纪生命科学的研究焦点是对多细胞生物的高层次生命现象的解释，因此，对生物体内细胞识别和调控过程的信息分子——糖类的研究是必不可缺的。糖类的研究像生命科学研究中的又一里程碑，标志着生命科学的又一跨越式的进展，将获得更多科学家的青睐！ 肥胖对人体健康有害，因此，很多人，尤其是白领丽人，非常认真地在减肥。他（她）对饮食十分讲究，特别是尽量少吃甜食，多吃甜食会肥胖。生活条件改善，加上工作繁忙紧张，患糖尿病的人越来越
所言中药三大类，植物动物矿物堆。植物药占大多数，其他二者愧不如。 植物生长发育中，新陈代谢多成分。有的遍布植物体，也有仅在器官中。 糖类脂肪和蛋白，鞣质苷类生物碱；挥发油里氨基酸，树脂色素无机盐。 当取部分做药用，药理作用先弄清；有效成分已查明，物质基础自然定。 中药材中成分杂，有效无效可转化。苷类成分常有效，偶尔也被无情抛。 鞣质似乎无作为，收敛止血不是吹。蛋白多肽常弃用，珍珠药中分量重。 中药针剂有意义，其他剂型没法比，迅速入血快起效，安全更比效重要。 化学成分不掌握，何谈中药之效果？中药成分若不清，药物效果难保证。 有效成分提分离，配液灌装注射剂。重视生产和实际，理论同样要学习。 第一节生物碱 通常所说生物碱，生物体内是来源；主要特征须含氮，有机分子无须言。 研究生物碱最早，成就当然也很高。一万多种生物碱，临床应用好几百。 长春新碱长春碱，秋水仙碱喜树碱。三尖杉碱樟柳碱，汉防己碱川芎碱。 伪麻黄碱麻黄碱，钩藤总碱钩藤碱。广玉兰碱轮环藤，举不胜举言不尽。 一、生物碱的分类 生物碱按母核分，大大小小十多种。有机胺类麻黄碱，益母草碱秋水仙。 吡啶类中有槟榔,胡椒烟苦参氧化碱。喹啉衍生喜树碱。吡咯类中千里光， 异喹啉类小檗碱，罂乌厚朴萨苏林，蝙蝠葛碱甲乙防，清吗延胡索乙素。 吲哚类中长士利，还有茱萸靛青苷。 莨菪烷类品古莨；喹唑酮类常山碱，嘌呤类里咖啡碱；还有二萜乌头碱。 二、生物碱的性质 1 、多数碱无色结晶，少数碱颜色不同。小檗碱则有点黄，烟碱更甚呈油状。
2 、一般分子结构中，有手性碳有手性；多数碱为左旋体，少数不具旋光性。 3 、多数碱难溶于水，亲脂溶于氯仿中；乙醚乙醇和丙酮，苯石油醚也能溶。碰到稀酸则成盐，几乎不溶遇到碱；若有内酯羧酚羟，结果可能不一样。 4 、生物碱多有碱性，氮孤电子是原因；季胺最强仲胺中，伯胺叔胺步后尘。有生物碱呈中性，酰胺结构已形成；此碱遇酸不成盐，比如咖啡秋水仙。 也有碱呈两面性，羧酚羟基是内因；遇酸逢碱皆能溶，吗啡槟榔喜相逢。 5 、每逢特殊酸和盐，多数碱能生沉淀。沉淀反应很有用，提取鉴别纯化中。苦味酸称Hager ，遇碱沉淀呈黄色；磷钨酸是沉淀剂，白色褐色有差异。 硅钨酸Bertrand ，沉淀白或淡黄色；鞣酸也与碱反应，棕黄色沉淀生成。 氯化金和氯化钼，前黄后白沉淀物；碘化汞钾Mayer ，沉淀过量又溶了。Dragendorff 试剂，碘化铋钾是主体，酸液中与碱相逢，黄或红棕色风景。 碘及碘化钾试剂，以wagner 名义，酸液中与碱反应，棕或褐色物生成。 常用试剂有四种，沉淀颜色要记清，碘钾试剂占其三，还有一个硅钨酸。 6 、遇到显色剂显色，氧化脱水或缩合；五颜六色各不同，生物碱鉴别有用。钒硫酸即Mandelin ，不显色有阿托品，显淡橙色有奎宁，绿至蓝色可待因。钼硫酸是Frohde ，吗啡显紫转绿色，秋水仙碱显绿色，乌头碱显黄颜色。 甲醛硫酸Marguis ，吗啡显蓝或者紫，显黄色有阿托品，显蓝色有可待因。浓硫酸用来显色，可待因微红加热；黄连素绿至黄色，阿托品等不显色。 硝酸显色溶液浓，吗啡有黄也有红；黄士的宁可待因，马钱子碱显血红。 三、生物碱的生理活性及药理作用 生物碱有药活性，结构有异而不同，止咳解痉镇疼痛，抗菌抗癌抗虐等dd。
指标鉴别诊断结核性与恶性胸水的评价 摘要目的评价检测胸水标本阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体(LAM-IgG)、腺苷脱氨酶(ADA)和癌胚抗原(CEA)指标鉴别诊断结核性与恶性胸水的应用价值。方法对象包括恶性胸水(恶性组)、结核性胸水(结核组)各40例，采集胸水为检测标本，应用斑点免疫金渗滤试验技术检测LAM-IgG、酶促反应终点法检测ADA、磁酶免技术检测CEA。结果LAM-IgG、ADA和CEA的阳性结果分别为：结核组59.5％、81.1％和5.4％，恶性组8.1％、13.5％和56.8％。结论在鉴别诊断结核性与恶性胸水方面，LAM一转和CEA具有高度特异性和较高敏感性，ADA 特异性较低但敏感性较高，3个指标共同应用对鉴别诊断结核性与恶性胸水具有较高的应用价值。 关键词鉴别诊断；结核性胸水恶性胸水 胸水征是临床较常见的一类体征，可由肿瘤、结核及其他原因所致，对胸水原因进行判别，是临床诊治胸水征决策的必要依据。常规的鉴别诊断结核性与恶性胸水方法特异性和敏感性均较低，不能满足临床需要。研究显示，检测胸水标本阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体(LAM-IgG)、腺苷脱氨酶(ADA)、癌胚抗原(CEA)等指标，在鉴别诊断结核性与恶性胸水方面具有较高的应用价值。 1对象与方法 1．1对象本试验所有对象均为我院确诊的住院病人，其中：(1)恶性胸水(恶性组)40例，男26例、女14例，年龄34～78岁；(2)结核性胸水(结核组)40例，男22例，女18例，年龄30～78岁。 1．2方法采集胸水为标本，1500rpm离心胸水5min，上清液用于检测LAM-IgG、ADA和CEA，沉渣用于检测抗酸杆菌。标本如不能及时检测，应尽快分离后封存于-20℃。检测LAM-IgG用斑点免疫金渗滤试验方法，以呈现明显的双紫红色斑点为LAM-IgG阳性结果；检测ADA用酶促反应终点法，以ADA>32U/L为阳性结果；检测CEA用磁酶免检测方法，以CEA>17rig/ml为阳性结果。所有检测试剂为商品试剂盒，检测步骤按各试剂盒操作说明书进行。检测抗酸杆菌用常规抗酸染色检菌法。统计学方法应用卡方检验，以P<0.05为具有统计学意义界限。
2005年天津南开大学生物化学考研真题 —.判断下列说法正确与否（对"V"，错者划×"，每小题1分，共35 分） 1.核酸的稀有碱基具有特殊的生物学活性。 2.tRNA 分子中的稀有碱基是转录后修饰的产物。 3.在稀盐溶液中 DNA 和 RNA 的双螺旋构象是一样的。 4.tRNA 曾经被称为"可溶性 RNA"是因为它具有更多的稀有碱基。 5.线粒体中的 RNA 是由核基因编码的。 6.脱氧核苷中脱氧核糖的 2位没有羟基。 7.若双螺旋 DNA分子的一条链的片断顺序为5'-GCAGTCCA-3'则另一条链为5-CGTCAGT- 3'。 8.病毒基因组的组成和其它生物一样都含有 DNA。 9.逆转录酶具有校对功能。 10.DNA损伤的光复活修复是由 DNA 聚合酶参与的。 11.真核基因都含有内含子。 12.端粒酶催化端粒 DNA 链合成的方向 5- 3'。 13.内含子的剪切反应有时需要ATP。 14.肽链的生物合成中核糖体从5'-3'方向沿着mRNA 移动。 15.细胞内的肽链合成是从C末端向 N末端进行的。 16．反密码子第一位是I的tRNA可以识别三个不同的密码子。 17.阿拉伯糖操纵子（ara）不受细胞内ATP水平的调节。 18.DNA连接酶催化 DNA连接反应需要能量因子。 19.PCR方法中的 DNA 合成不需要引物。 20.多核苷酸磷酸化酶合成多聚核糖核苷酸需要模板。 21．蛋白质分子中个别氨基酸的取代必然会导致生物活性的改变。 22.蛋白质在SDS-PAGE中和非变性电泳中的分离结果是相同的。 23.皮质激素可以转变为性激素。 24.ATP 是生物能量的储存方式。 25. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子。
分子生物学实验报告阿拉伯糖诱导绿色荧光蛋白的表达
阿拉伯糖诱导绿色荧光蛋白的表达 摘要 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein)，简称GFP，这种蛋白质最早是由下村修等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。绿色荧光蛋白（GFP）基因来自海底生物多孔水母，该基因表达产物在紫外光照射下可发出绿色荧光。现已将该基因克隆到阿拉伯糖启动子驱动的原核表达pGLO中，通过阿拉伯糖的诱导，可使该基因在细菌中进行表达。GFP融合蛋白的荧光灵敏度远比荧光素标记的荧光抗体高，抗光漂白能力强，因此更适用于定量测定与分析。 关键字：绿色荧光蛋白阿拉伯糖操纵子 前言 由水母Aequorea victoria中发现的野生型绿色荧光蛋白，395nm和475nm分别是最大和次大的激发波长，它的发射波长的峰点是在509nm，在可见光绿光的范围下是较弱的位置。由海肾（sea pansy）所得的绿色荧光蛋白，仅有在498nm 有一个较高的激发峰点。 在细胞生物学与分子生物学领域中，绿色荧光蛋白基因常被用作为一个报导基因(reporter gene）。一些经修饰过的型式可作为生物探针，绿色荧光蛋白基因也可以克隆到脊椎动物（例如：兔子上进行表现，并拿来映证某种假设的实验方法。2008年10月8日，日本科学家下村修（伍兹霍尔海洋生物学研究所）、美国科学家马丁·查尔菲（哥伦比亚大学）和钱永健（加利福尼亚大学圣迭戈分校）因为发现和改造绿色荧光蛋白而获得了当年（2008）的诺贝尔化学奖。 实验目的 1.学习用诱导物诱导外源基因的表达。 2.学习感受态细胞的制备和转化。
精氨酸激酶（AK）的表达及其纯化 报告题目藻精氨酸激酶（AK）的表达及其纯化作者姓名余姣 班级学号0801/2008114010130 指导教师汪劲松 完成时间2011年5月 生物学实验教学中心
目录 摘要........................................................................ 错误！未定义书签。引言.. (2) 1 实验材料 (2) 2 实验方法 (3) 2.1菌种活化 (3) 2.2扩大培养 (3) 2.3 IPTG诱导AK的表达 (3) 2.4 AK的提取及其纯化 (3) 2.5His-tag Ni亲和层析法纯化融合蛋白 (3) 2.6 AK的检测SDS-PAGE电泳 (4) 3 结果与分析 (4) 3.1 提取物的层析谱图与分析 (5) 3.2 提取物SDS-PAGE电泳图与分析 (6) 总结 (6) 参考资料 (7)
藻精氨酸激酶（AK）的表达及其纯化 余姣 （指导老师：汪劲松） 摘要： 精氨酸激酶（AK)(E.C.2.7.3.3)是一种磷酸原胍基化合物激酶，存在无脊椎动物中。本实验是将具有重组有AK基因的质粒的E.coli，在含有50μg/ml卡那霉素的LB液体培养基中活化和扩大培养。当菌体密度即OD值为0.6-0.8时，用0.5μg/ml IPTG异丙基硫代- -D-半乳糖诱导lac乳糖操纵子表达AK 5h。接着5000 r/m离心10分钟，弃上清液获得沉淀物重悬加裂解液后用超声波破壁至沉淀变得澄清，再12000 r/m离心，弃沉淀得到AK的粗提液。采用亲和层析法（含His-tag Ni的树脂层析柱）纯化AK，最后SDS-PAGE电泳，鉴定。 关键词：精氨酸激酶亲和层析光谱分析
《生物化学与分子生物学》 《生物化学与分子生物学》考试大纲及要紧参考教材 一、考试内容 1.蛋白质化学 考试内容 ●蛋白质的化学组成，20种氨基酸的简写符号 ●氨基酸的理化性质及化学反应 ●蛋白质分子的结构（一级、二级、高级结构的概念及形式） ●蛋白质一级结构测定的一样步骤 ●蛋白质的理化性质及分离纯化和纯度鉴定的方法 ●蛋白质的变性作用 ●蛋白质结构与功能的关系 考试要求 ●了解氨基酸、肽的分类 ●把握氨基酸与蛋白质的物理性质和化学性质 ●了解蛋白质一级结构的测定方法（目前关于蛋白质一级结构测定的新方 法和新思路专门多，而教科书和教学中涉及的可能不够广泛，建议只让 学生了解即可） ●明白得氨基酸的通式与结构 ●明白得蛋白质二级和三级结构的类型及特点，四级结构的概念及亚基 ●把握肽键的特点 ●把握蛋白质的变性作用 ●把握蛋白质结构与功能的关系 2.核酸化学 考试内容 ●核酸的差不多化学组成及分类 ●核苷酸的结构 ●DNA和RNA一级结构的概念和二级结构要特点；DNA的三级结构 ●RNA的分类及各类RNA的生物学功能 ●核酸的要紧理化特性 ●核酸的研究方法 考试要求 ●全面了解核酸的组成、结构、结构单位以及把握核酸的性质
●全面了解核苷酸组成、结构、结构单位以及把握核苷酸的性质 ●把握DNA的二级结构模型和核酸杂交技术 ●了解microRNA的序列和结构特点（近年来针对非编码RNA的研究越来越 深入，建议增加相关考核） 3. 糖类结构与功能 考试内容 ●糖的要紧分类及其各自的代表 ●糖聚合物及其代表和它们的生物学功能 ●糖链和糖蛋白的生物活性 考试要求 ●把握糖的概念及其分类 ●把握糖类的元素组成、化学本质及生物学功用 ●明白得旋光异构 ●把握单糖、二糖、寡糖和多糖的结构和性质 ●把握糖的鉴定原理 4. 脂质与生物膜 考试内容 ●生物体内脂质的分类，其代表脂及各自特点 ●甘油脂、磷脂以及脂肪酸特性。油脂和甘油磷脂的结构与性质 ●生物膜的化学组成和结构，“流体镶嵌模型”的要点 考试要求 ●了解脂质的类不、功能 ●熟悉重要脂肪酸、重要磷脂的结构 ●把握甘油脂、磷脂的通式以及脂肪酸的特性 ●把握油脂和甘油磷脂的结构与性质 5. 酶学 考试内容 ●酶的作用特点 ●酶的作用机理 ●阻碍酶促反应的因素（米氏方程的推导） ●酶的提纯与活力鉴定的差不多方法 ●熟悉酶的国际分类和命名 ●了解抗体酶、核酶和固定化酶的差不多概念和应用
操纵子（operon） DNA 2 组中成簇串联组成。DNA序列。多种原核基因启 及-35 一动序列的共有序列在-10区域是TATAAT，又 ），在TTGACA。 合，或使RNA聚合酶不能沿DNA 还有一种特异DNA序列可结合激活蛋白，使转录激活，介导正性调节。 转录（Transcription DNA ）UTP）4 RNA的过程。 MRNA，通过它携有的密码子到核糖 DNA的复制相比，有很多相同或相似之处，亦有其自己的特点。mRNA。就是说，以特定的 以DNA DNA 另一条单链叫非模板链。DNA。 真核细胞的大小亚基是在核中形成的, 在核仁部位rDNA转录出45S rRNA,是rRNA的前体分子,与胞质运来的蛋白质结合,再进行加工,经酶裂解成28S,18S和5.8S的rRNA,而5S rRNA则在核仁外合成28S,5.8S及5S rRNA与蛋白质结合,形成RNP分子团。为大亚基前体,分散在核仁颗粒区,再加工成熟后,经核孔入胞质为大亚基,18S rRNA也与蛋白质结合,经核孔入胞质为小亚基。大小亚基在胞质中可解离存在,在需要时也可在>0.001M Mg 存在时,但合成完整单核糖体,才具有合成功能,当Mg4 <0.001M时则又重新解离。 原核细胞的核糖体较小, 沉降系数为70S，相对分子质量为2.5x103 kDa,由50S和30S两个亚基组成; 而真核细胞的核糖体体积较大, 沉降系数是80S，相对分子质量为3.9～4.5x103 kDa, 由60S和40S两个亚基组成。典型的原核生物大肠杆菌核糖体是由50S大亚基和30S小亚基组成的。在完整的核糖体中，rRNA约占2/3, 蛋白质约为1/3。50S大亚基含有34种不同的蛋白质和两种RNA分子，相对分子质量大的rRNA的沉降系数为23S，相对分子质量小的rRNA为5S。30S小亚基含有21种蛋白质和一个16S的rRNA分子。 碱性纤维素细菌：通过CMC-Na初筛培养基，采用刚果红染色鉴定法筛选纤维素酶产生菌。